Rusų vardas
TRIPSIN + HYMPSIN.Tripsino + chymotrypsin lotynų kalbos pavadinimai
Tripsinum + chymotrypinum ( strypas. Tripsni + chymotrypini)Farmakologinė medžiagų grupė TRIPSIN + HYMPSIN
Tipiškas klinikinis ir farmakologinis straipsnis 1 straipsnis
Farmacija. Proteolitinis kombinuotas baltymų gamta. Gauti iš galvijų kasos. Pagal vietinį ir išorinį naudojimą, neaiškius audinius ir fibrinį švietimą; Atrodo kaip klampus paslaptis, eksudatas, kraujo krešuliai. Hidrolizatorių baltymai ir peptonai su mažos molekulinės masės peptidų susidarymu, skyla su aromatinių aminorūgščių (tirozino, tropotofano, fenilalanino, metionino) liekanų.
Indikacijos. Privalomos bronchopinės ligos (bronchektatinė liga, absceso šviesa, ATELECTASIS, eksudacinis pleblatas). ENT-organai: pūlingos sinusitas, pūlingas otitas (ūminis, subakutas, lėtinis), eustheitis su klampus eksudato, po tracheostomy palengvinti storo klampų eksudato, lėtinio rinito pašalinimą. Nudegimai, suskirstymas, trofinės opos, pūlingos žaizdos. Oftalmologijoje: ragenos ligos (opa, herpiterinis keratitas); Nudeginkite akies gleivinės, ašarų ašarų, vangių gijimo akių akių ašarų obstrukcija.
Kontraindikacijos. Padidėjęs jautrumas, piktybiniai navikai, destruktyvios plaučių tuberkuliozės formos, HSN II-III str., Plaučių emfizema su kvėpavimo takų sutrikimas. Neįmanoma įvesti į kraujavimo ertmes, taikomos ant opelių piktybinių navikų paviršių.
Atsargiai. Empiama plura tuberkuliozės etiologija (eksudato rezorbcija gali prisidėti prie bronchialinės fistulės plėtros).
Dozavimas. Vietoje, išorėje.
Gydymui pūlingas bėgo. Ir sterilios servetėlės \u200b\u200bsudrėkintos tirpalu: 25-50 mg vaisto 10-50 ml 0,25% tirpalo prokaino, yra nustatyti nuo 2 iki 24 valandas (priklausomai nuo pūlingo nekrozinių masių storio ) ant žaizdos paviršiaus. Disles keičiasi kas 3-5 dienas.
Dėl Šiluminiai nudegimai III menas. Plonas vaisto sluoksnis yra ant juostos 1 g greičiu 100 kv. Cm žaizdos paviršiaus, padengtas tvarsčiu, sudrėkintu 0,9% NaCl tirpalu arba 0,25% tirpalu; Nustatykite drėgmę atsparią tvarstį. Per dieną pagamintų padažų keitimas. Per kiekvieną pamainą, padažai pašalinami lengvai atskirtos nekrotinio audinio plotų. Kai žaizdos padengtos storais ratu, jis supjaustė prieš paduodentį.
Su nagging bronchildren ligos Įkvėpimas 25-30 mg vaisto, išsiskyręs į 5 ml distiliuoto vandens, 1-3 kartus per dieną yra naudojamas. Sprendimas taip pat gali būti skiriamas per bronchoskopą, endotracheal zondą, trachestone. Sprendime galite pridėti antibiotikų, ryškių Ls.
Už opų gydymui, ragenos ir keratito nudegimai naudojami akių pavidalu 1: 500 kasdien, per 2-3 dienas arba palaidotas 2 dangtelis 0,25% tirpalo, 4 kartus per dieną, per 1- 2 dienos. Ašarų ir odos žaizdų obstrukcija ir voko žaizdos: nuplauna ašaromis ir servetėlėmis su 1% tirpalu. Sprendimai yra paruošti ex tempore.
Lėtiniu rinitu jie švirkščiami arba drėkinami tirpalu (5 mg 5 ml 0,9% NaCl tirpalo) iš narkotikų nosies ertmės 2-3 kartus per dieną.
Lėtiniu pūlingu okitu, kurį apsunkina choleateatoma, po 0,9% NaCl tirpalo ertmės plaunant 0,5% vaisto tirpalą (išsiskyręs 0,9% naCL sprendimas), 2-3 kartus per dieną 20-30 minučių.
