Paroksizminė naktinė hemoglobinurija. Suaugusiųjų aplastinė anemija. Klinikinės gairės Simptomai ir klinikinė eiga

Paroksizminė naktinė hemoglobinurija yra sunki įgyta hemolizinių anemijų grupės patologija. Markiafava-Micheli liga arba Strubing-Markiafava liga, kiti šios patologijos pavadinimai, sukelia raudonųjų kraujo kūnelių sunaikinimą kraujyje. Liga yra labai reta, 500 tūkstančių gyventojų gali susitikti 1 žmogus, turintis šią patologiją.

Kad nesijaudintumėte dėl galimų komplikacijų ir patologijos pasekmių vystymosi, turėtumėte žinoti, kokia yra paroksizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozė, simptomai ir gydymas.

Hemoglobinurijos priežastys

Kaip minėta aukščiau, paroksizminė naktinė hemoglobinurija yra labai reta liga, be to, patologija dažniausiai nustatoma žmonėms nuo 20 iki 40 metų. Ligos išsivystymo senatvėje ar vaikams atvejai taip pat žinomi medicinos praktikoje, tačiau jų procentas yra nereikšmingas.

Manoma, kad paroksizminę naktinę hemoglobinuriją (PNH) sukelia mutacinė kamieninių ląstelių geno (PIG-A) reakcija, kuri yra kaulų čiulpų X chromosomos sudedamoji dalis, reaguojant į nenustatytus įtakos veiksnius. Kai kurie šaltiniai teigia, kad genų mutacijos priežastys nežinomos.

Kiti teigia, kad hemoglobinurija gali išsivystyti dėl infekcinių ligų, plaučių uždegimo, traumų, intoksikacijos, hipotermijos ir nudegimų bei net stipraus fizinio streso.

Tačiau vieninga nuomonė apie patologijos etiologiją dar nėra nustatyta.

Buvo parodyta aiški sąsaja tarp paroksizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozės sukūrimo, kaip kartu atsirandančių patologijų simptomas. Medicininiai tyrimai parodė, kad PNH išsivysto dėl aplastinės anemijos ir kitų kraujagyslių sistemos patologijų 30% atvejų.

Gerai žinomas argumentas, kad net viena mutavusi ląstelė gali sukelti sunkios patologinės būklės vystymąsi. Kai susidaro raudonieji kraujo kūneliai, kurie atliekami kaulų čiulpuose, kamieninės ląstelės dalijasi, subręsta ir išsiskiria į kraują. Vienas modifikuotas genas yra padalintas į dar porą, o tie - į porą ir tt Tai reiškia, kad viena ląstelė dauginasi pati, palaipsniui užpildydama kraują pažeistais eritrocitais.

Raudonųjų kraujo kūnelių pažeidimo esmė yra neužbaigta arba trūkstama baltymų membrana, kuri padeda apsaugoti ląsteles nuo imuninės sistemos. Esant menkiausiems ląstelės defektams, organizmo imunitetas ją sunaikina, todėl susidaro tokia diagnozė kaip hemolizė - eritrocitų sunaikinimas intravaskuliniu būdu, kuriam būdingas gryno hemoglobino išsiskyrimas į kraują.

Tas pats procesas vyksta sergant lėtine hemolizine anemija, todėl paroksizminė naktinė hemoglobinurija yra jo analogas arba, kaip dažnai sako praktikai, ūminė įgyta forma. Pagrindinis ir vienintelis skirtumas tarp šių patologijų yra jų vystymosi principas.

Hemolizinė anemija yra įgimta patologija, įgyta hemoglobinurija. Defektuoti eritrocitai taip pat gali išplisti į kitus kietus kraujagyslių skysčio elementus: leukocitus ir trombocitus.

Naktinės hemoglobinurijos simptomai

Markiafava-Micheli ligos simptomai priklauso nuo priežastinės patologijos klasifikacijos. Kaip buvo išsiaiškinta, liga gali būti nepriklausoma, pagal tai išskiriama idiopatinė PNH forma. Dėl patologijos vystymosi aplastinės anemijos fone paroksizminė naktinė hemoglobinurija pasireiškia sindromu. Idiomatinė PNH forma, pasireiškianti kraujodaros hipoplazijos fone, laikoma rečiausia.

Neįmanoma išskirti ryškių bet kurios ligos formos simptomų, nes ji yra labai įvairi. Ligos eiga gali būti išoriškai besimptomė, tokiu atveju patologiją galima nustatyti tik atlikus laboratorinę diagnozę. Kiti pacientai turi sunkų anemijos sindromą.

Apskritai galima nustatyti nedidelį visų galimų naktinės hemogloburijos apraiškų apibendrinimą, taip išryškinant pagrindinį simptominį vaizdą.

• Hemolizės procesas (raudonųjų kraujo kūnelių ir hemoglobino sunaikinimas) dažniausiai vyksta naktį (naktinė hemoglobinurija), todėl ryte šlapinantis šlapimo spalva įgaus tamsiai rudą atspalvį. Dienos ir vakaro metu šio ženklo nepastebėta.
• Dėl kiekybinio eritrocitų kiekio kraujyje sumažėjimo pastebimas aneminis sindromas. Jos apraiškos yra tiesiogiai susijusios su organų ir audinių badu. Todėl pacientui gali pasireikšti galvos skausmas, galvos svaigimas, juodų taškelių mirgėjimas prieš akis, bendras silpnumas, nuovargis, krūtinės anginos priepuoliai ir tachikardija.

• Esant gretutinėms infekcinėms ligoms, kraujavimui, fiziniam krūviui ir pan., Gali išsivystyti hemolizinė krizė, pasireiškianti staigiu hemoglobino kiekio padidėjimu kraujagyslių skystyje, taip pat stiprus negalavimas, karščiavimas, skausmas. gali atsirasti kaulų, odos pageltimas ir vidutinio sunkumo splenomegalija (blužnies padidėjimas).
• Hemoglobinuriją lydi azoto oksido koncentracijos plazmoje pažeidimas, kuris tiek krizių, tiek sunkios patologijos fone sukelia vyrų erekcijos sutrikimus.
• Dėl trombocitų (už kraujo krešėjimą atsakingų kraujo ląstelių) defekto gali atsirasti trombozė, kuri dažniausiai pastebima venose. Tas pats procesas gali išprovokuoti medžiagą, kuri išsiskiria, kai sunaikinamos kietosios kraujo ląstelės. Dėl to padidėja kraujagyslių skysčio krešėjimas, nuo kurio priklauso polinkis į trombozę. Tokie pažeidimai gali būti mirtini.

Aiškiausius paroksizminės naktinės hemoglobinurijos simptomus galima gauti atlikus laboratorinę diagnostiką. Tyrimai parodys hemoglobino kiekį kraujyje, ląstelių būklę, trombopeniją ir leukopeniją, geležies ir kitų mikroelementų kiekį ir kt. Norint visiškai ir tiksliai diagnozuoti hemoglobinuriją, reikia daug laiko, nes ši liga gali būti kruopščiai paslėptas po kitų patologijų priedanga.

Todėl racionaliausias būdas laiku nustatyti Markiafava-Micheli ligą yra reguliarus profilaktinis tyrimas.

Paroksizminės naktinės hemoglobinurijos gydymas

Paroksizminės naktinės hemoglobinurijos aptikimo laikotarpis nustato būtinus terapinius metodus ir nustato patologijos baigties prognozę, kuri daugeliu atvejų yra nepalanki. Taip yra dėl to, kad nėra konkrečios vystymosi priežasties ir neįmanoma jos pašalinti. Todėl nėra specialaus PNH gydymo metodo.

Visos terapinės priemonės yra skirtos pašalinti simptomines apraiškas. Vienintelis veiksmingas būdas visiškai atsikratyti mutavusių ląstelių yra raudonųjų kaulų čiulpų transplantacija (kraujo ląstelių susidarymo vieta).

Kai išsivysto hemolizinė krizė, ūminė hemolizės forma, pacientui skiriami keli eritrocitų masės perpylimai. Tokių perpylimų gali būti 5 ir daugiau. Procedūrų skaičius ir jų dažnis nustatomas pakartotinėmis analizėmis ir atliekamas kitą kartą, kai dauginasi defektuoti eritrocitai.

Retais atvejais blužnis pašalinamas. Splenektomijos požymiai yra staigus organo padidėjimas ir infarkto būklės išsivystymas.

Likusios terapinės priemonės yra skirtingos grupės vaistų, palengvinančių patologijos eigą, vartojimas. Pagrindiniai vaistai yra steroidinių hormonų grupių preparatai, citostatikai, taip pat geležies ir folio rūgšties preparatai.

Nerobol

Dažniausiai paskiriant gydytojus, kovojančius su simptominiu paroksizminės naktinės hemoglobinurijos pasireiškimu, yra vaistas Nerobol. Tai anabolinių steroidų grupės hormoninis vaistas. Vaisto veikimas yra nukreiptas:

• stimuliuoti baltymų sintezę paciento organizme, kurio nepakanka pažeistoje eritrocitų membranoje;
• teigiamai veikia azoto apykaitą;
• lėtina kalio, sieros ir fosforo, būtinų normaliai baltymų sintezei, išsiskyrimą;
• išprovokuoja padidėjusį kalcio fiksavimą kauluose.

Išgėręs šio vaisto, pacientas jaučia apetito padidėjimą, intensyvų raumenų masės padidėjimą, pagreitintą kaulų kalcifikaciją, taip pat daug geresnę bendrą organizmo būklę.

Vaisto vartojimas prasideda nuo 10 g, palaipsniui didinant iki 30 g, 1-2 dozes per dieną. Vaikams vaisto dozė yra 1 tabletė kas antrą dieną, sunkiais atvejais - kasdien. Gydymo Nerobol kursas yra nuo 2 iki 3 mėnesių.

Pasibaigus vaisto vartojimui, daugeliui pacientų pastebimas hemolizės padidėjimas.

Nerobol galima vartoti griežtai pagal gydančio gydytojo nurodymus.

Heparinas

Heparinas yra tiesioginis antikoaguliantas - priemonė, stabdanti kraujo krešėjimą. Esant paroksizminei naktinei hemoglobinurijai, jis skiriamas siekiant išvengti kraujo krešulių susidarymo, kurie apsunkina ligos eigą.

Dozavimas ir vartojimo dažnis yra visiškai individualus, atsižvelgiant į patologijos sudėtingumą ir kraujo krešulių riziką induose.

Pasibaigus heparino kursui, gydytojas skiria netiesioginius antikoaguliantus, kad palaikytų normalų krešėjimo lygį.

Ekulizumabas yra vaistas, kurį sudaro humanizuoti monokanaliniai antikūnai. Vaisto veikimo principas yra sustabdyti intravaskulinę hemolizę ir tiesioginį atsparumą kraujo komplikacijoms. Dėl to susilpnėja natūralus pažeistų raudonųjų kraujo kūnelių naikinimas organizmo imuninei sistemai.

Šis vaistas yra brangiausias pasaulyje. Jo veikimo mechanizmas ir galimų jo naudojimo pasekmių raida nebuvo pakankamai ištirti.

Geležies ir folio rūgšties preparatai

Jei sutrinka raudonųjų kaulų čiulpų darbas, atsiranda geležies ir folio rūgšties trūkumas, būtinas normaliai kraujodarai. PNH gydymo terapija apima šių mikroelementų preparatų skyrimą, siekiant kompensuoti patologinius nuostolius.

Vaisto dozę ir vartojimo būdą nustato gydantis gydytojas. Dažniausiai skiriami „Sorbifer“, „Tardiferron“, „Ferretab“, „Fenuls“ ir kt. Šių vaistų sudėtis apima mikroelementų kompleksą, būtiną normaliam raudonųjų kaulų čiulpų kietųjų kraujo dalelių susidarymui.

Kepenų palaikymas

Intensyvi terapija kovojant su paroksizmine naktine hemoglobinurija stipriai veikia kepenis. Jei nėra palaikomosios kepenų terapijos, ji gali tiesiog atsisakyti. Todėl svarbu vartoti hepatoprotekcinius vaistus. Tai gali būti tokie vaistai:

• Maksar;
• Heptral;
• Carsil.

Be to, yra daug maisto produktų, kurie gali padėti atstatyti kepenų ląsteles. Tai moliūgai, džiovinti abrikosai, rudadumbliai, alyvuogių aliejus, pieno produktai ir kt. Svarbiausia, kad kepenų silpnumo akimirkomis nepabloginkite jo su greitu maistu.

Nustačius ligą, gydytojai pateikia netikslias prognozes. Statistika sako, kad nustačius diagnozę, pacientas gali gyventi palaikomąją terapiją maždaug 5 metus.

Dėl nežinomos ligos kilmės ir jos vystymosi priežasčių netikslumų negalima išvengti paroksizminės naktinės hemoglobinurijos.

išvadas

Markiafava-Micheli liga arba paroksizminė naktinė hemoglobinurija yra sunki liga, kuri gali būti mirtina net ir intensyviai gydant. Vienintelis galimas pasveikimas laikomas raudonųjų kaulų čiulpų transplantacija, kurios metu susidaro kraujo ląstelės. Be to, patologija sukelia gretutinių ligų, kurios yra ne mažiau pavojingos paciento būklei, vystymąsi.

Todėl gydytojai vieningai pareiškia, kad geriausias būdas išvengti bet kokios patologijos yra reguliariai atlikti išsamų medicininį patikrinimą. Galbūt, jei liga yra tik formavimosi stadijoje, ją galima visam laikui pašalinti. Sergant tokiomis sunkiomis ligomis, pagrindinis klausimas yra laikas. Turėtumėte rūpintis savimi ir savo kūnu.

Patento RU 2574968 savininkai:

Šis išradimas susijęs su medicina, būtent su laboratorine diagnostika, ir gali būti naudojamas diagnozuoti paroksizminę naktinę hemoglobinuriją. Norėdami tai padaryti, dažykite tiriamą kraujo mėginį monokloniniais antikūnais CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC). PNH klono buvimas tarp eritrocitų ir retikulocitų vertinamas pagal apsauginio baltymo CD59 nebuvimą ant retikulocitų membranos, izoliuotos vartų CD235a - visos eritrocitų žymeklio ir CD71 - transferino receptoriaus. Norint įvertinti PNH kloną tarp retikulocitų CD71 + vartuose, surenkama mažiausiai 20 000 įvykių, priklausomai nuo CD71 + vartų, brėžiamas FSC (log) vs SSC (log) grafikas, ant kurio išskiriami retikulocitai, naudojant papildomą CD71str vartai, tokiu būdu išvalant retikulocitų populiaciją nuo šiukšlių ir dublių, naudojant nuoseklaus vartų metodą. Esant 100% teigiamam CD59 retikulocitų poveikiui, vertinamas PNH klono nebuvimas ir diagnozuojama paroksizminės naktinės hemoglobinurijos ligos nebuvimas. Jei aptinkamas pacientas, turintis klinikinių neigiamų CD59 retikulocitų simptomų ir gautų rodiklių vertė yra didesnė nei 1%, jie pateikia diagnostinę išvadą apie PNH klono buvimą ir patvirtina paroksizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozę, papildomas tyrimas rekomenduojama pagal tarptautinį standartizuotą protokolą. Aptikus neigiamą CD59 retikulocitų kiekį ir gautų rodiklių vertę 0,1–1%, vertinamas nedidelio PNH klono buvimas ir rekomenduojama iš naujo nustatyti PNH kloną po 6 mėnesių, kad padidėtų jo vertė ir vystymasis. paroksizminės naktinės hemoglobinurijos, o patvirtinus tokio dydžio klonui diagnozuojama subklinikinė paroksizminės naktinės hemoglobinurijos forma be klinikinių požymių. Naudojant daugiaparametrinį CD71 + ląstelių blokavimą, galima į analizę neįtraukti šiukšlių, dubletų ir nespecifiškai susietų monokloninių antikūnų. 1 serga.

Išradimas susijęs su medicina, būtent klinikiniais ir laboratoriniais diagnostikos metodais, ir gali būti naudojamas paroksizminės naktinės hemoglobinurijos (PNH) atrankos diagnostikai.

Paroksizminė naktinė hemoglobinurija yra reta liga.

PNH sukelia PIG-A geno mutacija. Dėl to sutrinka glikozilfosfatidilinozitolio (GPI) inkaro sintezė, dėl kurios ant kraujo ląstelių membranos yra daug molekulių (įskaitant CD24 ant granulocitų, CD14 ant monocitų, CD59 ant eritrocitų ir jų pirmtakų), kurios apsaugo kraujo ląsteles nuo papildymo sistema.

Eritrocitų membraną labiausiai veikia atakuojančio komplekso membranos, o nesant apsauginio baltymo CD59, eritrocitai hemolizuojami.

PNH būdinga intravaskulinė hemolizė, anemija, hemoglobinurija, trombozės komplikacijos, disfagija, letargija, erekcijos sutrikimas, lėtinis inkstų nepakankamumas, plaučių hipertenzija.

Be to, PNH klonas gali atsirasti sergant aplazine anemija, autoimunine hemolizine anemija ir mielodisplastiniu sindromu. Amžiaus mediana yra 30–35 metai. Paroksizminės naktinės hemoglobinurijos dažnis yra nuo 1 iki 10: 1 milijono žmonių. Mirtingumas negydant paroksizminės naktinės hemoglobinurijos yra apie 35% per 5 metus nuo ligos pradžios.

Dabar atsirado ląstelių technologijos, leidusios sukurti šiuolaikinius šios ligos gydymo metodus.

Šiuo atžvilgiu tapo būtina sukurti tikslius diagnostikos metodus, tk. gydymo veiksmingumas ir tinkamumas priklauso nuo diagnostinių priemonių informatyvumo, objektyvumo ir įrodymų bei gautos informacijos išsamumo, o tai leidžia įvertinti PNH klono buvimą ir patikslinti diagnozę.

Žinomas PNH aptikimo metodas Hem metodu paroksizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozei nustatyti (Abdulkadyrov KM, Clinical Hematology, Handbook - St. Petersburg: Peter, 2006, p. 82), pagrįstas komplemento sistemos inaktyvacijos stimuliavimu. dėl kraujo mėginio parūgštėjimo ir padidėjusio jautrumo jam eritrocitų pacientams, sergantiems paroksizmine naktine hemoglobinurija. Hema testo rezultatas vertinamas vizualiai.

Šis metodas susideda iš to, kad į donoro kraujo serumą įpilama 0,2 normalaus HCl tirpalo, kuris pagal ABO antigenų sistemą yra panašus į paciento serumą, jo serumo pH pasikeičia į 6,4, todėl atsiranda komplemento aktyvacija ( serumo ir rūgšties santykis yra 9: 1). Tada dešimt tūrių parūgštinto serumo sumaišoma su vienu tūriu 50% nuplautų eritrocitų suspensijos. Tada vizualiai įvertinkite gautą sustabdymą. Esant paroksizminei naktinei hemoglobinurijai, atsiranda eritrocitų hemolizė ir suspensija tampa rausvos arba raudonos spalvos, tuo tarpu normalūs eritrocitai tomis pačiomis sąlygomis hemolizuojasi.

Tačiau ši technika nėra pakankamai jautri mažiems PNH klonams aptikti: mažiausias aptinkamas klono dydis yra 4,2–5%. Hemo metodas nesuteikia informacijos apie klono dydį.

Visa tai neleidžia įvertinti PNH klono procentais, kuris, atrankos metu aptikus ligą, yra tolesnio stebėjimo ir tinkamo gydymo atspirties taškas.

Be to, technika yra labai sunki ir neatitinka šiuolaikinių diagnostikos reikalavimų.

Taip pat žinomas paroksizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozavimo metodas, naudojant sacharozės testą („Problemos, susijusios su hematologija ir kraujo perpylimu“, 1972 m., Rugpjūčio mėn., 17 (8) 55-7, „Parozizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozavimo sacharozės tyrimo įvertinimas“, Idelsonas LI, Benisovičius V. I., Savina L. S., Radživilovskaja E. G.).

Metodas pagrįstas padidėjusiu paciento, sergančio paroksizmine naktine hemoglobinurija, eritrocitų jautrumu komplemento sistemos baltymams, šiuo atveju dėl sacharozės.

Į paciento eritrocitus pridedamas šviežio donoro serumas, identiškas paciento kraujo grupei. Eritrocitai tris kartus plaunami fiziologiniu tirpalu (0,145 M NaCl), į 900 ml sacharozės tirpalo įpilama 100 μl citruoto arba defibrinuoto kraujo ir 30 minučių inkubuojama 37 ° C arba 23 ° C temperatūroje. Tada mėgintuvėliai centrifuguojami, o supernatantas įvertinamas dėl matomos hemolizės. Jei vyksta hemolizė, jos laipsnis, išreikštas procentais, apskaičiuojamas pagal supernatanto hemoglobino koncentraciją, kuri nustatoma cianmethemoglobino metodu.

Visas kraujo mėginys sumaišomas 9: 1 su 3,2% natrio citrato arba 0,1 M oksalato tirpalu, o visas kraujas defibrinuojamas, pridedant 4 mm stiklo karoliuką 2 ml kraujo. Visas kraujas ir plazma be trombocitų yra sumaišomi įvairiomis proporcijomis. Izotoninis sacharozės tirpalas ruošiamas ištirpinant 0,27 mol specialaus sacharozės reagento 91 ml 50 mM NaH 2 PO 4 ir 9 ml NaHPO 4. Jei reikia, mažomis NaOH koncentracijomis pH sureguliuojamas iki 6,1. Galutinis tūris pripildomas 1000 ml vandens.

Vamzdeliai centrifuguojami, o supernatantas įvertinamas dėl matomos hemolizės. Hemolizės procentas yra apskaičiuota vertė, apskaičiuota pagal supernatanto hemoglobino koncentraciją, nustatytą cianmethemoglobino metodu. Mėginiams įvertinti taip pat buvo paruoštos dvi kitos alikvotinės dalys - 100% hemolizė ir "nulinė" hemolizė (be raudonųjų kraujo kūnelių).

Šio metodo trūkumas yra jautrumo ir specifiškumo trūkumas diagnozuojant ligą: mažiausias aptinkamas klono dydis - 4,2–5% nesuteikia tikslaus supratimo apie klono dydį, nors jis gali būti paciento kraujas esant mažesnėms vertėms- mažiau nei 4,2%. Šio metodo trūkumai taip pat gali būti priskirti jo sudėtingumui.

