Rusko ime

Tripsin + himotpsin

Latinska imena tvari tripsina + kimotripsina

Tripsinum + chymotrpsinum ( Štap. Tripsini + chymotrypsini)

Farmakološka skupina tvari Tripsin + himotpsin

Tipični klinički i farmakološki članak 1

Farmaceutski. Proteolitička kombinirana priroda proteina. Dobiti iz gušterače stoke. Pod lokalnom i vanjskom uporabom, skrivena tkiva i fibrinoznog obrazovanja; Izgleda kao viskozna tajna, eksudat, krvni ugrušci. Hidrolizirani proteini i peptoni s formiranjem peptida s niskim molekularnim težinom, razdvajaju spojku nastale ostacima aromatskih aminokiselina (tirozin, tropotofana, fenilalanina, metionina).

Oznake. Vezanja bolesti bronhopila (bronhiectictic bolest, svjetlost apscesa, atelectasis, eksudativan plegres). ENT-ORGANI: gnojni sinusitis, gnojni otitis (akutni, subakutan, kronični), eusheis s viskoznim eksudatom, nakon traheostomije kako bi se olakšalo uklanjanje guste viskoznog eksudata, kroničnog rinitisa. Burns, slom, trofički čirevi, gnojne rane. U oftalmologiji: bolesti rožnice (ulkus, hermaty keratis); Burn sluznice oka, opstrukcija suza suza, tromo iscjeljivanje očiju kapka.

Kontraindikacije. Preosjetljivost, maligne neoplazme, destruktivne oblike plućne tuberkuloze, HSN II-III., Emfizema pluća s neuspjeh respiratornog sustava, Nemoguće je uvesti u krvarenje šupljine, primjenjivati \u200b\u200bna ulceriranim površinama malignih tumora.

Pažljivo. Empiama Pleura tuberkuloza etiologija (resorpcija eksudata može doprinijeti razvoju bronhipolorne fistule).

Doziranje. Lokalno, izvana.

Za liječenje gnojne trčanje. I sterilne maramice navlažene s otopinom: 25-50 mg lijeka u 10-50 ml 0,25% otopine prokain, nameće se periodom od 2 do 24 h (ovisno o debljini gnojnih nekrotičnih masa ) na površini rane. Preljeve se mijenjaju svakih 3-5 dana.

Za termalne opekline III. Tanki sloj lijeka se nanosi na traku brzinom od 1 g na 100 četvornosti površine rane, prekrivena zavoj, navlaženom s 0,9% otopinom NaCl ili 0.25% otopinom; nametnuti zavoj otporan na vlagu. Promjena preljeva proizvedenih u jednom danu. Tijekom svakog pomaka, oblaci uklanjaju lako odvojena područja nekrotičnog tkiva. Kada rane prekrivene debelim krilom, izreže se prije preklapanja.

S prigovaranjem bronšilne bolesti Udisanje 25-30 mg lijeka, razvedena u 5 ml destilirane vode, koristi se 1-3 puta dnevno. Otopina se također može primijeniti kroz bronhoskop, endotrahealnu sondu, trahestonu. U rješenju možete dodati antibiotike, svijetle ls.

Za liječenje čireva, opekline rožnice i keratitisa koriste se u obliku očnih jastuka u otopini 1: 500 dnevno, unutar 2-3 dana ili zakopane 2 čep 0,25% otopine, 4 puta dnevno, unutar 1- 2 dana. Opstrukcija suza i kožnih rana i rana kapka: oprano suzama i brisačima s 1% otopinom. Rješenja se pripremaju ex tempore.

U kroničnom rinitisu, oni se ubrizgavaju ili navodnjavaju otopinom (5 mg u 5 ml 0,9% otopine NaCl) nazalne šupljine lijeka 2-3 puta dnevno.

U kroničnom gnojnom djelu, nakon pranja šupljine 0,9% otopine NaCl, 0,5% otopine lijeka (razvedeno za 0,9%) otopina nacl), 2-3 puta dnevno za 20-30 minuta.

Nuspojava. Alergijske reakcije, povećati tjelesnu temperaturu na subfebrile, tahikardija.

