Patologiniai procesai, vykstantys organizme, gali sukelti skysčių kaupimąsi. Jos tvora ir tyrimai turi didelę reikšmę diagnostikos stadijoje. Tikslas čia yra išsiaiškinti, kas yra ištraukta medžiaga – eksudatas ar transudatas. Tokios analizės rezultatai leidžia nustatyti ligos pobūdį ir pasirinkti tinkamą gydymo taktiką.
Apibrėžimas
Eksudatas- skystis, kurio kilmė yra susijusi su vykstančiais uždegiminiais procesais.
Transudatas- išsiliejimas, susidaręs dėl priežasčių, nesusijusių su uždegimu.
Palyginimas
Taigi, nustačius skysčio rūšį, galima padaryti svarbias išvadas. Juk jei taškinė (iš organizmo išgauta medžiaga) yra eksudatas, vadinasi, yra uždegimas. Šį procesą lydi, pavyzdžiui, reumatas ar tuberkuliozė. Kita vertus, transudatas rodo kraujotakos sutrikimus, medžiagų apykaitos sutrikimus ir kitus sutrikimus. Uždegimas čia neįtrauktas. Šis skystis kaupiasi ertmėse ir audiniuose, pavyzdžiui, sergant širdies nepakankamumu ir kai kuriomis kepenų ligomis.
Reikia pasakyti, kad skirtumas tarp eksudato ir transudato ne visada yra išvaizda. Abu gali būti skaidrūs ir gelsvo atspalvio. Tačiau eksudatas dažnai būna kitokios spalvos, taip pat drumstas. Šio skysčio variantų yra nemažai. Serozinė veislė savo savybėmis ypač artima transudatui. Kiti pavyzdžiai yra konkretesni. Pavyzdžiui, pūlingas eksudatas yra klampus ir žalsvas, hemoraginis – raudono atspalvio dėl didelio raudonųjų kraujo kūnelių kiekio, chyle – turi riebalų ir vizualiai vertinant primena pieną.
Lyginant eksudato ir transudato tankį, antrojo tipo taškeliais pažymimi žemesni jo parametrai. Pagrindinis skiriamasis kriterijus yra baltymų kiekis skysčiuose. Paprastai jų eksudatas yra labai prisotintas, o transudate šios medžiagos kiekis yra mažas. Rivalta testas padeda gauti informacijos apie baltymo komponentą. Į indą su acto kompozicija įlašinami lašai tiriamosios medžiagos. Jei krisdami jie virsta drumstu debesiu, tada viskas yra su eksudatu. Antrojo tipo biologinis skystis tokios reakcijos nesukelia.
Fizinių ir cheminių savybių nustatymas
Pleuros efuzijos fizikinių ir cheminių savybių nustatymas prasideda nuo gautos medžiagos išvaizdos įvertinimo ir jos spalvos, skaidrumo, konsistencijos ir kvapo nustatymo. Dėl šių priežasčių galima išskirti keletą pleuros efuzijos tipų:
Transudatas yra neuždegiminis pleuros išsiliejimas, atsirandantis dėl hidrostatinio slėgio padidėjimo (dešiniojo skilvelio ar dviskilvelio širdies nepakankamumo) arba sumažėjus koloidiniam osmosiniam kraujo plazmos slėgiui (nefrozinis sindromas sergant glomerulonefritu, inkstų amiloidoze ir lipoidine nefroze su sutrikusiomis kepenų cirozės funkcijomis). ir kt.). Išvaizda transudatas yra skaidrus, gelsvas skystis, bekvapis.
Eksudatai – uždegiminės kilmės pleuros efuzija (infekcinė ir neinfekcinė genezė). Visuose eksudatuose yra daug baltymų, ypač fibrinogeno, ir didelis santykinis tankis. Eksudato išvaizda priklauso nuo uždegiminio pleuros proceso pobūdžio, pleuros skysčio ląstelinės sudėties ir kai kurių kitų veiksnių.
Yra keletas pagrindinių eksudatų tipų:
Serozinis eksudatas yra skaidrus, gelsvas skystis, bekvapis, savo išvaizda labai panašus į transudatą. Pacientams, sergantiems įvairios etiologijos pleuros efuzijomis, 70% atvejų atsiranda serozinis eksudatas (N.S. Tyukhtinas). Dažniausios serozinio eksudato priežastys yra tuberkuliozė, pneumonija ir navikai.
Pūlingas eksudatas – drumstas (dėl leukocitų gausos), gelsvai žalsvas arba pilkšvai baltas, tirštas, kreminės konsistencijos, dažniausiai bekvapis. Pūlingas eksudatas dažniausiai aptinkamas sergant bakterinės floros sukeltu pleuritu. Su gangrena arba plaučių abscesas komplikuojasi supuvusiu pleuros išsiliejimu, pastarasis įgauna nemalonų nemalonų kvapą, atsirandantį dėl baltymų skilimo, veikiant anaerobinėms bakterijoms.
Hemoraginis eksudatas. Priklausomai nuo kraujo priemaišos ir buvimo pleuros ertmėje trukmės, jis turi įvairaus intensyvumo kruviną spalvą – nuo rausvos skaidrios iki tamsiai raudonos ir rudos, drumzlino skysčio ir turi nemažą pakitusių ir nepakitusių eritrocitų priemaišą. Dėl jų hemolizės eksudatas įgauna savotišką lako išvaizdą. Hemoraginis eksudatas dažniau stebimas esant pleuros efuzijai, susijusiai su naviko procesu pleuros ir plaučių srityje (pirminis pleuros navikas - mezoteliomą, naviko metastazės pleuros ertmėje), su trauminiu pleuritu ir tuberkulioze. Rečiau sergant plaučių uždegimu ir kitomis ligomis nustatomi įvairūs hemoraginio efuzijos variantai, tarp jų ir serozinis-hemoraginis.
Chylous ir chyle panašūs eksudatai yra drumstas, balkšvas skystis, dėl didelio riebalų kiekio panašus į pieną. Chiloiniai eksudatai susidaro, kai limfos nutekėjimas krūtinės ląstos limfotaku apsunkinamas dėl naviko suspaudimo, padidėję limfmazgiai arba plyšus latakui (trauma, patinimas). Chile panašiuose eksudatuose taip pat yra daug riebalų ne dėl limfos (chyle) priemaišos, o dėl gausaus ląstelių irimo, vykstančios riebalinės degeneracijos, kuri dažniau stebima lėtinis uždegimas serozinės membranos.
Cholesterolio eksudatai yra tirštas skystis, turintis tamsiai gelsvą arba rusvą atspalvį ir paprastai randamas lėtinių kapsuliuotų efuzijų pavidalu prieš keletą metų.
Transudatai ir seroziniai eksudatai yra skaidrūs, turi būdingą šiek tiek gelsvą spalvą. Pūlingi, hemoraginiai, chyle, chyle panašūs ir cholesterolio eksudatai dažniausiai būna drumsti ir savo spalva skiriasi nuo transudatų ir serozinių eksudatų.
6.2 lentelėje pateikiami kai kurie svarbūs diagnostikos požymiai, kuriuos galima aptikti atliekant išsamų pleuros turinio tyrimą.
2 lentelė .
Kai kurių pleuros efuzijos makroskopinių požymių diagnostinė vertė
|
Ženklai |
Diagnostinė vertė |
|
Kraujas pleuros efuzijoje |
Navikinis pleuritas (apie 44 proc.) Potrauminis pleuritas Tuberkuliozinis pleuritas Parapneumoninis pleuritas ir kt. |
|
Balta efuzija |
Chylous efuzija Į šilumą panašus išsiliejimas Cholesterolio išsiskyrimas |
|
Šokolado sirupo spalva |
Amebinis kepenų abscesas su proveržiu į pleuros ertmę |
|
Juoda spalva |
Aspergiliozės efuzija |
|
Gelsvai žalsva efuzija |
Pleuritas dėl reumatoidinio artrito |
|
Pleuros empiema |
|
|
Puvimo kvapas |
Pleuros empiema (anaerobiniai patogenai) |
|
Labai didelis efuzijos klampumas |
Mezoteliomą |
|
Amoniako kvapas |
Ureminis efuzija |
Laboratorinis pleuros išsiliejimo fizikinių ir cheminių savybių tyrimas daugeliu atvejų leidžia atskirti transudatą ir eksudatą.
