Čo je imunoblot na HIV. Diagnóza AIDS Immunoblot pre HIV. Ako spoľahlivý je pozitívny výsledok testu

Immunobloting (imunoblot) je vysoko špecifická a vysoko citlivá referenčná metóda potvrdzujúca diagnózu pre pacientov s pozitívnymi alebo neistými výsledkami získaných analýz. Použitie RPGA alebo IFA .

Tento spôsob detekcie protilátok proti jednotlivým patogénovým antigénom je založený na formulácii ELISA na nitrocelulózových membránach, ktoré vo forme samostatných pásov sú náchylné na špecifické proteíny oddelené gélovou elektroforézou. Ak sú protilátky proti určitým antigénom, sa nachádza tmavá čiara v príslušnom strúse stristu. Jedinečnosť imunobltu spočíva v jeho vysokej informative a spoľahlivosti získaných výsledkov.

Materiál pre výskum Je sérum alebo krvná plazma. Na štúdium na rovnakom páse je potrebný 1,5-2 ml krvi alebo 15-25 ul séra.

Podľa odporúčania WHO, Immunobloting (Western Blot) sa používa v diagnóze HIV infekcie ako dodatočnú odbornú metódu, ktorá musí potvrdiť výsledky ELISA. Zvyčajne táto metóda obnoví pozitívny výsledok pre ELFA, pretože sa považuje za citlivejšie a špecifickejšie, hoci zložitejšie a drahé.

Imunitný blot kombinuje imuno-imunitú analýzu (ELISA) s predbežnou elektroforetickou separáciou vírusových proteínov v géli a ich prenos na nitrocelulózovú membránu. Postup imunoblot sa skladá z niekoľkých stupňov. Po prvé, vopred purifikované a zničené kompozitné zložky HIV sa podrobí elektroforéze, zatiaľ čo všetky antigény zahrnuté v víruse sú oddelené molekulovou hmotnosťou. Potom sa metóda blotovania antigénu prenesie z gélu do pásu nitrocelulózy alebo nylonového filtra, ktorý odteraz obsahuje neviditeľné spektrum proteínov charakteristických pre HIV. Ďalej je materiál (sérum, pacientka krvná plazma atď.) Aplikuje sa na pásik a ak existujú špecifické protilátky vo vzorke, sú spojené s prísne zodpovedajúcimi prúžkami proteínov-antigénov. V dôsledku následných manipulácií (podobne iFA) je výsledok tejto interakcie vizualizovaný - je to viditeľné. Prítomnosť pásov v určitých častiach pásu potvrdzuje prítomnosť protilátok v študovanom sére na striktne definované HIV antigény.

Imunitný blot je najčastejšie používaný na potvrdenie diagnózy HIV infekcie. Kto zvažuje pozitívne séra, v ktorých protilátky proti akémukoľvek dvom proteínom HIV shell sú detegované imunitným bliknutím. Podľa týchto odporúčaní, ak existuje reakcia s iba jedným z proteínov shell (GP160, GP120, GP41) v kombinácii alebo bez reakcie s inými proteínmi, výsledok sa považuje za pochybné a re-vyšetrenie sa odporúča pomocou množiny inej série alebo iná firma. Ak by to bol výsledok pochybný, výskum pokračuje každé 3 mesiace.

Vlastnosti

Imunoblotová analýza je spoľahlivá metóda, ktorá vám umožní určiť prítomnosť protilátok proti antigénom HIV prvého a druhého typu. Ak je osoba infikovaná, protilátky, ktoré môžu byť zistené a oveľa neskôr sa objavujú za dva týždne. Funkcia HIV je, že množstvo protilátok sa rýchlo zvyšuje a je zachovaná v krvi pacienta. Aj keď sú prítomné, choroba sa nemusí prejaviť do dvoch alebo viacerých rokov. Metóda ELISA nie je vždy presne stanovená prítomnosť ochorenia, preto potvrdenie výsledkov s použitím imunobloting a PCR, ak imunoassimenčná analýza vykazovala pozitívny výsledok.

Indikácia na vymenovanie

Čo je to "imunoblot" už zistené, ale kto predpíše túto štúdiu? Dôvodom prejsť testy pre vírus imunodeficiencie (HIV) metódou imunoblotovania sa stáva pozitívnym výsledkom ELISA. Je potrebné prejsť analýzou imunofementácie pacientom, ktorí budú prevádzkovaní. Okrem toho je potrebné urobiť analýzu žien plánovanie tehotenstva, ako aj pre každého, kto vedie chaotický sexuálny život. Immunoblotovanie pacientov s HIV, ak výsledky IFA spôsobujú pochybnosti.

Nasledujúce rušivé príznaky sa môžu stať dôvodom pre príťažlivosť pre lekára:

ostré chudnutie;
slabosť, strata výkonu;
črevná porucha (hnačka), ktorá pokračuje tri týždne;
dehydratácia tela;
horúčka;
zvýšenie lymfatických uzlín na tele;
vývoj kandidózy, tuberkulózy, pneumónia, toxoplazmózy, exacerbácie herpes.

Pacient nemusí byť pripravený pred odovzdaním venóznej krvi. 8-10 hodín pred štúdiou sa nedá konzumovať. Neodporúča sa na jeden deň, kým sa krv podáva na použitie alkoholických a kávových nápojov, zapojte sa do ťažkého cvičenia, mávajúce vzrušenie.

Ako je štúdia?

Z hľadiska pacienta sa imunoblot nelíši od žiadnej inej analýzy: venózne krv sa odoberá, výsledok sa skúma a výsledok. Ale ak idete trochu viac podrobností, to nie je veľmi jednoduché, ale stále sa snaží prísť na to.

Spočiatku sa v prvom rade prijíma "referenčný" vírus ľudskej imunodeficiencie. Potom s pomocou špeciálneho postupu (elektroforéza) v gélovom prostredí je vírus zničený svojimi najmenšími zložkami: proteíny (vírusové antigény). Potom, s pomocou samotného blotovania (z angličtiny), sú častice umiestnené na špeciálnom materiáli - nitrocelulóza alebo nylonový filter, indikátor je pripravený na použitie, tzv. Pás je pásik, v ktorom antigény sú rozdelené v závislosti od ich molekulovej hmotnosti, v číre sekvencii, to znamená, že každý milimeter papier zodpovedá určitému proteínu.

Ako môžete vedieť, či existujú vírusy v krvi človeka, telo začne produkovať protilátky proti ich škrupinám (definované proteíny) protilátky a čo pre každý vírus má svoj vlastný individuálny antigénový proteínový proteín. Identifikácia protilátok proti antigénom proteíny v krvi je základom metódy imunoblot. Koniec koncov, ak protilátka čelí antigénu, určite navzájom komunikujú - "palica".

Takže antigény sú na páse pásu a v prípade prítomnosti v krvi podkladových vhodných antigénov, nevyhnutne vzájomne spolupracujú, a na tomto mieste, na páse pásu sa objaví indikátor - byt (ako tehotenský test). A na určitom mieste pásu, tak lekár pochopí, či existuje súbor proteínov charakteristických pre konkrétny vírus v krvi.

Tak napríklad, ak existuje stmavové centrum v mieste proteínov gP160, GP120, GP41hIV je diagnostikovaný, pre iné vírusy to bude úplne iná sada proteínov.

Treba poznamenať, že imunoblot vám umožňuje presne stanoviť prítomnosť vírusu len vtedy, ak je kompletná sada protilátok v krvi, to znamená, ak sú proteíny gp160, gp120, gp41 sú prítomné v rovnakom čase, potom je to 100 Infekcie HIV. Ale ak aspoň jeden nie je, napríklad: GP41 chýba a existuje len gp160, gp120, potom sa test považuje za pochybnú a vyžaduje opakovanie.

FAQ

Aké štádiá zahŕňajú imunoblot?

Príprava pásu.Predbežné purifikované a zničené kompozitné zložky, imunodeficiencie (HIV) sa podrobí elektroforéze, zatiaľ čo antigény zahrnuté v HIV sú oddelené molekulovou hmotnosťou. Potom blotovaním (analóg extrúzie na "mokré" nadbytočné atramentové) antigény sa prenášajú do nitrocelulózového pásu, ktorý odteraz obsahuje neviditeľný obraz antigénneho pásu spektra charakteristického pre HIV.
Štúdia vzorky.Skúšobný materiál (séra, krvná plazma pacienta, atď.) Sa aplikuje na nitrocelulózový pásik) a ak existujú špecifické protilátky vo vzorke, sú spojené s prísne zodpovedajúcimi (bezplatné) antigénne pruhy. V dôsledku následných manipulácií je výsledok tejto interakcie vizualizovaný - je to viditeľné.
Výklad výsledku.Prítomnosť pásov v určitých oblastiach nitrocelulózovej dosky potvrdzuje prítomnosť v študovanej sére protilátok na prísne definované HIV antigény.

Strih A - Pozitívna kontrola
Strih In - Slabo-lôžkové ovládanie
Strip C - Negatívna kontrola
Strip D je pozitívna vzorka (prítomnosť protilátok proti HIV-1 bola detegovaná)

Ako dešifrovať analýzu?

Ak IFA preukázala prítomnosť všetkých alebo takmer všetkých protilátok proti antigénom podľa tohto testovacieho systému, znamená to pozitívnu HIV analýzu. Ak je odpoveď po druhej sérologickej imunotestovej analýze pozitívna, potom sa musí vykonať imunoblot. Dekódovanie jej výsledkov bude správne. Ak enzýmová imunoassálna analýza poskytla pozitívny výsledok, nasledujúca analýza imunoblot tiež ukázala HIV, potom je konečný výsledok nastavený.

Keď sa analyzuje dešifrované, je potrebné vedieť, že pozitívny test HIV je určený:

od 60% do 65% 28 dní po infekcii;
v 80% - po 42 dňoch;
90% - po 56 dňoch;
95% - po 84 dňoch.

Ak je prijatá pozitívna reakcia HIV, znamená to, že protilátky proti vírusu sú odhalené. Aby ste sa vyhli falošne pozitívnej odozve, musíte prejsť znova analýzy, je to žiaduce dvakrát. Ak sa protilátky proti imunodeficiencii odhalia počas dodávky dvoch analýz z dvoch alebo s odovzdaním 3 testov v 2 z nich, sa usudzuje, že výsledok je pozitívny.

Antigén R22 môže byť zjavený v krvi po 14 dňoch od dátumu infekcie. Použitím spôsobu imunimálnej analýzy sa tento antigén deteguje od 14 do 56 dní. Po 60 dňoch už nie je v krvi. Iba keď je AIDS vytvorená v tele, rast tohto proteínu p24 v krvi sa opakuje. Skúšobné systémy analýzy imunoloky sa preto používajú na detekciu HIV v prvých dňoch infekcie buď, aby sa určilo, aká choroba sa vyskytuje a monitoruje proces liečby. Vysoká analytická citlivosť imunoopementálnej analýzy detekuje antigén P24 v biologickom materiáli v HIV prvého podtypu v koncentrácii od 5 do 10 pkg / ml, s druhým podtypovým HIV 0,5 ng / ml a menej.

Pod pochybný Výsledkom imuno-enzýmovej analýzy je určený, že počas diagnózy sa niekde mýlila, spravidla lekár zdravotníci zmätení, alebo u ľudí existujú známky infekcie a výsledok je negatívny, čo spôsobuje podozrenie, osoba je odoslané na prehodnotenie.

Pod falošne pozitívne Výsledkom je výsledok, keď sa uskutočnilo dodávanie krvných testov v nasledujúcich stavoch pacienta:

tehotenstvo;
ak má osoba porušené hormonálne pozadie;
s predĺženou imunosupresiou.

Ako dešifrovať analýzu v tomto prípade? Falošný pozitívny výsledok je umiestnený, ak sa odhaľuje aspoň jeden proteín. Vzhľadom k tomu, že antigén P24 je veľmi závislý od individuálnych variácií, potom použitie tohto spôsobu, v prvom období infekcie sa deteguje od 20% do 30% pacientov.

Ako spoľahlivý je pozitívny výsledok testu?

