Imunoblotiranje (imunoblot) je vrlo specifična i vrlo osjetljiva referentna metoda koja potvrđuje dijagnozu za bolesnike s pozitivnim ili nesigurnim rezultatima dobivenih analiza. Pomoću RPGA ili IFA .

Ova metoda detektiranja antitijela na pojedinačne patogene antigene temelji se na formulaciji ELISA na nitroceluloznim membranama, koji su u obliku odvojenih traka skloni specifičnim proteinima odvojenim gel elektroforezom. Ako postoje antitijela protiv određenih antigena - tamna linija pojavljuje se u odgovarajućem strister strister. Jedinstvenost imunoblota sastoji se u visokoj informativnosti i pouzdanosti dobivenih rezultata.

Materijal za istraživanje Je serum ili krvna plazma. Učiti na istoj traci, potrebno je 1,5-2 ml krvi ili 15-25 ul seruma.

Prema tome tko je preporuka, imunobloting (zapadni blot) koristi se u dijagnostici HIV infekcije kao dodatna stručna metoda, koja mora potvrditi rezultate ELISA-e. Obično ova metoda ponovno provjerava pozitivan rezultat za ELFA, jer se smatra osjetljivijim i specifičnijim, iako složenije i skuplji.

Imunološka blot kombinira imuno-imunikalnu analizu (ELISA) s preliminarnim elektroforetskim odvajanjem virusnih proteina u gelu i njihovom prijenosu na nitroceluloznu membranu. Postupak imunoblota sastoji se od nekoliko faza. Prvo, prethodno pročišćeni i uništeni kompozitnim komponentama HIV-a podvrgnuti su elektroforezi, dok su svi antigeni uključeni u virus odvojeni molekulskom težinom. Zatim se metoda blotiranja antigena prenosi s gela na traku nitroceluloze ili najlon filter, koji od sada sadrži nevidljivi spektar proteina karakterističnih za HIV. Nadalje, materijal (serum, krvna plazma pacijenta, itd.) Nanosi se na traku, a ako postoje specifična antitijela u uzorku, oni su povezani s strogo odgovarajućim trakama proteina-antigena. Kao rezultat naknadnih manipulacija (slično IFA), rezultat ove interakcije se vizualizira - to je učinjeno vidljivom. Prisutnost bendova na određenim dijelovima trake potvrđuje prisutnost antitijela u ispitivanom serumu na strogo definirane HIV antigene.

Imunološka blot se najčešće koristi za potvrdu dijagnoze HIV infekcije. Tko razmatra pozitivne serume u kojima se imunološka blot detektiraju antitijela na bilo koji dva proteina HIV-ovih ljuske. Prema ovim preporukama, ako postoji reakcija sa samo jednim od bjelančevina ljuske (GP160, GP120, GP41) u kombinaciji ili bez reakcije s drugim proteinima, rezultat se smatra upitnim i ponovno ispitivanjem pomoću seta drugog serija ili druge tvrtke. Ako, nakon toga, rezultat ostaje sumnjiv, istraživanje se nastavlja svaka 3 mjeseca.

Značajka

Imunoblot analiza je pouzdana metoda koja vam omogućuje da odredite prisutnost antitijela na HIV antigene prvog i drugog tipa. Ako je osoba zaražena, antitijela koja se mogu otkriti i kasnije se pojavljuju u dva tjedna. Značajka HIV-a je da se količina antitijela brzo povećava i sačuva se u krvi pacijenta. Čak i ako su prisutni, bolest se ne može manifestirati u roku od dvije ili više godina. ELISA metoda ne uvijek točno određuje prisutnost bolesti, stoga potvrdu rezultata koji koriste imunoblotiranje i PCR, ako je imunoasimenzionalna analiza pokazala pozitivan rezultat.

Oznaka za imenovanje

Što je to "imunoblot" već saznao, ali tko propisuje ovu studiju? Razlog za prolazak testova za virus imunodeficijencije (HIV) metodom imunoblovstva postaje pozitivan rezultat ELISA-e. Potrebno je proći kroz analizu imunofermenata pacijentima koji će biti operirani. Osim toga, potrebno je napraviti analizu žena koje planira trudnoću, kao i svatko tko vodi neuredan seksualni život. Pacijenti s imunoblotiranjem s HIV-om, ako rezultati IFA uzrokuju sumnje.

Sljedeći uznemirujući simptomi mogu postati razlog za privlačenje liječniku:

• oštri gubitak težine;
• slabost, gubitak uspješnosti;
• crijevni poremećaj (proljev), koji se nastavlja tri tjedna;
• dehidracija tijela;
• groznica;
• povećanje limfnih čvorova na tijelu;
• razvoj kandidijaza, tuberkuloze, upale pluća, toksoplazmoza, pogoršanje herpesa.

Pacijent ne mora biti spreman prije predaje venske krvi. 8-10 sati prije nego što se studija ne može jesti. Ne preporučuje se dan prije nego što se krv daje za korištenje alkoholnih i kave pića, uključite se u teške vježbe, mašući uzbuđenje.

Kako je studija?