Santykinis tankis transudatai svyruoja nuo 1,002 iki 1,015, o eksudatai - virš 1,018.
Baltymas. Transudatuose baltymų yra ne daugiau kaip 5-25 g/l, eksudatuose – nuo 30 g/l ir daugiau. Pūlinguose eksudatuose ypač didelė baltymų koncentracija (iki 70 g/l). Dažnai nustatomas pleuros efuzijos baltymo ir serumo baltymų santykis (baltymaskoeficientas). Transudatams būdingas santykinai mažas baltymo koeficientas (mažesnis nei 0,5). Eksudatai turi didesnį santykį (> 0,5).
Rivalta testas naudojamas apytiksliai atskirti eksudatus nuo transudatų. Jis pagrįstas tuo, kad į acto rūgšties tirpalą įlašinus lašelį eksudato su sąlyginai didele baltymų koncentracija, jis drumsčiasi (32 pav.). Distiliuotas vanduo pilamas į 100 ml talpos cilindrą ir parūgštinamas 2-3 lašais ledinio šalto. acto rūgštis... Tada į cilindrą lašinamas bandomasis skystis. Jei tuo pačiu metu atsiranda tam tikras tirpalo drumstumas balto debesėlio pavidalu, nusileidžiantis cilindro dugnu (32 pav., a), mėginys laikomas. teigiamas, kuri būdinga eksudatui. Jeigu krintantys lašai greitai ir be pėdsakų ištirpsta (32 pav., b), mėginys laikomas kaip neigiamas(transudatas).
Ryžiai. 32. Teigiamas (a) ir neigiamas (b) Rivalto testas.
gliukozė. Gliukozės kiekis pleuros ertmėje nustatomas kartu su gliukozės koncentracijos kraujyje tyrimu. Gliukozės kiekio pleuros skystyje ir kraujo santykio sumažėjimas žemiau 0,5 būdingas eksudatams, o tai dažnai rodo gliukozės pernešimo į pleuros efuziją blokadą. Be to, uždegimo židinyje, veikiant polimorfonukleariniams leukocitams ir bakterijoms, suaktyvėja anaerobinis gliukozės metabolizmas, dėl kurio sumažėja gliukozės koncentracija kraujyje. pleuros ertmė, pieno rūgšties ir anglies dioksido susidarymas. Gliukozės kiekis sumažėja iki 3,3 mmol/l sergant tuberkulioze, reumatoidiniu artritu, piktybiniais navikais, pneumonija (parapneumonine efuzija), stemplės plyšimu, taip pat ankstyvosiose ūminės vilkligės pleurito stadijose. Labiausiai pastebimas gliukozės koncentracijos sumažėjimas, kai išsivysto pūlingas pleuritas (pleuros empiema).
PH sumažėjimas pleuros skystis mažesnis nei 7,3 aptinkamas esant tokioms pat patologinėms būklėms. Pleuros efuzijos pH paprastai gerai koreliuoja su mažu gliukozės kiekiu. Pleurinio skysčio pH sumažėjimas su pūlingu-uždegiminiu ir neinfekciniu pleuritu atsiranda dėl suaktyvėjusio anaerobinio gliukozės metabolizmo, dėl kurio padidėja pieno rūgšties ir CO 2 kiekis ir išsivysto acidozė.
Laktato dehidrogenazės (LDH) aktyvumas leidžia apytiksliai atskirti pleuros uždegiminio proceso intensyvumą. Eksudatams apskritai būdingas aukštas LDH lygis (daugiau nei 1,6 mmol/l x val., o transudatams – žemas (mažiau nei 1,6 mmol/l x h).) Kartais atsiranda vadinamųjų. fermento koeficientas - LDH kiekio efuzijoje santykis su kraujo serumo LDH, kuris eksudatuose viršija 0,6, o transudatuose - mažesnis nei 0,6.
Taigi, pleuros efuzijos fizikinių ir cheminių savybių nustatymas daugeliu atvejų (nors ir ne visada) leidžia atskirti transudatą ir eksudatą, kurių būdingiausi skirtumai pateikti 6.3 lentelėje.
Prisiminti: Dėl transudatai mažas santykinis tankis (1,002-1,015), mažas baltymų kiekis (iki 25 g / l), mažas LDH aktyvumas (3,3 g / l), neigiamas Rivalt testas, baltymų sumažėjimas (
Eksudatai išsiskiria didesniu santykinio tankio (> 1,018) ir baltymų kiekiu (30 g / l ir daugiau), dideliu LDH aktyvumu (> 1,6 mmol / l xh), gliukozės (0,5) ir fermentų ( > 0,6) koeficientai.
Reikia pridurti, kad didelis amilazės kiekis pleuros skystyje būdingas išskyroms, atsiradusioms dėl kasos ligų – ūminio ar paūmėjusio lėtinio pankreatito. Be to, pleuros skystyje amilazės padidėjimas atsiranda plyšus stemplei ir (labai retai) sergant plaučių adenokarcinoma. Būdinga tai, kad šiais atvejais amilazės kiekis pleuros ertmėje yra didesnis nei kraujo serume.
Imunologiniai tyrimai pleuros turinys leidžia nustatyti ligos sukėlėją ir (arba) antikūnus prieš jį. Šiuo tikslu paprastai naudojamas labai informatyvus fermentų imunologinis tyrimas ir polimerazės grandininė reakcija (PGR).
3 lentelė.
Pagrindiniai transudato ir eksudato skirtumai
|
Rodikliai |
Transudatas |
Eksudatas |
|
Santykinis tankis efuzijos pH |
||
|
„Baltymų santykis“ – santykis: efuzinis baltymas / serumo baltymas |
||
|
Rivaltos testas |
Neigiamas |
Teigiamas |
|
Fibrinogenas |
Pateikti |
Dingęs |
|
Nuosėdos |
Santykinis ertmės skysčių tankis nustatomas naudojant urometrą. Transudatų santykinis tankis yra mažesnis nei eksudatų. Santykinis transudatų tankis svyruoja nuo 1005 iki 1015; santykinis eksudatų tankis paprastai yra didesnis nei 1018.
Baltymų kiekis ir jo nustatymas atliekamas tais pačiais metodais, kaip ir šlapime, arba panašiai kaip baltymo nustatymas kraujo serume refraktometru; rezultatus išreikškite gramais litre.
Transudatuose yra 5–25 g/l baltymų, o eksudatuose – daugiau nei 30 g/l. Taip pat svarbi kokybinė baltymų sudėtis. Taigi albumino ir globulinų santykis transudatuose ir eksudatuose yra skirtingas: transudatuose albumino-globulino indeksas yra 2,5-4,0; eksudatuose jis yra 0,5-2,0.
Išsamesniam baltymų frakcijų tyrimui naudojama elektroforezė.
Standartizuotas baltymų kiekybinio nustatymo metodas
Metodo principas grindžiamas tuo, kad salicilo rūgštis sukelia baltymų denatūraciją (drumstumą). Drumstumo intensyvumas yra proporcingas baltymų koncentracijai.
Speciali įranga: fotoelektrinis kolorimetras.
Tyrimo pažanga
Dėl didelio baltymų kiekio transudatuose ir eksudatuose prieš tyrimą jie skiedžiami 0,9 % natrio chlorido tirpalu. Skiedimo laipsnis apytiksliai nustatomas reaguojant su sulfosalicilo rūgštimi. Po to paruošiamas pagrindinis efuzijos skysčių skiedimas 1:100, kuriam į 0,1 ml eksudato arba transudato įpilama 9,9 ml 0,9% natrio chlorido tirpalo. Jei reikia (didelis baltymų kiekis), skiedimo greitį galima padidinti.
Į mėgintuvėlį įpilama 1,25 ml praskiesto skysčio ir 3,75 ml 3% sulfosalicilo rūgšties tirpalo, turinys išmaišomas. Po 5 minučių atliekama fotometrija, esant 590-650 nm bangos ilgiui (oranžinis arba raudonas filtras) kiuvetėje, kurios optinio kelio ilgis 0,5 cm prieš kontrolinį mėginį, į kurį vietoj sulfosalicilo rūgšties įpilama 3,75 ml 0,9 proc. pilamas natrio chlorido tirpalas...
Skaičiavimas atliekamas pagal kalibravimo grafiką, atsižvelgiant į mėginio praskiedimą. Norint nubraižyti grafiką, skiedimai ruošiami iš standartinio albumino tirpalo ir apdorojami kaip eksperimentiniai mėginiai.