Niekedy IFA má falošne pozitívne výsledky (asi 1% prípadov), príčinou tohto výsledku môže byť tehotenstvo, rôzne vírusové infekcie, ako aj jednoduchú nehodu. Po obdržaní pozitívneho výsledku, presnejší test - imunoblot, na základe výsledkov, z ktorých je diagnóza vyrobená. Pozitívny výsledok imunoblot po pozitívnom ELISA je spoľahlivý o 99,9% - to je maximálna presnosť pre akýkoľvek lekársky test. Ak je imunoblot negatívny, to znamená, že prvý test bol falošný a v skutočnosti HIV u ľudí.

Čo je to neurčitý (pochybný) výsledok?

Ak je IFA pozitívna alebo negatívna, potom imunoblot môže byť pozitívny, negatívny alebo neistý. Neurčitý výsledok imunoblot, t.j. Prítomnosť aspoň jedného proteínu v imunoblotov môže byť pozorovaná, ak sa infekcia nedávno stala a existuje menej protilátok proti HIV v krvi, v tomto prípade sa imunoblot stane pozitívnym po chvíli. Tiež sa neurčitý výsledok môže objaviť v neprítomnosti HIV infekcie v hepatitíde, niektoré chronické metabolické ochorenia, alebo počas tehotenstva. V tomto prípade bude imunoblot negatívny, alebo príčina neistého výsledku sa zistí.

Koľko je analýza?

Immunoblot na HIV sa nevzťahuje na lacný výskum. V priemere, skríningové vyšetrenie s metódami imunofementov stojí od 500 do 900 rubľov. Imunobloting je overenie štúdia, na ktoré sa pohybuje od troch do piatich tisíc rubľov. Komplexnejšie metódy sú oveľa drahšie. Napríklad na analýzu polymerázovej reťazovej reakcie (PCR), bude potrebné zaplatiť asi 12 000 rubľov.

Kde analýzu?

Kde môžem prejsť HIV? ELISA, imunoblot výskum sa vykonáva v mestských súkromných klinikách, výsledky sa vydávajú počas dňa. Možná je urgentná diagnostika. V štátnych zdravotníckych inštitúciách sa IFA testy a imunoblotovanie vykonávajú zadarmo, podľa legislatívy Ruskej federácie. V povinných, tehotných žien sa kontrolujú na infekčné choroby, ako aj pacienti, ktorí majú hospitalizáciu alebo prevádzkovú intervenciu.

Imunoblotting -(Z angličtiny "." Blot "je škvrna) - spôsob identifikácie antigénov (alebo protilátok) so známymi sérami (alebo antigénmi). Je to kombinácia gélovej elektroforézy z ELISA. Spočiatku, bakteriálne bunky alebo virióny sú zničené ultrazvukom a potom metódou elektroforézy oddeľuje všetky antigény vírusov alebo bakteriálnych buniek a prijíma komerčné činidlo na špeciálnom nitrocelulózovom filme. Pri vykonávaní imunoblotovania na filme so známymi antigénmi sa aplikuje študované sérum pacienta. Po inkubácii a praní neopozrených protilátok sa pustí do ELISA - Antisérum sa aplikuje na imunoglobulínu osoby, ktorá je označená enzýmom a chromogénnym substrátom, mení maľbu pri interakcii s enzýmom. V prítomnosti komplexov antigén-protilátka-anti-Svetes na imunoglobulín-enzým na nosiči, objavujú sa maľované škvrny. Metóda imunoblotovania vám umožňuje oddelene detegovať protilátky proti rôznym antigénom patogénov (napríklad s infekciou HIV, imunoblotovanie odhaľuje protilátky na GP120, GP24 a iných vírusových antigénoch).

Rádioimunitná analýza (RIA)

Spôsob je založený na reakcii protilátky antigénu s použitím označenia antigénu alebo rádionuklidu protilátky. Ako označenie používa 125I, 14C, 3H, 51CR a iné rádionuklidy. Výsledné imunitné komplexy sa izolujú zo systému a určujú ich rádioaktivitu na počítadlách (β-žiarenie). Intenzita žiarenia je priamo úmerná počtu pripojených antigén a protilátkových molekúl.

Verzia pevnej fázy RIA s použitím značených protilátok alebo antigénov, sorbovaných v otvoroch polystyrénových panelov, je rozšírená.

RIA sa používa na identifikáciu mikróbov, vírusov, rôznych hormónov, enzýmov, liečivých látok, imunoglobulínov, ako aj iných látok obsiahnutých v materiáli podľa štúdie v menších koncentráciách 10-12-10-15 g / l.

Kontrolné otázky

Reakcia imunitnej bakteriolizácie: Aká je táto reakcia; Čo je to antigén, ktoré - protilátky, reakčný mechanizmus, spôsoby prípravku, praktické použitie. Reakcia imunitnej hemolýzy: potrebné zložky, spôsoby prípravy; Ovládanie, Praktická aplikácia. Reakcia lokálnej hemolýzy v géli (reakcia YERNE): Princíp reakcie, spôsoby prípravy, praktické použitie. Väzbová reakcia komplementu: Princíp reakcie; ktorý je vytvorený v interakcii imunitného séra so špecifickým antigénom; Čo sa stane s doplnkom, ak je súčasne prítomný? Aký je osud doplnku v prípade, že medzi antigénom a protilátkami neexistujú žiadnu špecifickú afinitu? S pomocou ktorej možno určiť reakciu, čo sa stalo s doplnkom; Prečo sa táto reakcia používa; Aký je viditeľný pozitívny výsledok RSK? Prečo? Čo je vlastnosť doplnku v prvej fáze RSK? V druhej fáze? Ak je konečný RSK hemolýzou, čo to znamená - pozitívny alebo negatívny výsledok? Vysvetlite výsledky: RSK + + + +, RSK + + +, RSK + +, RSK +. Pomenujte zložky prvého systému RSK a zložiek druhého systému RSK. Prečo by mal byť testovacie sérum inaktivované? Ako titrujte komplement? Hemolytické sérum: Čo obsahuje, ako sa dostanú, čo je titer a ako to určiť? Aké zvieratá sa používajú na získanie zložiek RSK? Metodika RSK v zime. Pri stanovovaní z toho z uvedených reakcií je potrebné na účasť komplementu: zrážky, flokulácia, aglutinácia, detekcia neúplných protilátok, imunitnej bakteriolizácie, imunitnej hemolýzy, YERNE, RSK? Imunofluorescenčná reakcia (útes) - Špecifikujte sekvenciu udalostí s priamou reakciou kunov; Požadované zložky. Čo je to antigén, ktoré - protilátky, ako označené protilátky, pretože výsledok reakcie sa berie do úvahy, čo vyzerá pozitívny výsledok? Praktická aplikácia - Čo môže byť určená touto reakciou? Nepriama imunofluorescenčná reakcia - špecifikujte sekvenciu udalostí s touto reakciou, nevyhnutnými zložkami, čo je antigén, ktoré sa aplikujú imunitné série; Praktické použitie; Výhodou nepriameho útesu v porovnaní s priamou reakciou. IMUNOENIMEN ANALÝZA (IFA) - zásada reakcie; potrebné zložky; Uveďte postupnosť udalostí, keď je formulácia reakcie, aby sa detegoval antigén v štúdii materiálu; potrebné zložky; Čo sa stane s pozitívnym výsledkom, čo vyzerá? Uveďte postupnosť účinku pri vykonávaní ELISA, aby ste detegovali protilátky v testovacom sére; potrebné zložky; Čo sa stane s pozitívnym výsledkom? Immunobloting je princíp reakcie; Hlavné kroky; potrebné zložky; Výsledok sa zohľadňuje; Výhody reakcie. Rádioimunitná analýza (RIA) - Z ktorého základných etáp reakcia je reakcia; Čo je označené protilátkami alebo antigénmi, ako výsledok zohľadňuje? Immunoelektronická mikroskopia - princíp metódy; Hlavné kroky; potrebné zložky; ako označené protilátky; Výsledok reakcie sa berie do úvahy. Imobilizačné reakcie - princíp metódy, technikových produkcií, komponentov, účtovných výsledkov.

Úlohy na vykonávanie v procese vlastného prípravy.

Vyplňte tabuľku "imunitne reakcia" s ohľadom na reakcie demontované v rámci tejto témy.

Reakcie imunity

Študentská práca v praktickej lekcii

Práca začína okamžite z Nastavenia 1 fázy RSK, ale nahrávanie notebooku neskôr (pozri nižšie).

1. Reakcia imunitnej hemolýzy. Zobraziť demonštračnú reakciu imunitnej hemolýzy, náčrty vo forme schémy, vysvetliť výsledok v skúsených a v kontrolných trubkách.

2. Doplnková záväzná reakcia

a) Demontujte RSK na stole;

b) Nakreslite v notebooku, ktorý nastaví RSK vo forme tabuľky;

c) položte druhú fázu RSK (prvá fáza je umiestnená na začiatku triedy);

d) demontovať diagnostické prípravky potrebné pre RSK;

e) Zohľadniť výsledok. Vypravte záver o prítomnosti špecifických protilátok v testovacom sére.

3. Imunofluorescenčná reakcia. Preskúmajte tabuľku, vytvorte graf reakcie formulácie v notebooku; Pozrite sa na diagnostické sérum; Určite - ktorý obsahuje sérum, ako je varené, pre akú reakciu (priamy alebo nepriamy útes) sa aplikuje. Pozrite si demonštračný výsledok útesu v luminiscenčnom mikroskope.

4. Immuno enzýmová analýza (ELISA). V notebooku, diagram prípravku reakcie v dvoch verziách: na detekciu antigénu v stave pod štúdiom a na detekciu sérových protilátok. Pozrite sa na súbor zložiek na diagnostiku HIV infekcie a hepatitídy V. Určite, že obsahuje každú zložku a pre ktorú sa aplikuje.

5. Immunoblotovanie. Vykonať reakčnú schému v notebooku; Pozrite sa na demonštráciu - výsledok reakcie.

6. Rádioimunitná analýza (RIA). Vykonať reakčnú schému v notebooku.

7. Mikroskopia imunitnej elektróny (IEM). Pozrite sa na demonštráciu - výsledok reakcie, vykonať reakčnú schému v notebooku, uveďte ramená antigén (vírus) a označené protilátky.

Immunobloting je vysoko citlivý spôsob detekcie proteínov na základe kombinácie elektroforézy a ELISA alebo RIA. Imunoblotovanie sa používa ako diagnostická metóda pre infekciu HIV atď.

Vo všeobecnom zmysle imunobloting chápe analýzu zmesi proteínov prenesených do pevnej substrátovej membrány, s ktorou sú spojené s kovalentnými väzbami, po ktorom nasleduje imunózna.

Môžete analyzovať zmes proteínov priamo aplikovaných na substrát - bod-bod-blot analýza - alebo po jej predbežnej frakcionácii spôsobmi elektrickým, disk-elektroforéza alebo dvojrozmerná elektroforéza - Western blot analýza (Western blotting).

Antigény patogénu sú oddelené elektroforézou v polyakrylamidovom géli, potom ich prenášajú z gélu do aktivovaného papiera alebo nitrocelulózovej membrány a prejavujú sa pomocou ELISA.

Firmy produkujú takéto prúžky s "blotmi" antigénov. Na tieto pásy sa aplikuje choré sérum. . Potom, po inkubácii, sú prane z nereaktívnych protilátok pacienta a séra proti ľudským imunoglobulínom, označeným enzýmom . Komplex (antigén + protilátka + protilátka + protilátka antigén + antigén + protilátka) sa deteguje pridaním chromogénneho substrátu mení farbu pod pôsobením enzýmu.

Takáto metodika sa tiež používa na výber baktérií, fágov alebo vírusov exprimujúcich cieľové klonované génové produkty.

Prenos proteínov na membránu sa vykonáva buď pasívne alebo používanie zariadenia na elektrinu. Účinnosť prevodu proteínu na membránu je ovplyvnená mnohými faktormi, ako je molekulová hmotnosť proteínov, gélová pórovitosť, čas prenosu a zloženie použitého pufra použitého (Trans Buffer).