Sa stajališta pacijenta, imunoblot se ne razlikuje od bilo koje druge analize: uzima se venska krv, rezultat se istražuje i rezultat. Ali ako idete malo više detalja, to nije jako jednostavno, ali još uvijek pokušati shvatiti.

U početku, u postrojenju reagensa, uzima se "referentni" virus ljudske imunodeficijencije. Zatim uz pomoć posebnog postupka (elektroforeza) u gel okruženju, virus se uništava do najmanjih komponenti: proteini (virusni antigeni). Zatim, uz pomoć upijanja (s engleskog), čestice se stavljaju na poseban materijal - nitroceluloza ili najlon filter, indikator je spreman za uporabu, tzv. Traka je traka u kojoj se antigeni distribuiraju ovisno o njihovoj molekularnoj težini, u jasnom slijedu, to jest, svaki milimetarski papir odgovara određenom proteinu.

Kao što svibanj znati postoji li virusi u krvi osobe, tijelo počinje proizvoditi antitijela protiv svojih školjki (definiranih proteina) antitijela, a što za svaki virus ima svoj pojedinačni antigen protein set. Identifikacija antitijela za antigene proteine \u200b\u200bu krvi temelj je imunoblot metode. Uostalom, ako se antitijelo suočava s antigenom, oni svakako komuniciraju jedni s drugima - "štap".

Dakle, antigeni su na traci s trakom i, u slučaju prisutnosti u krvi temeljnih prikladnih antigena, oni nužno djeluju jedni s drugima, i na ovom mjestu, na traci s trakom, pojavit će se indikator - stan (kao test trudnoće) pojavit će se. I na određenom mjestu trake, tako će liječnik razumjeti postoji li set proteina karakterističnih za određeni virus u krvi.

Dakle, na primjer, ako postoji zamračeni centar na mjestu proteina gP160, GP120, GP41hIV se dijagnosticira, za druge viruse bit će potpuno drugačiji skup proteina.

Treba napomenuti da vam imunoblot omogućuje da točno utvrdite prisutnost virusa samo ako je skup antitijela u krvi dovršen, to jest, ako su proteini GP160, GP120, GP41 prisutni u isto vrijeme, onda je 100 % HIV infekcije. Ali ako barem jedan nije, na primjer: GP41 je odsutan, a postoji samo GP160, GP120, zatim se test smatra sumnjivim i zahtijeva ponoviti.

Pitanja

Koje faze uključuju imunoblot?

1. Priprema trake.Pre-pročišćeni i uništeni na kompozitne komponente, imunodeficijencija (HIV) podvrgava se elektroforezi, dok su antigeni uključeni u HIV odvojeni molekulskom težinom. Zatim se blotiranjem (analog ekstruzije na "mokro" višak tinte) prenose na nitroceluloznu traku, koji od sada sadrži nevidljivu sliku antigenske trake spektra karakteristike HIV-a.
2. Uzorak studija.Ispitni materijal (serum, krvna plazma pacijenta, itd.) Nanosi se na nitroceluloznoj traci), a ako postoje specifična antitijela u uzorku, oni su povezani s strogo odgovarajućim njima (besplatne) antigenske trake. Kao rezultat naknadnih manipulacija, rezultat ove interakcije se vizualizira - to je učinjeno vidljivom.
3. Tumačenje rezultata.Prisutnost bendova u određenim područjima nitroceluloznog ploča potvrđuje prisutnost u ispitivanoj serumi antitijela na strogo definirane HIV antigene.

• Strip a - pozitivna kontrola
• Traka u - slabo-krevet kontrola
• Strip c - negativna kontrola
• Strip D je pozitivan uzorak (otkrivena je prisutnost antitijela za HIV-1)

Kako dešifrirati analizu?

Ako je IFA pokazala prisutnost svih ili gotovo svih antitijela prema ovom ispitnom sustavu, to znači pozitivnu HIV analizu. Ako je odgovor nakon drugog serološkog imunološki analiza pozitivan, onda je imunoblot treba provesti. Dekodiranje njegovih rezultata bit će točnije. Ako je enzimska imunozna analiza dala pozitivan rezultat, sljedeća analiza imunoblota također je pokazala HIV, a zatim je postavljen konačni rezultat.

Kada su analize dešifrirane, potrebno je znati da je pozitivan HIV test određen:

• od 60% do 65% 28 dana nakon infekcije;
• u 80% - nakon 42 dana;
• 90% - nakon 56 dana;
• 95% - nakon 84 dana.

Ako je primljen pozitivan HIV odgovor, to će značiti da se otkriju antitijela na virus. Da biste izbjegli lažno pozitivan odgovor, morate ponovno proći analize, to je poželjno dvaput. Ako se antitijela na imunodeficijenciju otkriju tijekom isporuke dvije analize od dvije ili s predajom 3 testova u 2 od njih, smatra se da je rezultat pozitivan.

Antigen R 24 može se otkriti u krvi nakon 14 dana od datuma infekcije. Koristeći metodu imununulalne analize, ovaj antigen se detektira od 14 do 56 dana. Nakon 60 dana više ne postoji u krvi. Tek kada se u tijelu formira AIDS, rast ovog proteina p24 u krvi se ponavlja. Stoga se ispitni sustavi analize imunoperacije koriste za otkrivanje HIV-a u prvim danima infekcije, bilo kako bi se utvrdilo kako se bolest dođe i pratiti postupak liječenja. Visoka analitička osjetljivost imunopermentalne analize detektira antigen p24 u biološkom materijalu u HIV prvog podtipa u koncentraciji od 5 do 10 pkg / ml, s drugim podtipom HIV od 0,5 ng / ml i manje.

