Nombre ruso
Tripsin + hymotpsinNombres latinos de las sustancias de tripsina + quimotripsina.
Trypsinum + Chymotrypsinum ( vara. Trypsini + chymotrypsini)Grupo farmacológico de sustancias Tripsin + Hymotpsin
Artículo clínico y farmacológico típico 1
Farmacéutico. Naturaleza proteolítica de proteínas combinadas. Obtener del páncreas del ganado. Bajo uso local y externo, tejidos oscuros y educación fibrinosa; Parece un secreto viscoso, exudado, coágulos de sangre. Hidroliza proteínas y peptenes con la formación de péptidos de bajo peso molecular, divide el acoplamiento formado por los residuos de aminoácidos aromáticos (tirosina, tropotofan, fenilalanina, metionina).
Indicaciones. Enfermedades de broncopile vinculante (enfermedad bronquiectática, ligero de absceso, atelectasis, plegritis exudativa). Ent-órganos: sinusitis purulenta, otitis purulenta (aguda, subaguda, crónica), eustheitis con exudado viscoso, después de la traqueotomía para facilitar la eliminación de un exudado viscoso grueso, rinitis crónica. Quemaduras, descomposición, Úlceras tróficas, heridas purulentas. En Oftalmología: Enfermedades de la córnea (úlcera, queratitis herpesina); Quemar de la membrana mucosa del ojo, la obstrucción de las lágrimas de las lágrimas, la curación lenta de los ojos de los párpados.
Contraindicaciones. Hipersensibilidad, neoplasias malignas, formas destructivas de tuberculosis pulmonar, arte de HSN II-III., Enfisema de los pulmones con insuficiencia respiratoria. Es imposible introducir en las cavidades sangrantes, aplicar sobre las superficies ulceradas de los tumores malignos.
Con cuidado. Etiología de la tuberculosis de Empiama Pleura (la reabsorción exudada puede contribuir al desarrollo de la fístula bronquiploral).
Dosificación. Localmente, externamente.
Para tratamiento puroso corrió. Y las toallitas estériles se humedecen con una solución: 25-50 mg del fármaco en 10-50 ml de una solución al 0,25% de la procaína, se imponen un período de 2 a 24 h (dependiendo del grosor de las masas necróticas purulentes. ) En la superficie de la herida. Los apósitos cambian cada 3-5 días.
Para quemaduras térmicas III ART. Se aplica una capa delgada del fármaco en la tira a la velocidad de 1 g por 100 m cm de la superficie de la herida, cubierta con un vendaje, humedecido con una solución de NaCl al 0,9% o una solución al 0,25%; Imponer un vendaje a prueba de humedad. Cambio de aderezos producidos en un día. Durante cada turno, los aderezos eliminan áreas separadas fácilmente de tejido necrótico. Cuando las heridas cubiertas con una vuelta gruesa, se corta antes de superponer el aderezo.
Con molesto enfermedades de los broncichos La inhalación de 25-30 mg del fármaco, se divorció en 5 ml de agua destilada, se usa 1-3 veces al día. La solución también se puede administrar a través de un broncoscopio, una sonda endotraqueal, trachestone. En la solución puedes agregar antibióticos, ls brillante.
Para el tratamiento de las úlceras, las quemaduras de la córnea y la queratitis se utilizan en forma de bolsas de eyectores en una solución de 1: 500 diariamente, dentro de 2-3 días o enterraron 2 capas de solución de 0.25%, 4 veces al día, dentro de 1- 2 días. La obstrucción de las lágrimas y las heridas de la piel y las heridas del párpado: se lavan con lágrimas y toallitas con una solución al 1%. Se preparan soluciones ex tempore.
En la rinitis crónica, se inyectan o se riegan con una solución (5 mg en 5 ml de solución de NaCl al 0,9%) de la cavidad nasal del fármaco 2-3 veces al día.
En octitis purulenta crónica complicada por el colheatoma, después de lavar la cavidad de una solución de NaCl al 0,9%, una solución al 0,5% del fármaco (divorciada por 0.9% solución de NaCl), 2-3 veces al día durante 20-30 minutos.