V závislosti od úloh a podmienok experimentu sa zvolení podmienky prenosu poskytujú najlepšie výsledky. Nitrocelulózové, polyvinylizididyluorid (PVDF) alebo pozitívne nabité nylonové membrány sa zvyčajne používajú ako substráty. Nitrocelulóza sa môže viazať na 80 - 100 ug proteínu na 1 cm2.

Proteíny s nízkou molekulovou hmotnosťou (s molekulovou hmotnosťou menšou ako 20 kDa) sa môžu stratiť v dôsledku umývania schopnosti predbežne preskúmať polymorfizmus určitých genetických lokusov na dĺžkach zodpovedajúcich reštrikčných fragmentov DNA.

Okrem toho, s použitím hybridizácie podľa SAREW, je ľahké zistiť, či cieľový gén má časť hydrolýzy určitého obmedzenia vo svojej vnútornej časti, ktorá vám umožní vybrať si optimálnu stratégiu pre klonovanie študovanej oblasti genómu.

Podobnou schémou agarózového gélu na nitrocelulózovom filtri sa môžu preniesť molekuly RNA. Táto metóda bola pomenovaná severným blotom (severným blotom) na rozdiel od južného blotovacieho blotovania, pretože južné južné jazykové priezvisko znamená "juh".

Prenos do filtrov z proteínového gélu bol nazývaný Western blotting (Western blotting). Veľké proteíny (viac ako 100 kDa), denaturované v roztoku dodecylsulfátu sodného (SDS), môžu byť slabo prenesené do membrány, ak je v Transferom prítomný etanol. Alkohol významne zlepšuje prenos proteínov s SDS polyakrylamidovým gélom, ale zužuje póry v géli, čo vedie k oneskoreniu veľkých proteínov.

Membrána PVDF je optimalizovaná pre imunóniu a je schopná zadržať špecificky spojené proteíny až do 160 ug / cm2 na veľmi nízkej úrovni nešpecifickej väzby.

Imunoblotovanie

Dôležitou vlastnosťou tejto membrány je možnosť jeho opakovaného použitia. Zeta-sonda nylonové membrány účinne viažu SDS proteíny v neprítomnosti alkoholu a táto väzba je odolná voči následným liečbe. Proteíny s nízkou molekulovou hmotnosťou sa tiež detegujú účinne. Kvôli vysokej väzbovej kapacite - približne 480 ug proteínu o 1 cm2 - zeta-sond membrány umožňujú detekciu stopových množstiev proteínu v analyzovaných zmesiach.

Potom, čo sa antigén ukáže, že je imobilizovaný na membráne, zostávajúce väzbové centrá blokujú želatínové roztoky alebo bovinné sérové \u200b\u200balbumín, alebo odstredené mlieko.

Membrána sa potom inkubuje v roztoku polyklonálnych alebo monoklonálnych protilátok proti štúdiu anti-génu. Po premývaní neviazaných protilátok sa membrána inkubuje v roztoku sekundárnych protilátok, ktoré sú konjugát enzýmom alkalických fosfatázy (alkalická fosfatáza, Ar) alebo chren peroxidáza (Horseradish peroxidáza, HRP) s protilátkami proti lásky (kozie protilátky proti imunoglobulínu Králik, myš alebo ľudia) alebo proteíny (stafylococcus aureus proteín) alebo g (proteín streptococcus sp.), ktorý má vysokú afinitu k Fc oblasti imunoglobulínov.

Detekcia vzdelaných imunitných komplexov sa vykonáva s chemickým alebo chemiluminiscenčným spôsobom. Substráty pre chemickú reakciu s použitím konjugátov s alkalickou fosfatázou sú 5-bróm-4-chlór-3-indolylfosfát (BCIP) alebo tetrazolium modrá (NBT) a pri použití konjugátov Krena peroxidázy - 4-chlór-1-nafthol a peroxid vodíka.

V dôsledku enzymatických reakcií na membráne je na lokalizačnej lokalizačnej lokalizácii komplexu antigénovej protilátky vytvorená maľovaný pás alebo bod.

Citlivosťou tejto metódy je 100 ghg proteínu pri použití konjugátov Ar a 100-500 GH pri použití konjugátov HRP. Chemiluminiscenčná detekcia imunitných komplexov vám umožňuje určiť menej ako 5 pg antigénu. Princíp tejto metódy spočíva v tom, že s HRP reakciou s peroxidom vodíka a cyklickým diacelhydrazinyluhnúzlom, dochádza k emisii svetla vlnovej dĺžky 428 nm, ktoré môžu byť upevnené na fotosenzitívnom filme.

Imunoblotovacia reakcia (Ri) je vyvinutá na základe ELISA. Je to najdôležitejšia a citlivá metóda imunochemickej analýzy. Imunoblotovanie (z anglického bloty - žiara, škvrna) kombinuje IFA s elektroforézou. Používa sa na identifikáciu nekomplexných protilátok proti HIV a protilátkam na jeho oddelené štruktúrne proteíny (proteíny-P24, glykoproteín-GR120, GR 41 atď.). Odkazujú na expertné (podporné) reakcie diagnózy infekcie HIV.

Reakcia sa uskutočňuje v niekoľkých stupňoch:

Vírus je zničený komponentmi - antigény (P24, GR120, GR 41, atď.), Ktoré sú podrobené elektroforéze v polyakrylamidovom géli, to znamená separáciu antigénov na frakciách molekulovej hmotnosti.

2. Gél je pokrytý nitrocelulózou membránou a frakcie antigénov sa na neho prenášajú pomocou elektroforézy. Nitrocelulóza sa správa ako zavlažovací papier. Membrána je narezaná na prúžky (prúžky). Firmy produkujú takéto prúžky s "blotmi" antigénov.

Immunobloting - Ďalšia nepriama metóda

Streams s HIV antigénami nasadenými na ňom sú ponorené do séru vyšetreného a potom odmývajú od nestranného materiálu.

4. Street sa inkubujú s antihylobulínovým sérom, označeným peroxidázou, premyté.

Pridá sa substrát a je zaznamenaný počet lakovaných frakcií (spotov), \u200b\u200bktoré zodpovedajú lokalizačnej zóne ag-at komplexu.

Prítomnosť pásov v určitých častiach pásu potvrdzuje prítomnosť protilátok v študovanom sére na striktne definované HIV antigény. Výsledok imunoblotovania sa považuje za pozitívny, ak membrána znázorňuje pásy zodpovedajúce dvom troch z troch HIV antigénov - P24, GP41 a GP 120 (obr. 37).

Obraz

Zoznam použitých literatúry

Hlavná literatúra

Lekárska mikrobiológia, virológia a imunológia: učebnica pre študentov medu. Univerzity 2. ed., Univerzita. a pridať. - 702 p. Ed. A.A. Sparrow. M.: MIA, 2012.

2. Mikrobiológia, Virológia a imunológia: Manuál pre laboratórne triedy: štúdie. Obete / (V.B.Subacov atď.); Ed. VB SUBACHAKOVA, M.M. KARAPATSA. - M.: GoOTar Media, 2014.- 320С.: IL.

3. Lekárska mikrobiológia, imunológia a virológia [Elektronický zdroj]: Návod na med.

univerzity - 760 p. - Prístupový režim: http://www.studmedlib.ru/book/ISBN9785299004250.html Kijiyev A.I., Babichev S.A. Petrohrad: speclit, 2010.

4. Zdravotná mikrobiológia, Virológia a imunológia [Elektronický zdroj]: Návod: v 2 t. / T. 1. - 448 p. - Prístupový režim: http://www.studmedlib.ru/book/ISBN97859704142241.html Zverev V.V., Boychenko M.N.

M.: GoOTar Media, 2010.

5. Zdravotná mikrobiológia, Virológia a imunológia [Elektronický zdroj]: Návod: 2 tony. T. 2. - 480 p. Prístupový režim: http://www.studmedlib.ru/book/ISBN97859704142242.html Zverev V.V., Boychenko M.N. M.: GoOTar Media, 2010.

Dodatočná literatúra

1. Imunodiagnostické reakcie: Tutoriál / Cena: G. K. DAVENTSHINA, Z.G. GAGABIDLIN, A.A. AAHTARIEVA, M.M.TUIGUNOV, A.K. BULGAKOV, T.A. SAVCHENKO, R.F.

Husnarizanova, Yu.Z. Gabidullin, M.M. Elsynbaev - UFA: Vydavateľstvo GBOU VPO BGMU Ministerstva zdravotníctva Ruska, 2016. - 86c.

2. Vlastnosti niektorých vlastností, ktoré určujú patogénny potenciál Enterobacter, Citrobacter, Serratia, E. coli, Proteus, Serratia, E. coli, Proteus: Vedecké vydanie / YU. Z. Gabidullin, RS SUFIYAROV, II DOLGUSHIN - UFA, 2015. - 250 s.

Domov »Immunoblot - Čo je to? Immunoblot v diagnostike infekčných chorôb

Immunoblot - Čo je to? Immunoblot v diagnostike infekčných chorôb

Čo je imunoblot? Ide o spoločný spôsob laboratórnej diagnostiky ľudských vírusových infekcií. Je to jeden z najpresnejších a spoľahlivých spôsobov, ako zistiť HIV.

Pre spoľahlivosť je ešte viac ako enzým pripojený test imunoosorbent (ELISA). Imunoblotové výsledky sa považujú za nevyvrátiteľné a konečné.

Immunoblot - Čo je to? Aby ste rozpoznali osobu HIV, musíte prejsť laboratórnou skúšobnou metódou krvného séra pre protilátky.

Rezy Western Blot sú tiež nazývané Western blot (Western Blot). Používa sa na detekciu ľudských vírusových infekcií ako dodatočnú odbornú metódu. To je potrebné potvrdiť ELISA - laboratórnu štúdiu, ktorá umožňuje stanoviť prítomnosť protilátok proti HIV v krvi. Imunoblot sa vzťahujú pozitívne ELISA.

Je to považované za najcitlivejšie, zložité a drahé.

účel

Čo je imunoblot? Tento spôsob laboratórnych testov sérových testov na prítomnosť protilátok k vírusu.

V priebehu špeciálneho výskumu, celkové vírusové proteíny v gélových a nitrocelulózových membránach.

Immunoblotovanie (detekcia protilátok u pacientov s v sére na určité antigény patogénov)

Navrhnutý postup pre západné škvrny na určenie infekcie HIV v rôznych stupňoch. V prvej fáze sa purifikovaný vírus z súčastí zložiek podrobí elektroforéze a antigénom, ktoré sú zahrnuté v nej rozdelené do molekulovej hmotnosti.

Plemená vírusov ľudskej imunodeficiencie v živých bunkách implementovali vo svojich genetických informáciách. V tomto štádiu sa osoba stáva nositeľom vírusu HIV, ak ste boli infikovaní.

Špecifiká tejto choroby spočívajú v tom, že sa už dlho prejavuje. Vírus ničí lymfocyty, teda človek znižuje imunitu a telo sa nedá vysporiadať s infekciami.

Ak je HIV správny a včasný, pacient bude žiť hlboko starobe. Nedostatočná liečba nevyhnutne vedie k smrti. Od infekcie, ale bez liečby, maximálne obdobie najviac desať rokov.

Vlastnosti

Analýza imunoblot je spoľahlivá metóda, ktorá vám umožní určiť prítomnosť protilátok proti antigénom HIV prvého a druhého typu.

Ak je osoba infikovaná, po dvoch týždňoch protilátok, ktoré možno výrazne objaviť. Funkcia HIV je, že množstvo protilátok sa rýchlo zvyšuje a zostáva v krvi pacienta. Aj keď sú prítomné, choroba sa nemusí prejaviť dvakrát alebo viac rokov. Metóda ELISA nie vždy presne indikuje ochorenie, ktoré vyžaduje potvrdenie výsledkov z častí PCR a Western blot, ak imunozmieznotvorná analýza vykazovala pozitívny výsledok.

Indikácie K.

Aký druh "imunoblot" už zistil, ale ktoré sú zavedené do štúdie?

