Paroksismal gece hemoglobinüri. Yetişkinlerde aplastik anemi. Klinik kılavuzlar Semptomlar ve klinik seyir

Paroksismal gece hemoglobinüri, hemolitik anemi grubunun ciddi bir edinilmiş patolojisidir. Bu patolojinin diğer isimleri olan Markiafava-Mikeli hastalığı veya Strübing-Marchiafawa hastalığı, kırmızı kan hücrelerinin tahrip olmasına neden olur. Hastalık çok nadirdir, nüfusun 500 bini için 1 kişi bu patolojiyle tanışabilir.

Patolojinin olası komplikasyonlarının ve sonuçlarının gelişmesinden endişe etmemek için, paroksismal gece hemoglobinüri tanısının ne olduğunu, patolojinin semptomlarını ve tedavisini bilmelisiniz.

Hemoglobinüri nedenleri

Yukarıda belirtildiği gibi, paroksismal gece hemoglobinüri çok nadir görülen bir hastalıktır, ayrıca patoloji en sık 20 ila 40 yaş arası kişilerde bulunur. Hastalığın yaşlılıkta veya çocuklarda gelişmesi vakaları da tıbbi uygulama tarafından bilinir, ancak ihmal edilebilir bir yüzdeyi oluştururlar.

Paroksismal noktürnal hemoglobinürinin (PNH) nedeninin, tanımlanmamış etki faktörlerine maruz kalmaya yanıt olarak kemik iliğindeki X kromozomunun bir bileşeni olan kök hücre geninin (PIG-A) mutasyonel reaksiyonu olduğuna inanılmaktadır. Bazı kaynaklar, genin mutasyona uğramasına neden olan nedenlerin bilinmediğini iddia etmektedir.

Diğerleri, hemoglobinürinin bulaşıcı hastalıklar, zatürree, yaralanmalar, zehirlenme, hipotermi ve yanıklar ve hatta ciddi fiziksel aşırı eforun arka planında gelişebileceğini iddia ediyor.

Ancak patolojinin etiyolojisi hakkında oybirliğiyle bir görüş henüz oluşturulmamıştır.

Eşlik eden patolojilerin bir semptomu olarak paroksismal gece hemoglobinüri tanısının gelişimi arasında açık bir bağlantı ortaya çıktı. Tıbbi araştırmalar, PNH'nin, vakaların %30'unda aplastik anemi ve vasküler sistemin diğer patolojilerinin bir sonucu olarak geliştiğini göstermiştir.

İyi bilinen bir argüman, mutasyona uğramış tek bir hücrenin bile ciddi bir patolojik durumun gelişmesine yol açabileceğidir. Kemik iliğinde gerçekleştirilen kırmızı kan hücrelerinin oluşumu sırasında kök hücreler bölünür, olgunlaşır ve kan dolaşımına salınır. Modifiye edilmiş bir gen başka bir çifte ve bunlar başka bir çifte bölünür, vb. Yani bir hücre kendini çoğaltarak kanı yavaş yavaş hasarlı kırmızı kan hücreleriyle doldurur.

Eritrosit hasarının özü, hücreleri bağışıklık sisteminden korumaya hizmet eden eksik veya eksik bir protein zarında yatmaktadır. Hücredeki en ufak bir kusurda, vücudun bağışıklığı onu yok eder, bunun sonucunda böyle bir tanı hemoliz - saf hemoglobinin kana salınması ile karakterize edilen kırmızı kan hücrelerinin intravasküler yıkımı olarak gelişir.

Aynı süreç kronik hemolitik anemide de meydana gelir, bu nedenle paroksismal noktürnal hemoglobinüri onun analoğudur veya uygulayıcıların sıklıkla söylediği gibi, akut edinilmiş şeklidir. Bu patolojiler arasındaki ana ve tek fark, gelişimlerinin ilkesidir.

Hemolitik anemi konjenital bir patolojidir, hemoglobinüri edinilir. Eritrositlerin kusuru, vasküler sıvının diğer katı elemanlarına da yayılabilir: lökositler ve trombositler.

Gece hemoglobinüri belirtileri

Markjafava-Micheli hastalığının semptomları, patolojinin nedensel sınıflandırmasına bağlıdır. Bulunduğu gibi, hastalık bağımsız olabilir, buna göre idiyopatik PNH formu ayırt edilir. Aplastik aneminin arka planına karşı patolojinin gelişmesi nedeniyle, paroksismal gece hemoglobinüri bir sendrom şeklini alır. En nadir olanı, hematopoetik hipoplazinin arka planında ortaya çıkan idiyomatik PNH formudur.

Çok değişken olduğundan, hastalığın formlarından herhangi biri için belirgin semptomları ayırt etmek imkansızdır. Hastalığın seyri dışarıdan asemptomatik olabilir, bu durumda patoloji ancak laboratuvar teşhisi ile tespit edilebilir. Diğer hastalarda şiddetli anemik sendrom vardır.

Genel olarak, gece hemogloburinin tüm olası belirtilerinin küçük bir genellemesini belirlemek, böylece ana semptomatik tabloyu vurgulamak mümkündür.

• Hemoliz süreci (kırmızı kan hücrelerinin ve hemoglobinin yok edilmesi) esas olarak geceleri (gece hemoglobinüri) meydana gelir, bu nedenle sabahları idrar yaparken idrar rengi koyu kahverengi bir renk alacaktır. Gündüz ve akşam böyle bir işaret görülmez.
• Eritrositlerin kanındaki kantitatif azalma nedeniyle, anemik bir sendrom gözlenir. Tezahürleri doğrudan organların ve dokuların oksijen açlığı ile ilgilidir. Bu nedenle hasta baş ağrısı, baş dönmesi, gözlerin önünde yanıp sönen siyah noktalar, genel halsizlik, yorgunluk, anjina pektoris atakları ve taşikardi yaşayabilir.

• Eşlik eden bulaşıcı hastalıklar, kanama, fiziksel efor vb. Olduğunda, vasküler sıvıdaki hemoglobin miktarında keskin bir sıçrama ile kendini gösteren hemolitik bir kriz gelişebilir, ayrıca şiddetli halsizlik, ateş, kemik ağrısı, ciltte sarılık ve orta derecede splenomegali görünebilir ( dalak büyümesi).
• Hemoglobinüriye, hem krizlerin arka planında hem de şiddetli patolojide erkeklerde erektil disfonksiyona neden olan plazmadaki nitrik oksit konsantrasyonunun ihlali eşlik eder.
• Trombositlerde (kan pıhtılaşmasından sorumlu kan hücreleri) ortaya çıkan kusur nedeniyle, damarlarda en sık görülen tromboz oluşabilir. Aynı süreç, katı kan hücrelerinin yok edilmesi sırasında salınan bir maddeyi tetikleyebilir. Tromboz eğiliminin bağlı olduğu vasküler sıvının pıhtılaşmasının artmasına neden olur. Bu tür ihlaller ölüme yol açabilir.

Paroksismal noktürnal hemoglobinürinin en belirgin semptomları laboratuvar tanısı ile elde edilebilir. Çalışmalar kandaki hemoglobin seviyesini, hücrelerin durumunu, trombopeni ve lökopeni varlığını, demir ve diğer eser elementlerin seviyesini vb. gösterecektir. Bu hastalıktan beri hemoglobinüriyi tam ve doğru bir şekilde teşhis etmek uzun zaman alır. diğer patolojiler kisvesi altında dikkatlice gizlenebilir.

Bu nedenle Markyafava-Mikeli hastalığını zamanında tespit etmenin en akılcı yolu düzenli bir önleyici muayene olacaktır.

Paroksismal gece hemoglobinüri tedavisi

Paroksismal gece hemoglobinürisinin tespit süresi, gerekli terapötik yöntemleri belirler ve çoğu durumda olumsuz olan patolojinin sonucu için prognozu belirler. Bu, belirli bir gelişme nedeninin olmaması ve onu ortadan kaldırmanın imkansızlığından kaynaklanmaktadır. Bu nedenle, PNH için spesifik bir tedavi yoktur.

Tüm terapötik önlemler, semptomatik belirtileri ortadan kaldırmayı amaçlamaktadır. Mutasyona uğramış hücrelerden tamamen kurtulmanın tek etkili yolu kırmızı kemik iliği naklidir (kan hücrelerinin oluştuğu yer).

Akut bir hemoliz şekli olan hemolitik krizin gelişmesiyle, hastaya birden fazla kırmızı kan hücresi transfüzyonu reçete edilir. Bu tür 5 veya daha fazla transfüzyon olabilir. Prosedürlerin sayısı ve sıklığı, tekrarlanan analizlerle belirlenir ve kusurlu eritrositlerin bir sonraki üremesinde gerçekleştirilir.

Nadir durumlarda dalak çıkarılır. Splenektomiye yol açan işaretler organda keskin bir artış ve kalp krizi gelişiminin bir tezahürüdür.

Terapötik önlemlerin geri kalanı, patolojinin seyrini hafifleten farklı grup ilaçları almaktan oluşur. Ana ilaçlar, steroid hormon gruplarının, sitostatiklerin yanı sıra demir ve folik asit preparatlarıdır.

nerobol

Doktorların paroksismal gece hemoglobinürisinin semptomatik tezahürüyle mücadele etmeleri için en yaygın reçete ilaç Nerobol'dur. Bu, anabolik steroid grubunun hormonal bir ilacıdır. İlacın eylemi yönlendirilir:

• kusurlu eritrosit zarında yeterli olmayan hastanın vücudundaki protein sentezini uyarmak;
• azot metabolizması üzerinde faydalı bir etkiye sahiptir;
• normal protein sentezi için gerekli olan potasyum, kükürt ve fosforun geri çekilmesini geciktirir;
• kemiklerde kalsiyum fiksasyonunun artmasına neden olur.

Bu ilacı aldıktan sonra, hasta iştahta bir artış, kas kütlesinde yoğun bir artış, kemik kireçlenmesinin hızlanması ve ayrıca vücudun çok daha iyi bir genel durumu hisseder.

İlacın kullanımı 10 g ile başlar, kademeli olarak günde 1-2 doz 30 g'a çıkar. Çocuklar için ilacın dozu, her gün şiddetli bir formda, her gün 1 tablettir. Nerobol ile tedavi süresi 2 ila 3 aydır.

Birçok hastada ilacın kesilmesinden sonra hemolizde artış olur.

Nerobol kullanımı kesinlikle ilgili doktorun reçetesine göre yapılabilir.

heparin

Heparin doğrudan bir antikoagülandır - kanın pıhtılaşmasını engellemenin bir yolu. Paroksismal gece hemoglobinüri ile, hastalığın seyrini zorlaştıran trombozu önlemek için reçete edilir.

Dozaj ve uygulama sıklığı, patolojinin seyrinin karmaşıklığına ve damarlarda kan pıhtılaşması riskine bağlı olarak tamamen kişiselleştirilir.

Heparin kursunun sonunda doktor, normal bir pıhtılaşma seviyesini korumak için dolaylı antikoagülanlar reçete eder.

Eculizumab, hümanize monokanal antikorlardan oluşan bir ilaçtır. İlacın etki prensibi intravasküler hemolizi durdurmak ve doğrudan kan iltifatına direnmektir. Sonuç olarak, kusurlu kırmızı kan hücrelerinin vücudun bağışıklık sistemi tarafından doğal olarak yok edilmesi durur.

Bu ilaç dünyanın en pahalı ilacıdır. Etki mekanizması ve uygulamanın olası sonuçlarının gelişimi yeterince araştırılmamıştır.

Demir ve folik asit preparatları

Kırmızı kemik iliğinin çalışmasındaki ihlallerle, normal hematopoez için gerekli olan demir ve folik asit eksikliği vardır. PNH'nin terapötik tedavisi, patolojik kayıpları telafi etmek için bu mikro elementlerin müstahzarlarının alınmasını içerir.

İlacın dozu ve alma yöntemi, ilgili doktor tarafından belirlenir. Çoğu zaman, Sorbifer, Tardiferron, Ferretab, Fenyuls vb. Reçete edilir.Bu ilaçlar, kırmızı kemik iliğinde normal katı kan parçacıklarının oluşturulması için gerekli olan bir eser element kompleksi içerir.

Karaciğer Desteği

Paroksismal gece hemoglobinürisine karşı mücadelede güçlendirilmiş tedavi, karaciğeri güçlü bir şekilde etkiler. Karaciğer için destekleyici tedavinin yokluğunda, basitçe reddedebilir. Bu nedenle hepatoprotektif ilaçlar almak önemlidir. Bunlar böyle ilaçlar olabilir:

• Maksar;
• heptral;
• Karsil.

Ek olarak, karaciğer hücrelerinin yenilenmesine yardımcı olan bir dizi ürün vardır. Bunlara balkabağı, kuru kayısı, yosun, zeytinyağı, süt ürünleri ve daha fazlası dahildir. Ana şey, karaciğer zayıflığı anlarında onu abur cuburla ağırlaştırmamaktır.

Hastalığı tanımladıktan sonra doktorlar yanlış tahminlerde bulunur. İstatistikler, tanı konulduktan sonra hastanın yaklaşık 5 yıl idame tedavisine devam edebileceğini söylüyor.

Hastalığın bilinmeyen kökeni ve gelişiminin nedenlerindeki yanlışlıklar nedeniyle, paroksismal gece hemoglobinüri önlenemez.

sonuçlar

Markjafava-Micheli hastalığı veya paroksismal nokturnal hemoglobinüri, yoğun bakımda bile ölümcül olan ciddi bir hastalıktır. Tek olası iyileşme, içinde kan hücrelerinin oluştuğu kırmızı kemik iliği naklidir. Ek olarak, patoloji, hastanın durumu için daha az tehlikeli olmayan eşlik eden hastalıkların gelişimini gerektirir.

Bu nedenle doktorlar, herhangi bir patolojiyi önlemenin en iyi yolunun düzenli olarak tam bir tıbbi muayeneden geçmek olduğunu oybirliğiyle beyan ederler. Belki hastalık henüz oluşum aşamasındaysa kalıcı olarak ortadan kaldırılabilir. Bu kadar ciddi hastalıklarda asıl mesele zamandır. Kendinize ve vücudunuza iyi bakmalısınız.

RU 2574968 patentinin sahipleri:

Buluş tıpla, yani laboratuvar teşhisleriyle ilgilidir ve paroksismal gece hemoglobinürisini teşhis etmek için kullanılabilir. Bunu yapmak için, test kan örneği monoklonal antikorlar CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC) ile boyanır. Eritrositler ve retikülositler arasında bir PNH klonunun varlığı, transferrin için bir reseptör olan CD235a kapısı - bir paneritrosit belirteci ve CD71 - tarafından izole edilen retikülositlerin zarı üzerinde koruyucu protein CD59'un yokluğu ile değerlendirilir. Retikülositler arasındaki PNH klonunu değerlendirmek için, CD71+ kapısına bağlı olarak CD71+ kapısında en az 20.000 olay toplanır, ek bir CD71str kapısı kullanılarak retikülositlerin izole edildiği bir FSC(log) vs SSC(log) grafiği oluşturulur, böylece sıralı geçitleme ile retikülosit popülasyonunun enkaz ve çiftlerden temizlenmesi. CD59 retikülositleri için %100 pozitif olduğunda, bir PNH klonunun yokluğuna karar verilir ve paroksismal nokturnal hemoglobinürinin yokluğu teşhis edilir. Klinik semptomları olan bir hastada negatif CD59-retikülositler tespit edilirse ve elde edilen göstergelerin değeri %1'den fazlaysa, bir PNH klonunun varlığı hakkında bir tanısal sonuç verilir ve paroksismal tanısını doğrulamak için ek bir çalışma önerilir. uluslararası standart protokole göre gece hemoglobinüri. CD59-negatif retikülositler tespit edilirse ve elde edilen göstergelerin değeri %0,1-1 ise, minör bir PNH klonunun varlığına karar verilir ve değerini ve değerini artırmak için PNH klonunun 6 ay sonra yeniden belirlenmesi önerilir. paroksismal gece hemoglobinüri geliştirir ve bu boyut doğrulanırsa klon klinik belirtiler olmadan paroksismal gece hemoglobinürisinin subklinik formunu teşhis eder. CD71+ hücrelerinin multiparametrik geçitlemesinin kullanılması, enkaz, çiftler ve spesifik olarak bağlanmamış monoklonal antikorların analizden çıkarılmasını mümkün kılar. 1 hasta.

Buluş tıpla, yani klinik ve laboratuvar tanı yöntemleriyle ilgilidir ve paroksismal gece hemoglobinürisinin (PNH) teşhislerinin taranması için kullanılabilir.

Paroksismal noktürnal hemoglobinüri nadir görülen bir hastalıktır.

PNH, PIG-A genindeki bir mutasyondan kaynaklanır. Sonuç olarak, kan hücrelerini hücre zarına sabitleyen çok sayıda molekülü (granülositler üzerinde CD24, monositler üzerinde CD14, eritrositler ve bunların öncüleri üzerinde CD59 dahil) sabitleyen glikosilfosfatidilinnositol (GPI) çapasının sentezi bozulur. kompleman sisteminin etkileri.

Eritrosit zarı en çok kompleks zarlara saldırmaya maruz kalır ve CD59 koruyucu proteinin yokluğunda eritrositler hemolize uğrar.

PNH, intravasküler hemoliz, anemi, hemoglobinüri, trombotik komplikasyonlar, disfaji, letarji, erektil disfonksiyon, kronik böbrek yetmezliği ve pulmoner hipertansiyon ile karakterizedir.

Ek olarak, aplastik anemi, otoimmün hemolitik anemi ve miyelodisplastik sendromda bir PNH klonu oluşabilir. PNH'nin ortanca başlangıç ​​yaşı 30-35'tir. Paroksismal gece hemoglobinüri insidansı 1 ila 10:1 milyon kişidir. Paroksismal noktürnal hemoglobinüride tedavisiz ölüm, hastalığın başlangıcından itibaren 5 yıl içinde yaklaşık %35'tir.

Şu anda, bu hastalığı tedavi etmek için modern yöntemler geliştirmeyi mümkün kılan hücre teknolojileri ortaya çıkmıştır.

Bu bakımdan doğru teşhis yöntemlerinin oluşturulmasına ihtiyaç vardı, çünkü. tedavinin etkinliği ve yeterliliği, bilgi içeriğine, tanı önlemlerinin nesnelliğine ve kanıtına ve bir PNH klonunun varlığının değerlendirilmesine ve tanının açıklığa kavuşturulmasına izin veren elde edilen bilgilerin eksiksizliğine bağlıdır.

Paroksismal noktürnal hemoglobinüri teşhisi için Hem yöntemini kullanarak PNH'yi saptamak için bilinen bir yöntem (Abdulkadirov KM, Clinical Hematology, Handbook - St. Petersburg: Peter, 2006, s. 82), tamamlayıcı sistemin inaktivasyonunun uyarılmasına dayanan bir paroksismal gece hemoglobinürisi olan hastaların kan örneğinin asitlenmesi ve eritrositlerine karşı aşırı duyarlılığın sonucu. Hema testinin sonucu görsel olarak değerlendirilir.

Yöntem, donörün kan serumuna, ABO antijen sistemine göre hastanın serumuyla karşılaştırılabilir, 0.2 normal HCl çözeltisinin eklenmesi gerçeğinden oluşur, serumun pH'ı 6.4'e değişir ve böylece kompleman aktivasyonuna neden olur. (serum ve asit oranı 9: birdir). Daha sonra, on hacim asitlendirilmiş serum, bir hacim %50'lik yıkanmış eritrosit süspansiyonu ile karıştırılır. Ardından ortaya çıkan süspansiyonun görsel bir değerlendirmesini yapın. Paroksismal gece hemoglobinüri ile eritrositlerin hemolizi meydana gelir ve süspansiyon kırmızımsı veya kırmızı bir renk kazanırken, normal eritrositler aynı koşullar altında hemoliz yapmaz.

Bununla birlikte, teknik, PNH'nin küçük klonlarını belirlemek için yeterli duyarlılığa sahip değildir: saptanabilir minimum klon boyutu %4.2-5'tir. Hem'in yöntemi, klonun boyutu hakkında bilgi sağlamaz.

Tüm bunlar, tarama sırasında bir hastalık tespit edilirse, sonraki izleme ve yeterli tedavi için başlangıç ​​noktası olan PNH klonunun yüzde olarak değerlendirilmesini imkansız hale getirir.

Ek olarak, teknik çok zahmetlidir ve modern teşhis gereksinimlerini karşılamamaktadır.

Bir sakaroz testi kullanarak paroksismal gece hemoglobinürisini teşhis etmek için bir yöntem de bilinmektedir (“Problems of Hematology and Blood Transfusion”, 1972, Ağustos, 17(8)55-7, “Paroksismal nokturnal hemoglobinüri teşhisi için bir sakaroz testinin değerlendirilmesi” ”, Idelson LI, Benisovich V.I., Savina L.S., Radzhivilovskaya E.G.).

Yöntem, paroksismal gece hemoglobinürisi olan bir hastanın eritrositlerinin, bu durumda sükroz ilavesi nedeniyle kompleman sisteminin proteinlerine artan duyarlılığına dayanmaktadır.

Hastanın eritrositlerine, hastanın kan grubuna benzer taze donör serumu eklenir. Eritrositler fizyolojik tuzlu su (0.145 M NaCl) içinde üç kez yıkanır, 100 ul sitratlı veya defibrine kan 900 ml sakaroz çözeltisine eklenir ve 30 dakika 37°C veya 23°C'de inkübe edilir. Bundan sonra tüpler santrifüjlenir, ardından süpernatant görünür hemoliz açısından değerlendirilir. Hemoliz meydana gelirse, yüzde olarak ifade edilen derecesi, siyanmethemoglobin yöntemiyle belirlenen süpernatantın hemoglobin konsantrasyonundan hesaplanır.

Tam kan numuneleri %3.2 sodyum sitrat veya 0.1 M oksalat solüsyonu ile 9:1 karıştırılır, tam kan 2 ml kana 4 mm cam boncuk eklenerek defibrine edilir. Tam kan ve trombosit içermeyen plazmanın alikotları çeşitli oranlarda karıştırılır. 0.27 mol sakaroz özel reaktifinin 91 ml 50 mM NaH2P04 ve 9 ml NaHP04 içinde çözülmesiyle izotonik bir sakaroz çözeltisi hazırlanır. pH, gerekirse küçük NaOH konsantrasyonları ile 6.1'e ayarlanır. Nihai hacme 1000 ml su dökülür.

Tüpler santrifüjlenir ve süpernatant görünür hemoliz açısından değerlendirilir. Hemoliz yüzdesi, siyanmethemoglobin yöntemiyle belirlenen süpernatant hemoglobin konsantrasyonundan hesaplanan hesaplanmış bir değerdir. Ayrıca numune değerlendirmesi için diğer iki alikot hazırlayın - %100 hemoliz ve "sıfır" hemoliz (eritrosit yok).

