Preskúmalo sa 45 detí vo veku 3-15 rokov. Účelom štúdie bolo určiť pripravenosť na apoptózu lymfocytov a neutrofilov periférnej krvi definovaním markerov apoptózy - CD95, CD95L, BSL2. Pri hodnotení apoptózy imunokompetentných buniek bol stanovený zníženie pripravenosti na naprogramovanej bunkovej smrti lymfocytov a zvýšenie neutrofilných granulocytov. Najvýraznejšie zmeny sú registrované v veková skupina 7-15 rokov so skúsenosťami viac ako 3 roky. Získané údaje môžu byť znakom potlačenia naprogramovanej smrti autoreaktívnych lymfocytov v tkanive pankreasu, čo prispieva k predĺženiu imunitnej reakcie. Zvýšenie podielu leukocytových buniek exprimujúcich CD95L môže pomôcť zvýšiť spôsoby programovanej bunkovej smrti na ostrove β-bunky pankreasu infiltrovaného imunokompetentnými bunkami.
apoptóza neutrofilov
apoptóza lymfocyt
diabetes typu 1
1. Meneev E. V. Markers Apoptóza u pacientov diabetes 1 Typ debutu choroby / E. V. Pekarev et al. // Diabetes mellitus. - 2009. - № 4. - P. 86-89.
2. PEKAREV E. V. Úloha apoptózy v patogenéze diabetes mellitus 1 / E. V. PEKAREV, T. V. Nikonová, O. M. SMIRNOVA // Diabetes cukru. - 2010. - № 1. - P.45-48.
3. Adeghate E. Aktualizácia etiológie a epidemiológie diabetes mellitus / E. Adeghate, P. Schattner, E. Dunn // Ann NY. Acad Sci, 2006. - Vol. 1084. - P. 1-29.
4. Klinický význam apoptózy neutrofilu v periférnej krvi pacientov s diabetesom typu 2 mellitus / S. SUDO ET AL. // Lab Hematol. 2007; 13 (3): 108-12 (redukované).
5. FILLEP J. G. G. G. G. G. G. UTROPHIL APOPTÓZOV: Cieľ na zvýšenie rozlíšení zápalu / J. G. FILLEP, E. L. Kebir // J. Bunk Biochem. - 2009. - VOL. 108. - P. 1039-1046.
6. Ľudské polymorfonukleárne neutrofily reakcie na Burkholderia Pseudomallei u zdravých a diabetických subjektov / S. Chahanchamroen et al. // infikovať imun. - 2009. - VOL. 77. - P. 456-463 (Znížená apoptóza).
7. Vplyv lymfocytov apoptózy v diabetes mellitus / K. Awadhesh et al. // ázijský Journal of Medical Sciences. - 2011. - № 2. - P. 1-6.
8. Zápal je vytrvalejší v type 1 dibetických myší / D. T. Graves et al. // J. Dent. Res., 2005. - Vol. 84. - P. 324-328.
9. Juliana C. ALVY U pacientov s Dibetes Mellitus: Prehľad patogenézy / C. Juliana, C. Janine, C. Alves // Indian J. Endocrinol. Metab. - 2012. marca. - SUPP L1. - č. 16. - P. 27-36.
10. LUO H. R. Konštitutívna neutrofilová apoptóza: mechanizmy a regulácia / H. R LUO, F. LOON // AM. J. Hematol. - 2008. - Vol. 83. - P. 288-295.
Úvod
Diabetes typu (SD1) je polygénne, mnohonásobné ochorenie spojené s tvorbou autoantoantibun a autoactive T-lymfocytov na p-bunky pankreasu.
Vedúce väzby v patogenéze autoimunitných lézií sú nereguláciou imunity a naprogramovanej smrti buniek.
Kontrolovaná apoptóza sa dnes považuje za hlavný mechanizmus na udržanie optimálnej rovnováhy buniek v zameraní zápalu, obmedzuje rozširovanie aktivovaných klonov a zabraňuje vývoju autoimunitných reakcií. V prípade chyby v jeho implementácii imunitné bunky Môže sa hromadiť, čo vedie k vzniku autoimunitných ochorení.
Účel štúdie: Štúdium aktivačných markerov apoptózy CD95, CD95L, BSL2 na lymfocytoch a periférnych krvných neutrofiloch s diabetom typu 1 u detí.
Metódy materiálu a výskumu
Bol vykonaný prieskum 45 detí s diabetes mellitus typu 1 vo veku 3-15 rokov. Skupina I Zahrnula 20 detí vo veku 3-6 rokov (predškolákov), v skupine II - 12 detí vo veku 7-15 rokov (školákov) s trvaním choroby mladšej ako 3 roky, skupina III - 13 detí 7- 15 rokov (školáci) so skúsenosťami o chorobe dlhšie ako 3 roky. Kontrolná skupina pozostávala z 30 zdravých detí 3-6 (15) a 7-15 (15) rokov. Štúdia bola vykonaná na základe endokrinologického oddelenia DGCB. K. Filippssky, Stavropol.
Na posúdenie programovateľnej bunkovej smrti sa odhalil počet lymfocytov a neutrofilných granulocytov exprimovaných markerov apoptózy. Lymfocyty boli izolované na gradient hustoty ficoll-paque, neutrofily - na gradient dvojitého hustoty ficoll-pakty a ficoll-urografia (GE Healthcare, Švédsko). Bunková suspenzia bola vypracovaná trikrát v prostredí RPMI-1640 (Vector-Best, Rusko). V kultúrach lymfocytov a neutrofilov sa hodnotil počet buniek exprimujúcich CD95, CD95L, BSL2 prietokovú cytometriu s použitím monoklonálnych protilátok (Invitrogen, USA).
Pre Štatistická analýza Data Použitý základný primér softvérového balíka BIOSTAT 4.0, ATTESTAT 10.5.1. ". Dispergická analýza opakovaných meraní sa použila na vyhodnotenie rozdielov medziskupín s výpočtom Newman - Keils kritériá.
Kvantitatívne hodnoty boli charakterizované abnormálnou distribúciou a boli prezentované vo forme strednej a intercavantile (25 a 75 percent) rozsahu (ME (Q1-Q)). Rozdiely považované za spoľahlivé, keď<0,05.