Dôvodom inšpekcie imunoblózu ľudskej imunodeficiencie (HIV) sa stane pozitívnym výsledkom ELISA. U pacientov, ktorí musia mať operáciu, je potrebné ísť cez analýzu imunotestov s pevnou fázou. Okrem toho musíte urobiť analýzu tehotenstva žien, ako aj tých, ktorí zvyšujú chaotický život. Rezy Western Blot sú predpísané pacientom s infekciou HIV, ak sú výsledky ELISA pochybné.

Nasledujúce rušivé príznaky môžu byť dôvodom na prístup k lekárovi: rýchla strata hmotnosti; slabosť, strata funkcií; črevných porúch (hnačka), ktorá trvá tri týždne; dehydratácia; horúčka; zvýšenie lymfatických uzlín v tele; rozvoj kandidózy , tuberkulóza, pneumónia, toxoplazmóza, exacerbácia herpes.

Pacient nemusí byť pripravený pred odovzdaním venóznej krvi.

8-10 hodín pred testom nejedzte. Neodporúča sa deň pred krvou nápojov alkoholu a kávy, ťažkými cvičeniami, vzhľadom na vzrušenie.

Kde analýzu?

Kde môžem prejsť testovaním HIV?

ELISA, Immunoblotová analýza vykonaná v mestských súkromných klinikách, výsledky sa poskytujú počas dňa. Možná je urgentná diagnostika. Vo verejných inštitúciách, ELISA Lekárske testy a sekcie Western Blot zdarma v súlade s právnymi predpismi Ruskej federácie.

Povinná kontrola infekčných chorôb tehotných žien a pacientov, ktorí potrebujú hospitalizáciu alebo operáciu. Ako sa táto štúdia uskutočňuje?

Ako držať ELISA? Imunoblot pozitívny / negatívny potvrdzuje alebo vyvráti výsledky ELISA. Postup je pomerne jednoduchý. Špecialista berie plot venóznej krvi, trvá menej ako päť minút.

Po odbere vzoriek by mal byť miesto injekcie dezinfikovať a uviaznuť s omietkou. Plot je vykonávaný na prázdnom žalúdku, takže po zákroku nebude poškodený jesť horkú čokoládovú dlaždice alebo sladký teplý nápoj.

Ak chcete získať odporúčanie pre bezplatnú analýzu v štátnej lekárskej inštitúcii, musíte navštíviť terapeut.

Všeobecne platí, že imunoblot sa nelíši od iných krvných štúdií plotom. Metodika štúdie je jednoduchá. Ak je vírus prítomný v krvi osoby, telo na jeho zničenie začína produkovať protilátky. Pre každý vírus existuje mnoho proteínových antigénov. Detekcia týchto protilátok je základom sekcií sekcie Western Blot. Náklad

Koľko analýzy? Imunoblot HIV sa vzťahuje na lacný výskum.

V priemere je skríningové metódy imunotesy od 500 do 900 rubľov. Západné bloty sekcií je študovať inšpekciu, na ktoré sa pohybuje od troch do piatich tisíc rubľov. Komplexnejšie metódy sú oveľa drahšie. Napríklad na analýzu polymerázovej reťazovej reakcie (PCR), bude potrebné zaplatiť asi 12 000 rubľov.

Interpretácia výsledkov

Najbežnejšie metódy diagnostikovania HIV infekcie je imunozmenikovou analýzou a imunoblotom.

Na stanovenie protilátok proti vírusu ľudskej imunodeficiencie. Infekcia sa typicky potvrdzuje dvoma testmi: skríning a potvrdenie. Výklad výsledkov by mal vykonať lekár, diagnostiky a predpisuje liečbu. Ak je imunoblot pozitívny, to znamená, že v ľudskom tele vírus.

Pozitívny výsledok by nemal byť dôvodom na samoobsluhu, pretože každý pacient môže mať svoje vlastné ochorenia ochorenia.

Kvalitatívna analýza zahŕňa skríning a certifikáciu. Ak pacient nerozpozná vírus, výsledok sa zobrazí "negatívne". Keď bol tento certifikát zistený, premietanie sa vykonáva ďalší výskum. Imunoblotová analýza, ktorá potvrdzuje alebo vyvracia skríning. Ak sa testovacie prúžky objavujú v stmavnutí niektorých oblastí (lokalizácia proteínov), diagnostika HIV je diagnostikovaná.

Ak sú výsledky pochybné, testy sa vykonávajú do troch mesiacov.

Aby sa zabránilo infekcii vírusu ľudskej imunodeficiencie, je možné dodržiavať určité pravidlá: Vyhnite sa náhodným sexuálnym kontaktom, pri kontakte používajte kondómy, nepoužívajte drogy.

Ak je choroba zistená v tehotnej žene, je dôležité dodržiavať odporúčania ošetrujúceho lekára, nezabudnite na testy na prítomnosť vírusu.

Čo je Western blotting?

Identifikácia proteínu srdcových zmesí alebo extraktov rôznych tkanív je jednou z najbežnejších úloh. Použitie takéhoto nástroja ako špecifické protilátky môžete definovať študovaný proteín s minimálnym dočasným a finančným nákladom.

V metóde Western Blotting (Western Blotting) v prvej fáze sa zmes proteínov oddelí elektroforézou v prítomnosti dodecylsulfátu sodného (DSN), potom sa prenesie do nitrocelulózovej membrány spôsobom elektrobility.

Podstatou tejto metódy je, že gél po elektroforéze je umiestnený na nitrocelulózovej membráne medzi vrstvami filtračného papiera. "Sendvič" zmontovaný týmto spôsobom je umiestnený v elektrickom poli, takže komplexy proteín-DSN sa pohybujú cez doskovú dosku a sú imobilizované (v dôsledku nešpecifickej sorpcie) na povrchu nitrocelulózovej membrány.

Väzbu komplexu proteín-DSN s nitrocelulózou membrány sa zúčastňujú na hlavnej silu elektrickej prírody a táto interakcia je multipoint a vedie k "tvarovaniu" proteínov na povrchu membrány. Po elektrickom sudoch sa teda dostaneme gélovú repliku na nitrocelulózu s proteínmi, ktoré sa nachádza rovnakým spôsobom ako v polyakrylamidovom géli.

Po vedení DSN - elektroforéza, elektrickej stopy a sorpcie proteínov z gélu na nitrocelulózovej membráne sa silne zmení terciárna konformácia proteínu, ak všeobecne správne rozpráva o existencii terciárnej štruktúry pre proteín po takom tuhé spracovanie. Preto sa pre imunochemickú detekciu proteínu podľa štúdie, zvyčajne používajú iba mono- alebo polyklonálne protilátky, špecifickosť proteínovej molekuly.

51. Immunologická analýza, imunoblotovanie. Kožušiny, komponenty, použitie.

Protilátky špecifické pre konformačné epitopy (alebo oblasti vrátane interrujúcich kontaktov) zvyčajne nie sú vhodné na použitie v metóde Western Blot.

Po prenesení proteínov sa membrána inkubuje postupne s protilátkami špecifickými pre štúdie proteínu a potom so sekundárnymi protilátkami, špecifické pre Fc fragmenty primárnych protilátok konjugovaných s enzýmom (alebo iným) štítkom (obr.

1 a). V prípade, keď je štítok konjugovaný priamo primárnym, špecifickým protilátkovým antigénom, sekundárne protilátky nie sú potrebné (obr. 1 b). Imunitné komplexy "sa prejavujú" vytvorené v lokalizácii študovaného proteínu s použitím chromogénneho substrátu (v závislosti od typu tagu).

Citlivosť a špecificita metódy je výrazne závislá, na ktorej sa protilátky používajú počas výskumu.

Použité protilátky by mali byť špecifické pre jedinečnú, charakteristiku študovaného proteínu aminokyselinovej sekvencie. V opačnom prípade je možné interakciu (najmä v prípade hrubých proteínových extraktov) protilátok s niekoľkými molekulami proteínu, čo zase povedie k vzniku niekoľkých farebných pásov na membráne.

Identifikácia štúdie proteínu v tomto prípade je často ťažké alebo nemožné.

Druhý dôležitý faktor, ktorý by mal byť pripomenutý pri výbere protilátok je afinita. Čím vyššia je afinita použitých protilátok, jasnejšie a jasnejšie sú proteínové pásy skórované, tým vyššia je citlivosť metódy. Pri použití ťažkostných protilátok je možné dosiahnuť citlivosť 1 ng a dokonca vyššia.

Na vizualizáciu výsledku interakcie membrány antigénu a protilátok sa používajú sekundárne protilátky konjugované s činidlami schopnými poskytnúť určitý signál za určitých podmienok.

Zvyčajne sa enzým (peroxidáza alebo fosfatáza) používa ako taký činidlo, produkt reakcie sa natretý a padá na membránu ako nerozpustnú zrazeninu.

Aj v tejto metóde je možné použiť fluorescenčné značky.

Obr. 1. Schéma imunochemického farbenia podľa štúdie proteínu: A - s použitím sekundárnych protilátok konjugovaných s enzýmovým štítkom; B - Primárna protilátka priamo konjugovaná s enzýmovým štítkom.

Protokol:

I. Príprava gélu a membrány a proteínového elektrického

Polyakrylamidový gél po elektroforéze sa umiestni do blotovacieho pufrového kúpeľa (25 mM Tris, pH 8,3, 192 mM glycín, 10% etanol).

Dva listy filtračného papiera, narezané na tvare kazety na blotovanie a navlhčenú s hrotom pre blot, sú umiestnené na tej časti kazety, ktorá bude adresovaná na anódu. Potom sa nitrocelulózová membrána umiestni na filtračný papier, ktorý nasleduje na vzduchové bubliny medzi membránou a papierom.

Potom by sa mal gél starostlivo umiestniť na membránu, obráťte sa osobitnú pozornosť na absenciu vzduchových bublín medzi gélom a membránou. Tvorba sendviča je dokončená dve vrstvy zvlhčeného filtračného papiera, ktoré sú umiestnené na povrchu gélu (obr. 2). Výsledný sendvič je upnutý do kazety a je umiestnený medzi elektródami tak, aby membrána smerovala k anóde.

Obr. 2. Schéma elektrických proteínov na membráne.

II. Elektrina

Elektrické proteíny na nitrocelulózovej membráne sa uskutočňujú v pufri obsahujúcom 25 mM tris, pH 8,3, 192 mM glycínu, 10% etanolu počas 30-50 minút pri konštantnom napätí 100 V.

Doba elektrického hrdla závisí od veľkosti prenosných proteínov, tým viac bielkovín, čím dlhšie sa vykonáva elektrický sud. Odhaduje sa kvalita elektrickej energie a umiestnenie proteínových pásov, zafarbia nitrocelulózovú membránu s 0,3% roztokom Ponceau S v 1% kyseline octovej. Pred vedením imunochemického farbenia by mala byť membrána prepláchnutá niekoľkokrát slabo alkalickým vodným roztokom Tris, aby sa odstránila farbivo s proteínmi.

III. Imunocemické farbenie proteínov imobilizovaných na nitrocelulózovej membráne

Ak chcete zablokovať nešpecifické viazacie miesta protilátok, sa membrána inkubuje s konštantným miešaním pri teplote miestnosti počas 30 minút na PBST (pre lepší zámok, môže sa použiť PBST roztok obsahujúci 10% suchého odstredeného mlieka).

Po blokovaní sa membrána inkubuje hodinu pri teplote miestnosti a konštantný v miešaní v PBST obsahujúcom 1-10 ug / ml špecifických protilátok.

Optimálna koncentrácia protilátok je vybraná empiricky a závisí od afinity interakcie protilátok s antigénom.

Na konci inkubácie sa membrána premyla 5-krát PBST a prenesením na roztok sekundárnych protilátok konjugovaných s chrenovou peroxidázou. Chov konjugátu zvyčajne označuje výrobca na obale, alebo je vybraný výskumníkom empiricky. V roztoku sekundárnych protilátok sa membrána inkubuje 1 hodinu s konštantným miešaním.

Po dôkladnom premytí (minimálne 5 - 6-krát sa PBST membrána prenesie do roztoku chromogénneho substrátu, obsahujúceho 3 mg diaminobenzidínu (DB) a 10 ul 30% peroxidu vodíka v 10 ml 0,1 M Tris-HCl , pH 7,6.