Taip pat žinomas PNH-klono (Rosse WF. Raudonųjų kraujo kūnelių variacijos paroksizminėje naktinėje hemoglobinurijoje. Br J Haematol 1973; 24: 327-42. 12) diagnozavimo metodas, įskaitant matavimo ir hemolizė esant įvairioms komplemento koncentracijoms. Ši analizė rodo, kad PNH ląstelės lizuojamos mažesnėmis koncentracijomis nei įprastos ląstelės.

Naudojant šį testą, nustatomos ląstelių populiacijos, turinčios tarpinį jautrumą komplemento sistemos baltymams (II tipas) tarp normalių eritrocitų (I tipas) ir nenormalūs eritrocitai, esantys paroksizminėje naktinėje hemoglobinurijoje (III tipas). Tačiau šis metodas užima daug laiko ir jį sunku standartizuoti. Naudojant testą galima praleisti mažas nenormalių ląstelių populiacijas.

Yra žinomas retikulocitų izoliavimo metodas pagal CD71, siekiant nustatyti PNH kloną pagal srauto citometriją tarp retikulocitų ir granulocitų (Tsagarakis NJ, Paterakis G. Pavyzdinis srauto citometrinis tyrimas, skirtas įprastiniam paroksizminiam nakties hemoglobinurijos tyrimui, pagrįstam nesubrendusiais retikulocitais ir granulocitais. 2012 - 07 259-263) (http: //onlinelibrary.wiley.coni/doi/10.1002/cyto.b.21030/full).

Tiriamas visas paciento kraujas, praskiedžiamas fosfatiniu buferiniu tirpalu 1: 100. Į du mėgintuvėlius įpilama 50 μl praskiesto kraujo, tada atliekamas dažymas: pirmame mėgintuvėlyje 10 μl monokloninių antikūnų (MCA) prieš CD71 ir 20 μl MCA iki CD59; Į antrąjį mėgintuvėlį įpilama 10 µl IgGl izotipinės kontrolės. Rezultatai vertinami naudojant vieno parametro histogramas.

Be to, metodas taip pat analizuoja granulocitus, naudojant MCA derinius: 1) CD59-FITC / CD24-PE / CD45-PE-Cy5 /; 2) CD66b-FITC / CD16-PE / CD45-PE-Cy5.

Pagal šį metodą PNH klono nustatymo jautrumas tarp granulocitų yra 1%, PNH klono nustatymo jautrumas tarp retikulocitų yra 5%. Tačiau siūlomas metodas buvo išbandytas nedaugeliui pacientų, kuriems pasireiškė paroksizminė naktinė hemoglobinurija (n = 8) ir kurių PNH klonas buvo mažesnis nei 1% (vertinant pagal granulocitus, ir atitinkamai mažiau nei 5%, kai nustatyta pagal retikulocitus). (n = 7). Be to, jautrumas klono nustatymui retikulocituose (5%) neleidžia naudoti metodo, leidžiančio vienu metu įvertinti kloną tarp granulocitų ir retikulocitų. Tuo pačiu metu tarp kraujo mėginių iš pacientų, kuriems įtariamas PNH, nebuvo nė vieno, kurio klono dydis būtų 1–24%, o tai nesuteikia išsamaus šio diapazono verčių koreliacijos vaizdo. Taikant šį metodą, retikulocitų suskirstymas yra sunkus, nes skydelyje nėra visos eritrocitų žymeklio (CD235a), kuris yra ypač būtinas norint išskirti gryną populiaciją ir nupjauti šiukšles bei dublius. Be to, norint objektyviai įvertinti PNH kloną, būtina įvertinti dešimtis tūkstančių ląstelių. Vienas tyrimas pagal siūlomą metodą sunaudoja daug antikūnų. Bendro surinktų vartų įvykių skaičiaus (pagal CD71) (2000 įvykių) gali nepakakti klonui aptikti.

Taigi žinomas metodas buvo išbandytas nedaugeliui pacientų, sergančių paroksizmine naktine hemoglobinurija ir PNH klonu, ląstelės, nespecifiškai susietos su MCA prie CD71, greičiausiai iškraipys analizės rezultatus. Be to, šiai analizei naudojami 6 tipų monokloniniai antikūnai, 2 iš jų naudojami du kartus, o tai atsispindi didele naudotos MCA plokštės kaina. Metodas buvo išbandytas 8 pacientams, sergantiems PNH, 7 iš jų klono vertė buvo mažesnė už jautrumo slenkstį (1% granulocitų, 5% retikulocitų). Šis metodas neišsprendžia patikimo mažo PNH klonų identifikavimo problemos ir nėra didelio metodo jautrumo įrodymas.

Kaip artimiausias analogas, yra žinomas paroksizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozavimo metodas srauto citometrijos metodu, kurį pasiūlė Tarptautinė klinikinės citometrijos asociacija (ICCS). (Michael J. Borowitz, Fiona E. Craig, Joseph A. DiGiuseppe, Andrea J. Illingworth, Wendell Rosse, D. Robert Sutherland, Carl T. Wittwer, Stephen J. Richards. Paroksizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozavimo ir stebėjimo gairės susiję sutrikimai pagal srauto citometriją, internete: 2010 m. balandžio 28 d. DOI: 10.1002 / cyto.b.20525).

Šis metodas apima GPI susietų baltymų buvimą granulocituose, monocituose ir eritrocituose. Tyrimą sudaro du etapai: mėginio paruošimas ir vėlesnė srauto citometro analizė.

Eritrocitų analizei visas kraujas praskiedžiamas PBS santykiu 1: 100, 10 µl viso kraujo pridedama prie 990 µl PBS; Tada į pažymėtą mėgintuvėlį įpilama 40 μl gautos ląstelių suspensijos. Norėdami dažyti eritrocitus, į ląstelių suspensiją atitinkamai pridedami monokloniniai antikūnai, sujungti su CD235FITC ir CD59 pažymėtais fluorochromais. Po 30 minučių inkubavimo su monokloniniais antikūnais tamsoje mėginiai plaunami iš nesusietų monokloninių antikūnų. Norint analizuoti eritrocitus, plovimas atliekamas du kartus, centrifuguojant mėginį 4 ml fosfatinio buferinio tirpalo maždaug 1500 minučių maždaug 5 minutes, po to paimamas supernatantas, ląstelės suspenduojamos, įpilama 500 μl fosfatiniu buferiniu tirpalu. analizė.

Norint surinkti ir analizuoti eritrocitus srauto citometre naudojant prietaiso programinę įrangą, sudaromos diagramos:

Sklypas-FS (log) vs (prieš) SS (log), ant kurio išskiriama raudonųjų kraujo kūnelių populiacija (sukurkite raudonųjų kraujo kūnelių vartus) ir pašalinamos šiukšlės, trombocitai ir raudonųjų kraujo kūnelių agregatai;

CD235a (log) vs FS (log) grafikas atspindi įvykius iš raudonųjų kraujo kūnelių vartų, kad būtų aiškiau paryškinta CD235a teigiama eritrocitų populiacija, sukurti nauji vartai (CD235a +)

CD59 (log) vs CD235a, (histograma rodo įvykius, susietus su CD235a +). Histograma atspindi CD59 ekspresijos lygį eritrocituose. Ląstelės, neturinčios CD59 trūkumo - I tipo, yra normalūs eritrocitai, ląstelės su daliniu CD59 ekspresijos trūkumu - II tipo PNH klonas, ląstelės, kurios neišreiškia CD59, tai yra eritrocitai, turintys visišką CD59 trūkumą, yra III tipo PNH klonas.

Remiantis metodika, surenkama mažiausiai 50 000 citometrinių įvykių.

Norėdami pasiruošti granulocitų ir monocitų analizei, į du pažymėtus mėgintuvėlius įpilkite 100 μl periferinio kraujo. Be to, norėdami dažyti žymėtais monokloniniais antikūnais, į kiekvieną mėgintuvėlį pridėkite savo pažymėtų monokloninių antikūnų derinį:

pažymėtų monokloninių antikūnų derinys, siekiant nustatyti PNH kloną tarp granulocitų FLAER (AlexaFluor700) / CD15 (PE) / CD24 (PerCP) / CD45 (PE -Cy7) (žymėjimo žymenys: CD45 ir CD15, GPI susiję žymenys FLAER ir CD24) ;

pažymėtų monokloninių antikūnų derinys, skirtas PNH klonui tarp monocitų FLAER (AlexaFluor700) / CD14PE / CD64PerCP / CD45PE-Cy7 nustatyti, kai žymėjimo žymenys yra CD45 ir CD64, GPI yra susiję žymenys FLAER ir CD14;

Dažyti mėginiai 30 minučių inkubuojami kambario temperatūroje tamsoje, po to į mėginį įpilama 1 ml lizės tirpalo, kad būtų pašalinti raudonieji kraujo kūneliai. Po inkubavimo su lizės tirpalu mėginiai 5 minutes centrifuguojami esant 1500 aps./min., Po centrifugavimo supernatantas nusausinamas, leukocitai mėgintuvėlio apačioje suspenduojami. Toliau mėginiai išplaunami iš lizės tirpalo, į mėginį įpilant 2 ml fosfato ir fiziologinio tirpalo buferio ir vėliau centrifuguojant 5 minutes esant 1500 aps./min. Po centrifugavimo supernatantas dekantuojamas, ląstelės resuspenduojamos, tada tolesnei analizei pridedama 500 μl fosfatiniu buferiniu tirpalu.

Norint analizuoti ir surinkti granulocitus ir monocitus srauto citometre naudojant prietaiso programinę įrangą, sudaromos šios diagramos:

Diagramoje CD45 (log) vs SS, CD45 + LY limfocitų sritys (didelės CD45 ekspresijos srities ląstelės, mažos SS vertės), monocitai CD45 + MON (terpės srities ląstelės CD45 ekspresija, didesnės SS vertės) ir granulocitai CD45 + GRAN (ląstelių sritys, kuriose yra maža CD45 ekspresija, didelės SS vertės).

Norint išanalizuoti PNH kloną tarp granulocitų, priklausomai nuo vartų (CD45 + GRAN), sudaromas CD 15 (log) ir SS grafikas. Naudojant CD15 + vartus, išskiriama granulocitų, neturinčių šiukšlių, ir ląstelių, nesusijusių su monokloniniais CD15 antikūnais, populiacija;

Histograma FLAER (log) vs CD24 (log) (pavaizduota prieš CD15 + vartus. Šioje diagramoje pavaizduoti PNH GRAN vartai, kurie užfiksuoja zoną, neigiamą CD24 ir FLAER išraiškai. Šių žymenų nebuvimas granulocituose rodo, kad ląstelės priklauso PNH klonui.

Norint įvertinti PNH kloną tarp monocitų, pavaizduotas -CD64 (log) ir SS grafikas, palyginti su CD45 MON vartais. Šioje diagramoje teigiami C064 įvykiai yra tik CD64 + MON vartai. Priklausomai nuo CD64 + MON vartų, brėžiamas grafikas -FLAER (log) vs CD14 (log) (priklausomai nuo pasirinktos CD64 + monocitų populiacijos - vartai). Šioje diagramoje pavaizduoti PNH MON vartai, apimantys neigiamą zoną CD14 ir FLAER išraiškai. Šių žymenų nebuvimas monocituose rodo, kad ląstelės priklauso PNH klonui.

PNH klono vertė yra ląstelių (granulocitų, monocitų, eritrocitų) procentinė dalis, tarp kurių nėra su GPI susijusių inkarinių baltymų.

PNH klono tyrimas pagal tarptautinį protokolą yra „auksinis standartas“ diagnozuojant PNH. Tačiau tyrimai yra brangūs ir atima daug laiko. Paruošimas ir analizė pagal šį metodą trunka mažiausiai 2,5-3 valandas.

Atsižvelgiant į tai, kad PNH yra reta liga, įvairių šaltinių duomenimis, ja serga nuo 1 iki 10 žmonių 1 milijonui gyventojų, dauguma pacientų, nukreiptų atlikti PNH klonų diagnostikos, nebus teigiami. Todėl sudėtinga ir brangi analizė pagal tarptautinį protokolą pacientams, kuriems nėra PNH, yra nepraktiška, ir pakanka tik atsakyti į klausimą, ar PNH klonas yra, ar ne. Su žymėtų monokloninių antikūnų kaina prasideda nuo 500 USD vienam elementui visas antikūnų ir reagentų rinkinys PNH diagnostikai pagal tarptautinį metodą kainuos nuo 5000 USD. Atsižvelgiant į trumpą kai kurių reikalingų reagentų galiojimo laiką, net ir mieste, kuriame gyvena 1 milijonas žmonių, su vienu rinkiniu per metus galima ištirti atitinkamai nuo 10 iki 100 pacientų, vieno tyrimo kaina gali siekti iki 500 USD.

Šio išradimo tikslas yra sukurti tikslų, jautrų ir įrodymais pagrįstą paroksizminės naktinės hemoglobinurijos laboratorinės diagnostikos metodą, kurį būtų paprasta atlikti, jis būtų prieinamas ir kuris leistų atrinkti paroksizminę naktinę hemoglobinuriją su minimaliomis materialinėmis sąnaudomis.

Išradimo esmė yra ta, kad taikant paroksizminės naktinės hemoglobinurijos laboratorinės diagnostikos metodą, įskaitant viso paciento kraujo dažymą monokloniniais antikūnais fosfatiniu buferiniu tirpalu, inkubaciją, kraujo ląstelių plovimą iš nesusietų monokloninių antikūnų centrifuguojant, pakartotinai suspenduojant gatavą mėginį arba vėlesnį klono dydžio įvertinimą, jei jo nėra srauto citometro programoje dėl apsauginių baltymų nebuvimo ar nebuvimo, trispalvė monokloninių antikūnų kombinacija CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC) , kuris pridedamas prie mėginio mėgintuvėlio, PNH klono buvimas tarp eritrocitų ir retikulocitų yra vertinamas pagal tai, ar ant CD235a vartų izoliuotos retikulocitų membranos nėra apsauginio CD59 baltymo-visos eritrocitų žymeklio ir CD71-transferino receptoriaus. ; norint įvertinti PNH kloną tarp retikulocitų CD71 + vartuose, renkama mažiausiai 20 000 įvykių, priklausomai nuo CD71 + vartų FSC (log) ir SSC (log) grafikas, kuriame retikulocitai yra išskiriami naudojant papildomus vartus CD71str, taip nuoseklaus uždarymo metodu išvaloma retikulocitų populiacija nuo šiukšlių ir dubletų, gautos vertės lyginamos su esant normaliems kriterijams, ir esant 100% teigiamiems CD59 retikulocitams, nėra PNH klono, ir diagnozuojama paroksizminės naktinės hemoglobinurijos ligos nebuvimas. Jei aptinkamas pacientas, turintis klinikinių neigiamų CD59 retikulocitų simptomų ir gautų rodiklių vertė yra didesnė nei 1%, jie pateikia diagnostinę išvadą apie PNH klono buvimą ir patvirtina paroksizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozę, papildomas tyrimas Rekomenduojama pagal tarptautinį standartizuotą protokolą, kai nustatomas neigiamas CD59 retikulocitų kiekis ir vertė. Gautieji 0,1–1% rodikliai sprendžia apie nedidelio PNH klono buvimą ir rekomenduoja iš naujo nustatyti PNH kloną po 6 mėnesių, kad padidėtų jo vertės ir paroksizminės naktinės hemoglobinurijos išsivystymo, patvirtinant šį klono dydį, diagnozuojama subklinikinė paroksizminės naktinės hemoglobinurijos forma be klinikinių požymių ...

Naudojant išradimą galima gauti tokį techninį rezultatą.

Siūlomas PNH klono aptikimo metodas pasižymi dideliu patikimumu, tikslumu ir jautrumu - 0,1%, palyginamas su tarptautiniu standartizuotu metodu, ir yra pagrįstas įrodymais.

Tai leidžia nustatyti reikšmingo dydžio PNH klonų buvimą pacientams, kuriems yra tikroji paroksizminė naktinė hemoglobinurija, ir nedidelius - nuo 0,01 iki 1%, pacientams, sergantiems aplazine anemija ir mielodisplastiniu sindromu.

Metodas yra paprastesnis, nereikalauja didelių materialinių išlaidų, palyginti su tarptautiniu standartizuotu metodu.

PNH klonų aptikimo technologija leidžia PNH atrankoje naudoti minimalų (trijų) monokloninių antikūnų skaičių (CD235a, CD71, CD59).

Vieno paciento kraujui tirti naudojamas tik vienas mėgintuvėlis, kuris taip pat supaprastina ir pagreitina analizę.

Vieno testo laikas yra 40-50 minučių. Naudojant mažiau antikūnų nenaudojant lizės tirpalų, analizė atliekama maždaug 75% pigiau. Tuo pačiu metu išlaikomas didelis jautrumas ir diagnostinis tikslumas.

Daugeliu atvejų šis metodas leidžia išvengti papildomų išlaidų, susijusių su daugiau antikūnų naudojimu, nes, atsižvelgiant į retą ligos atvejį, rezultatas dažnai būna neigiamas. Ši technika puikiai tinka pacientų tikrinimui ir yra prieinama įvairių profilių medicinos įstaigoms, taip pat visų kategorijų piliečiams.

Galutinis siūlomo metodo analizės rezultatas pateikiamas eritrocitų ir retikulocitų, turinčių su GPI susijusių baltymų, tai yra PNH klono, procentine išraiška. Šis metodas leidžia nustatyti padidėjusią trombų susidarymo riziką, remiantis nustatyto PNH klono procentine dalimi.

Siūlomas metodas yra geresnis, palyginti su kai kuriais kitais žinomais metodais - Hemo testu, sacharozės tyrimu, hemolizės laipsnio matavimu esant įvairioms komplemento sistemos baltymų koncentracijoms.

Techninis rezultatas pasiektas dėl naujos autorių sukurtos technologijos PNH klonui nustatyti paroksizminėje naktinėje hemoglobinurijoje, naudojant srauto citometriją, kurios algoritmas numato šio klono nustatymą retikulocituose ir eritrocituose (priešingai nei nustatytas standartinis) ant neutrofilų, monocitų ir eritrocitų). Šiuo atveju autoriai pirmą kartą naudoja antikūnų CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC) derinį. Remiantis siūlomu metodu, duomenų analizės metu naudojama papildoma procedūra, skirta daugiaparametriškam CD71 + ląstelių surinkimui ir pašalinimui iš šiukšlių, dubletų analizės ir nespecifiškai susietų monokloninių antikūnų šalinimui.

Svarbiausia yra atlikti retikulocitų tyrimą, kuris pagal autorių sukurtą technologiją yra išskirtas naudojant antikūnus prieš CD71 ir tiriamas naudojant trijų monokloninių antikūnų CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 ( APC), kuriuos pasirinko autoriai. PNH klonas tarp retikulocitų atspindi tikrąją PNH klono vertę; autoriai palygino gautus PNH klonus tarp retikulocitų su vertėmis, gautomis taikant standartizuotą tarptautinį požiūrį į PNH diagnozę. PNH teigiamų retikulocitų tūrio koreliacija su monocitais yra 0,95, granulocitų - 0,93. PNH teigiamų eritrocitų procentas pagal siūlomą metodą yra matuojamas su didesniu jautrumu, palyginti su tarptautiniu standartizuotu metodu, nes taikant siūlomą metodą, tiriama mažiausiai 1 000 000 eritrocitų, o pagal ICCS - tik 500 000.

Pirmą kartą PNH klonas buvo tiriamas retikulocituose, naudojant monokloninių antikūnų CD235a / CD71 / CD59 derinį, o tai leido 100%jautrumu įvertinti šio klono dydį.

Dėl to tapo įmanoma tirti PNH naudojant tris monokloninius antikūnus. Naudojant papildomą retikulocitų izoliavimo etapą ir nespecifiškai prie monokloninių antikūnų prijungtų ląstelių „nupjovimą“ (grafike FS vs SS, pav.) Pateikite tikslų rezultatą, kuris, remiantis atranka, leidžia patvirtinti diagnozę PNH ir atlikti veiksmingą tinkamą gydymą.

Metodas atliekamas taip.

Tyrimui paciento veninis kraujas paimamas į mėgintuvėlį su K 2 EDTA antikoaguliantu. Mėgintuvėlis į laboratoriją pristatomas iš medicinos ir profilaktinės įstaigos (LPI) gydymo kambario.

Eritrocitų ir retikulocitų analizei visas kraujas praskiedžiamas atskirame polistireno mėgintuvėlyje. Praskiedus fosfatiniu buferiniu tirpalu santykiu 1:10, 50 μl viso kraujo įpilama į 450 μl fosfatiniu buferiniu tirpalu ir kruopščiai maišoma 5 sekundes ant sūkurio, tada įpilama 40 μl gautos ląstelių suspensijos į pažymėtą mėgintuvėlį.

Mėginiui dažyti naudojamas trijų spalvų monokloninių antikūnų - CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC) - derinys. Dažymas atliekamas į mėginį pridedant 3 μl pažymėtų monokloninių antikūnų, po to mėgintuvėlis 5 sekundes purtomas sūkuriu. Tada inkubuojama 15 minučių tamsoje kambario temperatūroje.

Tada kraujo ląstelės du kartus plaunamos 4 ml fosfatiniu buferiniu tirpalu centrifugavimo režimu 5 minutes 1500 aps./min. Po kiekvieno centrifugavimo supernatantas atsargiai surenkamas pipete, kad ląstelės liktų mėgintuvėlio apačioje.

Gatavas mėginys 5 sekundes pakartotinai suspenduojamas sūkuryje ir įpilama 750 μl fosfatiniu buferiniu tirpalu, po to mėginys yra paruoštas analizuoti srauto citometru.

Tada rezultatai įvertinami ir registruojami naudojant daugiaspalvę srauto citometriją. Analizę galima atlikti bet kuriuo srauto citometru, turinčiu mažiausiai trijų fluorescencinių kanalų detektorius.

Matavimai atliekami naudojant BD FACSCanto ™ II Becton-Dickinson srauto citometrą (JAV).

PNH klono buvimas ar nebuvimas eritrocituose ir retikulocituose, taip pat PNH klono dydis įvertinamas srauto citometru naudojant specialią programinę įrangą.

Norint įvertinti PNH kloną tarp eritrocitų ir retikulocitų, nubraižomas grafikas - FSC (log) vs SSC (log), naudojant loginį suvaržymą, išskiriamas eritrocitų plotas, išskyrus šiukšles ir dubletus (1a pav.).