Výsledky a jeho diskusiu
Papier založil zníženie počtu lymfocytov exprimujúcich FAS receptory (CD95) u pacientov všetkých skupín v porovnaní so zdravými deťmi (tabuľka 1). Minimálne ukazovatele sú označené deťmi 7-15 rokov so skúsenosťami viac ako 3 rokmi (tabuľka 1).
stôl 1
Ukazovatele apoptózy lymfocytov u detí s diabetom typu 1
|
Klinické skupiny |
||||
|
3-6 rokov |
SD1 (I) (n \u003d 20) |
17,7(15,9-19,43) * ** |
7,4(5,81- 8,94) * ** |
70,2(68,56-71,76) * ** |
|
Kontrolná skupina |
28,0(26,08-30,0) |
9,2(8,04- 10,25) |
65,9(62,82-69,05) |
|
|
7-15 rokov |
20,5(17,94-23,02) * ** |
11,6(10,12-13,14) * ** |
70,3(65,72-74,9) * ** |
|
|
13,9(10,04-17,73) * ** |
15,6(14,26-16,87) * ** |
79,5(75,47-83,59) * ** |
||
|
Kontrolná skupina |
26,5 (24,20-28,84) |
8,14 (6,49-9,78) |
60,3(56,97-63,66) |
*- p. \\ t<0,05 - по сравнению с контрольной группой, **- p. \\ t<0,05 - по сравнению с группой
Pri hodnotení úrovne expresie anti-apoptotických markerov (BSL2), jeho zvýšenie lymfocytov detí všetkých skupín, výraznejšie v školách s trvaním choroby viac ako 3 roky, čo tiež označuje porušenie Apoptózy závislej od FAS u detí s diabetes mellitus 1, čo vedie k spomaleniu procesov bunkovej smrti infekčných foriem lymfocytov.
Naše výsledky môžu byť nepriamym znakom potlačenia programovanej smrti aktivovaných lymfocytov v tkanive pankreasu, čo prispieva k predĺženiu imunitnej reakcie.
Úroveň apoptotickej pripravenosti lymfoidných buniek závisí od trvania ochorenia a znižuje detí so skúsenosťami s SD1 dlhšie ako 3 roky.
Predtým sa ukázalo, že počas diabetu sa deteguje rezistencia lymfocytov na apoptózu, čo môže vysvetliť povahu a trvanie autoimunitnej odozvy.
V kultúre lymfocytov detských pacientov s diabetes mellitus, zvýšenie percentuálneho podielu lymfocytov exprimujúcich CD95L (tabuľka 1), v porovnaní so skupinou zdravých detí. Najvyššie sadzby boli stanovené v deťoch zo 7-15 rokov so skúsenosťami viac ako 3 rokmi (tabuľka 1).
Je známe, že keď sú pankreasové ostrovy infiltrované imunitnými bunkami, ktoré produkujú širokú škálu cytokínov, ktoré sú sprevádzané aberantnou expresiou membránových receptorov. Pod vplyvom zvýšenej koncentrácie glukózy a cytokínov, p-bunky začínajú expresiu CD95 na jeho povrch, prakticky neprítomný.
Zvýšenie expresie CD95L na lymfoidných bunkách Možné spôsobuje výraznejší apoptotický proces v p-bunkách pankreasu a ich následné odstránenie.
V posledných rokoch sa ukázalo, že neutrofilné granulocyty sa aktívne zapájajú do tvorby autoimunitného zápalu. Reakcia neutrofilov, zameraná na lokalizáciu a elimináciu autoantigénu závisí do značnej miery na pevnosti a trvanie antigénneho účinku na imunitný systém, ako aj počiatočnú úroveň funkčnej aktivity buniek.
Zistili sme, že priebeh diabetu u detí je sprevádzaný zvýšením percentuálneho podielu neutrofilov exprimujúcich markery apoptózy (CD95) a zníženie bunkovej frakcie buniek na jeho povrchu (tabuľka 2).
Tabuľka 2
Ukazovatele apoptózy neutrofilov u detí s diabetom typu 1
|
klinické skupiny |
||||
|
3-6 rokov |
SD1 (I) (n \u003d 20) |
75,1(71,49-78,72) * ** |
9,5 (8,63- 10,32) * ** |
3,68 (3,46-3,90 * ** |
|
kontrolná skupina |
59,2 (56,31- 62,01) |
7,35 (6,58- 8,12) |
||
|
7-15 rokov |
SD1, núdzové skúsenosti mladšie ako 3 roky (ii) (n \u003d 12) |
77,6(71,15-83,99) * ** |
9,5(8,14-10,92) * ** |
3,99(2,9- 5,08) * ** |
|
SD1, núdzové skúsenosti viac ako 3 roky (iii) (n \u003d 13) |
87,9(84,24-91,63) * ** |
12,1(10,22-13,96) * ** |
2,78(2,36-3,19) * ** |
|
|
kontrolná skupina |
58,43(54,95- 1,90) |
*- p. \\ t<0,05 - по сравнению с контрольной группой, **- p. \\ t<0,05 - по сравнению с группой III (NEWMAN - KRITÉRIÁ TALES, DANNA CRIMITION).
S porovnávacou medziskupinou charakteristickou maximálnymi ukazovateľmi CD95 (p<0,05) и минимальные Bsl2 (p<0,05) отмечены у детей 7-15 лет с длительностью заболевания более 3-х лет.
Zvýšenie percentuálneho podielu polymorfoidných leukocytov, ktoré majú CD95L na jeho povrchu, bol zjavený. Najvyššie sadzby sú označené v školách so skúsenosťami o chorobe dlhšie ako 3 roky.
Výsledky štúdie apoptózy džemu v diabetes, prezentovaných v literárnych zdrojoch, sú protichodné. Existujú údaje o zvýšení rýchlosti apoptózy periférnych krvných neutrofilov na SD1 a SD2.
Avšak, v mnohých štúdiách, zníženie apoptózy neutrofilických granulocytov u pacientov so SD1, najmä za hyperglykémiu, pravdepodobne iniciované procesmi chronického zápalu s poškodením tkaniva, a tiež predisponuje pre dlhodobé bakteriálne infekcie u pacientov s diabetom 1. \\ T .
Naše výsledky naznačujú, že u pacientov so SD1 existuje zvýšená predispozícia na apoptózu, ktorá môže byť prejavom ochrannej reakcie zameranej na elimináciu "prebytok" aktívnych neutrofilov, ktorých tvorba zvyšuje poškodenie tkaniva.
Zvýšenie apoptotického potenciálu neutrofilických granulocytov je odrazom aktívneho zapojenia ochorenia v imunopatogenéze ochorenia.
Zvýšenie expresie CD95L na neutrofilných granulocytoch u pacientov s diabetes mellitus pravdepodobne prispieva k eliminácii nielen pankreatických buniek, ale aj ich vlastných leukocytových buniek.
Pri hodnotení apoptózy imunokompetentných buniek u detí pacientov s diabetesom mellitus typu 1, zníženie pripravenosti na naprogramovanej bunkovej smrti lymfocytov a zvýšenie polymorfných leukocytov.
Najvýraznejšie zmeny sú registrované vo vekovej skupine 7-15 rokov so skúsenosťami o chorobe dlhšie ako 3 roky. U detí všetkých skupín sa zjavilo zvýšenie frakcie buniek leukocytov exprimujúcich na jeho povrch CD95L.
Je známe, že swing je prepojenie medzi vrodenou a adaptívnou imunitou a vykonávať dominantnú úlohu pri antibakteriálnej ochrane.
Zvýšenie ich apoptotickej aktivity môže spôsobiť nízku udržateľnosť dieťaťa súvisiaceho s vekom, jeho vystavenie infekčným ochoreniam.