Nakon udisanja uprave: iritacija sluznice gornje dišni put, jebeni glas.

U oftalmologiji: iritacije i oticanje konjunktive (u ovom slučaju, preporuča se smanjiti koncentraciju primijenjene otopine).

Posebne upute. U narednim satima nakon udisanja, pacijent mora temeljito očistiti sputum ili treba ukloniti usisavanjem.

ohms sudjeluje u proteinima proteina u proteinima u tanki crijevo Himmotripsin poželjno razdvaja vez koji se formiraju kotonskim skupinama aminokiselina koje imaju hidrofobne bočne lance, a karakterizira širi specifičnost nego. Nasuprot tome, tripsin h. Mlijeko želja.

Chymotrpsin se proizvodi egzokrinim stanicama gušterače (gušterača) u obliku neaktivnog profranog - kimotripsinogena, koji se izlučuje duodenal crijevagdje se utjecaj tripsina pretvara u kimotripsin. Osoba i većina sisavaca pronašla su dvije vrste kimotripsinogena - a i b, različitu u njihovom fizikalna kemijska svojstva, U procesu aktivacije kimotripsinogena, formira se nekoliko aktivnih oblika kimotripsina, razne topljivosti, oblik kristala i veličinu enzimske aktivnosti. Glavni oblik kimotripsina je kimotripsin a-protein s molekulskom masom od oko 25.000. Maksimalno otporan na slabost; U neutralnom i slabo alkalnom mediju podliježu autolize. Optimum djelovanja X. je na pH 7,5-8,2.

Odrediti aktivnost H. predložila je brojne metode temeljene na proteinima za razdvajanje i sintetskim supstratima. Kontrolirani spektrofotometrijski esteri M-supstituiranog tirozina naširoko se koristi.

Aktivnost X. je ugnjetavan brojnim sintetskim i prirodnim inhibitorima. U plazmi krvi i tkiva postoje inhibitori proteina H., zaštićeni od uništenja ovog enzima. Mnogi od njih su polivalentni da ugnjetavaju druge proteaze (na primjer, α2 -matloglobulin, neki inhibitori tripsina); Specifični inhibitor X. Krvni plazma je α 1 -Anthimotripsis.

Chymotrpsin se koristi kao drogaSposoban za selektivno podijeliti proteine \u200b\u200bnekrotičnih tkiva, vlaknastih formacija, zapaliti viskozne eksudate, gnojne mase. Ima protuupalni, antietnički učinak i promiče iscjeljenje Ruske akademije znanosti. Lijekovi H. se dobiva iz kimotripsinogena A, koji se izolira iz gušterače stoke i nakon rekristalizacije aktivira se tripsinom. U medicinskoj praksi, koristi se himotripsin a, proizveden od "chimothrixin kristal". to bijela boja, Dobro topljivi u vodi i u otopini izotoničnog natrijevog klorida.

Indikacije za uporabu, metode primjene, doze i moguće komplikacije Isto kao u kristalnom tripsinu. Dodatno, X. se koriste s intrakapsularnom ekstrakcijom katarakte. Zajedno s tripsinom, X. je dio himopcina, pankreatina i nekih drugih lijekova koji se koriste u slučaju nedostatke funkcije gušterače.

Obrazac za otpuštanje: hermetički pečene boce ili ampule koje sadrže 0,005 g. (5 mg.) i 0,01. g. (10 mg.) Kristalni kimotripsin. Skladištenje u svjetlom zaštićenom mjestu na temperaturi koja nije viša od + 10 °.

Ii. Chimothrixin

enzim izlučivanja gušterače koji se odnosi na klasu hidroliza (CF 3.4.21.1), kataliziranje hidrolitičkog cijepanja proteina, peptida, amida i aminokiselinskih estera pri probavljanju hrane u crijevu.

1. mala medicinska enciklopedija. - M: Medicinska enciklopedija, 1991-96 2. Prvo zdravstvena zaštita, - M.: Velika ruska enciklopedija. 1994 3. enciklopedijski rječnik medicinski uvjeti, - m.: Sovjetska enciklopedija. - 1982-1984.