Bu yöntemin dezavantajı, hastalığın teşhisi için duyarlılık ve özgüllüğün olmamasıdır: saptanabilir minimum klon boyutu - %4,2-5, klon boyutu hakkında doğru bir fikir vermezken, hastanın kanında mevcut olabilir. daha düşük değerler -% 4.2'den az. Yöntemin dezavantajları, karmaşıklığına da atfedilebilir.

Ayrıca, bir PNH klonunu teşhis etmek için bir yöntem de bilinmektedir (Rosse WF. Paroksismal nokturnal hemoglobinüride kırmızı hücrelerdeki varyasyonlar. Br J Haematol 1973; 24:327-42. 12), hemoliz derecesinin ölçümü ve analizi dahil. farklı tamamlayıcı konsantrasyonları. Bu analiz, PNH hücrelerinin normal hücrelerden daha düşük konsantrasyonlarda parçalandığını gösterir.

Bu test, paroksismal nokturnal hemoglobinüride (tip III) normal eritrositler (tip I) ile anormal eritrositler arasındaki tamamlayıcı proteinlere (tip II) orta düzeyde duyarlılığa sahip hücre popülasyonlarını tanımlar. Ancak, yöntem zahmetli ve standardize edilmesi zordur. Testi kullanırken, küçük anormal hücre popülasyonları gözden kaçabilir.

Retikülositler ve granülositler arasında akış sitometrisi ile PNH klonunu belirlemek için CD71 ile retikülositleri izole etmek için bilinen bir yöntem vardır (Tsagarakis NJ, Paterakis G. Olgunlaşmamış retikülositler ve granülositlere dayalı rutin paroksismal nokturnal hemoglobinüri testi için basit akış sitometrik testi. - ClinicalCytometri, 07.2012, 07. - C. 259-263 (http://onlinelibrary.wiley.coni/doi/10.1002/cyto.b.21030/full).

Fosfat tamponlu salin 1:100 içinde seyreltilen hastanın tam kanı incelenir. 50 µl seyreltilmiş kan iki tüpe eklenir, ardından boyama gerçekleştirilir: birinci tüpte, CD71'e 10 µl monoklonal antikorlar (MCA) ve 20 µl MCA'dan CD59'a; İkinci tüpe 10 µl IgGl izotip kontrolü eklenir. Sonuçlar tek parametreli histogramlarda değerlendirilir.

Ek olarak, yöntem ayrıca MCA kombinasyonlarını kullanarak granülositleri de analiz eder: 1) CD59-FITC /CD24-PE /CD45-PE-Cy5/; 2) CD66b-FITC/CD16-PE/CD45-PE-Cy5.

Bu yönteme göre granülositler arasında PNH klonu belirleme duyarlılığı %1, retikülositler arasında PNH klonu belirleme duyarlılığı %5'tir. Bununla birlikte, önerilen yöntem, paroksismal noktürnal hemoglobinürisi (n=8) ve PNH klonu %1'den az (granülositler üzerinde değerlendirildiğinde ve buna bağlı olarak retikülositler üzerinde belirlendiğinde %5'ten az) olan az sayıda hasta üzerinde test edilmiştir ( n=7). Ayrıca, retikülositler üzerinde klon tespitinin duyarlılığı (%5), bir klonun granülositler ve retikülositler arasında aynı anda değerlendirilmesi için tekniğin kullanılmasına izin vermez. Aynı zamanda, PNH'den şüphelenilen hastaların kan örnekleri arasında, %1-24 klon boyutuna sahip olanlar yoktu, bu da bu aralıktaki değerlerin korelasyonunun tam bir resmini vermiyor. Bu yaklaşımla, panelde özellikle saf bir popülasyonu izole etmek ve enkaz ve çiftleri kesmek için gerekli olan bir paneritrosit işaretçisinin (CD235a) olmaması nedeniyle retikülosit geçitlemesi zordur. Ek olarak, bir PNH klonunun objektif bir değerlendirmesi için on binlerce hücrenin değerlendirilmesi gerekir. Önerilen yönteme göre bir test, büyük miktarda antikor tüketir. Kapıya göre toplanan toplam olay sayısı (CD71'e göre) (2000 olay) bir klonu tanımlamak için yeterli olmayabilir.

Bu nedenle, bilinen yöntem paroksismal gece hemoglobinürisi ve PNH-klonu olan az sayıda hasta üzerinde test edilmiştir, MCA ila CD71 ile spesifik olmayan bir şekilde ilişkili hücreler, büyük olasılıkla analizin sonuçlarını bozacaktır. Ayrıca bu analiz için 6 tip monoklonal antikor kullanılmaktadır, bunlardan 2'si iki kez kullanılmakta olup, bu da kullanılan MCA panelinin yüksek maliyetine yansımıştır. Yöntem, PNH'li 8 hasta üzerinde test edildi, bunlardan 7'si duyarlılık eşiğinin altında bir klon değerine sahipti (granülositler için %1, retikülositler için %5). Bu yöntem, minör PNH klonlarının güvenilir bir şekilde saptanması sorununu çözmez ve yöntemin yüksek duyarlılığının kanıtı değildir.

En yakın analog olarak, Uluslararası Klinik Sitometri Birliği (ICCS) tarafından önerilen akış sitometrisi ile paroksismal noktürnal hemoglobinüri teşhisi için bir yöntem bilinmektedir. (Michael J. Borowitz, Fiona E. Craig, Joseph A. DiGiuseppe, Andrea J. Illingworth, Wendell Rosse, D. Robert Sutherland, Carl T. Wittwer, Stephen J. Richards. Paroksismal noktürnal hemoglobinüri ve akış sitometrisi ile ilgili bozukluklar, çevrimiçi: 28 Nisan 2010. DOI: 10.1002/cyto.b.20525).

Yöntem, granülositler, monositler ve eritrositler üzerinde GPI ile ilişkili proteinlerin varlığının araştırılmasını içerir. Çalışma iki aşamadan oluşur: numune hazırlama ve ardından bir akış sitometresinde analiz.

Eritrositlerin analizi için, tam kan fosfat tamponlu salin ile 1:100 oranında seyreltilir, 990 µl fosfat tamponlu saline 10 µl tam kan eklenir; Daha sonra, elde edilen hücre süspansiyonunun 40 ul'si etiketli tüpe eklenir. Eritrositleri boyamak için sırasıyla CD235FITC etiketli ve CD59 etiketli PE florokromlarına konjuge monoklonal antikorlar hücre süspansiyonuna eklenir. Karanlıkta 30 dakika monoklonal antikorlarla inkübasyondan sonra, numuneler bağlanmamış monoklonal antikorlardan yıkanır. Eritrositlerin analizi için numune 4 ml fosfat tamponlu salin içinde 1500 rpm'de 5 dakika santrifüj edilerek iki kez yıkama yapılır, daha sonra süpernatant alınır, hücreler yeniden süspanse edilir, 500 µl fosfat tamponlu salin eklenir. daha fazla analiz.

Bir akış sitometresinde eritrositleri toplamak ve analiz etmek için, cihaz yazılımı kullanılarak grafikler oluşturulur:

Graph-FS(log) ile (karşı) SS(log) karşılaştırması üzerinde bir eritrosit popülasyonu izole edilir (bir RBC geçidi oluşturur) ve döküntü, trombositler ve eritrosit agregatları taranır;

CD235a(log) - FS(log) grafiği, eritrosit popülasyonunu daha net bir şekilde ayırt etmek için RBC geçidindeki olayları yansıtır, eritrosit popülasyonu CD235a işaretçisi için pozitiftir, yeni bir geçit oluşturur (CD235a+)

CD59(log) ve CD235a, (histogram, CD235a+ tarafından kapılı olayları gösterir). Histogram, eritrositler üzerindeki CD59 ekspresyonunun seviyesini yansıtır. CD59 eksikliği olmayan hücreler - tip I normal eritrositler, kısmi CD59 ekspresyon eksikliği olan hücreler - tip II PNH klonu, CD59 eksprese etmeyen hücreler, yani tam CD59 eksikliği olan eritrositler - bu tip III PNH klonudur.

Yönteme göre en az 50.000 sitometrik olay toplanır.

Granülosit ve monosit analizine hazırlanmak için iki etiketli tüpe 100 µl periferik kan eklenir. Daha sonra, etiketli monoklonal antikorlarla boyama için, her tüpe bir etiketli monoklonal antikor kombinasyonu eklenir:

granülositler arasında PNH klonunu belirlemek için etiketli monoklonal antikorların bir kombinasyonu FLAER(AlexaFluor700) /CD15(PE)/CD24(PerCP)/CD45(PE-Cy7) (geçit işaretleri: CD45 ve CD15, GPI ile ilgili işaretler FLAER ve CD24) ;

FLAER(AlexaFluor700)/CD14PE/CD64PerCP/CD45PE-Cy7 monositleri arasında PNH klonunu belirlemek için etiketli monoklonal antikorların bir kombinasyonu, burada kapı işaretleri: CD45 ve CD64, GPI, FLAER ve CD14 ile ilişkili işaretlerdir;

Boyanan numuneler karanlıkta oda sıcaklığında 30 dakika inkübe edildikten sonra eritrositlerden kurtulmak için numuneye 1 ml lizis solüsyonu eklenir. Bir parçalama solüsyonu ile inkübasyondan sonra numuneler 5 dakika 1500 rpm'de santrifüjlenir, santrifüjden sonra süpernatan boşaltılır ve tüpün altındaki lökositler yeniden süspanse edilir. Daha sonra, numuneye 2 ml fosfat tamponlu salin eklenerek ve ardından 1500 rpm'de 5 dakika santrifüj edilerek numuneler parçalama çözeltisinden yıkanır. Santrifüjlemeden sonra, süpernatan boşaltılır, hücreler yeniden süspanse edilir, daha sonra ileri analiz için 500 ul fosfat tamponlu salin eklenir.

Akış sitometresinde granülositlerin ve monositlerin analizi ve toplanması için, alet yazılımı kullanılarak aşağıdaki grafikler oluşturulur:

CD45(log) vs SS grafiğinde, CD45+LY lenfosit bölgeleri (yüksek CD45 ekspresyon bölgesindeki hücreler, düşük SS değerleri), CD45+MON monositleri (orta CD45 ekspresyon bölgesindeki hücreler, daha yüksek SS değerleri) ve CD45+ GRAN granülositleri (düşük CD45 ekspresyonu olan hücre alanları, yüksek SS değerleri).

Granülositler arasında PNH klonunu analiz etmek için, kapıya (CD45+GRAN) bağlı olarak SS'ye karşı bir CD 15 (log) grafiği çizilir. CD15+ geçidi kullanılarak, kalıntı içermeyen bir granülosit popülasyonu ve anti-CD15 monoklonal antikorlarla temas etmemiş hücreler izole edilir;

FLAER(log) ve CD24(log) histogramı (CD15+ kapısına bağlı olarak oluşturulmuştur. Bu grafikte, CD24 ve FLAER ifadesi için negatif bölgeyi yakalayan PNH GRAN kapısı oluşturulmuştur. Granülositler üzerinde bu işaretlerin olmaması, hücrelerin PNH klonuna aittir.

Monositler arasında PNH klonunu değerlendirmek için, CD45 MON kapısına bağlı olarak bir -CD64(log) - SS grafiği oluşturulur. Bu grafikte, C064-pozitif olaylar CD64+MON geçidi ile sınırlıdır. CD64+MON geçidine bağlı olarak, -FLAER(log) ile CD14(log) arasındaki bir grafik çizilir (izole edilmiş CD64+ monosit popülasyonuna - geçidine bağlı olarak). Bu grafikte, CD14 ve FLAER ifadesi için negatif bölgeyi yakalayan PNH MON geçidi oluşturulmuştur. Bu belirteçlerin monositlerde olmaması, hücrelerin PNH klonuna ait olduğunu gösterir.

PNH klon değeri, GPI ile ilişkili ankor proteinlerinin bulunmadığının gözlemlendiği hücrelerin (granülositler, monositler, eritrositler) yüzdesidir.

PNH klonunun uluslararası protokole göre incelenmesi, PNH tanısında "altın standart"tır. Ancak, çalışma maliyetli ve zaman alıcıdır. Bu yönteme göre hazırlık ve analiz en az 2,5-3 saat sürer.

PNH'nin nadir görülen bir hastalık olması nedeniyle çeşitli kaynaklara göre 1 milyon popülasyonda 1 ila 10 kişiyi etkilediğinden, PNH klon tanısı için sevk edilen hastaların çoğu PNH pozitif olmayacaktır. Bu nedenle PNH'si olmayan hastalarda uluslararası protokole göre zahmetli ve pahalı bir analiz yapılması tavsiye edilmez ancak PNH klonu var mı yok mu sorusuna cevap vermek yeterlidir. 500 c.u.'den etiketlenmiş monoklonal antikorlar pahasına. bir isim için, uluslararası yaklaşıma göre PNH teşhisi için eksiksiz bir antikor ve reaktif seti 5000 USD'den mal olacak. Gerekli reaktiflerin bazılarının kısa raf ömrü göz önüne alındığında, nüfusu 1 milyon olan bir şehirde bile, yılda bir set ile sırasıyla 10 ila 100 hasta incelenebilir, bir çalışmanın maliyeti 500'e kadar çıkabilir. AMERİKAN DOLARI.

Buluşun amacı, uygulanması kolay, uygun maliyetli ve minimum malzeme maliyeti ile paroksismal noktürnal hemoglobinüri taramasına olanak tanıyan, paroksismal noktürnal hemoglobinürinin laboratuvar teşhisi için doğru, hassas ve kanıta dayalı bir yöntem yaratmaktır.

Buluşun özü, hastanın tam kanının fosfat tamponlu salin içinde monoklonal antikorlarla boyanması, inkübasyon, santrifüjleme yoluyla bağlanmamış monoklonal antikorlardan kan hücrelerinin yıkanması, kan hücrelerinin yeniden süspanse edilmesi dahil olmak üzere paroksismal gece hemoglobinürisinin laboratuvar teşhisine yönelik bir yöntemde yatmaktadır. bitmiş numune, koruyucu proteinlerin yokluğu veya mevcudiyeti ile akış sitometre programında klon boyutunun veya yokluğunun müteakip değerlendirmesi, CD235a (FITC)/CD59(PE)/CD71 (APC) monoklonal antikorların üç renkli bir kombinasyonudur. numune ile test tüpüne eklenen test kan örneğini boyamak için kullanılır, eritrositler ve retikülositler arasında bir PNH klonunun varlığı, kapı CD235a tarafından izole edilen retikülositlerin zarı üzerinde koruyucu protein CD59'un yokluğu ile değerlendirilir - transferrin için bir paneritrosit işaretçisi ve CD71 reseptörü; ya FSC(log) vs SSC(log) grafiği, üzerinde retikülositlerin ek bir CD71str geçidi kullanılarak izole edildiği, böylece sıralı geçitleme yöntemi ile retikülosit popülasyonunun enkaz ve ikililerden temizlendiği, göstergelerin elde edilen değerleri karşılaştırılır. normal kriterlerle ve CD59 retikülositleri için %100 pozitiflik varlığında, bir PNH klonunun yokluğuna karar verir ve paroksismal noktürnal hemoglobinüri hastalığının yokluğunu teşhis eder. Klinik semptomları olan bir hastada negatif CD59 retikülositleri tespit edilirse ve elde edilen göstergelerin değeri %1'den fazlaysa, bir PNH klonunun varlığı hakkında tanısal bir sonuç verir ve paroksismal gece hemoglobinüri tanısını doğrulamak için ek bir Negatif CD59 retikülositleri tespit edilirse ve elde edilen % 0.1-1'lik göstergeler minör bir PNH klonunun varlığını yargılarsa ve 6 ay sonra PNH klonunun bir artış için yeniden belirlenmesini önerirse, uluslararası standart protokole göre çalışma önerilir. değeri ve paroksismal gece hemoglobinüri gelişimi, eğer klonun bu boyutu doğrulanırsa, klinik belirtiler olmadan subklinik bir paroksismal gece hemoglobinüri formu teşhis edilir.

Buluşun kullanımı, aşağıdaki teknik sonucun elde edilmesini sağlar.

Bir PNH klonunu saptamak için önerilen yöntemin yüksek güvenilirlik, doğruluk ve duyarlılığı vardır - %0,1, uluslararası standartlaştırılmış metodolojiyle karşılaştırılabilir ve kanıta dayalıdır.

Gerçek paroksismal gece hemoglobinürisi olan hastalarda önemli bir boyut olarak PNH klonlarının varlığını ve aplastik anemi ve miyelodisplastik sendromu olan hastalarda minör - %0.01 ila %1 arasında belirlemenizi sağlar.

Yöntemin uygulanması daha basittir, uluslararası standartlaştırılmış metodolojiye kıyasla büyük malzeme maliyetleri gerektirmez.

PNH klon saptama teknolojisi, PNH (CD235a, CD71, CD59) taramasında minimum sayıda (üç) monoklonal antikor kullanmayı mümkün kılar.

Bir hastanın kanını incelemek için sadece bir tüp kullanılır, bu da analizi basitleştirir ve hızlandırır.

Bir test yapmak için harcanan süre 40-50 dakikadır. Parçalama solüsyonları kullanılmadan daha az antikor kullanılması, analizi test başına yaklaşık %75 oranında daha ucuz hale getirir. Aynı zamanda, yüksek hassasiyet ve teşhis doğruluğu korunur.

Çoğu durumda, yöntem, hastalığın nadir görülmesi nedeniyle sonuç genellikle olumsuz olduğundan, daha fazla antikor kullanımıyla ilişkili ek maliyetlerden kaçınır. Teknik, hastaları taramak için çok uygundur ve çeşitli profillerdeki tıbbi kurumların yanı sıra tüm vatandaş kategorileri için kullanılabilir.

Önerilen yöntemdeki analizin nihai sonucu, GPI ile ilgili proteinlerde, yani bir PNH klonunda kusurlu eritrosit ve retikülosit yüzdesi olarak sunulur. Teknik, tespit edilen PNH klonunun yüzdesine dayalı olarak artan tromboz riskini belirlemeyi mümkün kılar.

Önerilen yöntem, diğer bazı bilinen yöntemlerle karşılaştırıldığında tercih edilir - Ham's testi, sukroz testi, tamamlayıcı sistem proteinlerinin çeşitli konsantrasyonlarında hemoliz derecesinin ölçümü.

Teknik sonuç, yazarlar tarafından, akış sitometrisi kullanılarak paroksismal gece hemoglobinürisinde PNH klonunu belirlemek için geliştirilen yeni teknoloji sayesinde elde edilir; algoritması, bu klonun retikülositler ve eritrositler üzerinde belirlenmesini sağlar (belirlenen standardın aksine). nötrofiller, monositler ve eritrositler üzerinde). Yazarlar, CD235a(FITC)/CD59(PE)/CD71(APC) antikorlarının bir kombinasyonunu kullanan ilk kişilerdir. Önerilen yönteme göre, veri analizi sırasında, CD71+ hücrelerinin multiparametrik kapılanması ve enkazın, çiftlerin analizden çıkarılması ve spesifik olarak bağlanmamış monoklonal antikorların atılması için ek bir prosedür kullanılır.

Kilit nokta, yazarlar tarafından geliştirilen teknolojiye göre, CD71 antikorları kullanılarak izole edilen ve seçilen üç monoklonal antikor CD235a(FITC)/CD59(PE)/CD71(APC) kullanılarak incelenen retikülositlerin çalışmasıdır. yazarlar tarafından. Retikülositler arasındaki PNH klonu, PNH klonunun gerçek değerini yansıtır, yazarlar, retikülositler arasındaki PNH klonlarının elde edilen değerlerini, PNH teşhisine standart bir uluslararası yaklaşım kullanılarak elde edilen değerlerle karşılaştırdı. PNH-pozitif retikülositlerin monositlerle hacim korelasyonu 0.95, granülositlerle - 0.93'tür. Önerilen yönteme göre PNH-pozitif eritrositlerin yüzdesi, uluslararası standart yaklaşıma kıyasla daha yüksek hassasiyetle ölçülür, çünkü önerilen yöntem kullanılarak en az 1.000.000 eritrosit incelenir ve ICCS'ye göre sadece 500.000'dir.

İlk kez, bir monoklonal antikor CD235a/CD71/CD59 kombinasyonu kullanılarak retikülositler üzerinde bir PNH klonu çalışıldı ve bu klonun boyutunu %100 hassasiyetle tahmin etmeyi mümkün kıldı.

Sonuç olarak, üç monoklonal antikor kullanarak PNH taraması yapmak mümkün hale geldi. Ek bir retikülosit izolasyonu aşamasının kullanılması ve spesifik olarak monoklonal antikorlara bağlanmamış hücrelerin "kesilmesi" (FS-SS grafiğinde, Şek.), taramaya dayalı olarak PNH teşhisinin doğrulanmasına izin veren doğru bir sonuç verir. ve etkili yeterli tedavi yürütmek.

Yöntem aşağıdaki gibi gerçekleştirilir.

Çalışma için hastanın venöz kanı, antikoagülan K 2 EDTA içeren bir test tüpüne alınır. Test tüpü, tıbbi kurumun tedavi odasından laboratuvara teslim edilir.

Eritrositlerin ve retikülositlerin analizi için tam kan ayrı bir polistiren tüp içinde seyreltilir. Fosfat tamponlu salin ile 1:10 oranında seyreltmek için, 450 μl fosfat tamponlu saline 50 μl tam kan eklenir ve bir girdapta 5 saniye iyice karıştırılır, ardından elde edilen hücre süspansiyonundan 40 μl eklenir. etiketli bir tüpe

Numuneyi boyamak için monoklonal antikorların üç renkli bir kombinasyonu olan CD235a(FITC)/CD59(PE)/CD71(APC) kullanılır. Boyama, numuneye sırayla 3 µl etiketli monoklonal antikor eklenerek gerçekleştirilir, ardından tüp bir vorteks üzerinde 5 saniye çalkalanır. Ardından karanlıkta oda sıcaklığında 15 dakika inkübe edin.

Daha sonra kan hücreleri, 1500 rpm'lik bir frekansta 5 dakika boyunca santrifüjleme modunda 4 ml fosfat tamponlu salin içinde iki kez yıkanır. Her santrifüjden sonra, hücrelerin tüpün altında kalması için süpernatantı bir pipetle dikkatlice toplayın.

Hazırlanan numune bir girdap üzerinde 5 saniye yeniden süspanse edilir ve 750 µl fosfat tamponlu salin eklenir, ardından numune bir akış sitometresinde analiz için hazır hale gelir.

Ardından, çok renkli akış sitometrisini kullanarak sonuçları değerlendirin ve kaydedin. Analiz, en az üç floresan kanalı için dedektörlerle donatılmış herhangi bir akış sitometresinde gerçekleştirilebilir.