Zníženie počtu lymfoidných buniek citlivých na indukciu apoptózy je nepriamym znakom potlačenia naprogramovanej smrti buniek a narušenie eliminácie aktivovaných foriem lymfocytov.
závery
1. U detí trpiacich cukrovkou typu 1, existuje zníženie pripravenosti na apoptózu periférnych lymfocytov, zvýšenie neutrofilných granulocytov, čo je sprevádzané zmenou expresie CD95 a BSL2 a závisí od skúseností z ochorenia .
2. Zvýšenie expresie CD95L na lymfocytoch a neutrofilných granulocytov na SD1 môže prispieť k zvýšeniu procesov naprogramovaných buniek na ostrove p-bunky pankreasu infiltrovaného imunokompetentnými bunkami.
Recenzenti:
Shchetinin E.V., D.M., profesor, prorektorka pre vedeckú a inovatívnu prácu STGMU, vedúci oddelenia HPE VPO "Stavroper State Medical University" Ministerstva zdravotníctva Ruskej federácie, Stavropolu.
Golubeva MV, D.M., profesor, vedúci oddelenia detských infekčných chorôb HBO VPO "Stavropol State Medical University" Ministerstva zdravotníctva Ruskej federácie, Stavropolu.
Bibliografická referencia
Barycheva L.YU., ERDNEY GORYAEVA N.E. Apoptóza markery imunokompetentných buniek s diabetes mellitus 1 u detí // moderné problémy vedy a vzdelávania. - 2013. - № 4;URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id\u003d9953 (dátum manipulácie: 07/18/2019). Prinášame vašu pozornosť časopisy publikovanie vo vydavateľstve "Akadémia prírodných vedy" 1
Markova A.a. jeden Kashkin E.I. jeden Rubtsov V.S. 1 Lyakisheva R.V. jeden
1 Štátna lekárska univerzita SARATOV. A. Razumovsky, Saratov
Analýza expresie markerov apoptózy a proliferácie u 61 pacientov s nešpecifickou ulcerózou kolitídy, v závislosti od trvania, stupeň závažnosti ochorenia, lokalizácia zápalového procesu v hrubom čreve je. Porovnávacia skupina predstavovala 15 prakticky zdravých ľudí. Prieskumy pacientov sa uskutočnili s použitím klinických, laboratórnych, endoskopických, morfologických metód. V biopsytatoch sliznice sa stanovil expresia imunohistochemických markerov KI-67, p53, babova a rea. V procese výskumu štatisticky významný pokles proliferačnej aktivity sliznice tuku čreva u pacientov s nešpecifickou ulceróznou kolitídou v porovnaní so skupinou zdravých osôb, ako aj zníženie procesov proliferácie a zvýšením expresie markerov apoptózy Trvanie a zhoršenie závažnosti klinických prejavov ochorenia sa zvyšuje.
nešpecifická ulcerózna kolitída
apoptóza markery hiproliferácie
1. Aruine L.I., Kapuller L.L., Isakov V.A. Morfologická diagnóza žalúdka a čriev. - M.: Triada, 1998. - 496 p.
2. Gastroenterology a hepatológia: diagnostika a liečba: sprievodca pre lekárov / ed. A.V. Kalinina, A.F. LOGINOVA, A.I. Khazanova. - 2. ed., Pereerab. a pridať. - m.: Medpress-Inform, 2011. - 864 p.: IL.
3. Brown D. Gatter K. Monoklonálna protilátka KI-67: Jeho použitie v histopatológii // histopatológie. - 1990. - № 17. -
4. Bruno S., Darynkiewich Z. Expresia závislá od bunkového cyklu a stabilita jadrového proteínu detegovaného Ki-67 protilátky v bunkách HL-60 buniek // bunky. Prolif. - 1992. - № 25. -
5. Porovnanie proliferačných markerov (BRDURD, KI-67, PCNA) stanovené v každej polohe buniek v kryptoch normálnej ľudskej kolonickej sliznice / M. Bromley, D. Rew, A. becciolini
et al. // EUR. J. Histochem. - 1996. - Vol. 40. - P. 89-100.
6. HOLT P.R., MOSS S.F., Kapetanakis A.M. Je KI-67 lepší proliferatívny marker v hrubom čreve, potom proliferujúce bunkový jadrový antigén? Rakovina. Epidimiol // biomarkery. Prev. - 1997. -
6. - P. 131-135.
7. McCormick D., Chong C., Hobbs C. et al. Detekcia antigénu KI-67 v časti fixnej \u200b\u200ba voskovej vosku s monoklonálnou protilátkou MIB-1 // histopatológie. - 1993. -
№ 22. - P. 355-360.
8. Reed J. C. BCL-2 a regulácia programovanej bunkovej smrti // J. Cell. Biol. - 1994. - Vol. 124. - P. 1-6.
Nešpecifická ulcerózna kolitída (niac) je jednou z najzávažnejších ochorení gastrointestinálneho traktu, ktorý vedie k zdravotným postihnutím a smrti pacientov.
V posledných desaťročiach, v rôznych krajinách sveta, výskyt nezmysel, ktorý je vo veľkej miere spôsobený zlepšením diagnózy tohto patologického procesu.
V súčasnosti sa pri diagnostike NAP využívajú komplexný prístup pomocou röntgenových, endoskopických, histologických výskumných metód. Jedným z sľubných spôsobov hodnotenia stavu hrubého čreva sliznice je imunohistochémia so stanovením proliferačných markerov a apoptózy.
Medzi metódy imunohistochemického výskumu, najrozšírenejšie použitie apoptózy BCL a p53. Je známe, že Rodinné proteíny BCL patria do induktorov Apoptózy (zlé, Bax, BAK, atď.) Alebo inhibítory apoptózy (Bcl-2, BCL-XL, BOO, atď.). Treba poznamenať, že proteín p53 sa deteguje v mnohých transformovaných bunkách. Jeho funkcie sú zamerané na zabránenie prenosu poškodených genetických informácií z jednej generácie buniek na druhú, vrátane v dôsledku iniciácie apoptózy. Vysoký obsah P53 vedie k zvýšeniu koncentrácie v bunke WAH a zníženia koncentrácie Bcl-2, ktorý prispieva k smrti bunky apoptózou.
Ako proliferačné markery sa používajú niekoľko antigénov. Proliferujúce bunkové jadrové antigén (PCNA) sa podieľa nielen v bunkovej proliferácii, ale aj v opravách DNA po jeho poškodení, čo robí tento bunkový cyklus špecifický pre antigén, pretože obnova DNA sa môže uskutočňovať v zvyšnej fáze. Ďalší antigén, spoľahlivo spojený s fázami bunkového cyklu, je KI-67. Expresia tohto proteínu sa vyskytuje počas fázy odpaľovania, zvyšuje sa počas bunkového cyklu a prudko znižuje fáze mitózy. Tento proteín, na rozdiel od PCNA, sa nezúčastňuje na reparáciách DNA. Expresia KI-67 umožňuje identifikovať bunky vo všetkých fázach bunkového cyklu, okrem zvyšnej fázy.