Šalutinis poveikis. Alerginės reakcijos, padidinkite kūno temperatūrą į subfteblę, tachikardiją.
Įkvėpus administravimą: viršutinės membranos dirginys kvėpavimo takų. \\ T, sušikti balsą.
Oftalmologijoje: konjunktyvos dirginimas ir patinimas (šiuo atveju rekomenduojama sumažinti taikomojo tirpalo koncentraciją).
Specialios instrukcijos. Per ateinančias valandas po įkvėpimo pacientas turi kruopščiai valyti skreplių arba jį turėtų būti pašalintas siurbimo.
ohms dalyvauja baltymų baltymų baltymuose plona žarna "HymmotrPSin" yra pageidautina padalinti obligacijas, kurias sudaro amino rūgščių grupių, turinčių hidrofobines šonines grandines, ir yra būdingas platesnis specifiškumas nei. Priešingai, tripsinas h. Pieno troškimai.
Chymotipsin gamina exocrine kasos ląstelės (kasos) neaktyvios kvalifikacijos - chymotripinogeno forma, kuri yra išskiriama dvylikapirštės žarnoskai tripsino įtaka virsta chymotipsin. Asmuo ir dauguma žinduolių rado dviejų tipų chymotripinogen - A ir B, skirtingų jų fizikinės ir cheminės savybės. Įjungus chimotrybinogeno a, suformuojamos kelios aktyvios chimotripsino formos, įvairūs tirpumas, kristalų forma ir fermentinės veiklos dydis. Pagrindinė chimotrpsino forma yra chymotsin a - baltymas, kurio molekulinė masė yra apie 25 000. Maksimalus atsparus silpnumui; Neutralioje ir silpnai šarminėje žiniasklaidoje taikoma autolizė. Optimalus X. Veiksmai yra ne pH 7,5-8,2.
Norint nustatyti H. Siūloma metodų, pagrįstų baltymų ir sintetinių substratų dalijimui. Plačiai naudojama kontroliuojami M-pakeisto tirozino spektrofotometriniai esteriai.
X veikla yra priespauda keletas sintetinių ir natūralių inhibitorių. Kraujo ir audinių plazmoje yra H. baltymų inhibitoriai, apsaugoti nuo sunaikinimo šio fermento. Daugelis jų yra polivalentas, kad nustumtų kitus proteazes (pvz., Α 2 -machroglobulinas, kai kurie tripsino inhibitoriai); Konkretus X inhibitorius. Kraujo plazma yra α 1 -anthihymotrips.
Chymotipsin naudojama kaip narkotikasGalima selektyviai padalinti nekrozinių audinių, pluoštinių formacijų, uždegimo klampių eksudatų, pūlingų masių. Ji turi priešuždegiminį, anti-etninį poveikį ir skatina Rusijos mokslų akademijos gijimą. Vaistai. \\ T H. yra gaunamas iš chimotopinogeno A, kuris yra izoliuotas nuo galvijų kasos ir po rekristalinimo aktyvuoja tripsiną. Medicinos praktikoje jį naudoja chymotrysin a, pagaminta "Chimotrixin Crystalline". IT balta spalva, gerai tirpsta vandenyje ir izotoniniu natrio chlorido tirpalu.
Naudojimo indikacijos, taikymo metodai, dozė ir galimos komplikacijos Tas pats kaip ir tripsino kristalinėje. Be to, X. yra naudojami su intrakapsuliniu kataraktos ištraukimu. Kartu su tripsinu, X. yra himopcino, pankreatino ir kai kurių kitų vaistų, naudojamų kasos funkcijos nepakankamumo atveju.
Atleidimo forma: hermetiškai kepti buteliai arba ampulės, kuriose yra 0,005 g. (5 mg.) ir 0,01. g. (10 mg.) Crystal chymotrypsin. Saugojimo šviesos saugomoje vietoje esant ne aukštesnei kaip + 10 ° temperatūrai.
Ii. Chimotrixin.kasos sekrecijos fermentas, susijęs su hidrolizų klasėmis (plg 3.4.21.1), hidrolizinio skilimo baltymų, peptidų, amides ir amino rūgšties esterių, kai virškinanti maistą į žarnyne.
1. Maža medicininė enciklopedija. - m.: Medicinos enciklopedija. 1991-1996 m 2. Pirma sveikatos apsauga. - m.: Didelė rusų enciklopedija. 1994 m. 3. enciklopedinis žodynas medicinos sąlygos. - m.: Sovietų enciklopedija. - 1982-1984..