Pastaba
Tiesioji kalibravimo grafiko priklausomybė palaikoma iki 1000 mg/ml baltymų koncentracijos.
Eksudatuose baltymų yra nuo 30 iki 80 g/l, o transudatuose – 5-25 g/l.
Rivaltas testas taip pat buvo pasiūlytas atskirti transudatus ir eksudatus.
Metodo principas
Transudatuose yra seromucino (globulino pobūdžio junginio), kuris duoda teigiamą testą (denatūraciją) su silpnu acto rūgšties tirpalu.
Ryžto progresas
Į cilindrą pilama 100-150 ml distiliuoto vandens, parūgštinama 2-3 lašais ledinės acto rūgšties ir lašinamas tiriamasis skystis. Krintantis eksudato lašas sudaro drumstą baltą debesį, kuris nusileidžia į indo dugną. Transudato lašas nesudaro drumstumo arba jis yra nereikšmingas ir greitai ištirpsta.
Nepaisant nurodytų skirtumų tarp eksudatų ir transudatų, praktiškai ne visada lengva juos atskirti, nes kartais tenka susidurti su daugybe pereinamųjų skysčių, taip pat su eksudatais, kurie baltymų kiekiu ir santykiniu požiūriu yra artimi transudatams. tankis.
Mikroskopinis tyrimas yra labai svarbus norint atskirti transudatus ir eksudatus.
Tiriant skysčius, gautus atliekant bandomąją krūtinės ląstos ir pilvo ertmių, sąnarių, pūlinių ir cistų punkciją, siekiama ištirti ištraukto taškinio audinio savybes. Tokio pobūdžio tyrimų duomenys turi didelę diagnostinę vertę, daugeliu atvejų lemiantys ligos proceso, sukėlusio skysčių kaupimąsi, pobūdį. Šiuo atveju išgaunamo taškinio pluošto kiekis nėra reikšmingas. Tai svarbu tik prognostiniu požiūriu. Kai vienais atvejais vos pavyksta surinkti vos kelis kubinius centimetrus efuzijos, kitais atvejais jį galima pašalinti litrais. Punktacijos kilmės ir kiekvienos ligos pobūdžio klausimas atskira byla iš esmės nuspręsta remiantis skysčių tyrimo duomenimis.
Per bandomąją krūtinės ląstos ir pilvo ertmių punkciją galima gauti įvairių rūšių eksudatų, transudatų, kraujo, skrandžio ar žarnyno turinio, šlapimo, įvairių cistų ir echinokokų pūslių turinio.
Taškinis tyrimas iškelia užduotį nustatyti fizines savybes skystis, jo cheminė sudėtis, vienodų elementų, sumaišytų su efuzija, tyrimas ir galiausiai bakteriologinis tyrimas.
Nustatant fizikines savybes, atkreipiamas dėmesys į efuzijos spalvą, skaidrumą, konsistenciją, savitąjį svorį ir reakciją.
Išvaizdos išskyros išskiriamos: a) visiškai bespalvės, b) vienos ar kitos spalvos, c) skaidrios, d) opalinės, e) drumstos ir f) pieno baltumo.
Visiškai bespalvis ir skaidrus, švarus, kaip vanduo, yra echinokokų ir maišelių navikų burbuliukų turinys – cistos; skaidrūs, be to, apima transudatus ir serozinius eksudatus, taip pat šlapimą, besikaupiantį pilvo ertmė su plyšusia šlapimo pūsle. Išsiliejimo spalva ir jo spalvos intensyvumas gali skirtis.
Seroziniai eksudatai ir transudatai yra beveik visiškai skaidrūs, tik šiek tiek opaliniai gražios citrinos geltonos spalvos skysčiai. Nedidelio kraujo dažų kiekio priemaiša suteikia jiems rausvą atspalvį; esant staigesnei ekstravazacijai, skystis tampa raudonas ir net vyšniškai raudonas, spalva labai nesiskiria nuo kraujo.
Drumstiems skysčiams priskiriami serofibrininiai, pūlingi ir choriniai eksudatai, hemoraginiai eksudatai, besikaupiantys sergant serozinių membranų tuberkuliozės pažeidimais, taip pat esant krūtinės ląstos ir pilvo organų piktybiniams navikams, skrandžio ir žarnų turinys ir, galiausiai, hemoraginiai koeburiniai chromoboluboliniai agregatai. ir kai kurios žarnų nepraeinamumo formos.
Pieno baltumo yra eksudatai – čiliniai, čiliški ir pseudochilai.
Plyšstant ertmės limfagyslėms pilvo ertmėje besikaupiančio čilo eksudato pieno baltumo spalva atsiranda susimaišius dideliam kiekiui riebalų, kurie, nusėdę, kaupiasi tirštos kreminės masės pavidalu ant jo paviršiaus. . Įpylus kelis kubinius centimetrus eterio, šarminto lašeliu šarminio kalio, skystis dėl visiško riebalų ištirpimo tampa visiškai skaidrus. 111 preparatų, apdorotų Sudanu, mikroskopinis tyrimas rodo intensyviai raudonos spalvos riebalų grūdelių masę. Sergant lėtiniu serozinių membranų uždegimu, pavyzdžiui, tuberkulioze, ertmėse kaupiasi į čilus panašūs eksudatai, kurių būdinga spalva priklauso nuo to, ar susikaupia daug sunykusių riebalinių degeneruotų ląstelių. Tokiuose eksudatuose yra žymiai mažiau riebalų; įpylus eterio, skystis, tik šiek tiek pašviesėjęs, lieka drumstas dėl didelio kiekio endotelio ląstelių ir jame suspenduotų leukocitų priemaišos.
Pseudohiloidiniai eksudatai, savo spalva panašūs į atskiestą pieną, turi tik labai nedaug riebalų. Įpylus eterio jie nebalina ir stovėdami nesudaro kreminio sluoksnio. Vieni jiems būdingą spalvą paaiškina lecitino turinčių globulinų buvimu, kiti – nukleidais ir mukoidais.
Pagal savo konsistenciją punkcijos būdu gauti efuzijos dažniausiai būna visiškai skysti; tai apima eksudatus, transudatus, skystį iš echinokokinės šlapimo pūslės, šlapimą ir kt.; tik gimdos cistų turinys yra skaidrios gleivinės konsistencijos. Dėl didelio pseudomucino kiekio priemaišos kiaušidžių cistos yra aiškiai gleivingos konsistencijos ir gali ištįsti į ilgus plonus siūlus. Gimdos turinys, kuris jai plyšdamas patenka į pilvo ertmę, yra tiršta, klampi masė, kuri taip pat išsitempia į ilgus siūlus. Mikroskopiniu tyrimu nuosėdose aptinkama daug leukocitų ir epitelio ląstelių.
Nustatant Specifinė gravitacija Paprastai naudojama Puncta Suskirstymas Detre, Tai tik Hammershlag pavyzdžio modifikacija. Ne visada įmanoma nustatyti hidrometru dėl greito skysčio krešėjimo; be to, tam reikia didelio kiekio (iki 25 kub. cm) taškinio. Norint atitolinti krešėjimą, taškinius mėginius rekomenduojama rinkti į indą, panardintą į iki 38 °C įkaitintą vandenį. Tyrimas turėtų būti atliekamas naudojant hidrometrus, nustatytus 36 ° temperatūrai.
Detre metodas pagrįstas bazinio tirpalo ir tiriamojo skysčio savitojo sunkio skirtumu. Jei efuzijos lašas panardinamas į lengvesnio savitojo svorio skystį, jis greitai nugrimzta į dugną, sunkesnio tirpale lašas plūduriuoja paviršiuje. Kai savitasis svoris vienodas, jis pakimba tirpale, plūduriuoja jame nepakildamas ir nenukrisdamas.