Tada CD235a + vartai sukonstruojami FSC (log) ir CD235a grafike (1b pav.), Taip apribojant teigiamas ląsteles ir neįtraukiant įvykių, kurie yra nespecifiškai susiję su CD235a (nuolaužos ir ląstelės, nepriklausančios CD235a + populiacijai).

Įvykiai, įtraukti į CD235a + vartus, analizuojami pagal CD71 vs FSC (log) grafiką (1e pav.), Ir jame paryškinta CD71 teigiama populiacija.

Norint objektyviai įvertinti PNH kloną tarp retikulocitų, CD71 + vartuose surenkama mažiausiai 20 000 įvykių.

Priklausomai nuo CD71 + vartų, brėžiamas FSC (log) ir SSC (log) grafikas (1f pav.), Kuriame retikulocitai išskiriami naudojant papildomus CD71str vartus ir taip populiacija galutinai išvaloma nuo šiukšlių ir dublečių nuosekliu vartymu .

Toliau brėžiamas CD235a prieš CD59 (1g pav.), Palyginti su CD71str vartais (išskirti retikulocitai). Šiame grafike išskiriamos dvi sritys Norm ° Ret ir PNH ° Ret (1g pav.), Tai yra atitinkamai normalių ir PNH teigiamų retikulocitų ribos. Statistika išreiškiama absoliučiomis vertėmis ir vartų% (1d ir 1h pav.).

Duomenų rinkimo protokolai yra sukonfigūruoti vieną kartą, vėliau reikia atlikti tik nedidelius pakeitimus.

Vartai CD235a + pirmajame duomenų rinkimo etape yra sustojimo vartai, t.y. ji renka 1 000 000 įvykių. CD235a + vartai buvo pritaikyti CD235a vs CD59 grafikui (1c pav.). Jei grafike CD235a prieš CD59 yra ne daugiau kaip 10 įvykių II ir PNH III tipo regionuose, duomenų rinkimas sustabdomas ir daroma išvada, kad PNH klono nėra.

Kadangi šiuose regionuose iš viso yra daugiau įvykių, tyrimas tęsiamas.

PNH klonas tarp retikulocitų yra retikulocitų, neturinčių apsauginio baltymo CD59, procentas.

Esant 100% teigiamam CD59 retikulocitų poveikiui, vertinamas PNH klono nebuvimas ir diagnozuojama paroksizminės naktinės hemoglobinurijos ligos nebuvimas.

Jei aptinkamas pacientas, turintis klinikinių neigiamų CD59 retikulocitų simptomų ir gautų rodiklių vertė yra didesnė nei 1%, jie daro klaidingą išvadą apie PNH klono buvimą ir patvirtina paroksizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozę. rekomenduojamas pagal tarptautinį standartizuotą protokolą (Michael J. Borowitz, Fiona E. Craig, Joseph A. DiGiuseppe, Andrea J. Illingworth, Wendell Rosse, D. Robert Sutherland, Carl T. Wittwer, Stephen J. Richards. Guidelines for the paroksizminės naktinės hemoglobinurijos ir susijusių sutrikimų diagnostika ir stebėjimas naudojant srauto citometriją).

Jei neigiamas nėra CD59 retikulocitų, o gautų rodiklių vertė yra 0,1–1%, vertinamas nedidelio PNH klono buvimas. Tokiu atveju rekomenduojama po 6 mėnesių iš naujo nustatyti PNH kloną, kad padidėtų jo vertė ir atsirastų paroksizminė naktinė hemoglobinurija.

Kai šį klono dydį patvirtina srauto citometrija pagal tarptautinį protokolą, diagnozuojama subklinikinė paroksizminės naktinės hemoglobinurijos forma be klinikinių požymių arba įvertinamas PNH klonas, vartojamas kartu su AA ir MDS, kai nustatomos tinkamos diagnozės pagal Tarptautinio tarptautinio komiteto rekomendacijas. PNH interesų grupė (I-PIG).

Šis metodas praėjo klinikinius tyrimus Rusijos medicinos akademijos magistrantūros klinikinės laboratorinės diagnostikos skyriuje. Mes ištyrėme 572 pacientus, siunčiamus iš įvairių sveikatos priežiūros įstaigų, kuriems buvo diagnozuota ar įtariama paroksizminė naktinė hemoglobinurija (PNH), aplastinė anemija (AA), mielodisplastinis sindromas (MPS), autoimuninė hemolizinė anemija (AIHA), nuo 12 iki 82 metų.

Visiems pacientams buvo atlikta diagnostika pagal siūlomą metodą, naudojant daugiaspalvę srauto citometrijos metodą, taip pat pagal tarptautinį standartizuotą metodą.

Nustatytas apsauginio baltymo CD59 nebuvimas ant retikulocitų membranos, išskirtos CD235a (visos eritrocitų žymeklis) ir CD71 (receptorius į transferiną) ir papildomai išgrynintas nuoseklaus uždarymo metodu pagal FS / SS šviesos sklaidos parametrus; PNH klono metodas tarp granulocitų ir monocitų, išmatuotas pagal tarptautinį standartizuotą metodą.

Buvo ištirti 572 žmonės nuo 15 iki 64 metų, iš jų 248 vyrai ir 324 moterys. Iš 572 ištirtų PNH klonas buvo rastas 175 pacientams, jų vertės svyravo nuo 0,1% iki 99,7% (mediana 41,6%). Tarp jų 78 vyrai ir 97 moterys. Visiems pacientams lygiagrečiai buvo atlikti PNH klono tyrimai pagal tarptautinį standartizuotą metodą ir naudojant siūlomą metodą. Koreliacija tarp PNH klono vertės tarp retikulocitų ir granulocitų buvo 0,93, tarp retikulocitų ir monocitų - atitinkamai 0,95. Metodo jautrumas buvo 98,9%, specifiškumas - 99,8%, o bendras tikslumas - 99,7%.

Iš esmės, esant aplazinei anemijai ir mielodisplastiniam sindromui, PNH klonas yra mažesnis nei 1%. Remiantis rekomendacijomis, tokio dydžio klonai turėtų būti tiriami dinamiškai 1 kartą per 6 mėnesius. Padidėjus klono dydžiui ir atitinkamiems klinikiniams požymiams, mes kalbame apie PNH diagnozę.

Pavyzdys. 34 metų pacientas M. buvo prižiūrimas hematologo. Po ūminių kvėpavimo takų virusinių infekcijų padidėjo silpnumas, gelta, patamsėjo šlapimas.

Pacientas buvo paguldytas į medicinos ir profilaktinės įstaigos (LPU) skyrių su skundais dėl silpnumo ir šlapimo patamsėjimo.

Medicinos įstaigos ambulatoriniame skyriuje buvo atliktas planinis tyrimas. Objektyvus tyrimas atskleidė odos ir matomų gleivinių gleivinę. Pacientas buvo paguldytas į hematologijos skyrių, skundžiantis bendru silpnumu, negalavimu, dusuliu, tachikardija, tamsiu šlapimu, sumažėjusiu hemoglobino ir eritrocitų kiekiu.

Mėgintuvėlis su periferinio kraujo mėginiu, stabilizuotu K 2 EDTA, buvo išsiųstas į Rusijos medicinos magistrantūros akademijos klinikinės laboratorinės diagnostikos skyrių PNH etaloniniame centre, kad nustatytų PNH kloną srauto citometrijos metodu. PNH klono analizė tarp granulocitų, monocitų ir eritrocitų buvo atlikta pagal tarptautinį protokolą, o PNH klono tyrimas buvo atliktas naudojant siūlomą eritrocitų ir retikulocitų metodą.

Tuo pačiu metu PNH klonas buvo tiriamas pagal tarptautinį protokolą ir pagal siūlomą metodą (ankstesnio sakinio kartojimas!). Remiantis tarptautiniu protokolu, mėginys buvo nudažytas, kad būtų galima nustatyti PNH kloną tarp granulocitų, monocitų ir eritrocitų, ir pagal autorių pasiūlytą metodą PNH klonui aptikti tarp eritrocitų ir retikulocitų. Pagal siūlomą metodą mėginys buvo nudažytas monokloniniais antikūnais prieš CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC), pakaitomis pridedant 40 μL 1:10 praskiesto viso kraujo.

Po 15 minučių inkubavimo tamsoje ląstelės buvo du kartus plaunamos 4 ml fosfatiniu buferiniu tirpalu centrifugavimo režimu 5 minutes 1500 aps./min.

Po kiekvienos centrifugavimo supernatantas buvo paimtas, o ląstelės liko mėgintuvėlio apačioje.

Paruoštas mėginys 5 sekundes pakartotinai suspenduotas sūkuryje ir įpilama 750 μl PBS.

Tiriant eritrocitus ir retikulocitus, FSC (log) vs SSC (log) grafike buvo paryškintas eritrocitų plotas, išskyrus šiukšles ir dubletus.

FSC (log) ir CD235a grafikas tada paryškino CD235a teigiamas ląsteles, išskyrus šiukšles ir ne CD235a + ląsteles, kurios nespecifiškai surišo anti-CD235a monokloninius antikūnus. Įvykiai, įtraukti į CD235a + vartus, buvo analizuojami pagal CD71 vs FSC (log) grafiką ir buvo nustatyta CD71 teigiama populiacija.

Norint objektyviai įvertinti PNH kloną tarp retikulocitų, CD71 + vartuose buvo surinkta mažiausiai 20 000 įvykių.

FSC (log) ir SSC (log) buvo nubraižyti prieš CD71 + vartus. Tada šiame grafike retikulocitų populiacija buvo izoliuota naudojant papildomus vartus CD71str, kurie taip buvo išgryninti iš šiukšlių ir dublių nuoseklaus uždarymo metodu.

Be to, grafike CD235a prieš CD59, priklausomai nuo CD71str vartų (izoliuoti retikulocitai), buvo įvertinti retikulocitai, ar jie yra su GPI susieto CD59 baltymo ant retikulocitų membranų, atitinkamai, PNH teigiamų ir PNH neigiamų ląstelių. Statistika buvo pateikta kaip absoliučios vertės ir vartų procentas.

Išskyrus retikulocitus CD71 ir vėliau išvalius iš šiukšlių, CD59 populiacijos ląstelės sudarė 97,6%. Taigi, naudojant siūlomą metodą, buvo rastas PNH klonas.

Tyrimas pagal tarptautinį PNH aptikimo protokolą patvirtino, kad PNH klono yra ant granulocitų, monocitų ir eritrocitų atitinkamai 99,2%, 97,6%ir 71,0%, o tai rodo siūlomų rezultatų atkuriamumą. ir standartiniai metodai. Šis tyrimas buvo paroksizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozės pagrindas.

Klinikiniai tyrimai parodė, kad siūlomas metodas pasižymi dideliu patikimumu, tikslumu ir jautrumu (0,1% PNH klonas), leidžia nustatyti tiek didelių klonų reikšmių buvimą pacientams, sergantiems paroksizmine naktine hemoglobinurija, tiek nedideles (nuo 0,1%) pacientams, sergantiems aplazine anemija, mielodisplastiniu sindromu. Siūlomą techniką lengva atlikti, nereikalauja didelių medžiagų sąnaudų, vienas bandymas trunka 40–50 minučių.

Ši technika puikiai tinka pacientų tikrinimui ir yra prieinama įvairių profilių medicinos įstaigoms, taip pat visų kategorijų piliečiams.

Paroksizminės naktinės hemoglobinurijos laboratorinės diagnostikos metodas, įskaitant viso paciento kraujo dažymą monokloniniais antikūnais fosfatiniu buferiniu tirpalu, inkubaciją, kraujo ląstelių plovimą iš nesusietų monokloninių antikūnų centrifuguojant, pakartotinai suspenduojant gatavą mėginį, tada įvertinant klono dydį arba jo nebuvimą srauto citometro programoje arba esant apsauginiams baltymams, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad dažymui naudojamas trijų spalvų monokloninių antikūnų CD235a (FITC) / CD59 (PE) / CD71 (APC) derinys, pridedamas prie mėginio mėgintuvėlio tiriamas kraujo mėginys, PNH klono buvimas tarp eritrocitų ir retikulocitų vertinamas pagal apsauginio baltymo CD59 nebuvimą ant retikulocitų membranos, išskirtos iš CD235a vartų - visos eritrocitų žymeklio ir CD71 - transferino receptoriaus, siekiant įvertinti PNH klonas tarp retikulocitų CD71 + vartuose, surenkama mažiausiai 20 000 įvykių, priklausomai nuo CD71 + vartų, brėžiamas FSC (log) grafikas palyginti su SSC (log), ant kurio retikulocitai yra išskiriami naudojant papildomus CD71str vartus, taip išvalant retikulocitų populiaciją iš šiukšlių ir dublių nuoseklaus uždarymo metodu, gautos vertės lyginamos su įprastais kriterijais ir esant 100% CD59 teigiamų retikulocitų, PNH nebuvimas vertinamas -klonas ir diagnozuojama paroksizminės naktinės hemoglobinurijos ligos nebuvimas, jei aptinkamas pacientas, turintis klinikinių neigiamų CD59 retikulocitų simptomų ir gautų rodiklių vertė yra didesnė nei 1 %, jie pateikia diagnostinę išvadą apie PNH klono buvimą ir patvirtina paroksizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozę, pagal tarptautinį standartizuotą protokolą rekomenduojama atlikti papildomą tyrimą, kai nustatomas neigiamas CD59 retikulocitų skaičius ir gautų rodiklių vertė yra 0,1–1%, vertinamas nedidelio PNH klono buvimas ir rekomenduojama po 6 mėnesių iš naujo nustatyti PNH kloną, kad padidėtų jo vertė ir atsirastų paroksizminis intramuralinė hemoglobinurija, kai šis klono dydis patvirtinamas, diagnozuojama subklinikinė paroksizminės naktinės hemoglobinurijos forma be klinikinių požymių.

Panašūs patentai:

Šis išradimas yra susijęs su medicina, būtent oftalmologija, ir gali būti naudojamas diagnozuoti paveldimą optinę neuropatiją (NON). Tam atliekami klinikiniai ir citologiniai tyrimai, be to, iš paciento odos gaunama 5000–10000 ląstelių / cm2 tankio fibroblastų kultūra, nudažoma nuo mitochondrijų priklausančios nuo įtampos fluorescenciniais dažais TMRE iki galutinės koncentracijos. 25 nM.

Išradimas susijęs su medicina ir apibūdina chemiliuminescencinį reagentą, skirtą nustatyti analitės buvimą ir (arba) kiekį mėginyje, kuriame yra numatomas analitės kiekis, kur reagentas yra neišsisklaidantis ir tirpus vandeninėje terpėje ir jame yra rišamoji medžiaga analitinė medžiaga ir chemiliuminescencinė kompozicija, kurioje yra olefino junginys ir metalo chelatas, kur olefino junginys yra junginys, galintis reaguoti su pavieniu deguonies 2 + 2 priedu, kad susidarytų dioksetanas, arba kuris gali reaguoti su pavieniu deguonimi su 4 + 2 ciklo papildymu su metalais ir kai metalas arba metalo chelatas yra retųjų žemių metalas arba VIII grupė, ir kai metalas yra derinamas su dviem ar daugiau tos pačios molekulės arba chelatinės medžiagos atomų, kai du ar daugiau atomų yra parinkti iš grupės, susidedančios iš deguonies, azoto ir sieros.

Išradimų grupė susijusi su medicina, būtent su imunologija, ir gali būti naudojama siekiant nustatyti vėžio gydymo ex vivo veiksmingumą. Tam tiriamajam pavartojus vieną ar kelias imunogeninės kompozicijos dozes, matuojamas aktyvuotų T-limfocitų (CD3 + CD69 +) kiekis organizme.

Išradimas yra susijęs su biotechnologijų sritimi ir gali būti naudojamas žmogaus genotipui nustatyti pagal polimorfizmą genų matricos metaloproteinazėje MMP9-1562 C> T (rs3918242).

Išradimas susijęs su Trichuris embrioninių kiaušinių biologinio aktyvumo nustatymo metodu. Apibūdintas metodas apima bent trijų analizių atlikimą, pasirinktą iš: - kiaušinių embriono vystymosi stadijos įvertinimo ir (arba) patvirtinimo, naudojant kiekybinį PGR metodą, naudojant tinkamas žymenų sekas genomo DNR kopijų skaičiui nustatyti, - embrioninius kiaušinius naudojant biocheminius ir (arba) molekulinius biologinius metodus, laboratorinių gyvūnų Trichuris lervų norma ...

Išradimas susijęs su medicina, būtent su kardiologija, ir gali būti naudojamas prognozuoti mirtingumo nuo širdies ir kraujagyslių ligų riziką pacientams, sergantiems lėtiniu širdies nepakankamumu po infarkto, kartu su 2 tipo cukriniu diabetu.

Išradimas susijęs su medicina, būtent su onkologija ir klinikine biochemija. Metodo esmė slypi tame, kad fiksuotos periferinės kraujo ląstelės yra apdorojamos pirminiais antikūnais prieš estrogeną surišančius baltymus, kurie specifiškai sąveikauja su antigenais segmentuotų granulocitų paviršiuje, tada prie gauto antigeno pridedami antriniai prieš rūšį fluorescenciniu būdu pažymėti antikūnai -antikūnų kompleksas, o jei yra nudažytas granulocitų segmentuotų granulocitų paviršius, diagnozuojami piktybiniai navikai, o nesant dalelių suskaidytų granulocitų paviršiuje -gerybiniai navikai.

Išradimas susijęs su medicina, būtent su onkologija, ir gali būti naudojamas prognozuoti hematogeninių metastazių vystymąsi po kombinuoto inkstų vėžio gydymo.

Išradimas susijęs su medicina, būtent su akušerija ir ginekologija, ir gali būti naudojamas prognozuoti vaisiaus augimo sulėtėjimą. Norėdami tai padaryti, ankstyvojo nėštumo moters veniniame kraujyje nustatomas santykinis CD3 + CD16 + 56 + limfocitų kiekis, komplemento C3 komponento lygis ir tirpus naviko nekrozės faktoriaus receptorius (sTNF-R). .

Šis išradimas susijęs su medicina, būtent su gastroenterologija, ir gali būti naudojamas diagnozuoti pūlingą poekrotinę kasos pseudocistą. Tam fagocitų aktyvumas paciento kraujyje nustatomas pagal CD 14 + / HLA-DR + ekspresijos lygį pagal srauto citometriją ir statistinę ROC analizę. Jei CD14 + / HLA-DR + kiekis yra mažesnis nei 85%, diagnozuojama pūliuojanti kasos pseudocista. Naudojant šį metodą, galima diagnozuoti pūlingą kasos pinekokrotinę pseudocistą, o tai leidžia nustatyti tokių pacientų valdymo taktiką ir pasirinkti chirurginę intervenciją. 2 ex, 1 stalas

Šis išradimas susijęs su medicina, būtent su hematologine onkologija, ir gali būti naudojamas prognozuoti pacientų, sergančių daugybine mieloma, išgyvenimą be recidyvų po autologinės kraujodaros kamieninių ląstelių transplantacijos. Išradimo tikslas yra supaprastinti pacientų, sergančių daugybine mieloma po ATHSC, išgyvenimo be ligos prognozavimo metodą. Pacientų, sergančių daugybine mieloma, po autologinės kraujodaros kamieninių ląstelių transplantacijos (ATHSC) išgyvenimo be ligos prognozavimo metodas apima srauto citometriją ir santykinio vienos limfocitų populiacijos turinio įvertinimą, naudojant jo slenkstinę vertę. Siūlomu metodu, po aferezės procedūros, prieš transplantaciją, paciento aferezės produkte nustatomas santykinis CD45 + CD19 + B ląstelių skaičius, o jei CD45 + CD19 + B ląstelių kiekis yra didesnis nei 2,5%, trumpesnis prognozuojamas išgyvenimo laikotarpis be atkryčių po ATHSC, o CD45 + CD19 + B ląstelių kiekis yra mažesnis nei 2,5%, prognozuoja ilgesnį DFS po ATHSC. 1 serga.

Išradimas susijęs su medicina, būtent su imunologija, ir gali būti naudojamas įvertinti limfocitų sprogimo transformacijos reakciją. Tam brucelinas naudojamas specifiniam limfocitų aktyvavimui. Limfocitų sprogimo formų aptikimas atliekamas naudojant monokloninius antikūnus prieš CD34, o po to - ląstelių skaičiavimą srauto citometrija. Naudojant šį metodą, brucelioze sergantiems pacientams ir sveikiems donorams galima apskaityti brucelino aktyvuotus limfocitus RBTL, naudojant monokloninius antikūnus CD34. 1 skirtukas.

Išradimas susijęs su medicina, būtent su imunologija, ir gali būti naudojamas nustatyti antikūnus prieš alogeninį HLA-G kraujo serume. Tam naudojamas donoro mononuklearinių ląstelių ir recipiento serumo kryžminės atitikties testas. Analizuokite mononuklearinių ląstelių pogrupius, naudodami srauto citofluorometriją, kad surištų monokloninius antikūnus HLA-G, ir įvertinkite HLA-G ekspresijos laipsnį eksperimentinėse ir kontrolinėse donorinėse mononuklearinėse ląstelėse. Šiuo atveju CD3-HLA-G + ir CD3 + HLA-G + pogrupiai yra reikšmingi, pagal kuriuos slopinimo koeficientas (CP) eksperimentinėje aplinkoje apskaičiuojamas pagal kontrolinį pagal formulę: CP HLA -G = (HLA -G О П -HLA -G K ON T) HLA -GK ON T × 100, kur HLA -Gon yra bendras santykinis pogrupių, išreiškiančių HLA -G, skaičius: (CD3 -HLA -G ++ CD3 + HLA-G +) eksperimentinėje aplinkoje,%; HLA-Gcont yra bendras santykinis pogrupių, išreiškiančių HLA-G, skaičius: (CD3-HLA-G ++ CD3 + HLA-G +) kontrolinėje aplinkoje,%. Tokiu atveju jautrinant alogeninį HLA-G, diagnozuojama neigiama CPHLA-G vertė. Naudojant šį metodą, galima nustatyti alogeninį jautrumą HLA-G, naudojant srauto citometriją, nustatant CD3-HLA-G + ir CD3 + HLA-G + pogrupius. 3 pvz., 3 vnt., 2 šaukštai.