Pod, ispod sumnjiv Rezultat imuno-enzimske analize je značilo da je tijekom dijagnoze negdje pogrešno umiješano, medicinski radnici su nešto zbunili, ili u ljudi postoje znakovi infekcije, a rezultat je negativan, što uzrokuje sumnju, osoba je osoba poslan na ponovnu procjenu.

Pod, ispod lažno pozitivan Rezultat je rezultat kada je isporuka krvnih testova napravljena u sljedećim stanjima pacijenta:

• trudnoća;
• ako osoba ima povrijeđenu hormonalnu pozadinu;
• s produljenom imunosupresijom.

Kako dešifrirati analizu u ovom slučaju? Lažni pozitivan rezultat je postavljen ako se otkriva najmanje jedan protein. Zbog činjenice da antigen P24 vrlo ovisi o individualnim varijacijama, zatim upotrebom ove metode, u prvom razdoblju infekcije detektira se od 20% do 30% bolesnika.

Koliko je pouzdan pozitivan rezultat testa?

Ponekad iFA ima lažne pozitivne rezultate (oko 1% slučajeva), uzrok ovog rezultata može biti trudnoća, razne virusne infekcije, kao i jednostavna nesreća. Nakon primitka pozitivnog rezultata, točniji test - imunoblot, na temelju rezultata koji se radi dijagnoza. Pozitivan rezultat imunoblota nakon pozitivne ELISA pouzdan je za 99,9% - to je maksimalna točnost za bilo koji medicinski test. Ako je imunoblot negativan, to znači da je prvi test bio lažno pozitivan, i zapravo HIV kod ljudi.

Što je neodređeni (sumnjivi) rezultat?

Ako je IFA pozitivna ili negativna, onda imunoblot može biti pozitivan, negativan ili neizvjestan. Neodređeni rezultat imunoblota, tj. Prisutnost najmanje jednog proteina u imunoblotu može se promatrati ako se infekcija nedavno dogodila i ima manje antitijela za HIV u krvi, u ovom slučaju imunoblot će postati pozitivan nakon nekog vremena. Također, nedefiniran rezultat može se pojaviti u odsutnosti HIV infekcije u hepatitisu, neke kronične metaboličke bolesti ili tijekom trudnoće. U tom slučaju, ili imunoblot će biti negativan ili će se otkriti uzrok neizvjesnog rezultata.

Koliko je analiza?

Imunoblot na HIV ne odnosi se na jeftinu istraživanja. U prosjeku, pregled ispita s metodama imunoferment košta od 500 do 900 rubalja. Imunoblotting je studija o provjeri, čiji trošak se kreće od tri do pet tisuća rubalja. Složenije metode su mnogo skuplje. Na primjer, za analizu lančane reakcije polimeraze (PCR), bit će potrebno platiti oko 12.000 rubalja.

Gdje napraviti analizu?

Gdje mogu proći na HIV-u? ELISA, Immunoblot istraživanja provodi se u urbanim privatnim klinikama, rezultati se izdaju tijekom dana. Moguća je hitna dijagnostika. U državnim zdravstvenim ustanovama, IFA testovi i imunobloting se obavljaju besplatno, u skladu sa zakonodavstvom Ruske Federacije. U obveznim, trudnice su pregledane za zarazne bolesti, kao i pacijente koji imaju hospitalizaciju ili operativnu intervenciju.

Imunobloting -(S engleskog. "Blot" je mrlja) - način identificiranja antigena (ili antitijela) s poznatim serumima (ili antigenima). To je kombinacija gela elektroforeze iz ELISA-e. U početku se bakterijske stanice ili virioni uništavaju ultrazvukom, a zatim se metoda elektroforeze razdvajaju sve antigene virusa ili bakterijskih stanica i primaju komercijalni reagens na posebnom nitroceluloznom filmu. Prilikom obavljanja imunoblotiranja na filmu s poznatim antigenima primjenjuje se proučavani pacijentni serum. Nakon inkubacije i oplakivanja nepovezanih antitijela, ukrcana je u ELISA - Antiserum se primjenjuje na imunoglobulin osobe, označenog enzimom, i kromogenom supstratom, mijenjajući slika pri interakciji s enzimom. U prisutnosti kompleksa antigen antitijela-antitijela na imunoglobulinski enzim na nosaču, pojavljuju se obojene mrlje. Metoda imunoblotiranja omogućuje vam odvojeno otkrivanje antitijela na razne patogene antigene (na primjer, s HIV infekcijom, imunoblotiranje otkriva antitijela na GP120, GP24 i druge virusne antigene).