4 sprendimai naudojami kaip pagrindiniai Valgomoji druska savitasis tankis 1,010 (1,380%), 1,020 (2,76%), 1,030 (4,14%) ir 1,040 (5,52%). Pradiniai tirpalai ruošiami distiliuotame vandenyje, pridedant nurodytus kiekius natrio chlorido. Reagento savitasis tankis turi būti tiksliai patikrintas hidrometru. Pirmiausia nustatoma ribinių tirpalų koncentracija. Šiuo tikslu vienas lašas tiriamojo skysčio pipete panardinamas į pradinius tirpalus, supiltus į mėgintuvėlius. Jei tirpale, kurio savitasis tankis yra 1,020, lašas nukrenta į dugną, o kurio savitasis tankis 1,030 plūduriuoja paviršiuje, tiriamo skysčio savitasis svoris yra kažkur 1,020–1,030. Po to paruošus tarpines koncentracijas, tinkamai praskiedus tirpalą, kurio savitasis tankis yra 1,030, distiliuotu vandeniu (9 + .1,8 + + 2,7 + 3 ir tt), atliekamas galutinis nustatymas.
Transudato savitasis svoris svyruoja nuo 1,005 iki 1,018. Didžiausias savitasis tankis yra lunktuose su pneumotoraksu, kai skystis pagal savo savybes yra tarp transudatų ir eksudatų.
Eksudatai yra tankesni. Jų savitasis svoris paprastai yra didesnis nei 1,018. Tačiau skirtumai šiuo atžvilgiu tarp eksudatų ir transudatų toli gražu ne visada yra pastovūs. Daugeliu atvejų savitasis eksudato tankis yra mažesnis už ribą, kita vertus, dažnai randami transudatai, kurių savitasis tankis yra labai didelis.
Taškinė reakcija turi didelę reikšmę tiriant skrandžio ir šlapimo pūslės turinį. Esant lašėjimui ir serozinių membranų uždegimui, išsiliejimas dažniausiai yra šarminis. Šiuo atveju stebimi vandenilio jonų koncentracijos svyravimai yra labai įvairūs ir neturi reikšmingos reikšmės atskiriant transudatus nuo eksudatų. Skrandžio turinys yra smarkiai rūgštus, rūgštaus kvapo ir dažnai jame yra kraujo; šlapimas su plyšusia pūsle mėsėdžiams dažniausiai būna neutralus, kartais rūgštus, rečiau ryškiai šarminis.
Baltymų kiekio nustatymas yra pagrindinis efuzijos tyrimo tikslas, nes šiuo atžvilgiu yra gana didelių skirtumų, kurie padeda atskirti eksudatus nuo transudatų. Tiksliausi rezultatai gaunami pasveriant sausas baltymų nuosėdas. Nusodinimui naudojamas 1% natrio chlorido tirpalas, parūgštintas acto rūgšties lašeliu. K 100 kubinių metrų pamatyti karšta NaCl tirpalas pridėti 10 kubinių metrų. cm bandomojo skysčio ir, gerai sukračius, filtruokite; nuosėdos perplaunamos vandeniu, parūgštinamos acto rūgštimi, alkoholiu, eteriu, džiovinamos eksikatoriuje ir pasveriamos. Iš bendro svorio atėmus filtro svorį ir padauginus skirtumą iš 10, gaunamas baltymų kiekis skystyje.
Iš daugiau paprasti metodai gana tikslūs rezultatai gaunami Roberts-Stolnikov metodu (žr. Baltymų nustatymas šlapime). Kadangi savitasis svoris daugiausia priklauso nuo jame ištirpusio baltymo kiekio, jo kiekį skystyje galima apytiksliai apskaičiuoti pagal savitąjį svorį naudojant formulę: x = AD (DD - svoris - 1000) - 2,88 eksudatams Nx = r1ya(DD - svoris - 1000) -2,72 transudatams.
Paprasčiausias ir patogiausias būdas nustatyti ne tik bendrą baltymų kiekį, bet ir nustatyti ryšį tarp baltymų frakcijų yra refraktometrinis metodas.
Baltymų kiekis transudatuose, palyginti su eksudatais, nėra ypač didelis ir paprastai yra mažesnis nei 2,5%. Tik retais atvejais, kaip, pavyzdžiui, sergant ascitu, lašeliais, dėl pneumotorakso, jo kiekis transudatuose siekia 3 ir net 4 proc. Baltymų kiekis eksudatuose yra daug didesnis nei 2,5% ir dažnai siekia 4 ir net 5%. Toks santykis padeda lengvai atskirti uždegiminį išsiliejimą nuo mechaninio. Tačiau dažnai pasitaiko atvejų, kai baltymų kiekis eksudate yra šiek tiek mažesnis už nurodytą ribą. Rivalt reakcija ir Moritz taip pat teikia svarbias paslaugas vertinant tokio pobūdžio efuziją tokiais atvejais.
Rivalta reakcija pagrįsta specialaus baltymo, nusodinto praskiestos acto rūgšties, praradimu. Tokio tipo baltyminių medžiagų galima rasti tik uždegiminio pobūdžio skysčiuose. Transudatuose jo visai nėra. Kaip reagentas naudojami silpni acto rūgšties tirpalai (2 lašai 100 kubinių cm distiliuoto vandens). Technika itin paprasta. Į siaurą 25 kubinių metrų talpos cilindrą. cm supilta 20 kub. žr. reagentą. Tada pipete ant jo paviršiaus užlašinamas vienas lašas tiriamojo skysčio. Esant baltymui, lašelis, lėtai krintantis, palieka drumstumo debesį, o apačioje susidaro nedidelės drumstos nuosėdos. Transudatai greitai ištirpsta reagente be drumstumo.
Moritzo reakcija. 2-3 kubiniai metrai žiūrėkite taškinius, įlašinkite kelis lašus 5% acto rūgšties. Eksudatas suteikia drumstumo ir nuosėdų, transudatas – silpną drumstumą.
Remiantis šių tyrimų rezultatais, tais atvejais, kai nėra didelio specifinio svorio ir baltymų kiekio skirtumo, galima tiksliai atskirti eksudatą nuo transudato.
Pseudomucino nustatymas. Kiaušidžių cistos, kurios yra gelsvas arba purvinas rudas klampus skystis, kurio savitasis tankis yra nuo 1,005 iki 1,050, išsiskiria savotišku a-pseudomucino baltymo kūnu. Pseudomucino nenusodina nei acto, nei azoto rūgštis, o nusodina alkoholis. Tačiau šis skirtumas nėra galutinis, nes išrūgų baltymai – nuolatinė išsiliejimo dalis – taip pat nusodinami alkoholiu.
Nustatyti pseudomuciną iki 25 kubinių metrų. žiūrėkite taškinius, įlašinkite kelis lašus alkoholio tirpalas rozolio rūgštis, pakaitinta iki virimo ir po to įlašinami lašai p/10 sieros rūgšties tirpalo iki silpnai rūgštinės reakcijos. Po šio apdorojimo šiek tiek pageltęs skystis vėl užvirinamas ir filtruojamas. Visiškas skaidrumas filtratas rodo, kad pseudomucino nėra.
Ypač didelę reikšmę nustatant efuzijos pobūdį ir jo kilmę turi mikroskopinis nuosėdų tyrimas - Citoskopija. Morfologinių efuzijos elementų tyrimas leidžia ne tik atskirti eksudatus nuo transudatų, bet tuo pačiu leidžia kartais padaryti išvadas dėl ligos, kurią lydi efuzijos kaupimasis kūno ertmėse, etiologijos.
Dėl mikroskopinis tyrimas naudoti nuosėdas, gautas centrifuguojant. Norint pašalinti fibrino krešulius, kurie labai apsunkina tyrimą, geriau defibrinuoti skystį. Tam tikslui efuzija dedama į storasienį butelį su stiklo karoliukais ir purtoma 30-60 min. Taip defibrinuotas skystis supilamas į kūginius mėgintuvėlius ir centrifuguojamas tol, kol nuo paviršiaus paimtame tiriamajame laše nebeliks forminių elementų. Nusausinus skaidrų skystį, nuosėdos švelniai maišomos stikline lazdele. Gauta emulsija naudojama tepinėlių ir šviežių preparatų ruošimui.
Šviežių preparatų beicavimas dažniausiai atliekamas 1 proc. vandeninis tirpalas metileno mėlynojo, kurio vienas lašas sumaišomas su lašeliu paimtos emulsijos. Atsargiai išmaišę mišinį stikline lazdele, uždenkite dengiamuoju stiklu, filtravimo popieriumi pašalinkite iš stiklo krašto išsikišusį skysčio perteklių ir nedelsdami apžiūrėkite. Per mikroskopą nesunku atskirti dideles, palaidas endotelio ląsteles, kompaktiškas, turinčias būdingą branduolį, baltuosius kraujo kūnelius, nebranduolinius eritrocitus, įvairių navikų ląsteles ir įvairią mikrobų florą.