Efecto secundario. Reacciones alérgicas, aumentar la temperatura corporal a la subfebrilla, taquicardia.
Después de la administración de la inhalación: irritación de la membrana mucosa de la parte superior tracto respiratorio, maldita voz.
En oftalmología: irritación e hinchazón de la conjuntiva (en este caso, se recomienda reducir la concentración de la solución aplicada).
Instrucciones especiales. En las próximas horas después de la inhalación, el paciente debe limpiar a fondo el esputo o debe eliminarse por succión.
los ohmios participan en proteínas de proteínas de proteínas en intestino delgado La himmotripsina se divide preferiblemente los enlaces formados por grupos de codón de aminoácidos que tienen cadenas laterales hidrófobas, y se caracteriza por una especificidad más amplia que. En contraste, la tripsina h. Los deseos de la leche.
La quimotripsina es producida por células pancreáticas exocrinas (páncreas) en forma de un quimotripsinógeno inactivo, que se secreta en tripa duodenaldonde la influencia de la tripsina se convierte en quimotripsina. La persona y la mayoría de los mamíferos encontraron dos tipos de quimotripsinógeno, A y B, difiriendo en su propiedades fisicoquímicas. En el proceso de activación del quimotripsinógeno A, se forman varias formas activas de quimotripsina, diversa solubilidad, la forma de cristales y la magnitud de la actividad enzimática. La forma principal de quimotripsina es la quimotripsina A - proteína con un peso molecular de aproximadamente 25,000. Máximo resistente a la debilidad; En medios neutrales y débilmente alcalinos están sujetos a autólisis. El óptimo de las acciones de X. está a pH 7.5-8.2.
Determinar la actividad de H. propuso una serie de métodos basados \u200b\u200ben las proteínas de división y sustratos sintéticos. Los ésteres espectrofotométricos controlados de la tirosina sustituida con M, se utilizan ampliamente.
Actividad X. Se oprime con una serie de inhibidores sintéticos y naturales. En el plasma de la sangre y los tejidos hay inhibidores de proteínas de H., protegidos de la destrucción por esta enzima. Muchos de ellos son polivalentes para oprimir otras proteasas (por ejemplo, α 2 -Machroglobulin, algunos inhibidores de tripsina); El inhibidor específico de X. El plasma sanguíneo es α 1 -anthihymotripsis.
La quimotripsina se usa como drogaCapaz de dividir selectivamente proteínas de tejidos necróticos, formaciones fibrosas, encender exudados viscosos, masas purulentas. Tiene un efecto antiinflamatorio, antiétnico y promueve la curación de la Academia de Ciencias de Rusia. Medicamentos H. Se obtiene a partir del quimotripsinógeno A, que se aísla del páncreas del ganado y después de la recripstalización se activa por tripsina. En la práctica médica, es utilizada por la quimotripsina A, fabricada por "chimothrixin cristalina". eso el color blanco, bien soluble en agua y en solución isotónica de cloruro de sodio.
Indicaciones de uso, métodos de aplicación, dosis y posibles complicaciones Lo mismo que en la tripsina cristalina. Además, X. se utilizan con extracción de cataratas intrakapsular. Junto con la tripsina, X. es parte de Himopcin, Pancreatin y algunos otros medicamentos utilizados en caso de insuficiencia de la función de páncreas.
Formulario de liberación: botellas horticalmente horneadas o ampollas que contienen 0.005 gRAMO. (5 mg.) y 0.01. gRAMO. (10 mg.) CHIMOTRYPSIN DE CRISTAL. Almacenamiento en lugar protegido por luz a una temperatura no superior a + 10 °.
II. Quimothrixinala enzima de la secreción del páncreas relacionado con la clase de hidrolítulos (CF 3.4.21.1), catalizando la escisión hidrolítica de proteínas, péptidos, amidas y ésteres de aminoácidos al digerir los alimentos en el intestino.
1. Pequeña enciclopedia médica. - M.: Enciclopedia Médica. 1991-96 2. Primero cuidado de la salud. - M.: Enciclopedia rusa grande. 1994 3. Diccionario Enciclopédico términos médicos. - M.: Enciclopedia soviética. - 1982-1984.