Sinonimai.:Žiūrėti, kas yra "chimothrixin" kituose žodynuose:
Himes ... Orfografinis žodynas
Hymmotrypsin, medžiaga, pagaminta organizme, kuri prisideda prie maisto virškinimo. Himotrupinas yra fermentas, kuris padengia baltymus. Jis gaminamas ploname žarnyne pagal kompleksą cheminės reakcijos Iš chimotrybinogeno ... Mokslo ir techninis enciklopedinis žodynas
Virškinimo fermentų kasos sultys; Dalyvauja baltymuose į žarnyne. Jis gaminamas neaktyvios chimotripinogeno pavidalu ... Didelis enciklopedinis žodynas
Proteolytic. Daugelio stuburinių su tripsinu ir kitais peptidazėmis fermentas į baltymų suskaidymą plonos žarnos; Jį sintezuoja kasos ląstelės neaktyvios chimotopinogeno pirmtako ir ... ... Biologinis enciklopedinis žodynas
Sut., Sinonimų skaičius: 1 fermento (253) assis sinonimai. V.N. Trishin. 2013 ... Sinonimas žodynas
chimotrixin. - Proteolitinis stubulinis fermentas, yra sintezuojamas kasoje chimotopinogeno grotelėmis. [ISFIEV V.A., L. L. L. Anglų Anglų. Žodynas Genetiniai terminai 1995 407s.] Genetikos temos En Chymotipsin ... Techninis vertėjas katalogas
Virškinimo fermentų kasos sultys; Dalyvauja baltymuose į žarnyne. Jis gaminamas neaktyvios chimotipinogeno pavidalu. * * * Chymotsin chymotrypsin, virškinimo fermentų kasos sultys; Dalyvauja ... ... enciklopedinis žodynas
- (G.Chymoscok + Tripsin) fermento, padalijimo maisto baltymų; Jis gamina kasos ląsteles. Naujasis žodynas užsienio žodžiai. Edwart, 2009. ChimotoTSin A, MN. Ne m. (... Rusų kalbos užsienio žodžių žodynas
Chymotipsin chymotrypsin [CF 3.4.21.1 2]. Proteolitinis stubulinis fermentas yra sintezuojamas kasoje himotipinogeno pirmtako pavidalu. (\\ T
Chimotrixin. - Proteolitinis fermentas; Katalizuoja baltymų ir peptidų suskaidymą. Nurodo peptido hidrolias. Kartu su tripsinas Dalyvauja baltymų baltymų ploname žarnyne chymotrypsin, pageidautina skaldant obligacijas, sudarytas pagal Coton grupių aminorūgščių, turinčių hidrofobinių šoninių grandinių, ir yra būdingas platesnis specifiškumas nei tripsinas. Skirtingai nuo tripsino X. Pieno troškimai.
"Hympcin" gamina "Exocrine" ląstelės kasa. \\ t Neaktyvaus ugnies - chymothygenogen forma, kuri yra išskiriama dvylikapirštės žarnos, kur pagal tripsino įtaką virsta chymotipsin. Asmuo ir dauguma žinduolių atrado dviejų tipų chymotrySinogen - A ir B, skirtingų jų fizikinių ir cheminių savybių. Įjungus chimotrybinogeno a, suformuojamos kelios aktyvios chimotripsino formos, įvairūs tirpumas, kristalų forma ir fermentinės veiklos dydis. Pagrindinė chymotrypin forma yra chymotrypsin a - baltymas, kurio molekulinė masė yra apie 25 000. Fermentas yra didžiausias atsparus silpnumui; Neutralioje ir silpnai šarminėje žiniasklaidoje taikoma autolizė. Optimalus X. Veiksmai yra ne pH 7,5-8,2.
Nustatyti H. pasiūlė keletą metodų,
Remiantis baltymais ir sintetiniais pagrindais. Plačiai naudojamas kontroliuojamas spektrofotometrijos hidrolizė M-pakeistų tirozinų esterių.X veikla yra priespauda keletas sintetinių ir natūralių inhibitorių. Kraujo ir audinių plazmoje yra H. baltymų inhibitoriai, užkirsti kelią baltymams nuo sunaikinimo šio fermento. Daugelis iš jų yra poliabalenos, kad nuspręstų kitų proteazių aktyvumą (pvz., 2 -machroglobulino, kai kurių tripių inhibitorių); Konkretus X inhibitorius kraujyje plazmoje yra 1 -anthihymotrixin.