Radioimuna analiza (RIA)

Metoda se temelji na reakciji antigena antitijela pomoću oznake antigena ili radionuklida antitijela. Kao oznaka koristi 125i, 14C, 3H, 51CR i druge radionuklide. Dobiveni imunološki kompleksi izolirani su iz sustava i određuju njihovu radioaktivnost na brojačima (β-zračenje). Intenzitet zračenja je izravno proporcionalan broj povezanih molekula antigena i antitijela.

Verzija PEC faze RIA korištenjem obilježenih antitijela ili antigena, sorbed u rupama polistirena panela je raširena.

RIA se koristi za identifikaciju mikroba, virusa, raznih hormona, enzima, ljekovitih tvari, imunoglobulina, kao i drugih tvari sadržanih u materijalu u studiju u manjim koncentracijama 10-12-10-15 g / l.

Kontrolna pitanja

Reakcija imunog bakteriolizacije: što je ova reakcija; Što je antigen koji - antitijela, reakcijski mehanizam, metode formulacije, praktična primjena. Reakcija imune hemolize: potrebne sastojke, postupke formulacije; Kontrole, praktična primjena. Reakcija lokalne hemolize u gelu (reakcija Yerne): načelo reakcije, metode formulacije, praktične primjene. Reakcija obvezujuće komplementa: Princip reakcije; koji se formira u interakciji imunog sera s određenim antigenom; Što se događa s nadopunom ako je prisutno u isto vrijeme? Koja je sudbina komplementa u slučaju da nema specifičnog afiniteta između antigena i antitijela? Uz pomoć koja se reakcija može odrediti ono što se dogodilo s komplementom; zašto se ova reakcija koristi; Što je vidljivi pozitivni rezultat RSK-a? Zašto? Koja je nekretnina komplementa u prvoj fazi RSK-a? U drugoj fazi? Ako je krajnji RSK hemolizu, što to znači - pozitivan ili negativan rezultat? Objasnite rezultate: RSK + + + +, RSK + +, RSK + +, RSK +. Navedite sastojke prvog RSK sustava i sastojke drugog RSK sustava. Zašto bi se testni serum bio inaktiviran? Kako titrirati komplement? Hemolitički serum: Što sadrži, kako oni dobivaju, što je titar i kako to odrediti? Koje se životinje koriste za dobivanje RSK komponenti? Metodologija RSK na hladnoći. Prilikom postavljanja od kojih je od navedenih reakcija potrebno za sudjelovanje komplementa: oborine, flokulacija, aglutinacija, otkrivanje nepotpunih antitijela, imunološka bakteriolizacija, imuna hemoliza, Yerne, RSK? Reakcija imunofluorescencije (greben) - navedite slijed događaja s izravnom reakcijom kunsa; Obavezni sastojci. Što je antigen koji - antitijela od označena antitijela, kao rezultat reakcije uzima se u obzir, kako izgleda pozitivan rezultat? Praktična primjena - Što se može odrediti ovom reakcijom? Neizravna reakcija imunofluorescencije - navedite slijed događaja s ovom reakcijom, potrebne sastojke, koji je antigen, koji se primjenjuju imuni serumi; praktična uporaba; Prednost neizravnog grebena u usporedbi s izravnom reakcijom. Imunoenimenska analiza (IFA) - načelo reakcije; potrebne sastojke; Navedite slijed događaja pri formulaciji reakcije kako bi se detektirali antigen u materijalu u studiju; potrebne sastojke; Što se događa s pozitivnim rezultatom, kako izgleda? Navedite slijed djelovanja prilikom izvođenja ELISA-e kako biste otkrili antitijela u testom serumu; potrebne sastojke; Što se događa s pozitivnim rezultatom? Imunoblotiranje je načelo reakcije; Glavni koraci; potrebne sastojke; Kako se rezultat uzima u obzir; Prednosti reakcije. Radioimuna analiza (RIA) - iz koje je osnovna faza reakcija reakcija; Što je označeno antitijelima ili antigenima, kako se to uzima u obzir? Imunoelektronska mikroskopija - načelo metode; Glavni koraci; potrebne sastojke; nego označena antitijela; Kao rezultat reakcije uzima se u obzir. Reakcije imobilizacije - načelo metode, tehničarske produkcije, komponente, računovodstvene rezultate.

Zadatke za obavljanje u procesu samopouzdanja.

Ispunite tablicu "reakcije imuniteta" u odnosu na reakcije rastavljeni u okviru ove teme.

Reakcije imuniteta

Studentski rad u praktičnoj lekciji

Radite odmah od postavljanja 1 faze RSK, ali za snimanje bilježnice kasnije (vidi dolje).

1. Reakcija imune hemolize. Pogledajte demonstracijska reakcija imune hemolize, skica u obliku sheme, objasnite rezultat u iskusnim i kontrolnim cijevima.

2. Napunite odgovor vezanja

a) rastavljati RSK na stolu;

b) nacrtati u bilježnici koja postavlja shemu RSK u obliku tablice;

c) staviti drugu fazu RSK (prva faza se nalazi na početku razreda);

d) rastavljanje dijagnostičkih pripravaka potrebnih za RSK;

e) uzeti u obzir rezultat. Formulirati zaključak o prisutnosti određenih antitijela u testu serumu.