Švieži preparatai ruošiami tik ex tempore tyrimams; jie greitai genda, juos galima konservuoti tik naudojant specialius konservuojančius junginius.
Šiuo atžvilgiu daug patogesni yra sausieji preparatai, kurie ruošiami paskleidus emulsijos lašelį ant stiklelio paviršiaus.
Po džiovinimo tepinėlis fiksuojamas metilo alkoholiu ir nudažomas Giemsa.
Vertinant gautus rezultatus, reikia atsiminti, kad serozinių membranų reakcija į mechaninius dirgiklius (transudatus) išreiškiama gausiu endotelio deskvamacija; serozinės membranos į piogenines infekcijas reaguoja neutrofilija, o tuberkuliozei būdinga limfocitozė.
Esant išsiliejimui su širdies ir inkstų liga todėl randama labai daug didelių endotelio ląstelių, sugrupuotų į krūvas po 5-10 ląstelių. Šios sankaupos kartais būna tokios gausios, kad visiškai apima visą regėjimo lauką. Juos nuo leukocitų nesunku atskirti pagal didelį, labai vakuolizuotą branduolį, kuris nusidažo purpurine spalva, ir plonu sluoksniu branduolį supančios gležnos rausvos protoplazmos. Be endotelio ląstelių, transudatuose randama daug eritrocitų, limfocitų ir atskirų neutrofilų.
At serozinis pleuritas ir peritonitą, sukeltą piogeninių mikrobų veikimo, eksudatuose susikaupia daug segmentuotų ir durtinių neutrofilų, taip pat eritrocitų. Endotelio ląstelės ir limfocitai yra menkai atstovaujami.
Sergant tuberkulioziniu pleuritu, regėjimo laukas yra padengtas mažų limfocitų mase, tarp jų yra atskirų vidutinio ir didelio dydžio ląstelių. Pas juos kartais didelis skaičius raudonieji kraujo kūneliai yra sumaišyti. Neutrofilai ir eozinofilai yra menkai atstovaujami. Vidalio teigimu, jų skaičius neturėtų viršyti 10% visos leukocitų masės.
Esant piktybiniams navikams, aptinkamos milžiniško dydžio ląstelės su stipriai vakuolizuota, dažnai išsigimusia protoplazma ir dideliu inksto arba ovalo formos branduoliu, kuriame matyti keli (2-3) branduoliai. Tokios ląstelės laikomos specifinėmis piktybiniams navikams.
Autoriai): O. Yu. KAMYSHNIKOV veterinarijos gydytojas patomorfologas, "Gydytojo N. V. Mitrochinos patomorfologijos ir laboratorinės diagnostikos veterinarijos centras"
Žurnalas:
№6-2017
Raktažodžiai: transudatas, eksudatas, efuzija, ascitas, pleuritas
Pagrindiniai žodžiai: transudatas, eksudatas, efuzija, ascitas, pleuritas
anotacija
Efuzijos skysčių tyrimas šiuo metu yra labai svarbus diagnostikoje. patologinės būklės... Šio tyrimo metu gauti duomenys leidžia gydytojui gauti informacijos apie efuzijos susidarymo patogenezę ir teisingai organizuoti terapines priemones... Tačiau diagnozės kelyje visada iškyla tam tikrų sunkumų, kurie gali sukelti diagnostikos spąstus. Šio darbo poreikis atsirado dėl didėjančio klinikinės laboratorinės diagnostikos gydytojų ir gydytojų citologų poreikio sukurti ir taikyti eksuduotų skysčių tyrimo metodą klinikoje. Todėl dėmesys bus skiriamas tiek pagrindiniams laboratorijos gydytojų uždaviniams – diferencijuoti efuziją į transudatą ir eksudatą, tiek svarbiausiam citologų uždaviniui – patikrinti skysčio ląstelinį komponentą ir suformuluoti citologinę išvadą.
Šiuo metu efuzinių skysčių tyrimas turi didelę reikšmę patologinių būklių diagnozei. Šio tyrimo išvados leidžia gydytojui gauti informacijos apie efuzijos susidarymo patogenezę ir teisingai organizuoti medicinines intervencijas. Tačiau diagnozės kelyje visada iškyla tam tikrų sunkumų, dėl kurių gali atsirasti diagnostinių spąstų. Šio darbo poreikis išryškėjo augant klinikinės laboratorinės diagnostikos gydytojų ir citologų eksudato skysčių tyrimo metodo įsisavinimui ir pritaikymui klinikoje. Todėl bus skiriamas dėmesys, taip pat pagrindiniai laborantų uždaviniai – atskirti efuziją į transudatą ir eksudatą, ir svarbiausias citologų uždavinys – patikrinti skysčio ląstelinį komponentą ir suformuluoti citologinę išvadą.
Santrumpos: ES - eksudatas, TS - transudatas, C - citologija, MC - mezotelio ląstelės.
Problemos istorija
Išskirčiau keletą istorinių duomenų, suformavusių šiuolaikinį efuzinių skysčių laboratorinės diagnostikos įvaizdį. Skysčių iš serozinių ertmių tyrimas buvo naudojamas jau XIX a. 1875 metais H.J. Quincke ir 1878 metais E. Bocgeholdas nurodė tokius būdingi ženklai navikinių ląstelių, tokių kaip riebalinė degeneracija ir dideli dydžiai lyginant su mezotelio ląstelėmis (MK). Tokių tyrimų sėkmė buvo palyginti nedidelė, nes fiksuotų ir dažytų preparatų tyrimo metodo dar nebuvo. Paulius Ehrlichas 1882 m. ir M.N. Nikiforovas 1888 m. aprašė specifinius biologinių skysčių fiksavimo ir dažymo metodus, tokius kaip kraujo tepinėlis, efuzija, išskyros ir kt. J.C. Dock (1897) nurodė, kad vėžio ląstelių požymiai yra reikšmingas branduolių dydžio padidėjimas, jų formos ir vietos pasikeitimas. Jis taip pat pastebėjo mezotelio atipiją uždegimo metu. Rumunų patologas ir mikrobiologas A. Babesas sukūrė pagrindą šiuolaikiniam citologiniam metodui naudojant žydrus dažus. Tolesnė metodo plėtra vyko kartu su įstojimu į praktinė medicina laboratorinė diagnostika, kuri mūsų šalyje į savo specialistų gretas įtraukė ir citologus. Klinikinę citologiją SSRS kaip klinikinio pacientų tyrimo metodą 1938 metais pradėjo taikyti N.N. Šileris-Volkova. Veterinarijos klinikinės laboratorinės diagnostikos plėtra vyko su dideliu atsilikimu, pavyzdžiui, pirmasis šios srities gydytojų ir mokslininkų fundamentalus darbas buvo paskelbtas tik 1953–1954 m. Tai buvo trijų tomų leidimas „Veterinarinių tyrimų metodai veterinarinėje medicinoje“, kurį redagavo prof. S.I. Afonsky, D.Sc. MM. Ivanova, prof. Ya.R. Kovalenko, kur pirmą kartą prieinamai pristatyti laboratorinės diagnostikos metodai, neabejotinai ekstrapoliuoti iš žmonių medicinos srities. Nuo seniausių laikų iki šių dienų eksudato skysčių tyrimo metodas buvo nuolat tobulinamas, remiantis anksčiau įgytomis žiniomis, o dabar jis yra neatsiejama bet kokių klinikinių ir diagnostinių laboratorinių tyrimų dalis.
Šiame darbe bandoma išsiaiškinti efuzinių skysčių laboratorinio tyrimo pagrindus ir esmę.
bendrosios charakteristikos
Efuziniai skysčiai – tai kraujo plazmos, limfos, audinių skysčio komponentai, besikaupiantys serozinėse ertmėse. Visuotinai pripažįstama, kad efuzija yra skystis kūno ertmėse, o edeminis skystis kaupiasi audiniuose pagal tą patį principą. Serozinės kūno ertmės yra siaura erdvė tarp dviejų serozinės membranos lakštų. Serozinės membranos yra plėvelės, kilusios iš mezodermos, vaizduojamos dviem lakštais: parietaliniu (parietaliniu) ir visceraliniu (organu). Parietalinio ir visceralinio lapo mikrostruktūrą vaizduoja šeši sluoksniai:
1.mezotelis;
2. ribinė membrana;
3.Paviršinis pluoštinis kolageno sluoksnis;
4. paviršinis neorientuotas tamprių pluoštų tinklas;
5. gilus išilginis tamprus audinys;
6. gilus kolageno skaidulų tinklinis sluoksnis.