Inkubácia sa uskutočňuje za miešania 5 - 10 minút. Membrána po skončení inkubácie so substrátom by sa mala opláchnuť PBST, suché, žiariace s filtračným papierom a okamžite vykonať elektronickú kópiu, skenovanie farieb. Ak je membrána úplne vysušená, poškriabané proteínové prúžky sú bledé a obraz je menej svetlý a kontrast.

Poznámka: DUB je toxická látka a potenciálny karcinogén. Práca len v gumových rukavíc!

Jeho meno Aids Vyacheslav Zalmanovich Tarantul

Immunobloting - Ďalšia nepriama metóda

Okrem IFA, v určitých prípadoch sa postup nazývaný "imunobloting" alebo "imunitný blot" používa na testovanie infekcie HIV (niekedy nazývaný "Western blot"). Na odporúčanie, imunoblotovanie sa používa v diagnóze HIV infekcie ako dodatočnú odbornú metódu, ktorá musí potvrdiť výsledky ELISA. Zvyčajne táto metóda obnoví pozitívny výsledok pre ELFA, pretože sa považuje za citlivejšie a špecifickejšie, hoci zložitejšie a drahé. Ale pred podpisom konečnej vety pacientovi musí lekár úplne zabezpečiť v správnosti diagnózy. Otázka komplexnosti a vysokých nákladov preto nemôže byť rozhodujúca.

Program, ako aj v spôsobe uskutočnenia k imunitným blotom, dobre známy výraz "priniesť na mokré" je dobre vhodné. Imunitný blot kombinuje analýzu imunotestov (ELISA) s predbežnou elektroforetickou separáciou vírusových proteínov v géli a ich prenos na nitrocelulózovú membránu ("tvarovaná"). Postup imunoblodu pozostáva z niekoľkých stupňov (obr. 27). Po prvé, vopred purifikované a zničené kompozitné zložky HIV sa podrobí elektroforéze, zatiaľ čo všetky antigény zahrnuté v víruse sú oddelené molekulovou hmotnosťou. Potom sa blotovaním (analóg extrúzie na "mokré" nadbytočné atramentové) antigény prenesú z gélu do nitrocelulózy alebo nylonového filtračného pásu, ktorý odteraz obsahuje neviditeľné oko spektra proteínov charakteristických pre HIV. Ďalej je pás ocenený materiál (sérum, krvná plazma pacienta atď.) A ak existujú špecifické protilátky vo vzorke, sú spojené s prísnymi zodpovedajúcimi prúžkami proteínov-antigénov. V dôsledku následných manipulácií (podobne iFA) je výsledok tejto interakcie vizualizovaný - je to viditeľné. V konečnom dôsledku prítomnosť pásov v určitých častiach STREPA potvrdzuje prítomnosť v študovanej sére protilátok na prísne definované HIV antigény.

Imunitný blot je najčastejšie používaný na potvrdenie diagnózy HIV infekcie. Kto zvažuje pozitívne séra, v ktorých protilátky proti akémukoľvek dvom proteínom HIV shell sú detegované imunitným bliknutím. Podľa týchto odporúčaní, ak existuje reakcia s jedným z proteínov shell (GP160, GP120, GP41), v kombinácii alebo bez reakcie s inými proteínmi, výsledok sa považuje za pochybné a znovu študuje s použitím sady inej série alebo iná firma. Pre chválu bezpečnosti, ak

Obr. 27. Pre imunoblotovanie v prvej fáze, proteíny obsiahnuté v sére, oddelené v géli svojou molekulovou hmotnosťou a nabitím elektrickým poľom (elektroforézou v géli). Potom sa gél aplikuje na nitrocelulózu alebo nylonovú membránu a "sciling" (toto je blotting). Toto sa uskutočňuje v špeciálnej komore, ktorá vám umožní vykonávať úplnú peritu gélového materiálu na membráne. Výsledkom je obraz umiestnenia proteínov, ktorý bol na géli, sa reprodukuje na membráne (blot), z ktorého sa ďalej ľahko manipuluje. Spočiatku sa membrána spracuje s protilátkami na požadovaný antigén a po premývaní nesúvisiacich materiálu sa pridá rádioaktívne označený konjugát, ktorý sa špecificky viaže na protilátky (ako v ELISA). Umiestnenie výslednej komplexnej "antigénovej protilátky - značeného konjugátu" sa stanoví pomocou autorádiografie pomocou röntgenového filmu. Po jeho prejave sa zistí, či existujú antigény v krvi alebo nie sú k nim a potom, čo výsledok zostáva pochybný, následné pozorovanie sa odporúča šesť mesiacov (výskum pokračuje každé tri mesiace).

Súčasnosť v Ruskej federácii na použitie v diagnóze HIV infekcie sa odporúča používať päť testovacích systémov, medzi ktoré sú ruské aj cudzie.

Z knihy anestéziológie a resuscitácie Autor Marina Aleksandrovna Kolesnikova

Z knihy podivnosti nášho tela. Zábavná anatómia Stephen Juang

Od metódy prvej pomoci Nikolai Berg.

Z knihy ako 100% prestať fajčiť, alebo milovať a zmeniť svoj život Autorom David Kyivovis

Z knihy Úplný sprievodca pre starostlivosť o pacienta Autor Elena Yuryevna Khramová

Od havarijného odkazu na knihu Autor Elena Yuryevna Khramová

Z knihy Cesarean Section: Bezpečný výkon alebo hrozbu pre budúcnosť? Michel Oden

Gary Griffin

Z knihy, ako zvýšiť veľkosť mužského penisu Gary Griffin

Z knihy Flatfoot. Najúčinnejšie spôsoby liečby Autor Alexandra Vasilyev

Od knihy krásy a zdravie Autor Vladislav Gennadevich LiftLyandsky

Z knihy jogy a sexuálnych praktík Autor Nick Douglas

Keď testy prešli na STD, som sa rozhodol prejsť HIV. V ten deň som dostal hotové testy na Etí, okrem HIV na konci som našiel CHLAMYDIA. Herpes a mikromplzóza. Ale HIV neprišiel. Zavolám mi po 3 dňoch a hovoria, že sa musíte objaviť v centre AIDS, aby som prešiel skôr som vybudoval na imubabot imunuboti ukázal pozitívny. Môže byť immanubelot falošný pozitívny pri chorobách Chlamydia MicraPlasze HPV Herpes

Odborníci Woman.ru.

Zistite si názor odborníka na vašu tému

Anastasia Sherterikova

Rusina Irina Vladimirovna

Psychológa, zbaviť sa stresu. Špecialista z lokality B17.RU

OLGA YURYVNA DIGANEYEVA

Psychológa. Špecialista z lokality B17.RU

OLGA BORISENKO

Psychológ, gestalt terapeut. Špecialista z lokality B17.RU

DMITRY VALEYIEVICH TISHAKOV

Psychológ, supervízor, systémový terapeut. Špecialista z lokality B17.RU

Shyan Olga Vasilyevna

Psychológ, psychológ-konzultant. Špecialista z lokality B17.RU

Oksana Lushankin

Psychológ, rodinný vzťah. Špecialista z lokality B17.RU

Anna Kastevskaya

Psychológ, poradenstvo v Skype. Špecialista z lokality B17.RU

Irina Bukina

Psychológa. Špecialista z lokality B17.RU

Aksenova Anna Mikhailovna

Psychológ, kandidát na skupiny. Špecialista z lokality B17.RU

nechcem ťa vystrašiť, ale keď spôsobia, že centrum takmer vždy pozitívne, pretože nie krížovo, veľa šťastia, hlavná vec, ktorá by ste mali mať terapiu a žiť dlho

Jeden priateľ žije s HIV desať rokov, zachráni sa.
Hovorí sa, že roky po troch môžu nájsť liek.
V každom prípade nie sú zúfalstvo a nerozdeľte ho, liečiť

Nie, IB nemôže byť falošné pozitívne a žiadne STD neovplyvní túto analýzu, ak je pozitívny, potom bohužiaľ, máte HIV, musíte sledovať imunitné bunky a začať terapiu v čase.

neexistujú žiadne alas ((ak je volaný do centra, potom pre istotu HIV

Pokiaľ viem, prvé a dokonca aj následné výsledky imunoblotov môžu byť pochybné. Nie je falošne pozitívne, menovite pochybné. A potom predpísať opakovanú analýzu. Dávam text z lokality:
"Imunitný blot je najčastejšie používaný na potvrdenie diagnózy HIV infekcie. Kto zvažuje pozitívne séra, v ktorých protilátky proti akémukoľvek dvom proteínom HIV shell sú detegované imunitným bliknutím. Podľa týchto odporúčaní, ak existuje reakcia s iba jedným z proteínov shell (GP160, GP120, GP41) v kombinácii alebo bez reakcie s inými proteínmi, výsledok sa považuje za pochybné a re-vyšetrenie sa odporúča pomocou množiny inej série alebo iná firma. Ak by to bol výsledok pochybný, výskum pokračuje každé 3 mesiace. "
môžete google. Ak áno, dúfam, že nepotvrdzujete HIV. Ale ak potvrdíte, viete, že dnes žijú s touto diagnózou a žijú rovnako ako zdraví ľudia a deti rodia. Hlavným podmienkam je disciplína v liečbe. Zdravie vám!

Antiretrovírusová terapia online

Kalkulačky

Stránka je určená pre zdravotníckych a farmaceutických pracovníkov 18+

Analýza dekódovania - imunoblot

Pomoc, prosím, dešifrovať analýzu
Env (gp160) +
Env (gp110 / 120) +
Env (gp41) +
Gag (p55) +
Gag (p40) +
Gag (p25) +
Pol (p68) +
Pol (p52) +
Pol (p34) +

Ahoj! Pred 2,5 rokmi som odovzdal HIV analýzu, tam bol taký imunoblot:
GP-160 +, GP-110/120 +, GP-41 +, P17 +, P55 +, P31 +, P34 +, P52 +, P55 +, P68 +. Ale imunnoblot od 30.05.18 g.: GP-160 +, GP-41 +, GAG 1 -, Ankel +, ENV2-. Nie je jasné, čo znamená Roll +? Je tam len jeden alebo nie je odhalený? A kde sú zvyšok proteínov?

Gény Pol a ENV, ktoré kódujú proteínové skupiny. Zvážte, že len záznam je iný. Otázka je iná. A čo čakáme? Prečo považujete blot? Všetko je dosť jasné. Urobte niečo, čo potrebujete.

Už sa odrazili s tým, čo mám HIV. A pripravený na terapiu.
Len je zaujímavé počúvať váš názor. To sa ukáže, čerstvá infekcia alebo niečo nerozumiem? Alebo niekedy sa stane, že imunoblot je pomaly veľmi odhalený?

Dnes som sa pozrel na moje analýzy v mojom osobnom prípade (boli sme vyrobené v SC):
IFA na prvý testovací systém - dať
IFA na druhý testovací systém je negatívny (ako je to?)

Ďalej, IB (Vyrobené v Invitro a SC Modes):
imunoblot na prvý testovací systém: GP 160+, GP 41+
immunoblot na inom testovacom systéme: GP41 +, P24 +, P17 +
immunoblot na tretí testovací systém: GP160 +, GP120 +, GP41 +, P24 +

Podľa mojich prognóz by som mohol infikovať pred rokom (akútna fáza bola niekde niekde), alebo pred 9 mesiacmi, ale vo všeobecnosti - Xs, keď) vždy zabránilo a sex bez kondómov bol len raz na jeseň roka 2017.

Dnes sa raz prešla na VN a IP. Thera začne za mesiac, pretože prichádza objednávka.

Dátumy uvedené na testy.

Prvý blot pred Ifou? Nebojuje. Neexistuje žiadny okamih, ktorý by mi umožnil povedať, že existuje veľmi pravdepodobná čerstvá infekcia, alebo naopak.
Zostane záhadou, ak nenájdete náhodného zdroja a neporovnávajte.