3. reakcija imunofluorescencije. Istražite tablicu, napravite grafikon formulacije reakcije u bilježnici; Pogledajte dijagnostički serum; Odredite - koji sadrži serum, kao što je kuhano, za koju reakciju (izravni ili indirektni greben) primjenjuje. Pogledajte demonstracijski rezultat grebena u luminescentnom mikroskopu.

4. Analiza imuno enzim (ELISA). U prijenosnom računalu, dijagram reakcije formulacije u dvije verzije: detektirati antigen u materijalu u studiju i detektirati serumska antitijela. Provjerite skup sastojaka za dijagnosticiranje HIV infekcije i hepatitis V. Odredite da sadrži svaki sastojak i za koji se primjenjuje.

5. imunobling. Napraviti reakcijsku shemu u bilježnici; Pogledajte demonstraciju - rezultat reakcije.

6. Radioimuna analiza (RIA). Napravite reakcijsku shemu u bilježnici.

7. Imunološka elektronska mikroskopija (IEM). Pogledajte demonstracije - rezultat reakcije, napravite reakcijsku shemu u prijenosnom računalu, označite rukama antigen (virus) i obilježena antitijela.

Imunoblotiranje je vrlo osjetljiva metoda za detekciju proteina, na temelju kombinacije elektroforeze i ELISA ili RIA. Imunoblotiranje se koristi kao dijagnostička metoda za HIV infekciju itd.

U općem smislu, imunoblotiranje razumije analizu smjese proteina prenesenih u čvrstu podloge-membranu s kojom su povezane s kovalentnim vezama, a zatim imunodekcijom.

Možete analizirati mješavinu proteina koji se izravno primjenjuju na supstrat - dot-blot analizu - ili nakon preliminarne frakcioniranja metodama elektroklopane, diskof-elektroforeze ili dvodimenzionalne elektroforeze - Western blot analize (Western blot).

Antigeni patogena su odvojeni elektroforezom u poliakrilamidnom gelu, a zatim ih prenesite iz gela do aktiviranog papira ili nitrocelulozne membrane i manifestiraju se pomoću ELISA-e.

Tvrtke proizvode takve trake s "mrljicama" antigena. Bolni serum se primjenjuje na te trake. . Zatim, nakon inkubacije, oni su oprali od nereaktivnih antitijela pacijenta i seruma protiv ljudskih imunoglobulina, označenih enzimom . Kompleks (antigen + antitijelo + antitijelo + antitijelo + antigen + antitijelo) se detektira dodavanjem kromogenog supstrata koji mijenja boju pod djelovanjem enzima.

Takva metodologija se također koristi za odabir bakterija, faga ili virusa koji izražavaju ciljane klonirane genske proizvode.

Prijenos proteina po membrani provodi se ili pasivno ili korištenje opreme za električnu energiju. Učinkovitost prijenosa proteina na membranu pod utjecajem mnogih čimbenika, kao što je molekularna težina proteina, poroznost gela, vrijeme prijenosa i sastav korištenog pufera (transfer).

Ovisno o zadacima i uvjetima eksperimenta, odabrani su uvjeti prijenosa koji pružaju najbolje rezultate. Nitrocelulozični, polivinililindiluorid (PVDF) ili pozitivno nabijene najlonske membrane obično se koriste kao supstrati. Nitroceluloza se može vezati na 80 - 100 ug proteina na 1 cm2.

Proteini niske molekularne težine (s molekulskom masom manje od 20 kDa) mogu se izgubiti kao posljedica pranja sposobnosti da prethodno istražuju polimorfizam određenih genetskih lokusa na duljinama odgovarajućih restrikcijskih fragmenata DNA.

Osim toga, koristeći hibridizaciju prema sarewu, lako je saznati je li ciljni gen ima dio hidrolize određenog ograničenja u svom unutarnjem dijelu, koji vam omogućuje da odaberete optimalnu strategiju za kloniranje studiranog područja genoma.

S sličnom shemom agaroznog gela na nitroceluloznom filtru, RNA molekule se mogu prenijeti. Ova metoda je nazvana od strane sjevernog blotting (sjeverni blotting) za razliku od južnog blotting upijaju, budući da prezime južnog jezika znači "jug".

Prijenos na filtre iz proteina gela je pod nazivom Western blotting (Western blot). Veliki proteini (više od 100 kDa), denaturirani u otopini natrijevog dodecil sulfata (SDS), mogu se slabo prenijeti u membranu ako je etanol prisutan u transfektu. Alkohol značajno poboljšava prijenos proteina s poliakrilamidnim gelom SDS, ali sužava pore u gelu, što dovodi do kašnjenja velikih proteina.

PVDF membrana je optimizirana za imunodekciju i može zadržati specifično povezane proteine \u200b\u200bdo 160 ug / cm2 na vrlo niskoj razini ne-specifičnog vezanja.

Imunoblov

Važno vlasništvo ove membrane je mogućnost ponovljene uporabe. Zeta-sonde najlonske membrane učinkovito vežu SDS proteine \u200b\u200bu odsustvu alkohola, a to vezanje je otporno na naknadne tretmane. Proteini niske molekularne težine također se učinkovito detektiraju. Zbog visokog kapaciteta vezanja - oko 480 μg proteina za 1 cm2 - zeta-probne membrane omogućuju otkrivanje tragova proteina u analiziranim mješavinama.