Sinónimos:Mira lo que es "Chimothrixin" en otros diccionarios:
HIMES ... Diccionario orfográfico
Himmotripsina, la sustancia producida en el cuerpo, que contribuye a la digestión de los alimentos. HimotryPSIN es una enzima que divide las proteínas. Se produce en un intestino delgado por complejo. reacciones químicas De quimotripsinógeno ... Diccionario enciclopédico científico y técnico
Jugo pancreático de enzimas digestivas; Participa en la división de proteínas en el intestino. Se produce en forma de quimotripsinógeno inactivo ... Gran enciclopédico diccionario
Proteolítico. La enzima de la mayoría de los vertebrados involucrados con la tripsina y otras peptidasas en la división de proteínas en intestinos delgados; Se sintetiza por las células del páncreas en forma de un precursor inactivo del quimotripsinógeno y ... ... Diccionario enciclopédico biológico
Sut., Número de sinónimos: 1 Enzyme (253) Sinónimos de ASIS. V.n. Trishin. 2013 ... Diccionario Eur
quimothrixina - Enzima de vertebrados proteolíticos, se sintetiza en el páncreas en forma de una rejilla de quimotripsinógeno. [Arefiev v.A., L. L. L. L. inglés inglés diccionario Términos genéticos 1995 407s.] Temas de genética en quimotripsina ... Directorio Técnico Traductor
Jugo pancreático de enzimas digestivas; Participa en la división de proteínas en el intestino. Se produce en forma de quimotripsinógeno inactivo. * * * Quimotripsina de quimotripsina, jugo pancreático enzimático digestivo; Participa en ... ... Diccionario Enciclopédico
- (g.chymoscok + tripsin) enzima, dividir las proteínas alimenticias; Es producido por las células del páncreas. Nuevo diccionario palabras extranjeras. Por Edwart, 2009. ChimotryPSIN A, MN. No m. (... Diccionario de palabras extranjeras de la lengua rusa.
Chymotripsina quimotripsina [cf 3.4.21.1 2]. La enzima vertebrada proteolítica se sintetiza en el páncreas en forma de un precursor de himotripsinógeno. (
Quimothrixina - enzima proteolítica; Cataliza la división de proteínas y péptidos. Se refiere a las hidrolasas peptídicas. Juntos con tripsina Participa en proteínas de proteínas en el intestino delgado de la quimotripsina que divide preferiblemente los enlaces formados por grupos de codón de aminoácidos que tienen cadenas laterales hidrófobas, y se caracteriza por una especificidad más amplia que la tripsina. A diferencia de la tripsina X. Los deseos de la leche.
Hymmipcin es producido por células exocrinas. páncreas En forma de un mar, se secreta en un duodeno, donde se secreta en un duodeno, donde bajo la influencia de la tripsina se convierte en quimotripsina. La persona y la mayoría de los mamíferos descubrieron dos tipos de quimotripsinógeno, A y B, diferenciándose en sus propiedades fisicoquímicas. En el proceso de activación del quimotripsinógeno A, se forman varias formas activas de quimotripsina, diversa solubilidad, la forma de cristales y la magnitud de la actividad enzimática. La forma principal de quimotripsina es la quimotripsina A - proteína con un peso molecular de aproximadamente 25,000. La enzima es máxima resistente a la debilidad; En medios neutrales y débilmente alcalinos están sujetos a autólisis. El óptimo de las acciones de X. está a pH 7.5-8.2.
Para determinar la actividad de H. propuso una serie de métodos,
Basado en la división de proteínas y sustratos sintéticos. La hidrólisis de espectrofotometría controlada de los ésteres de tirosina sustituidos con M se usa ampliamente.Actividad X. Se oprime con una serie de inhibidores sintéticos y naturales. En el plasma de la sangre y los tejidos hay inhibidores de proteínas de H., evitando que las proteínas destruyan por esta enzima. Muchos de ellos son polivalentes para oprimir la actividad de otras proteasas (por ejemplo, una 2-machroglobulina, algunos inhibidores de la tripa); Un inhibidor específico de X. En el plasma sanguíneo es un 1 -anthihymotrixin.