Sinonimi:

Gledajte što je "chimothrixin" u drugim rječnicima:

On ... Orfografski rječnik

Himmotripsin, tvar proizvedena u tijelu, što doprinosi probavi hrane. Himotrijeprikasin je enzim koji dijeli proteine. Proizvodi se u tankom crijevu složenim kemijske reakcije Od kimotripsinogena ... Znanstveni i tehnički enciklopedijski rječnik

Probavni enzimski sok od gušterače; Sudjeluje u razdvajanju proteina u crijevu. Izrađuje se u obliku neaktivnog cimotripsinogena ... Veliki enciklopedijski rječnik

Proteolitički. Enzim većine kralježnjaka koji su uključeni u tripsin i druge peptidaze u razdvajanju proteina u tanki crijeva; Sintetizira se stanicama gušterače u obliku neaktivnog prekursora kimotripsinogena i ... ... ... ... ... Biološki enciklopedijski rječnik

SUT., Broj sinonima: 1 enzim (253) sinonimi za ASIS. Vnta Trishin. 2013 ... Sinonimski rječnik

chimothrixin - Proteolitički enzim kralježnjaka, sintetiziran je u gušterači u obliku rešetke kimotripsinogena. [Arefiev V.a., L. L. L. Engleski Engleski rječnik Genetski pojmovi 1995 407s.] Teme genetike en chymotripsin ... Direktorij tehničkog prevoditelja

Probavni enzimski sok od gušterače; Sudjeluje u razdvajanju proteina u crijevu. Izrađuje se u obliku neaktivnog cimotripsinogena. * * * Chymotryspin kimotripsin, probavni enzimski sok od gušterače; Sudjeluje u ... ... enciklopedijski rječnik

- (g.chimoscok + tripsin) enzim, cijepanje proteina hrane; Proizvodi se stanicama gušterače. Nova rječnik strana riječi, By Edwart, 2009. chimotrypsin a, mn. Ne m. (… Rječnik stranih riječi ruskog jezika

ChymoTripsin kimotripsin [cf 3.4.21.1 2]. Proteolitički enzim kralježnjaka sintetiziran je u gušterači u obliku himotripsinski prekursora. (

Chimothrixin - proteolitički enzim; Katalizira cijepanje proteina i peptida. Odnosi se na peptidne hidrolaze. Zajedno s tripsin Sudjeluje u proteinima proteina u tankom crijevu kimotripsina poželjno cijepanje veza nastaju coton skupinama aminokiselina s hidrofobnim bočnim lancima, a karakterizira širi specifičnost od tripsina. Za razliku od tripsina X. Želja mlijeka.

Himmipcin se proizvodi egzokrinim stanicama gušterača U obliku neaktivnog profranog - kimotrizogenog, koji se izlučuje u duodenumu, gdje se pod utjecajem tripsina pretvara u kimotripsin. Osoba i većina sisavaca otkrili su dvije vrste kimotripsinogena - A i B, koji se razlikuju u njihovim fizikalno-kemijskim svojstvima. U procesu aktivacije kimotripsinogena, formira se nekoliko aktivnih oblika kimotripsina, razne topljivosti, oblik kristala i veličinu enzimske aktivnosti. Glavni oblik kimotripsina je kimotripsin a - protein s molekulskom masom od oko 25.000. Enzim je maksimalno otporan na slabost; U neutralnom i slabo alkalnom mediju podliježu autolize. Optimum djelovanja X. je na pH 7,5-8,2.

Utvrditi aktivnost H. predložila je brojne metode,

Na temelju cijepanja proteina i sintetskih supstrata. Kontrolirana hidroliza spektrofotometrijske hidrolize M-supstituiranih tirozin estera se široko koristi.

Aktivnost X. je ugnjetavan brojnim sintetskim i prirodnim inhibitorima. U plazmi krvi i tkiva postoje inhibitori proteina H., sprječavanjem proteina od uništenja ovog enzima. Mnogi od njih su polivalentni da ugnjetaju aktivnost drugih proteaza (na primjer, 2-gahroglobulina, neki tripsin inhibitori); Specifični inhibitor X. U krvnoj plazmi je 1 -anthimotrixin.