Ölçümler bir BD FACSCanto™ II Becton-Dickinson akış sitometresinde (ABD) gerçekleştirilir.

Eritrositler ve retikülositler üzerinde bir PNH klonunun varlığının veya yokluğunun yanı sıra PNH klonunun boyutunun değerlendirilmesi, özel yazılım kullanılarak bir akış sitometresinde gerçekleştirilir.

Eritrositler ve retikülositler arasındaki PNH klonunu değerlendirmek için bir grafik oluşturulur - FSC(log) vs SSC(log), mantıksal bir kısıtlama kullanarak, enkaz ve çiftler hariç bir eritrosit alanı izole edilir (Şekil 1a).

Daha sonra FSC(log) - CD235a grafiği (Şekil 1b) üzerinde bir CD235a+ geçidi oluşturulur, böylece pozitif hücreler kısıtlanır ve CD235a'ya spesifik olmayan şekilde bağlı olmayan olaylar (enkaz ve CD235a+ popülasyonuna ait olmayan hücreler) hariç tutulur.

CD235a+ kapısına giren olaylar, CD71 pozitif popülasyonu vurgulayan bir CD71'e karşı FSC(log) grafiğinde (Şekil 1e) analiz edilir.

Retikülositler arasında PNH klonunun objektif bir değerlendirmesi için, CD71+ kapısında en az 20.000 olay toplanır.

CD71+ geçidine bağlı olarak, ek bir CD71str geçidi kullanılarak retikülositlerin izole edildiği ve böylece popülasyon sonunda yöntem ile enkaz ve çiftlerden arındırıldığı FSC(log) vs SSC(log)'un bir grafiği oluşturulur (Şekil 1f). sıralı kapılama.

Daha sonra, CD235a'ya karşı CD59 (Şekil 1g) grafiği, CD71str kapısına (izole edilmiş retikülositler) karşı çizilir. Bu grafikte iki alan Norm°Ret ve PNH°Ret ayırt edilir (Şekil 1g), bunlar sırasıyla normal ve PNH-pozitif retikülositlerin sınırlarıdır. İstatistikler, mutlak değerler ve geçidin yüzdesi olarak gösterilir (Şekil 1d ve 1h).

Veri toplama protokolleri bir kez ayarlanır ve daha sonra yalnızca küçük ayarlamalar yapılması gerekir.

Veri toplamanın ilk aşamasındaki CD235a+ kapısı bir durdurma kapısıdır, yani. 1.000.000 olay toplar. CD235a+ kapısı, CD235a vs CD59 grafiğine uygulanır (Şekil 1c). CD235a vs CD59 grafiğinde PNH Tip II ve PNH Tip III bölgelerinde 10'dan fazla olay yoksa, veri toplama durdurulur ve PNH klonu olmadığı sonucuna varılır.

Bu bölgelerde toplamda daha fazla sayıda olayla birlikte çalışma devam ediyor.

Retikülositler arasındaki PNH klonu, koruyucu CD59 proteininden yoksun retikülositlerin yüzdesidir.

CD59 retikülositleri için %100 pozitif olduğunda, bir PNH klonunun yokluğuna karar verilir ve paroksismal nokturnal hemoglobinürinin yokluğu teşhis edilir.

Klinik semptomları olan bir hastada negatif CD59-retikülositler tespit edilirse ve elde edilen göstergelerin değeri %1'den fazlaysa, bir PNH klonunun varlığı hakkında tanısal bir sonuç verirler ve paroksismal gece hemoglobinüri tanısını doğrulamak için bir uluslararası standartlaştırılmış protokole göre ek çalışma önerilir (Michael J. Borowitz, Fiona E. Craig , Joseph A. DiGiuseppe, Andrea J. Illingworth, Wendell Rosse, D. Robert Sutherland, Carl T. Wittwer, Stephen J. Richards. Kılavuzlar akış sitometrisi ile paroksismal noktürnal hemoglobinüri ve ilgili bozuklukların teşhisi ve izlenmesi için).

Negatif hiçbir CD59-retikülosit saptanmadığında ve elde edilen göstergelerin değeri %0.1-1 olduğunda, küçük bir PNH klonunun varlığına karar verilir. Bu durumda değerini artırmak ve paroksismal noktürnal hemoglobinüri geliştirmek için PNH klonunun 6 ay sonra yeniden belirlenmesi önerilir.

Bu klon boyutu uluslararası protokole göre akış sitometrisi ile doğrulandığında, klinik belirtileri olmayan subklinik bir paroksismal nokturnal hemoglobinüri formu teşhis edilir veya önerilere göre uygun teşhisler konulduğunda AA ve MDS ile ilişkili bir PNH klonu değerlendirilir (Uluslararası PNH İlgi Grubu (I-PIG)).

Yöntem, RMAPO Klinik Laboratuvar Teşhis Departmanında klinik deneylerden geçmiştir. Yaşları 12 ile 82 arasında değişen, çeşitli hastanelerden paroksismal noktürnal hemoglobinüri (PNH), aplastik anemi (AA), miyelodisplastik sendrom (MPS), otoimmün hemolitik anemi (AIHA) ön tanısı veya şüphesiyle sevk edilen 572 hastayı inceledik.

Tüm hastalara, çok renkli akış sitometrisi yöntemi kullanılarak önerilen yönteme ve uluslararası standart yaklaşıma göre teşhis konuldu.

CD235a (paneritrosit belirteci) ve CD71 (transferrin reseptörü) tarafından izole edilen ve ışık saçılım parametreleri FS/SS ile sıralı geçitleme ile daha da saflaştırılan retikülositlerin zarı üzerinde koruyucu CD59 proteininin yokluğu belirlendi, PNH hacmiyle yüksek bir korelasyon belirlendi. retikülositler arasında ölçülen klonun, uluslararası standardize edilmiş yaklaşıma göre ölçülen granülositler ve monositler arasında PNH-klonu ile yönteme göre kanıtlanmıştır.

15-64 yaş arası 248 erkek ve 324 kadın olmak üzere 572 kişi muayene edildi. İncelenen 572 hastadan 175 hastada PNH klonu bulundu, değerler %0,1 ile %99,7 arasında değişiyordu (ortalama %41,6). Bunların 78'i erkek ve 97'si kadın. Tüm hastalara, uluslararası standartlaştırılmış yaklaşıma göre ve önerilen yöntem kullanılarak PNH klonunun paralel çalışmaları yapıldı. Retikülositler ve granülositler arasında PNH klonunun değeri arasındaki korelasyon sırasıyla 0.93, retikülositler ve monositler arasında 0.95 idi. Yöntemin duyarlılığı %98.9, özgüllüğü %99.8, genel doğruluğu %99.7 idi.

Genel olarak aplastik anemi ve miyelodisplastik sendromda PNH klonu %1'den azdır. Önerilere göre, bu boyuttaki klonlar, 6 ayda 1 kez sıklıkta dinamik olarak incelenmelidir. Klon boyutunda bir artış ve buna karşılık gelen klinik belirtilerle, PNH tanısı hakkında konuşuyoruz.

Örnek. 34 yaşındaki hasta M., bir hematolog gözetimindeydi. ARVI'dan sonra, zayıflık, sarılık ve idrarın koyulaşmasında bir artış oldu.

Hasta güçsüzlük ve idrarda koyulaşma şikayetleri ile bir tıp kurumunun (MPU) bölümüne başvurdu.

Sağlık kuruluşunun poliklinik bölümünde planlı muayene yapıldı. Objektif bir muayenede ciltte sarılık ve görünür müköz membranlar saptandı. Hasta genel halsizlik, halsizlik, nefes darlığı, taşikardi, koyu renkli idrar, hemoglobin ve alyuvar azalması şikayetleri ile hematoloji servisine yatırıldı.

K 2 EDTA ile stabilize edilmiş bir periferik kan örneğine sahip bir test tüpü, akış sitometrisi ile PNH klonunu tanımlamak için Rusya Tıp Lisansüstü Eğitim Akademisi Klinik Laboratuvar Teşhisi Departmanına PNH çalışması için referans merkezine gönderildi. Granülositler, monositler ve eritrositler arasında PNH klonunun analizi uluslararası protokole göre yapılmış ve PNH klonunun çalışması eritrositler ve retikülositler üzerinde önerilen yöntem kullanılarak gerçekleştirilmiştir.

Aynı zamanda, PNH klonunun çalışması uluslararası protokole ve önerilen yönteme göre (önceki teklifin tekrarı!) gerçekleştirildi. Uluslararası protokole göre numune, granülositler, monositler ve eritrositler arasında PNH klonunu saptamak için ve yazarlar tarafından önerilen yönteme göre, eritrositler ve retikülositler arasında PNH klonunu saptamak için boyandı. Önerilen yönteme göre, numune sırayla 40 µl seyreltilmiş 1:10 tam kan içine sokularak CD235a(FITC)/CD59(PE)/CD71(APC)'ye karşı monoklonal antikorlarla boyandı.

Karanlıkta 15 dakika inkübasyondan sonra hücreler, 1500 rpm'lik bir frekansta 5 dakika boyunca santrifüj modunda 4 ml fosfat tamponlu salin içinde iki kez yıkandı.

Her santrifüjden sonra, hücreler tüpün altında kalırken süpernatant çıkarıldı.

Hazırlanan numune vortekste 5 saniye yeniden süspanse edildi ve 750 µl PBS eklendi.

FSC(log) ve SSC(log) grafiğindeki eritrositler ve retikülositlerin incelenmesi için, enkaz ve çiftler dışında bir eritrosit alanı tanımlandı.

Daha sonra, FSC(log) vs CD235a grafiğinde, anti-CD235a monoklonal antikorlarını spesifik olmayan şekilde bağlayan enkaz ve CD235a+ olmayan hücreler hariç, CD235a-pozitif hücreler izole edildi. CD235a+ kapısına dahil edilen olaylar, CD71'e karşı FSC(log) grafiğinde analiz edildi ve CD71 için pozitif bir popülasyon belirlendi.

CD71+ geçidindeki retikülositler arasında PNH klonunun objektif bir değerlendirmesi için en az 20.000 olay toplandı.

FSC(log) vs SSC(log) CD71+ kapısına bağlı olarak çizildi. Daha sonra, ek bir CD71str geçidi kullanılarak, bu grafikte bir retikülosit popülasyonu izole edildi, bu şekilde sıralı geçitleme ile enkaz ve çiftlerden temizlendi.

Daha sonra, CD71str kapısına (izole edilmiş retikülositler) bağlı olarak CD235a - CD59 grafiğinde retikülositler, sırasıyla PNH-pozitif ve PNH-negatif hücreler olmak üzere retikülosit membranları üzerinde GPI ile ilişkili CD59 proteininin varlığı açısından değerlendirildi. İstatistiksel veriler, mutlak değerlere ve geçidin yüzdesine yansıtılmıştır.

CD71 ile retikülositlerin izolasyonunda ve ardından enkazdan saflaştırmada, CD59 hücre popülasyonu %97.6 idi. Böylece önerilen yöntem kullanılarak bir PNH klonu tespit edildi.

PNH'nin tespiti için uluslararası protokole göre çalışma, PNH klonunun granülositler, monositler ve eritrositler üzerinde sırasıyla %99.2, %97.6 ve %71.0 miktarında bulunduğunu doğruladı, bu da önerilen sonuçların tekrarlanabilirliğini gösterir. ve standart yöntemler. Bu test, paroksismal nokturnal hemoglobinüri tanısı için temel teşkil etti.

Klinik araştırmalar, önerilen yöntemin yüksek güvenilirlik, doğruluk ve hassasiyete (% 0.1 PNH-klonu) sahip olduğunu, paroksismal gece hemoglobinürisi olan hastalarda klonun hem yüksek değerlerinin hem de minör değerlerin varlığını belirlemenize izin verdiğini göstermiştir. (%0,1'den) aplastik anemi, miyelodisplastik sendromlu hastalarda. Önerilen yöntemin uygulanması kolaydır, büyük malzeme maliyetleri gerektirmez, bir test 40-50 dakika sürer.

Teknik, hastaları taramak için çok uygundur ve çeşitli profillerdeki tıbbi kurumların yanı sıra tüm vatandaş kategorileri için kullanılabilir.

Hastanın tam kanının fosfat tamponlu salin içinde monoklonal antikorlarla boyanmasını, inkübasyonu, santrifüjleme yoluyla bağlanmamış monoklonal antikorlardan kan hücrelerinin yıkanmasını, bitmiş numunenin yeniden süspanse edilmesini ve ardından klon boyutunun veya onun koruyucu proteinlerin yokluğu veya mevcudiyeti ile akış sitometre programında yokluğu, özelliği, test kan örneğini boyamak için CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (ARC) monoklonal antikorlarının üç renkli bir kombinasyonunun kullanılmasıdır, Örnekle birlikte test tüpüne eklenen, eritrositler ve retikülositler arasında bir PNH klonunun varlığı, kapı CD235a - bir paneritrosit belirteci ve CD71 - bir reseptör tarafından izole edilen retikülositlerin zarı üzerinde koruyucu protein CD59'un yokluğuna göre değerlendirilir. transferrin için, CD71+ kapısındaki retikülositler arasındaki PNH klonunu değerlendirmek için CD71+ kapısında en az 20.000 olay toplanır, CD71+ kapısına bağlı olarak bir FSC (log) grafiği çizilir vs SSC(log), ek bir CD71str geçidi kullanılarak retikülositlerin izole edildiği, böylece sıralı geçitleme yöntemiyle retikülosit popülasyonunun enkaz ve ikililerden temizlendiği, göstergelerin elde edilen değerleri normal kriterlerle karşılaştırılır ve CD59 retikülositleri için 100% pozitif varlığında, PNH'nin yokluğu yargılanır -klonlayın ve negatif CD59 retikülositlerinin klinik semptomları olan bir hasta tespit edilirse paroksismal gece hemoglobinüri hastalığının yokluğunu teşhis edin ve elde edilen göstergelerin değeri %1'den fazla ise, bir PNH klonunun varlığı hakkında tanısal bir sonuç verirler ve paroksismal nokturnal hemoglobinüri tanısını doğrulamak için, CD59 retikülositleri için negatif saptanırsa ve uluslararası standart protokole göre ek bir çalışma önerilir. elde edilen göstergelerin değeri %0.1-1'dir, küçük bir PNH klonunun varlığı yargılanır ve değerinde bir artış ve paroksismal h gelişimi için 6 ay sonra PNH klonunun tekrar tekrar belirlenmesi önerilir. gece hemoglobinürisi, klonun bu boyutunu doğrularken, klinik belirtiler olmaksızın subklinik bir paroksismal gece hemoglobinüri formu teşhis edilir.

Benzer patentler:

Buluş tıpla, yani oftalmolojiyle ilgilidir ve kalıtsal optik nöropatiyi (HON) teşhis etmek için kullanılabilir. Bunu yapmak için, klinik ve sitolojik çalışmalar yapılır ve ayrıca, hastanın derisinden, mitokondriyal potansiyele bağlı floresan boya TMRE ile nihai konsantrasyona kadar boyanmış, cm2 başına 5000-10000 hücre yoğunluğuna sahip bir fibroblast kültürü elde edilir. 25 nM.

Buluş ilaçla ilgilidir ve bir numunede analitin beklenen içeriğine sahip bir analitin varlığını ve/veya miktarını belirlemek için bir kemilüminesan reaktifi tanımlarken reaktif bir sulu ortamda dağılmaz ve çözünürdür ve bir bağlanma ortağı içerir. bir olefin bileşiği ve bir metal şelat içeren analit ve bir kemilüminesan bileşim için, burada olefin bileşiği, dioksetan oluşturmak üzere 2+2 ilavesinde singlet oksijen ile reaksiyona girebilen veya içinde singlet oksijen ile reaksiyona girebilen bir bileşiktir. metal veya metal şelatının bir nadir toprak metali veya metal Grubu VIII olduğu ve metalin aynı molekülün veya şelatlama maddesinin iki veya daha fazla atomuna koordine edildiği, burada iki veya daha fazla atomun olduğu bir 4+2 siklo ilavesi oksijen, azot ve kükürtten oluşan gruptan seçilir.

MADDE: Buluş grubu tıpla, yani immünolojiyle ilgilidir ve kanser tedavisinin ex-vivo etkinliğini belirlemek için kullanılabilir. Bunu yapmak için, süjeye bir veya daha fazla immünojenik kompozisyon dozunun verilmesinden sonra, vücuttaki aktive edilmiş T-lenfositlerin (CD3+ CD69+) seviyesi ölçülür.

Buluş biyoteknoloji alanı ile ilgilidir ve matris metalloproteinaz MMP9-1562 C>T (rs3918242) genindeki polimorfizm ile insan genotipini belirlemek için kullanılabilir.

Buluş, embriyonlu Trichuris yumurtalarının biyolojik aktivitesini belirlemeye yönelik bir yöntemle ilgilidir. Tanımlanan yöntem, aşağıdakilerden seçilen en az 3 testin gerçekleştirilmesini içerir: - genomik DNA kopyalarının sayısını belirlemek için uygun işaret dizileri kullanılarak nicel bir PCR yöntemi aracılığıyla yumurtaların embriyonik gelişim aşamasının değerlendirilmesi ve/veya doğrulanması, - Biyokimyasal ve/veya moleküler biyolojik yöntemler kullanılarak embriyonik yumurtaların metabolik aktivitesi, - Embriyonik yumurtalarda gen ekspresyonunun indüklenebilirliğinin değerlendirilmesi, - Yüksek sıcaklıklarda ön inkübasyondan sonra uzun süreli gözlemler boyunca bir mikroskop kullanılarak Trichus larvalarının hareketliliğinin değerlendirilmesi, ve/veya - bir laboratuvar hayvanının vücudunda Trichuris larvalarının kuluçka oranının değerlendirilmesi.

Buluş tıpla, yani kardiyolojiyle ilgilidir ve tip 2 diyabet ile bağlantılı enfarktüs sonrası kronik kalp yetmezliği olan hastalarda kardiyovasküler ölüm riskini tahmin etmek için kullanılabilir.

Buluş, tıp, yani onkoloji ve klinik biyokimya ile ilgilidir. Yöntemin özü, sabitlenmiş periferik kan hücrelerinin, segmentli granülositlerin yüzeyindeki antijenlerle spesifik olarak etkileşime giren östrojen bağlayıcı proteine ​​karşı birincil antikorlarla tedavi edilmesi ve ardından ortaya çıkan antijene ikincil anti-tür floresan etiketli antikorların eklenmesi gerçeğinde yatmaktadır. -antikor kompleksi ve segmentli granülositlerin yüzeyinin boyanması durumunda malign neoplazmalar teşhisi konur ve segmentli granülositlerin yüzeyinin boyanmaması durumunda iyi huylu neoplazmalar teşhis edilir.

Buluş tıpla, yani onkolojiyle ilgilidir ve böbrek kanseri için kombine tedaviden sonra hematojen metastazların gelişimini tahmin etmek için kullanılabilir.

Buluş tıp, yani kadın doğum ve jinekoloji ile ilgilidir ve intrauterin fetal büyüme geriliğini tahmin etmek için kullanılabilir. Bunu yapmak için, hamileliğin erken evrelerinde bir kadının venöz kanında, göreceli CD3 + CD16 + 56 + lenfosit içeriği, komplemanın C3 bileşeninin seviyesi ve çözünür tümör nekroz faktörü reseptörü (sTNF-R) belirlenir.

MADDE: buluş tıpla, yani gastroenterolojiyle ilgilidir ve iltihaplı postnekrotik pankreas psödokistini teşhis etmek için kullanılabilir. Bunu yapmak için, hastanın kanında fagositlerin aktivitesi akış sitometrisi ve istatistiksel ROC analizi ile CD 14+/HLA-DR+ ekspresyon seviyesi ile belirlenir. CD14+/HLA-DR+ içeriği %85'in altında olduğunda, iltihaplı bir postnekrotik pankreas psödokisti teşhisi konur. Bu yöntemin kullanılması, pankreasın iltihaplı bir postnekrotik psödokistini teşhis etmeyi mümkün kılar, bu da bu tür hastaları yönetme taktiklerini belirlemeyi ve cerrahi müdahale seçimi yapmayı mümkün kılar. 2 ör., 1 sekme.

Buluş tıpla, yani onkohematolojiyle ilgilidir ve hematopoietik kök hücrelerin otolog transplantasyonundan sonra multipl miyelomlu hastalarda hastalıksız sağkalımın gelişimini tahmin etmek için kullanılabilir. Buluşun amacı, AHSCT'den sonra multipl miyelomlu hastalarda hastalıksız sağkalımı tahmin etme yöntemini basitleştirmektir. Otolog hematopoietik kök hücre transplantasyonundan (AHSC) sonra multipl miyelomlu hastalarda nükssüz sağkalımı tahmin etmeye yönelik bir yöntem, akış sitometrisini ve eşik değeri kullanılarak lenfosit popülasyonlarından birinin nispi içeriğinin değerlendirilmesini içerir. Önerilen yöntemde, aferez prosedüründen sonra, transplantasyondan önce, hastanın aferez ürününde nispi CD45+CD19+ B hücrelerinin sayısı belirlenir ve CD45+CD19+ B hücrelerinin içeriği %2,5'ten fazla ise, daha kısa bir süre daha kısadır. AHSCT'den sonra relapssız sağkalım tahmin edilir ve eğer CD45 +CD19+ B-hücrelerinin içeriği %2.5'ten azsa, AHSCT'den sonra daha uzun relapssız bir sağkalım öngörür. 1 hasta.

Buluş, tıp alanı, yani immünoloji ile ilgilidir ve lenfosit patlama dönüşümünün reaksiyonunu değerlendirmek için kullanılabilir. Bunun için, lenfositlerin spesifik aktivasyonu için brusellin kullanılır. Lenfositlerin patlama formlarının tespiti, CD34'e monoklonal antikorlar kullanılarak gerçekleştirilir, ardından akış sitometrisi ile hücre sayımı yapılır. Bu yöntemin kullanımı, brusellozlu hastalarda ve sağlıklı donörlerde monoklonal antikorlar CD34 kullanılarak RBTL'de brusellin ile aktive olan lenfositlerin kaydedilmesine izin verir. 1 sekme.