Ak zadáte, potom

Nakúpené na Invitro.
Prvý IFA - 11. mája.
Potom to isté sérum pokračovalo na blot a mal pozitívnu analýzu, kde odhalili dva proteíny.
gP 160+, GP 41+

Ďalej som už prešiel do SC.
Krv prešla 29. mája.
A tam bol poháňaný v niekoľkých testovacích systémoch, kde prvý ukázal negatívny, druhý pozitívny. Negatívne IFA je ešte zábavné.
Ďalej, rovnaké sérum prechádza na blot, kde údaje pochádzajú z:

Prvý testovací systém: GP41 +, P24 +, P17 +
Druhý testovací systém: GP160 +, GP120 +, GP41 +, P24 +

Ale nie esencia.
Prišla nová analýza - 754. To poteší. VN ešte nie je pripravená. Ako to príde, pravdepodobne začnem theer.

Skutočnosť, že infekcia bola pred rokom - som istí 80%. A skutočnosť, že blot sa pomaly odhalí a iFA je negatívna - toto je zvláštne. Alebo je to v normálnom rozsahu?

Negatívne IFA je ešte zábavné. Poznajte názov systému, ktorý je stále zaznamenaný v čiernom poznámke. Aj keď tento okamih, ak neberiete teóriu s manželstvom, silne pre skorú infekciu.
Skutočnosť, že infekcia bola pred rokom - som istí 80%. Blot je pre tento čas chudobný. Nie nemožné, ale nepravdepodobné.

V určitom okamihu som dokonca začal pochybovať o výsledkoch HIV testov - preto čakám
V tejto otázke je už posledný bod.

Skutočnosť, že je za mesiac vzrástol o 200 kópií bez Terra - je to aj v normálnom rozsahu? Teraz beriem Ursosan z Polypu v žlče - vo vložke je napísané, že liek zvyšuje imunitu.

Je potrebné vyhodnotiť relatívny obsah a zohľadniť údaje jedného laboratória s jedným spôsobom počítania. Pretože - Boh vie, čo je z CD4.

Všeobecne CD4-780 bunky / ul. VN - 250 Kópie / ml.
Toto nie je terapia. To znamená, že CD4 486 mesačne sa ponáhľa na 780.
VN klesla z 550 až 250 kópií.

Napriek tomu nie je zvláštne alebo také skoky v normálnom rozsahu? Teória je čas začať?)

Ahoj! Budem odovzdať IFA trikrát, zakaždým +, od SC prišiel imunoblot p24 + p18 +. Potenciálne riziko bolo viac ako šesť mesiacov. P24 Označuje, že toto je všetko rovnaké HIV?

Blot pochybné, opakujte po 6-8 týždňoch. Najpravdepodobnejší falošný alarm.

Dobrý deň!
Výsledky analýz prišli, vrátane bloty:

Nebezpečný kontakt: 04/24/2018
Analýza na HIV IFA 23.05.2018 (4 týždne od nebezpečného kontaktu alebo 29 dní) Výsledok "+"
Analýza na HIV IFA 05/28/2018 (5 týždňov od nebezpečného kontaktu alebo 34 dní) Výsledok "Zapamätajte si"
Analýza na HIV IFA 06/01/2018 (5 týždňov od nebezpečného kontaktu alebo 38 dní) Výsledok "+"

Blot prišiel z prvej analýzy (05.23.18):
Gp160 SL.
P24 SL.

Nové testy boli zadané 06.06.2018 ELISA a PCR RNA HIV v centre miestneho AIDS. Výsledky stále čakajú.

BLOT OTÁZKY:
1. Ak je prítomný P24, je potrebné, aby sa detegoval antigén HIV alebo taký proteín s inými ochoreniami?
2. Čo znamená skratka "SL" vedľa proteínu? Zvyčajne v popísanom flotile majú + alebo -
3. Čo závisí na nasadenie flotily? Z termínu alebo z individuálnych charakteristík tela?
4. S takýmto blotom v 4. týždni od nebezpečného kontaktu je šanca, že to nie je HIV?

Majte pekný deň a ďakujem.

1. Nie, môže to byť len podobným proteínom inej prírody. 2. Slabé. tí. Pochybnosti. 3. Podmienky a implementovať individuálny prvok, ale v priemere je všetko veľmi blízko. 4. Otázka je nesprávna, vždy existuje šanca, kým nie je nastavená diagnóza.

Ahoj!
Pomoc, prejdite na výsledky testov a pochopte, ako sa správať správne, takže opakované analýzy sú správne.

Analýzy odovzdané 05/25/2018
Ib hiv
New Lav Blot 1 - Pochopte. Od 05/29/2018
IB HIV
gP 160 +.
gP 120 -
gp 41 -
p55 +.
p40 -
p 24 +.
p18 -
p 68 -
p 52 -
p 34 -
IFA HIV
Admu Centaur HIV AG-AB Reaktivita IFA 12.00 Pozícia (05/28/2018)
Odporúčaná analýza Opakujte za 2 týždne.

V novembri 2017 bolo NAP, potom, čo boli testy odovzdané na HIV AG AB COMBO ABBOTT ARCHITECT ARCHITECT, potom bol výsledok negatívny.

Paralelne odovzdaný všeobecný krvný test. Limfocyty sú mierne zvýšené, eozinofily sú presne 0 (ale predtým som mal také indikátory eozinofilov predtým.

Hlavnou otázkou je:
aké lieky môžu a nemôžu byť prijaté v týchto dvoch týždňoch? (Chcem nič "fonil")
Pravidelne prejdem útokom alergií, zvyčajne pijem Tueguil. Mal by som to odmietnuť?
Je možné užívať pred analytikom antibiotiká? (Ak sú predpísaní lekára na liečbu iných infekcií a chorôb)

Imunitný blot v diagnóze HIV

Imunitný blot (imunoblot, western blot, western blot) - kombinuje imuno-enzýmovú analýzu (ELISA) s predbežným elektroforetickým prenosom na nitrocelulózový pásik (pás) vírusových antigénov.

V tomto krásnom vedeckovom mene "blot" prekladá s najväčšou pravdepodobnosťou ako "bloty" a "western" - ako "western" odráža smer šírenia tohto "bloty" na papieri zľava doprava, to znamená na zemepisnej mape To zodpovedá smerovi zo západu na východ. " Podstatou spôsobu "imunitného blot" je, že imuno-imunimálna reakcia sa uskutočňuje nie so zmesou antigénov, ale s HIV antigénmi, vopred distribuovaný imunoforézou s použitím frakcií, ktoré sa nachádzajú podľa molekulovej hmotnosti na povrchu nitrocelulózy membrány. Výsledkom je, že hlavné proteíny HIV, nosiče antigénnych determinantov sú rozdelené na povrch vo forme jednotlivých pásov, ktoré sa prejavujú pri vykonávaní imunofementálnej reakcie.

Immunoblot obsahuje niekoľko stupňov:

Príprava pásu. Predbežné purifikované a zničené kompozitné zložky, imunodeficiencie (HIV) sa podrobí elektroforéze, zatiaľ čo antigény zahrnuté v HIV sú oddelené molekulovou hmotnosťou. Potom blotovaním (analóg extrúzie na "mokré" nadbytočné atramentové) antigény sa prenášajú do nitrocelulózového pásu, ktorý odteraz obsahuje neviditeľný obraz antigénneho pásu spektra charakteristického pre HIV.

Štúdia vzorky. Skúšobný materiál (séra, krvná plazma pacienta, atď.) Sa aplikuje na nitrocelulózový pásik) a ak existujú špecifické protilátky vo vzorke, sú spojené s prísne zodpovedajúcimi (bezplatné) antigénne pruhy. V dôsledku následných manipulácií je výsledok tejto interakcie vizualizovaný - je to viditeľné.

Výklad výsledku. Prítomnosť pásov v určitých oblastiach nitrocelulózovej dosky potvrdzuje prítomnosť v študovanej sére protilátok na prísne definované HIV antigény.

V súčasnosti je imunitný blot (imunoblot) hlavnou metódou na potvrdenie prítomnosti vírusových špecifických protilátok v testovacom sére. V niektorých prípadoch, HIV infekcia, pred vývojom sérokonverzie, špecifické protilátky sú účinnejšie detegované spôsobom imunitného bloty ako ELISA. V štúdii metódou imunitného blotovania sa zistilo, že protilátky na GP 41 sú detegované v séra v séra, a detekcia P24 u osôb opýtaných s profylaktickým cieľom vyžaduje ďalšie štúdie pre ich HIV infekciu. Testovací systém pre imunitný blot na báze rekombinantných proteínov získaných genetickým inžinierstvom sa ukázal ako špecifickejšie ako konvenčné systémy založené na čistenom vírusovom lyzáte. Pri použití rekombinantného antigénu, nie difúzne, ale jasne vyslovený úzky antigénový pás, ľahko dostupný pre účtovníctvo a hodnotenie.

Sérum osôb infikovaných HIV-1 sú detegované protilátkami na nasledujúce hlavné proteíny a glykoproteíny - štruktúrne proteíny škrupiny (ENV) - gp160, gp120, gp41; Krásne (GAG) - P17, P24, P55, ako aj vírusové enzýmy (POL) - P31, P51, P66. Pre HIV-2 Typické protilátky proti Env - GP140, GP105, GP36; GAG - P16, P25, P56; Pol - P68.

Medzi laboratórne metódy potrebné na stanovenie špecifickosti reakcie má najväčšie rozpoznávanie detekciu protilátok proti proteínom HIV-1-GP41 Shell proteínu, GP120, GP160 a HIV-2 - GP36, GP105, GP140.

Kto považuje pozitívne séra, v ktorých protilátky proti niektorým dva HIV glykoproteíny sa zistia spôsobom imunitného blotovania. Podľa týchto odporúčaní, v prítomnosti reakcie s jedným z proteínov shell (GP 160, GP 120, GP 41), v kombinácii alebo bez reakcie s inými proteínmi, výsledok sa považuje za pochybné a re-vyšetrenie sa odporúča používať súbor inej série alebo inej firmy. Ak by výsledok zostáva pochybný, pozorovanie sa odporúča 6 mesiacov (štúdie po 3 mesiacoch).

Prítomnosť pozitívnej reakcie s antigénom P24 môže indikovať pre obdobie séraurusu, pretože protilátky sa niekedy objavujú tomuto proteínu. V tomto prípade sa odporúča v závislosti od klinických a epidemiologických dát, zopakujte štúdiu so sérou vzorkou, ktorý sa užíva aspoň za 2 týždne, a to je to v prípade, keď s infekciou HIV je potrebné študovať párové sérum.

Pozitívne reakcie s GAG a Pol proteíny bez reakcie s proteínmi ENN môžu odrážať krok predčasného sérokonverzie a môžu tiež indikovať infekciu HIV-2 alebo nešpecifickú odpoveď. Osoby s takýmito výsledkami po testovaní na HIV-2 sa opätovne preskúmajú po 3 mesiacoch (do 6 mesiacov).

Otázka: Opakovaná HIV analýza?

Skúmal sa na infekcie prijaté sexuálnym spôsobom (žiadne príznaky - chceli dôveru vo vzťahu so ženou). HIV test bol pozitívny. Ďalší ultrazvuk ukázal nádor na obličky, odstránené (ukázalo sa, že je malígne).
Čítal som knihu SAZONOVA I.M., hovorí, že malígny nádor môže poskytnúť pozitívny výsledok HIV testov.
Mohol by to tak byť, alebo dúfam, že nie?

Musíte vykonať kontrolu analýzy HIV. Ak bol prvý test HIV určený pomocou ELISA, výsledok môže byť falošný pozitívny. Jeho spoľahlivosť môže byť kontrolovaná citlivejšou diagnostickou metódou - PCR (polymerázová reťazová reakcia), ktorá definuje DNA vírusu v krvi.

pomoc. 12/16/10 IFA (+) IB (+) potom od 03/23/11 do 19.05.11, deväť negatívnych ELISA (-) a kvantitatívne PCR. nebudú určené. V roku 2002, počas tehotenstva IFA je (+), že (-), ale IB je vždy (-). Od roku 2004 do roku 2008 som odovzdal viac ako 2-krát ročne IFA (-). Ale dňa 30. apríla 2007, IFA (+) a IB-neisté. Potom znova každé 2 mesiace som to vždy odovzdal (-). A od decembra 2010 je to napísané vyššie. Nikdy som nebol nazývaný, môj manžel má vždy IFA (-). SD4 980 bunky. A dokonca aj krv na syfilis od 29.04 dal 3 +++. A trikrát. Duplety. Vlákno každých 10 dní. Hepatitída All (-). Bol to tak niekto. Ďakujem.