Účelom štúdie je analyzovať expresiu apoptózy a proliferačných markerov u pacientov s nešpecifickou ulcerózou kolitídy, v závislosti od trvania, stupňa závažnosti ochorenia, lokalizácia zápalového procesu.
Metódy materiálov a výskumu
Hlavná skupina bola 61 pacientov s NYAK vo veku 19 až 66 rokov (27 žien a 34 mužov), skupina porovnania - 15 prakticky zdravých ľudí. Preskúmanie pacientov sa uskutočnilo s použitím klinických, laboratórnych, endoskopických, morfologických metód, ako aj pomocou imunohistochemických štúdií bioptov slizníc sliznice hrubého čreva.
Pacienti s NYM boli rozdelené do skupín v závislosti od závažnosti klinických prejavov, trvanie ochorenia, lokalizácie zápalového procesu.
Proliferatívna aktivita buniek bola stanovená proliferatívnym indikátorom KI-67 vzorcom:
kde X. - Počet jadier v oblasti pohľadu mikroskopu. Výpočet bol vyrobený aspoň 10 polí.
Apoptóza bola posudzovaná expresiou p53 a bax proteínov na povrchu a epitelu glínového hrubého čreva. Na stanovenie regeneračných procesov v slizničnej membráne hrubého čreva sa stanovila expresia rakovinového embryonálneho antigénu (REA).
Výsledky výskumu a diskusie
V imunohistochemickom štúdii bola závislosť vyjadrenia týchto markerov stanovená z trvania niac, závažnosti jej klinických prejavov a prevalenciu zápalového procesu v hrubom čreve.
S štatistickou spracovaním údajov získaných po testovaní disperzií a normálnosti distribúcie sa preukázalo, že vzorka nespĺňa zákon normálneho rozdelenia, preto sa na porovnanie skupín použili neparametrické kritériá. Na opis kvantitatívnych príznakov boli použité medián, horné a dolné kvartily.
Takže u zdravých jedincov IP KI-67 predstavoval 54 (46; 67), čo indikuje vysokú proliferačnú aktivitu buniek hrubého čreva (tabuľka).
Index proliferácie KI-67 buniek epitelu meradla hrubého čreva (%) u zdravých ľudí a pacientov s nešpecifickou ulceróznou kolitídou v závislosti od jeho trvania, závažnosti prietoku a lokalizácie
|
Skupina analyzovaná |
Hodnoty KI-67 |
Spoľahlivosť rozdielov |
|
|
Porovnať Group |
|||
|
Trvanie ochorenia |
p 0 ≤ 0,001 ročník 1 ≤ 0,02 p 0 ≤ 0,001 ročník 1 ≥ 0,05 |
||
|
Prerušenie prietoku stredne ťažký |
p 0 ≤ 0,004 ročník 2 ≤ 0,05 p 0 ≤ 0,004 ročník 2 ≤ 0,02 |
||
|
Lokalizácia lézie distálny obojstranný celkom |
p 0 ≤ 0,002 ročník 3 ≥ 0,05 p 0 ≤ 0,002 ročník 3 ≥ 0,05 |
Poznámky:
- ročník 0 - presnosť rozdielov s kontrolnou skupinou;
- ročník 1 - presnosť rozdielov s trvaním choroby menej ako 1 rok;
- ročník 2 - presnosť rozdielov s miernym priebehom ochorenia;
- ročník 3 - Presnosť rozdielov s distálnou lokalizáciou ochorenia.
Expresia Baxu u zdravých jedincov bola neprítomná v 80% prípadov a v 20% bola zaznamenaná nízka expresia markera. Expresia rea \u200b\u200bbola zaznamenaná v 50% prípadov a bola tiež nízka.
Všetci pacienti v závislosti od trvania ochorenia boli rozdelené do 3 skupín: 1. s trvanie NYM až 1 rok, 2. s trvaním 1 až 5 rokov a 3. - viac ako 5 rokov.
Z tabuľky, zvýšenie XP Ki-67 v skupine pacientov s dĺžkou liečby ochorenia 1 rok až 5 rokov v porovnaní s 1. skupinou ( ročník ≤ 0,02), môže byť vysvetlená zvýšenou proliferatívnou aktivitou buniek, ktoré odrážajú reparatívne procesy v slizničnej membráne hrubého čreva. Nízka IP KI-67 v skupine pacientov s ulceróznou kolitídou trvaním do 1 roka, ktorá predstavuje 31 (25; 36), môže uviesť výrazný pokles proliferatívnych procesov v črevnej sliznici v debute ochorenia.
V štúdii indikátora p53, v závislosti od trvania ochorenia, vzory expresie tohto proteínu neboli identifikované, ale existuje rozdiel vo expresii tohto markera medzi skupinou zdravých jedincov a skupinou pacientov s a Trvanie ochorenia 1 rok do 5 rokov ( ročník ≤ 0,05) a viac ako 5 rokov ( ročník ≤ 0,03).
Expresia Baxu bola stanovená v povrchovom i glandulárnom územnom epiteli. Bolo zistené, že expresia tohto markera v povrchovom epiteli a epitelové žľazy je takmer rovnaký v každom prípade. Expresia baxu u pacientov s NYAK bol detegovaný v 100% prípadov, štatisticky významné rozdiely v expresii markerov boli identifikované medzi porovnávacou skupinou a chorým NAP ( ročník ≤ 0,01).
Pri porovnávaní intenzity expresie proteánu sa významný nárast zaznamenal s nárastom trvania ochorenia. V porovnávacej skupine sa výrazom rea prejavilo len v izolovaných prípadoch ( ročník ≤ 0,003).
V závislosti od závažnosti klinických prejavov sa NYAK odhalil aj zmeniť PI KI-67 (pozri tabuľku). SP KI-67 sa u pacientov so strednou zobrazovanou formou ochorenia znížil ročník ≤ 0,05) a ťažká forma ( ročník ≤ 0,02) V porovnaní s pacientmi s miernym tokom bol tiež rozdiel medzi skupinou zdravých jedincov a pacientov z akéhokoľvek stupňa závažnosti ( ročník ≤ 0,004).
Zmena expresie markera p53 závisí od závažnosti exacerbácie (12,5% pri svetelnom priebehu; 35,7% s miernou závažnosťou a 50% s ťažkým). Štatisticky významné rozdiely boli získané medzi skupinami zdravých jedincov a pacientmi s noutickými a ťažkými formami ochorenia ( ročník ≤ 0,03).
Bax a RaA boli vyjadrené v 100% prípadov, avšak závislosť intenzity expresie týchto markerov na stupňu závažnosti klinických prejavov NAP nebola detegovaná. Rozdiely sú stanovené vo výraze markerov medzi porovnávacou skupinou a pacientmi s NAP, bez ohľadu na závažnosť klinických prejavov (p \u003c0,01).