Himmotripsin se koristi kao lijek koji se može selektivno podijeliti proteine \u200b\u200bnekrotičnih tkiva, oblika, zapaliti viskozne eksudate, gnojne mase. Ima protuupalni, antietnički učinak i promiče iscjeljenje Ruske akademije znanosti. X. Medicinske pripravke dobivaju se iz Chymotrygenogena A, koji se izolira iz gušterače stoke i nakon rekristalizacije aktivira se tripsinom. U medicinskoj praksi, koristi se himotripsin a, proizveden od "chimothrixin kristal". Ovo je bijeli prah, topiv u vodi i u otopini izotoničnog natrijevog klorida.

Indikacije za uporabu,

Metode primjene, doze, kontraindikacije i moguće komplikacije su iste kao i tripsin kristalnog. Dodatno, X. se koriste s intrakapsularnom ekstrakcijom katarakte. Zajedno s tripsinom, X. je dio himopcina, pankreatina i nekih drugih lijekova koji se koriste u slučaju nedostatke funkcije gušterače.

Obrazac za otpuštanje: hermetički pečene boce ili ampule koje sadrže 0,005 g. (5 mg.) i 0,01. g. (10 mg.) Kristalni kimotripsin. Skladištenje u svjetlom zaštićenom mjestu na temperaturi koja nije viša od + 10 °.

Chymotrpsin (chymotrpsinum) enzim

Chymotrpsin (Chymotrpsinum)
Farmakološki učinak:

U okviru lokalne primjene, kvalificirane (mrtve) tkanine i fibrinoznih formacija (krvni ugrušci / grupci) razbijaju; Likvice viskozne tajne (odvojene posebnim žlijezdama, na primjer, sputum), eksudate (oslobađaju se iz malu posude bogate proteinom tekućine), krvni ugrušak.

Struktura:

Chimothrixinto je proteolitički enzim generiran u gušterači sisavaca. Za medicinska primjena Dobiva se iz gušterače stoke. U soku od gušterača sadrži u neaktivnom stanju u obliku chilmnogenog (kotrijagerogerogen a i b), koji se aktivira pod utjecajem tripsina, a brojni oblici formiraju se iz kimotripsinogena, a formiraju se brojni oblici: A, B, G, S i P - kohimotrispisi i iz himotripsinogena B. Svi oblici kimotripsina su bliski u enzimskim svojstvima, ali se razlikuju u aktivnosti. Praktična važnost kao lijek trenutno ima -Hmptipsis, koji se proizvodi pod nazivom "Chymotryspin kristal".
a - Chimothrixin To je protein s relativnom molekulskom masom od 21,600 - 27,000. Odnosi se na skupinu proteolitičkih enzima. Kao što su tripsin, proteini i peptons hidrolizirani s relativno niskim peptidima molekulske mase. Od tripsina, razlikuje se od činjenice da prevladava uglavnom vezane veza nastaju ostacima aromatskih aminokiselina (tirozin, triptofan, fenilalanin, metionin). U nekim slučajevima, kimotripsin proizvodi dublju hidrolizu proteina od tripsina. Razlikuje se od tripsina također pozivanjem mlijeka koagulacije. Više regala od tripsina i sporiji je inaktiviran.
Chimothrixincrystal je sjajna vaga ili bijeli prah. Topljivi u vodi i u otopini izotoničnog natrijevog klorida; pH 0,2% vodene otopine 4.5 - 6.5. U suhom pogledu na police; vodena otopina Brzo inaktivirati, osobito na visokim temperaturama.

Indikacije za uporabu:

Tromboflebitis (upala zidova vena s njihovom blokanjom), upalni-distrofijski oblici parodonta (zuba), osteomijelitis (upala koštane srži i susjedne koštano tkivo), sinusitis (upala maksilarnog sinusa), otitis (upala ušne šupljine), iritita (upala irisa), iridociklita (očne bolesti); Traheites (upala dušnika), bronhitis (upala bronhija), ekstrakcija katarakta (uklanjanje potisne kore oka).