Buluş tıpla, yani immünolojiyle ilgilidir ve kan serumunda allojenik HLA-G'ye karşı antikorları saptamak için kullanılabilir. Bunu yapmak için, alıcının serumu ile test çapraz uyumluluk (cross match) donör mononükleer hücrelerini kullanın. Mononükleer alt popülasyonların analizi, HLA-G monoklonal antikorlarının bağlanması için akış sitoflorometrisi kullanılarak gerçekleştirilir ve deney ve kontrol donör mononükleer hücreleri üzerindeki HLA-G ekspresyonunun derecesi değerlendirilir. Aynı zamanda, CD3-HLA-G+ ve CD3+HLA-G+ alt popülasyonları önemlidir, buna göre baskılama katsayısı (KF) deney ortamında kontrol ile ilgili olarak aşağıdaki formüle göre hesaplanır: SP HLA- G = (HLA − GOP − HLA − G CONT) HLA − GCONT × 100, burada HLA-Gop, HLA-G'yi ifade eden alt popülasyonların toplam nispi sayısıdır: (CD3-HLA-G++CD3+HLA-G+) deneysel ayar, %; HLA-Gcont, HLA-G'yi ifade eden alt popülasyonların toplam nispi sayısıdır: (CD3-HLA-G++CD3+HLA-G+), kontrol ayarında, %. Aynı zamanda, allojenik HLA-G'ye karşı duyarlılığın varlığı, CPHLA-G'nin negatif değeri ile teşhis edilir. Bu yöntemi kullanmak, akış sitometrisi kullanarak HLA-G'ye karşı allojenik duyarlılığı saptamanıza ve CD3-HLA-G+ ve CD3+HLA-G+ alt popülasyonlarını belirlemenize olanak tanır. 3 pr., 3 hasta., 2 sekme.

Buluş tıpla, yani kadın doğum ve jinekoloji ile ilgilidir ve bir düşük tehdidinin tekrarını tahmin etmek için kullanılabilir. Bunu yapmak için, düşük tehdidi olan kadınlarda 7-12 haftalık gebelikte periferik venöz kanın immünolojik bir çalışması yapılır. Düşük tehdidinin tedavisinden sonra, CD8+ lenfosit popülasyonundaki CD45RA-CD62L- nispi içeriği belirlenir. Değeri %23,9'dan fazla ise, tekrarlayan düşük öyküsü olan kadınlarda ikinci trimesterde düşük tehdidi olacağı tahmin edilmektedir. Bu yöntemin kullanılması, hamile bir kadını yönetmek için doğru taktiklerin seçilmesine izin verecek ve bu komplikasyonun sıklığını azaltacak olan, gebeliğin ikinci trimesterinde tehdit altındaki bir düşükün tekrarını tahmin etmeyi mümkün kılar. 1 sekme., 4 pr.

Buluş tıpla, yani transfüzyonla ilgilidir ve donör kanının ışınlanmasının etkinliğini kontrol etmek için kullanılabilir. Yöntem, kan hücrelerinin blast transformasyonunun mitojen fitohemagglutinin ile reaksiyonunun evrelenmesini ve lenfositlerin stimülasyon indeksini belirleyerek reaksiyonun sonuçlarını dikkate almayı içerir. Reaksiyon, ışınlanmış donör kanıyla ilgili olarak kurulur, sonuçlar, farklı florokromlarla etiketlenmiş monoklonal antikorlar kullanılarak bir akış sitometresi kullanılarak kaydedilir, ortak lökosit belirteci CD45'in azaltılmış ekspresyonu ile aktive edilmiş lenfositleri kapır ve çift negatif T- yüzdesini belirler. aralarında CD3+ immünofenotipi olan lenfositler, CD4-CD8-, kontrol olarak ise aynı kanın ışınlanmamış bir örneği alınır. Bundan sonra, ışınlamanın etkinliği, test edilen ışınlanmış ve aynı ışınlanmamış kontrol kanındaki immünofenotip CD3+CD4-CD8- ile çift negatif T-lenfositlerin içeriğinin, negatif T-lenfositleri ile aynı ışınlanmış kontrol kanındaki oranı ile belirlenir. deneyde immünofenotip CD3+CD4-CD8- (test edilen ışınlanmış kanda), Sdntlk - kontrolde immünofenotip CD3+CD4-CD8- ile çift negatif T-lenfositlerin yüzdesi (ışınlanmamış örnekte aynı kan). Kontrol ile arasındaki fark %50'den fazla ise, ışınlanmış kandaki T-lenfositlerin fonksiyonel olarak düşüklüğü ve bu kan ürününün alıcı için immünolojik güvenliği hakkında bir sonuca varılır. Bu yöntemin kullanılması, akış sitometrisi ile donör kanının ışınlanmasının etkinliğini belirlemenizi sağlar.

Buluş tıpla, yani kadın doğum ve jinekolojiyle ilgilidir ve hamile kadınlarda tehdit altındaki geç düşükleri tahmin etmeyi mümkün kılar. Bunu yapmak için, 5-12 haftalık gebelik döneminde, periferik venöz kandaki nispi CD178+ gebelik monosit sayısı belirlenir. Monositik kapıdaki değeri %37,7 veya daha az olduğu için erken gebelikte düşük tehdidi olan ve tekrarlayan düşük öyküsü olan kadınlarda geç düşük yapma tehdidi öngörülmektedir. Bu yöntemi kullanmak, düşük yapma riski yüksek bir grup kadında doğru gebelik taktiklerini seçmenize, bir dizi terapötik ve önleyici önlem almanıza ve komplikasyon riskini ve olumsuz gebelik sonuçlarını azaltmanıza olanak tanır. 3 pr., 1 sekme.

Buluş tıpla, yani obstetrikle ilgilidir ve plasental yetmezlik ve fetal büyüme geriliği sendromu (FGR) olan hamile kadınlar için yönetim taktiklerinin seçimi ile ilgilidir. Bunu yapmak için, kan serumunda fetoplasental yetmezlik ve IGR olan hastalarda, süperoksit dismutaz aktivitesi, plasental büyüme faktörü, endoglin ve melatonin içeriği enzim immünoassay ile belirlenir. Bu göstergelere dayanarak, tahmin katsayısı P şu formül kullanılarak hesaplanır: P=(0.0001*KOİ+0.0255*Mel+0.1636*CD105+(-0.0487*PGF)-8.5389, burada KOİ süperoksit dismutaz, pg/ ml, Mel - melatonin, pg / ml, CD 105 - endoglin, pg / ml, PGF - plasental büyüme faktörü, pg / ml 0.64 veya daha fazla P değeri ile, antenatal dönemde fetüsün kritik bir durumunu geliştirme riskinin yüksek olduğu tahmin edilmektedir. fetüsün çıkarları için acil sezaryen ile hamileliğin sonlandırılmasını gerektiren.

Buluş tıpla, yani kulak burun boğaz ile ilgilidir ve yetişkinlerde akut viral ve bakteriyel bademcik iltihabının ayırıcı ekspres teşhisi için kullanılabilir. Bunun için periferik kan numunesi alınır ve yüzey zarı üzerinde eşzamanlı olarak CD16, CD11b eksprese eden nötrofilik granülositlerin alt popülasyonlarının nispi içeriği belirlenir. Yüksek bir CD16 ekspresyon yoğunluğu ve düşük bir CD11b ekspresyon yoğunluğu ile %80 ila 99.9 arasında bir CD16brightCD11bdimNG% alt popülasyonunun varlığı norm olarak alınır. CD16bright CD11bbrightNG veya CD16dimCD11bbrightNG'nin bir alt popülasyonu %40 veya daha fazla miktarda tespit edilirse, sırasıyla bir akut viral enfeksiyon veya bir akut bakteriyel enfeksiyon belirlenir. Bu yöntemin kullanılması, yetişkinlerde akut viral ve bakteriyel bademcik iltihabının ayırıcı tanısının doğruluğunu sağlamaya izin verir. 3 pr., 1 sekme.

MADDE: buluş grubu, tıpla, yani laboratuvar teşhisiyle ilgilidir ve insanlar ve hayvanlar için patojenik mikroorganizmaların koşullu taksonomik gruplarının temsilcilerinin aynı anda tanımlanması için kullanılabilir. Tek bir yuvaya yerleştirilmiş en az beş immünokromatografik şerit testinin kullanılması ile karakterize edilir. Aynı zamanda, cihazın gövdesinin birinci ve ikinci kanallarında toksinleri tespit etmek için şerit testleri, üçüncü kanalda - vejetatif bakteri formlarını tespit etmek için bir şerit testi, dördüncü - bakteri spor formlarında ve beşincide - virüsleri ve riketsiyayı yetiştirmek için besin ortamını tespit etmek için bir şerit testi. Test, immünokromatografik şerit testlerinin gövdesi, aralarında gözenekli ısı yalıtım malzemesinden yapılmış bir ısı yalıtım contası bulunan iki kat sefalenden oluşan bir ısı yalıtımlı cephlen torbasına ve immünokromatografik şerit testlerinin gövdesine yerleştirerek gerçekleştirilir. torbanın içi sabit bir ısı kaynağı ile ısıtılır ve torbanın ağzı mekanik bir kelepçe ile kapatılır ve bu anı testin başlangıcı olarak kabul edin. İmmünokromatografik analiz için bir cihaz da önerilmiştir. ETKİ: buluş grubu, immünokromatografik analizin verimliliğini artırmayı, immünokromatografik analizin sıcaklık aralığını eksi 20'den artı 50°C'ye genişletmeyi, oda sıcaklığında analize kıyasla sonuç elde etme süresini 10 dakikaya indirmeyi mümkün kılar (20 dakika), aynı duyarlılığa ulaşılması koşuluyla, oda sıcaklığında gerçekleştirilen analize kıyasla analizin duyarlılığını artırın. 2 n. ve 7 z.p. f-ly, 5 ill., 4 sekme., 8 pr.

Buluş tıpla, yani laboratuvar teşhisleriyle ilgilidir ve paroksismal gece hemoglobinürisini teşhis etmek için kullanılabilir. Bunu yapmak için test kan örneği monoklonal antikorlar CD235aCD59CD71 ile boyanır. Eritrositler ve retikülositler arasında bir PNH klonunun varlığı, transferrin için bir reseptör olan CD235a kapısı - bir paneritrosit belirteci ve CD71 - tarafından izole edilen retikülositlerin zarı üzerinde koruyucu protein CD59'un yokluğu ile değerlendirilir. Retikülositler arasında PNH klonunu değerlendirmek için CD71+ kapısında en az 20.000 olay toplanır; 100 CD59 pozitif retikülosit varlığında, bir PNH klonunun yokluğu yargılanır ve paroksismal nokturnal hemoglobinürinin yokluğu teşhis edilir. Klinik semptomları olan bir hastada negatif CD59 retikülositleri tespit edilirse ve elde edilen göstergelerin değeri 1'den fazlaysa, bir PNH klonunun varlığı hakkında tanısal bir sonuç verilir ve paroksismal gece hemoglobinüri tanısını doğrulamak için ek bir çalışma önerilir. uluslararası standartlaştırılmış protokole göre. CD59-negatif retikülositler tespit edilirse ve elde edilen göstergelerin değeri 0.1-1 ise, küçük bir PNH klonunun varlığı değerlendirilir ve değerinde bir artış için 6 ay sonra PNH klonunun yeniden belirlenmesi önerilir ve paroksismal noktürnal hemoglobinüri gelişimi ve bu klon boyutunun doğrulanması üzerine, klinik belirtiler olmaksızın subklinik bir paroksismal nokturnal hemoglobinüri formu teşhis edilir. CD71+ hücrelerinin multiparametrik geçitlemesinin kullanılması, enkaz, çiftler ve spesifik olarak bağlanmamış monoklonal antikorların analizden çıkarılmasını mümkün kılar. 1 hasta.

Bu hasta grubunda ailesel anemi eğilimi, eşlik eden konjenital anomaliler ve yenidoğan döneminde anormallikler yoktur. Aplastik anemi çocuklarda ve yetişkinlerde herhangi bir yaşta ortaya çıkabilir, bazen belirli bir zehirlenme veya enfeksiyonla ilişkili olabilir, ancak genellikle böyle bir bağlantı yoktur ve o zaman anemi "idiyopatik" olarak kabul edilir.

6-merkaptopurin, metotreksat, siklofosfamin ve busulfan gibi bazı ilaçlar, kemik iliğini baskılamak için spesifik, öngörülebilir, doza bağımlı bir yeteneğe sahiptir. Bu inhibisyon devam ederse, genellikle ilaç kesildikten sonra hızla kaybolan kemik iliği aplazisine yol açacaktır. Bu ilaçlar, lösemik hücrelerin büyümesini engellediklerinde olduğu gibi aynı mekanizma yoluyla normal kemik iliği hücrelerine zarar verir. Eylemlerinin biyokimyasal ilkeleri oldukça iyi anlaşılmıştır. Bu kategori ayrıca kemik iliğine radyasyon hasarını da içerir.

Normal terapötik dozlarda kullanılan kinakrin, kloramfenikol, fenilbutazon ve antikonvülsanlar gibi diğer ilaçlar çok az sayıda insanda derin kemik iliği aplazisine neden olabilir ve bu aplazi önceden tahmin edilemez. Genellikle geri dönüşümsüzdür ve hastaların yaklaşık yarısı ölür. Bu kategori ayrıca DDT ve bazı organik çözücüler gibi insektisitlerle zehirlenmeyi de içerir. Aneminin belirli bir ilaca bağlı olup olmadığı genellikle belirsizdir. Böyle bir bağlantı için gerekli koşul, son 6 ay içinde ilaç kullanımıdır. Bunlardan en ünlüsü ve üzerinde çalışılanı kloramfenikoldür. Bu ilaç, Scott ve arkadaşları tarafından tanımlanan edinsel aplastik anemili hasta grubunda ve Shahidi'deki aynı hasta çocuk gruplarında bilinen etiyolojik ajanlar listesinin başında yer almaktadır. Gurman, 8 yıl boyunca Sidney'de hastalığın, beklendiği gibi kloramfenikol alımıyla ilişkili olduğu 16 vaka gözlemledi. Herhangi bir tehlikeli ilaca bilinen maruziyeti olmayan ve kloramfenikol dahil çeşitli ilaçlara maruz kaldığı bilinen popülasyonlarda ölümcül edinilmiş aplastik aneminin mutlak insidansı.

Kloramfenikol ile tedavi, aplastik anemi geliştirme olasılığını 13 kat artırır, ancak bu artışın küçük olduğu da açıktır. Diğer ilaçlar için risk daha da azdır. Bununla birlikte, İngiliz İlaç Güvenliği Komitesi, tifo ateşi ve hemofilik influenza menenjiti dışındaki tüm hastalıklar için sistemik kloramfenikol, ancak dikkatli klinik ve genellikle laboratuvar araştırmalarının ardından başka bir antibiyotiğin yeterli olmayacağını gösteren tavsiye eder. Banal bir enfeksiyon için asla sistemik olarak kullanılmamalıdır.

Kloramfenikolün etkisi altında aplastik aneminin gelişme mekanizması belirsizdir. Aplastik aneminin ortaya çıkması, tedavi dozu ve süresi ile ilişkili olmadığı gibi duyarlı kişilerde yetersiz atılım ile açıklanamaz. Normal kemik iliği hücrelerinde nükleik asit sentezinin in vitro baskılanması gösterilebilir, ancak sadece in vivo kullanılanı aşan bir ilaç konsantrasyonunda. Mastitis tedavisi gören ineklerin sütünde küçük miktarlarda kloramfenikolün alınabileceğine ve bu küçük miktarların kemik iliğini daha sonra uygulanan terapötik dozlara karşı duyarlı hale getirebileceğine dair spekülasyonlar vardır. Ayrıca, tek başına kullanıldığında muhtemelen zararsız olan diğer ilaçlarla henüz keşfedilmemiş bir sinerjizm olduğu öne sürülmüştür. Kloramfenikolün neden olduğu pansitopenik letal aplazinin etiyolojisi tartışılırken, bu ilacı alan hastaların önemli bir bölümünün kemik iliğinde tamamen farklı, geri dönüşümlü ve doza bağımlı bir depresyona sahip olduğuna dikkat edilmelidir. Kloramfenikol ile tedavi edilen 22 hastanın 10'unda, erken kemik iliği eritroblastlarında çok sayıda büyük vakuol bulundu ve buna sıklıkla eritrosit ve retikülosit sayısında bir düşüş eşlik etti. Bu değişiklikler ilacın kesilmesinden bir hafta sonra kaybolur. Görünüşe göre, gelişimleri artan dozlar, plazmadan gecikmeli klirens ve hızlandırılmış eritropoez ile kolaylaştırılmıştır. Aynı vakuoller fenilalanin veya riboflavin eksikliğinde de görülebilir.

Diğer ilaca bağlı aplazilerin etiyolojisi ile ilgili olarak, belki de ilaca bağlı tipte bağışıklık mekanizmalarının etkisini varsaymak her zaman cazip olmuştur. Ancak, bu mekanizmalar hiçbir zaman kanıtlanmamıştır. Sadece bir klinik durumda, yani transfüzyon alan immünolojik olarak yetersiz bebeklerde graft-versus-host hastalığı, aplastik aneminin immünolojik kökeni belirlenmiştir. Hassas bir hastada kazara DDT'ye yeniden maruz kaldıktan sonra belirgin bir anafilaktoid reaksiyonun gelişmesi de bir bağışıklık mekanizmasını düşündürür. Newig ilaca bağlı aplazi için üç açıklama önerdi: a) örneğin benzen ile kronik endüstriyel temastan sonra kemik iliği hücreleri üzerindeki doğrudan ve toksik etkiler; b) tezahürleri küçük bir dozla temastan sonra hızla ortaya çıkan gerçek alerji; c) yüksek dozlarla uzun süreli temas, yani "yüksek doz alerjisi". Bu en yaygın biçimdir. Yazar bunu öncelikle hücre zarlarına verilen hasarla açıklıyor. Tek yumurta ikizlerinde kloramfenikol ile teması takiben bir kan diskrazisi vakasının gösterdiği gibi, genetik bir yatkınlık da önerilebilir. Neuwig'in ilaca bağlı aplastik anemi hakkındaki inceleme makaleleri yakın zamanda Lancet'te yayınlandı.

Aplastik aneminin gelişmesinden önceki viral enfeksiyonla bağlantılı olarak da benzer problemler ortaya çıkar. Bu fenomen enfeksiyöz hepatitte iyi çalışılmıştır. 4 ila 19 yaşları arasındaki 5 hastada aplastik anemi, hepatit başlangıcından 1-7 hafta sonra gelişti. Schwartz ve arkadaşları tarafından 3 vaka dahil olmak üzere bir dizi benzer vaka tanımlanmıştır. Bu yazarlar, enfeksiyöz hepatitte genellikle granülosit, trombosit ve hemoglobin sayısında geçici bir azalma olduğunu ve çok az sayıda hastada kemik iliği aplazisine yol açan ilerleyici değişikliklerin, muhtemelen aşağıdakilere bağlı olarak tüm sürecin devamını temsil edebileceğini belirtmişlerdir. genetik yatkınlık. Burada kloramfenikol zehirlenmesi ile bir benzetme görebilirsiniz. Geçici kemik iliği hipoplazisi olan pansitopeni, kızamıkçık ve grip mikrovirüsleri, parainfluenza virüsleri, kabakulak ve kızamık virüsleri dahil olmak üzere RNA virüslerinin neden olduğu bir dizi enfeksiyonla ilişkili olarak da tarif edilmiştir. Farelerde iki deneysel viral enfeksiyon, yani MVH-3 ve Venezüella at ensefalitinin Trinidadian suşu, pansitopeni ve kemik iliği hipoplazisine neden olur ve virüs kemik iliğinden izole edilebilir. Aplastik aneminin diğer nedenlerinde olduğu gibi, otoimmün bir süreçten şüphelenilir.

Edinilmiş aplastik anemi vakalarının yaklaşık yarısında, önceden ciddi bir enfeksiyon veya toksik ajanlara maruz kalma öyküsü saptanamaz. Wolf, 334 edinilmiş pansitopeni vakasını içeren geniş bir materyal yayınladı ve 191 vakada, yani %57.2, anemi idiyopatik olarak kabul edildi.

Gurman'ın materyalinde, idiyopatik anemili hastaların nispi sayısı daha azdı, yani edinilmiş aplaziden muzdarip 104 hastadan 28'i. Shahidi'nin materyaline göre 17 olgunun 5'inde ve Desposito'nun materyaline göre 9 olgunun 5'inde anemi idiyopatikti. Bu vakalardaki hastalıkların, tanımlanamayan bir virüsün neden olduğu enfeksiyondan kaynaklanıp kaynaklanmadığı henüz belli değil. En azından bazı idiyopatik vakalar, aplastik fazda prelösemi veya lösemi olarak adlandırılabilecek ayrı bir gruba uyuyor gibi görünmektedir.

Mehlhorn ve arkadaşları, güçlü ve inkar edilemez kanıtlara dayanarak 1 yıl 11 ay ile 6 yaş arasında aplastik anemi teşhisi konan 6 çocuğu tanımladılar, ancak bu çocukların tamamı daha sonra 9 hafta ila 20 ay sonra akut lenfoblastik lösemi geliştirdi. Bu 6 hastada, bir ortak özellik gözlendi - ilk kortikosteroid tedavisinde aplastik anemiye kıyasla normalden daha hızlı bir terapötik etki. Aynısı Gurman tarafından da not edildi ve biz de bu etkiyi 3 ay sonra akut lenfoblastik lösemi gelişen bir vakada gözlemledik. Pansitopeninin tek başına kortikosteroid tedavisine verdiği bu hızlı yanıt, diğer aplastik anemi vakalarındaki olağan yanıt eksikliğinden belirgin şekilde farklıdır. Benzen ve kloramfenikol tarafından indüklenen aplastik aneminin benzer bir lösemik dönüşümünün tarif edildiğine dikkat edilmelidir.

Edinilmiş aplastik anemi belirtileri

Edinilmiş aplastik anemi, anayasal form ile yaklaşık olarak aynı semptomlar ve nesnel belirtilerle karakterizedir, ancak pigmentasyon, kısa boy ve iskelet veya iç organların konjenital anomalileri yoktur. Hastalığın ortaya çıktığı yaş aralığı, maksimum insidansın "zirvesinin" 3. ve 7. yıl arasında olduğu kloramfenikolün neden olduğu olası aplazi dışında, daha geniştir. Büyük Kurt'ta hastalığın edinilmiş formu olan hastaların %43'ü: ve büyük Gurman özetinde %67'sinin aplastik yatkınlığa yatkın olduğu bilinen ilaçlar veya kimyasallarla, genellikle son 6 ay içinde, bazen tekrar eden bir temas öyküsü vardı. anemi.

Newman ve yardımcı yazarlar, idiyopatik pansitopenili 14 çocuğu tanımladılar ve anemi, ateş ve purpura olmak üzere üç ana belirtiye ek olarak, önemli negatif belirtilerin, yani hepatosplenomegali, lenfadenopati, oral ülser ve sarılığın yokluğu olduğunu kaydettiler. Ancak ağız mukozasında purpura ve diş etlerinden kanama görülebilir. Bazen lokal sepsis ile ilişkili inflamatuar lenfadenopati olabilir.