Pri analýze závislosti IP KI-67 o lokalizácii zápalového procesu bola odhalená významný nárast expresie markerov v skupine pacientov s NYM v porovnaní so zdravými ľuďmi. ročník ≤ 0,002), Avšak, s porovnávacou analýzou v rámci hlavnej skupiny štatisticky významných rozdielov medzi expresiou markerov a inou lokalizáciou procesu ( ročník ≥ 0,05).
Expresia p53 nebola detegovaná od všetkých pacientov. U pacientov s distálnou kolitídou sa získal pozitívny výsledok len v 20% prípadov, s obojstranným na 18% pacientov. S celkovou léziou čreva bola expresia p53 detegovaná v 100% prípadov ( ročník ≤ 0,03 v porovnaní s distálnou kolitídou). Treba poznamenať, že výraz bol najintenzívnejší v oblastiach s príznakmi epitelu metaplazia.
Intenzita expresie baxu v celkovej skupine kolitídy bola významne vyššia ako pri distálnej kolitíde ( ročník ≤ 0,03).
Expresia REA nebola závisieť od lokalizácie zápalového procesu, ale u pacientov s NYM v porovnaní s porovnávacou skupinou ( ročník ≤ 0,03).
V nešpecifickej ulceróznej kolitíde je proliferatívna aktivita buniek epitelu sliznice sliznice významne nižšia a ukazovatele apoptózy sú vyššie ako v neprítomnosti jeho zápalových zmien.
Zvýšenie trvania non-poradenskej ulceróznej kolitídy je sprevádzaná nízkou proliferatívnou aktivitou epitelu sliznice gumy, ktorá môže zhoršiť jeho opravu.
So zvýšením závažnosti klinických prejavov nešpecifickej ulceróznej kolitídy, nielen zníženie stupňa proliferatívnej aktivity bunkových buniek buniek, ale aj zvýšenie indikátorov expozície apoptózy.
Pri šírení zápalového procesu sa zvýšenie indikátorov apoptózy odhalilo proximálnym sektorom hrubého čreva.
Recenzenti:
Schwartz Yu.g., D.M., profesor, hlava. Katedra terapie fakulty GBOU VPO "Saratov GMU pomenovaný po V.I. Raz-Movsky "Ministerstvo zdravotníctva a sociálneho rozvoja Ruska, Saratov;
Fedorina T.A., D.M., profesor, hlava. Katedra všeobecnej a klinickej patológie: patologická anatómia, patologická fyziológia GBOU VPO "SAMARA Štátna lekárska univerzita" Ministerstva zdravotníctva a sociálneho rozvoja Ruska, Samara.
Práca išla do editora 09.12.2011.
Bibliografická referencia
Markova A.A., Kashkina E.I., Rubtsov V.S., Lyakisheva R.V. Vlastnosti expresie markerov apoptózy a proliferácie u pacientov s nešpecifickou ulcerózou kolitídy // Základné štúdie. - 2012. - № 2. - P. 79-82;URL: http://fundlassard-research.ru/ru/article/view?id\u003d29400 (dátum manipulácie: 07/18/2019). Prinesieme do vašej pozornosti časopisy publikovanie vo vydavateľstve "Akadémia prírodných vied"
CAD (Kaspáza aktivovaná DNázy) na fragmenty vo veľkosti, viacnásobných 180-200 nukleotidov. V dôsledku apoptózy tvorba apoptických televíznych televízorov - membránové vezikuly obsahujúce holistické organely a fragmenty jadrového chromatínu. Tieto teľatá sú absorbované susednými bunkami alebo makrofágmi v dôsledku fagocytózy. Pretože extracelulárna matrica nie je prekvapená bunkovými enzýmami, a to aj pri veľkom počte apoptotických buniek, zápal nie je pozorovaný.
Proces apoptózy je potrebný na fyziologickú reguláciu počtu buniek organizmu, na zničenie starých buniek, na tvorbu lymfocytov, ktoré nie sú reaktívne pre ich antigény (autoantigén), na jesenné odvolanie listov rastlín, pre cytotoxické Účinky vrahov, pre embryonálny vývoj tela (zmiznutie kožných membrán medzi prstami v vtáčich embryách) a ďalších.
Porušenie normálnej apoptózy buniek vedie k nekontrolovanému násobeniu bunky a vzhľadu nádoru.
1. Hodnota apoptózy
Apoptóza je neoddeliteľnou súčasťou životne dôležitých aktivít väčšiny mnohobunkových organizmov. Hrá mimoriadne dôležitú úlohu v rozvojových procesoch. Napríklad končatiny štyri-legged sú položené ako vopotoxické rastú, a tvorba prstov je spôsobená smrťou buniek medzi nimi. Apoptóza už nie je potrebná bunkami, takže chvost tadosatiky v metamorfóze je zničený. V nervovej tkanine stavovcov počas embryonálneho vývoja viac ako polovica neurónov zomrie apoptózou bezprostredne po vzdelávaní.
Apoptóza je tiež súčasťou riadiaceho systému pre "kvalitu" buniek, umožňuje zničiť tie, ktoré sú nesprávne umiestnené, poškodené, nefunkčné alebo potenciálne nebezpečné pre telo. Príkladom je obidva B-lymfocyty, ktoré zomierajú, ak nenesú užitočné receptory antigén-špeciálne receptory alebo niesť autorstvo. Apoptóza tiež zomrie väčšinu lymfocytov atkivanov v infekciách po jeho prekonávaní.
U dospelých organizmov, súčasná regulácia bunkovej proliferácie a apoptózy umožňuje zachovať veľkosť celého jednotlivca a jeho jednotlivých orgánov. Napríklad po spotrebe liečiva fenobarbital, ktorý stimuluje proliferáciu hepatocytov, pečeň sa zvyšuje u potkanov. Ihneď po ukončení pôsobenia tejto látky však všetky extra bunky podliehajú apoptóze, v dôsledku čoho sa veľkosť pečene vráti do normálu.
Apoptóza nastáva, keď bunka "cíti" veľký počet vnútorných škôd, ktoré nemôže byť reparvats. Napríklad v prípade poškodenia DNA sa bunka môže transformovať na rakovinu, takže sa nestane za normálnych podmienok, "cums samovražda". Tiež zomrie apoptózou veľké množstvo buniek infikovaných vírusmi.
2. Značky apoptických buniek
Markery apoptózy
Detekcia fragmentácie DNA v apoptických bunkách s použitím metódy tunelu myšieho tkaniva pečene, jadro apoptických buniek má hnedú farbu, optickú mikroskopiu.
Detekcia fragmentácie DNA v apoptických bunkách s elektroforézou v agarózovom géli. Vľavo: DNA izolovaná z apoptických buniek - videná "DNA Lestenka"; V strede: markery; Podnikanie: DNA kontrolná vzorka zo surových buniek. H4Iie bunková línia (potkany hepatómu), induktor apoptózy - parakvat, vizualizácia s pomocou eretidu bromidu.