"HymmotrPSin" naudojamas kaip vaistas, kuris gali selektyviai padalinti nekrotinio audinių, formų, uždegimo klampių eksudatų, pūlingų masių. Ji turi priešuždegiminį, anti-etninį poveikį ir skatina Rusijos mokslų akademijos gijimą. X. Vaistiniai preparatai gaunami iš chimotrygenogen A, kuris yra izoliuotas nuo galvijų kasos ir po rekristalizacijos yra aktyvuota tripsin. Medicinos praktikoje jį naudoja chymotrysin a, pagaminta "Chimotrixin Crystalline". Tai balta milteliai, gerai tirpsta vandenyje ir izotoniniu natrio chlorido tirpalu.
Naudojimo indikacijos,
Taikymo metodai, dozė, kontraindikacijos ir galimos komplikacijos yra tokios pačios kaip ir kristalinio tripsinu. Be to, X. yra naudojami su intrakapsuliniu kataraktos ištraukimu. Kartu su tripsinu, X. yra himopcino, pankreatino ir kai kurių kitų vaistų, naudojamų kasos funkcijos nepakankamumo atveju.Atleidimo forma: hermetiškai kepti buteliai arba ampulės, kuriose yra 0,005 g. (5 mg.) ir 0,01. g. (10 mg.) Crystal chymotrypsin. Saugojimo šviesos saugomoje vietoje esant ne aukštesnei kaip + 10 ° temperatūrai.
Chymotsin (chymotidinum) fermentas
Chymotipsin (chymotidinum)
Pharmachologic efektas:
Pagal vietinę paraišką, nesilaikoma (negyvi) audiniai ir fibrinuoto formacijos (kraujo krešuliai / burgtakiai); Montūros klampios paslaptys (atskirtos specialios liaukos, pavyzdžiui, skreplių), išsklaido (išleistas iš mažų laivų audinių daug baltymų skysčio), kraujo krešulių. Struktūra:
Chimotrixin.tai prepeolitinis fermentas, sukurtas žinduolių kasoje. Dėl medicinos taikymas Jis gaunamas iš galvijų kasos. Be kasos sultyse jis yra neaktyvioje būsenoje chylmnogenic (chymotrygerogen A ir B), kuri yra aktyvuota pagal tripsino įtaką, ir formų yra sudaryta iš chimotopinogeno, ir formų skaičius yra sudaryta: A, B, G, S ir P - chimotopsins ir chymotsinogen B. Visos chimotopsino formos yra arti fermentinių savybių, tačiau skiriasi veikla. Praktinė reikšmė, kaip narkotikų šiuo metu yra -hymppipsis, kuris yra pagamintas pagal pavadinimą "Chymotipsin Crystalline".a - Chimotrixin. Tai baltymas, kurio santykinė molekulinė masė yra 21,600 - 27,000. Reiškia proteolitinių fermentų grupę. Kaip ir tripsinas, baltymai ir peptonai, hidrolizuojami su palyginti mažu molekuliniu masės peptidais. Iš tripsino ji skiriasi nuo to, kad ji daugiausia lemia obligacijas, sudarytas iš aromatinių aminorūgščių likučių (tirozinas, triptofanas, fenilalaninas, metioninas) likučių. Kai kuriais atvejais chymotsin gamina gilesnę baltymų hidrolizę nei tripsinas. Jis skiriasi nuo tripsino, taip pat skambinant pieno koaguliacijai. Daugiau lentynos nei tripsinas ir yra lėtesnis inaktyvuotas.
Chimotrixin."Crystal" yra ryškios svarstyklės arba baltos spalvos milteliai. Tirpsta vandenyje ir izotoniniu natrio chlorido tirpalu; PH 0,2% vandeninio tirpalo 4.5 - 6.5. Sausoje vaizduose; vandeniniai tirpalai Greitai inaktyvuoti, ypač esant aukštai temperatūrai.