Çocuğun kırmızı idrarı varsa, paroksismal gece hemoglobinüri gelişimi varsayılmalıdır.

Laboratuvar teşhisi

Periferik kanın resmi, anayasal formdaki ile yaklaşık olarak aynıdır, ancak nötropeni daha derindir, bazen agranülositoza yaklaşır. Ek olarak, neredeyse tamamen hemik hücrelerden yoksun yağlı alanlardan oluşan kemik iliğinin daha belirgin bir aplazisi vardır. Kemik iliğinde halen mevcut olan eritroid öncüllerinin %5-90'ında megaloblastik değişiklikler ve diğer "diseritropoez" belirtileri gözlenir. Doza bağlı kloramfenikol ile indüklenen geri dönüşümlü kemik iliği baskılanması olan hastalarda, fenilalanin eksikliğinde görülene benzer şekilde kemik iliğinde eritroid ve miyeloid progenitörlerinde vakuolizasyon gözlenir. Fetal hemoglobin düzeyi, yapısal formlardakiyle aynı ölçüde, ancak daha az kalıcı olarak yükselebilir. %400 µg'nin (veya %5) üzerindeki seviyelerin edinilmiş hastalık için daha iyi bir prognoza işaret ettiği düşünülmüştür, ancak aynı kurumda tedavi edilen daha sonraki vakaların analizleri, muhtemelen farklı bir yöntemin kullanılması nedeniyle bu bulguları doğrulamamıştır.

Konstitüsyonel forma sahip hastaların yaklaşık yarısında gözlenen aminasidüri yoktur ve kemik yaşında gecikme yoktur.

Bu hastalığı olan yetişkin hastaların yarısından fazlasında, IgG seviyeleri normalin altında olan lenfopeni ve hipogamaglobulinemi vardır.

Paroksismal gece hemoglobinüri dahil ilişkili hemoliz. Aplastik anemili bazı hastalarda eritrositlerin ömrü kısalır. Bu, eritrositlerdeki kusurun bazen sadece nicel değil, aynı zamanda niteliksel olduğunu da gösterir. Aynı zamanda dalakta artan sekestrasyon gözlemlenebilir. Bu durumda olması gereken retikülositoz, genellikle kemik iliği aplazisi nedeniyle dışlanır. Bazı durumlarda haptoglobin içeriği azalır. Bu hastalıkta hemoliz nedenlerinden biri, paroksismal noktürnal hemoglobinüri (PNH) ve aplastik aneminin alışılmadık bir kombinasyonudur. Aplastik anemisi olan bir hastada yüksek bilirubin veya spontan retikülositoz olduğunda bu sendrom varsayılmalıdır. Tanı, PNH için bir serum asit hemoliz (SHA) testinin yanı sıra hemosiderinüri testleri ile doğrulanır. Bazı durumlarda, PNH yalnızca en hassas eritrosit popülasyonu incelenerek saptanabilir, yani 20-35 ml kanın 500 G'de santrifüjlenmesinden sonra lökosit-trombosit pıhtısının altındaki tabakanın dikkatlice pipetlenmesiyle elde edilen retikülositler ve genç eritrositler.

Genellikle, bu sendromda, PNH, genellikle eritropoez belirli bir dereceye kadar düzeldikten sonra, aplastik aneminin arka planında tespit edilir. Bazı durumlarda, ters sekans gözlendi, yani PNH'nin arka planına karşı şiddetli veya ölümcül kemik iliği yetmezliği gelişti. Lewis ve Days, aplastik anemili tüm hastalarını sistematik olarak test etti ve 46 kişiden 7'sinin (%15) PNH için laboratuvar kriterlerine sahip olduğunu buldu. Bunlardan ikisi daha sonra tipik bir PNH resmi geliştirdi. Bu konuya farklı bir bakış açısıyla yaklaşan yazarlar, PNH'li 60 hastanın en az 15'inde başlangıçta aplazi belirtileri olduğunu bulmuşlardır. PNH genellikle yetişkin erkeklerin hastalığıdır. Bununla birlikte, aplazi ile ortaya çıkan form daha genç yaşta ortaya çıkıyor ve çocukları etkileyebiliyor. Gardner, 6 ila 25 yaşları arasında olmak üzere bu tür 11 hasta gözlemledi, 2 hasta 7 ve 9 yaşındaydı. Bu ikisi erkekti. 2 yıl 5 yıl süren PNH tanısından önce aplastik anemileri vardı.

Bu kombine sendromun ilginç bir özelliği, aplastik aneminin Fanconi tipi olabilmesi, kloramfenikol, sakinleştiriciler, böcek öldürücüler, herbisitler ve diğer maddelerle temastan sonra kazanılabilmesi ve idiyopatik olabilmesidir. Lewis ve Days, ana bağlantının kemik iliği aplazisi ve PNH arasında olduğuna ve kemik iliği hasarına neden olan etiyolojik faktörler ile PNH arasında olmadığına inanmaktadır. Bu yazarların her ikisi de Gardner ve Bloom'un yanı sıra, aplazi döneminde, kemik iliği kök hücrelerinin somatik mutasyonunun meydana geldiğini ve bu da PNH'de bulunan ve üretilmeye başlayan ikincil bir patolojik eritrosit klonunun ortaya çıkmasına neden olduğunu öne sürüyor. sonraki kemik iliği rejenerasyonu sırasında. PNH'deki karakteristik kusurun eritrositlerde yoğunlaşmasına rağmen, granülositlerin de değiştiği eklenmelidir. "Cilt penceresi" yöntemi, fagositik aktivitelerinde ve alkalin fosfataz aktivitesinde bir azalma gösterir. Tersine, komplike olmayan aplastik anemide granülositlerdeki alkalin fosfataz aktivitesi genellikle yükselir.

Tedavi

Tedavi prensipte yapısal aplastik anemi ile aynıdır, ancak biliniyorsa ilaç veya toksik ajanla tüm temasın kesilmesine özen gösterilmelidir. Yeniden maruz kalma, ilk aplazi atağı geçirmiş hastalarda ölümcül bir nükse neden olabilir ve hatta ölümcül anafilaktik şoku tetikleyebilir.

Anemi semptomlara neden olacak kadar şiddetliyken, genellikle %4-6 g hemoglobin düzeyinde, destekleyici önlemler arasında kan nakli de yer alır. Eritrosit kitlesi sadece belirgin kanamaların tedavisi için kullanılmaz ve seviyeyi %8-9 g'a çıkarmak için çaba gösterilmelidir. Daha yüksek hemoglobin seviyeleri, eritropoezin daha şiddetli inhibisyonuna yol açar. Trombositopenik kanama, trombositten zengin plazma veya trombosit konsantrelerinin (4 U/m2) hızlı infüzyonları ile tedavi edilir. Kas içi enjeksiyonlardan kaçınılmalıdır. Tüm prosedürler, katı asepsi ve enfeksiyonların bakterisidal antibiyotiklerle güçlü bir şekilde tedavisini gerektirir. Nötropeni genellikle edinilmiş aplastik anemi formlarında özellikle derin olduğundan, nötropenik faz sırasında özel bir nötropenik rejim kullanılabilir: yemeklerden sonra ağzın günde 4 kez %0.1 gibitan solüsyonu ile yıkanması (deterjansız saf bir antiseptik ve boyalar); burun deliklerinin günde 3 kez naseptin merhem ile yağlanması; günlük banyo. Günde 2 kez (dişleri fırçalamak yerine) %1 gibitan diş jeli ile diş etlerinin yağlanması. Hastalar hastanedeyken, hastane mikroflorası ile enfeksiyon riskini azaltmak için ters bariyerli bir tür izolasyon gereklidir. Profilaktik sistemik antibiyotik tedavisi, mantar enfeksiyonlarına ve antibiyotiklere dirençli enfeksiyonlara duyarlılığı arttırdığı için kesinlikle reddedilmelidir. Yeni başlayan enfeksiyon, kanama eğiliminde artış ile ortaya çıkabilir. Enfeksiyon ile sadece trombosit sayısı azalmakla kalmaz, aynı zamanda belirli bir trombosit sayısı ile hemorajik eğilim artar.

androjenler. Androjenler + kortikosteroidler ile spesifik tedavi, anayasal formlarla aynı şekilde gerçekleştirilir, yani. oral oksimetalon - günde 4-5 mg / kg + prednizolon 20 kg'a kadar olan çocuklarda günde 2 kez 5 mg, 5 mg 3 kez 20 ila 40 kg vücut ağırlığı olan bir günde ve 40 kg'dan fazla vücut ağırlığı olan günde 4 kez. Fark, kazanılmış anemi formlarında, etkinin hastaların daha küçük bir yüzdesinde elde edilmesi, tedaviye yanıtın daha yavaş olması, ancak tedavi edilebilen hastalarda androjen ve kortikosteroidlerin kesilmesinden sonra remisyonun devam etmesi gerçeğinde yatmaktadır. Fanconi anemisinde, bu tedavinin kesilmesinden sonra kemik iliği yetmezliği hızla tekrarlar. Bu durumun, kazanılmış bir formu anayasal olandan ayırt ederken zor durumlarda kullanılabileceği bile belirtildi.

Androjenler ve steroidlerle yapılan tedavinin ilk sonuçları çok etkileyiciydi. Edinilmiş aplastik anemisi olan 17 çocuktan (12'sinde toksik, 5'inde idiyopatik) 10'unda kalıcı retikülositoz vardı ve bu, androjenler ve kortikosteroidlerle 1-7 aylık kombine tedaviden sonra %5-15'te zirve yaptı. Bu çocuklardan 9'u hayatta kaldı ve ardından hemoglobin içerikleri arttı. 3 çocukta başka reaksiyonlar olmaksızın geçici retikülositoz gözlendi. Bu hastalarda retikülositozun ortaya çıkma zamanlaması ile hemoglobindeki artış arasındaki tutarsızlık hemoliz ile açıklanmıştır. Ek olarak, kemik iliği rejenerasyonunun erken evresinde oluşan eritrositler, normal serum demir seviyeleri ve yüksek eritrosit serbest protoporfirin ile hipokromiktir, bu da hemoglobin sentezinde hücresel bir bloğu gösterir. Hemoglobinde maksimum artış, androjen tedavisinin başlamasından 2-15 ay sonra gözlendi. Tedavinin erken evresindeki dinamiklerde kemik iliği çalışmasında, daha sonra tedaviye yanıt geliştiren hastalarda olgunlaşan ve eritroid odaklara dönüşen retiküler hücre gruplarının bulunduğu bulundu. Hemoglobin artışı olan tüm hastalarda, segmentli hücre sayısında 1 µl'de 1500'den fazla bir artış da gözlendi, ancak trombosit reaksiyonu daha az belirgindi ve 1 µl'de sadece 25.000-90.000'e ulaştı. Genellikle segmentli nötrofillerin sayısı hemoglobin seviyesinden daha yavaş artarken, trombosit sayısı daha da yavaş arttı. Bu hastalarda androjen tedavisinin toplam süresi 2 ila 15 ay arasında değişmekte olup, tedavi kesildikten sonra süresiz olarak remisyonda kalmıştır. Tedaviye olumlu yanıt veren 2 hastada idiyopatik aplazi, 8 hastada toksik aplazi vardı. Yanıt vermeyen hastalardan 3'ünde idiyopatik, 4'ünde toksik aplazi formu vardı. Yazarlar, yüksek doz kortikosteroidlerle uzun süreli tedavinin, kemik iliğindeki yağ dokusu miktarındaki artıştan dolayı kemik iliği fonksiyonunu bozabileceğini öne sürdüler.

Androjenler + steroidler kullanılarak Desposito ve arkadaşları tarafından benzer sonuçlar elde edilmiştir. Edinilmiş aplastik anemisi olan 9 çocuktan 5'inde, stabil olduğu ortaya çıkan belirgin bir hematolojik iyileşme meydana geldi. 2 çocukta idiyopatik, 3 çocukta toksik form vardı. (Tedaviye yanıt vermeyen hastalardan 3'ünde idiyopatik, 1'inde toksik anemi vardı.) Benzer zamanlama oranları gözlendi. Tedavinin başlamasından sadece 9-17 ay sonra trombosit sayısı önemli ölçüde arttı ve o zaman bile bir hastada sadece 50.000'e ve 2 hastada 1 µl'de 100.000'e ulaştı, hemoglobin ve segmentli hücreler normaldi. Tedavi 7-11 ay sonra durduruldu; 5 hastadan 4'ünde hemoglobin seviyesi 1-3 ay süreyle geçici olarak düştü. Hastalar 1 ila 3 yıl arasında takip edildi. Bu süre zarfında hiçbir nüks yaşamadılar.

Bu iki rapora göre, çocukların yarısından biraz fazlası olumlu yanıt verdi ve tedavi aplastik aneminin hem idiyopatik hem de toksik formlarında etkiliydi. Toksik formları olan hastalar arasında reaksiyonların sıklığı belki biraz daha yüksekti.

Bu makalelerin sonuncusu çıkana kadar, androjen tedavisi olmadan hastaların nadiren hayatta kaldığı izlenimi vardı. En son iki raporda belirtilen artan sağkalım, antibiyotikler ve trombosit transfüzyonları dahil semptomatik tedavinin başarısından kaynaklanmaktadır. Özellikle, Hayne ve arkadaşlarının materyali, hastalığın doğal seyrine yeni bir ışık tutuyor ve androjenlerle tedavi edilen ve androjen içermeyen hastalar arasındaki boşluğu dolduruyor gibi görünüyor (33 hastanın 30'unda anemi etiyolojisi idiyopatik değil toksikti. , bu daha iyi prognozu açıklayabilir). Gurman, Boston ve Sidney'den edinsel aplastik anemisi olan 104 hasta çocukla ilgili bir derlemede, androjenler ve kortikosteroidler ile kombine tedavi ile genel sağkalımın %34 ve tek başına kortikosteroidler veya destekleyici tedavi ile %19 olduğunu belirtmektedir.

Aynı Boston Çocuk Hastanesinden alınan sonuçları da içeren daha yeni raporlarda, veriler daha az tatmin edicidir. Androjenler, kortikosteroidler ve destekleyici bakıma rağmen mortalite %70-80 idi. Hayatta kalma eğrisi iki fazlıdır. Birçok hasta ilk 6 ay içinde enfeksiyon ve kanama nedeniyle erken ölmektedir. Şu anda, şiddetli edinsel aplazili hastalarda androjenlerin etkinliği sorgulanmaktadır.

prognostik işaretler. Gurman'ın çalışmasına göre, enfeksiyonlardan, özellikle enfeksiyöz hepatitlerden veya kısa bir kloramfenikol küründen sonra aplastik anemide prognoz daha kötü görünüyor. Prognoz, idiyopatik vakalarda ve ayrıca antikonvülzanlar veya tekrarlanan kloramfenikol kürleri ile açıklanabilen anemili hastalarda daha iyidir. Kısa bir kürden sonra aplastik anemi gelişen bir çocuğun kemik iliğinin, pansitopenisinin sadece tekrarlanan ilaç kürlerinden kaynaklandığı bir çocuğa göre genellikle daha fazla depresif olduğu öne sürülmüştür. Şiddetli kemik iliği hiposelülerliği olan çocuklarda, kemik iliğinde %85'ten fazla lenfosit sayısı, 1 µl'de 200'den az nötrofil veya 1 µl'de 20.000'den az trombosit sayısı ile özellikle ciddi bir prognozun belirtildiği bilinmektedir. . Bu verilere dayanarak, Gamitt ve arkadaşları, bu cinsin hastalarının sadece yaklaşık %10'unun idame tedavisi + androjenler ve steroidlerle hayatta kaldığı göz önüne alındığında, hepatit sonrası şiddetli aplazinin erken kemik iliği transplantasyonu için bir endikasyon olarak kabul edilmesi gerektiğini öne sürmüştür.

Kemik iliği nakli . Şiddetli edinilmiş aplastik anemilerde androjen tedavisinin başarısız olması nedeniyle, araştırmacılar kemik iliği nakli olasılığının olasılıklarına yöneldiler. 10 vakanın 5'inde tek yumurta ikizlerinden intravenöz kemik iliği infüzyonlarından sonra, kemik iliği fonksiyonunda hızlı bir iyileşme oldu. Tek yumurta ikizleri mevcut değilse, greftin olası reddi veya kök salması durumunda graft-versus-host hastalığı ciddi bir engeldir. Bununla birlikte, normal kardeşler arasında, kalan doku uyumluluk lokuslarını ortaya çıkarmak için HL-A tiplemesi ve karışık lenfositik kültür ile eşleştirilen doku uyumlu bir donör bulunma olasılığı 4'te birdir. Bu önlemler greft uyumsuzluğu sorununu azaltır ancak tamamen çözmez. Ret olasılığını azaltmak veya ortadan kaldırmak için, kemik iliği transplantasyonundan önce yüksek dozlarda siklofosfamid ve transplantasyondan sonra bir metotreksat kürü gibi ek immünosupresif tedavi gereklidir. Bu terapötik önlem alınmadan önce, hastanın steril bir ortamda emzirilmesi, kritik ilk günlerde lökosit ve trombosit transfüzyonları ve kapsamlı deneyime sahip bir tıbbi ekibin varlığı dahil olmak üzere yoğun destekleyici bakım yapılmalıdır. Thomas ve diğerleri, kemik iliği toplama, işleme ve aşılama tekniğini açıklar. Şiddetli aplastik anemili 24 hasta (8'i 14 yaş altı dahil) (14 idiyopatik anemi vakası, hepatit sonrası 4 anemi vakası, 4 ilaca bağlı anemi vakası, 1 vaka PNH, 1 vaka Fanconi anemi vakası), kim yaptı? geleneksel tedaviye yanıt vermeyen, HL-A'da özdeş kardeşlerden nakiller aldı. 21 hastada, çoğu durumda, genetik belirteçler kullanılarak belirlendiği üzere, donör hücrelere bağlı olan kemik iliğinin hızlı yenilenmesi gözlemlendi. 4 hastada greft reddedildi ve öldüler. Dört hasta ikincil bir hastalıktan öldü, 11 kişi işleyen organlarla yaşıyor. Gözlem süresi 141 günden 823 güne kadardı. On hasta normal aktif yaşam tarzına döndü. Seattle'dan bir grup araştırmacı tarafından elde edilen bu sonuçlar, diğerlerini bu yöntemi kullanmaya teşvik etti. Şek. 25, Royal Marsden Hastanesinde kemik iliği nakli ekibi tarafından gerçekleştirilen Birleşik Krallık'taki ilk vakadaki nakil sonucunu göstermektedir. Bunun, ilk yardım talebinde kötü prognostik belirtileri olan bireysel hastaların daha ileri tedavisi olması mümkündür.

Farklı tedavi türleri. Diğer tedavilere uygun olmayan, hücresel kemik iliği olan hastalarda splenektomi endikedir. Bununla birlikte, bu operasyonun varsayılan etkisi, geniş bir vaka grubunun analizinde doğrulanmadı ve trombositopenili bu hastalarda splenektomi oldukça tehlikeli olduğundan, genellikle önerilmemektedir. Olası bir istisna, hemoliz elementi olan ve dalakta eritrosit sekestrasyonu saptanan hastalardır. Splenektominin, trombosit transfüzyonunun artık yardımcı olmadığı aplazili hastalarda trombosit sağkalımını arttırdığı gösterilmiştir.

Aplastik anemide intravenöz fitohemagglutinin önerilmiştir, ancak şu ana kadar toplanan veriler bu yöntemin yararlı olduğu fikrini desteklememektedir. Mide bulantısı, kusma ve tiroid bezi büyümesine neden olan kobalt tedavisi gibi demir tedavisi de kontrendikedir. Folik asit ve B12 vitamini megaloblastik değişiklikleri olan hastalarda bile etkisizdir.

Kadın dergisi www.

Materyaller RUDN Üniversitesi ders kitabından sunulmaktadır.

anemi. Klinik, tanı ve tedavi / Stuklov N.I., Alpidovsky V.K., Ogurtsov P.P. - M.: LLC "Tıbbi Bilgi Ajansı", 2013. - 264 s.

Yazarları belirtilmeden materyalleri kopyalamak ve çoğaltmak yasaktır ve yasalarca cezalandırılabilir.

Paroksismal noktürnal hemoglobinüri (PNH), kan hücrelerinin zarındaki bir kusurla ilişkili edinilmiş bir klonal hemolitik anemidir, bu nedenle hastalık, membranopatiler grubunda kabul edilir ve bu grubun hastalıkları arasında edinilmiş tek membranopatidir. PNH'de membran defektine yol açan mutasyon pluripotent kök hücre seviyesinde meydana gelir ve mutasyonun nedeni belirsizliğini korur.

PNH, popülasyonun 1:500.000 sıklığında meydana gelir. Her yaş grubundan insan hastalanır, ancak daha sık - 30 - 40 yaşlarında. Erkekler ve kadınlar eşit sıklıkta hastalanırlar.

Etiyoloji ve patogenez

Bir genin nokta mutasyonu PİGA bir pluripotent kök hücrenin (PSC) 22 kromozomu veya X kromozomu üzerinde, kan hücrelerinin yüzeyinde fosfatidilinolinik asit ve proteinlerin oluşumunun bozulmasına yol açar. CD 55 ve CD 59, normal hücrelerde bir kaskad oluşumu nedeniyle aktive edilmiş komplemanın membran üzerindeki zararlı etkisini bloke eden bir sistem oluşturur. CD 5b -9 - hücre zarı üzerinde proteolitik etkiye sahip bir kompleks.

Bu nedenle, kan hücrelerinin yüzeyinde kompleman işlevini engelleyen faktörlerin yokluğu, kusurlu eritrositler, nötrofiller ve trombositlerin parçalanmasına yol açar.

PNH ile hastaların kanında iki klon vardır: normal ve patolojik ve klinik tablo ve hastalığın şiddeti büyük ölçüde bu klonların oranına bağlıdır.

klinik

Aktive edilmiş komplemanın proteolitik etkisi, kendini gösteren kusurlu eritrositlerin intravasküler yıkımına yol açar. hemoglobinüri. Kompleman aktivasyonu, pH'ın asit tarafına kayması nedeniyle gece uyku sırasında meydana gelir.

Klinik olarak, uyku sırasında hemoliz, sabah diürezi, halsizlik şikayetleri, baş dönmesi ve sklera sarılığının ortaya çıkması sırasında siyah idrarın salınması ile kendini gösterir. Ek olarak, hemoliz bulaşıcı hastalıkları ve bazı ilaçları provoke edebilir.

Hemoliz ile ilişkili anemik semptomlara ek olarak, PNH kliniğinde önemli bir rol oynar. trombotik komplikasyonlar, tromboplastin salınımı ve tahrip olmuş hücrelerden bir dizi aktif enzimin neden olduğu.