Z vyššie uvedených látok: Detekcia kondenzácie a fragmentácie chromatínu natieraním s fluorescenčným farbivom (Hoechst 34580). V strede: Identifikácia fosfátdidylserínu translokácie do vonkajšieho listu PLASMAMAMEMM lakovaním Annexin V. Z nižšieho: Mikrografu apoptických buniek vo svetelnom poli. Bunková línia - Jurkat, Apoptóza induktorov - TRAIL, konfokálny a potencvičilej optickej mikroskopie.
Bunky zomierajú apoptózou, môžu byť rozpoznané množstvom morfologických znakov. Stávajú sa menší a hustší (piknóza), zaokrúhlený a strácajú pseudopodia, cytoskeleton je v nich zničený, jadrová membrána sa rozpadá, chromatín je kondenzovaný a fragmentovaný. Na povrchu bunky sa objavuje veľký počet bublín, ak sú bunky dostatočne veľké, sa rozpadajú do fragmentovaných membrán - apoptických príbehov.
V apoptických bunkách sa vyskytne aj veľký počet biochemických zmien. Konkrétna DNA je rezaná v špeciálnych nukleázach v linkerových oblastiach medzi nukleozómom na fragmentoch rovnakej dĺžky. Preto pri oddelení celého DNA apoptických buniek s použitím elektroforézy môžete pozorovať charakteristický "rebrík". Ďalším spôsobom detekcie fragmentácie DNA je etikety jeho voľných koncov pomocou metódy tunelu ( T. Erminálna deoxynukleotidyl transferáza D U. TP. n. ýka e. Nd. l. ABELING. ) .
Zmeny podstúpia plazmatické membrány apoptichnych buniek. Za normálnych podmienok je negatívne nabitý fosfézid fosfatidylserín obsiahnutý len vo vnútornom (vrátenom do cytozolu) vrstvy, avšak počas apoptózy, "skoky" do vonkajšieho listu. Táto molekula slúži ako signál "jesť ma" pre susedné fagocyty. Absorpcia apoptických buniek indukovala fosfatidylserínu na rozdiel od iných typov fagocytózy nevedie k uvoľneniu zápalu mediátorov. Opísaná zmena v plazmamemme je založená na inom spôsobe identifikácie buniek, ktoré zomierajú apoptózou - anexín V, sa špecificky viaže na fosfatidylserín.
3. Caspaz - mediátory apoptózy
Bunkové systémy, ktoré poskytujú prechod apoptózy podobný všetkým zvieratám, centrom proteínov Kaspaz je pre nich centrálne. Kaspázy sú proteázy, ktoré majú cysteínový zvyšok v aktívnom centre, a znížiť ich substráty na špecifický zvyšok kyseliny asparágovej (teda názov: c. z cysteín. a asp. z kyselina asparágová. ). Kaspázy sa syntetizujú v bunke vo forme neaktívneho tekutiny, ktorá sa môže stať substrátmi pre iné už aktivované kaspy, ktoré ich odrezajú na jednom alebo dvoch miestach na absolútny zvyšok. Dva sú tvorené fragmenty - väčšie a menšie - vzájomne prepojené vytvorením diméru, ktorý spája s rovnakým stmievačom. Týmto spôsobom vytvoril tetramér je aktívna proteáza, ktorá môže znížiť proteíny substrátov. Okrem oblastí zodpovedajúcich väčšiemu a menšiemu podjednotke, DAPASIS niekedy tiež obsahovať inhibičné produkty, ktoré sú degradované po štiepení.
V dôsledku rozdelenia a aktivácie niektorých kaspáz sa vytvorí protektická kaskáda, ktorá výrazne zvyšuje signál a robí apoptózu z určitého momentu v ireverzibilnom procese. Tie Penspass, ktoré začínajú túto kaskádu, sa nazývajú iniciatívou a ich sustriaci sú efektor. Po atkivacii môžu efektorové kaspázy rozdeliť iné efektor DAPAPAPA alebo cieľové proteíny. Pred cieľmi efektorových kaspáz, ktoré sú zničené počas apoptózy, zahŕňajú najmä proteíny jadrových lamínín, ktorých zoznam vedie k rozpadu tejto štruktúry. Tiež degraduje proteín, za normálnych podmienok potláča CAD endonukleázy, v dôsledku toho začína fragmentácia DNA. Kaspázy a cytoskeletné proteíny a intercelulárna adhézia sa štiepia, ako výsledok, ktorého sú apoptické bunky zaoblené a odpojené od susedných buniek, a tak sa uľahčujú cieľ pre fagocyty.
Sada kaspáz potrebných na prechod apoptózy závisí od typu tkaniny a dráhu, cez ktorú je aktivovaná smrť buniek. Napríklad u myší s "vypínaním" génového kódujúceho efektorové kaspy-3 sa apoptóza nevyskytuje v mozgu, ale normálne prúdi v iných tkanivách.
Gény HamSpaz sú aktívne v zdravých bunkách, a preto sú proteíny potrebné na trysky prúd apoptózy, len ich aktivácia je potrebná na spustenie bunkovej samovraždy. Trieda iniciátora zahŕňa dlhodobý obsah obsahujúci kartu ( kaspasová náborová doména. , Doména príťažlivosti CasPAZ). Karta umožňuje, aby bol iniciátorom tempo pripojený k adaptérovým proteínom, ktorý tvorí aktivačné komplexy, keď bunka prijíma signál, ktorý stimuluje apoptózu. V aktivačných komplexoch sú viaceré molekuly triedy priamo blízko seba, čo postačuje na prechod na ich aktívny stav, po ktorom sa navzájom rezajú.
Dvaja sú lepšie študované signalizačné dráhy aktivácie kaskádovej kaskády v cicavčích bunkách sa nazývajú externé a vnútorné (mitochondriálne), každý z nich používa svoju vlastnú iniciatívu.
4. Spôsoby aktivácie apoptózy
4.1. Externá cesta
Bunka môže prijímať apoptózu indukovanú signálom, zvonku, napríklad z cytotoxických lymfocytov. V tomto prípade je aktivovaná takzvaná externá cesta ( vonkajšia dráha. ), Počnúc receptormi smrti. Smrť receptory sú transmembránové proteíny patriace do rodiny receptorov faktora nádorového nekrózy (FNO), napríklad samotný receptor FNF a receptorom Smrť FAS. Tvoria homotriméry, v ktorých má každý monomér extracelulárnu doménu pripojenú na ligand, transmembránovú doménu a cytoplazmatickú doménu smrti, prostredníctvom adaptérových proteínov láka a aktivuje daspléziu.
Ligandy receptorov smrti sú tiež homotrim. Sú to príbuzní medzi sebou a patria do rodiny signálnych molekúl faktora nekrózy nádoru. Napríklad cytotoxické lymfocyty sa prenášajú na jeho povrchu ligandov FAS, ktorý môže byť spojený receptormi Smrť FAS na plazmatickom melónii cieľových buniek. V tomto prípade sú intracelulárne domény týchto receptorov spojené od proteínu adaptéra ( FADD, FAS-asociovaná doména smrti ) A zase priťahujú iniciátor DASPASASE 8 a / ALEBO 10. V dôsledku tejto série udalostí je vytvorený signálny komplex vyvolaný smrťou - disk ( sIGNUTOVANÝ SIMPRETING SIGNATION ). Po aktivácii v tomto komplexe sa kazeta iniciátora zníži efektor DAPASSE a spustí apopticky kaskádu.