Nakon ispada antigena imobiliziran na membranu, preostali vezni centri blokiraju želatinske otopine ili albumin goveđeg seruma ili obrano mlijeko.

Membrana se zatim inkubira u otopini poliklonskih ili monoklonskih antitijela na anti-gen u studiji. Nakon pranja nevezanih antitijela, membrana se inkubira u otopini sekundarnih antitijela, koji su konjugat enzima alkalnog fosfataze (alkalna fosfataza, AR) ili hrena peroksidaza (hrena peroksidaza, HRP) s anti-ljubavnim antitijelima (koza antitijela na imunoglobulin od Zec, miš ili ljudi) ili proteini (Staphylococcus aureus protein) ili G (protein streptococcus sp.), s visokim afinitetom prema FC području imunoglobulina.

Detekcija obrazovanih imunoloških kompleksa provodi se s kemijskim ili kemijskim putem. Podloge za kemijsku reakciju upotrebom konjugata alkalne fosfataze su 5-brom-4-klor-3-indolilfosfat (BCIP) ili tetrazolij plava (NBT), i kada se koristi konjugate krošnje peroksidaze - 4-klor-1-naftol i vodikov peroksid.

Kao rezultat enzimatskih reakcija na membrani, oslikana traka ili točka se formira na lokaciji lokalizacije antigena antitijela kompleksa.

Osjetljivost ove metode je 100 ghg proteina kada se koristi AR i 100-500 GH konjugata pri korištenju HRP konjugata. Kemiluminiscentna detekcija imunih kompleksa omogućuje vam da odredite manje od 5 PG antigena. Načelo ove metode leži u činjenici da je s HRP reakcijom s vodikovim peroksidom i cikličkim diacilhidrazinimuminolom, emisijom svjetla valne duljine 428 nm, što se može pričvrstiti na fotosenzitivni film.

Imunoblotiranje reakcija (RI) razvija se na temelju ELISA. To je najspecifičnija i osjetljivija metoda imunokemijske analize. Imunoblotiranje (s engleskog blot - sjaj, mrlje) kombinira IFA s elektroforezom. Koristi se za identifikaciju nesloženih antitijela za HIV, i antitijela na njegove odvojene strukturne proteine \u200b\u200b(proteini-P24, glikoprotein-GR120, GR 41, itd.). Pogledajte Expert (podržavanje) reakcije dijagnoze HIV infekcije.

Reakcija se provodi u nekoliko faza:

Virus uništava komponente - antigeni (P24, GR120, GR 41, itd.), Koji su podvrgnuti elektroforezi u poliakrilamidnom gelu, to jest, odvajanje antigena na frakcijama molekularne težine.

2. Gel je prekriven nitroceluloznom membranom i frakcije antigena se prenose na njega pomoću elektroforeze. Nitroceluloza se ponaša kao papir za zalijevanje. Membrana je rezana na trakama (trake). Tvrtke proizvode takve trake s "mrljicama" antigena.

Imunoblotiranje - dodatna neizravna metoda

STREAPS s HIV antigenima raspoređenim na njemu su uronjeni u serum ispitanog i zatim isprati od nepristranog materijala.

4. STREAPS se inkubiraju s antihilobulinskim serumom, označenom peroksidazom, ispere.

Dodan je supstrat i broj obojenih frakcija (mrlja), koji odgovaraju zoni lokalizacije AG-as kompleksa, zabilježen je.

Prisutnost bendova na određenim dijelovima trake potvrđuje prisutnost antitijela u ispitivanom serumu na strogo definirane HIV antigene. Rezultat imunoblovstva smatra se pozitivnim ako membrana pokaže bendove koji odgovaraju bilo koje dvije od tri HIV antigens - p24, GP41 i GP 120 (Sl. 37).

Slike

Popis rabljene literature

Glavna literatura

Medicinska mikrobiologija, virologija i imunologija: udžbenik za studente meda. Sveučilišta 2. Ed., Sveučilište. i dodajte. - 702 str. Ed. A.a. Vrabac. M.: Mia, 2012.

2. Mikrobiologija, virologija i imunologija: Priručnik za laboratorijske klase: Studije. Žrtve / (v.b.subacov, itd.); Ed. VB Subachakova, M.M. Karapetsa. - m.: Gootar Media, 2014.- 320h.: Il.

3. Medicinska mikrobiologija, imunologija i virologija [elektronički resursi]: Tutorial za med.

sveučilišta - 760 str. - Pristupni način rada: http://www.studmedlib.ru/book/isbn9785299004250.html kijiyev a.i., babichev s.a. St. Petersburg: speclit, 2010.

4. Medicinska mikrobiologija, virologija i imunologija [elektronički resursi]: Tutorial: u 2 t. / T. 1. - 448 str. - Pristup način: http://www.studmedlib.ru/book/isbn97859704142241.html Zverev V.V., Boychenko M.N.

M.: Gootar Media, 2010.