Uveďte, či sa Ribt vykonalo (reakcia imobilizácie bledo treponam), ak áno, aké sú výsledky tejto štúdie.

nie, nikto nenavrhol taká analýza. A čo ukáže? Dúfam, že ste si uvedomili, že hovorím o testoch HIV. Ďakujem. Vo vašej praxi boli podobné prípady? Áno, mimochodom o IB v roku 2008 bol neurčitý, pretože Tam bol proteín p24 / 25. V roku 2010, IB (+) proteíny GP160.41.120 P24.17.31. Potom, keď IFA bola opäť 3RD (-) zaslaná IB 4. apríla. Výsledok prišiel pozitívny, ale proteíny GP 120 a 41 sú prečiarknuté červenou pastou a v spodnej časti červeného IB opakovania. PCR je však odmietnutá z rovnakého čísla. Po 4. apríli som prešiel ELISA 4-krát. Všetko v centre AIDS, vrátane antigénu a protilátky. Teraz čakám na opakované IB a vysoko kvalitné PCR. To je všetko. Veľmi unavený premýšľať a čakať. Dúfať v to najlepšie. ĎAKUJEM. Čakanie na odpoveď veľmi veľa.

Ak sa pýtate na akúkoľvek otázku, skúste to konkrétnejšie formulovať, s objasnením diagnózy. Ribt sa používa na potvrdenie diagnózy syfilisu. Na presne diagnostiku HIV infekcie sa uskutočňuje definícia protilátok proti HIV v krvi metódy IFA a metóda imunoblot. Diagnóza je potvrdená len vtedy, ak sú obe tieto výsledky pozitívne.

ospravedlňujeme sa, že je to nepresne formulovaná otázka. Napísal som, že v decembri, iFA a imunoblot na HIV prišiel pozitívny. Ale od marca mesiaca IFA na HIV je záporný 9-krát. Ak som bol zapísaný na AIDS v AIDS, potom sa to v zásade uskutoční. HIV buď vždy vložte buď negatívne. A ako sa IFA rozhodne o HIV, aby IFA odmietla? Potom všetko popiera iFA, aby skontroloval Imhunoblot, takže ak sa ukáže? V našom centre AIDS nemôže pre mňa odpovedať. Tak som sa k vám otočil. Ďakujem.

Bohužiaľ, ELISA aj imunoblot môžu poskytnúť falošne pozitívne výsledky. Preto sa diagnóza HIV považuje za finále, len so súčasnou detekciou HIV s pomocou IFA a imunoblotovou metódou.

dobrý deň. Dnes dostal výsledky PCR pre HIV HIV HIV. Výsledok nebol zistený a opakovaný imunoblot na HIV. Výsledok bol neurčitý z dôvodu proteínu 41. V centre AIDS by s najväčšou pravdepodobnosťou nemali žiadne HIV, a v mojom telo sú telá podobné HIV. A čo si myslíte, ak zvážite moje otázky od 15 do 16. júna (pozri) HIV alebo nie. ĎAKUJEM.

V tomto prípade je diagnóza infekcie HIV pochybná.

píšete, že len so súčasnou detekciou HIV s pomocou ELISA a imunoblot, diagnóza HIV sa považuje za finále. A ako buďte v mojom prípade? Koniec koncov, všetky PCR bude poprieť. A blot a ifA budú skočiť po celú dobu. 9 rokov. Povedzte mi, či bol vírus v mojej krvi, potom jeho RNA a DNA pre toľko rokov. A môže doba inkubácie alebo "Windows" trvať toľko rokov? Sú výsledky PCR na HIV choré, berúc do úvahy také obdobie? Áno, zabudol som povedať, že testy Express HIV pre HIV, ktoré mi prechádzajú, sú vždy negatívne. A nemali by sa na ne spoliehať? Ďakujem.

V tomto prípade, PCR Diagnostics nie je hlavnou metódou identifikácie dynamiky procesov - viac informatívnych sérologických metód. V tomto prípade je pravdepodobnosť falošných negatívnych výsledkov vysoká. Express HIV testy majú vysoký prah citlivosti, preto môže tiež poskytnúť falošný negatívny výsledok.

prepáč. Určite som tam napísal. Odpovedzte na HIV alebo nie HIV. Ďakujem.

V prípade, že ste nedostali oznámenie o prijatí odpovede na vašu poštu, môžete zobraziť odpoveď na otázku, ktorú ste zadali na tejto adrese http://tiensmed.ru/news/nswers/vich-i-ne-vich -.html

Ahoj! Prosím, povedzte mi, čo sa má zaregistrovať v LCD (teraz 10 týždňov tehotenstva) prešiel testmi pre HIV, pred niekoľkými dňami sa volá lekára a povedal, že predbežné testy pre HIV pozitívne (prvý bol vyrobený v Kirovograd, a tam je Žiadny oficiálny výsledok z Kyjeva ešte) V ten istý deň urobil v našom mestskom laboratóriu Two Express testy spoločnosti "Pharmaaso" CITO TEST HIV 1/2, obidva výsledky sú negatívne, laboratórny asistent, ktorý tieto testy sú spoľahlivé a nemôžem sa báť , pretože počas tehotenstva sa to stane, a tieto testy by sa mohli jednoducho zmiasť. Doktor povedal, že opäť prejde krv a dvakrát som prešiel svoju krv na analýzu v rôznych nemocniciach (nikto z troch výsledkov ešte nie). Som veľmi znepokojený, nie som drogový závislý, nebol žiadny pochybný sexuálny vzťah, ak je to veľmi zriedkavé, iné analýzy sú v poriadku. Je možné dôverovať expresné testy? Stáva sa to naozaj počas tehotenstva? Bolí ma veľa doktora. Ďakujem

Musíte sa upokojiť ako prvý a nemyslieť na zlé. Niekedy počas tehotenstva, existujú falošne pozitívne výsledky. Je potrebné opätovne vyvolať krv pre HIV a počkať na výsledky prieskumu.

ahoj! Faktom je, že som mal sexuálny kontakt s dievčaťom pred 2 mesiacmi (stále sa stretávame). Po 1,5 týždňoch sa zvýši teplota 37,4. Čoskoro spal. Na dôveru sme prešli analýzou EIF za 2 týždne a znovu po 1,5 mesiaci. Odpovedá na negatívne. Ale stále mám teplotu a kašeľ s premenlivým zlepšením. Povedz mi, prosím, je možné riskovať? Okrem toho som pracoval už dlho bez víkendov a pred týždňom bol na nekonečnej dovolenke (orvi). Krvný test a pľúca v poriadku. Ďakujem.

Táto teplota môže byť spojená s preneseným vírusovým ochorením, telo sa ešte nezískalo alebo chronické prepracovanie. V prípade, že ekologická patológia je vylúčená, všeobecná analýza krvi a moču v rámci normy, ako aj údaje o fluorografickom výskume, ako aj v rámci normy, je potrebné vylúčiť pohlavne prenosné choroby: chlamydia, mykoplazmóza, ureaplamzóza To môže spôsobiť zápal malých orgánov panvy a uretry a v dôsledku toho zvýšenie telesnej teploty. Prečítajte si viac o dôvodoch zvýšenia telesnej teploty. Prečítajte si kliknutím na odkaz: Vysoká teplota.

Ahoj. Tam bol taký obchod - viac ako pred rokom bol nechránený sexuálny kontakt s prechádzkou. Uistil, že to nebolo chorý, ale nemôžem jej uveriť 100%. Uistila sa tiež, že je lekársky vyšetrenie pred tým, než zariadenie pracuje (pracovala ako predávajúci) a všetko bolo v poriadku. 7 mesiacov po kontakte, stále som prešiel analýzou HIV v laboratóriu, mesto abstraktné sa ukázalo byť negatívne. Ale v poslednej dobe som sa často stal chorým, zatiaľ 3 týždeň, ako mám červené zapálené hrdlo a nemôžem ho vyliečiť. Opäť sa začal báť, a náhle sa potom zdvihol? Povedz mi, že je to možné a či stojí za to dôverujú analýze Sitilab? Ešte raz sa bojím, nervy to nebudú stáť.

V prípade, že výsledok je negatívny, potom s najväčšou pravdepodobnosťou nie ste chorý a nie je infikovaný HIV / AIDS. Aby sa však objasniť diagnóza, odporúča sa znovu analyzovať v špecializovaných laboratóriách podľa vládnych agentúr, táto skúška sa vykonáva anonymne. V prípade, že nezávisle spracovanie neprinesie požadovaný výsledok. Odporúča sa konzultovať s otolaryngológom, na primerané vyšetrenie a vymenovanie vhodnej liečby. Prečítajte si viac o preskúmaní HIV, prečítajte si cyklus článkov kliknutím na odkaz: HIV.

Povedzte mi, môžete dať nejakú vlastnosť satelitnej laboratória? To isté, nie je vždy možné odovzdať analýzu v štátnej inštitúcii. A čo je pravdepodobnosť v percentách pre človeka, aby sa infikoval nechránený kontakt?

Bohužiaľ, neposkytujeme porovnávacie hodnotenie laboratórií a súkromných zdravotníckych inštitúcií. V prípade, že pochybujete o spoľahlivosti výsledkov, vykonajte prieskum v inom centre a najprv požiadajte o licenciu na poskytovanie údajov z lekárskych služieb, či má toto centrum právo vykonávať tento prieskum a či už všetky prijaté normy. Riziko infekcie je rovnaké pre obe pohlavia s nechráneným stykom. Prečítajte si viac o preskúmaní HIV, prečítajte si cyklus článkov kliknutím na odkaz: HIV.

Dobrý deň! Dieťa bolo 8 mesiacov, analýza HIV metódou IFA v krvi bola zistená GP160 + a P25 + zvyšok všetkého mínus, uzavretie IB-pochybnosti. Ako sudca na týchto analýzach ukazuje, že dieťa +? GP160 + GP110 / 120 - P68 - P55 - P52 - GP41 - P34 - P55 + P18 -

Na základe získaných údajov nie je možné diagnostikovať so 100 percentuálnou pravdepodobnosťou, pretože falošný pozitívny výsledok nie je vylúčený. Ak chcete vytvoriť presnú diagnózu, rad prieskumov bude musieť prejsť, vrátane opakovania tejto analýzy metódu IFA, ako aj prejsť analýzu podľa PCR techniky. Potom by ste mali kontaktovať špecializovanú lekársku inštitúciu, kde lekár infekčný hráč bude môcť odhadnúť výsledky získané v komplexe. Môžete sa dozvedieť viac o prejavoch infekcií HIV v tematickej časti našej stránky kliknutím na odkaz: HIV

Môže ukázať falošný pozitívny výsledok s "orz" alebo akútne sa vyskytujúcimi infekčnými chorobami? Niekde som čítal, že pri 58 chorobách alebo dokonca vyššie môže ukázať "+" vrátane očkovania z hepatitídy B, ak obličky trpia atď.?

Pravdepodobnosť falošne pozitívneho výsledku je, takže odporúčam, aby ste vykonali nasledovne: Urobte znovu analýzu - Metóda IFA a Metóda PCR, po ktorej je znovu navštívený infekčným lekárom. Prečítajte si viac o diagnostike infekcie HIV, môžete sa naučiť z tematickej časti: HIV

Dobrý deň! Immunoblot je nešpecifikovaný v dôsledku proteínu P25. Aká je pravdepodobnosť HIV?