Mnohé bunky syntetizujú molekuly do určitej miery chráni ich pred aktiváciou vonkajšej cesty apoptózy. Príkladom takejto ochrany môže byť expresia takzvaných receptorov návnadu ( receptory. ) Mať extracelulárne ligandové väzbové domény, ale nie cytoplazmatické živice domény, a preto nemôže spustiť apoptózu a konkurovať konvenčným receptorom smrti pre ligandy. Bunky môžu tiež produkovať proteíny, ktoré blokujú vonkajšiu cestu apoptózy, napríklad flip, podobne ako štruktúra rozbočovačov 8 a 10, ale nie proteíny. To potláča viazanie hrotov iniciátora s komplexom disku.
4.2. Vnútorný spôsob
Apoptosoma
Apoptóza môže byť tiež spustená z vnútra bunky, napríklad v prípade poškodenia, poškodenia DNA, nedostatok kyslíka, živín, alebo extracelulárne signály prežitia. U stavovcov, táto signálna dráha sa nazýva vnútorná ( vnútorná dráha. ) Alebo mitochondriálne, kľúčová udalosť v ňom je uvoľňovanie určitých molekúl s medzimembránovým priestorom mitochondrií. K takýmto molekulám ZOKREMA, ponáhľať cytchrome c, oholenie myseľ zvitch, aby vstúpil do Lancer Elektron-transport Lancer MіTOHONDRONY, protsty na cytoplazme vikonuє inthu funkіyu - s cieľom adaptér bіlkapa apaf ( apoptotická proteáza Activing Faktor-L ), Čo spôsobuje, že oligomerizácia kolesa je zvýšená konštrukcia nazývaná apoptozóm. Apoptosoma priťahuje a aktivuje iniciátorové čerpadlo-9, ktoré potom môže aktivovať iniciátor čerpadla.
V niektorých bunkách by externá dráha apoptózy mala aktivovať vnútornú, aby sa účinne zničila bunka. Vnútorná cesta je prísne regulovaná rodinnými proteínmi BCL-2.
4.2.1. Nariadenie vnútornej cesty proteínom rodiny Bcl-2
Rodina BCL-2 zahŕňa evolučné konzervatívne proteíny, ktorého hlavnou funkciou je regulácia uvoľňovania cytochrómu C a iných molekúl z cieľového mitochondriálneho priestoru. Medzi nimi existujú pro-apoptické a anti-apoptické molekuly, ktoré môžu vzájomne pôsobiť v rôznych kombináciách, navzájom sa potláčajú, rovnováhu medzi ich aktivitom a určiť osud bunky.
Teraz známe asi 20 bielkovín z tejto rodiny, všetky obsahujú aspoň jednu zo štyroch štyroch alfa špirálových domén homológie BCL2, nazývanej BH1-4 ( homológia BCL2 ). Antipoptické proteíny rodiny BCL2 obsahujú všetky štyri domény, zahŕňa samotný Bcl-2, ako aj BCL-X L, Bcl-W, MCL-1 a A1. Proteíny Pro Papoptichny sú rozdelené do dvoch skupín, z ktorých prvé skupiny obsahujú tri BH-domény (BH1-3), toto najmä BAK, Bax a BOK (Ten je vyjadrený len v tkanivách reprodukčných orgánov). Najpočetnejšou z rodiny BCL-2 je druhá skupina pro-apoptických proteínov, ktoré obsahujú iba doménu BH3 (len BH3), zahŕňa BIM, BID, BAD, BIK / NBK, BMF, NIX / BNIP3, HRK, NOXA, PUMA.
Za normálnych podmienok (tj keď bunka neprechádza apoptózu) anti-apoptických proteínov, ako je Bcl-2 a Bcl-x L, sú spojené s proteínmi BH123 (Bax a BAK) proteíny a neumožňujú im Polymerize vo vonkajšej membrány mitochondrie tvoriace póry. V dôsledku pôsobenia určitého apoptického stimulu v bunke v bunke alebo začína syntetizovať proapoptický proteíny obsahujúce iba doménu BH3. Na druhej strane inhibujú anti-apoptické proteíny, odstránia represívny účinok na BAK a Bax, alebo priamo interagovať s touto skupinou a prispievať k ich oligomerizácii a tvorbe pórov. Vzhľadom k permeoabilizácii vonkajšej membrány v cytosolu, cytochrómu C, ako aj iných mediátoroch apoptózy, ako je AIF (ENG. faktor indukujúci apoptózu ).
Napríklad, s nedostatkom prežitie signálov v bunke prostredníctvom mediácie map-kinázy JNK, je aktivovaná expresia BIM proteínu, ktorá uvádza vnútornú cestu apoptózy. V prípade poškodenia DNA sa akumuluje supresor nádorov p53, čo stimuluje transkripciu génov kódujúcich proteíny BH3 PUMA a NOXA, ktoré tiež poskytujú prechod apoptózy. Ďalší BH3 proteín - BID poskytuje prepojenie medzi vonkajšími a vnútornými cestami apoptózy. Po aktivácii receptorov smrti a ako výsledok kaspázy-8, tieto zníži ponuku na vytvorenie skrátenej tvary tvaru (skrátená ponuka), ktorá sa pohybuje do mitochonium, ktorý potláča Bcl-2.
Bunkové rozdelenie ako celok je dostatočne monotónny proces nazývaný bunkový cyklus. Má veľký počet "kontrolných bodov", v ktorých sa vykonáva kontrola prechodu bunky z jednej fázy cyklu k druhému. Zničenie jedného alebo viacerých "kontrolných bodov" môže viesť k neopravovanej proliferácii a smrti buniek, najmä apoptózy. Morfologický obraz apoptózy so všetkými charakteristickými znakmi (chromatozátou, nedostatočná zápalová reakcia, bunkový kanibalizmus atď.) Bol opísaný L. Graper a nazýva sa "fyziologická eliminácia buniek". V roku 1971, J. Kerr navrhol termín "apoptózu" (z Lat. Aro - C, ptoóza - pád) analógiou s pádom zo stromu, potom tam sú listy. Pre apoptózu sa izolujú tri fázy - čoskoro (zníženie veľkosti buniek, fragmentácia DNA na veľké fragmenty), medziprodukt (ďalšia fragmentácia DNA) a neskoré (apoptotické príbehy). Apoptóza hrá dôležitú úlohu pri rozvoji ľudskej placenty. S priebehom tehotenstva existuje zvýšenie apoptotických zmien v normálne fungujúcej placenty.
Termiz et al.