Mezotelis yra vieno sluoksnio plokščiasis epitelis, susidedantis iš daugiakampių ląstelių, glaudžiai besiribojančių viena su kita. Nepaisant epitelio formos, mezotelis yra mezoderminės kilmės. Ląstelės yra labai įvairios savo morfologinėmis savybėmis. Galima pastebėti dvibranduoles ir tricikles ląsteles. Mezotelis nuolat išskiria skystį, kuris atlieka slydimo-smūgį sugeriančią funkciją, gali itin intensyviai daugintis, pasižymi savybėmis jungiamasis audinys... MC paviršiuje yra daug mikrovielių, kurie padidina visos serozinės ertmės membranos paviršių maždaug 40 kartų. Serozinių membranų lakštų jungiamojo audinio pluoštinis sluoksnis lemia jų mobilumą. Visceralinio lapo serozinės membranos aprūpinimas krauju yra atliekamas organo, kurį jis dengia, kraujagyslės. O parietaliniam lapui kraujotakos sistemos pagrindas yra plataus tinklelio arterio-arteriolinių anastomozių tinklas. Kapiliarai yra tiesiai po mezoteliu. Limfos drenažas iš serozinių membranų yra gerai išvystytas. Limfinės kraujagyslės susisiekia su serozinėmis erdvėmis per specialias angas – stomatas. Dėl šios priežasties net ir nedidelis drenažo sistemos užsikimšimas gali sukelti skysčio kaupimąsi serozinėje ertmėje. O anatominės kraujo tiekimo savybės skatina greitą kraujavimo pradžią dirginant ir pažeidžiant mezotelį.
Klinikinė laboratorinė efuzinių skysčių diagnostika
Laboratorinio tyrimo metu sprendžiamas klausimas, ar efuzija priklauso transudatui ar eksudatui, įvertinamos bendros savybės (skysčio makroskopinė išvaizda): spalva, skaidrumas, konsistencija.
Skystis, kuris kaupiasi serozinėse ertmėse be uždegiminės reakcijos, vadinamas transudatu. Jei skystis kaupiasi audiniuose, mes susiduriame su edema ( edema). Transudatas gali kauptis perikarde ( hidroperikardas), pilvo ertmė ( ascitas), pleuros ertmė ( hidrotoraksas), tarp sėklidės membranų ( hidrocelė Transudatas dažniausiai yra skaidrus, beveik bespalvis arba gelsvo atspalvio, rečiau šiek tiek drumstas dėl suragėjusio epitelio, limfocitų, riebalų ir kt. Savitasis tankis neviršija 1,015 g/ml.
Transudato susidarymą gali sukelti šie veiksniai.
- Padidinti veninis spaudimas, kuri pasireiškia esant kraujotakos nepakankamumui, inkstų ligai, kepenų cirozei. Transudacija yra kapiliarų kraujagyslių pralaidumo padidėjimas dėl toksinės žalos, hipertermijos ir valgymo sutrikimų.
- Sumažinus baltymų kiekį kraujyje, koloidų osmosinis slėgis sumažėja, kai albumino kiekis kraujo plazmoje sumažėja mažiau nei 25 g/l (įvairios etiologijos nefrozinis sindromas, sunkus kepenų pažeidimas, kacheksija).
- Užblokuotos limfagyslės. Tokiu atveju susidaro chilous edema ir transudatai.
- Sutrikusi elektrolitų apykaita, daugiausia padidėjusi natrio koncentracija (hemodinaminis širdies nepakankamumas, nefrozinis sindromas, kepenų cirozė).
- Padidėjusi aldosterono gamyba.
Viena fraze transudato susidarymą galima apibūdinti taip: transudatas atsiranda, kai hidrostatinis arba koloidinis-osmosinis slėgis pakinta tiek, kad į serozinę ertmę išfiltruotas skystis viršija reabsorbcijos tūrį.
Eksudatų makroskopines charakteristikas galima priskirti šioms rūšims.
1. Serozinis eksudatas gali būti skaidrus arba drumstas, gelsvas arba bespalvis (nustatomas pagal bilirubino buvimą), įvairaus drumstumo laipsnio (1 pav.).
2. Serozinis-pūlingas ir pūlingas eksudatas – drumstas, gelsvai žalias skystis su gausiomis biriomis nuosėdomis. Pūlingas eksudatas atsiranda sergant pleuros empiema, peritonitu ir kt. (2 pav.).
3. Puvimas eksudatas yra drumstas pilkai žalias skystis, turintis aštrų puvimo kvapą. Puvinis eksudatas būdingas plaučių gangrenai ir kitiems procesams, kuriuos lydi audinių irimas.
4. Hemoraginis eksudatas yra skaidrus arba drumstas skystis, rausvai arba rusvai rudos spalvos. Eritrocitų skaičius gali būti įvairus: nuo mažos priemaišos, kai skystis yra šiek tiek rausvos spalvos, iki gausaus, kai jis panašus į visą kraują. Dauguma bendra priežastis hemoraginis efuzija yra neoplazma, tačiau hemoraginis skysčio pobūdis neturi didelės diagnostinės vertės, nes jis taip pat stebimas esant daugeliui neoplastinių ligų (traumos, plaučių infarkto, pleurito, hemoraginės diatezės). Tuo pačiu metu esant piktybiniams procesams, kai navikas yra plačiai išplitęs išilgai serozinės membranos, gali būti serozinis, skaidrus išsiliejimas (3 pav.).
5. Chylous eksudatas yra drumstas pieno skystis, kurio suspensijoje yra mažiausi riebalų lašeliai. Įdėjus eterio skystis tampa skaidrus. Tokį išsiliejimą sukelia limfos patekimas iš sunaikintų stambiųjų limfagyslių į serozinę ertmę, pūlinys, naviko infiltracija į kraujagysles, filariozė, limfoma ir kt. (4 pav.).
6. Hiluso tipo eksudatas yra pieniškas drumstas skystis, atsirandantis dėl gausaus ląstelių irimo su riebaline degeneracija. Kadangi, be riebalų, šiame eksudate yra daug riebalinių ląstelių, pridėjus eterio skystis tampa drumstas arba nežymiai jį nuskaidrina. Chylus tipo eksudatas būdingas eksudaciniams skysčiams, kurių atsiradimas yra susijęs su atrofine kepenų ciroze, piktybiniais navikais ir kt.
7. Cholesterolio eksudatas yra tirštas gelsvas arba rusvas perlamutrinio atspalvio skystis su blizgiais dribsniais, susidedančiais iš cholesterolio kristalų sankaupų. Sunaikintų raudonųjų kraujo kūnelių mišinys gali suteikti efuzijai šokolado spalvos efuziją. Ant mėgintuvėlio sienelių, sudrėkintų efuzija, matomi mažiausių blizgučių pavidalo cholesterolio kristalų atliejai. Tai yra uždaros efuzijos, kuri ilgą laiką (kartais keletą metų) egzistuoja serozinėje ertmėje, pobūdis. Esant tam tikroms sąlygoms - vandens ir kai kurių mineralinių eksudato komponentų reabsorbcijai iš serozinės ertmės, taip pat nesant skysčių tekėjimo į uždarą ertmę - bet kokios etiologijos eksudatas gali įgyti cholesterolio pobūdį.
8. Gleivinis eksudatas – turi nemažą kiekį mucino ir pseudomucino, gali atsirasti sergant mezotelioma, gleives formuojančiais navikais, pseudomiksoma.
9. Fibrininis eksudatas – yra nemažas kiekis fibrino.
Taip pat yra mišrių eksudato formų (serozinis-hemoraginis, gleivinis-hemoraginis, serozinis-fibrininis).
Natūraliame efuzijos skystyje būtina atlikti citozės tyrimą. Norėdami tai padaryti, iš karto po punkcijos skystis supilamas į mėgintuvėlį su EDTA, kad jis nesukrešėtų. Citozė arba ląsteliškumas (šiuo metodu nustatomas tik branduolių turinčių ląstelių skaičius) atliekama standartine technika Gorjajevo kameroje arba hematologiniame analizatoriuje viso kraujo skaičiavimo režimu. Branduolinių ląstelių skaičius yra WBC (baltųjų kraujo kūnelių arba leukocitų) vertė tūkstančiais ląstelių viename mililitre skysčio.