Način primjene:

Intramuskularno odrasli na 0,0025 g 1 vrijeme dnevno. Za injekciju, otopljena neposredno prije upotrebe 0,005 g kristalnog kristalnog kimotripsina u 1 -2 ml izotonično rješenje Natrijev klorid ili 0.5-2% otopina novokaina. Rješenje se uvodi duboko u gornji vanjski kvadrant bobica mišića. Tečaj -6-15 injekcija.

Nuspojave:

Alergijske reakcije, osjećaj pečenja na mjestu primjene. Krvarenje od granuliranja (iscjeljivanje) parcela. Kada se uvede u šupljinu, moguće je oslobađati tvari s djelovanjem nalik histamin.

Kontraindikacije:

Krvarenje rana i dezintegracija maligni tumori, Individualna netolerancija. Lijek nije prikladan za intravensku primjenu.

Obrazac za otpuštanje:

Prah u hermetički začepljenim bočicama od 0,005 g i 0,01

Pažnja!
Prije upotrebe priprave himmipcina morate se posavjetovati sa svojim liječnikom. Ova uputa za prijavu osigurava se u slobodnom prijevodu i namijenjen je isključivo za upoznavanje. Za više informacija, obratite se znamenitosti proizvođača.

Serinski proteinaze.

Mehanizam djelovanja kimotripsina i karboksipeptidaze.

Već je spomenuto da je gušterača odgovorna za proizvode od cijele skupine proteolitičkih enzima, peptidnih veza hidrolizu formiranih različitim aminokiselinama. Enzimi su uključeni u probavu proteina, a njihova specifičnost u odnosu na peptidne veze formirane različitim aminokiselinama daju se u tablici. 3.1. Najvažniji i potpuno proučavani predstavnik crijevnih proteinaza koje pripadaju obitelji serinski proteinaze, je kimotripsin. Himotripsin je probavni enzim, sintetiziran u obliku fermentacije gušterače.

Tablica 3.1

Proteinaze specifičnosti supstrata gastrointestinalnog trakta

	Aktivni enzim	Zimski	Aktivator	Cijepanje
				peptidna komunikacija
	Karboksiproteinaza		Autoaktiva,
	Pepsin A.	Pepsinogen A.	aktivni pepsin
	Serin
	proteinaza
	Trzaj	Tripidinogen.	Enterocinat
			Trzaj
	Chimothrixin	Himothriksinogen	Trzaj	Tyr, Phe, Trp, susreo se
	Elastasa	Proelstaza	Trzaj
	peptidaza
	Karboksipeptidaza A.	Prokarboksiptik		Val, Leu, Ile, Ala sa
	Karboksipeptidaza B.	Prokarboksiptik
	Amoniptidaza	Pro-lijek		Cijepanje n-
				terminal
				ostaci (za
				iznimka Pro)

Unutar acinthenskih stanica, nove žbukene molekule proteina se transportiraju iz endoplazmatskog retikuluma u golgji, gdje su okruženi membranom proteina-lipida - solarne granule, koji u elektronskim mikroskopom izgledaju kao vrlo guste telad (sl. 3.3 ).

Sl. 3.3 Elektronička mikrografija zimovanja granula u acinarnim stanicama gušterače (prema G. Ploči iz stroja., Biokemija

"Mir", M., Vol. 2, 1985).

Zimske granule koje sadrže kimotripsinogen akumulirane su na vrhu acinarnih stanica, a zatim pod djelovanjem hormonskog ili neuronskog signala izbačeni su na kanal koji vodi u duodenumu.

Chimotrirygen je predstavljen jednim polipeptidnim lancem od 245 aminokiselina. Lanac se stabilizira s pet disulfidnih mostova. Aktivacija kimotripsinogena se provodi pod djelovanjem tripsina, cijepanje peptidne veze između arginina-15 i izoleucina-16.

U isto vrijeme, aktivni π-hymotripsis djeluje na druge molekule himmopinogena (sl. 3.4).

Sl. 3.4 shema ilustriraju slijed faza aktivacije kimotripsina

Nadalje, π-hymotripsis je podvrgnut dodatnom proteolitičkom djelovanju kimotripsina s odabirom dva dipeptida SER14 -ARG15 i Thr147 -ASN148 i formiranje stabilnog oblika enzima - a - kohimotripsina.