Çoğu zaman, hastanın ilk şikayetlerinden biri, çeşitli akut karın patolojilerini simüle eden karın ağrısıdır. Karın ağrısı, küçük mezenterik arterlerin trombozu ile ilişkilidir.

tromboflebitPNH'li hastaların %12'sinde görülür ve farklı şekillerde ilerleyebilir. Seçeneklerden birinde, hastaların krizler dışındaki durumu oldukça tatmin edicidir, içerik Hb – yaklaşık 80 – 90 g/l. Diğer hastalarda, şiddetli hemolitik krizler birbiri ardına gelir ve şiddetli anemiye yol açar. Bunlara sıklıkla trombotik komplikasyonlar eşlik eder.

laboratuvar verileri

Hemolitik kriz sırasında, hemoglobin seviyelerinde 20 g / l ve altına keskin bir düşüş ve kırmızı kan hücrelerinin sayısında paralel bir azalma olabilir. Remisyon döneminde, içerik Hb ve eritrositler artar, ancak nadir durumlarda normun alt sınırına ulaşır.Çoğu membranopatiden farklı olarak, PNH'deki eritrosit zarındaki bir kusura, patolojik eritrositlerin şeklindeki karakteristik değişiklikler eşlik etmez. Anemi çoğu durumda normositik ve normokromiktir. Bununla birlikte, idrarda önemli bir demir kaybı (hemoglobinüri ve hemosiderinüri sonucu) ile eritrosit hipokromisi gelişir. Retikülositlerin içeriği artar, ancak benzer bir hemoliz yoğunluğuna sahip konjenital membranopatilerden çok daha az ölçüde. PNH'li eritrositlerde anormal hemoglobinler ve enzimlerin aktivitesinde (asetilkolinesteraz hariç) bir azalma tespit edilmedi. Eritrositlerin ozmotik direnci değişmez. PNH hastalarının eritrositlerinin steril koşullar altında inkübasyonu sırasında, otohemoliz normalden fazladır, ancak bu, glukoz eklendiğinde azalmaz.

Çoğu durumda lökosit sayısı nötropeni nedeniyle azalır. Bazen lökogramda sola kayma olur.

Trombosit sayısı da genellikle azalır. Trombosit fonksiyonları bozulmaz.

Kemik iliği incelenirken, eritroid hiperplazisi ve kemik iliği hematopoezinin yetersizlik belirtileri, kırmızı hücrelerin ve granülositik elementlerin olgunlaşmasının ihlali ve ayrıca megakaryositlerin sayısında, genellikle ihlali ile birlikte bir azalma şeklinde tespit edilir. trombositlerin bağlanması. PNH'li bazı hastalarda, dishematopoez belirtileri ile birlikte, aplastik aneminin özelliği olan kemik iliği hipoplazisi bulunur.

Daha önce kurulmuş hematopoetik aplazisi olan hastalarda komplemana duyarlı PNH eritrositlerinin ve intravasküler hemoliz semptomlarının bulunduğu durumlarda, aplastik aneminin arka planına karşı gelişen PNH sendromu teşhisi konur.

Bununla birlikte, şiddetli hemolitik krizler ve diğer yan etkiler (enfeksiyonlar, bazı ilaçlar, vb.) ile kemik iliği hematopoezinin tükenmesi nedeniyle aplastik anemi ile sonuçlanan nadir PNH vakalarının farkında olunmalıdır.

PNH'nin önemli bir laboratuvar belirtisi hemoglobinüridir. PNH'deki eritrositlerin intravasküler yıkımına bağlı olarak plazmadaki serbest hemoglobin içeriği, hemolizin şiddetine bağlı olarak %11 ila 280 mg arasında değişir (%4 mg'a kadar bir oranda).

Bilirubinin içeriği, esas olarak konjuge olmayan fraksiyon nedeniyle genellikle keskin bir şekilde artmaz. PNH'deki serum demir seviyesi, hastalığın evresine bağlıdır: hemolitik krizlerde, hemoglobin demirinin plazmaya salınması nedeniyle ferritinemi gözlenir ve sakin bir seyir döneminde, demir kaybına bağlı olarak görülür. idrar, hipoferritinemi görülür. Demir eksikliği anemisinin aksine, PNH'deki demir eksikliğine, görünüşe göre karaciğerdeki bozulmuş transferrin sentezi nedeniyle toplam ve gizli demir bağlama kapasitesinde eşzamanlı bir azalma eşlik eder.

PNH'li hastaların çoğunda idrar çalışmasında hemoglobinüri tespit edilir. PNH ile hemoglobin, plazma haptoglobin içeriğinde bir azalma ile ilişkili olan plazmada nispeten düşük bir konsantrasyonda idrarda görünür. Hemoglobinin böbrekler tarafından atılması sırasında, bir kısmı geri emilir ve tübüllerin epitelinde hemosiderin şeklinde biriktirilir ve daha sonra idrarla atılır. İlginç bir şekilde, PNH'deki hemosiderinüri, hemolitik krizin dışında da geliştiği için hemoglobinüriye göre daha sık yakalanabilir.

teşhishastalık, karakteristik bir klinik tablo, intravasküler hemoliz laboratuvar bulguları (hemoglobinemi (santrifüjden sonra kan serumunun kırmızı rengi), kana haptoglobinde azalma, hafif dolaylı bilirubinemi, LDH'de artış, hemoglobinüri, hemosiderinüri). PNH tanısı, bu hastalığın karakteristiği olan komplemana duyarlı eritrositlerin saptanmasına dayanır. Bu amaçla kullanılan Hem'in asit testi ve daha hassas sakaroz testi.

Hema testi hazırlanırken, çalışılan eritrositler pH 6.4'e asitlendirilmiş normal serumda inkübe edilir. Bu koşullar altında, yalnızca komplemana duyarlı eritrositler parçalanır. Hastanın kanında az miktarda PNH-eritrosit içeriği ve serumda düşük kompleman aktivitesi ile Hem testinin negatif sonuçlar verebileceği unutulmamalıdır.

Daha hassas olan, çalışılan eritrositlerin ve az miktarda normal serumun izotonik bir sakaroz çözeltisine yerleştirildiği sakaroz testidir. Bir sakaroz ortamında azaltılmış voltaj koşulları altında, komplemanın eritrosit yüzeyinde daha aktif fiksasyonu ve komplemana duyarlı PNH eritrositlerinin lizizi meydana gelir.

Bir PNH klonunun varlığının kanıtı, hücre zarı üzerinde PIG A gen hasarının karakteristik belirtilerinin saptanmasıdır, hemoliz. En güvenilir olanı, monosit granülositlerin incelenmesidir, çünkü çekirdekli hücreler tamamlayıcının etkisine daha az duyarlıdır.

Tedavi

PNH'nin patogenezi hakkında net fikirlerin olmaması nedeniyle, bu hastalığın tedavisi şu anda semptomatiktir.

Anemi ile mücadele etmek için, sıklığı hemolizin ciddiyetine ve kemik iliğinin telafi edici aktivitesine bağlı olan replasman kan transfüzyonları kullanılır. PNH'li hastalarda taze tam kan transfüzyonuna sıklıkla hemoliz artışının eşlik ettiği unutulmamalıdır. Bu reaksiyonun nedeni belirsizdir. PNH'li hastalar, uzun süreli saklamada (7-8 günden fazla) tam kan veya eritrosit kütlesi transfüzyonlarını ve lökosit ve trombositlerden arındırılmış 3-5 kat yıkanmış eritrosit transfüzyonlarını daha iyi tolere eder. PNH tedavisinde yıkanmış eritrosit kullanımı en iyi transfüzyon yöntemidir. İzosensitizasyonun gelişmesi nedeniyle yıkanmış eritrositlere bir reaksiyon da ortaya çıktığında, dolaylı Coombs reaksiyonuna göre bireysel bir donör seçimi gereklidir (Şekil 12).

PNH tedavisinde önemli bir yer işgal edilmiştir. demir preparatları ve androjenik hormonlar. PNH'li hastalar için eritrosit hipokromisinin saptanması ve hastalığın sakin seyri sırasında serum demir seviyelerinde bir azalma olması durumunda demir preparatları ile tedavi önerilir. Demir preparatları dikkatli kullanılmalıdır (küçük dozlarda ve sadece peros ), çünkü PNH'li bazı hastalarda şiddetli hemolitik krizleri provoke etme yetenekleri bilinmektedir.

PNH'de androjenlerin kullanımı, bu hormonların eritropoez üzerindeki uyarıcı etkisine dayanmaktadır. Nerabol veya analoglarının 30-40 mg / gün dozunda atanması, hemolitik ataktan sonra hemoglobin seviyelerinin daha hızlı iyileşmesine katkıda bulunur ve böylece kan transfüzyonu ihtiyacını önemli ölçüde azaltır. Özellikle etkili olan, hematopoetik hipoplazili PNH'de androjenlerin kullanılmasıdır.

Trombotik komplikasyonları tedavi etme taktikleri, trombozun lokalizasyonuna, sürelerine ve pıhtılaşma sisteminin durumuna bağlıdır. Bu komplikasyonun hastanın hayatını tehdit ettiği durumlarda, genel tedavi kurallarına göre ve yeterli dozlarda kompleks trombolitik ve antikoagülan tedavi (fibrinolizin veya ürokinaz, nikotinik asit, heparin ve dolaylı antikoagülanlar) kullanılması gerekir.

Heparin uygulamasından sonra artan hemoliz raporları olduğundan, bu antikoagülan çok dikkatli kullanılmalıdır.

PNH için splenektomi endike değildir, çünkü postoperatif dönem sıklıkla mezenterik damarların trombozu ile komplike hale gelir. Ameliyat riski, yalnızca belirgin hipersplenizm semptomları varsa kabul edilebilir: şiddetli hemorajik sendromun eşlik ettiği sık enfeksiyonlar ve / veya trombositopeni ile komplike olan derin lökopeni.

PNH'den muzdarip çocukların ve yetişkinlerin tedavisi için FDA (Gıda ve İlaç İdaresi) tarafından tescil edilmiş modern bir genetik mühendislik ürünü Eculizumab (eculizumab) (Soliris, SOLIRIS®) geliştirilmiştir. Ekulizumab, insan kompleman proteini C5'e bağlanan ve kompleman aracılı hücre lizizinin aktivasyonunu inhibe eden, glikosile hümanize monoklonal bir antikor olan kappa immünoglobulindir (IgG2/4k). Antikor, bir insan antikorunun hafif ve ağır zincirlerinin değişken bölgelerine gömülü, insan immünoglobulinin sabit bölgelerinden ve fare immünoglobulinin tamamlayıcı-deterministik bölgelerinden oluşur. Ekulizumab, her biri 448 amino asitlik iki ağır zincir ve her biri 214 amino asitlik iki hafif zincir içerir. Molekül ağırlığı 147870 Da'dır. Ekulizumab, kültürlenmiş fare miyelom NS0 hücrelerinde üretilir ve afinite ve iyon değişim kromatografisiyle saflaştırılır. Maddenin üretim sürecinde virüslerin spesifik inaktivasyonu ve uzaklaştırılması süreçleri de yer almaktadır.

Ekulizumab, C5 bileşeni için yüksek bir afiniteye sahip olan insan komplemanının terminal aktivitesini inhibe eder. Sonuç olarak, C5 bileşeninin C5a ve C5b'ye bölünmesi ve terminal kompleman kompleksi C5b-9'un oluşumu tamamen bloke edilir. Böylece, eculizumab kandaki kompleman aktivitesinin regülasyonunu eski haline getirir ve PNH'li hastalarda intravasküler hemolizi önler. Öte yandan, terminal kompleman eksikliğine, başta meningokok enfeksiyonları olmak üzere kapsüllü mikroorganizmalarla enfeksiyon insidansında artış eşlik eder. Aynı zamanda eculizumab, mikroorganizmaların opsonizasyonu ve immün komplekslerin ortadan kaldırılması için gerekli erken kompleman aktivasyon ürünlerinin içeriğini korur. Soliris ilacının hastalarına atanmasına, terminal kompleman aktivitesinde hızlı ve istikrarlı bir azalma eşlik eder. PNH'li hastaların çoğunda, yaklaşık 35 µg/ml'lik bir plazma eculizumab konsantrasyonu, terminal kompleman aktivasyonunun neden olduğu intravasküler hemolizi tamamen inhibe etmek için yeterlidir.

Eşsiz yeni klinik sonuçlar ve hekimlerin hastaların tam yaşamını ve sağlığını korumaları için terapötik fırsatların açılması nedeniyle, Eculizumab klinik denemelerin üçüncü aşamasını gerçekleştirmeden hızlandırılmış bir şekilde kaydedildi - bu hem çocuklar hem de çocuklar için birçok hayat kurtaracak. yetişkinler.

Bu bağlamda, ABD'de tescilin ardından Avrupa İlaç Komitesi, yakın gelecekte de beklenen Eculizumab'ın Avrupa'da hızlandırılmış tesciline ilişkin olumlu bir görüş yayınladı.

Ekulizumabın yüksek maliyeti, hastalığın nedenini hedefleyememesi ve ömür boyu kullanılması gerektiği gerçeği göz önüne alındığında, özellikle yüksek sayıda PNH hücreli hastalar veya hastalar için tasarlanmış bir rezerv stratejisine uygulanabilir. PNH klonunun boyutuna bağlı olmayan tromboz eğilimi ile.

Şu anda, PNH için tek küratif tedavi allojenik kemik iliği transplantasyonudur.

Kurs ve tahmin

Prognoz, altta yatan hastalığın seyrinin ciddiyetine bağlıdır, ciddi trombozlu kan transfüzyonlarına bağlı hastalarda daha kötüdür. Hastaların% 10'unda, hastalığın spontan remisyonları, diğerlerinde, aplastik anemiye, MDS'ye,% 5'inde akut lösemiye dönüşüm görülür. Ortalama yaşam beklentisi 10-15 yıldır.

PNH kronik ve halen tamamen tedavi edilemez bir hastalıktır. PNH'nin şiddeti ve prognoz büyük ölçüde komplemana duyarlı eritrosit popülasyonunun boyutuna, kemik iliğinin kompansatuar kapasitesine ve özellikle venöz tromboz gibi komplikasyonların oluşumuna bağlıdır. PNH'de ciddi bir prognoz fikri, aktif semptomatik tedavinin tanıtılması nedeniyle son yıllarda önemli ölçüde değişti.

Uzun süredir klinik ve hematolojik kompanzasyon durumunda olan ve bu dönemde normal bir yaşam sürdüren hasta sayısı artmıştır. Şiddetli, yaşamı tehdit eden tromboz sıklığı azalmıştır. Bazı hastalarda, zamanla, komplemana duyarlı eritrositlerin oranında bir azalma ile hastalığın seyrinde bir yumuşama vardır. Nadir durumlarda, hastalığı iyileştirmenin temel olasılığını gösteren patolojik eritrositlerin tamamen ortadan kalkması tarif edilir.

Patolojinin özü, kan hücrelerinin (çoğu eritrositler) yapısındaki değişikliklerdir, bu da zarlarının erken tahribatına ve intravasküler çürümeye (hemoliz) yol açar.

Prevalans milyonda 16 vaka ve yıllık insidans milyonda 1,3'tür.20 ila 40 yaş arasındaki kişilerin hastalanma olasılığı daha yüksektir, cinsiyet bağımlılığı tespit edilmemiştir.

Adı, yıllarca eğitim görmüş İtalyan araştırmacı ve doktorların isimlerini içeriyor: Marchiafava-Micheli hastalığı, Strübing-Marchiafava.

"Hemoglobinüri" nedir, buna ne sebep olur?

Hemoglobinüri, zar üzerindeki etkileriyle kırmızı kan hücrelerinin parçalanmasına neden olan çeşitli hastalıkların bir belirtisidir, hemoglobin ise hücreleri terk eder ve plazmaya girer.

Sağlıklı bir insanda, toplam kan plazması hacminin% 5'inden fazla olamaz. Konjenital bozukluklarda veya hemoglobinopatilerde (β-talasemi, orak hücreli anemide eritrosit yıkımı) %20-25 gibi yüksek bir hemoglobin düzeyi gözlenir.

Hemoglobinürinin nedenleri şunlar olabilir:

• akut bulaşıcı hastalık (grip);
• Zatürre;
• travma;
• anilin boyaları, karbolik asit, berthollet tuzu ile zehirlenme durumunda zehirlenme;
• keskin hipotermi;
• güçlü ve uzun süreli fiziksel stres;
• kan hastalıkları;
• farklı kan gruplarının transfüzyonu;
• geniş yanıklar;
• PIG-A geninin edinilmiş mutasyonunun rolü belirlenmiştir.

Anilin boyaları tekstil endüstrisinde yaygın olarak kullanılmaktadır, batik dekorasyon, kuru temizleme ve boyama işlemlerinde kullanılması özen gerektirir.

Hemoglobinüri, kanda yüksek düzeyde hemoglobin (hemoglobinemi) olmadan oluşmaz. Sabah öncesi nöbetler, asit-baz dengesinde tam olarak geceleri asidoza doğru fizyolojik bir kayma ile ilişkilidir. Çürüme ürünlerinin artan içeriği, vücudun asitleşmesine katkıda bulunur ve kan hücrelerinin parçalanmasını arttırır.

Bozuklukların patogenezi

Paroksismal noktürnal hemoglobinürideki ana değişiklikler kompleman seviyesinde meydana gelir. Doğuştan gelen bağışıklık sağlayan bir biyokimyasal reaksiyonlar zinciridir.

Aktif madde, oluşan zar saldırı kompleksidir. Yaklaşık 30 regülatör bileşeni içerir. Kompleman bileşenlerinin sentezi, sinir ve endokrin sistemlerinden alınan sinyallere bağlıdır. Normalde konak (insan) hücrelerinin yıkımına izin vermeyen özel proteinler tarafından kontrol edilir.

Gece hemoglobinüri ile bu süreç kaybolur. Eritrositlerin hücre zarının lipid tabakası yok edilir ve bu da ölümlerine neden olur. Eritrosit zarının tamamlayıcı bileşenlere karşı artan duyarlılığı kanıtlanmıştır.

Hücreleri enfeksiyöz ajanlardan korumak ve mikroorganizmaların bozunma ürünlerini ve onların kendi hasarlı hücrelerini kullanmak için tamamlayıcı gereklidir.

Diğer kan hücreleri (lökositler ve trombositler) de zardaki kusurların ortaya çıkmasıyla reaksiyona girer. Üzerlerinde immünoglobulin birikimi bulunmadı, bu da otoalerji mekanizmasının olmadığını kanıtlıyor ve ortak progenitör hücreye verilen hasar lehine konuşuyor. Yıkıcı eylem hakkında genetik bilgiyi (düzen) alan odur.

Bir kök hücrenin eksik genetik bölgesine GPI-AP denir. Eritrosit klonundaki eksikliği, kompleman etkisi altında hemolize yatkınlığa katkıda bulunur. Aynı zamanda vücutta normal bir kırmızı kan hücresi klonu bulunabilir.

Paroksismal gece hemoglobinüri, yalnızca patolojik klon normal olana üstün gelirse ortaya çıkar. Kısmi veya tam GPI-AP yokluğu olan bir klondan elde edilen eritrositler, akış sitometrisi ile hastalarda tespit edilir. Hastalardaki patolojik hücre sayısının aynı olmaması önemlidir.

Marchiafava-Micheli hastalığında artan trombüs oluşumu, eritrositlerin yok edilmesi sırasında salınan faktörler tarafından kan pıhtılaşmasının uyarılması ile ilişkilidir.

Hastalığın formları

Klinik formların sınıflandırılması, laboratuvar verilerini ve kan değişikliklerinin nedensel ilişkisini dikkate alır. Aşağıdaki çeşitleri ayırt etmek gelenekseldir:

1. Subklinik - laboratuvarda hemoliz belirtisi yoktur, yalnızca çok hassas yöntemler GPI-AP'den yoksun az sayıda hücreyi tespit edebilir. Hastalığın kliniği yok. Genellikle aplastik anemi ile ilişkilidir.
2. Klasik - tüm klinik semptomlar vardır, eritrositler, lökositler ve trombositler hariç, periyodik alevlenmelerle ilerler, laboratuvar hemoliz belirtileri belirlenir (retikülositlerin büyümesi, serum laktat dehidrojenaz enzimi, bilirubin, azaltılmış haptoglobin seviyesi ile). Kemik iliğinde hematopoez anomalileri gözlenmez.
3. Çeşitli hastalıklarda kemik iliği hematopoezinin yetersizliğinden kaynaklanır - kemik iliğinin bozulmuş hematopoez (aplastik anemi, miyelodisplastik sendrom ile) ile birlikte veya aktarılmış patolojisi olduğu varsayılır. Analizlere ve kliniğe göre, hemolizin tüm belirtileri, kemik iliği hematopoezi anomalilerinin arka planına karşı ortaya çıkar.

Başka bir sınıflandırmaya göre, tahsis edilmesi önerilmektedir:

• idiyopatik form veya aslında paroksismal nokturnal hemoglobinüri;
• çeşitli hastalıklarda sendrom şeklinde patoloji;
• kemik iliği hipoplazisinden sonra ortaya çıkan nadir bir tür.

Semptomlar ve klinik seyir

Hastalık hem aniden (akut olarak) başlayabilir hem de kademeli bir kronik seyir gösterebilir. Alevlenme dönemlerine hemolitik krizler denir. Genellikle soğuk algınlığı, enfeksiyonla bağlantı, toksik maddelerle temastan önce gelirler.

Paroksismal gece hemoglobinürisinin ana semptomları şunları içerir:

• karın ağrısı;
• göğüste farklı yoğunluk ve lokalizasyondaki ağrı - farklı lokalizasyondaki ağrı, arter yatağının küçük dallarının trombozu ve iç organlarda iskemik odakların oluşumu ile ilişkilidir;
• anemi belirtileri (zayıflık, baş dönmesi, baş ağrısı) - artan yıkım ve kırmızı kan hücrelerinin yetersiz üretiminden kaynaklanır, ayrıca çalışmalar hastaların kanında demir ve folik asit eksikliğini gösterir;
• cilt ve sklera sarılığı - karaciğer tarafından aşırı hemoglobinden işlenen doğrudan bilirubinin kana salınmasının bir göstergesi;
• yutma bozukluğu;
• erkeklerde erektil disfonksiyon - sadece krizlerin arka planında kendini göstermez, aynı zamanda plazmada azaltılmış nitrik oksit konsantrasyonu, bozulmuş kas ve vasküler tonus nedeniyle kronik hale gelir.
• artan yorgunluk;
• nefes darlığı, çarpıntı;
• lokal tromboflebit belirtileri (damar üzerindeki cilt bölgesinde kızarıklık, şişlik, palpasyonda ağrı, ateş);
• Bir hastayı muayene ederken, doktor genişlemiş bir karaciğer ve dalağı not edebilir, bu işaret özellikle içlerinde tromboz ve kalp krizi gelişimini teşhis etmek için önemlidir.