V tejto situácii je potrebné dôkladné štúdium študijných protokolov v komplexe s inými ukazovateľmi, pretože na základe týchto údajov nie je možné predpokladať predpoklad. Pravdepodobne môže byť výsledok považovaný za pochybné a po 3 mesiacoch sa vyžaduje opätovné štúdium. Prečítajte si viac v sekcii našej webovej stránky: HIV

Dobrý deň.
Môžete komentovať IFA na HIV
1 SERUM +3,559 K \u003d 13.3
+2,121 K \u003d 4.9
r 24 OTR.
2 SERUM +3,696 K \u003d 13,9
+2,477 K \u003d 5.7

V tomto prípade nie je vylúčený falošný pozitívny výsledok, pretože metóda IFA je nepriamo, preto odporúčam, aby ste odovzdali analýzu na inej, citlivejšej metóde - imunitné blotovanie. Kliknutím na nasledujúci odkaz môžete naučiť podrobnejšie informácie o tejto otázke v príslušnej časti našej stránky: HIV

Dobré popoludnie, povedz mi, čo chcete konfigurovať? Pred rokom so svojím manželom, pri plánovaní dieťaťa, všetky testy prešli, vrátane HIV (ošetrené veľmi vážne a správne), bol som skúmaný v Kirgizskej republike. Manžel v Kyjeve, mal na mňa negatívnu odpoveď, že som nefungoval Na to, čo činidlo musí byť znovu použité v centre AIDS v Kyjeve. Spustenie analýzy v stredovej reakcii prišlo aj pre mňa. Teraz som v pozícii 14 týždňov I.E. Som zaregistrovaný v absolvovaní všetkých testov a opäť odpoveď bola odpoveďou na HIV neistý, opätovne prešiel na klinike a odišiel do "Dovira" expresného testu na upokojenie, ale neubezpečil expresný test ukázal pozitívny výsledok ( Druhý pás bol menej výrazný), bezprostredne po všetkých týchto postupoch som nestrácala čas premenil sa na centrum AIDS aj Analýza, očakávam, že výsledok. (Nemôžem sa upokojiť) Žiadam vás, aby ste povedali, ako dôverovať Express analýzy a prečo nie je odpoveď na HIV analýzu od prvého času? (Môj manžel a ja sa správam zdravý životný štýl a milujem sa navzájom). Ďakujem.

Nie je potrebné paniku pred časom - Express Diagnostics nie je dôvodom na diagnózu HIV, umožňuje identifikovať skupiny pacientov, ktorí potrebujú podrobnú hĺbkovú štúdiu. V takýchto situáciách sa odporúča vykonávať imunitné blot a osobne konzultovať s infekčným lekárom. Môžete sa dozvedieť viac podrobnejšie informácie o tejto otázke v tematickej časti našej stránky kliknutím na nasledujúci odkaz: HIV. Pre viac informácií môžete tiež dostať do ďalšej časti našej webovej stránky: laboratórna diagnostika

Dobrý deň, ležal v infekčnom čase, len dnes bol prepustený pri starostlivosti o lekára, ktorý ma zavolal a vysvetlil, že som mal pozitívnu Elisa, najprv, keď som vstúpil do nemocnice, bol negatívny, potom, keď ho prekročil pozitívny, poslal výskum imunoblot Na Sokolniki Mount povedal, že bude pripravený do marca týždenne, ležať v nemocnici s angínou a vírusy Paragripy, prísť do šoku, stále nechápem, ako to považujem za to, extrakt pre moju kliniku Údaj o tom, že IFA bola nájdená a nižšia ako imunoblot v práci, ak sa zajtra vypúšťa v tomto vypúšťaní, všetko bude označené v tomto výboji, pokiaľ je prítomná pravdepodobnosť HIV? Môže to byť spôsobené tým, že som Bol liečený z angíny paraping vírusu zobraziť pozitívne výsledky na ELISA?

Pravdepodobnosť falošne pozitívneho výsledku je veľmi veľká. Prítomnosť jedného pozitívneho výsledku neposkytuje dôvody na zvýšenie diagnózy HIV, preto odporúčame, aby ste čakali na výsledok imunobloting, po ktorom osobne konzultuje s doktorom infekčným hráčom pri ďalších prieskumoch a pozorovaní. Angina, Paragripp a iné prechladnutie významného vplyvu na výsledky analýzy nemajú.

chcem tomu veriť, ale koncom augusta som mal ochorenie, teplota sa zvýšila, 37,5-38 bola tekutá stolička asi 4 dni, bolo to na dovolenke, kde sa nachádzalo veľa diskoték, som pil vodu Žeriav rovnako ako mnoho ďalších, pretože to bolo veľmi drahé pohár vody stojí 300R, som pripojil tekutú stoličku s takou teplotou s nejakým druhom črevnej infekcie s vybraným vo vode, nepamätám sa presne, ale tam bol malý Vyrážka v hornej časti tela, príde domov s teplotou nazývanou lekárom, napísala rotavírusovú infekciu, po 5 dňoch lekára som sa dobrovoľne opustil, aby som ho opustil a chodil do práce, kde beh za pár dní s sinusitídou , (v tej dobe určitý čas, potreboval som byť na ulici) som to zviazal, že veľký rozdiel teploty z dovolenky a otravy chváli moju imunitu, a preto ešte raz prišiel sinusitídou, a to je opäť choré , podľa pokynov Laura, kolid CP 500 bol navrhnutý do 10 dní, prešiel, opäť vyšiel do práce po 3 týždňoch bol na služobnej ceste v Arch krajiny na 3 dni. Klimatizačné kondicionéry v doprave a hotel boli nemilosrdníci a na návrat domov, v lietadle som mal teplotu už 39,5. Doma, s teplotou 40, nazývaný lekárom do domu napísal Arvi a povedal myšlienky PTS červenej, ja Majte kroniku mandulitídu a povedal, že Laura sama napísal piť antibiotikum Levvietyth R. Skrinky, pretože som neopustil tempo 40 a nepadol, hospitalizácia nebola ponúknutá, v nasledujúcom dni rovnaká história urobila antipyretikum injekcie a odišiel. Tretíkrát som trval na hospitalizácii, sotva sotva v infekčnej nemocnici, kde bola infekcia zmesou infikovaná paragripou a adenovírusovou infekciou, ale ak bol lekár vybitý, vetva uviedla, že som mal pozitívny HIV pozitívny a To, čo robili dvakrát, som šokovaný, neviem, čo mám robiť nemôžem jesť a piť. Povedala, že mám jasne vyjadrenú akútnu HIV infekciu a na kontrolu poslal analýzu mojej krvi imunnobloba v AIDS Centrum,
teraz vykonávam analógiu udalostí, ktoré sa mi udiali za posledný čas, rovnako ako 3 nemocničné listy do rady, všetky príznaky pre seba a som vystrašený z toho, čo by mohlo byť, po absolutéri v ten istý deň som išiel Prejsť analýzu v Invitro Ananino a na druhý deň bol výsledok IFA tiež +
odpustím odpustenie takýchto podrobných informácií, ale som v rozbití a zabil, pijem silné sedatívy a nemám chuť a nemám to skoro stratené veľa
stále mám takúto otázku, že lekár s vypúšťaním z nemocnice poukázal na výsledok HIV na IFA bol objavený a nižší ako imunnoblot v práci, ale keď som zavriem BL na mojej klinike na mieste, všetko bude napísané. Ako môžem byť? To nebude dôverné. Požiadal som lekára, aby nepísal túto analýzu tejto analýzy na to, čo mi bola odmietnutá, koľko moji práva o Informácie o NESPRAS.

Nanešťastie, výsledky štúdií vykonaných v nemocnici zapadajú do extraktu, pretože účastník okresný lekár by mal mať informácie o vašom zdravotnom stave v plnom rozsahu. V tejto situácii nehovoríme o zverejňovaní informácií, pretože sa prenáša len iným lekárom, ktorý vás bude ďalej pozorovať.

Ahoj! Odovzdal som testy HIV. Vzhľadom k tomu, že som potreboval osvedčenie pre FMS, testy nedosiahli niekoľko týždňov neskôr, že boli pozvaní do hlavy a vydali výsledok s výsledkom, že si vzali banmu príjmov a poslali veľa Pomoc k regionálnemu stredisku pre ďalšie vykúpenie. Chcem prejsť na inú kliniku a potom už ísť na regionálne, alebo to nemá zmysel? Len nechápem, prečo majú tak dlho, že nikdy starostlivo, lekár povedal, že údajne urobili nejakú analýzu a stále mám 4T rubľov. Ako to mám urobiť okrem Daliba Certifikát podrobné informácie o chorobe?

V tejto situácii by nemala byť plánovaná včas - prijatie jedného pozitívneho výsledku neumožňuje spoľahlivo posúdiť o možnej infekcii, pretože nepravdepodobné pozitívne výsledky nie sú vylúčené. Odporúčame vám znova prejsť analýzu a ak existuje pozitívny výsledok, budete potrebovať ďalší prieskum - imunobloting. Spravidla v laboratóriu pre podrobné informácie o výsledkoch nedávajú, čo je normálna a bežná prax. Pre všetky otázky, ktoré vznikajú, môžete po inšpekcii odpovedať na účasť na osobnej konzultácii.

zabudol som dodať, že od začiatku júna do polovice septembra som urobil anabolický steroidný kurz, a to SUSTRON250 je zmes testosterónu a stanozololu s Primoboolan, chcel sa pripraviť na leto a sviatok, mohli by zraziť moju imunitu A všetko sa mi stalo.

Poškodenie imunity, ako aj prítomnosť autoimunitných ochorení môže poskytnúť falošne pozitívne výsledky HIV analýzy. To je dôvod, prečo v prípade prijatia 2 pozitívnych výsledkov, metóda IFA odporúča, aby sa odporúča imunobloting, čo vám umožní odpovedať na otázku s presnosťou, existuje infekcia alebo nie.

Čo znamená autoimuin ochorenie? Čo sú to?
všeobecne platí, že môžem povedať, že som často chorý z predčasného detstva a dokonca pár pred tromi rokmi, som sa spýtal na účasť na lekári, aby som urobil svoju imunitu, pretože tam bola neustále únava a často chorý, väčšinou ucho hrdlo, ale po celú dobu Boli negatívne výsledky na HIV, mám celý čas, keď prešli dostatočným ľahkosťou bez myslenia.

Falošný pozitívny výsledok HIV analýzy môže byť po nedávno prevedenej vírusovej infekcii, očkovanie proti hepatitíde B, s tuberkulózou, hepatitídou, herpesom a na pozadí autoimunitných ochorení, ako sú: reumatoidná artritída, systémová red lupus, dermatomyomyomy, sklerodermia, spájajúce ochorenia tkaniva a atď.

Chcem pridať do mojej otázky, môj imunoblot prišiel negatívny, ale lekár povedal, že od dvoch IFA boli +, keď som ležal v infekčnej nemocnici, potom stále musím vyvolať analýzu, ale o niečo neskôr

V tomto prípade sú lekárske taktiky odôvodnené - odporúčame po 1,5-2 mesiacoch znova prejsť imunoblotom.

Aká je pravdepodobnosť: 2 ELISA + rozdiel medzi krvnými plotmi je asi 2 dni, imunoblot -; Ležal som v infekčnej nemocnici s adenovírusovou infekciou a paragrippom, kde to bol krvný plot, imunoblot poslal na AIDS

Dobrý deň! Dostal som sa zaregistrovaný v LCD, prešiel všetkými testmi doktora hovorí, že mám herpes v mojej krvi, potom zavolajte z AIDS a povedziem, že musím odskočiť, bolo mi povedané, a bolo mi povedané, že mám pozitívny HIV, išiel som darovať v panike Analýza prešla a mám ELISA a IMUNOBLOT + jej manžel -, to bolo znova za mesiac. Mám + môj manžel - teraz som na 23 týždňoch tehotenstva!

V tejto situácii, bohužiaľ, existuje pravdepodobnosť infekcie HIV, ale konečná diagnóza je nemožná, aby sa s pozitívnym imunoblotom, vzhľadom na stav tehotenstva. V tejto situácii sa vyžaduje eliminácia falošných pozitívnych výsledkov, preto odporúčame prejsť analýzu na re-a osobne konzultovať s infekčným lekárom.

ak imunoblot ukázal pozitívny výsledok na HIV a skríning je negatívny, čo má za následok veriť?

Immunoblot je presnejšia štúdia, takže s touto štúdiou, ak bol prijatý pozitívny výsledok, je potrebné pokračovať v štúdii a osobne navštíviť infekčný skúšanie.