Išradimas susijęs su medicina, būtent su akušerija ir ginekologija, ir gali būti naudojamas prognozuoti persileidimo grėsmę. Šiuo tikslu 7-12 nėštumo savaitę moterims, kurioms gresia persileidimas, atliekamas imunologinis periferinio veninio kraujo tyrimas. Išgydžius nėštumo nutraukimo grėsmę, nustatomas santykinis CD45RA-CD62L- kiekis CD8 + limfocitų populiacijoje. Jų vertė yra didesnė nei 23,9%, jie prognozuoja grėsmingą persileidimą antrajame trimestre moterims, kurioms buvo pasikartojantis persileidimas. Naudojant šį metodą galima numatyti grėsmingo persileidimo pasikartojimą antrąjį nėštumo trimestrą, o tai leis pasirinkti teisingą nėščios moters valdymo taktiką ir sumažinti šios komplikacijos dažnumą. 1 šaukštelis, 4 pvz

Šis išradimas susijęs su medicina, būtent su transfuziologija, ir gali būti naudojamas kontroliuoti donorų kraujo švitinimo efektyvumą. Šis metodas apima kraujo ląstelių sprogimo transformacijos reakcijos su mitogeniniu fitohemagglutininu atlikimą ir reakcijos rezultatų nustatymą nustatant limfocitų stimuliacijos indeksą. Reakcija yra suskirstyta į apšvitintą donoro kraują, rezultatai registruojami naudojant srauto citometrą, naudojant monokloninius antikūnus, pažymėtus skirtingais fluorochromais, surenkant aktyvuotus limfocitus su sumažėjusia bendrojo leukocitų žymeklio CD45 ekspresija ir nustatant dvigubo neigiamo procentą. T-limfocitai, turintys imunofenotipą CD3 CD4-CD8-, o neapšvitintas to paties kraujo mėginys imamas kaip kontrolė. Po to spinduliuotės efektyvumas nustatomas pagal dvigubai neigiamų T-limfocitų, turinčių CD3 + CD4-CD8- imunofenotipą, kiekio santykį tiriamame apšvitintame ir tame pačiame neapšvitintame kontroliniame kraujyje kaip neigiami T-limfocitai su CD3 + CD4 -CD8- imunofenotipas eksperimente (tirtame apšvitintame kraujyje), Sdntlc-dvigubai neigiamų T-limfocitų, turinčių CD3 + CD4-CD8- imunofenotipą, turinio procentinė dalis kontrolėje (neapšvitintame to paties kraujo mėginyje ). Jei skirtumas su kontrole yra didesnis nei 50%, daroma išvada apie apšvitinto kraujo T-limfocitų funkcinį nepilnavertiškumą ir šio kraujo produkto imunologinį saugumą recipientui. Naudojant šį metodą, galima nustatyti donoro kraujo švitinimo efektyvumą srauto citometrijos metodu.

Išradimas susijęs su medicina, būtent su akušerija ir ginekologija, ir leidžia numatyti grėsmingą vėlyvą persileidimą nėščioms moterims. Tam 5–12 nėštumo savaičių laikotarpiu nustatomas santykinis CD178 + nėštumo monocitų skaičius periferiniame veniniame kraujyje. Kadangi jo vertė monocitiniuose vartuose yra 37,7% ar mažesnė, moterims, kurioms gresia ankstyvas nėštumo nutraukimas ir pasikartojantis persileidimas, gresia pavojus vėlyvam persileidimui. Šio metodo naudojimas leidžia pasirinkti teisingą nėštumo valdymo taktiką, atlikti terapinių ir profilaktinių priemonių kompleksą ir sumažinti komplikacijų bei nepageidaujamų nėštumo rezultatų grupę moterų, turinčių didelę persileidimo riziką. 3 ex, 1 stalas

Išradimas susijęs su medicina, būtent su akušerija, ir yra susijęs su taktikos pasirinkimu nėščioms moterims, sergančioms placentos nepakankamumu ir vaisiaus augimo sulėtėjimo sindromu (FGRS). Šiuo tikslu pacientams, kuriems yra fetoplacentinis nepakankamumas ir kraujo serumo IGR, fermentinis imuninis tyrimas naudojamas superoksido dismutazės aktyvumui, placentos augimo faktoriaus, endoglino ir melatonino kiekiui nustatyti. Šiems rodikliams prognozuojamasis koeficientas P apskaičiuojamas pagal formulę: P = (0,0001 * COD + 0,0255 * Mel + 0,1636 * CD105 + ( - 0,0487 * PGF) -8,5389, kur COD yra superoksido dismutazė, pg / ml, Mel - melatoninas, pg / ml, CD 105 - endoglinas, pg / ml, PGF - placentos augimo faktorius, pg / ml. Kai P vertė lygi 0,64 ar daugiau, didelė rizika susirgti kritine vaisiaus būsena prieš gimdymą numatomas laikotarpis, dėl kurio nėštumas turi būti nutrauktas neatidėliotinu cezario pjūviu vaisiaus interesais. Šis metodas leidžia tiksliau prognozuoti kritinę vaisiaus būklę prieš gimdymą, o tai leidžia laiku pasirinkti tinkamą paciento valdymo taktiką.

Šis išradimas susijęs su medicina, būtent su otolaringologija, ir gali būti naudojamas suaugusiųjų ūminio virusinio ir bakterinio tonzilito diferencinei skubiai diagnostikai. Tam paimamas periferinis kraujas ir nustatomas santykinis neutrofilinių granulocitų pogrupių kiekis, tuo pačiu metu ekspresuojantis CD16, CD11b ant paviršiaus membranos. CD16brightCD11bdimNG% pogrupio buvimas nuo 80 iki 99,9%, turintis didelį CD16 ekspresijos tankį ir mažą CD11b ekspresijos tankį, laikomas normaliu. Jei aptinkama 40% ar daugiau CD16brightCD11bbrightNG arba CD16dimCD11bbrightNG pogrupio, nustatoma atitinkamai ūminė virusinė infekcija arba ūminė bakterinė infekcija. Šio metodo naudojimas leidžia užtikrinti ūminio virusinio ir bakterinio tonzilito diferencinės diagnozės tikslumą suaugusiesiems. 3 pvz., 1 stalas

Išradimų grupė yra susijusi su medicina, būtent su laboratorine diagnostika, ir gali būti naudojama vienu metu aptikti sąlyginių taksonominių mikroorganizmų, patogeninių žmonėms ir gyvūnams, atstovų. Jai būdingas bent penkių imunochromatografinių juostelių testų, esančių viename korpuse, naudojimas. Tuo pačiu metu pirmame ir antrame prietaiso korpuso kanaluose atliekami juostelių bandymai, skirti aptikti toksinus, trečiajame - juostelės bandymas vegetatyvinėms bakterijų formoms aptikti, ketvirtame - sporų formos bakterijoms ir penktasis - juostelės testas, skirtas nustatyti viruso ir riketsijos auginimo terpę. Bandymas atliekamas įdedant imunochromatografinės juostos bandinių korpusą į šilumą izoliuojantį ceflen maišelį, sudarytą iš dviejų ceflen sluoksnių, tarp kurių yra šilumą izoliuojanti tarpinė, pagaminta iš poringos šilumą izoliuojančios medžiagos, ir imunochromatografinės juostelės korpusas maišelio viduje yra šildomas pastoviu šilumos šaltiniu, o maišo anga uždaroma mechaniniu spaustuku ir šią akimirką laikykite bandymo pradžia. Taip pat siūlomas imunochromatografinės analizės prietaisas. POVEIKIS: išradimų grupė leidžia padidinti imunochromatografinės analizės produktyvumą, išplėsti imunochromatografinės analizės temperatūros diapazoną nuo minus 20 iki plius 50 ° C, kad rezultato gavimo laikas sutrumpėtų iki 10 minučių, lyginant su analize kambario temperatūroje ( 20 min), jei pasiekiamas tas pats jautrumas, kad padidėtų analizės jautrumas, palyginti su kambario temperatūroje atlikta analize. 2 n. ir 7 p.p. f-kristalai, 5 dwg., 4 tbl., 8 ex.

Šis išradimas susijęs su medicina, būtent su laboratorine diagnostika, ir gali būti naudojamas diagnozuoti paroksizminę naktinę hemoglobinuriją. Norėdami tai padaryti, dažykite tiriamą kraujo mėginį monokloniniais antikūnais CD235a CD59CD71. PNH klono buvimas tarp eritrocitų ir retikulocitų vertinamas pagal apsauginio baltymo CD59 nebuvimą ant retikulocitų membranos, izoliuotos vartų CD235a - visos eritrocitų žymeklio ir CD71 - transferino receptoriaus. Norint įvertinti PNH kloną tarp retikulocitų CD71 + vartuose, surenkama mažiausiai 20 000 įvykių, priklausomai nuo CD71 + vartų, brėžiamas FSC vs SSC grafikas, ant kurio retikulocitai yra išskiriami naudojant papildomus CD71str vartus, taip išvalant retikulocitą gyventojų nuo šiukšlių ir dublių nuoseklaus uždarymo metodu. Esant 100 CD59 teigiamų retikulocitų, vertinamas PNH klono nebuvimas ir diagnozuojama paroksizminės naktinės hemoglobinurijos nebuvimas. Jei aptinkamas pacientas, turintis klinikinių neigiamų CD59 retikulocitų simptomų ir gautų rodiklių vertė yra didesnė nei 1, pateikiama diagnostinė išvada apie PNH klono buvimą ir rekomenduojamas papildomas tyrimas pagal tarptautinį standartizuotą protokolą paroksizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozė. Aptikus neigiamą CD59 retikulocitų kiekį ir gautų rodiklių reikšmę 0,1-1, vertinamas nedidelio PNH klono buvimas ir rekomenduojama po 6 mėnesių iš naujo nustatyti PNH kloną, kad padidėtų jo vertė ir atsirastų paroksizminę naktinę hemoglobinuriją, ir patvirtinus šį klono dydį diagnozuojama subklinikinė paroksizminės naktinės hemoglobinurijos forma be klinikinių požymių. Naudojant daugiaparametrinį CD71 + ląstelių blokavimą, galima į analizę neįtraukti šiukšlių, dubletų ir nespecifiškai susietų monokloninių antikūnų. 1 serga.

Šioje pacientų grupėje nėra šeiminio polinkio į anemiją, nėra įgimtų anomalijų ir naujagimių laikotarpio sutrikimų. Aplastinė anemija gali pasireikšti bet kokio amžiaus vaikams ir suaugusiems, kartais ji gali būti siejama su konkrečia intoksikacija ar infekcija, tačiau dažnai toks ryšys nepastebimas ir tada anemija laikoma „idiopatine“.

Kai kurie vaistai, tokie kaip 6-merkaptopurinas, metotreksatas, ciklofosfaminas ir busulfanas, turi tam tikrą nuspėjamą nuo dozės priklausomą gebėjimą slopinti kaulų čiulpus. Jei ši depresija tęsis, tai sukels kaulų čiulpų aplaziją, kuri paprastai greitai išnyksta nutraukus vaisto vartojimą. Šie vaistai pažeidžia normalias kaulų čiulpų ląsteles tuo pačiu mechanizmu, kuris slopina leukeminių ląstelių augimą. Biocheminiai jų veikimo principai yra gana gerai suprantami. Kaulų čiulpų radiacijos pažeidimas priklauso tai pačiai kategorijai.

Kiti vaistai, tokie kaip akriquinas, chloramfenikolis, fenilbutazonas ir prieštraukuliniai vaistai, vartojami įprastomis terapinėmis dozėmis, labai retiems žmonėms gali sukelti giliųjų kaulų čiulpų aplaziją, ir šios aplazijos negalima numatyti iš anksto. Dažnai tai yra negrįžtama ir apie pusė pacientų miršta. Šiai kategorijai priklauso apsinuodijimas insekticidais, tokiais kaip DDT ir kai kurie organiniai tirpikliai. Dažnai neaišku, ar anemija gali būti susijusi su tam tikru vaistu. Būtina sąlyga tokiems santykiams yra vaistų vartojimas per pastaruosius 6 mėnesius. Geriausiai žinomas ir ištirtas iš jų yra chloramfenikolis. Šis vaistas yra žinomų etiologinių agentų sąrašo viršuje pacientų, sergančių įgyta aplastine anemija, grupės, aprašytos Scott ir kt., Ir tose pačiose sergančių vaikų grupėse Shahidi. Gurmanas 8 metus Sidnėjuje stebėjo 16 atvejų, kai liga, kaip manoma, buvo susijusi su chloramfenikolio vartojimu. Absoliutus mirtinos įgytos aplastinės anemijos dažnis populiacijose, kuriose nebuvo žinoma jokių pavojingų vaistų poveikio ir buvo žinoma įvairių vaistų, įskaitant chloramfenikolį, poveikis.

Gydymas chloramfenikoliu padidina aplastinės anemijos išsivystymo tikimybę 13 kartų, tačiau taip pat akivaizdu, kad šis padidėjimas yra nedidelis. Kitų vaistų rizika yra dar mažesnė. Tačiau Didžiosios Britanijos vaistų saugos komitetas rekomenduoja chloramfenikolį sistemingai vartoti visoms ligoms, išskyrus vidurių šiltinę ir hemofilinio gripo meningitą, tik atlikus kruopščius klinikinius ir dažniausiai laboratorinius tyrimus, rodančius, kad kito antibiotiko nepakaks. Jis niekada neturėtų būti sistemingai naudojamas banaliai infekcijai.

Aplazinės anemijos išsivystymo mechanizmas veikiant chloramfenikoliui yra neaiškus. Aplastinės anemijos atsiradimas nėra susijęs su doze ir gydymo trukme, taip pat negali būti paaiškinamas nepakankamu jautrių asmenų išsiskyrimu. In vitro galima įrodyti nukleorūgščių sintezės slopinimą normaliose kaulų čiulpų ląstelėse, tačiau tik esant tokiai vaisto koncentracijai, kuri viršija naudojamą in vivo. Buvo pasiūlyta, kad nedidelis chloramfenikolio kiekis gali būti suvartotas piene iš karvių, gydytų nuo mastito, ir kad šie nedideli kiekiai gali padidinti kaulų čiulpų jautrumą gydomosioms dozėms. Taip pat buvo pasiūlyta, kad yra neatrasta sąveika su kitais vaistais, kurie, tikėtina, yra nekenksmingi, kai vartojami vieni. Aptariant chloramfenikolio sukeltos pancitopeninės mirtinos aplazijos etiologiją, reikia pažymėti, kad daugumai pacientų, vartojančių šį vaistą, yra visiškai kitoks, grįžtamasis ir nuo dozės priklausomas kaulų čiulpų slopinimas. 10 iš 22 pacientų, vartojusių chloramfenikolį, ankstyvuosiuose kaulų čiulpų eritroblastuose buvo aptikta daug didelių vakuolių, o tai dažnai lydėjo eritrocitų ir retikulocitų skaičiaus sumažėjimas. Šie pokyčiai išnyksta praėjus savaitei po vaisto vartojimo nutraukimo. Jų vystymąsi, matyt, skatina padidėjusios dozės, uždelstas klirensas iš plazmos ir pagreitėjusi eritropoezė. Tos pačios vakuolės gali būti pastebėtos esant fenilalanino ar riboflavino trūkumui.

Kalbant apie kitų vaistų sukeltų aplazijų etiologiją, visada buvo pagunda pasiūlyti imuninių mechanizmų, galbūt vaistų tipo - hapteno, veikimą. Tačiau šie mechanizmai niekada nebuvo įrodyti. Tik vienoje klinikinėje situacijoje, t. Y. Transplantacijos imunitetui nekompetentingų kūdikių reakcijos į transplantatą prieš šeimininką atveju, buvo nustatyta imuninė aplastinės anemijos kilmė. Ryškios anafilaktoidinės reakcijos išsivystymas po atsitiktinio pakartotinio kontakto su DDT jautriame paciente taip pat rodo imuninį mechanizmą. Newwig pasiūlė tris vaistų aplazijos paaiškinimus: a) tiesioginis ir toksiškas poveikis kaulų čiulpų ląstelėms, pavyzdžiui, po lėtinio pramoninio benzeno poveikio; b) tikroji alergija, kurios apraiškos greitai atsiranda po sąlyčio su nedidele doze; c) ilgalaikis kontaktas su didelėmis dozėmis, ty „alergija didelėms dozėms“. Tai yra labiausiai paplitusi forma. Autorius tai pirmiausia paaiškina ląstelių membranų pažeidimais. Taip pat galima manyti, kad yra genetinis polinkis, kaip rodo kraujo diskrazijos atvejis po sąlyčio su chloramfenikoliu identiškiems dvyniams. Neseniai „Lancet“ buvo paskelbti apžvalginiai straipsniai apie Newwigo medicininę aplastinę anemiją.

Panašios problemos kyla dėl ankstesnio virusinės infekcijos aplastinės anemijos vystymosi. Šis reiškinys yra gerai ištirtas sergant infekciniu hepatitu. Aplastinė anemija 5 pacientams nuo 4 iki 19 metų išsivystė praėjus 1-7 savaitėms nuo hepatito pradžios. Aprašyta daug panašių atvejų, įskaitant 3 atvejus Schwartz ir kt. Šie autoriai pažymėjo, kad sergant infekciniu hepatitu dažnai pastebimas laikinas granulocitų, trombocitų ir hemoglobino kiekio sumažėjimas ir kad progresuojantys pokyčiai, sukeliantys kaulų čiulpų aplaziją labai nedaugeliui pacientų, gali būti viso proceso tęsinys. priklauso nuo genetinio polinkio. Čia galite pamatyti analogiją su intoksikacija chloramfenikoliu. Taip pat aprašyta pancitopenija su laikina kaulų čiulpų hipoplazija, susijusi su daugybe infekcijų, kurias sukelia RNR virusai, įskaitant raudonukės ir gripo mikrovirusus, paragripo virusus, kiaulytės ir tymų virusus. Dvi eksperimentinės pelių virusinės infekcijos, ty MVH-3 ir Venesuelos arklių encefalito Trinidadino padermė, sukelia pancitopeniją ir kaulų čiulpų hipoplaziją, o virusą galima skiepyti iš kaulų čiulpų. Kaip ir kitos aplazinės anemijos priežastys, manoma, kad yra autoimuninis procesas.

Maždaug pusei įgytos aplazinės anemijos nėra buvusios rimtos ankstesnės infekcijos ar toksinių medžiagų poveikio. Vilkas paskelbė didelę medžiagą, įskaitant 334 įgytos pancitopenijos atvejus, o 191 atveju, ty 57,2%, anemija buvo pripažinta idiopatine.

Gurmano medžiagoje santykinis pacientų, sergančių idiopatine anemija, skaičius buvo mažesnis, tai yra 28 iš 104, kurie sirgo įgyta aplazija. 5 iš 17 atvejų, pagrįstų Shahidi medžiagomis, ir 5 iš 9 atvejų, pagrįstų Desposito medžiaga, anemija buvo idiopatinė. Dar neaišku, ar šiais atvejais ligas sukėlė nenustatyto viruso infekcija. Bent jau kai kurie idiopatiniai atvejai, atrodo, patenka į specialią grupę, kuri gali būti vadinama ikileukemija arba leukemija aplazinėje fazėje.

Melhornas ir kt. Apibūdina 6 vaikus, kuriems, remiantis tvirtais, neginčijamais įrodymais, buvo diagnozuota aplazinė anemija nuo 1 metų 11 mėnesių iki 6 metų amžiaus, tačiau visi šie vaikai vėliau, po 9 savaičių iki 20 mėnesių, susirgo ūmiomis ligomis. limfoblastinė leukemija ... Šie 6 pacientai turėjo vieną bendrą bruožą - greitesnį nei įprastai terapinį poveikį, palyginti su aplastine anemija, pradinio gydymo kortikosteroidais metu. Gurmanas pažymėjo tą patį, ir mes taip pat pastebėjome šį poveikį vienu atveju, kai ūminė limfoblastinė leukemija išsivystė po 3 mėnesių. Šis greitas pancitopenijos atsakas į gydymą vien kortikosteroidais labai skiriasi nuo įprasto atsako trūkumo kitais aplastinės anemijos atvejais. Reikėtų pažymėti, kad aprašyta panaši aplazinės anemijos leukeminė transformacija, kurią sukelia benzenas ir chloramfenikolis.

Įgytos aplazinės anemijos simptomai

Įgyta aplazinė anemija pasižymi maždaug tais pačiais simptomais ir objektyviais požymiais kaip ir konstitucinė forma, tačiau nėra pigmentacijos, trumpo ūgio ir įgimtų skeleto ar vidaus organų anomalijų. Ligos amžius yra platesnis, išskyrus chloramfenikolio sukeltą aplaziją, kai didžiausias sergamumo „pikas“ yra tarp 3–7 metų. 43% pacientų, sergančių įgyta ligos forma, didelėje medžiagoje „Wolf“, o 67 proc. - didelėje suvestinėje medžiagoje „Gourmet“ anksčiau buvo kontaktavęsis su vaistais ar chemikalais, kartais pakartotinai, dažniausiai per pastaruosius 6 mėnesius. kuri, kaip žinoma, yra polinkis į aplastinę anemiją.

Newmanas ir jo bendraautoriai apibūdino 14 vaikų, sergančių idiopatine pancitopenija, ir pažymėjo, kad, be trijų pagrindinių požymių - anemijos, karščiavimo ir purpuros, yra ir svarbių neigiamų požymių, t. Y. Hepatosplenomegalijos nebuvimas, limfadenopatija, burnos opos ir gelta. Tačiau galima pastebėti burnos gleivinės purpurą ir kraujavimą iš dantenų. Kartais gali būti uždegiminė limfadenopatija, susijusi su vietiniu sepsiu.

Jei vaikui atsiranda raudonas šlapimas, reikia daryti prielaidą, kad išsivysto paroksizminė naktinė hemoglobinurija.

Laboratorinė diagnostika

Periferinio kraujo vaizdas yra maždaug toks pat kaip konstitucinės formos, tačiau neutropenija yra gilesnė, kartais artėja prie agranulocitozės. Be to, yra ryškesnė kaulų čiulpų aplazija, kurią sudaro beveik kai kurios riebalinės sritys, kuriose nėra hemicinių ląstelių. Megaloblastiniai pokyčiai ir kiti „diseritropoezės“ požymiai pastebimi 5–90% eritroidinių pirmtakų, kurie vis dar yra kaulų čiulpuose. Pacientams, kurių chloramfenikolio sukeltas su doze susijęs atvirkštinis kaulų čiulpų slopinimas, kaulų čiulpuose stebimas eritroidinių ir mieloidinių pirmtakų vakuolizavimas, panašus į fenilalanino trūkumą. Vaisiaus hemoglobino kiekis gali būti padidintas tiek pat, kiek ir konstitucinių formų, tačiau ne taip nuolat. Manoma, kad lygis, didesnis nei 400 μg% (arba 5%), rodo geresnę įgytos ligos prognozę, tačiau vėlesnių tame pačiame institute gydytų atvejų analizė nepatvirtino šių išvadų, galbūt dėl ​​kito metodo naudojimo.