Vo svojej práci sa ukázalo, že apoptóza bola zapojená do mechanizmov fyziologickej regulácie vaskulogenézy placenty. Začnete 21. deň tehotenstva a zahŕňa vznik hemangioblastov a angiogénnych bunkových ostrovov. Vaskulogenéza placenta sa skúmala s použitím histologických (prípravkov natretých hematoxylínom a eozínom), imunohistochemickou (detekciou CD31), molekulárne genetické (CD31-tunel - TDT-sprostredkované X-DUTP Nick End Enhearing Enhtiment Lettering etikety) a prenosovej elektrónovej mikroskopie. Štúdia ukazuje, že v angiogénnych bunkových ostrovoch neexistujú žiadne CD31-pozitívne bunky. V bunkách primitívnych kapilár a v množstve stromálnych buniek umiestnených medzi vaskulickými oblasťami sa odhalila expresia CD31. V morfologickom vyšetrení liekov natretých hematoxylínom a eozínom v týchto bunkách identifikovali príznaky apoptózy - karyopické a apoptotické príbehy. Stupeň závažnosti apoptózy a vaskulogenézy v placenty bol priamo úmerný.
Úroveň apoptózy sa zvýši o porúch tehotenstva, ako je potrat v skorých obdobiach, ektopické tehotenstvo, preeklampsia.
Proliferácia a diferenciácia cytotrofoboblastov a vývoja ciev v strómovi Vorsin si vyžadujú primerané na zaistenie kyslíka a živín získaných z intervalového priestoru. Medzi komplikácie tehotenstva je oneskorenie vnútromaternicového vývoja jedným z popredných príčin perinatálnej mortality. Porušenie úpravy apoptózy vedie k zníženiu počtu buniek sycitiotopoblastov, čo znamená pokles prietoku živín do plodu a na oneskorenie intrauterinného vývoja plodu. Levy et al. Pripojte oneskorenie intrauterského vývoja s preeklampsie a tabakom - stavmi, ktoré vedú k kyslíkovému hladu placenty tkaniny. V práci S. Y. Dai et al. Skúmala sa placenta žien bez zlých návykov a gestiózy, ale kto mal oneskorenie v rozvoji intraterinského ovocia. Autori naznačujú, že apoptotické zmeny placenty buniek v hladení kyslíka môžu byť regulované faktormi aktivovanými v hypoxie (faktor indukovatého hypoxiu), - HIF-LA, HIF-2A, HIF-1 P.
HIF-1 je hlavným faktorom, ktorý zabezpečuje prispôsobenie buniek hypoxie.
Môže zmeniť expresiu radu génov zodpovedných za erytropoes, glykoliz a angiogenézu. Zatiaľ čo HIF-LP heterodimér sa deteguje vo všetkých bunkách placenty za akýchkoľvek podmienok, HIF-LA sa deteguje len hypoxiou. Menej často v podmienkach hladom o kyslíku v bunkách sa deteguje HIF-2a, tiež známy ako EPAs-1. HIF-LA a -2A mRNA sa deteguje v platnike počas tehotenstva, ale úroveň z nich sa výrazne líši v závislosti od obdobia tehotenstva. Ak úroveň HIF-la mRNA zostáva konštantná, úroveň HIF-2A mRNA sa zvyšuje s priebehom tehotenstva. Naproti tomu HIF-la HIF-2A je vyjadrený hlavne v endotelových bunkách, čo hrá dôležitú úlohu v angiogenéze a hematopoéze. V ľudskej placente je expresia HIF-LA a HIF-2A maximálne vyjadrená v skorých termínoch, čo zabezpečuje stabilitu buniek fyziologickej hypoxie, ktorá sa uskutočňuje v tomto období tehotenstva. Okrem toho sa na preeklampsi zaznamenalo zvýšené vyjadrenie týchto faktorov.
Dôsledkom stimulačného vplyvu týchto faktorov na apoptózu je oneskorenie v intrauterinnom vývoji plodu.
Takže v štúdii S. Y. Dai et al. Apoptotický index v dedine SyncytoTotopoblasty bol 1,45 + 1,26% v skupine s oneskorením intrauterinového vývoja a 0,18 ± 0,16 - v kontrolnej skupine, kde neboli pozorované oneskorenia intrauterinného vývoja ovocia
Súčasne boli makroskopicky detekované srdcové infarkty výrazne častejšie zaznamenané v placentách skupiny s oneskorením intraterínového vývoja (50%) ako v kontrolnej skupine (22%). Stupeň depozície fibrinoidov v intervalovom priestore bol tiež o niečo vyšší v skupine s oneskorením intrauterinového vývoja. Mitotická aktivita prvkov trofoblastov a krvných buniek a krvných ciev v čase tehotenstva 6 a 12-14 týždňov boli študované Choriencou et al. Autori zaznamenané v období tehotenstva 6 týždňov prítomnosť obrázkov mitózy a prítomnosť CD67-pozitívnych jadier v cytotrofoboblastových bunkách a erytroblastoch. V cytotrofumfulast sa počet KI67-pozitívnych jadier znížil o 12-14 týždňov tehotenstva, pričom sa zachovala len v bunkových ostrovoch extravorillest cytotrofoboblasti. V erytroblastoch sa KI67 už nezistí do tohto obdobia. V endotelových bunkách v 6 týždňoch tehotenstva, mitotických obrázkov a expresia KI67 boli neprítomné, Letin UEAA1 sa odhalil v 12-14 týždňoch tehotenstva. Nedostatok obdobia tehotenstva 6 týždňov mitotických obrázkov a expresie KI67 v bunkách endotelu a perivaskulárnych buniek indikuje priamu závislosť vaskulogenézy z stromálnych buniek a vo väčšej miere ako z trofoblastov.
Kontrola nad bunkovým cyklom eukaryotických buniek sa uskutočňuje rodinou kinázy, najmä kináz závislých od cyklínu. Z prvého trimestra tehotenstva v jadrách cytotrofoboblastov a endotelínov plavidiel v susedí s ním sa deteguje cyklín D1, ktorej expresia je postupne rastú až do tretieho trimestra tehotenstva. CDK4 sa deteguje v kódoch cytotrofoboblastov v prvom aj v treťom trimestri tehotenstva, zatiaľ čo bunky pozitívne na šťavy endotelu sú uvedené len na konci tretieho trimestra. To naznačuje, že komplex D1 / CDK4 je zapojený do regulácie proliferácie buniek cytotrofoboblastov v priebehu tehotenstva a pri kontrole nad angiogenézou - v treťom trimestri tehotenstva. Poruchy endokrinnej, imunologickej rovnováhy, akumulácia voľných radikálov vedie k zvýšeniu apoptózy v tkanivách placenty. Tak, počas preeklampsie, diferenciácie cytotrofoboblastov a procesu jeho invázie v maternici, ktorý je do značnej miery spôsobený apoptózou. Je známe, že apoptóza je oveľa častejšia v zrelej platnii počas tehotenstva, komplikovaný rast oneskoreného fetálu a v regulácii tohto procesu, hlavná úloha hrá proteín p53 a proteín sa na ňom nezúčastňuje. Početné štúdie označujú hyperexpresiu p53, a teda k zvýšeniu apoptotických buniek v cytotrofumfumlastov v chorioncarcinómom a bublinovom drifte.