La himmotripsina se usa como un medicamento que puede dividir selectivamente las proteínas de los tejidos necróticos, las formas, encender exudados viscosos, masas purulentas. Tiene un efecto antiinflamatorio, antiétnico y promueve la curación de la Academia de Ciencias de Rusia. X. Las preparaciones medicinales se obtienen a partir de la quimotreción A, que se aísla del páncreas del ganado y después de la recripstalización se activa mediante tripsina. En la práctica médica, es utilizada por la quimotripsina A, fabricada por "chimothrixin cristalina". Esto es polvo blanco, bien soluble en agua y en solución de cloruro de sodio isotónico.
Indicaciones para el uso,
Los métodos de aplicación, dosis, contraindicaciones y posibles complicaciones son las mismas que en una tripa de cristalina. Además, X. se utilizan con extracción de cataratas intrakapsular. Junto con la tripsina, X. es parte de Himopcin, Pancreatin y algunos otros medicamentos utilizados en caso de insuficiencia de la función de páncreas.Formulario de liberación: botellas horticalmente horneadas o ampollas que contienen 0.005 gRAMO. (5 mg.) y 0.01. gRAMO. (10 mg.) CHIMOTRYPSIN DE CRISTAL. Almacenamiento en lugar protegido por luz a una temperatura no superior a + 10 °.
CHIMOTRYPSIN (CHYMOTRYPSINUM) ENZIMA
Quimotripsina (chymotrypsinum)
Efecto farmacológico:
Bajo la aplicación local, las telas no crudenadas (muertas) y las formaciones fibrinosas (coágulos de sangre / hamburges) se están rompiendo; Los secretos viscosos de los licencias (separados por glándulas especiales, por ejemplo, esputo), exudados (liberados de pequeños vasos de tejido rico en líquido proteico), coágulo de sangre. Estructura:
Quimothrixinaes una enzima proteolítica generada en el páncreas de los mamíferos. Para aplicación médica Se obtiene del páncreas del ganado. En el jugo del páncreas, contiene en un estado inactivo en forma de quilmnogénicos (quimotrecerlicógenos A y B), que se activa bajo la influencia de la tripsina, y se forman una serie de formas a partir de quimotripsinógeno, y se forman varias formas: A, B, G, S y P - quimotripsinas, y de quimotripsinógeno B. Todas las formas de quimotripsina están cerca de las propiedades enzimáticas, pero difieren en la actividad. La importancia práctica que un fármaco tiene actualmente, tiene un -Mippipsis, que se fabrica bajo el nombre "Chimotripsina cristalina".a - Quimothrixina Es una proteína con un peso molecular relativo de 21,600 - 27,000. Se refiere a un grupo de enzimas proteolíticas. Al igual que la tripsina, las proteínas y los peptones se hidrolizan con péptidos de peso molecular relativamente bajo. Desde la tripsina, difiere del hecho de que ella se escapa principalmente de los enlaces formados por los residuos de aminoácidos aromáticos (tirosina, triptófano, fenilalanina, metionina). En algunos casos, la quimotripsina produce una hidrólisis más profunda de la proteína que la tripsina. Se diferencia de la tripsina también llamando a la coagulación de la leche. Más bastidores que la tripsina, y es desactivado más lento.
Quimothrixinael cristal es escalofrío brillante o polvo blanco. Soluble en agua y en solución de cloruro de sodio isotónico; PH 0.2% Solución acuosa 4.5 - 6.5. En una vista seca de los bastidores; soluciones acuosas Inactivado rápidamente, especialmente a altas temperaturas.