Aminacidurija, pastebėta maždaug pusėje konstitucinės formos pacientų, nėra ir kaulų amžius nėra atsilikęs.

Daugiau nei pusė suaugusių pacientų, sergančių šia liga, turi limfopeniją ir hipogamaglobulinemiją, kai IgG kiekis yra nenormalus.

Kartu atliekama hemolizė, įskaitant paroksizminę naktinę hemoglobinuriją... Kai kuriems pacientams, sergantiems aplazine anemija, eritrocitų gyvenimo trukmė sutrumpėja. Tai rodo, kad eritrocitų defektas kartais yra ne tik kiekybinis, bet ir kokybinis. Šiuo atveju galima pastebėti padidėjusį blužnies sekvestraciją. Retikulocitozė, kuri šiuo atveju turėjo būti, paprastai neįtraukiama dėl kaulų čiulpų aplazijos. Kai kuriais atvejais haptoglobino kiekis sumažėja. Viena iš šios ligos hemolizės priežasčių yra neįprastas paroksizminės naktinės hemoglobinurijos (PNH) ir aplastinės anemijos derinio sindromas. Šį sindromą reikia manyti, kai pacientui, sergančiam aplazine anemija, padidėjęs bilirubino kiekis arba atsiranda savaiminė retikulocitozė. Diagnozę patvirtina PNH rūgšties serumo hemolizės (CSH) tyrimas, taip pat hemosiderinurijos tyrimai. Kai kuriais atvejais PNH galima aptikti tik ištyrus jautriausią eritrocitų populiaciją, t. Y. Retikulocitus ir jaunus eritrocitus, gautus pipete kruopščiai pašalinus sluoksnį po leukocitų trombocitų krešuliu, centrifugavus 20–35 ml kraujo esant 500 G temperatūrai.

Paprastai su šiuo sindromu PNH nustatomas aplazinės anemijos fone, dažnai po to, kai eritropoezė tam tikru mastu atsigauna. Kai kuriais atvejais buvo pastebėta atvirkštinė seka, ty PNH fone išsivystė sunkus ar mirtinas kaulų čiulpų nepakankamumas. Lewisas ir Dayesas sistemingai ištyrė visus savo pacientus, sergančius aplazine anemija, ir nustatė, kad 7 iš 46 (15%) turėjo laboratorinius PNH kriterijus. 2 iš jų vėliau sukūrė tipišką APH modelį. Žvelgdami į šią problemą kitu požiūriu, autoriai nustatė, kad bent 15 iš 60 pacientų, sergančių PNH, iš pradžių turėjo aplazijos požymių. PNH paprastai yra suaugusių vyrų liga. Tačiau forma, pasireiškianti aplazijai, atsiranda jaunesniame amžiuje ir gali paveikti vaikus. Gardneris stebėjo 11 tokių pacientų, įskaitant 6–25 metų amžiaus, 2 pacientai buvo 7 ir 9 metų amžiaus. Šie du buvo berniukai. Prieš diagnozuojant PNH, jų aplazinė anemija truko 2 ir 5 metus.

Įdomus šio kombinuoto sindromo bruožas yra tas, kad aplastinė anemija gali būti Fanconi tipo, ji gali būti įgyta po sąlyčio su chloramfenikoliu, raminamaisiais preparatais, insekticidais, herbicidais ir kitomis medžiagomis, taip pat gali būti idiopatinė. Lewisas ir Dayesas mano, kad pagrindinis ryšys egzistuoja tarp kaulų čiulpų aplazijos ir PNH, o ne tarp etiologinių veiksnių, dėl kurių buvo pažeisti kaulų čiulpai ir PNH. Abu šie autoriai, taip pat Gardneris ir Bloomas teigia, kad aplazijos laikotarpiu įvyksta somatinė kaulų čiulpų kamieninių ląstelių mutacija, dėl kurios atsiranda antrinis PNH būdingų patologinių eritrocitų klonas, kuris pradeda gaminti. vėlesnio kaulų čiulpų regeneracijos metu. Reikėtų pridurti, kad nors būdingas PNH defektas yra sutelktas eritrocituose, granulocitai taip pat pasikeičia. „Odos lango“ metodas rodo jų fagocitinio aktyvumo ir šarminės fosfatazės aktyvumo sumažėjimą. Priešingai, esant nesudėtingai aplastinei anemijai, šarminės fosfatazės aktyvumas granulocituose paprastai padidėja.

Gydymas

Gydymas iš esmės yra toks pat kaip ir konstitucinės aplastinės anemijos atveju, tačiau būtina įsitikinti, kad bet koks kontaktas su vaistu ar toksiniu agentu, jei žinomas, yra nutrauktas. Pakartotinis poveikis gali sukelti mirtiną recidyvą pacientams, kurie patyrė pirmą aplazijos priepuolį, ir netgi gali išprovokuoti mirtiną anafilaksinį šoką.

Pagalbinės priemonės taip pat apima kraujo perpylimą, tuo tarpu anemija yra pakankamai gili, kad sukeltų simptomus, paprastai esant 4–6 g%hemoglobino kiekiui. Eritrocitų masė naudojama ne tik akivaizdžiam kraujavimui gydyti, ir būtina stengtis lygį padidinti iki 8-9 g%. Didesnis hemoglobino kiekis lemia ryškesnį eritropoezės slopinimą. Trombocitopeninis kraujavimas gydomas greitai infuzuojant trombocitų turinčią plazmą arba trombocitų koncentratus (4 V / m2). Reikia vengti injekcijos į raumenis. Atliekant visas procedūras, būtina griežtai laikytis aseptikos ir energingai gydyti infekcijas baktericidiniais antibiotikais. Kadangi neutropenija dažniausiai būna ypač gili įgytose aplazinės anemijos formose, neutropenijos fazėje galite naudoti specialų neutropeninį režimą: skalauti burnos ertmę 0,1% gibitan tirpalu 4 kartus per dieną po valgio (pagamintas iš gryno antiseptiko be ploviklių ir dažikliai); šnervių sutepimas naseptino tepalu 3 kartus per dieną; kasdieninė vonia. Dantenų sutepimas 1% gibitanijos dantų geliu 2 kartus per dieną (užuot valantis dantis). Kai pacientai yra ligoninėje, tam tikra izoliacija su atvirkštiniu barjeru reikalinga tam, kad būtų sumažinta ligoninės mikrofloros užteršimo rizika. Profilaktinė sisteminė antibiotikų terapija turėtų būti visiškai atmesta, nes padidėja polinkis į grybelines ir antibiotikams atsparias infekcijas. Infekcijos pradžia gali pasireikšti kaip padidėjęs polinkis į kraujavimą. Užsikrėtus, ne tik sumažėja trombocitų skaičius, bet ir padidėja hemoraginė tendencija, esant tam tikram trombocitų skaičiui.

Androgenai... Specifinė terapija su androgenais ir kortikosteroidais atliekama taip pat, kaip ir konstitucinių formų atveju, t. Y. Oksimetalono per burną - 4-5 mg / kg per parą + 5 mg prednizolono 2 kartus per dieną vaikams, sveriantiems iki 20 kg, 5 mg 3 kartus per parą. per dieną su kūno svoriu nuo 20 iki 40 kg ir 4 kartus per dieną, kai kūno svoris didesnis nei 40 kg. Skirtumas tas, kad esant įgytoms anemijos formoms, poveikis pasiekiamas mažesnei pacientų daliai, atsakas į gydymą yra lėtesnis, tačiau remisija pacientams, kurie reaguoja į gydymą, tęsiasi nutraukus androgenų ir kortikosteroidų vartojimą. Esant Fanconi anemijai, nutraukus gydymą, kaulų čiulpų nepakankamumas greitai atsinaujina. Buvo net nurodyta, kad ši aplinkybė gali būti panaudota sunkiais atvejais, kai įgyta forma skiriasi nuo konstitucinės.

Pirmieji gydymo androgenais ir steroidais rezultatai buvo labai įspūdingi. Iš 17 vaikų, sergančių įgyta aplastine anemija (12 toksiškų, 5-idiopatinių), 10 sirgo nuolatine retikulocitoze, kuri pasiekė didžiausią 5–15% po 1–7 mėnesių kombinuoto gydymo androgenais ir kortikosteroidais. Iš šių vaikų išgyveno 9, vėliau jų hemoglobino kiekis padidėjo. Trims vaikams pasireiškė laikina retikulocitozė be kitų reakcijų. Šių pacientų neatitikimas tarp retikulocitozės pradžios laiko ir hemoglobino padidėjimo buvo paaiškintas hemolize. Be to, eritrocitai, kurie susidaro ankstyvosiose kaulų čiulpų regeneracijos stadijose, yra hipochrominiai esant normaliam geležies kiekiui serume ir padidėjusiam laisvojo protoporfirino kiekiui eritrocituose, o tai rodo ląstelių hemoglobino sintezės blokavimą. Didžiausias hemoglobino kiekio padidėjimas buvo pastebėtas praėjus 2-15 mėnesių nuo gydymo androgenais pradžios. Tiriant kaulų čiulpų dinamiką ankstyvame gydymo etape, buvo nustatytos tinklinių ląstelių grupės, kurios subręsta ir virsta eritroidiniais židiniais tiems pacientams, kuriems vėliau atsiranda atsakas į gydymą. Visiems pacientams, kuriems padidėjo hemoglobino kiekis, taip pat buvo pastebėtas padidėjęs segmentinių ląstelių skaičius iki daugiau kaip 1500 1 μl, tačiau trombocitų reakcija buvo mažiau ryški ir jie pasiekė tik 25 000–90 000 1 μl. Paprastai segmentinių neutrofilų skaičius padidėjo lėčiau nei hemoglobino lygis, o trombocitų skaičius padidėjo dar lėčiau. Bendra šių pacientų gydymo androgenais trukmė svyravo nuo 2 iki 15 mėnesių; nutraukus gydymą, remisija išliko neribotą laiką. 2 pacientai, teigiamai reagavę į gydymą, turėjo idiopatinę aplaziją, 8 - toksiški. Tarp pacientų, kurie neatsakė, 3 sirgo idiopatine, 4 - toksiška aplazijos forma. Autoriai pasiūlė, kad ilgalaikis gydymas didelėmis kortikosteroidų dozėmis gali pakenkti kaulų čiulpų funkcijai, padidindamas riebalinio audinio kiekį kaulų čiulpuose.

Desposito ir kt. Gavo panašius rezultatus naudojant androgenus + steroidus. 5 iš 9 vaikų, sergančių įgyta aplastine anemija, pasireiškė ryškus hematologinis pagerėjimas, kuris pasirodė esąs stabilus. 2 vaikai turėjo idiopatinę ir 3 - toksišką formą. (Iš pacientų, kurie į gydymą nereagavo, 3 sirgo idiopatine ir 1 toksine anemija.) Buvo pastebėti panašūs laiko santykiai. Trombocitų skaičius žymiai padidėjo tik praėjus 9–17 mėnesių nuo gydymo pradžios, ir net tada jis pasiekė tik 50 000 vienam pacientui ir 100 000 1 μl 2 pacientams, tuo tarpu hemoglobinas ir ląstelių segmentai buvo normalūs. Po 7-11 mėnesių gydymas buvo nutrauktas; 4 iš 5 pacientų hemoglobino kiekis laikinai sumažėjo 1–3 mėnesiais. Pacientai buvo stebimi nuo 1 iki 3 metų. Per tą laiką jie neturėjo recidyvų.

Remiantis šiomis dviem ataskaitomis, teigiama reakcija buvo pastebėta kiek daugiau nei pusei vaikų, o gydymas buvo veiksmingas tiek idiopatinės, tiek toksiškos aplazinės anemijos formų atveju. Tarp pacientų, sergančių toksiškomis formomis, reakcijų dažnis buvo galbūt šiek tiek didesnis.

Iki paskutinio šių straipsnių pasirodymo atrodė, kad pacientai retai išgyvena be gydymo androgenais. Paskutinėse dviejose ataskaitose pastebėtas geresnis išgyvenamumas siejamas su simptominio gydymo, įskaitant antibiotikus ir trombocitų perpylimą, pažanga. Visų pirma Hein ir kt. Medžiaga atskleidžia natūralią ligos eigą ir, matyt, užpildo spragą tarp pacientų, gydytų androgenais ir be androgenų (30 iš 33 pacientų anemijos etiologija buvo toksiška, o ne idiopatinė, o tai gali paaiškinti palankesnę prognozę). „Gourmet“, apžvelgęs 104 sergančius vaikus, kuriems buvo įgyta aplastinė anemija iš Bostono ir Sidnėjaus, nurodė, kad bendras išgyvenamumas buvo 34% gydant kombinuotu androgenų ir kortikosteroidų vartojimu ir 19% gydant vien tik kortikosteroidais arba palaikomuoju gydymu.

Naujausiose ataskaitose, įskaitant tos pačios Bostono vaikų ligoninės rezultatus, duomenys yra mažiau patenkinami. Mirtingumas buvo 70–80%, nepaisant androgenų, kortikosteroidų ir palaikomojo gydymo. Išgyvenimo kreivė yra dvifazė. Daugelis pacientų anksti miršta nuo infekcijų ir kraujavimo per pirmuosius 6 mėnesius. Šiuo metu abejojama androgenų veiksmingumu pacientams, sergantiems sunkia įgyta aplazija.

Prognoziniai požymiai... Remiantis Gurmano darbu, aplastinės anemijos prognozė po infekcijų, ypač infekcinio hepatito, arba po vieno trumpo chloramfenikolio kurso yra blogesnė. Prognozė yra geresnė idiopatiniais atvejais, taip pat pacientams, sergantiems anemija, o tai galima paaiškinti vartojant prieštraukulinius vaistus arba kartojant chloramfenikolio kursus. Buvo daroma prielaida, kad vaiko, kuriam po vieno trumpo kurso išsivystė aplastinė anemija, kaulų čiulpai dažnai būna labiau prislėgti nei vaiko, kurio pancitopeniją sukelia tik pakartotiniai vaistų kursai. Yra žinoma, kad vaikams, kuriems yra ūminis kaulų čiulpų hipoceliuliarumas, ypač sunkią prognozę rodo limfocitų skaičius kaulų čiulpuose, daugiau kaip 85%, neutrofilų skaičius mažesnis nei 200 1 μl arba trombocitų mažiau nei 20 000 1 μl. Remdamiesi šiais duomenimis, Gamitt ir kt. Pasiūlė, kad sunki aplazija po hepatito turėtų būti laikoma ankstyvos kaulų čiulpų transplantacijos indikacija, nes tik apie 10% tokio pobūdžio pacientų išgyvena taikant palaikomąjį gydymą + + androgenų ir steroidų.

Kaulų čiulpų transplantacija ... Dėl nepakankamo androgenų gydymo sunkioms įgytoms aplastinėms anemijoms mokslininkai kreipėsi į kaulų čiulpų transplantacijos perspektyvą. Po identiškų dvynių kaulų čiulpų infuzijos į veną, 5 iš 10 atvejų kaulų čiulpų funkcija greitai atsistatė. Jei donorų identiškų dvynių pavidalu nėra, rimta kliūtis yra galimas transplantato atmetimas arba, jei jis įsišaknija, reakcija į transplantatą prieš šeimininką. Tačiau tarp normalių brolių ir seserų yra viena iš keturių tikimybių, kad bus rastas histologiškai suderinamas donoras, suderintas su HL-A tipavimu ir mišria limfocitų kultūra, siekiant nustatyti likusius histokompatibilumo lokusus. Šios atsargumo priemonės sumažina transplantato nesuderinamumo problemą, tačiau jos visiškai neišsprendžia. Siekiant sumažinti arba atmesti atmetimo galimybę, reikia papildomo imunosupresinio gydymo, pavyzdžiui, didelės ciklofosfamido dozės prieš kaulų čiulpų transplantaciją ir metotreksato kursas po transplantacijos. Prieš taikant šią korekcinę priemonę, turėtų būti atliekama didžiulė palaikomoji priežiūra, įskaitant paciento slaugą sterilioje aplinkoje, leukocitų ir trombocitų perpylimą kritinėmis pirmosiomis dienomis ir didelę patirtį turinčią medicinos komandą. Thomas ir kt. Aprašo kaulų čiulpų surinkimo, apdorojimo ir infuzijos techniką. 24 pacientai (įskaitant 8 jaunesnius nei 14 metų amžiaus), kuriems buvo sunki aplastinė anemija (14 idiopatinės anemijos atvejų, 4 anemijos atvejai po hepatito, 4 - vaistų sukeltas, 1 - PNH, 1 - Fanconi anemija), kurie nereagavo į įprastą gydymas buvo persodintas iš brolių ir seserų, identiškų HL-A. 21 pacientui buvo pastebėtas greitas kaulų čiulpų atsinaujinimas, kuris daugeliu atvejų, kaip nustatyta naudojant genetinius žymenis, atsirado dėl donoro ląstelių. 4 pacientams transplantatas buvo atmestas ir jie mirė. Keturi pacientai mirė nuo antrinės ligos, 11 žmonių gyvena su veikiančiomis transplantacijomis. Stebėjimo laikotarpis buvo nuo 141 iki 823 dienų. Dešimt pacientų grįžo į įprastą aktyvų gyvenimo būdą. Šie rezultatai, kuriuos gavo Sietle įsikūrusi tyrėjų komanda, paskatino kitus naudoti šį metodą. Fig. 25 parodytas pirmosios transplantacijos JK rezultatas, atliktas Karališkosios Marsdeno ligoninės kaulų čiulpų persodinimo komandos. Gali būti, kad būtent taip ir toliau bus gydomas pavieniai pacientai, turintys prastų prognozės požymių, kai jie pirmą kartą kreipiasi pagalbos.

Skirtingi gydymo būdai... Splenektomija skiriama pacientams, kurie nereaguoja į kitą gydymą kaulų čiulpų ląstelėmis. Tačiau tariamas šios operacijos poveikis nebuvo patvirtintas analizuojant didelę atvejų grupę, ir kadangi šiems pacientams, sergantiems trombocitopenija, splenektomija yra gana pavojinga, tai paprastai nerekomenduojama. Galima išimtis yra pacientai, kuriems yra hemolizės elementas ir kuriems nustatytas blužnies eritrocitų sekvestracija. Nustatyta, kad splenektomija padidina trombocitų gyvenimo trukmę pacientams, sergantiems aplazija, kuriems nebepadeda trombocitų perpylimas.

Dėl aplastinės anemijos buvo pasiūlytas intraveninis fitohemaggliutininas, tačiau iki šiol surinkti duomenys nepatvirtina šio metodo įgyvendinimo hipotezės. Gydymas geležimi yra draudžiamas, kaip ir gydymas kobaltu, kuris sukelia pykinimą, vėmimą ir padidėjusią skydliaukę. Folio rūgštis ir vitaminas B12 yra neveiksmingi net pacientams, turintiems megaloblastinių pokyčių.

Žurnalas moterims www.

Medžiaga pateikiama iš RUDN universiteto vadovėlio

Anemija. Klinika, diagnostika ir gydymas / Stuklovas N.I., Alpidovskis V.K., Ogurtsovas P.P. - M.: LLC „Medicinos informacijos agentūra“, 2013. - 264 psl.

Kopijuoti ir dauginti medžiagą nenurodant autorių yra draudžiama ir baudžiama įstatymais.

Paroksizminė naktinė hemoglobinurija (PNH) yra įgyta kloninė hemolizinė anemija, susijusi su kraujo ląstelių membranos defektu; todėl ši liga laikoma membranopatijų grupe ir yra vienintelė įgyta membranopatija tarp šios grupės ligų. Mutacija, sukelianti PNH membranos defektą, atsiranda pluripotentinių kamieninių ląstelių lygyje, o mutacijos priežastis lieka neaiški.

PNH pasireiškia 1: 500 000 gyventojų. Visų amžiaus grupių žmonės serga, bet dažniau - sulaukę 30 - 40 metų. Vyrai ir moterys serga vienodai dažnai.

Etiologija ir patogenezė

Genų taškų mutacija PIGA dėl pluripotentinės kamieninės ląstelės (PSC) 22 arba X chromosomos sutrinka fosfatidilinolino rūgšties ir baltymų susidarymas kraujo ląstelių paviršiuje CD 55 ir CD 59, formuojanti sistemą normaliose ląstelėse, kuri blokuoja žalingą poveikį aktyvuoto komplemento membranai dėl kaskados susidarymo CD 5 b –9 - kompleksas, proteolitiškai veikiantis ląstelės membraną.

Taigi, kraujo ląstelių paviršiuje nėra veiksnių, trukdančių komplemento funkcijai, ir dėl to sutrinka eritrocitų, neutrofilų ir trombocitų defektai.

Sergant PNH, pacientų kraujyje yra du klonai: normalus ir patologinis, o klinikinis vaizdas ir ligos eigos sunkumas labai priklauso nuo šių klonų santykio.

Klinika

Aktyvuoto komplemento proteolitinis poveikis sukelia defektų turinčių eritrocitų intravaskulinį sunaikinimą, kuris pasireiškia hemoglobinurija... Komplemento aktyvacija įvyksta naktį miego metu dėl pH poslinkio į rūgštinę pusę.

Kliniškai hemolizė miego metu pasireiškia juodo šlapimo išsiskyrimu ryto šlapimo metu, skundais dėl negalavimo, galvos svaigimo ir geltonos skleros. Be to, hemolizė gali išprovokuoti infekcines ligas ir kai kuriuos vaistus.

Be anemijos simptomų, susijusių su hemolize, klinikinėje praktikoje PNH atlieka svarbų vaidmenį. trombozės komplikacijos sukelia tromboplastino ir daugelio aktyvių fermentų išsiskyrimas iš sunaikintų ląstelių.

Dažnai vienas iš pirmųjų paciento skundų yra pilvo skausmas, imituojantis įvairias ūmines pilvo patologijas. Pilvo skausmas yra susijęs su mažų mezenterinių arterijų tromboze.