Hastalığın kronik seyri aşağıdakilerin gelişimine katkıda bulunur:

• pulmoner damarların dallarında trombozlu pulmoner hipertansiyon;
• böbrek tübüllerinde bir hemoglobin yıkım ürününün (hemosiderin) birikmesinden kaynaklanan kronik böbrek yetmezliği, mikro enfarkt oluşumu ile vasküler tromboz;
• birleştirme enfeksiyonuna karşı yüksek hassasiyet.

Bu sendromlar en olası ölüm nedenleridir.

Laboratuvar teşhisi

Marchiafava-Micheli hastalığının teşhisi, spesifik testler ve analizler yapma kabiliyetine sahip hematoloji merkezlerinde kapsamlı bir muayeneden sonra konur.

Periferik kanda bulunur:

• eritropeni, lökopeni, trombositopeni (genel kan hücrelerinin inhibisyon durumuna pansitopeni denir);
• retikülositoz;
• plazma hemoglobin seviyelerinde artış;
• azalmış demir ve folat seviyeleri.

Kemik iliği muayenesi şunları ortaya çıkarır:

• progenitör hücrelerin (normoblastlar, plazma ve mast hücreleri) birikmesi nedeniyle eritropoez aktivasyonu (eritrosit üretimi) belirtileri;
• granülositlerin ve megakaryositlerin sayısı azalır;
• kanama alanları, sinüslerde hemolizli eritrositlerin birikmesi;
• hematopoezin baskılanması aşamasında, yağlı dejenerasyon ve yıkım bölgeleri görülür.

Her iki test de zayıf bir çözeltiye yerleştirilmiş bir kan örneğindeki kırmızı kan hücrelerinin "hayatta kalmasını" test eder. Hem testi, %5 veya daha fazla yıkımla pozitiftir ve Hartman's - %4 veya daha fazla.

Coombs testi, hücre yıkımının otoimmün mekanizması ile bir bağlantıyı dışlamak için yapılır, gece hemoglobinüri için negatiftir.

İdrarın boyanması, içinde önemli bir oksihemoglobin içeriği olduğunu gösterir.

İdrar çalışması, gece hemoglobinürisinin ilk belirtilerinden birinin koyu kırmızıya boyanmış idrarın sabah ve gece kısımları olduğunu gösterdi. Zamanla, toplanan idrar katmanlara ayrılır:

• üstte, sıvı şeffaftır, ancak rengi korur;
• organik kökenli ölü hücre parçacıkları aşağıdan belirlenir.

Hangi hastalıklar gece hemoglobinürisinden ayırt edilmelidir?

Paroksismal gece hemoglobinürisinin ayırıcı tanısı, klinik seyirde benzer olan diğer anemilerle, öncelikle otoimmün tipte hemolitik anemi ve aplastik ile gerçekleştirilir.

Ortak işaretler şunlardır:

• kırmızı kan hücrelerinin sayısında keskin bir azalma;
• retikülositoz;
• sarılık varlığı;
• ateş;
• serbest bilirubin konsantrasyonunda artış;
• tromboz eğilimi;
• karaciğer ve dalakta orta derecede genişleme.

Anemi ile kan plazmasında yüksek sayıda hemoglobin, idrarda ürobilin yoktur. Hem, Hartman'ın laboratuvar testleri negatif, Coombs' testi pozitif.

Hastalık, akut bir miyeloid lösemi, eritromiyeloz, osteomiyeloskleroz, malign tümörlerde kemik iliği metastazı arka planına karşı geçici krizler şeklinde ortaya çıkarsa, teşhis önemli ölçüde zordur.

Eritrosit kütlesi soğukta özel ambalajlarda saklanır.

Tedavi

Bugüne kadar, kırmızı kan hücrelerinin parçalanmasını durdurmanın etkili bir yolu yoktur. Sadece değiştirme fırsatını kullanmak ve yıkanmış eritrosit donör kütlesini hastaya aktarmak için kalır.

Transfüzyon için kullanılan kan, içindeki lökositleri tamamen yok etmek için en az bir hafta donmuş halde saklanmalıdır. Hastaya girdikten sonra, artan sensitizasyon ve kompleman aktivasyonu nedeniyle hemoliz alevlenmesine neden olabilirler.

Sık transfüzyonlarla, anti-eritrosit antikorlarının oluşumu hala mümkündür. Bu tür hastalarda, eritrositleri salinle yıkamak ve Coombs reaksiyonunu kullanarak donör kanını kontrol etmek için birkaç prosedürden sonra müteakip transfüzyon gerçekleştirilir.

Transfüzyon sayısı genellikle en az beş verilir, ancak hastanın durumunun ciddiyetine ve tedaviye yanıtına bağlıdır.

Uygun hematopoezi uyarmak için, üç aya kadar olan kurslarda Nerobol (bir anabolik hormonal ilaç) kullanılır. Bu durumda, karaciğerin fonksiyonel durumunda bir değişiklik mümkündür.

Tromboz tedavisi ve önlenmesi amacıyla, Heparin kullanılır, ardından dolaylı antikoagülanların bakım dozlarına geçiş yapılır.

Demir kaybını telafi etmek için tabletlerde ilaçlar reçete edilir.

Dalağın çıkarılması için bir gösterge keskin bir artış, kalp krizi belirtileri olabilir. Splenektomi nadiren yapılır.

Karaciğeri korumak için hepatoprotektif ilaçlar reçete edilir. Bazen steroid tedavisi yardımcı olur.

İlaç sadece intravenöz olarak uygulanır.

Son yıllarda, monoklonal antikorlardan yapılan Eculizumab (Soliris) ilacının kullanımı hakkında bilgiler ortaya çıkmıştır. Mevcut raporlara bakılırsa, hemolizi bloke ediyor, kan tamamlayıcısına direnebiliyor. İlaç dünyanın en pahalı ilacı olarak kabul edilir. Eylemi ve olumsuz etkileri iyi anlaşılmamıştır.

Noktürnal hemoglobinürinin henüz spesifik bir tedavisi yoktur. Yeterli idame tedavisi ile bile, hastalar hastalığın başlangıcından yaklaşık beş yıl sonra yaşarlar. Önleme yok. Herkes çalışırken ve toksik bileşiklerle zorla temas kurarken doğru davranışa uymalıdır.

Paroksismal gece hemoglobinüri kendini nasıl gösterir?

Paroksismal gece hemoglobinüri, hemolitik anemi grubunun ciddi bir edinilmiş patolojisidir. Bu patolojinin diğer isimleri olan Markiafava-Mikeli hastalığı veya Strübing-Marchiafawa hastalığı, kırmızı kan hücrelerinin tahrip olmasına neden olur. Hastalık çok nadirdir, nüfusun 500 bini için 1 kişi bu patolojiyle tanışabilir.

Patolojinin olası komplikasyonlarının ve sonuçlarının gelişmesinden endişe etmemek için, paroksismal gece hemoglobinüri tanısının ne olduğunu, patolojinin semptomlarını ve tedavisini bilmelisiniz.

Hemoglobinüri nedenleri

Yukarıda belirtildiği gibi, paroksismal gece hemoglobinüri çok nadir görülen bir hastalıktır, ayrıca patoloji en sık 20 ila 40 yaş arası kişilerde bulunur. Hastalığın yaşlılıkta veya çocuklarda gelişmesi vakaları da tıbbi uygulama tarafından bilinir, ancak ihmal edilebilir bir yüzdeyi oluştururlar.

Paroksismal noktürnal hemoglobinürinin (PNH) nedeninin, tanımlanmamış etki faktörlerine maruz kalmaya yanıt olarak kemik iliğindeki X kromozomunun bir bileşeni olan kök hücre geninin (PIG-A) mutasyonel reaksiyonu olduğuna inanılmaktadır. Bazı kaynaklar, genin mutasyona uğramasına neden olan nedenlerin bilinmediğini iddia etmektedir.

Diğerleri, hemoglobinürinin bulaşıcı hastalıklar, zatürree, yaralanmalar, zehirlenme, hipotermi ve yanıklar ve hatta ciddi fiziksel aşırı eforun arka planında gelişebileceğini iddia ediyor.

Ancak patolojinin etiyolojisi hakkında oybirliğiyle bir görüş henüz oluşturulmamıştır.

Eşlik eden patolojilerin bir semptomu olarak paroksismal gece hemoglobinüri tanısının gelişimi arasında açık bir bağlantı ortaya çıktı. Tıbbi araştırmalar, PNH'nin, vakaların %30'unda aplastik anemi ve vasküler sistemin diğer patolojilerinin bir sonucu olarak geliştiğini göstermiştir.

İyi bilinen bir argüman, mutasyona uğramış tek bir hücrenin bile ciddi bir patolojik durumun gelişmesine yol açabileceğidir. Kemik iliğinde gerçekleştirilen kırmızı kan hücrelerinin oluşumu sırasında kök hücreler bölünür, olgunlaşır ve kan dolaşımına salınır. Modifiye edilmiş bir gen başka bir çifte ve bunlar başka bir çifte bölünür, vb. Yani bir hücre kendini çoğaltarak kanı yavaş yavaş hasarlı kırmızı kan hücreleriyle doldurur.

Eritrosit hasarının özü, hücreleri bağışıklık sisteminden korumaya hizmet eden eksik veya eksik bir protein zarında yatmaktadır. Hücredeki en ufak bir kusurda, vücudun bağışıklığı onu yok eder, bunun sonucunda böyle bir tanı hemoliz - saf hemoglobinin kana salınması ile karakterize edilen kırmızı kan hücrelerinin intravasküler yıkımı olarak gelişir.

Aynı süreç kronik hemolitik anemide de meydana gelir, bu nedenle paroksismal noktürnal hemoglobinüri onun analoğudur veya uygulayıcıların sıklıkla söylediği gibi, akut edinilmiş şeklidir. Bu patolojiler arasındaki ana ve tek fark, gelişimlerinin ilkesidir.

Hemolitik anemi konjenital bir patolojidir, hemoglobinüri edinilir. Eritrositlerin kusuru, vasküler sıvının diğer katı elemanlarına da yayılabilir: lökositler ve trombositler.

Gece hemoglobinüri belirtileri

Markjafava-Micheli hastalığının semptomları, patolojinin nedensel sınıflandırmasına bağlıdır. Bulunduğu gibi, hastalık bağımsız olabilir, buna göre idiyopatik PNH formu ayırt edilir. Aplastik aneminin arka planına karşı patolojinin gelişmesi nedeniyle, paroksismal gece hemoglobinüri bir sendrom şeklini alır. En nadir olanı, hematopoetik hipoplazinin arka planında ortaya çıkan idiyomatik PNH formudur.

Çok değişken olduğundan, hastalığın formlarından herhangi biri için belirgin semptomları ayırt etmek imkansızdır. Hastalığın seyri dışarıdan asemptomatik olabilir, bu durumda patoloji ancak laboratuvar teşhisi ile tespit edilebilir. Diğer hastalarda şiddetli anemik sendrom vardır.

Genel olarak, gece hemogloburinin tüm olası belirtilerinin küçük bir genellemesini belirlemek, böylece ana semptomatik tabloyu vurgulamak mümkündür.

• Hemoliz süreci (kırmızı kan hücrelerinin ve hemoglobinin yok edilmesi) esas olarak geceleri (gece hemoglobinüri) meydana gelir, bu nedenle sabahları idrar yaparken idrar rengi koyu kahverengi bir renk alacaktır. Gündüz ve akşam böyle bir işaret görülmez.
• Eritrositlerin kanındaki kantitatif azalma nedeniyle, anemik bir sendrom gözlenir. Tezahürleri doğrudan organların ve dokuların oksijen açlığı ile ilgilidir. Bu nedenle hasta baş ağrısı, baş dönmesi, gözlerin önünde yanıp sönen siyah noktalar, genel halsizlik, yorgunluk, anjina pektoris atakları ve taşikardi yaşayabilir.

• Eşlik eden bulaşıcı hastalıklar, kanama, fiziksel efor vb. Olduğunda, vasküler sıvıdaki hemoglobin miktarında keskin bir sıçrama ile kendini gösteren hemolitik bir kriz gelişebilir, ayrıca şiddetli halsizlik, ateş, kemik ağrısı, ciltte sarılık ve orta derecede splenomegali görünebilir ( dalak büyümesi).
• Hemoglobinüriye, hem krizlerin arka planında hem de şiddetli patolojide erkeklerde erektil disfonksiyona neden olan plazmadaki nitrik oksit konsantrasyonunun ihlali eşlik eder.
• Trombositlerde (kan pıhtılaşmasından sorumlu kan hücreleri) ortaya çıkan kusur nedeniyle, damarlarda en sık görülen tromboz oluşabilir. Aynı süreç, katı kan hücrelerinin yok edilmesi sırasında salınan bir maddeyi tetikleyebilir. Tromboz eğiliminin bağlı olduğu vasküler sıvının pıhtılaşmasının artmasına neden olur. Bu tür ihlaller ölüme yol açabilir.

Paroksismal noktürnal hemoglobinürinin en belirgin semptomları laboratuvar tanısı ile elde edilebilir. Çalışmalar kandaki hemoglobin seviyesini, hücrelerin durumunu, trombopeni ve lökopeni varlığını, demir ve diğer eser elementlerin seviyesini vb. gösterecektir. Bu hastalıktan beri hemoglobinüriyi tam ve doğru bir şekilde teşhis etmek uzun zaman alır. diğer patolojiler kisvesi altında dikkatlice gizlenebilir.

Bu nedenle Markyafava-Mikeli hastalığını zamanında tespit etmenin en akılcı yolu düzenli bir önleyici muayene olacaktır.

Paroksismal gece hemoglobinüri tedavisi

Paroksismal gece hemoglobinürisinin tespit süresi, gerekli terapötik yöntemleri belirler ve çoğu durumda olumsuz olan patolojinin sonucu için prognozu belirler. Bu, belirli bir gelişme nedeninin olmaması ve onu ortadan kaldırmanın imkansızlığından kaynaklanmaktadır. Bu nedenle, PNH için spesifik bir tedavi yoktur.

Tüm terapötik önlemler, semptomatik belirtileri ortadan kaldırmayı amaçlamaktadır. Mutasyona uğramış hücrelerden tamamen kurtulmanın tek etkili yolu kırmızı kemik iliği naklidir (kan hücrelerinin oluştuğu yer).

Akut bir hemoliz şekli olan hemolitik krizin gelişmesiyle, hastaya birden fazla kırmızı kan hücresi transfüzyonu reçete edilir. Bu tür 5 veya daha fazla transfüzyon olabilir. Prosedürlerin sayısı ve sıklığı, tekrarlanan analizlerle belirlenir ve kusurlu eritrositlerin bir sonraki üremesinde gerçekleştirilir.

Nadir durumlarda dalak çıkarılır. Splenektomiye yol açan işaretler organda keskin bir artış ve kalp krizi gelişiminin bir tezahürüdür.

Terapötik önlemlerin geri kalanı, patolojinin seyrini hafifleten farklı grup ilaçları almaktan oluşur. Ana ilaçlar, steroid hormon gruplarının, sitostatiklerin yanı sıra demir ve folik asit preparatlarıdır.

nerobol

Doktorların paroksismal gece hemoglobinürisinin semptomatik tezahürüyle mücadele etmeleri için en yaygın reçete ilaç Nerobol'dur. Bu, anabolik steroid grubunun hormonal bir ilacıdır. İlacın eylemi yönlendirilir:

• kusurlu eritrosit zarında yeterli olmayan hastanın vücudundaki protein sentezini uyarmak;
• azot metabolizması üzerinde faydalı bir etkiye sahiptir;
• normal protein sentezi için gerekli olan potasyum, kükürt ve fosforun geri çekilmesini geciktirir;
• kemiklerde kalsiyum fiksasyonunun artmasına neden olur.

Bu ilacı aldıktan sonra, hasta iştahta bir artış, kas kütlesinde yoğun bir artış, kemik kireçlenmesinin hızlanması ve ayrıca vücudun çok daha iyi bir genel durumu hisseder.

İlacın kullanımı 10 g ile başlar, kademeli olarak günde 1-2 doz 30 g'a çıkar. Çocuklar için ilacın dozu, her gün şiddetli bir formda, her gün 1 tablettir. Nerobol ile tedavi süresi 2 ila 3 aydır.

Birçok hastada ilacın kesilmesinden sonra hemolizde artış olur.

Nerobol kullanımı kesinlikle ilgili doktorun reçetesine göre yapılabilir.

heparin

Heparin doğrudan bir antikoagülandır - kanın pıhtılaşmasını engellemenin bir yolu. Paroksismal gece hemoglobinüri ile, hastalığın seyrini zorlaştıran trombozu önlemek için reçete edilir.

Dozaj ve uygulama sıklığı, patolojinin seyrinin karmaşıklığına ve damarlarda kan pıhtılaşması riskine bağlı olarak tamamen kişiselleştirilir.

Heparin kursunun sonunda doktor, normal bir pıhtılaşma seviyesini korumak için dolaylı antikoagülanlar reçete eder.

ekulizumab

Eculizumab, hümanize monokanal antikorlardan oluşan bir ilaçtır. İlacın etki prensibi intravasküler hemolizi durdurmak ve doğrudan kan iltifatına direnmektir. Sonuç olarak, kusurlu kırmızı kan hücrelerinin vücudun bağışıklık sistemi tarafından doğal olarak yok edilmesi durur.

Bu ilaç dünyanın en pahalı ilacıdır. Etki mekanizması ve uygulamanın olası sonuçlarının gelişimi yeterince araştırılmamıştır.

Demir ve folik asit preparatları

Kırmızı kemik iliğinin çalışmasındaki ihlallerle, normal hematopoez için gerekli olan demir ve folik asit eksikliği vardır. PNH'nin terapötik tedavisi, patolojik kayıpları telafi etmek için bu mikro elementlerin müstahzarlarının alınmasını içerir.

İlacın dozu ve alma yöntemi, ilgili doktor tarafından belirlenir. Çoğu zaman, Sorbifer, Tardiferron, Ferretab, Fenyuls vb. Reçete edilir.Bu ilaçlar, kırmızı kemik iliğinde normal katı kan parçacıklarının oluşturulması için gerekli olan bir eser element kompleksi içerir.

Karaciğer Desteği

Paroksismal gece hemoglobinürisine karşı mücadelede güçlendirilmiş tedavi, karaciğeri güçlü bir şekilde etkiler. Karaciğer için destekleyici tedavinin yokluğunda, basitçe reddedebilir. Bu nedenle hepatoprotektif ilaçlar almak önemlidir. Bunlar böyle ilaçlar olabilir:

Ek olarak, karaciğer hücrelerinin yenilenmesine yardımcı olan bir dizi ürün vardır. Bunlara balkabağı, kuru kayısı, yosun, zeytinyağı, süt ürünleri ve daha fazlası dahildir. Ana şey, karaciğer zayıflığı anlarında onu abur cuburla ağırlaştırmamaktır.

Hastalığı tanımladıktan sonra doktorlar yanlış tahminlerde bulunur. İstatistikler, tanı konulduktan sonra hastanın yaklaşık 5 yıl idame tedavisine devam edebileceğini söylüyor.

Hastalığın bilinmeyen kökeni ve gelişiminin nedenlerindeki yanlışlıklar nedeniyle, paroksismal gece hemoglobinüri önlenemez.

sonuçlar

Markjafava-Micheli hastalığı veya paroksismal nokturnal hemoglobinüri, yoğun bakımda bile ölümcül olan ciddi bir hastalıktır. Tek olası iyileşme, içinde kan hücrelerinin oluştuğu kırmızı kemik iliği naklidir. Ek olarak, patoloji, hastanın durumu için daha az tehlikeli olmayan eşlik eden hastalıkların gelişimini gerektirir.

Bu nedenle doktorlar, herhangi bir patolojiyi önlemenin en iyi yolunun düzenli olarak tam bir tıbbi muayeneden geçmek olduğunu oybirliğiyle beyan ederler. Belki hastalık henüz oluşum aşamasındaysa kalıcı olarak ortadan kaldırılabilir. Bu kadar ciddi hastalıklarda asıl mesele zamandır. Kendinize ve vücudunuza iyi bakmalısınız.

Paroksismal gece hemoglobinüri (PNH)

nedenler:

Hastalığın nedenleri, büyük ölçüde kusurlu olan eritrositlerin intravasküler yıkımı ile ilişkilidir. Eritrositlerin patolojik popülasyonu ile birlikte, normal bir ömre sahip normal hücrelerin bir kısmı da korunur. Granülositlerin ve trombositlerin yapısındaki ihlaller bulundu. Hastalık kalıtsal değildir, ancak bir klon olan kusurlu bir hücre popülasyonunun oluşumunu tetikleyen herhangi bir dış faktör, yani. Orijinal olarak değiştirilmiş tek bir hücrenin yavruları bilinmemektedir.

PNH'de patolojik eritrositlerin kompleman duyarlılığında artış vardır. Belki de bu, tamamlayıcıyı aktive eden faktörleri içeren taze kan transfüzyonu ile hemolitik krizin kışkırtılmasının temelidir. Bir haftadan uzun süre saklanan kanın transfüzyonu hemolize neden olmaz.

Paroksismal gece hemoglobinüri belirtileri:

Hastalık yavaş gelişir: genellikle mezenterik damarların trombozu ile ilişkili orta derecede anemi, halsizlik, yorgunluk, egzersiz sırasında çarpıntı, karın ağrısı belirtileri vardır. Deri ve mukoz membranlar soluk sarımsıdır, anemi ve hemosiderin birikimi nedeniyle grimsidir. İntravasküler hemoliz belirtileri ile karakterizedir.

Eritrositlerin morfolojisinin karakteristik özellikleri yoktur. Kemik iliğinde kırmızı germ hiperplazisi gözlenir, ancak trepanatta, kemik iliğinin hücreselliğinde, hastalık ilerledikçe hipoplastik hale gelebilen hafif bir artış vardır.

Teşhis:

Tanı, intravasküler hemoliz belirtileri (anemi, hafif retikülositoz, idrarda hemosiderin) temelinde konur. Tanıyı özel çalışmalarla netleştirin (pozitif sakaroz testi, Hem testi, negatif Coombs testi).

PNH'den farklı olarak lökopeni ve trombositopeni yoktur; prednizolon genellikle iyi bir etki sağlar. Kemik iliğinin resmi, PNH'yi aplastik anemiden ayırmaya izin verir: aplazi ile trepanat, hemoliz ile yağın baskınlığı ile karakterize edilir - hücresel hiperplazi ile, ancak, nadir durumlarda, PNH, kemik iliği hipoplazisinin bir resmini geliştirebilir, ancak hemosiderin sürekli olarak idrarda bulunur ve kanda retikülositoz bulunur.