Indicaciones para el uso:
Tromboflebitis (inflamación de las paredes de las venas con su obstrucción), formas inflamatorias-disttróficas de periodontal (enfermedad de los dientes), osteomielitis (inflamación de la médula ósea y adyacentes tejido óseo), sinusitis (inflamación del seno maxilar), otitis (inflamación de la cavidad del oído), irritó (inflamación del iris), iridociclita (enfermedad ocular); Taracteritas (inflamación de la tráquea), bronquitis (inflamación de los bronquios), extracción de cataratas (eliminación de la corteza de empuje del ojo).Modo de aplicación:
Adultos intramusculares a 0.0025 g 1 vez por día. Para inyección, disuelto inmediatamente antes del uso de 0.005 g de cristalina de la quimotripsina en 1 -2 ml solución isotónica Cloruro de sodio o solución de novocaína de 0,5-2%. La solución se introduce en profundidad en el cuadrante exterior superior del músculo berry. Curso -6-15 inyecciones.Efectos secundarios:
Reacciones alérgicas, sensación de quema en el sitio de la aplicación. Sangrado de parcelas de granulación (curación). Cuando se introdujo en la cavidad, es posible liberar sustancias con acción de histamina.Contraindicaciones:
Heridas sangrantes y desintegración. tumores malignos. Intolerancia individual. El medicamento no es adecuado para la administración intravenosa.Forma de liberación:
Polvo en viales herméticamente obstruidos de 0.005 gy 0.01¡Atención!
Antes de usar la preparación de Hymmipcin, debe consultar con su médico. Esta instrucción de solicitud se proporciona en la traducción gratuita y está destinado únicamente a la familiarización. Para obtener más información, comuníquese con la anotación del fabricante.
Proteinasas de serina.
El mecanismo de la acción de la quimotripsina y la carboxipeptidasa.
Ya se ha mencionado que el páncreas es responsable de los productos de un grupo completo de enzimas proteolíticas, enlaces peptídicos de hidrólisis formados por diferentes aminoácidos. Enzimas involucradas en la digestión de las proteínas, y su especificidad con respecto a las conexiones peptídicas formadas por diferentes aminoácidos se dan en la tabla. 3.1. El representante más importante y totalmente estudiado de las proteinasas intestinales que pertenecen a la familia. proteinasas de serina, es la quimotripsina. La himotripsina es una enzima digestiva, sintetizada en forma de fermentación de los ácidos pancreáticos.
Tabla 3.1
Proteinas de especificidad del sustrato del tracto gastrointestinal.
Enzima activa |
Zimógeno. |
Activador |
Terrible |
|
comunicación peptídica |
||||
Carboxiproteinasa |
Autoactivación, |
|||
PEPSIN A. |
Pepsinógeno A. |
pepsina activa |
||
Serina |
||||
proteinasa |
||||
Tripsina |
Tripsinógeno. |
Enterocar |
||
Tripsina |
||||
Quimothrixina |
Quimothrixinógeno |
Tripsina |
Tyr, Phe, TRP, se reunió |
|
Elastasa |
PROELSTAZA |
Tripsina |
||
peptidasa |
||||
Carboxipeptidasa A. |
Procarboxypéptico |
Val, Leu, Ile, Ala con |
||
Carboxipeptidasa B. |
Procarboxypéptico |
|||
Amonítima |
Fármaco pro |
Escisión de n- |
||
terminal |
||||
residuos (para |
||||
excepción pro) |
||||
Dentro de las células acintadas, las nuevas moléculas de proteínas enlucidas se transportan desde el retículo endoplásmico hacia el aparato GOLGJI, donde están rodeados de una membrana de proteínas-lípidos: se forman gránulos solares, que en el microscopio electrónico se parecen a terneros muy densos (Fig. 3.3 ).
Higo. 3.3 Micrografía electrónica de gránulos de invierno en las células acinares del páncreas (según G. Palade de Stryer L., Bioquímica
"Paz", M., vol. 2, 1985).
Los gránulos de invierno que contienen quimotripsinógeno se acumulan en la parte superior de las células acinares y luego en la acción de una señal hormonal o neuronal se expulsan al conducto que conduce en el duodeno.
El quimotryGenegeno está representado por una cadena de polipéptidos de 245 aminoácidos. La cadena está estabilizada por cinco puentes disulfuro. La activación del quimotripsinógeno se lleva a cabo bajo la acción de una tripsina, divide el enlace peptídico entre la arginina-15 y la isoleucina-16.
Al mismo tiempo, el π activo -hymotripsis está actuando sobre otras moléculas de himmopixinógeno (Fig. 3.4).
Higo. 3.4 Esquema que ilustra la secuencia de etapas de la activación de la quimotripsina.