Naudojimo indikacijos:
Tromboflebitas (veislių sienų uždegimas su jų užsikimšimu), uždegiminės distrofinės periodonto formos (dantų ligos), osteomielito (kaulų čiulpų uždegimas ir gretimų uždegimas kaulų audinys), sinusitas (žandikaulio sinuso uždegimas), otitas (ausies ertmės uždegimas), dirginimas (Iris uždegimas), iridocikliukas (akių liga); Trachetiai (trachėjos uždegimas), bronchitas (bronchų uždegimas), kataraktos gavyba (akies traukos plutos pašalinimas).Taikymo būdas:
Į raumenis suaugusieji 0,0025 g 1 kartą per dieną. Už injekciją, ištirpus ištirpinama prieš naudojimą 0,005 g chymotrypsin kristalinio 1 -2 ml izotoninis sprendimas Natrio chloridas arba 0,5-2% Novokaino sprendimas. Sprendimas įvedamas giliai į viršutinį uogų raumenų kvadrantą. Kursas -6-15 injekcijos.Šalutiniai poveikiai:
Alerginės reakcijos, deginimo pojūtis taikymo vietoje. Kraujavimas nuo granuliavimo (gijimo) sklypų. Įvedus į ertmę, galima atlaisvinti medžiagas su histamin panašiais veiksmais.Kontraindikacijos:
Kraujavimo žaizdos ir dezintegracija piktybiniai navikai. Individualus netoleravimas. Vaistas netinka intraveniniam vartojimui.Atleidimo forma:
Milteliai hermetiškai užsikimšusiems buteliukuose - 0,005 g ir 0,01DĖMESIO!
Prieš naudodami Hympciną, turite pasikonsultuoti su gydytoju. Šis paraiškos nurodymas pateikiamas nemokamu vertimu ir yra skirtas tik susipažinti. Norėdami gauti daugiau informacijos, kreipkitės į gamintojo anotaciją.
Serino proteinazės.
Chymotipsino ir karboksipeptidazės veikimo mechanizmas.
Jau buvo minėta, kad kasa yra atsakinga už visos grupės proteolitinių fermentų, hidrolizės peptido obligacijas, sudarytas iš skirtingų aminorūgščių. Fermentai, dalyvaujantys baltymų virškinimui, ir jų specifiškumas su peptidų jungtimis, suformuotu skirtingų aminorūgščių, pateikiamos lentelėje. 3.1. Svarbiausia ir visiškai tiriama šeimai priklausančių žarnyno baltymų atstovas serino proteinazės. \\ T, yra chymotipsin. "HymotrySin" yra virškinimo fermentas, sintezuojamas kasimo kasos rūgščių fermentacijos pavidalu.
3.1 lentelė
Substrato specifiškumo proteinazės virškinimo trakto
Aktyvus fermentas |
Zimogen. \\ T |
Aktyvatorius. \\ T |
Splitting. |
|
peptidų komunikacija |
||||
Karboksiproteinase. |
Autoaktyvacija, |
|||
Pepsin A. |
Pepsinogen A |
aktyvus pepsinas |
||
Serinas |
||||
proteinazė. \\ T |
||||
TRIPSIN. |
Tpsinogenas. |
Enterocinate. |
||
TRIPSIN. |
||||
Chimotrixin. |
Chimototrixinogen. |
TRIPSIN. |
TYR, PHE, TRP, RER |
|
Elastasa. |
Proelstaza. |
TRIPSIN. |
||
peptidase. |
||||
Karboksipeptidazė A. |
Procarboxipeptic. |
Val, leu, ile, ala su |
||
Karbokspeptidazė B. |
Procarboxipeptic. |
|||
Amonipidase. |
Pro-narkotikas |
N- |
||
terminalas |
||||
likučiai (už. \\ T |
||||
išimtis PRO) |
||||
Viduje acynthene ląsteles, nauji tinkuoti baltymų molekulės gabenamos iš endoplazminės reticulum į golgji aparatą, kur jie yra sujungti baltymų lipidų membranos - saulės granules yra suformuotas, kuris elektronų mikroskopoje atrodo kaip labai tankūs veršeliai (Pav. 3.3 pav. ).
Fig. 3.3 Elektroninis mikrografija žiemojančių granulių į kasos aciarino ląsteles (pagal G. Palade nuo stryer l, biochemija
"Taika", M., Vol. 2, 1985).
Žiemos granulės, kurių sudėtyje yra chimotopinogeno, yra sukauptos cinar ląstelių viršuje, o po hormoninio arba neuroninio signalo veikimas išstumiamas į dvylikapirštės žarnos kanalą.
ChmentryGenogen atstovauja viena polipeptido grandinė 245 aminorūgščių. Grandinė stabilizuojama penkiais disulfidų tiltais. Chimotopinogeno aktyvinimas atliekamas pagal trippsino veikimą, padalijant peptido ryšį tarp arginino-15 ir izoleucino-16.
Tuo pačiu metu aktyvus π -hymotripsis veikia ant kitų hympopixinogen molekulių (3.4 pav.).