5. Medicinska mikrobiologija, virologija i imunologija [elektronički resursi]: Tutorial: 2 tona. T. 2. - 480 str. Način pristupa: http://www.studmedlib.ru/book/isbn97859704142242.html Zverev V.V., Boychenko M.N. M.: Gootar Media, 2010.

dodatna literatura

1. Immunodiagnostičke reakcije: Tutorial / Cijena: G. K. Davlentin, Z.G. Gagabidulin, a.a. aahtarieva, m.m.tuigunov, A.K. Bulgakov, T.A. Savchenko, R.F.

HUSNARIZANOVA, YU.Z. Gabidullin, M.M. Elsynbaev - UFA: izdavačka kuća GBOU VPO BGMU Ministarstva zdravstva Rusije, 2016. - 86c.

2. Značajke nekih nekretnina koje određuju patogeni potencijal tvrtke Enterobacter, Citrobacter, Serratia, E. coli, Proteus, Serratia, E. coli, Proteus: Znanstveno izdanje / Yu. Z. Gabidullin, RS Sufiyarov, II Dolgushin - UFA, 2015. - 250 s.

Početna »Imunoblot - što je to? Imunoblot u dijagnostici zaraznih bolesti

Imunoblot - što je to? Imunoblot u dijagnostici zaraznih bolesti

Što je imunoblot? To je uobičajena metoda laboratorijske dijagnostike ljudskih virusnih infekcija. To je jedan od najtočnijih i pouzdanijih načina za otkrivanje HIV-a.

Za pouzdanost, to je još više od enzim-priključenog testa imunosorbent (ELISA). Rezultati imunolot se smatraju nepobitnim i konačnim.

Imunoblot - što je to? Da biste prepoznali osobu HIV, morate proći metodu laboratorijskog testa krvnog seruma za antitijela.

Odjeljci Western blot metode također se nazivaju zapadni blot (zapadni blot). Koristi se za otkrivanje ljudskih virusnih infekcija kao dodatnu stručnu metodu. To je potrebno potvrditi ELISA - laboratorijsku studiju, koja omogućuje određivanje prisutnosti antitijela u HIV u krvi. Imunoblot se odrekao pozitivne Elisa.

Smatra se najosjetljivijim, složenijim i skupim.

Svrha

Što je imunoblot? Ova metoda laboratorijskih testa serumskih testova za prisutnost antitijela na virus.

U tijeku posebnih istraživanja, ukupni virusni proteini u gelu i nitroceluloznim membranama.

Imunoblotiranje (detekcija antitijela u pacijentima u serumu određenim patogenim antigenima)

Dizajniran postupak za zapadnjačke blot dijelove za određivanje HIV infekcije u različitim fazama. U prvoj fazi pročišćeni virus iz sastavnih dijelova podvrgnuti su elektroforezi i antigenima uključenim u njemu podijeljenoj u molekularnu težinu.

Virus ljudske imunodeficijencije pasmine u živim stanicama koje se provode u svojim genetskim informacijama. U ovoj fazi osoba postaje nositelj HIV virusa ako ste zaraženi.

Specifičnosti ove bolesti leži u činjenici da se ne očituje dugo vremena. Virus uništava limfocite, stoga osoba smanjuje imunitet i tijelo ne može se nositi s infekcijama.

Ako je HIV točan i pravodobno tretiran, pacijent će živjeti u dubokoj starosti. Nedostatak liječenja neizbježno dovodi do smrti. Od infekcije, ali bez liječenja, maksimalno razdoblje od najviše deset godina.

Značajka

Analiza imunoblota je pouzdana metoda koja vam omogućuje da odredite prisutnost antitijela na HIV antigene prvog i drugog tipa.

Ako je osoba zaražena, nakon dva tjedna antitijela koja se mogu značajno otkriti. Značajka HIV-a je da se količina antitijela brzo povećava i ostaje u krvi pacijenta. Čak i ako su prisutni, bolest se ne može manifestirati dvije ili više godina. ELISA metoda ne znači uvijek ne ukazuje na bolest koja zahtijeva potvrdu rezultata iz PCR-a i Western blot dijelova, ako je imunoimenzionalna analiza pokazala pozitivan rezultat.

Indikacije K.

Kakvu vrstu "imunoblot" već saznala, ali koja se uvodi u studiju?

Razlog za inspekciju virusa humane imunodeficijencije (HIV) imunoblot će postati pozitivan rezultat ELISA-e. Potrebno je proći kroz solidnu faznu analizu imunoestrata u bolesnika koji moraju imati operaciju. Osim toga, morate napraviti analizu ženske trudnoće, kao i one koji podižu neuredan život. Zapadni blot dijelovi su propisani pacijentima s HIV infekcijom ako su rezultati ELISA sumnjive.

Sljedeći uznemirujući simptomi mogu biti razlog za pristup liječniku: brz gubitak težine; slabost, gubitak funkcija; crijevni poremećaji (proljev), koji traje tri tjedna; dehidracija; groznica; povećanje limfnih čvorova u tijelu; razvoj kandidoze , tuberkuloza, upala pluća, toksoplazmoza, pogoršanje herpesa.

Pacijent ne mora biti spreman prije predaje venske krvi.

8-10 sati prije testa ne jesti. Ne preporučuje se dan prije krvi pijenja alkohola i kave pića, teška vježba, uzimajući uzbuđenje.