Además, π -Himotripsis se somete a una acción proteolítica adicional de la quimotripsina con la selección de dos dipéptidos Ser14 -ARG15 y THR147 -asN148 y la formación de una forma estable de la enzima - α - quimotripsina.
Dado que la quimotripsina es una de las enzimas más estudiadas, es recomendable considerar su estructura y el mecanismo de acción con más detalle. La molécula α-HYPHE consiste en tres cadenas de polipéptidos conectadas por dos enlaces disulfuro intercelulares (Fig. 3.5).
Higo. 3.5 La molécula α α tiene dos puentes de disulfuro interceptados y tres enlaces de desulfuro de ingestión.
El peso molecular de α -hymotripsyin es de aproximadamente 25.000 sí. La molécula tiene una forma elipsoidal compacta de 51 × 40 × 40 Å. Todos los grupos cargados, con la excepción de los tres necesarios para la catálisis, están en la superficie de la molécula.
El equilibrio de la reacción de hidrólisis se desplaza casi completamente hacia la división de los enlaces peptídicos. Sin embargo, la quimotripsina es capaz de hidrolizarse a alta velocidad lejos de cada conexión peptídica. Actúa de forma selectiva en contacto, educada. grupos carboxilo de ácidos aromáticos y aminoácidos con radicales hidrófobos. talla grandePor ejemplo, metionina.
Una característica característica de la quimotripsina es su capacidad para hidrolizar las conexiones esenciales. Esencialmente, se obtuvo una parte significativa de la información sobre el mecanismo de acción de la quimotripsina al estudiar hidrólisis.
ésteres
Como se muestra, la quimotripsina cataliza la hidrólisis del péptido y los enlaces esenciales en dos etapas separadas. Por primera vez, se descubrió al estudiar las cinéticas de hidrólisis del enlace éster N-N-netrofenilacetato.
El análisis de la reacción mostró que la liberación durante la hidrólisis de uno de los productos, N-N-N-Norte-Throatonol se produce en dos etapas: el primer n - nitrofenol se libera explosivamente, y luego ya está formado con
menos velocidad de pacientes hospitalizados.
EN características generales El proceso de hidrólisis N-net-fenilacetato se reduce a la formación de un complejo de sustratos enzimáticos, entonces la conexión esencial en el sustrato se divide y se libera nn-ntrofnenene, con un grupo acetilo del sustrato permanece conectado covalentemente en el centro activo. de la enzima. A continuación, el agua ataca el complejo de acetil-enzimas para formar un ión de acetato y enzimas regeneradas (Fig. 3.6)
Higo. 3.6 Acidrilación: Educación Compleja Enzima Acetyl como un producto intermedio. Desactivación: hidrólisis de la enzima acetil enzima compleja intermedia.
La fase inicial rápida de la liberación de N -Nithrofenol está asociada con la formación de un complejo de acil-enzimá mostrado en la FIG. 3.6 icono
(*). Esta etapa se llama acilación. La segunda etapa llamada desacilidad, corresponde a una etapa de respuesta estacionaria, que se limita simultáneamente. El complejo de la enzima acil, resultó ser tan estable que bajo ciertas condiciones, es posible asignarla. Después de que el pH 3 fue resaltado en forma pura Este complejo de enzimas de acilo intermedio se logró caracterizar el lugar donde se adjunta el grupo acilo a la enzima. Resultó que el grupo acilo está asociado con un átomo de oxígeno de un residuo de serina específico
- Serina-195 (Ser-195). Es por esta razón que la quimotripsina pertenece al grupo. proteinasas de serina. Este residuo muestra una capacidad de reacción inusualmente alta. Puede ser específicamente marcar
fluorofosfato orgánico: diisopropilfluorfosfato (Fig. 3.7).
Higo. 3.7 El diisopropil fosfato (DPFF) está inactivado por la quimotripsina formando la serina derivada de diisopropil fosforil-195.