Fig. 3.4 Schema, iliustruojanti chymorinsino aktyvavimo etapų seką
Be to, π -hymotrips yra taikoma papildomo chimotopsino proteolitinio veiksmo su dviem dipeptidais SER14 -Arg15 ir TH147 -An148 ir stabilios fermento - α - chymotrypinimo formos formavimas.
Kadangi chymotsin yra viena iš labiausiai ištirtų fermentų, patartina išsamiau apsvarstyti savo struktūrą ir veiksmų mechanizmą. Α-hype molekulė susideda iš trijų polipeptido grandinės, sujungtos dviem tarpsektinėmis disulfidų obligacijomis (3.5 pav.).
Fig. 3.5 α α molekulė turi du sulaikytus disulfido tiltus ir tris nurijimo disulfidų obligacijas.
Α -hymotripsino molekulinė masė yra apie 25 000 taip. Molekulė turi kompaktišką elipsoidų formą 51 × 40 × 40 Å. Visos įkrautos grupės, išskyrus trims reikalingoms katalizei, yra ant molekulės paviršiaus.
Hidrolizės reakcijos pusiausvyra beveik visiškai perkeliama į peptidų obligacijas. Tačiau chymotipsin gali hidrolizuoti dideliu greičiu toli nuo kiekvieno peptido ryšio. Jis veikia selektyviai, išsilavinę karboksilo grupės aromatinių rūgščių ir aminorūgščių su hidrofobiniais radikalais didelis dydisPavyzdžiui, metioninas.
Chymotrypsin būdingas bruožas yra jo gebėjimas hidrolizuoti esminius ryšius. Iš esmės didelė informacijos apie chymotypsino veikimo mechanizmą buvo gauta tiriant hidrolizę
esteriai.
Kaip parodyta, chymotipsin katalizuoja peptido ir esminių obligacijų hidrolizę į du atskirus etapus. Pirmą kartą jis buvo atrastas studijuojant esterio obligacijos hidrolizės kinetiką N-N-Netrophenilacetate.
Reakcijos analizė parodė, kad vieno iš produktų hidrolizės išleidimas - N-N-N-nty-throatonol atsiranda dviem etapais: pirmasis N - nitrofenolio išleidžiamas, ir tada jis jau yra jau suformuotas jau su
mažiau stacionaro greitis.
Į bendrosios savybės Hidrolizės N-Net-fenilacetato procesas yra sumažintas iki fermento pagrindo komplekso susidarymo, tada esminis pagrindo prijungimas yra padalytas ir NN-Ntrophnenene yra išleistas, su acetil grupės substrato lieka kovalentiškai prijungtas prie aktyvaus centro fermento. Be to, vanduo atakuoja acetil-fermentų kompleksą, kad susidarytų acetato jonų ir regeneruotas fermentas (3.6 pav.)
Fig. 3.6 Akilimas: švietimo kompleksas acetilo fermentas kaip tarpinis produktas. DEACTIVATION: tarpinio sudėtingo acetilo fermento hidrolizavimas.
Greitas pradinis N -Nithrophenolio išleidimo etapas yra susijęs su acilo-fermento komplekso formavimu, parodytu Fig. 3.6 ICON.
(*). Šis etapas vadinamas acilinimu. Antrasis etapas vadinamas deaCillocation., atitinka stacionarią atsako etapą, kuris tuo pačiu metu riboja. Acil-fermentų kompleksas pasirodė taip stabilus, kad tam tikromis sąlygomis galima jį paskirti. Po to, kai pH 3 buvo pabrėžta gryna forma Šis tarpinis acilo fermento kompleksas buvo pavyko apibūdinti vietą, kur pridedama acilo grupė į fermentą. Paaiškėjo, kad acilo grupė yra susijusi su deguonies atomu tam tikros serino likučių
- Serina-195 (SER-195). Dėl šios priežasties chymotipsin priklauso grupei serino proteinazės. \\ T. Ši liekana rodo neįprastai didelį reakcijos talpą. Jis gali būti konkrečiai pažymėti
ekologiškas fluorofosfatas - diizopropilffosfatas (3.7 pav.).
Fig. 3.7 diizopropilo fosfatas (DPGF) yra inaktyvuotas chymotrysin formuojant diizopropilo fosforilio darinį serino-195.