Nustačius citozę, skystis gali būti centrifuguojamas, kad gautų granulę mikroskopiniam tyrimui. Supernatantas arba supernatantas taip pat gali būti tiriamas dėl baltymų, gliukozės ir kt. Tačiau iš skysčio su EDTA galima nustatyti ne visus biocheminius parametrus, todėl kartu rekomenduojama skystį pilti į švarų sausą mėgintuvėlį (pavyzdžiui, centrifuguoti ar biocheminiai tyrimai). Iš to išplaukia, kad tiriant efuziją laboratorijoje, medžiagą reikia gauti bent dviejuose induose: mėgintuvėlyje su EDTA ir švariame sausame mėgintuvėlyje, o skystis turi būti dedamas iš karto po to, kai jis pašalinamas iš kūno ertmę.
Nuosėdų tyrimą laboratorijoje atlieka laborantas arba citologas. Norint nusodinti efuzinį skystį, jis turi būti centrifuguojamas 1500 aps./min. greičiu 15–25 minutes. Priklausomai nuo išsiliejimo tipo, susidaro skirtingos kiekybės ir kokybės nuosėdos (gali būti pilkšvos, gelsvos, kruvinos, vienasluoksnės arba dvisluoksnės, retkarčiais ir trisluoksnės). Esant seroziniam skaidriam išsiliejimui, nuosėdos gali būti itin mažos, jų charakteris smulkiagrūdis, spalva pilkšvai balta. Esant drumstam, pūlingam arba pūlingam išsiliejimui su daugybe ląstelių, nuosėdos yra gausios, stambiagrūdžios. Esant hemoraginei efuzijai su dideliu raudonųjų kraujo kūnelių mišiniu, susidaro dviejų sluoksnių nuosėdos: viršutinis sluoksnis yra balkšvos plėvelės, o apatinis - tankios raudonųjų kraujo kūnelių sankaupos pavidalu. O kai nuosėdos yra padalintos į 3 sluoksnius, viršutinį dažniau vaizduoja sunaikintų ląstelių ir detrito komponentas. Ruošiant tepinėlius ant stiklelių, iš kiekvieno sluoksnio paimama medžiaga iš nuosėdų ir paruošiami bent 2 tepinėliai. Esant vieno sluoksnio nuosėdoms, rekomenduojama pagaminti ne mažiau kaip 4 stiklines. Esant nedideliam nuosėdų kiekiui, paruošiamas 1 tepinėlis, kuriame yra didžiausias medžiagos kiekis.
Kambario temperatūroje ore išdžiovinti tepinėliai fiksuojami ir nudažomi žydros spalvos eozinu standartiniu metodu (Romanovsky-Giemsa, Pappenheim-Kryukov, Leishman, Nocht, Wright ir kt.).
Transudatų ir eksudatų diferencinė diagnostika
Norėdami atskirti transudatą nuo eksudato, galite naudoti kelis metodus, pagrįstus fizinių ir biocheminių skysčio parametrų nustatymu. Skirtumas priklauso nuo baltymų kiekio, ląstelių tipo, skysčio spalvos ir savitojo svorio.
Transudatas, priešingai nei eksudatas, yra neuždegiminės kilmės efuzija, tai skystis, kuris kaupiasi kūno ertmėse dėl sisteminių homeostazę reguliuojančių veiksnių įtakos skysčių susidarymui ir rezorbcijai. Transudato savitasis svoris yra mažesnis nei eksudato ir yra mažesnis nei 1,015 g / ml, palyginti su 1,015 ar daugiau eksudatų. Bendras baltymų kiekis transudatuose yra mažesnis nei 30 g/l, o eksudatuose didesnis nei 30 g/l. Yra kokybės testas, leidžiantis patikrinti transudatą iš eksudato. Tai gerai žinomas Rivalta testas. Laboratorinėje praktikoje jis pateko daugiau nei prieš 60 metų ir užėmė svarbią vietą efuzinių skysčių diagnostikoje iki biocheminių metodų sukūrimo ir jų supaprastinimo bei prieinamumo, o tai leido nuo kokybinio Rivalta tyrimo metodo pereiti prie kiekybinio. baltymų kiekio savybės. Tačiau daugelis mokslininkų dabar siūlo naudoti Rivalta testą, kad gautumėte greitus ir pakankamai tikslius duomenis apie efuziją. Todėl šį pavyzdį būtina šiek tiek apibūdinti.
Rivalta pavyzdys
Į siaurą cilindrą su silpnu acto rūgšties tirpalu (100 ml distiliuoto vandens + 1 lašas ledinės acto rūgšties) įlašinkite tiriamą efuzinį skystį. Jei šis lašas, krisdamas žemyn, už jo nusidriekia drumstumo ruožą, tai skystis yra eksudatas. Transudatai neduoda teigiamo testo arba neduoda silpnai teigiamos trumpalaikės miglos reakcijos.
„Citologinis šunų ir kačių atlasas“ (2001) R. Raskin ir D. Meyer siūlo išskirti šiuos serozinių skysčių tipus: transudatus, modifikuotus transudatus ir eksudatus.
Modifikuotas transudatas yra pereinamoji forma nuo transudato iki eksudato, turi "tarpines" baltymų koncentracijos vertes (nuo 25 g / l iki 30 g / l) ir specifinį svorį (1,015-1,018). Šiuolaikinėje buitinėje literatūroje terminas „modifikuotas transudatas“ nenurodomas. Tačiau formuluotė „daugiau duomenų vienam transudatui“ arba „daugiau duomenų vienam eksudatui“ leidžiama, remiantis diferencinių charakteristikų parametrų rezultatais.
Lentelė 1 rodo parametrus, kuriuos nustačius galima patikrinti transudatą iš eksudato.
Skirtukas. 1. Skirtingos transudatų ir eksudatų charakteristikos
|
Transudatai |
Eksudatai |
|
|
Savitasis tankis, g/ml |
daugiau nei 1018 |
|
|
Baltymai, g/l |
mažiau nei 30 g/l |
daugiau nei 30 g/l |
|
Krešėjimas |
dažniausiai nebūna |
dažniausiai atsitinka |
|
Bakteriologija |
Sterilus arba turi "kelioninę" mikroflorą |
Mikrobiologinio tyrimo metu nustatoma mikroflora (streptokokai, stafilokokai, pneumokokai, Escherichia coli ir kt.) |
|
Nuosėdų citologija |
Mezotelis, limfocitai, kartais eritrocitai ("kelionės") |
Neutrofilai, limfocitai, plazmos ląstelės, makrofagai ir raudonieji kraujo kūneliai, eozinofilai, reaktyvusis mezotelis, naviko ląstelės |
|
Bendras baltymų išsiskyrimo / serumo santykis |
||
|
LDH, požiūris LDH efuzija / LDH serumas |
||
|
Gliukozės koncentracija, mmol/l |
daugiau nei 5,3 mmol/l |
mažiau nei 5,3 mmol/l |
|
Cholesterolio koncentracija, mmol/l |
mažiau nei 1,6 mmol/l |
daugiau nei 1,6 mmol/l |
|
Citozė (branduolinės ląstelės) |
mažiau nei 1 × 10 9 / l |
daugiau nei 1 × 10 9 / l |
Mikroskopinis eksudatų tyrimas
Efuzijos skysčių citogramų aprašymas
Fig. 5 yra reaktyvios efuzijos nuosėdų mikrofotografija. Nuosėdose yra mezotelio ląstelių, dažnai dvibranduolių, su gausia, intensyviai bazofiline citoplazma ir apvaliais hiperchrominiais branduoliais. Citoplazmos kraštas yra nelygus, gaubtuotas, dažnai su staigiu perėjimu nuo bazofilinės iki ryškios oksifilinės spalvos išilgai ląstelės krašto. Branduoliuose yra tankus kompaktiškas heterochromatinas, branduolių nesimato. Mikroaplinkoje yra makrofagų ir segmentuotų neutrofilų. Vaisto vartojimo fonas nenustatytas.