Budući da je kimotripsin jedan od najpotpunije proučavanih enzima, preporučljivo je uzeti u obzir njegovu strukturu i mehanizam djelovanja detaljnije. Α-hype molekula se sastoji od tri polipeptidne lance povezane s dvije intercelurne disulfidne veze (sl. 3.5).

Sl. 3.5 α α molekula ima dva presretnuta disulfidna mostova i tri uzivne disulfidne veze.

Molekularna težina α-hymotripsiin je oko 25.000 da. Molekula ima kompaktni elipsoidni oblik od 51 × 40 × 40. Sve optužene skupine, osim tri potrebne za katalizu, nalaze se na površini molekule.

Equilium reakcije hidrolize je gotovo potpuno pomaknuta prema cijepanju peptidnih veza. Međutim, kimotripsin može hidrolizirati pri velikoj brzini daleko od svake peptidne veze. Djeluje selektivno u kontaktu, obrazovan karboksilne skupine aromatskih kiselina i aminokiselina s hidrofobnim radikalima velika veličinaNa primjer, metionin.

Karakteristična značajka kimotripsina je njegova sposobnost hidroliziranja bitnih veza. U osnovi, dobiven je značajan dio informacija o mehanizmu djelovanja kimotripsina pri proučavanju hidrolize

esteri.

Kao što je prikazano, kimotripsin katalizira hidrolizu peptida i esencijalnih veza u dvije odvojene faze. Prvi put je otkriveno prilikom proučavanja kinetike hidrolize esterovog veza n-n-netrofenilacetata.

Analiza reakcije pokazala je da se oslobađanje tijekom hidrolize jednog od proizvoda - N-N-N-N-N-NTY-Throatonol nastaje u dvije faze: prvi N-nitrofenol se oslobađa eksplozivno, a zatim je već formiran već s

manje bolan brzinu.

U osnovne značajke Proces hidrolize n-net-net-fenilacetata je sveden na formiranje enzima-supstratnog kompleksa, zatim je bitna veza u supstratu je podijeljena i Nn-nefnenen se oslobađa, a acetil skupina supstrata ostaje kovalentno spojena u aktivnom centru enzima. Dalje, voda napada acetil-enzim kompleks da se dobije acetat i regenerirani enzim (sl. 3.6)

Sl. 3.6 Acilacija: obrazovni kompleks acetil enzim kao međuprodukt. Deaktivacija: Hidroliza intermedijatnog kompleksa acetil enzim.

Brza početna faza oslobađanja N -Nitrofenola povezana je s formiranjem acil-enzimskog kompleksa prikazanog na Sl. 3.6 Ikona

(*). Ova faza se naziva acilacija. Nazvana je druga faza deacillocation, odgovara stacionarnoj fazi odgovora, koja je istovremeno ograničavajuća. Pokazalo se da je acil-enzimski kompleks tako stabilan da je pod određenim uvjetima, moguće ga je dodijeliti. Nakon što je Ph 3 istaknut čist oblik Ovaj međuprodukt acilni enzim je uspio okarakterizirati mjesto gdje je pričvršćena acilna skupina na enzim. Pokazalo se da je acilna skupina povezana s atom kisika određenog serinskog ostatka

- Serina-195 (Ser-195). Iz to je zbog toga što Chymotrypsin pripada grupi serinski proteinaze, Ovaj ostatak prikazuje neobično visoki kapacitet reakcije. Može biti posebno označiti

organski fluorofosfat - diizopropilfluorfosfat (slika 3.7).

Sl. 3.7 Diizopropil fosfat (DPFF) se inaktivira s kimotripsinom formiranjem diizopropil fosforilnog derivata serin-195.

Povećana reaktivnost Serina-195 ukazuje na činjenicu da preostalih 27 serinskih ostataka u kimotripsinu apsolutno ne u interakciji s diizopropilfluorfosfatom (DPFF). Usput, himmipcin nije jedini enzim koji je inhibira DPFF. Mnogi drugi proteolitički enzimi kao što je tripsin, elastasa,

trombin, bakterijski subtilisin također specifično reagiraju s DPFF-om, potpuno gubljenje aktivnosti. Kao iu slučaju kimotripsina, ovi proteinaze međusobno djeluju s DFFom zbog jednog serinskog ostatka. Dakle, prikladno je govoriti o postojanju cijele obiteljiserinske proteaze.