Padidėjęs serino-195 reaktingumas rodo, kad likusios 27 serino liekanos chymotrypsin visiškai nesikreipia su diizopropilffosfatu (DPGF). Beje, Hympcinas nėra vienintelis Fermentas, kurį slopina DPFF. Daug kitų proteolitinių fermentų, tokių kaip tripsinas, elastasa,
trombinas, bakterinis subtilisinas taip pat konkrečiai reaguojant su DPGF, visiškai prarasti veiklą. Kaip ir chymotipsin, šie proteinazės sąveikauja su DFF dėl vienos serino likučių. Taigi tikslinga kalbėti apie visos šeimos egzistavimąserino proteazės.
Tačiau kataliziniuose vaisiuose yra ne tik SER-195 SER-195 šoninis radikalas. Buvo įrodyta, kad aktyviame fermento centre, histidino pusiausvyra taip pat vaidina svarbų vaidmenį - jo-57. Remdamasi jo dalyvavimą katalizėje buvo valdoma naudojant vadinamąją afine etiketę, kuri sujungia su chymotidinu kaip substratas, viena vertus ir sudaro kovalentinį ryšį su konkrečiu grupe aktyvaus centro, kita vertus.
Ši chymotrypin etiketė yra tosil-l- Fenilalaninchlorometil ketonas, kuris rodomas Fig. 3.8.
Fig. 3.8 Tosil-l-fenilalaninchlorometilo ketono struktūra, naudojama kaip chymotrypino (R - Tosil grupės) afine etiketė.
Fenilalanino atstovaujamos šoninės grandinės etiketės molekulės buvimas suteikia konkrečią sąveiką su fermentu. Reaktyvi etiketės grupė - chlorometilo ketonas sąveikauja tik su jo 57 likučiu ir alkilina vienu iš azoto atomų histidino žiedo. Tokios affine etiketės sąveika su chymotipsin visiškai atima savo fermentinę veiklą. Yra keletas įrodymų apie didelį etiketės sąveikos specifiškumą chymotipsin:
- Pirma, affine etiketė yra didelė stere parieto. D-izomer etiketės su chymotipsin sąveikauja;
- antra, chimritripsin - β-fenilpropionato konkurencinis inhibitorius slopina sąveikos procesą tarp žymos su baltymu;
- Trečia, chymorinsino šėrimo greitis pridedant etiketę, yra ta pačia priklausomybe nuo pH kaip katalizės greičio.
"Tosil-L" fenilalaninchlorometilo ketono sąveikos modelis su jo 57 yra parodyta Fig. 3.9.
Fig. 3.9 histidino-57 alkilinimas chymotipinu, kai sąveikaujate su "Tosil-L" fenilalaninchlorometillorketu.
Taigi, chymotrypino katalizinio aktyvumo pasireiškimui, SER-195 buvimas ir jo 57 lieka aktyvaus fermento fermento centre. Kaip parodyta vėliau, aspartinės rūgšties liekana taip pat yra šalia šių likučių chymotripsin molekulės - ASP-102. Rentgeno konstrukcinė analizė parodė, kad visos trys likučiai yra šalia vienas kito ir sukuria vadinamąjį mokesčių perkėlimo sistemadėl to, kad ASP-102 sudaro vandenilio jungtis su savo 57, kuri savo ruožtu yra sujungta vandenilio jungtis su SER195 (Pav. 3.10).
Fig. 3.10 Įkrovimo pervedimo sistema aktyviu chymotipsin centre, nesant substrato (smūgio D.M., STEIZ T.A., Rentgeno spindulių difrakcijos studijos, Ann., Rev. Biochem., 1976, 39, 86-95).
Carboksilate-jonų ASP-102 poliarizuoja imidazolo grupę jo-57, o tai padidina savo gebėjimą vykdyti "Pronon" pertvarkymą, ir kai substratas sąveikauja su himotripsin molekulėmis, ASP-102 ir jo 57 priima protoną SER-195 hidroksilo grupė.
Fig. 3.11 Įkrovimo perkėlimo sistema aktyviu chymotipsin centre esant substrato akivaizdoje. Įdėję substratą, protonų tarpinis yra tarpinis privalomas aspartato-102 ir histidino-57 (smūgis D.M., STEITZ T.A., rentgeno difrakcijos tyrimai fermentų, Ann. Rev. Biochem., 1976, 39, 86-95).