Fig. 6 yra reaktyvių efuzinių nuosėdų mikrofotografija. Nuosėdose stebimi makrofagai (paveiksle pavaizduotos 2 ląstelės arti). Ląstelės netaisyklingos formos, turi gausią nevienalytę „ažūrinę“ citoplazmą su daugybe vakuolių, fagosomų, inkliuzų. Ląstelių branduoliai yra netaisyklingos formos, juose yra netinklinio ir kilpinio chromatino. Matosi branduolių likučiai branduoliuose. Mikroaplinkoje yra 2 limfocitai. Preparato fone yra raudonųjų kraujo kūnelių.
Fig. 7 yra reaktyvios efuzijos nuosėdų mikrofotografija. Nuosėdose pastebimos mezotelio ląstelės su ryškiais reaktyvių pokyčių požymiais: tiek citoplazmos, tiek branduolių hiperchromija, citoplazmos pabrinkimas, mitozinės figūros. Mikroaplinkoje esantys makrofagai turi eritrofagocitozės požymių, kurie dažnai stebimi esant ūminiams kraujavimams serozinėse ertmėse.
Fig. 8 yra reaktyviosios-uždegiminės efuzijos nuosėdų mikrofotografija. Nuosėdose yra makrofagų, limfocitų ir segmentuotų neutrofilų su degeneracinių pokyčių požymiais. Degeneraciniai pakitimai Neutrofilai yra laikomi uždegimo trukmės ir uždegiminio atsako aktyvumo rodikliu. Kuo „senesnis“ uždegimas, tuo ryškesni degeneraciniai požymiai. Kaip aktyvesnis procesas, tuo dažniau būdingos ląstelės randamos pakitusių neutrofilų fone.
Didelę citogramų interpretavimo problemą sukuria mezotelio ląstelės, kurios, veikiamos nepalankių veiksnių ir dirginimo, gali įgyti atipijos požymių, kuriuos galima supainioti su piktybinių navikų požymiais.
Ląstelių piktybiškumo (atipijos) kriterijai efuzijoje lyginami lentelėje. 2.
Skirtukas. 2. Skiriamieji bruožai reaktyviosios mezotelio ląstelės ir piktybinių navikų ląstelės.
Piktybiniai serozinių membranų navikai gali būti pirminiai (mezotelioma) ir antriniai, t.y. metastazavusios.
Dažnos piktybinių navikų metastazės išilgai serozinių membranų:
1.pleuros ir pilvo ertmės - krūties vėžys, plaučių vėžys, virškinamojo trakto, kiaušidžių, sėklidžių vėžys, limfoma;
2. perikardo ertmei – dažniausiai plaučių ir krūties vėžys.
Gali būti, kad serozinėse kūno ertmėse aptinkamos ir plokščialąstelinės vėžio metastazės, melanomos ir kt.
Fig. 9 parodyta efuzijos nuosėdų mikrofotografija, esant pilvo ertmės pažeidimui su liaukos vėžio metastazėmis. Mikrofotografijos centre matomas daugiasluoksnis netipinių epitelio ląstelių kompleksas – liaukinio krūties vėžio metastazės. Ribos tarp ląstelių neatskiriamos, hiperchrominė citoplazma slepia branduolius. Preparato fone yra eritrocitų ir uždegiminių ląstelių.
Fig. 10 parodyta efuzinio skysčio nuosėdų mikrofotografija, kai pilvo ertmę pažeidžia liaukos vėžio metastazės. Mikrografo centre vaizduojama sferinė netipinių epitelio ląstelių struktūra. Ląstelių kompleksas turi liaukinę struktūrą. Kaimyninių ląstelių ribos yra neatskiriamos. Ląstelių branduoliams būdingas vidutinis polimorfizmas. Ląstelių citoplazma yra vidutinio sunkumo, intensyviai bazofilinė.
Fig. 11 ir 12 parodytos efuzinio skysčio nuosėdų mikrofotografijos, kai pleuros ertmę pažeidžia liaukos vėžio metastazės. Paveiksluose pavaizduoti netipinių polimorfinių epitelio genezės ląstelių kompleksai. Ląstelėse yra dideli polimorfiniai branduoliai su smulkiagrūdžiu išsklaidytu chromatinu ir 1 didele nukleole. Ląstelių citoplazma yra vidutinio sunkumo, bazofilinė, turi smulkių oksifilinių granuliacijų – sekrecijos požymių.
Fig. 13 parodyta efuzinio skysčio nuosėdų mikrofotografija, kai pilvo ertmę pažeidžia liaukos vėžio metastazės. Rodomas nedidelis mikroskopo padidinimas – ląstelių kompleksas labai didelis. Ir pav. 14 parodyta išsamesnė vėžio ląstelių struktūra. Ląstelės sudaro liaukinį kompleksą – komplekso centre esantį neląstelinio komponento nuskaidrėjimą supa netipinių naviko epitelio ląstelių eilės.
Išvadą apie rastų naviko ląstelių priklausymą pirminiam židiniui galima sudaryti remiantis anamnezės duomenimis ir specifine ląstelių bei jų kompleksų sandara. Esant nenustatytam pirminiam naviko židiniui, nesant istorijos duomenų, maža ląstelių diferenciacija, sunki atipija, sunku nustatyti naviko ląstelių audinių tapatybę.
Ryžiai. 15 parodyta milžiniška netipinė vėžio ląstelė eksudate. Pagrindinis dėmesys tokiu atveju nenustatytas. Ląstelėje yra didelis, „keistos“ formos branduolys, vidutinio stiprumo bazofilinė citoplazma su inkliuzais ir empiriolezės reiškinys.
Kai limfoma išplinta išilgai serozinių membranų, į efuziją pateks daug netipinių limfoidinių ląstelių (16 pav.). Šios ląstelės dažnai turi blastinių ląstelių tipą, skiriasi polimorfizmu ir atipija: jose yra polimorfinių branduolių, nelygios kariolemos su atspaudais, netolygus chromatinas (17 pav.).
Mezotelioma sukelia didelių sunkumų diagnozuojant piktybinių navikų serozinių membranų pažeidimus.
Mezotelioma – pirminė piktybinis navikas serozinės membranos. Remiantis statistika, jis dažniau pasireiškia pleuros ertmėje nei pilvaplėvės ertmėje. Mezoteliomą labai sunku atlikti histologinei, o juo labiau citologinei diagnostikai, nes ją reikia atskirti nuo reaktyvaus mezotelio ir beveik visų galimi tipai vėžys, randamas serozinėse ertmėse.
Fig. 18-19 paveikslai yra mezoteliomų ląstelių efuzijoje mikrofotografijos. Ląstelėms būdinga aštri atipija, polimorfizmas, gigantiškas... bet morfologinės savybės mezotelio ląstelės yra tokios įvairios, kad be didelės praktinės patirties citologui mezoteliomą „atpažinti“ praktiškai neįmanoma.
Išvada
Remiantis tuo, kas išdėstyta, galime daryti išvadą, kad citologinis eksudatų iš serozinių ertmių tyrimas yra vienintelis būdas diagnozuoti efuzijos pobūdį. O įprastą eksudacinių skysčių tyrimą, nustatant jų priklausomybę eksudatui, reikėtų papildyti citologiniu nuosėdų tyrimu.
Literatūra
1. Abramovas M.G. Klinikinė citologija. Maskva: Medicina, 1974 m.
2. Balakova N.I., Zhukhina G.E., Bolshakova GD, Mochalova I.N. Skysčių tyrimai
iš serozinių ertmių. L., 1989 m.
3. Volčenka N.N., Borisova O.V. Piktybinių navikų diagnostika seroziniais eksudatais. M .: GEOTAR-Media, 2017 m.
4. Dolgovas V.V., Šabalova I.P. ir kiti eksudaciniai skysčiai. Laboratoriniai tyrimai... Tverė: Triada, 2006 m.
5. Klimanova Z.F. Citologinis eksudatų tyrimas su metastazavusiais pilvaplėvės ir pleuros pažeidimais su vėžiu: Gairės... M., 1968 m.
6. Kost E.A. Klinikinių laboratorinių tyrimų metodų vadovas. Maskva: Medicina, 1975 m.
7. Žmogaus navikų citologinės diagnostikos gairės. Red. A.S. Petrova, M.P. Ptokhova. Maskva: Medicina, 1976 m.
8. Strelnikova T.V. Eksudaciniai skysčiai (analitinės literatūros apžvalga). RUDN biuletenis, serija: Agronomija ir gyvulininkystė. 2008 m.; 2.
9. Raskin R.E., Meyer D.J. Šunų ir kačių citologijos atlasas. W.B. Sandersas, 2001 m.