U katalitičkim djelima kimotripsina, međutim, ne samo bočni radikal Ser-195. Pokazalo se da u aktivnom središtu enzima, ravnoteža histidina također igra važnu ulogu - njegov-57. Dokazujući svoje sudjelovanje u katalizi upravljano je korištenjem tzv. Affine naljepnice, koja se veže na kimotripsin kao podlogu s jedne strane i tvori kovalentnu vezu s određenom skupinom u aktivnom centru, s druge strane.

Ova oznaka za kimotripsin je tosil-l- Fenilalaninklorometil keton, koja je prikazana na Sl. 3.8.

Sl. 3.8 Struktura tosil-L-fenilalaninklorometil ketona, koji se koristi kao afinarska oznaka kimotripsina (R - tosil grupe).

Prisutnost u molekuli oznake bočnog lanca predstavljena fenilalaninom osigurava njegovu specifičnu interakciju s enzimom. Grupa reaktivne naljepnice - klorometil keton interaktira samo s ostatkom njegovih 57 i alkilata jedan od dušikovih atoma histidinskog prstena. Interakcija takve afinske etikete s kimotripsinom u potpunosti lišava njegovu enzimsku aktivnost. Postoji nekoliko dokaza o visokim specifičnosti interakcije naljepnice s kimotripsinom:

- Prvo, afinarska oznaka je visok stereospecifični. Oznake D-izomera s kimotripsinom ne djeluju;

- Drugo, konkurentni inhibitor chimritr-β-fenilpropionata inhibira proces interakcije između oznake s proteinom;

- Treće, brzina hranjenja kimotripsina prilikom dodavanja oznake je u istoj ovisnosti o pH kao brzinu katalize.

Uzorak interakcije tosil-L-fenilalaninklorometil ketona s njegovim 57 prikazan je na Sl. 3.9.

Sl. 3.9 Alkiliranje histidina-57 u himotripsinu pri interakciji s tosil-L-fenilalaninklorometil ketonom.

Prema tome, za manifestaciju katalitičke aktivnosti kimotripsina, prisutnost Ser-195 i njegova-57 ostaje u aktivnom centru enzima enzima. Kao što je prikazano kasnije, ostatak asparaginske kiseline također se nalazi i pored tih ostataka u molekuli chymotrpsin - ASP-102. Rendgenska strukturna analiza pokazala je da su sva tri ostatka blizu jednika i stvaraju tzv sustav prijenosa naplatezbog činjenice da ASP-102 tvori vodikovu vezu s Hi-57, što je pak spojen vodikovom vezom sa SER195 (Sl. 3.10).

Sl. 3.10 Sustav prijenosa naplate u aktivnom središtu kimotripsina u odsustvu supstrata (udarac D.m., Steitz T.A., X-Ray difrakcijske studije enzima, Ann. Rev. Biochem., 1976, 39, 86-95).

Karboksilat-ion ASP-102 polarizira imidazolsku skupinu, što povećava svoju sposobnost da provodi pronon shuttle vezanja, a kada supstrat interagira s molekulom Himotrijebsin, ASP-102 i njegov-57 prihvatit će proton Ser-195 hidroksilna skupina.

Sl. 3.11 Sustav prijenosa naplate u aktivnom središtu kimotripsina u prisutnosti supstrata. Prilikom dodavanja supstrata, intermedijer je intermedijer za aspartat-102 i histidin-57 (udarac D.M., Steitz T.A., studije difrakcije X-zraka enzima, Ann. Rev. Biochem., 1976, 39, 86-95).