El aumento de la reactividad de la serina-195 indica el hecho de que los 27 residuos de serina restantes en la quimotripsina no interactúan absolutamente con diisopropilfluorfosfato (DPFF). Por cierto, Hymmipcin no es la única enzima que es inhibida por el DPFF. Muchas otras enzimas proteolíticas, tales como tripsina, Elastasa,
thrombin, subtilisina bacteriana. también reacciona específicamente con DPFF, perdiendo completamente la actividad. Como en el caso de la quimotripsina, estas proteinasas interactúan con DFF debido a un solo residuo de serina. Por lo tanto, es apropiado hablar sobre la existencia de toda una familia.proteasas de la serina.
En los actos catalíticos de la quimotripsina, sin embargo, no solo participa el radical lateral de Ser-195. Se demostró que en el centro activo de la enzima, el balance de histidina también juega un papel importante: su-57. La demostración de su participación en la catálisis se gestionó utilizando la llamada etiqueta afín, que se une a la quimotripsina como un sustrato por un lado y forma una conexión covalente con un grupo específico en el centro activo, por otro lado.
Esta etiqueta para la quimotripsina es el TOSIL-L- Fenilalaninqulorometil cetona, que se muestra en la FIG. 3.8.
Higo. 3.8 La estructura de tosil-l-fenilalaninqulorometil cetona, utilizada como una etiqueta afín de quimotripsina (grupo R - TOSIL).
La presencia en la molécula de la etiqueta de la cadena lateral representada por la fenilalanina proporciona su interacción específica con la enzima. El grupo de etiquetas reactivas: la clorometil cetona interactúa solo con el residuo de su-57 y alquilados uno de los átomos de nitrógeno del anillo de histidina. La interacción de tal etiqueta afín con la quimotripsina priva completamente su actividad enzimática. Existen varias pruebas de alta especificidad de la interacción de la etiqueta con la quimotripsina:
- Primero, la etiqueta afín es alto esteroespecífica. Las etiquetas D-isomer con quimotripsina no interactúan;
- En segundo lugar, el inhibidor competitivo de la quimritripsina - β-fenilpropionato inhibe el proceso de interacción entre la etiqueta con proteína;
- Tercero, la velocidad de alimentación de la quimotripsina al agregar la etiqueta está en la misma dependencia del pH como la velocidad de la catálisis.
El patrón de interacción de tosil-l-fenilalanininclorometil cetona con su-57 se muestra en la FIG. 3.9.
Higo. 3.9 Alquilación de histidina-57 en quimotripsina cuando interactúa con tosil-l-fenilalanininclorometil cetona.
Por lo tanto, para la manifestación de la actividad catalítica de la quimotripsina, la presencia de Ser-195 y sus 57 restos en el centro activo de la enzima enzimática. Como se muestra más adelante, el residuo del ácido aspártico también se encuentra junto a estos residuos en la molécula de quimotripsina - ASP-102. El análisis estructural de rayos X mostró que los tres residuos se acercan y crean los llamados llamados sistema de transferencia de cargadebido al hecho de que ASP-102 forma un enlace de hidrógeno con su-57, que a su vez está conectado por un enlace de hidrógeno con Ser195 (Fig. 3.10).
Higo. 3.10 Sistema de transferencia de carga en el centro activo de la quimotripsina en ausencia de un sustrato (soplo D.M., Steitz T.A., estudios de difracción de rayos X de enzimas, Ann. Rev. Biochem., 1976, 39, 86-95).
El carboxilato-iones ASP-102 polariza el Grupo Imidazol HIS-57, lo que aumenta su capacidad para llevar a cabo la vinculación de la lanzadera de pronon, y cuando el sustrato interactúa con la molécula de HimotryPSIN, ASP-102 y HIS-57 aceptarán el protón de la GRUPO HIDROXYL DE SER-195.
Higo. 3.11 Sistema de transferencia de carga en el centro activo de la quimotripsina en presencia de un sustrato. Al agregar un sustrato, el intermedio de protones es una unión intermedia a aspartato-102 e histidina-57 (golpe d.m., steitz t.a., estudios de difracción de rayos X de enzimas, ann. Rev. Biochem., 1976, 39, 86-95).