Tromboflebitaspasireiškia 12% pacientų, sergančių PNH, ir gali pasireikšti įvairiais būdais. Vienu iš variantų pacientų, esančių ne krizėse, būklė yra gana patenkinama, turinys Hb - apie 80-90 g / l. Kitiems pacientams sunkios hemolizinės krizės seka viena po kitos ir sukelia sunkią anemiją. Dažnai juos lydi trombozės komplikacijos.

Laboratoriniai duomenys

Hemolizinės krizės metu galima pastebėti staigų hemoglobino lygio sumažėjimą iki 20 g / l ir žemiau, lygiagrečiai sumažėjusį eritrocitų skaičių. Remisijos laikotarpiu turinys Hb ir eritrocitų padaugėja, tačiau retais atvejais pasiekia apatinę normos ribą.Skirtingai nuo daugumos membranopatijų, PNH eritrocitų membranos defektas nėra lydimas būdingų patologinių eritrocitų formos pokyčių. Anemija daugeliu atvejų yra normocitinė ir normochrominė. Tačiau labai sumažėjus geležies kiekiui šlapime (dėl hemoglobinurijos ir hemosiderinurijos) išsivysto eritrocitų hipochromija. Retikulocitų kiekis yra padidėjęs, tačiau daug mažesnis nei įgimtų membranopatijų, kurių hemolizės intensyvumas yra panašus. Nenormalių hemoglobinų ir sumažėjusio fermentų aktyvumo (išskyrus acetilcholinesterazę) eritrocituose su PNH nerasta. Eritrocitų atsparumas osmosui nesikeičia. Inkubuojant eritrocitus pacientams, sergantiems PNH steriliomis sąlygomis, pastebima didesnė nei įprasta autohemolizė, kuri, tačiau pridėjus gliukozės, nemažėja.

Daugeliu atvejų leukocitų skaičius sumažėja dėl neutropenijos. Kartais leukogramoje yra poslinkis į kairę.

Trombocitų skaičius taip pat paprastai yra mažas. Trombocitų funkcija nėra sutrikusi.

Ištyrus kaulų čiulpus, nustatoma eritroidinė hiperplazija ir kaulų čiulpų kraujodaros nepakankamumo požymiai, pasireiškiantys sutrikusiu raudonųjų ląstelių ir granulocitinių elementų brendimu, taip pat sumažėjęs megakariocitų skaičius, dažnai sutrikus trombocitų raiščiams. Kai kuriems pacientams, sergantiems PNH, kartu su disgematopoezės požymiais, nustatoma kaulų čiulpų hipoplazija, būdinga aplazinei anemijai.

Tais atvejais, kai komplementui jautrūs PNH eritrocitai ir intravaskulinės hemolizės simptomai aptinkami pacientams, kuriems anksčiau buvo nustatyta kraujodaros aplazija, diagnozuojamas PNH sindromas, išsivystęs dėl aplazinės anemijos.

Tačiau reikia prisiminti apie retus PNH atvejus, kurie baigiasi aplastine anemija dėl kaulų čiulpų kraujodaros išeikvojimo sunkiomis hemolizinėmis krizėmis ir kitokio nepageidaujamo poveikio (infekcijos, kai kurie vaistiniai preparatai ir kt.).

Svarbus laboratorinis PNH požymis yra hemoglobinurija. Laisvojo hemoglobino kiekis plazmoje dėl eritrocitų sunaikinimo intravaskuliniu būdu PNH, priklausomai nuo hemolizės sunkumo, svyruoja nuo 11 iki 280 mg% (iki 4 mg%).

Bilirubino kiekis paprastai šiek tiek padidėja, daugiausia dėl nekonjuguotos frakcijos. Geležies kiekis serume PNH priklauso nuo ligos fazės: esant hemolizinėms krizėms dėl hemoglobino išsiskyrimo į plazmą, stebima feritinemija, o ramios eigos metu dėl geležies netekimo šlapime - hipoferritinemija. . Geležies trūkumas PNH, priešingai nei geležies stokos anemija, lydi tuo pačiu metu sumažėjusį bendrą ir latentinį geležies surišimo pajėgumą, matyt, dėl transferino sintezės kepenyse pažeidimo.

Tiriant šlapimą daugumai pacientų, sergančių PNH, nustatyta hemoglobinurija. Esant PNH, hemoglobinas šlapime atsiranda esant palyginti mažai koncentracijai plazmoje, o tai susiję su haptoglobino kiekio sumažėjimu plazmoje. Kai inkstai išskiria hemoglobiną, dalis jo reabsorbuojama ir nusėda kanalėlių epitelyje hemosiderino pavidalu, kuris vėliau išsiskiria su šlapimu. Įdomu tai, kad PNH hemosiderinuriją galima aptikti dažniau nei hemoglobinuriją, nes ji taip pat vystosi už hemolizinės krizės ribų.

Diagnostikaliga yra susijusi su būdingo klinikinio vaizdo nustatymu, laboratoriniais intravaskulinės hemolizės požymiais (hemoglobinemija (raudona kraujo serumo spalva po centrifugavimo), haptoglobino kiekio kraujyje sumažėjimu, nežymia netiesiogine bilirubinemija, LDH padidėjimu, hemoglobinurija, hemosiderinurija). PNH diagnozė pagrįsta šiai ligai būdingų komplementui jautrių eritrocitų aptikimu. Šiuo tikslu naudojami Hemo rūgšties tyrimas ir jautresni sacharozės testas.

Atliekant Hem testą, tiriami eritrocitai inkubuojami normaliame serume, parūgštintame iki pH 6,4. Esant tokioms sąlygoms, lizuojami tik komplementui jautrūs eritrocitai. Reikėtų prisiminti, kad esant mažam PNH eritrocitų kiekiui paciento kraujyje ir mažam komplemento aktyvumui serume, Hem testas gali duoti neigiamų rezultatų.

Jautresnis yra sacharozės tyrimas, kurio metu tiriami eritrocitai ir nedidelis kiekis normalaus serumo dedami į izotoninį sacharozės tirpalą. Esant sumažėjusiai įtampai sacharozės terpėje, aktyvesnis komplemento fiksavimas ant eritrocitų paviršiaus ir komplementui jautrių PNH eritrocitų lizė.

PNH klono buvimo įrodymas yra požymių, būdingų PIG A geno pažeidimui, aptikimas ląstelės membranoje. Šiuolaikiniai srauto citofluorometrijos metodai leidžia nustatyti eritrocitų buvimą, esant visiškam ar daliniam CD59 molekulių trūkumui tačiau ant membranos ne visada galima aptikti patologinius eritrocitus, atsižvelgiant į jų ryškią hemolizę. Patikimiausias yra monocitų granulocitų tyrimas, nes branduolinės ląstelės yra mažiau jautrios komplemento veikimui.

Gydymas

Kadangi nėra aiškaus PNH patogenezės supratimo, šios ligos gydymas šiuo metu yra simptominis.

Siekiant kovoti su anemija, naudojami pakaitiniai kraujo perpylimai, kurių dažnis priklauso nuo hemolizės sunkumo ir kaulų čiulpų kompensacinio aktyvumo. Reikėtų prisiminti, kad šviežio viso kraujo perpylimas PNH sergantiems pacientams dažnai lydimas padidėjusios hemolizės. Šios reakcijos priežastis neaiški. Pacientai, sergantys PNH, geriau toleruoja viso kraujo ar eritrocitų masės perpylimą ilgą laiką (ilgiau nei 7–8 dienas) ir 3–5 kartus nuplautų eritrocitų, išlaisvintų iš leukocitų ir trombocitų, perpylimą. Išplautų eritrocitų naudojimas yra geriausias kraujo perpylimo būdas gydant PNH. Kai dėl izosensibilizacijos išsivysto reakcija į nuplautus eritrocitus, netiesioginė Kumbso reakcija reikalauja individualaus donoro pasirinkimo (12 pav.).

Svarbią vietą gydant PNH užima geležies preparatai ir androgeniniai hormonai... Geležies terapija rekomenduojama pacientams, sergantiems PNH, kai ramios ligos eigos metu nustatoma eritrocitų hipochromija ir sumažėjęs geležies kiekis serume. Geležies preparatus reikia vartoti atsargiai (tik mažomis dozėmis ir tik peros ), nes jų gebėjimas kai kuriems PNH sergantiems pacientams sukelti sunkias hemolizines krizes yra žinomas.

Androgenų naudojimas PNH yra pagrįstas šių hormonų stimuliuojančiu poveikiu eritropoezei. Nerabol ar jo analogų paskyrimas 30-40 mg per parą doze skatina greitesnį hemoglobino lygio atsigavimą po hemolizinio epizodo ir taip žymiai sumažina kraujo perpylimo poreikį. Androgenų vartojimas ypač efektyvus sergant PNH sergant kraujodaros hipoplazija.

Trombozinių komplikacijų gydymo taktika priklauso nuo trombozės lokalizacijos, jų trukmės ir krešėjimo sistemos būklės. Tais atvejais, kai ši komplikacija kelia grėsmę paciento gyvybei, būtina naudoti sudėtingą trombolizinį ir antikoaguliantinį gydymą (fibrinoliziną arba urokinazę, nikotino rūgštį, hepariną ir netiesioginius antikoaguliantus), laikantis bendrųjų terapinių taisyklių ir pakankamų dozių.

Kadangi yra pranešimų apie padidėjusią hemolizę po heparino vartojimo, šį antikoaguliantą reikia vartoti labai atsargiai.

PNH splenektomija nėra nurodyta, nes pooperacinį laikotarpį dažnai apsunkina mezenterinių kraujagyslių trombozė. Operacijos rizika leidžiama tik esant sunkiems hipersplenizmo simptomams: giliai leukopenijai, kurią komplikuoja dažnos infekcijos ir (arba) trombocitopenija, kartu su sunkiu hemoraginiu sindromu.

Sukurtas modernus genų technologinis vaistas Eculizumab (Soliris, SOLIRIS®), kurį FDA (Maisto ir vaistų administracija) yra įregistravusi gydyti vaikus ir suaugusiuosius, sergančius PNH. Ekulizumabas yra glikozilintas humanizuotas monokloninis antikūnas, kappa imunoglobulinas (IgG2 / 4k), kuris jungiasi prie žmogaus komplemento baltymo C5 ir slopina komplemento sukelto ląstelių lizės aktyvavimą. Antikūną sudaro pastovios žmogaus imunoglobulino sritys ir papildomos deterministinės pelės imunoglobulino sritys, įterptos į įvairias žmogaus antikūno lengvųjų ir sunkiųjų grandinių sritis. Ekulizumabo sudėtyje yra dvi sunkios grandinės, kurių kiekvienoje yra 448 aminorūgštys, ir dvi lengvos grandinės, kurių kiekvienoje yra 214 aminorūgščių. Molekulinė masė yra 147870 Da. Ekulizumabas gaminamas pelių mielomos NS0 ląstelių kultūroje ir išgryninamas afiniteto ir jonų mainų chromatografijos būdu. Į medžiagos gamybos procesą taip pat įtraukiami specifiniai virusų inaktyvavimo ir pašalinimo procesai.

Ekulizumabas slopina galutinį žmogaus komplemento aktyvumą ir turi didelį afinitetą jo C5 komponentui. Dėl to visiškai blokuojamas C5 komponento skilimas į C5a ir C5b ir galinio komplemento C5b-9 susidarymas. Taigi, ekulizumabas atkuria kraujo komplemento aktyvumo reguliavimą ir apsaugo nuo intravaskulinės hemolizės pacientams, sergantiems PNH. Kita vertus, galutinio komplemento trūkumą lydi padidėjęs užsikrėtusių užsikrėtusių mikroorganizmų, daugiausia meningokokinės infekcijos, dažnis. Tuo pačiu metu ekulizumabas palaiko ankstyvųjų komplemento aktyvinimo produktų, būtinų mikroorganizmams opsonizuoti ir imuniniams kompleksams pašalinti, turinį. Skiriant Soliris pacientams, greitas ir stabilus galutinio komplemento aktyvumo sumažėjimas. Daugumos PNH pacientų ekulizumabo koncentracija kraujo plazmoje yra apie 35 μg / ml, kad visiškai slopintų intravaskulinę hemolizę, kurią sukelia galutinio komplemento aktyvacija.

Dėl unikalių naujų klinikinių rezultatų ir gydytojams atsivėrusių terapinių galimybių išsaugoti visavertį pacientų gyvenimą ir sveikatą, ekulizumabas buvo registruotas pagreitinta tvarka, neatliekant trečiojo klinikinių tyrimų etapo - tai išgelbės daug gyvybių, tiek vaikų, tiek suaugusiųjų.

Šiuo atžvilgiu po registracijos JAV Europos vaistų komitetas pateikė teigiamą nuomonę dėl pagreitintos ekulizumabo registracijos Europoje, kurios taip pat tikimasi artimiausiu metu.

Atsižvelgiant į dideles ekulizumabo išlaidas, tai, kad jo negalima paveikti ligos priežasties, ir į tai, kad jis turi būti naudojamas visą gyvenimą, rezervo strategija sukurta specialiai pacientams, turintiems daug PNH ląstelių, arba pacientams, kuriems yra jai labiausiai tinka polinkis į trombozę.priklausomai nuo APG klono dydžio.

Šiuo metu vienintelis radikalus PNH gydymo būdas yra alogeninė kaulų čiulpų transplantacija.

Eiga ir prognozė

Prognozė priklauso nuo pagrindinės ligos sunkumo, blogesnė pacientams, priklausomiems nuo kraujo perpylimo, sergantiems sunkia tromboze. 10% pacientų pastebima savaiminė ligos remisija, kitiems - virsta aplastine anemija, MDS, o 5% - ūmine leukemija. Vidutinė gyvenimo trukmė yra 10-15 metų.

PNH yra lėtinė ir šiuo metu visiškai nepagydoma liga. PNH sunkumas ir prognozė labai priklauso nuo komplementui jautrios eritrocitų populiacijos dydžio, kompensacinio kaulų čiulpų pajėgumo ir komplikacijų, ypač venų trombozės, atsiradimo. Sunkios PNH prognozės koncepcija pastaruoju metu labai pasikeitė dėl aktyvios simptominės terapijos.

Padidėjo pacientų, kurie ilgą laiką buvo klinikinės ir hematologinės kompensacijos būsenoje ir šiuo metu vadovaujasi įprastu gyvenimo būdu, skaičius. Sumažėjo sunkios, gyvybei pavojingos trombozės dažnis. Kai kuriems pacientams laikui bėgant ligos eiga suminkštėja, sumažėja komplementui jautrių eritrocitų dalis. Retais atvejais aprašomas visiškas patologinių eritrocitų išnykimas, o tai rodo esminę ligos išgydymo galimybę.

Patologijos esmė yra kraujo ląstelių (daugiausia eritrocitų) struktūros pokyčiai, dėl kurių ankstyvas jų membranos sunaikinimas ir intravaskulinis irimas (hemolizė).

Paplitimas yra apie 16 atvejų milijonui gyventojų, o metinis dažnis - 1,3 milijono žmonių. 20–40 metų žmonės dažniau serga, priklausomybės nuo lyties nenustatyta.

Pavadinimas apima italų mokslininkų ir gydytojų, kurie daugelį metų mokėsi, vardus: Markiafava-Mikeli liga, Strubing-Markiafava liga.

Kas yra „hemoglobinurija“, kaip ji atsiranda?

Hemoglobinurija yra įvairių ligų, sukeliančių raudonųjų kraujo kūnelių suskaidymą dėl jų poveikio membranai, simptomas, o hemoglobinas palieka ląsteles ir patenka į plazmą.

Sveikas žmogus gali turėti ne daugiau kaip 5% viso kraujo plazmos tūrio. Padidėjęs 20–25% hemoglobino kiekis pastebimas esant įgimtiems sutrikimams ar hemoglobinopatijoms (β-talasemija, raudonųjų kraujo ląstelių sunaikinimas sergant pjautuvine anemija).

Hemoglobinurijos priežastys gali būti:

• ūminė infekcinė liga (gripas);
• plaučių uždegimas;
• trauma;
• apsinuodijimas apsinuodijimu anilino dažais, karbolio rūgštimi, bertoleto druska;
• staiga hipotermija;
• stiprus ir ilgalaikis fizinis stresas;
• kraujo ligos;
• kraujo perpylimas;
• platus nudegimas;
• nustatytas PIG-A geno mutacijos vaidmuo.

Anilino dažai yra plačiai naudojami tekstilės pramonėje, batikos dekoravimui, sauso valymo ir dažymo paslaugoms, o dirbant su jais reikia kruopščiai

Nėra hemoglobinurijos be aukšto hemoglobino kiekio kraujyje (hemoglobinemija). Prieš rytinį paroksizmą sieja fiziologinis rūgščių ir šarmų pusiausvyros poslinkis link acidozės naktį. Padidėjęs skilimo produktų kiekis dar labiau prisideda prie organizmo rūgštėjimo, padidėjusio kraujo ląstelių skilimo.

Sutrikimų patogenezė

Pagrindiniai paroksizminės naktinės hemoglobinurijos pokyčiai atsiranda komplemento lygiu. Tai biocheminių reakcijų grandinė, suteikianti įgimtą imunitetą.

Veiklioji medžiaga yra suformuotas membranos atakos kompleksas. Jame yra apie 30 reguliatorių komponentų. Komplemento komponentų sintezė priklauso nuo signalų, gaunamų iš nervų ir endokrininės sistemos. Paprastai jį kontroliuoja specialūs baltymai, kurie neleidžia sunaikinti šeimininko (žmogaus) ląstelių.

Esant naktinei hemoglobinurijai, šis procesas prarandamas. Eritrocitų ląstelių sienelių lipidų sluoksnis sunaikinamas, o tai sukelia jų mirtį. Įrodyta, kad padidėjęs eritrocitų membranos jautrumas papildomiems komponentams.

Papildas yra būtinas norint apsaugoti ląsteles nuo infekcinių ligų sukėlėjų ir panaudoti mikroorganizmų ir jų pačių pažeistų ląstelių skilimo produktus

Kitos kraujo ląstelės (baltieji kraujo kūneliai ir trombocitai) taip pat reaguoja su membranos defektais. Ant jų nerasta imunoglobulinų kaupimosi, o tai įrodo autoallerginio mechanizmo nebuvimą ir pasisako už bendros kamieninės ląstelės pralaimėjimą. Būtent ji gauna genetinę informaciją (užsakymą) apie destruktyvų veiksmą.

Trūkstama genetinė kamieninių ląstelių dalis vadinama GPI-AP. Jo trūkumas eritrocitų klone prisideda prie jautrumo hemolizei veikiant komplementui. Tuo pačiu metu organizme gali egzistuoti normalus raudonųjų kraujo kūnelių klonas.

Paroksizminė naktinė hemoglobinurija atsiranda tik tuo atveju, jei patologinis klonas vyrauja virš įprasto. Eritrocitai iš klono, kuriame iš dalies arba visiškai nėra GPI-AP, pacientams aptinkami srauto citometrijos metodu. Svarbu, kad pacientų patologinių ląstelių skaičius būtų nevienodas.

Padidėjęs trombų susidarymas sergant Markiafava-Micheli liga yra susijęs su kraujo krešėjimo stimuliavimu veiksniais, išsiskiriančiais sunaikinant eritrocitus.

Ligos formos

Klasifikuojant klinikines formas atsižvelgiama į laboratorinius duomenis ir priežastinį kraujo pokyčių ryšį. Įprasta išskirti šias veisles:

1. Subklinikinis - nėra laboratorinių hemolizės požymių, tik labai jautrūs metodai gali aptikti nedidelį skaičių ląstelių, kurioms trūksta GPI -AP. Klinikinio ligos vaizdo nėra. Dažnai kartu su aplastine anemija.
2. Klasikinis - yra visi klinikiniai simptomai, periodiškai paūmėja, be eritrocitų, leukocitų ir trombocitų, yra nustatomi laboratoriniai hemolizės požymiai (retikulocitų, serumo fermento laktato dehidrogenazės, bilirubino augimas, sumažėjęs haptoglobino kiekis). Kaulų čiulpų kraujodaros sutrikimų nepastebėta.
3. Atsiranda dėl kaulų čiulpų kraujodaros nepakankamumo sergant įvairiomis ligomis - daroma prielaida, kad kaulų čiulpų patologija yra sutrikusi ir sutrinka kraujodaros sutrikimai (su aplazine anemija, mielodisplastiniu sindromu). Remiantis analize ir klinika, visos hemolizės apraiškos atskleidžiamos kaulų čiulpų kraujodaros anomalijų fone.

Pagal kitą klasifikaciją siūloma atskirti:

• idiopatinė forma arba paroksizminė naktinė hemoglobinurija;
• patologija sindromo forma su įvairiomis ligomis;
• reta rūšis, atsirandanti po kaulų čiulpų hipoplazijos.

Simptomai ir klinikinė eiga

Liga gali prasidėti staiga (ūmiai) ir laipsniškai įsisenėti. Paūmėjimų laikotarpiai vadinami hemolizinėmis krizėmis. Dažnai prieš juos atsiranda peršalimas, ryšys su infekcija, kontaktas su toksiškomis medžiagomis.

Pagrindiniai paroksizminės naktinės hemoglobinurijos simptomai yra šie:

• pilvo skausmas;
• skirtingo intensyvumo ir lokalizacijos krūtinės skausmai - skirtingos lokalizacijos skausmai yra susiję su mažų arterijų lovos šakų tromboze ir išeminių židinių susidarymu vidaus organuose;
• anemijos požymiai (silpnumas, galvos svaigimas, galvos skausmas) - sukelia padidėjęs raudonųjų kraujo kūnelių sunaikinimas ir nepakankama gamyba, be to, tyrimai rodo geležies ir folio rūgšties trūkumą pacientų kraujyje;
• odos ir skleros geltonumas - tiesioginio bilirubino išsiskyrimo į kraują rodiklis, kurį kepenys apdoroja nuo hemoglobino pertekliaus;
• rijimo sutrikimas;
• vyrų erekcijos disfunkcija - pasireiškia ne tik krizių fone, bet tampa lėtinė, kurią sukelia sumažėjusi azoto oksido koncentracija plazmoje, sutrikęs raumenų ir kraujagyslių tonusas.
• padidėjęs nuovargis;
• dusulys, širdies plakimas;
• vietiniai tromboflebito požymiai (odos srities virš venos paraudimas, patinimas, skausmas palpuojant, karščiavimas);
• apžiūrėdamas pacientą, gydytojas gali pastebėti kepenų ir blužnies padidėjimą, šis simptomas ypač svarbus diagnozuojant trombozės ir širdies priepuolių vystymąsi jose.