Pokazalo se lokalizacija web-mjesta obvezujuća mjesta i vjerojatnu orijentaciju spojke hidroliziranog peptida kao rezultat implementacije rendgenske difrakcijske analize chymotrpssin kompleksa s analozima supstrata. Posebno je prikazan na primjeru proučavanja kompleksa kimotripsina s analogom nehidro-stanica supstrata - formil-l-triptofan egzistencije u dubokom hidrofobnom enzimu

pocket u blizini Serine-195, koji u veličini odgovara bočnim radikalima aromatskih aminokiselina (sl. 3. 12).

Sl. 3.12 shematska slika vezanja formil-l-triptofan kimotripsina.

To je prisutnost ovog dubokog džepa da specifičnost kimotripsina je posljedica aminokiselina s aromatskim ili drugim hidrofobnim lateralnim lancem velike veličine. Kada se rendgenska strukturna analiza konstrukcija kimotripsina s analozima polipeptidnih podloga otkrivena veliki broj Vodokonske veze između glavnih lanaca enzima i supstrata, koje se također nalaze, kao u anti-paralelnim slojevima β-trgovine.

Mehanizam katalitičkog djelovanja himotripsina

Intenzivan i sveobuhvatan rendgenski strukturni i biokemijske studije Hymotrpsin je dopustio da dođe do određenog zaključka u odnosu na mehanizam njegovog katalitičkog djelovanja. Kao što je spomenuto, njegov-57 i Ser-195 su izravno uključeni u razdvajanje peptidnog spoja supstrata. Hidroliza ovog spoja počinje s činjenicom da kisik OH-Group Ser-195 napada karbonilnu skupinu ugljikovog atoma

hidrolizirani peptidni komunikacijski supstrat. Kao rezultat toga, veza između C i O atoma u karbonilnoj skupini postaje jedan i atom o stječe se negativna naknada, U isto vrijeme, četiri različita atoma povezana s karbonilnom karbonilnom skupinom raspoređena su kao tetraedar. Obrazovanje ovoga tetrahedralni srednji spojpokazuje se zbog pojave vodikovih veza između negativno nabijenog atoma kisika (nazvan oksiano) i dvije NH skupine primarnog lanca enzima (sl. 3.13).

Sl. 3.13 Tetrahedralni intermedijer u reakcijama dekaktivnosti o priključenju i deaktivnosti. Stabilnost intermedijarnog spoja osigurava vodikove veze formirane od NHGroups primarnog lanca enzima.

Ovaj komad kimotripsina se zove oksijajsko šupljina, U mehanizmu formiranja navedenog srednjeg spoja, prijenos protona iz Ser-195 na njegov-57 je glavna uloga.

Sl. 3.14 Prva faza hidrolize peptidnog kimotripsina - acilacija. Formira se tetraedralna srednja veza. Zatim se aminska komponenta supstrata brzo odvoji od enzima, a sam enzim se pretvara u međuprodukt - acil enzim.

Prijenos protona je mnogo lakši zahvaljujući prisutnosti sustava prijenosa naplate. ASP-102 ostatak strogo se fokusira položaj histidin-57 imidazola i djelomično neutralizira se na punjenje pojavljuje na ovom prstenu. Proton povezan s par Njegove asp zatim prolazi na dušikov atomu hidrolizirane peptidne veze, koji se prepušta kao rezultat. U ovoj fazi aminska komponenta supstrata je spojena vodikovom vezom sa Hi-57, a kisela komponenta - bitna (kovalentna vezanja) sa Ser-195, čime se dovršava fazi acilacije. Prema tome, pod aciliranjem kohimotripsina, formira se međuprodukt tetraedralni spoj (1) i, kao posljedica, amina komponenta supstrata (2) se brzo odvoji od enzima. Sam enzim se pretvara u međuprodukt katalize - acil-enzim (3) (sl. 3.14).

Sl. 3.15 Druga faza hidrolize peptidnog kimotripsina - deaktaka. Acil-enzim se hidrolizira vodom. Deactilary je u biti reakcija, inverzna acilacija, ali voda je prekrivena aminom komponentom supstrata.

U sljedećoj fazi - deaciliranje amin komponenta difundira iz enzima, a njegovo mjesto u aktivnom centru zauzima vodu.

U biti, deaciliranje je proces povratne acilacije. Isprva, sustav prijenosa naboja skida proton iz vode.