La localización de los sitios de unión al sitio del sustrato y la orientación probable del acoplamiento peptídico hidrolizado se establecieron como resultado de la implementación del análisis de difracción de rayos X de los complejos de quimotripsina con análogos de sustrato. En particular, se mostró en el ejemplo del estudio de los complejos de quimotripsina con un análogo no hidroel-célula del sustrato - la existencia de formil-l-triptófano en una enzima hidrofóbica profunda
el bolsillo cerca de Serina-195, que en tamaño corresponde a radicales laterales de aminoácidos aromáticos (Fig. 3. 12).
Higo. 3.12 Imagen esquemática de la unión de la quimotripsina Formil-L-triptófano.
Es la presencia de este bolsillo profundo que la especificidad de la quimotripsina se debe a los aminoácidos con una cadena lateral aromática u otra cadena lateral hidrófoba de un tamaño grande. Cuando el análisis estructural de rayos X de los complejos de quimotripsina con análogos de sustratos de polipéptidos detectados. número grande Enlaces de hidrógeno entre las cadenas principales de la enzima y el sustrato, que también se encuentran, como en las capas de la tienda β anti-paralelas.
El mecanismo de acción catalítica de la quimotripsina.
Radiografía intensiva y completa estructural y estudios bioquímicos Hymotrypsin permitió llegar a una cierta conclusión en relación con el mecanismo de su acción catalítica. Como se mencionó, HIS-57 y Ser-195 están directamente involucrados en la división de la conexión peptídica del sustrato. La hidrólisis de esta conexión comienza con el hecho de que el oxígeno OH-Group Ser-195 ataca el átomo de carbono del grupo carbonilo
sustrato de comunicación peptídica hidrolizada. Como resultado, la conexión entre los átomos de C y O en el grupo carbonilo se convierte en el single y el átomo. carga negativa. Al mismo tiempo, cuatro átomos diferentes asociados con carbonil carbonilo se organizan como tetraedro. Educación de esto compuesto intermedio tetraédricoresulta posible debido a la aparición de enlaces de hidrógeno entre un átomo de oxígeno cargado negativamente (llamado OXIANO) y dos grupos NH de la cadena primaria de la enzima (Fig. 3.13).
Higo. 3.13 Intermedio tetraédrico en las reacciones de desactilidad de acidez y desactilidad. La estabilidad del compuesto intermedio proporciona enlaces de hidrógeno formados por los Grupos NH de la cadena primaria de la enzima.
Esta pieza de quimotripsina se llama cavidad oxiantina. En el mecanismo de la formación de dicha conexión intermedia, la transferencia de protones de Ser-195 sobre el HIS-57 es un papel importante.
Higo. 3.14 La primera etapa de hidrólisis de la quimotripsina peptídica - acilación. Se forma una conexión intermedia tetraédrica. Luego, el componente de amina del sustrato se separa rápidamente de la enzima, y \u200b\u200bla enzima en la misma se convierte en un producto intermedio: una enzima acil.
La transferencia de protones es mucho más fácil, gracias a la presencia del sistema de transferencia de carga. El residuo ASP-102 enfoca estrictamente la posición del imidazol Hystidine-57 y neutralizó parcialmente la carga en este anillo. El protón asociado con un par de su-ASP luego pasa al átomo de nitrógeno de un enlace peptídico hidrolizado, que se encuentra como resultado. En esta etapa, el componente de amina del sustrato está conectado por un enlace de hidrógeno con su-57, y el componente ácido: la esencial (unión covalente) con Ser-195, completando así la etapa de acilación. Por lo tanto, bajo la acilación de la quimotripsina, se forma un compuesto tetraédrico intermedio (1) y, en consecuencia, el componente de amina del sustrato (2) se separa rápidamente de la enzima. La enzima misma se convierte en un producto intermedio de catálisis, una acil-enzima (3) (Fig. 3.14).
Higo. 3.15 La segunda etapa de hidrólisis de la quimotripsina de péptido - desactivación. La acil-enzima está hidrolizada por agua. El desagrilar es esencialmente una reacción, acilación inversa, pero el agua está cubierta por el componente de amina del sustrato.
En la siguiente etapa, el componente de amina de desacilación se difunde de la enzima, y \u200b\u200bsu lugar en el centro activo ocupa el agua.
En esencia, la desacilación es el proceso de retorno de acilación. Al principio, el sistema de transferencia de carga saca el protón del agua.