Paroksismal gece hemoglobinüri tedavisi:

Şiddetli anemi yokluğunda tedavi yapılmaz. Şiddetli anemik sendrom, kırmızı kan hücresi transfüzyonu gerektirir; en iyi sonuçlar yıkanmış veya yaşlandırılmış eritrositlerin 7-10 gün süreyle transfüzyonu ile elde edilir. Hematopoez hipoplazisi ile anabolik steroidler belirtilir: nerobol - günde 10-20 mg veya retabolil - 2-3 hafta boyunca kas içinden 50 mg.

tartışmalar

PNH (paroksismal gece hemoglobinüri) PNG

12 mesaj

PNH, genellikle diğer hastalıklarla örtüşen, spesifik olmayan ve öngörülemeyen belirti ve semptomlarla karakterize karmaşık bir hastalıktır. Ayrıca PNH her hastada kendini farklı gösterir. PNH'niz varsa, kırmızı kan hücrelerinizin bir kısmı veya tamamı önemli bir koruyucu proteinden yoksundur. Bu protein olmadan kırmızı kan hücreleri, vücudunuzun bağışıklık sisteminin tamamlayıcı sistem adı verilen bir bileşeni tarafından yok edilebilir. Hissetmeseniz bile hemoliz her zaman görünmez bir şekilde gerçekleşir ve yaşamı tehdit edebilir. Diyabet veya hipertansiyon gibi diğer kronik durumlarda olduğu gibi, tedavi edilmezse PNH ciddi sağlık sorunlarına yol açabilir. PNH ile ilişkili tipik semptomlar karın ağrısı, yutma güçlüğü, anemi, nefes darlığı ve yorgunluğu içerir. Daha ciddi komplikasyonlar arasında kan pıhtıları, böbrek yetmezliği ve hayati organlarda hasar bulunur.

PNH'li hastalar, hastalığın tahmin edilemeyecek şekilde kötüleşebilen (örneğin, stresin etkisi altında) veya zaman zaman iyileşebilen çeşitli belirtilerine sahip olabilir. Bununla birlikte, PNH'li tüm hastalarda kronik hemoliz vardır.

PNH'li hastalarda ayrıca aplastik anemi veya miyelodisplastik sendrom gibi kemik iliği fonksiyonunu etkileyen başka hastalıkları da olabilir. Kırmızı kan hücrelerini yok eden PNH'nin aksine, bu koşullar kan hücrelerinin üretimini azaltarak PNH'nin gidişatını daha da karmaşık hale getirebilir. Aplastik anemi veya miyelodisplastik sendrom ile aynı anda PNH teşhisi konulursa, mevcut hastalıklarınız için tüm olası etkili tedavi seçeneklerini doktorunuzla görüşün.

PNH'de kırmızı kan hücreleri önemli bir proteinden yoksundur.

2. Kompleman sisteminin etkisi

Bu protein olmadan, vücudun savunma sistemlerinden biri olan kompleman sisteminin etkisi altında kırmızı kan hücrelerinin bir kısmı yok edilebilir.

3. PNH'de eritrositlerin yok edilmesi (hemoliz)

PNH'de eritrositler yok edilir, bunun sonucunda toksik bozunma ürünleri çevreleyen plazmaya girer (kanın sarı sıvı bileşeni).

Hemoliz, "kırmızı kan hücrelerinin yok edilmesi" anlamına gelen tıbbi bir terimdir. Hemoliz yoğunluğu, LDH'nin (laktat dehidrojenaz - eritrositlerde bulunan bir enzim) aktivitesinin belirlenmesinin sonuçları ile tahmin edilir. Yüksek LDH aktivitesi aşırı hemolizi gösterir. Sağlıklı insanlarda hafif hemoliz, devam eden doğal bir süreçtir. Bununla birlikte, PNH'li hastalar, kırmızı kan hücrelerinin bir kısmının veya tamamının yüzeyinde koruyucu bir protein bulunmaması nedeniyle aşırı hemoliz yaşarlar. Bu aşırı hemolize toksik kırmızı kan hücrelerinin kana salınması eşlik eder, bu da zamanla PNH ile ilişkili semptomların çoğuna ve ayrıca vücudunuzdaki önemli organlara zarar verebilir. PNH'niz varsa, kendinizi iyi hissetseniz de, örneğin stres veya enfeksiyon sırasında olduğu gibi hastalıkta bir alevlenme (paroksizm) geçirseniz de, hemoliz her zaman meydana gelir. Aşırı ve uzun süreli hemoliz, PNH'de ciddi sağlık sorunlarının ana nedenidir.

Kan hücreleri yok edildiğinde, toksik içerikleri kan dolaşımına girerek orada birikerek sağlığa zarar verebilir ve bu da beklenmedik bir şekilde ve her an kendini gösterebilir. Bu bozukluklar arasında böbrek yetmezliği ve karaciğer, beyin ve akciğerler gibi hayati organlara zarar verebilecek tehlikeli kan pıhtılarının oluşumu sayılabilir.

Hemoliz ayrıca nasıl hissettiğinizi de etkiler. PNH'li birçok hasta, semptomların başlangıcının ve ciddiyetinin öngörülemezliğinin yaşam kalitelerini olumsuz etkilediğini bildirmektedir. Kronik hemoliz düzeyini azaltmak doktorlar tarafından PNH tedavisinde en önemli hedef olarak görülmektedir.

İlaç, kompleman sisteminin C5 bileşenini bloke eden bir antikordur. Uygulama deneyimi sağ kalımda artış, hemoliz ve trombozda azalma, yaşam kalitesinde artış göstermiştir.

Hastalık en sık yavaş yavaş başlar. Hastalar halsizlik, halsizlik, baş dönmesinden şikayet ederler. Bazen bir subikterik sklera vardır. Genellikle ilki baş ağrısı şikayetleri, çeşitli lokalizasyonların karın ağrısıdır. Artan tromboz eğilimi, hastanın doktora başvurmasını sağlar. Hemoglobinüri, nadiren hastalığın ilk semptomudur ve bazı hastalarda PNH tamamen olmayabilir. Bazı durumlarda, ilk kez 2-3 yıl, hatta hastalığın başlangıcından 10 yıl sonra ortaya çıkar.

PNH'nin karakteristik belirtilerinden biri karın ağrısı nöbetleridir. Yerelleştirmesi çok farklı olabilir. Kriz dönemi dışında, kural olarak karın ağrısı görülmez. Genellikle kusma eşlik eder. Büyük olasılıkla, PNH'li hastalarda karın ağrısı, mezenterik damarların trombozu ile ilişkilidir.

Periferik damarların trombozu (en sık - üst ve alt ekstremite damarları, daha az sıklıkla - böbrek damarları) aynı zamanda paroksismal gece hemoglobinürisinin karakteristik bir semptomudur. PNH'li hastaların %12'sinde tromboflebit gözlenir. Trombotik komplikasyonlar bu hastalıkta en sık ölüm nedenidir.

Hastanın objektif muayenesinde, hafif ikterik bir renk tonu ile solgunluk en sık dikkat çeker. Genellikle yüzde şişlik, bazen aşırı dolgunluk vardır. Dalak ve karaciğerde hafif bir artış olabilir, ancak bu PNH'nin özelliği değildir.

Paroksismal gece hemoglobinüri, en önemlisi serbest plazma hemoglobininde bir artış olan intravasküler hemoliz belirtileri ile karakterizedir. Bu semptom, PNH'li hemen hemen tüm hastalarda periyodik olarak not edilir. Bununla birlikte, serbest plazma hemoglobinindeki artış derecesi değişir ve çalışmanın yürütüldüğü hastalık dönemine bağlıdır. Kriz sırasında, bu rakam önemli ölçüde artar, ayrıca plazma metalbümin miktarında bir artış olur.

Serbest plazma hemoglobin düzeyi, o andaki hemoliz derecesine, haptoglobin içeriğine, hemoglobinin idrarda süzülme derecesine ve hemoglobin-haptoglobin kompleksinin yok edilme hızına bağlıdır. Küçük bir hemoliz derecesi durumunda, serbest plazma hemoglobin seviyesi, onu renal filtreden süzmek için yetersiz olacaktır. Bu nedenle, hemoglobinüri hastalığın zorunlu bir semptomu değildir. Nefron tübüllerinden geçerken, salgılanan hemoglobin kısmen yok edilir ve tübüllerin epitelinde birikir. İdrarda hemosiderin atılımının nedeni budur.

Hemosiderin, paroksismal gece hemoglobinürisi olan hastaların büyük çoğunluğunda idrarla atılır. Bazen hemosiderinüri hemen görünmez. Bu önemlidir, ancak hastalığın PNH belirtisine özgü değildir.

Paroksismal gece hemoglobinüri için laboratuvar göstergeleri

PNH'li hastalarda eritrosit sayısı hemoglobindeki azalma düzeyine göre azalmaktadır. Renk indeksi uzun bir süre birliğe yakın kalır. Hastanın idrarda hemosiderin ve hemoglobin şeklinde önemli miktarda demir kaybettiği durumlarda, demir seviyesi giderek azalır. Hastaların yaklaşık yarısında düşük renk indeksi gözlenir. Bazıları, özellikle alevlenme sırasında yüksek hemoglobin P seviyelerine sahiptir.

Hastaların önemli bir kısmında retikülosit içeriği artar, ancak nispeten düşüktür (%2-4). Çoğu durumda PNH'deki lökosit sayısı azalır. Birçok hastada 1 litrede 1,5-3 G'dir, ancak bazen 1 litrede 0,7-0,8 G'ye düşer. Lökopeni genellikle nötrofilik granülositlerin sayısındaki azalmaya bağlı olarak gözlenir. Bazen PNH'deki lökositlerin içeriği normaldir veya artar - 1 litre başına 10-11 G'ye kadar.

Strübing-Marchiafave hastalığı, Marchiafava-Micheli hastalığı olarak da bilinen paroksismal noktürnal hemoglobinüri, nadir görülen bir hastalıktır, hastanın hayatını tehdit eden ilerleyici bir kan patolojisidir. Eritrosit zarlarının yapısının ihlal edilmesinden kaynaklanan edinilmiş hemolitik anemi çeşitlerinden biridir. Arızalı hücreler, damarların içinde meydana gelen erken çürümeye (hemoliz) maruz kalır. Hastalık doğada genetiktir, ancak kalıtsal olarak kabul edilmez.

Gece paroksismal hemoglobinüri

epidemiyoloji

Görülme sıklığı 1 milyon kişide 2 vakadır. İnsidans yılda milyon kişi başına 1.3 vakadır. Ağırlıklı olarak yaşlı kişilerde kendini gösterir, insidansın cinsiyet ve ırka bağımlılığı tespit edilmemiştir. Çocuklarda ve ergenlerde hastalığın izole vakaları vardır.

Önemli: Hastalığın ortalama tespit yaşı 35'tir.

Gece paroksismal hemoglobinüri nedir

Hastalığın nedenleri

Hastalığın gelişimi için nedenler ve risk faktörleri bilinmemektedir. Patolojiye, X kromozomunun kısa kolunda bulunan PIG-A geninin mutasyonunun neden olduğu tespit edilmiştir. Mutajenik faktör henüz tanımlanmamıştır. Gece paroksismal hemoglobinüri vakalarının% 30'unda başka bir kan hastalığı - aplastik anemi ile bir bağlantı vardır.

Kan hücrelerinin oluşumu, gelişimi ve olgunlaşması (hematopoez) kırmızı kemik iliğinde gerçekleşir. Tüm özelleşmiş kan hücreleri, bölünme yeteneğini koruyan, uzmanlaşmamış kök hücrelerden oluşur. Ardışık bölünmeler ve dönüşümler sonucunda oluşan olgun kan hücreleri kan dolaşımına girer.

Tek bir hücrede bile PIG-A geninin mutasyonu, PNH gelişimine yol açar. Genin zarar görmesi, kemik iliğinin hacmini koruma süreçlerinde hücrelerin aktivitesini de değiştirir, mutant hücreler normalden daha aktif olarak çoğalır. Hematopoietik dokuda, kusurlu kan hücreleri üreten bir hücre popülasyonu oldukça hızlı bir şekilde oluşur. Aynı zamanda, mutant klon malign oluşumlara ait değildir ve kendiliğinden kaybolabilir. Normal kemik iliği hücrelerinin mutant hücrelerle en aktif şekilde değiştirilmesi, özellikle aplastik aneminin neden olduğu önemli lezyonlardan sonra kemik iliği dokusunun iyileşme süreçlerinde meydana gelir.

Gece paroksismal hemoglobinürinin karakteristik belirtileri

PIG-A genindeki hasar, vücut hücrelerini tamamlayıcı sistemin etkilerinden koruyan sinyal proteinlerinin sentezinin bozulmasına yol açar. Kompleman sistemi, genel bağışıklık koruması sağlayan spesifik plazma proteinleridir. Bu proteinler, zarar görmüş kırmızı kan hücrelerine bağlanarak onları eritir ve açığa çıkan hemoglobin, kan plazması ile karıştırılır.

sınıflandırma

Patolojik değişikliklerin nedenleri ve özellikleri hakkındaki mevcut verilere dayanarak, çeşitli paroksismal gece hemoglobinüri biçimleri ayırt edilir:

1. Belirti göstermemiş.
2. Klasik.
3. Hematopoez bozuklukları ile ilişkili.

Hastalığın subklinik formu genellikle aplastik anemiden önce gelir. Patolojinin klinik belirtileri yoktur, ancak az sayıda kusurlu kan hücresinin varlığı sadece laboratuvar çalışmalarında tespit edilir.

Gece paroksismal hemoglobinüri kliniği

Bir notta. PNH'nin ilk aşaması aplastik anemi olan daha karmaşık bir hastalık olduğuna dair bir görüş var.

Klasik form, tipik semptomların tezahürleriyle ilerler, hastanın kanında kusurlu eritrositler, trombositler ve bazı lökosit türleri vardır. Laboratuvar araştırma yöntemleri, patolojik olarak değiştirilmiş hücrelerin intravasküler yıkımını doğrular, hematopoez bozuklukları tespit edilmez.

Aktarılan hastalıklardan sonra, hematopoez yetmezliğine yol açan üçüncü patoloji şekli gelişir. Kemik iliği lezyonlarının arka planına karşı belirgin bir klinik tablo ve eritrositlerin intravasküler lizisi gelişir.

Ayırt ettikleri alternatif bir sınıflandırma vardır:

1. Aslında PNG, idiyopatik.
2. Diğer patolojilerde eşlik eden bir sendrom olarak gelişir.
3. Kemik iliği hipoplazisinin bir sonucu olarak gelişir.

Gece paroksismal hemoglobinüri kliniği. Bölüm 2

Farklı vakalarda hastalığın seyrinin şiddeti, her zaman kusurlu eritrositlerin sayısı ile bağlantılı değildir. %90'a yaklaşan modifiye hücre içeriğine sahip subklinik bir seyir vakası ve normal popülasyonun %10'unun yer değiştirdiği aşırı şiddetli vakalar açıklanmaktadır.

Hastalığın gelişimi

Şu anda, paroksismal gece hemoglobinürisi olan hastaların kanında, kanda kompleman sistemi tarafından yıkıma karşı farklı duyarlılığa sahip üç tip eritrosit bulunabileceği bilinmektedir. Normal hücrelere ek olarak, duyarlılığı normalden birkaç kat daha yüksek olan kan dolaşımında eritrositler dolaşır. Marchiafava-Micheli hastalığı teşhisi konan hastaların kanında, kompleman duyarlılığı normalden 3-5 kat daha yüksek hücreler bulundu.

Gece paroksismal hemoglobinüri neye yol açar?

Patolojik değişiklikler ayrıca diğer kan hücrelerini, yani trombositleri ve granülositleri de etkiler. Hastalığın zirvesinde, hastalarda pansitopeni tespit edilir - farklı tipte kan hücrelerinin yetersiz içeriği.

Hastalığın tezahürünün şiddeti, sağlıklı ve kusurlu kan hücrelerinin popülasyonları arasındaki orana bağlıdır. Komplemana bağlı hemolize aşırı duyarlı eritrositlerin maksimum içeriğine, mutasyon anından itibaren 2-3 yıl içinde ulaşılır. Bu zamanda, hastalığın ilk tipik semptomları ortaya çıkar.

Patoloji genellikle yavaş yavaş gelişir, akut kriz başlangıcı nadirdir. Alevlenmeler, menstrüasyon, şiddetli stres, akut viral hastalıklar, cerrahi müdahale, belirli ilaçlarla tedavi (özellikle demir içerenler) arka planında kendini gösterir. Bazen hastalık, belirli yiyeceklerin kullanımıyla veya belirgin bir sebep olmaksızın şiddetlenir.

Paroksismal gece hemoglobinüri

Maruz kalma nedeniyle Marchiafava-Micheli hastalığının belirtilerine dair kanıtlar vardır.

Yerleşik paroksismal gece hemoglobinürisi olan hastalarda kan hücrelerinin değişen derecelerde çözünmesi sürekli olarak meydana gelir. Orta derecede akış dönemleri, hemolitik krizler, kırmızı kan hücrelerinin büyük tahribatı ile serpiştirilir ve bu da hastanın durumunda keskin bir bozulmaya yol açar.

Krizin dışında hastalar, nefes darlığı, aritmi atakları, genel halsizlik ve egzersiz toleransının kötüleşmesi gibi orta derecede genel hipoksi belirtilerinden endişe duyarlar. Bir kriz sırasında, esas olarak göbekte, alt sırtta lokalize olan karın ağrıları ortaya çıkar. İdrar siyaha döner, en karanlık kısım sabah olur. Bu fenomenin nedenleri henüz kesin olarak belirlenmemiştir. PNH ile yüzün hafif bir pastozitesi gelişir, cildin sarılığı ve sklera fark edilir.

Bir notta! Hastalığın tipik bir belirtisi idrar lekelenmesidir. Bilinen hastalık vakalarının yaklaşık yarısı kendini göstermez.

Paroksismal nokturnal hemoglobinüride idrar renginin normalden anormale değişmesi

Krizler arasındaki dönemlerde hastalar şunları yaşayabilir:

• anemi;
• tromboz eğilimi;
• karaciğer büyümesi;
• miyokardiyal distrofinin belirtileri;
• bulaşıcı kökenli iltihaplanma eğilimi.

Kan hücreleri yok edildiğinde, pıhtılaşmayı artıran maddeler salınır ve bu da tromboza neden olur. Belki de karaciğer damarlarında, böbreklerde, koroner ve beyin damarlarında kan pıhtılarının oluşumu da etkilenir ve bu da ölüme neden olabilir. Karaciğer damarlarında lokalize olan tromboz, organın boyutunda bir artışa yol açar. İntrahepatik kan akışının ihlalleri, distrofik doku değişikliklerini gerektirir. Portal ven sisteminin veya dalağın damarlarının tıkanması ile splenomegali gelişir. Azot metabolizması bozukluklarına düz kasların işlev bozuklukları eşlik eder, bazı hastalar yutma güçlüğünden şikayet eder, yemek borusu spazmları, erkeklerde erektil disfonksiyon mümkündür.

Önemli! PNH'deki trombotik komplikasyonlar ağırlıklı olarak damarları etkiler, arteriyel tromboz nadirdir.

Video - Paroksismal gece hemoglobinüri

PNH komplikasyonlarının gelişimi için mekanizmalar

Hemolitik kriz aşağıdaki semptomlarla kendini gösterir:

• küçük mezenterik damarların çoklu trombozunun neden olduğu akut karın ağrısı;
• artan sarılık;
• bel bölgesinde ağrı;
• kan basıncını düşürmek;
• artan vücut ısısı;
• idrar lekesi siyah veya koyu kahverengi.

Nadir durumlarda, akut anürinin eşlik ettiği belirli bir geçici böbrek yetmezliği formu olan bir "hemolitik böbrek" gelişir. Bozulmuş boşaltım fonksiyonu nedeniyle protein yıkımının son ürünleri olan nitrojen içeren organik bileşikler kanda birikir ve azotemi gelişir. Hasta krizden çıktıktan sonra, kanda oluşan elementlerin içeriği yavaş yavaş geri yüklenir, sarılık ve anemi belirtileri kısmen kaybolur.

Hastalığın seyrinin en yaygın çeşidi, istikrarlı, tatmin edici bir durumun dönemleriyle serpiştirilmiş bir krizdir. Bazı hastalarda, krizler arasındaki süreler çok kısadır, kan kompozisyonunu eski haline getirmek için yetersizdir. Bu hastalarda kalıcı anemi gelişir. Akut başlangıçlı ve sık krizlerle akışın bir çeşidi de vardır. Zamanla, krizler daha az sıklıkta olur. Özellikle ağır vakalarda, akut böbrek yetmezliği veya kalbi veya beyni besleyen damarların trombozunun neden olduğu ölümcül bir sonuç mümkündür.

Önemli! Hemolitik krizlerin gelişimindeki günlük düzenlilikler ortaya çıkmadı.

Nadir durumlarda, hastalığın uzun bir sakin seyri de olabilir, izole iyileşme vakaları tarif edilir.

teşhis

Gece paroksismal hemoglobinürinin laboratuvar tanısı

Hastalığın erken evrelerinde, farklı nonspesifik semptomların ortaya çıkması nedeniyle tanı zordur. Bazen bir teşhis koymak için birkaç ay gözlem gerekir. Klasik semptom - spesifik idrar boyaması - tüm hastalarda değil, krizler sırasında ortaya çıkar. Marchiafava-Micheli hastalığından şüphelenmek için gerekçeler şunlardır:

• etiyolojisi bilinmeyen demir eksikliği;
• belirgin bir sebep olmaksızın tromboz, baş ağrıları, bel ve karın ağrısı nöbetleri;
• nedeni bilinmeyen hemolitik anemi;
• pansitopeni ile birlikte kan hücrelerinin erimesi;
• taze donör kanının transfüzyonu ile ilişkili hemolitik komplikasyonlar.

Tanı sürecinde, eritrositlerin kronik intravasküler parçalanması gerçeğini belirlemek ve PNH'nin spesifik serolojik belirtilerini belirlemek önemlidir.

Çalışmalar kompleksinde, genel idrar ve kan testlerine ek olarak, gece paroksismal hemoglobinüri şüphesi durumunda aşağıdakiler yapılır:

• kandaki hemoglobin ve haptoglobin içeriğinin belirlenmesi;
• kusurlu hücre popülasyonlarını belirlemek için akış sitometrisi ile immünofenotipleme;
• serolojik testler, özellikle Coombs testi.

Gece paroksismal hemoglobinüri için tanı testleri

Hemoglobinüri ve farklı bir etiyolojinin anemisi ile ayırıcı tanı gereklidir, özellikle otoimmün hemolitik anemi dışlanmalıdır. Yaygın semptomlar anemi, sarılık, kanda artan bilirubindir. Tüm hastalarda karaciğer ve/veya dalak büyümesi görülmez.