Svetainės įpareigojančių substrato vietų lokalizavimas ir tikėtina hidrolizuoto peptido movos orientacija buvo nustatyta dėl chimotrypsin kompleksų rentgeno difrakcijos analizės su substrato analogais. Visų pirma, buvo parodyta chymotrypin s kompleksų tyrimo pavyzdyje su nehidro-ląstelių analogu substrato - formil-L-triptofano egzistavimą giliai hidrofobiniu fermentu
pocket šalia serina-195, kuris pagal dydį atitinka aromatinių aminorūgščių šoninius radikalus (3. pav. 12).
Fig. 3.12 Formil-L-triptofano chymotrypin schema.
Tai yra šios gilaus kišenės buvimas, kad chymotsin specifiškumas yra dėl aminorūgščių su aromatine ar kita hidrofobinė šoninė grandinė didelio dydžio. Kai rentgeno konstrukcinė chimotrybin kompleksų su analogais polipeptidų substratų analizė aptikta didelis skaičius Vandenilio jungtys tarp pagrindinių fermento ir substrato grandinių, kurie taip pat yra, kaip ir anti-lygiagrečiai β-parduotuvių sluoksniuose.
Chymotsino katalizinio veiksmo mechanizmas
Intensyvus ir išsamus rentgeno konstrukcinis ir biocheminiai tyrimai "HymotrySin" leido pasiekti tam tikrą išvadą, susijusią su jo katalizinio veiksmų mechanizmu. Kaip minėta, jo 57 ir SER-195 yra tiesiogiai dalyvauja į peptido prijungimo substrato. Šio ryšio hidrolizė prasideda tuo, kad deguonies OH grupės SER-195 atakuoja karbonilo grupę anglies atomas
hidrolizuotas peptido komunikacijos substratas. Dėl to ryšys tarp C ir O atomų karbonilo grupėje tampa vieninteliu ir atominiu " neigiamas mokestis. Tuo pačiu metu keturi skirtingi atomai, susiję su karbonilo karbonilo grupe, yra išdėstyti kaip tetraedronas. Švietimas tetraedrinis tarpinis junginyspasirodo įmanoma dėl vandenilio obligacijų atsiradimo tarp neigiamo įkrovimo deguonies atomo (vadinamos oksiano) ir dviem NH grupių pirminės fermento grandinės (Pav. 3.13).
Fig. 3.13 Tetraedrinis tarpinis tarpinis ir išjungimo išjungimo reakcijos. Tarpinio junginio stabilumas užtikrina vandenilio obligacijas, kurias sukūrė pirminės fermento grandinės NHGROPS.
Šis chimotopsino yra vadinamas oksianijos ertmė. Minėto tarpinio ryšio formavimo mechanizme protonų pervedimas iš SER-195 dėl jo 57 yra svarbus vaidmuo.
Fig. 3.14 Pirmasis etapas hidrolizės peptido chymotrypsin - acilinimas. Susidaro tetraedrinis tarpinis ryšys. Tada substrato amino komponentas greitai atskiriamas nuo fermento, o pats fermentas virsta tarpiniu produktu - acilo fermentu.
Protonų perdavimas yra daug lengviau dėka įkrovimo perdavimo sistemos buvimą. ASP-102 likučiai griežtai orientuota į histidin-57 imidazolo padėtį ir iš dalies neutralizuoja į šį žiedą. Protonas, susijęs su savo ASP pora, tada praeina hidrolizuoto peptido jungties azoto atomui, kuris sprogsta kaip rezultatas. Šiame etape substrato amino komponentas yra sujungtas vandenilio jungtimi su savo 57, o rūgštiniu komponentu - esminiu (kovalentiniu klijavimu) su SER-195, taip baigiant acilinimo etapą. Taigi, pagal chymotipsin, tarpinis tetraedralinis junginys (1) yra suformuotas ir, todėl amino komponentas substrato (2) greitai atskirtas nuo fermento. Pats fermentas virsta tarpiniu katalizės produktu - acil-fermento (3) (3.14 pav.).
Fig. 3.15 Antrasis etapas hidrolizės peptido chymotrypsin - deaklation. Acilo-fermentas yra hidrolizuotas vandeniu. Deaktilary iš esmės yra reakcija, atvirkštinė acilinimas, tačiau vanduo yra padengtas substrato amino komponentu.
Kitame etape - Deacilinimas amino komponentas difuzuoja iš fermento, o jo vieta aktyviame centre užima vandenį.
Iš esmės, deacilinimas yra grąžinimo acilinimo procesas. Iš pradžių įkrovimo perdavimo sistema nuima protoną nuo vandens.