Lėtinė ligos eiga prisideda prie:

• plaučių hipertenzija su tromboze plaučių kraujagyslių šakose;
• lėtinis inkstų nepakankamumas, atsirandantis dėl hemoglobino skilimo produkto (hemosiderino) nusėdimo inkstų kanalėliuose, kraujagyslių trombozė, susidarant mikroinfarktams;
• didelis jautrumas prisijungti prie infekcijos.

Šie sindromai tampa labiausiai tikėtina mirties priežastimi.

Laboratorinė diagnostika

Markiafava-Micheli liga diagnozuojama atlikus išsamų tyrimą hematologiniuose centruose, galinčiuose atlikti specifinius tyrimus ir analizes.

Periferiniame kraujyje yra:

• eritropenija, leukopenija, trombocitopenija (bendro kraujo ląstelių augimo slopinimo būsena vadinama pancitopenija);
• retikulocitozė;
• padidėjęs hemoglobino kiekis plazmoje;
• geležies ir folio rūgšties kiekio sumažėjimas.

Tirdami kaulų čiulpus, jie nustato:

• eritropoezės (eritrocitų gamybos) suaktyvėjimo požymiai dėl kamieninių ląstelių (normoblastų, plazmos ir putliųjų ląstelių) kaupimosi;
• sumažėja granulocitų ir megakariocitų skaičius;
• kraujavimo sritys, hemolizuotų eritrocitų kaupimasis sinusuose;
• kraujodaros slopinimo stadijoje matomos riebalų degeneracijos ir niokojimo zonos.

Abu mėginiai tiria kraujo mėginio, įdėto į praskiestą tirpalą, eritrocitų „gyvybingumą“. Hemo testas yra teigiamas, kai sunaikinama 5% ar daugiau, o Hartmano testas - 4% ar daugiau.

Kumbso testas atliekamas siekiant pašalinti ryšį su autoimuniniu ląstelių sunaikinimo mechanizmu; jis yra neigiamas esant naktinei hemoglobinurijai.

Šlapimo dažymas rodo didelį oksihemoglobino kiekį jame.

Šlapimo tyrimas parodė, kad vienas iš pradinių naktinės hemoglobinurijos požymių yra rytinė ir naktinė šlapimo dalys, nusidažiusios tamsiai raudona spalva. Laikui bėgant, surinktas šlapimas išsiskiria į sluoksnius:

• skystis yra skaidrus viršuje, tačiau išlaiko spalvą;
• iš apačios nustatomos organinės kilmės negyvų ląstelių dalelės.

Kokias ligas reikia atskirti nuo naktinės hemoglobinurijos?

Diferencinė paroksizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozė atliekama su kitomis anemijomis, panašiomis į klinikinę eigą, visų pirma su autoimuninio tipo ir aplastine hemolizine anemija.

Bendros savybės yra šios:

• staigus raudonųjų kraujo kūnelių skaičiaus sumažėjimas;
• retikulocitozė;
• gelta;
• karščiavimas;
• padidėjusi laisvo bilirubino koncentracija;
• polinkis į trombozę;
• vidutinio sunkumo kepenų ir blužnies padidėjimas.

Sergant anemija, kraujo plazmoje nėra didelio hemoglobino kiekio, šlapime - urobilino. Neigiami laboratoriniai Hem, Hartmano testai, bet teigiamas Coombso testas.

Diagnozė yra labai sunki, jei liga tęsiasi laikinų krizių forma ūminės mieloblastinės leukemijos, eritromieliozės, osteomielosklerozės, piktybinių navikų metastazavusių kaulų čiulpų pažeidimų fone.

Eritrocitų masė laikoma šaltyje specialiose pakuotėse

Gydymas

Iki šiol nėra veiksmingo būdo sustabdyti raudonųjų kraujo kūnelių irimą. Belieka tik pasinaudoti pakaitine galimybe ir perduoti pacientui nuplautą eritrocitų masę.

Kraujas, naudojamas perpylimui, turi būti laikomas užšaldytas bent savaitę, kad visiškai sunaikintų jame esančius leukocitus. Patekę pas pacientą, jie gali sukelti hemolizės paūmėjimą dėl padidėjusio jautrumo ir komplemento aktyvacijos.

Dažnai perpilant, vis dar įmanoma susidaryti antikūnų prieš eritrocitus. Tokiems pacientams vėlesnis perpylimas atliekamas po kelių procedūrų, kai plaunami eritrocitai fiziologiniu tirpalu ir patikrinamas donoro kraujas naudojant Kumbso reakciją.

Paprastai perpylimų skaičius yra ne mažesnis kaip penki, tačiau priklauso nuo paciento būklės sunkumo ir atsako į gydymą.

Norint paskatinti teisingą kraujodaros procesą, Nerobol (anabolinis hormoninis vaistas) vartojamas iki trijų mėnesių. Tokiu atveju galimas kepenų funkcinės būklės pasikeitimas.

Trombų gydymui ir prevencijai naudojamas heparinas, po to pereinama prie palaikomųjų netiesioginių antikoaguliantų dozių.

Siekiant kompensuoti geležies netekimą, vaistai skiriami tabletėmis.

Blužnies pašalinimo indikacija gali būti staigus padidėjimas, širdies priepuolio požymiai. Splenektomija atliekama retai.

Siekiant apsaugoti kepenis, skiriami hepatoprotekciniai vaistai. Steroidų terapija kartais padeda.

Vaistas skiriamas tik lašinant į veną

Pastaraisiais metais pasirodė informacija apie vaisto Eculizumab (Soliris), pagaminto iš monokloninių antikūnų, vartojimą. Remiantis pranešimais, jis blokuoja hemolizę, gali atsispirti kraujo komplementui. Šis vaistas laikomas brangiausiu pasaulyje. Jo veikimas ir neigiamas poveikis nėra gerai suprantami.

Naktinė hemoglobinurija dar neturi specialaus gydymo. Net ir esant pakankamai palaikomajai priežiūrai, pacientai gyvena apie penkerius metus nuo ligos pradžios. Nėra jokios prevencijos. Kiekvienas turėtų laikytis teisingo elgesio dirbdamas ir priverstinio kontakto su toksiškais junginiais.

Kaip pasireiškia paroksizminė naktinė hemoglobinurija?

Paroksizminė naktinė hemoglobinurija yra sunki įgyta hemolizinių anemijų grupės patologija. Markiafava-Micheli liga arba Strubing-Markiafava liga, kiti šios patologijos pavadinimai, sukelia raudonųjų kraujo kūnelių sunaikinimą kraujyje. Liga yra labai reta, 500 tūkstančių gyventojų gali susitikti 1 žmogus, turintis šią patologiją.

Kad nesijaudintumėte dėl galimų komplikacijų ir patologijos pasekmių vystymosi, turėtumėte žinoti, kokia yra paroksizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozė, simptomai ir gydymas.

Hemoglobinurijos priežastys

Kaip minėta aukščiau, paroksizminė naktinė hemoglobinurija yra labai reta liga, be to, patologija dažniausiai nustatoma žmonėms nuo 20 iki 40 metų. Ligos išsivystymo senatvėje ar vaikams atvejai taip pat žinomi medicinos praktikoje, tačiau jų procentas yra nereikšmingas.

Manoma, kad paroksizminę naktinę hemoglobinuriją (PNH) sukelia mutacinė kamieninių ląstelių geno (PIG-A) reakcija, kuri yra kaulų čiulpų X chromosomos sudedamoji dalis, reaguojant į nenustatytus įtakos veiksnius. Kai kurie šaltiniai teigia, kad genų mutacijos priežastys nežinomos.

Kiti teigia, kad hemoglobinurija gali išsivystyti dėl infekcinių ligų, plaučių uždegimo, traumų, intoksikacijos, hipotermijos ir nudegimų bei net stipraus fizinio streso.

Tačiau vieninga nuomonė apie patologijos etiologiją dar nėra nustatyta.

Buvo parodyta aiški sąsaja tarp paroksizminės naktinės hemoglobinurijos diagnozės sukūrimo, kaip kartu atsirandančių patologijų simptomas. Medicininiai tyrimai parodė, kad PNH išsivysto dėl aplastinės anemijos ir kitų kraujagyslių sistemos patologijų 30% atvejų.

Gerai žinomas argumentas, kad net viena mutavusi ląstelė gali sukelti sunkios patologinės būklės vystymąsi. Kai susidaro raudonieji kraujo kūneliai, kurie atliekami kaulų čiulpuose, kamieninės ląstelės dalijasi, subręsta ir išsiskiria į kraują. Vienas modifikuotas genas yra padalintas į dar porą, o tie - į porą ir tt Tai reiškia, kad viena ląstelė dauginasi pati, palaipsniui užpildydama kraują pažeistais eritrocitais.

Raudonųjų kraujo kūnelių pažeidimo esmė yra neužbaigta arba trūkstama baltymų membrana, kuri padeda apsaugoti ląsteles nuo imuninės sistemos. Esant menkiausiems ląstelės defektams, organizmo imunitetas ją sunaikina, todėl susidaro tokia diagnozė kaip hemolizė - eritrocitų sunaikinimas intravaskuliniu būdu, kuriam būdingas gryno hemoglobino išsiskyrimas į kraują.

Tas pats procesas vyksta sergant lėtine hemolizine anemija, todėl paroksizminė naktinė hemoglobinurija yra jo analogas arba, kaip dažnai sako praktikai, ūminė įgyta forma. Pagrindinis ir vienintelis skirtumas tarp šių patologijų yra jų vystymosi principas.

Hemolizinė anemija yra įgimta patologija, įgyta hemoglobinurija. Defektuoti eritrocitai taip pat gali išplisti į kitus kietus kraujagyslių skysčio elementus: leukocitus ir trombocitus.

Naktinės hemoglobinurijos simptomai

Markiafava-Micheli ligos simptomai priklauso nuo priežastinės patologijos klasifikacijos. Kaip buvo išsiaiškinta, liga gali būti nepriklausoma, pagal tai išskiriama idiopatinė PNH forma. Dėl patologijos vystymosi aplastinės anemijos fone paroksizminė naktinė hemoglobinurija pasireiškia sindromu. Idiomatinė PNH forma, pasireiškianti kraujodaros hipoplazijos fone, laikoma rečiausia.

Neįmanoma išskirti ryškių bet kurios ligos formos simptomų, nes ji yra labai įvairi. Ligos eiga gali būti išoriškai besimptomė, tokiu atveju patologiją galima nustatyti tik atlikus laboratorinę diagnozę. Kiti pacientai turi sunkų anemijos sindromą.

Apskritai galima nustatyti nedidelį visų galimų naktinės hemogloburijos apraiškų apibendrinimą, taip išryškinant pagrindinį simptominį vaizdą.

• Hemolizės procesas (raudonųjų kraujo kūnelių ir hemoglobino sunaikinimas) dažniausiai vyksta naktį (naktinė hemoglobinurija), todėl ryte šlapinantis šlapimo spalva įgaus tamsiai rudą atspalvį. Dienos ir vakaro metu šio ženklo nepastebėta.
• Dėl kiekybinio eritrocitų kiekio kraujyje sumažėjimo pastebimas aneminis sindromas. Jos apraiškos yra tiesiogiai susijusios su organų ir audinių badu. Todėl pacientui gali pasireikšti galvos skausmas, galvos svaigimas, juodų taškelių mirgėjimas prieš akis, bendras silpnumas, nuovargis, krūtinės anginos priepuoliai ir tachikardija.

• Esant gretutinėms infekcinėms ligoms, kraujavimui, fiziniam krūviui ir pan., Gali išsivystyti hemolizinė krizė, pasireiškianti staigiu hemoglobino kiekio padidėjimu kraujagyslių skystyje, taip pat stiprus negalavimas, karščiavimas, skausmas. gali atsirasti kaulų, odos pageltimas ir vidutinio sunkumo splenomegalija (blužnies padidėjimas).
• Hemoglobinuriją lydi azoto oksido koncentracijos plazmoje pažeidimas, kuris tiek krizių, tiek sunkios patologijos fone sukelia vyrų erekcijos sutrikimus.
• Dėl trombocitų (už kraujo krešėjimą atsakingų kraujo ląstelių) defekto gali atsirasti trombozė, kuri dažniausiai pastebima venose. Tas pats procesas gali išprovokuoti medžiagą, kuri išsiskiria, kai sunaikinamos kietosios kraujo ląstelės. Dėl to padidėja kraujagyslių skysčio krešėjimas, nuo kurio priklauso polinkis į trombozę. Tokie pažeidimai gali būti mirtini.

Aiškiausius paroksizminės naktinės hemoglobinurijos simptomus galima gauti atlikus laboratorinę diagnostiką. Tyrimai parodys hemoglobino kiekį kraujyje, ląstelių būklę, trombopeniją ir leukopeniją, geležies ir kitų mikroelementų kiekį ir kt. Norint visiškai ir tiksliai diagnozuoti hemoglobinuriją, reikia daug laiko, nes ši liga gali būti kruopščiai paslėptas po kitų patologijų priedanga.

Todėl racionaliausias būdas laiku nustatyti Markiafava-Micheli ligą yra reguliarus profilaktinis tyrimas.

Paroksizminės naktinės hemoglobinurijos gydymas

Paroksizminės naktinės hemoglobinurijos aptikimo laikotarpis nustato būtinus terapinius metodus ir nustato patologijos baigties prognozę, kuri daugeliu atvejų yra nepalanki. Taip yra dėl to, kad nėra konkrečios vystymosi priežasties ir neįmanoma jos pašalinti. Todėl nėra specialaus PNH gydymo metodo.

Visos terapinės priemonės yra skirtos pašalinti simptomines apraiškas. Vienintelis veiksmingas būdas visiškai atsikratyti mutavusių ląstelių yra raudonųjų kaulų čiulpų transplantacija (kraujo ląstelių susidarymo vieta).

Kai išsivysto hemolizinė krizė, ūminė hemolizės forma, pacientui skiriami keli eritrocitų masės perpylimai. Tokių perpylimų gali būti 5 ir daugiau. Procedūrų skaičius ir jų dažnis nustatomas pakartotinėmis analizėmis ir atliekamas kitą kartą, kai dauginasi defektuoti eritrocitai.

Retais atvejais blužnis pašalinamas. Splenektomijos požymiai yra staigus organo padidėjimas ir infarkto būklės išsivystymas.

Likusios terapinės priemonės yra skirtingos grupės vaistų, palengvinančių patologijos eigą, vartojimas. Pagrindiniai vaistai yra steroidinių hormonų grupių preparatai, citostatikai, taip pat geležies ir folio rūgšties preparatai.

Nerobol

Dažniausiai paskiriant gydytojus, kovojančius su simptominiu paroksizminės naktinės hemoglobinurijos pasireiškimu, yra vaistas Nerobol. Tai anabolinių steroidų grupės hormoninis vaistas. Vaisto veikimas yra nukreiptas:

• stimuliuoti baltymų sintezę paciento organizme, kurio nepakanka pažeistoje eritrocitų membranoje;
• teigiamai veikia azoto apykaitą;
• lėtina kalio, sieros ir fosforo, būtinų normaliai baltymų sintezei, išsiskyrimą;
• išprovokuoja padidėjusį kalcio fiksavimą kauluose.

Išgėręs šio vaisto, pacientas jaučia apetito padidėjimą, intensyvų raumenų masės padidėjimą, pagreitintą kaulų kalcifikaciją, taip pat daug geresnę bendrą organizmo būklę.

Vaisto vartojimas prasideda nuo 10 g, palaipsniui didinant iki 30 g, 1-2 dozes per dieną. Vaikams vaisto dozė yra 1 tabletė kas antrą dieną, sunkiais atvejais - kasdien. Gydymo Nerobol kursas yra nuo 2 iki 3 mėnesių.

Pasibaigus vaisto vartojimui, daugeliui pacientų pastebimas hemolizės padidėjimas.

Nerobol galima vartoti griežtai pagal gydančio gydytojo nurodymus.

Heparinas

Heparinas yra tiesioginis antikoaguliantas - priemonė, stabdanti kraujo krešėjimą. Esant paroksizminei naktinei hemoglobinurijai, jis skiriamas siekiant išvengti kraujo krešulių susidarymo, kurie apsunkina ligos eigą.

Dozavimas ir vartojimo dažnis yra visiškai individualus, atsižvelgiant į patologijos sudėtingumą ir kraujo krešulių riziką induose.

Pasibaigus heparino kursui, gydytojas skiria netiesioginius antikoaguliantus, kad palaikytų normalų krešėjimo lygį.

Ekulizumabas

Ekulizumabas yra vaistas, kurį sudaro humanizuoti monokanaliniai antikūnai. Vaisto veikimo principas yra sustabdyti intravaskulinę hemolizę ir tiesioginį atsparumą kraujo komplikacijoms. Dėl to susilpnėja natūralus pažeistų raudonųjų kraujo kūnelių naikinimas organizmo imuninei sistemai.

Šis vaistas yra brangiausias pasaulyje. Jo veikimo mechanizmas ir galimų jo naudojimo pasekmių raida nebuvo pakankamai ištirti.

Geležies ir folio rūgšties preparatai

Jei sutrinka raudonųjų kaulų čiulpų darbas, atsiranda geležies ir folio rūgšties trūkumas, būtinas normaliai kraujodarai. PNH gydymo terapija apima šių mikroelementų preparatų skyrimą, siekiant kompensuoti patologinius nuostolius.

Vaisto dozę ir vartojimo būdą nustato gydantis gydytojas. Dažniausiai skiriami „Sorbifer“, „Tardiferron“, „Ferretab“, „Fenuls“ ir kt. Šių vaistų sudėtis apima mikroelementų kompleksą, būtiną normaliam raudonųjų kaulų čiulpų kietųjų kraujo dalelių susidarymui.

Kepenų palaikymas

Intensyvi terapija kovojant su paroksizmine naktine hemoglobinurija stipriai veikia kepenis. Jei nėra palaikomosios kepenų terapijos, ji gali tiesiog atsisakyti. Todėl svarbu vartoti hepatoprotekcinius vaistus. Tai gali būti tokie vaistai:

Be to, yra daug maisto produktų, kurie gali padėti atstatyti kepenų ląsteles. Tai moliūgai, džiovinti abrikosai, rudadumbliai, alyvuogių aliejus, pieno produktai ir kt. Svarbiausia, kad kepenų silpnumo akimirkomis nepabloginkite jo su greitu maistu.

Nustačius ligą, gydytojai pateikia netikslias prognozes. Statistika sako, kad nustačius diagnozę, pacientas gali gyventi palaikomąją terapiją maždaug 5 metus.

Dėl nežinomos ligos kilmės ir jos vystymosi priežasčių netikslumų negalima išvengti paroksizminės naktinės hemoglobinurijos.

išvadas

Markiafava-Micheli liga arba paroksizminė naktinė hemoglobinurija yra sunki liga, kuri gali būti mirtina net ir intensyviai gydant. Vienintelis galimas pasveikimas laikomas raudonųjų kaulų čiulpų transplantacija, kurios metu susidaro kraujo ląstelės. Be to, patologija sukelia gretutinių ligų, kurios yra ne mažiau pavojingos paciento būklei, vystymąsi.

Todėl gydytojai vieningai pareiškia, kad geriausias būdas išvengti bet kokios patologijos yra reguliariai atlikti išsamų medicininį patikrinimą. Galbūt, jei liga yra tik formavimosi stadijoje, ją galima visam laikui pašalinti. Sergant tokiomis sunkiomis ligomis, pagrindinis klausimas yra laikas. Turėtumėte rūpintis savimi ir savo kūnu.

Paroksizminė naktinė hemoglobinurija (PNH)

Priežastys:

Ligos priežastys yra susijusios su eritrocitų, kurie iš esmės yra defektuoti, naikinimu intravaskuliniu būdu. Kartu su patologine eritrocitų populiacija išsaugomos ir kai kurios normalios ląstelės, kurių gyvenimo trukmė normali. Nustatyti granulocitų ir trombocitų struktūros sutrikimai. Liga nėra paveldima, tačiau kai kurie išoriniai veiksniai, provokuojantys defektų ląstelių populiacijos, kuri yra klonas, susidarymą, t.y. vienos iš pradžių pakeistos ląstelės palikuonys nėra žinomi.

Padidėjęs patologinių eritrocitų komplemento jautrumas PNH. Galbūt tai yra pagrindas išprovokuoti hemolizinę krizę, perpilant šviežią kraują, kuriame yra veiksnių, aktyvuojančių komplemento. Kraujo perpylimas, kuris buvo laikomas ilgiau nei savaitę, nesukelia hemolizės.

Paroksizminės naktinės hemoglobinurijos simptomai:

Liga vystosi lėtai: yra vidutinio sunkumo anemijos požymių, silpnumas, nuovargis, širdies plakimas fizinio krūvio metu, pilvo skausmas, dažnai susijęs su mezenterinių kraujagyslių tromboze. Oda ir gleivinės yra šviesiai ledinės, pilkšvos dėl anemijos ir hemosiderino nusėdimo. Būdingi intravaskulinės hemolizės požymiai.

Eritrocitų morfologija neturi būdingų bruožų. Kaulų čiulpuose stebima raudonojo daigelio hiperplazija, tačiau trepanate šiek tiek padidėja kaulų čiulpų ląsteliškumas, kuris, progresuojant ligai, gali tapti hipoplastinis.

Diagnozė:

Diagnozė nustatoma remiantis intravaskulinės hemolizės požymiais (anemija, silpna retikulocitozė, hemosiderinas šlapime). Diagnozę patikslina specialūs tyrimai (teigiamas sacharozės testas, Hemo testas, neigiamas Kumbso testas).

Skirtingai nuo PNH, jis neturi leukopenijos ir trombocitopenijos; paprastai prednizolonas duoda gerą poveikį. Kaulų čiulpų modelis gali atskirti PNH nuo aplazinės anemijos: aplazijos atveju trepanatui būdingas riebalų, hemolizės atveju - ląstelių hiperplazija, tačiau retais atvejais PNH gali susidaryti kaulų čiulpų hipoplazijos vaizdas, nors hemosiderinas yra nuolatinis. randama šlapime ir retikulocitozė kraujyje.

Paroksizminės naktinės hemoglobinurijos gydymas:

Gydymas nesant sunkios anemijos nėra atliekamas. Sunkus anemijos sindromas reikalauja raudonųjų kraujo kūnelių perpylimo; Geriausi rezultatai gaunami perpilant 7–10 dienų nuplautus ar brandintus eritrocitus. Esant kraujodaros hipoplazijai, rodomi anaboliniai steroidai: nerobolis - 10-20 mg per parą arba retabolilas - 50 mg į raumenis 2-3 savaites.

Diskusijos

PNG (paroksizminė naktinė hemoglobinurija) PNG

12 pranešimų

PNH yra sudėtinga liga, pasireiškianti nespecifiniais ir nenuspėjamais požymiais ir simptomais, kurie dažnai sutampa su kitų ligų simptomais. Be to, kiekvienam pacientui PNH pasireiškia skirtingai. Jei turite PNH, kai kuriems ar visiems jūsų raudoniesiems kraujo kūneliams trūksta svarbaus apsauginio baltymo. Be šio baltymo raudonuosius kraujo kūnelius gali sunaikinti jūsų organizmo imuninės sistemos komponentas, vadinamas komplemento sistema. Net jei to nejaučiate, hemolizė vyksta nuolat, slapta ir gali kelti grėsmę jūsų gyvybei. Kaip ir kitų lėtinių ligų, tokių kaip diabetas ar hipertenzija, PNH gydymo stoka gali sukelti rimtų sveikatos problemų. Tipiški simptomai, susiję su PNH, yra pilvo skausmas, rijimo sunkumas, anemija, dusulys ir nuovargis. Rimtesnės komplikacijos yra kraujo krešuliai, inkstų nepakankamumas ir gyvybiškai svarbių organų pažeidimas.

Pacientams, sergantiems PNH, gali pasireikšti įvairios ligos apraiškos, kurios retkarčiais gali nenuspėjamai pablogėti (pavyzdžiui, veikiamos streso) arba pagerėti. Tačiau visiems PNH sergantiems pacientams yra lėtinė hemolizė.

Žmonės, sergantys PNH, gali turėti kitų ligų, turinčių įtakos kaulų čiulpų funkcijai, pavyzdžiui, aplazinę anemiją ar mielodisplastinį sindromą. Priešingai nei PNH, kuriame sunaikinami raudonieji kraujo kūneliai, sergant šiomis ligomis, kraujo ląstelių gamyba gali sumažėti, o tai dar labiau apsunkina PNH eigą. Jei PNH diagnozuojama kartu su aplazine anemija ar mielodisplastiniu sindromu, pasitarkite su gydytoju apie visas veiksmingas jūsų sveikatos būklės gydymo galimybes.

Su PNH raudonieji kraujo kūneliai netenka svarbaus baltymo

2. Komplemento sistemos poveikis

Be šio baltymo dalis raudonųjų kraujo kūnelių gali būti sunaikinta veikiant komplemento sistemai - vienai iš organizmo gynybos sistemų.

3. Eritrocitų naikinimas (hemolizė) PNH

Naudojant PNH, raudonieji kraujo kūneliai sunaikinami, todėl toksiški skilimo produktai patenka į aplinkinę plazmą (skystą geltonojo kraujo komponentą).

Hemolizė yra medicininis terminas „raudonųjų kraujo kūnelių sunaikinimas“. Hemolizės intensyvumas vertinamas pagal LDH (laktato dehidrogenazės - fermento, esančio eritrocituose) - aktyvumo nustatymo rezultatus. Padidėjęs LDH aktyvumas rodo per didelę hemolizę. Sveikiems žmonėms nedidelė hemolizė yra natūralus, nuolatinis procesas. Tačiau PNH sergantiems pacientams pasireiškia per didelė hemolizė, nes kai kurių ar visų raudonųjų kraujo kūnelių paviršiuje nėra apsauginio baltymo. Ši per didelė hemolizė lydi toksiškų eritrocitų turinio patekimą į kraują, o tai ilgainiui gali sukelti daugumą su PNH susijusių simptomų, taip pat pažeisti svarbius jūsų kūno organus. Jei sergate PNH, hemolizė vyksta nuolat, nepriklausomai nuo to, ar jaučiatės gerai, ar ligos paūmėjimas (paroksizmas), pavyzdžiui, streso ar infekcijos metu. Pernelyg didelė ir užsitęsusi hemolizė yra pagrindinė rimtų PNH sveikatos problemų priežastis.

Sunaikinus kraujo ląsteles, jų toksinis turinys patenka į kraują ir gali ten kauptis, taip kenkdamas sveikatai, kuris gali atsirasti netikėtai ir bet kuriuo metu. Šie sutrikimai gali apimti inkstų nepakankamumą ir pavojingus kraujo krešulius, kurie gali pažeisti gyvybiškai svarbius organus, tokius kaip kepenys, smegenys ir plaučiai.

Hemolizė taip pat turi įtakos jūsų savijautai. Daugelis PNH pacientų praneša, kad ligos simptomų atsiradimo ir sunkumo nenuspėjamumas neigiamai veikia jų gyvenimo kokybę. Lėtinės hemolizės lygio mažinimą gydytojai laiko svarbiausiu PNH gydymo tikslu.

Vaistas yra antikūnas, blokuojantis komplemento sistemos C5 komponentą. Naudojimo patirtis parodė, kad padidėjo išgyvenamumas, sumažėjo hemolizė ir trombozė, pagerėjo gyvenimo kokybė.

Dažniausiai liga prasideda palaipsniui. Pacientai skundžiasi silpnumu, negalavimu, galvos svaigimu. Kartais pastebimas skleros subicterity. Dažnai pirmieji skundai yra galvos skausmas, įvairios lokalizacijos pilvo skausmas. Tendencija padidėti trombozei priverčia pacientą kreiptis į gydytoją. Hemoglobinurija retai būna pirmasis ligos simptomas, o kai kuriems pacientams PNH gali visai nebūti. Kai kuriais atvejais jis pirmą kartą pasirodo po 2-3 metų ir net 10 metų nuo ligos pradžios.

Vienas iš būdingų PNH požymių yra pilvo skausmo priepuoliai. Jos lokalizacija gali būti labai skirtinga. Ne krizės laikotarpiu pilvo skausmas paprastai nėra pastebimas. Prie jo dažnai prisijungia vėmimas. Labiausiai tikėtina, kad PNH sergančių pacientų pilvo skausmas yra susijęs su mezenterine tromboze.

Periferinių kraujagyslių trombozė (dažniausiai - viršutinių ir apatinių galūnių venos, rečiau - inkstų kraujagyslės) taip pat yra būdingas paroksizminės naktinės hemoglobinurijos simptomas. Tromboflebitas pastebimas 12% PNH pacientų. Trombozinės komplikacijos yra dažniausia šios ligos mirties priežastis.

Atliekant objektyvų paciento tyrimą, dėmesį dažniausiai patraukia blyškumas su nedideliu gelta. Dažnai pastebimas veido paburkimas, kartais - perpildymas. Blužnis ir kepenys gali būti šiek tiek padidėję, nors tai nėra įprasta PNH.

Paroksizminei naktinei hemoglobinurijai būdingi intravaskulinės hemolizės požymiai, iš kurių svarbiausias yra laisvojo hemoglobino kiekio padidėjimas plazmoje. Šis simptomas periodiškai pastebimas beveik visiems PNH sergantiems pacientams. Tačiau laisvojo plazmos hemoglobino padidėjimo laipsnis skiriasi ir priklauso nuo laikotarpio, per kurį buvo atliktas tyrimas. Krizės metu šis rodiklis žymiai padidėja, taip pat pastebimas plazmos metalbumino kiekio padidėjimas.

Laisvojo hemoglobino kiekis plazmoje priklauso nuo šiuo metu vykstančio hemolizės laipsnio, haptoglobino kiekio, hemoglobino filtracijos šlapime laipsnio ir nuo hemoglobino-haptoglobino komplekso sunaikinimo greičio. Esant nedideliam hemolizės laipsniui, laisvojo plazmos hemoglobino kiekio nepakanka, kad jis būtų filtruojamas per inkstų filtrą. Todėl hemoglobinurija nėra privalomas ligos simptomas. Kai nefronai praeina per kanalėlius, išsiskyręs hemoglobinas iš dalies sunaikinamas ir nusėda kanalėlių epitelyje. Dėl šios priežasties hemosiderinas išsiskiria su šlapimu.

Daugeliui pacientų, sergančių paroksizmine naktine hemoglobinurija, hemosiderinas išsiskiria su šlapimu. Kartais hemosiderinurija atsiranda ne iš karto. Tai yra svarbus ligos simptomas, bet nėra būdingas PNH.

Paroksizminės naktinės hemoglobinurijos laboratoriniai rodikliai

Eritrocitų skaičius PNH sergantiems pacientams mažėja atsižvelgiant į hemoglobino sumažėjimo lygį. Spalvų indikatorius ilgą laiką išlieka artimas vienam. Tais atvejais, kai pacientas šlapime netenka daug geležies hemosiderino ir hemoglobino pavidalu, geležies kiekis palaipsniui mažėja. Žemas spalvų indeksas pastebimas maždaug pusėje pacientų. Kai kuriems iš jų yra padidėjęs hemoglobino P kiekis, ypač paūmėjimo metu.

Nemažai pacientų daliai retikulocitų kiekis yra padidėjęs, tačiau palyginti mažas (2-4%). Daugeliu atvejų leukocitų skaičius PNH sumažėja. Daugeliui pacientų jis yra 1,5-3 G 1 litre, bet kartais jis sumažėja iki 0,7-0,8 G 1 litre. Paprastai leukopenija stebima dėl neutrofilinių granulocitų skaičiaus sumažėjimo. Kartais leukocitų kiekis PNH yra normalus arba padidėjęs - iki 10-11 G litre.

Paroksizminė naktinė hemoglobinurija, dar vadinama Strubing-Markiafava liga, Markiafava-Micheli liga, yra reta liga, progresuojanti kraujo patologija, kelianti grėsmę paciento gyvybei. Tai viena iš įgytų hemolizinių anemijų rūšių, atsiradusių dėl eritrocitų membranų struktūros sutrikimų. Sugedusios ląstelės yra jautrios ankstyvam irimui (hemolizei) induose. Liga yra genetinio pobūdžio, tačiau nelaikoma paveldima.

Naktinė paroksizminė hemoglobinurija

Epidemiologija

Pasireiškimo dažnis yra 2 atvejai 1 milijonui žmonių. Per metus sergamumas yra 1,3 atvejo milijonui žmonių. Tai daugiausia pasireiškia amžiaus asmenims, sergamumo priklausomybė nuo lyties ir rasės nenustatyta. Yra pavienių ligos atvejų vaikams ir paaugliams.

Svarbu: vidutinis ligos aptikimo amžius yra 35 metai.

Kas yra paroksizminė naktinė hemoglobinurija

Ligos priežastys

Ligos vystymosi priežastys ir rizikos veiksniai nežinomi. Nustatyta, kad patologiją sukelia PIG-A geno, esančio X chromosomos trumpojoje rankoje, mutacija. Mutageninis faktorius dar nenustatytas. 30% naktinės paroksizminės hemoglobinurijos atvejų yra ryšys su kita kraujo liga - aplastine anemija.

Kraujo ląstelių susidarymas, vystymasis ir brendimas (hematopoezė) vyksta raudonųjų kaulų čiulpuose. Visos specializuotos kraujo ląstelės susidaro iš vadinamųjų nespecializuotų kamieninių ląstelių, kurios išlaikė galimybę dalytis. Subrendusios kraujo ląstelės, susidariusios dėl nuoseklių dalijimųsi ir transformacijų, patenka į kraują.

PIG-A mutacija net vienoje ląstelėje sukelia PNH vystymąsi. Genų pažeidimas taip pat keičia ląstelių aktyvumą palaikant kaulų čiulpų tūrį, mutantinės ląstelės dauginasi aktyviau nei normalios ląstelės. Hematopoetiniame audinyje greitai susidaro ląstelių, gaminančių defektines kraujo ląsteles, populiacija. Šiuo atveju mutantas klonas nepriklauso piktybiniams dariniams ir gali spontaniškai išnykti. Aktyviausiai normalios kaulų čiulpų ląstelės pakeičiamos mutantais, kai kaulų čiulpų audiniai atstatomi po reikšmingų pažeidimų, ypač dėl aplazinės anemijos.

Būdingi naktinės paroksizminės hemoglobinurijos požymiai

Pažeidus PIG-A geną, sutrinka signalinių baltymų, apsaugančių kūno ląsteles nuo komplemento sistemos poveikio, sintezė. Komplemento sistema - specifiniai kraujo plazmos baltymai, užtikrinantys bendrą imuninę apsaugą. Šie baltymai jungiasi prie pažeistų raudonųjų kraujo kūnelių ir juos lydo, o išsiskyręs hemoglobinas susimaišo su kraujo plazma.

klasifikacija

Remiantis turimais duomenimis apie patologinių pokyčių priežastis ir savybes, išskiriamos kelios paroksizminės naktinės hemoglobinurijos formos:

1. Subklinikinė.
2. Klasika.
3. Susijęs su kraujodaros sutrikimais.

Prieš subklinikinę ligos formą dažnai būna aplastinė anemija. Klinikinių patologijos apraiškų nėra, tačiau nedidelis skaičius pažeistų kraujo ląstelių yra aptinkamas tik laboratorinių tyrimų metu.

Naktinės paroksizminės hemoglobinurijos klinika

Ant užrašo. Yra nuomonė, kad PNH yra sudėtingesnė liga, kurios pirmasis etapas yra aplastinė anemija.

Klasikinė forma pasireiškia būdingais simptomais, paciento kraujyje yra pažeistų eritrocitų, trombocitų ir kai kurių tipų leukocitų populiacijų. Laboratorinių tyrimų metodai patvirtina patologiškai pakitusių ląstelių intravaskulinį sunaikinimą, kraujodaros sutrikimai nenustatomi.

Po perduotų ligų, sukeliančių kraujodaros nepakankamumą, išsivysto trečioji patologijos forma. Kaulų čiulpų pažeidimų fone atsiranda ryškus klinikinis vaizdas ir eritrocitų intravaskulinė lizė.

Taip pat yra alternatyvi klasifikacija, pagal kurią yra:

1. Tiesą sakant, PNG, idiopatinis.
2. Besivystantis kartu su kitų patologijų sindromu.
3. Jis vystosi dėl kaulų čiulpų hipoplazijos.

Naktinės paroksizminės hemoglobinurijos klinika. 2 dalis

Ligos eigos sunkumas įvairiais atvejais ne visada koreliuoja su ydingų eritrocitų skaičiumi. Aprašomi tiek subklinikinio kurso atvejai, kai modifikuotų ląstelių kiekis artėja prie 90%, tiek labai sunkūs atvejai, kai pakeičiama 10% normalios populiacijos.

Ligos vystymasis

Šiuo metu žinoma, kad pacientų, sergančių paroksizmine naktine hemoglobinurija, kraujyje gali būti trijų tipų eritrocitų, kurių jautrumas komplemento sistemai yra skirtingas. Be normalių ląstelių, kraujyje cirkuliuoja eritrocitai, kurių jautrumas kelis kartus didesnis nei įprastai. Pacientų, kuriems diagnozuota Markiafava-Micheli liga, kraujyje buvo rasta ląstelių, kurių jautrumas komplementui buvo 3-5 kartus didesnis nei įprastai.

Ką sukelia naktinė paroksizminė hemoglobinurija?

Patologiniai pokyčiai taip pat veikia kitas kraujo ląsteles, būtent trombocitus ir granulocitus. Ligos įkarštyje pacientams diagnozuojama pancitopenija - nepakankamas įvairių tipų kraujo ląstelių kiekis.

Ligos sunkumas priklauso nuo sveikų ir pažeistų kraujo ląstelių populiacijų santykio. Didžiausias eritrocitų, jautrių nuo komplemento priklausomai hemolizei, kiekis pasiekiamas per 2–3 metus nuo mutacijos momento. Šiuo metu atsiranda pirmieji būdingi ligos simptomai.

Patologija paprastai vystosi palaipsniui, ūminė krizė prasideda retai. Paūmėjimai pasireiškia menstruacijų, stipraus streso, ūminių virusinių ligų, operacijų, gydymo tam tikrais vaistais (ypač geležies turinčiais) fone. Kartais liga paūmėja vartojant tam tikrus maisto produktus arba be aiškios priežasties.

Paroksizminė naktinė hemoglobinurija

Yra įrodymų, kad Markiafava-Mikeli liga pasireiškia dėl radiacijos.

Pacientams, kuriems yra nustatyta paroksizminė naktinė hemoglobinurija, kraujo ląstelės vienaip ar kitaip ištirpsta. Vidutinio kurso laikotarpiai yra susiję su hemolizinėmis krizėmis, didžiuliu raudonųjų kraujo kūnelių naikinimu, dėl kurio paciento būklė smarkiai pablogėja.

Ne krizės metu pacientai nerimauja dėl vidutinio sunkumo bendros hipoksijos apraiškų, tokių kaip dusulys, aritmijų priepuoliai, bendras silpnumas ir pablogėja fizinis krūvis. Krizės metu atsiranda pilvo skausmai, daugiausia lokalizuoti bamboje, apatinėje nugaros dalyje. Šlapimas tampa juodas, tamsiausia dalis yra ryte. Šio reiškinio priežastys dar nėra galutinai nustatytos. Esant PNH, atsiranda nedidelis veido pastingumas, pastebimas odos ir skleros pageltimas.

Ant pastabos! Tipiškas ligos simptomas yra šlapimo dažymas. Maždaug pusėje žinomų atvejų liga nepasireiškia.

Šlapimo spalvos pasikeitimas iš įprastos į patologiją su paroksizmine naktine hemoglobinurija

Laikotarpiais tarp krizių pacientai gali patirti:

• anemija;
• polinkis į trombozę;
• kepenų padidėjimas;
• miokardo distrofijos apraiškos;
• polinkis į infekcinės kilmės uždegimą.

Sunaikinus kraujo ląsteles, išsiskiria krešėjimą didinančios medžiagos, kurios sukelia trombozę. Galimas kraujo krešulių susidarymas kepenų, inkstų induose, taip pat paveikti vainikiniai ir smegenų indai, kurie gali būti mirtini. Trombozė, lokalizuota kepenų induose, padidina organo dydį. Intrahepatinės kraujotakos sutrikimai sukelia degeneracinius audinių pakitimus. Užblokavus vartų venų sistemą arba blužnies venas, išsivysto splenomegalija. Azoto apykaitos sutrikimus lydi lygiųjų raumenų funkcijos sutrikimai, kai kurie pacientai skundžiasi rijimo pasunkėjimu, stemplės spazmais, vyrams galimi erekcijos sutrikimai.

Svarbu! Trombozinės PNH komplikacijos daugiausia veikia venas; arterijų trombozė yra reta.

Vaizdo įrašas - paroksizminė naktinė hemoglobinurija

PNH komplikacijų vystymosi mechanizmai

Hemolizinė krizė pasireiškia šiais simptomais:

• ūmus pilvo skausmas, atsirandantis dėl daugybinės mažųjų mezenterinių venų trombozės;
• padidėjęs geltonumas;
• apatinės nugaros dalies skausmas;
• kraujospūdžio mažinimas;
• padidėjusi kūno temperatūra;
• šlapimo dažymas juodas arba tamsiai rudas.

Retais atvejais išsivysto „hemolizinis inkstas“ - specifinė trumpalaikė inkstų nepakankamumo forma, lydima ūminės anurijos. Dėl išskyrimo funkcijos pažeidimo kraujyje kaupiasi azoto turintys organiniai junginiai, kurie yra galutiniai baltymų skilimo produktai, ir išsivysto azotemija. Pacientui išėjus iš krizės, kraujo kūnelių kiekis kraujyje palaipsniui atsistato, geltonumas ir anemijos apraiškos iš dalies išnyksta.

Dažniausias ligos eigos variantas yra krizė, susidedanti iš stabilios patenkinamos būklės laikotarpių. Kai kuriems pacientams laikotarpiai tarp krizių yra labai trumpi, jų nepakanka kraujo sudėčiai atkurti. Šiems pacientams išsivysto nuolatinė anemija. Taip pat yra kurso variantas su ūmia pradžia ir dažnomis krizėmis. Laikui bėgant krizės retėja. Ypač sunkiais atvejais galimas mirtinas rezultatas, dėl kurio atsiranda ūminis inkstų nepakankamumas arba širdį ar smegenis maitinančių kraujagyslių trombozė.

Svarbu! Hemolizinių krizių vystymosi dienotvarkės nebuvo.

Retais atvejais liga taip pat gali tęstis ilgai, ramiai, aprašomi pavieniai pasveikimo atvejai.

Diagnostika

Laboratorinė naktinės paroksizminės hemoglobinurijos diagnozė

Ankstyvosiose ligos stadijose diagnozė yra sunki, nes pasireiškia nespecifiniai simptomai. Kartais diagnozei nustatyti prireikia kelių mėnesių stebėjimo. Klasikinis simptomas - specifinis šlapimo dažymas - atsiranda krizių metu, o ne visiems pacientams. Įtarimo dėl Markiafava-Micheli ligos priežastys yra šios:

• nežinomos etiologijos geležies trūkumas;
• trombozė, galvos skausmas, skausmo priepuoliai apatinėje nugaros ir pilvo dalyje be aiškios priežasties;
• neaiškios kilmės hemolizinė anemija;
• kraujo ląstelių lydymas, lydimas pancitopenijos;
• hemolizinės komplikacijos, susijusios su šviežio donoro kraujo perpylimu.

Diagnostikos procese svarbu nustatyti lėtinio eritrocitų intravaskulinio skilimo faktą ir nustatyti specifinius PNH serologinius požymius.

Tyrimų komplekse, jei įtariama naktinė paroksizminė hemoglobinurija, be bendrų šlapimo ir kraujo tyrimų, atliekama:

• hemoglobino ir haptoglobino kiekio kraujyje nustatymas;
• imunofenotipavimas srauto citometrija, siekiant nustatyti defektų turinčių ląstelių populiacijas;
• serologiniai tyrimai, ypač Kumbso testas.

Diagnostiniai naktinės paroksizminės hemoglobinurijos tyrimai

Reikalinga diferencinė diagnozė su hemoglobinurija ir kitos etiologijos anemija, ypač autoimuninė hemolizinė anemija. Dažni simptomai yra anemija, geltonumas ir padidėjęs bilirubino kiekis kraujyje. Kepenų ir (arba) blužnies padidėjimas pastebimas ne visiems pacientams