Gdje napraviti analizu?

Gdje mogu proći testiranje HIV-a?

ELISA, imunoblot analiza provedena u urbanim privatnim klinikama, rezultati se daju tijekom dana. Moguća je hitna dijagnostika. U javnim institucijama, ELISA medicinske testove i zapadni blot odjeljak besplatno, u skladu sa zakonodavstvom Ruske Federacije.

Obvezna inspekcija na zaraznim bolestima trudnica i pacijenata kojima je potrebna hospitalizacija ili operacija. Kako se događa ova studija?

Kako držati ELISA? Imunoblot pozitivno / negativno potvrđuje ili opovrgne rezultate ELISA-e. Postupak je vrlo jednostavan. Specijalist uzima ogradu venske krvi, potrebno je manje od pet minuta.

Nakon uzorkovanja, mjesto injekcije trebalo bi se dezinficirati i zaglaviti s žbukom. Ograda se provodi na praznom želucu, tako da nakon postupka neće povrijediti da jede gorku čokoladnu pločicu ili slatko toplo piće.

Da biste dobili uputnicu za besplatnu analizu u državnoj medicinskoj ustanovi, morate posjetiti terapeuta.

Općenito, imunoblot se ne razlikuje od ostalih krvnih studija prema ogradi. Metodologija studije je jednostavna. Ako je virus prisutan u krvi osobe, tijelo za njegovo uništenje počinje proizvoditi antitijela. Za svaki virus postoje mnogi protein antigeni. Otkrivanje ovih antitijela temelj je zapadnih dijelova blotskog dijela. Trošak

Koliko analize? Imunoblot HIV odnosi se na jeftina istraživanja.

U prosjeku, metode probira imunoasa je od 500 do 900 rubalja. Zapadne mrlje odjeljaka je proučavanje inspekcije, čiji trošak se kreće od tri do pet tisuća rubalja. Složenije metode su mnogo skuplje. Na primjer, za analizu polimeraze lančane reakcije (PCR), bit će potrebno platiti oko 12.000 rubalja.

Tumačenje rezultata

Najčešći metode dijagnosticiranja HIV infekcije je imuno-himmenzionalna analiza i imunoblot.

Oni su za određivanje antitijela virusu ljudske imunodeficijencije. Infekcija obično potvrđuju dva testa: Provjera i potvrđivanje. Tumačenje rezultata trebalo bi izvršiti liječnik, dijagnosticira i propisuje liječenje. Ako je imunoblot pozitivan, to znači da u ljudskom tijelu virus.

Pozitivan rezultat ne bi trebao biti razlog samo-tretmana, jer svaki pacijent može imati vlastite bolesti bolesti.

Kvalitativna analiza uključuje pregled i certifikaciju. Ako pacijent ne otkrije virus, rezultat pokazuje "negativno". Kada je taj certifikat otkriven, probiranje se provodi dodatna istraživanja. Imunoblot analiza koja potvrđuje ili opovrgne probiranje. Ako se test trake pojavljuju u zamračenju određenih područja (lokalizacija proteina), dijagnosticira se dijagnoza HIV-a.

Ako su rezultati upitni, testovi se provode u roku od tri mjeseca.

Kako bi se spriječila infekcija virusa ljudske imunodeficijencije, moguće je biti u skladu s određenim pravilima: izbjegavajte slučajne seksualne kontakte, koristite kondome kada kontaktirate, ne koristite lijekove.

Ako se bolest otkrije u trudnoj ženi, važno je slijediti preporuke liječnika, ne zaboraviti na testove za prisutnost virusa.

Što je zapadno blot?

Identifikacija proteina srčanih smjesa ili ekstrakata različitih tkiva jedan je od najčešćih zadataka. Koristeći takav alat kao specifična antitijela, možete definirati proučavani protein s minimalnim privremenim i financijskim troškovima.

U metodi Western blotting (Western blot) u prvoj fazi, smjesa proteina se odvoji elektroforezom u prisutnosti natrijevog dodecil sulfata (DSN), zatim prenesen u nitroceluloznu membranu postupkom elektroblotiranja.

Suština ove metode je da se gel nakon elektroforeze postavlja na nitroceluloznu membranu između slojeva filtarskog papira. "Sendvič" sastavljen na ovaj način postavljen je u električno polje, tako da se protein-DSN kompleksi kreću preko ploče ploče i imobilizirani (kao rezultat nespecifične sorpcije) na površini nitrocelulozne membrane.

U vezivanju proteina-DSN kompleksa s nitroceluloznom membranom, sudjeluju u glavnoj sili električne prirode, a ta interakcija je višezača i dovodi do "oblikovanja" proteina na površini membrane. Dakle, nakon električne cijevi, dobivamo gel repliku na nitrocelulozu s proteinima, smještenim na isti način kao u poliakrilamidnom gelu.

Nakon provođenja DSN - elektroforeze, električne staze i sorpcije proteina iz gela na nitroceluloznoj membrani, tercijarna konformacija proteina snažno se mijenja, ako općenito pravilno govori o postojanju tercijarne strukture za proteina nakon takve krute obrade. Stoga se da se za imunokemijsko otkrivanje proteina u studiju, obično se koriste samo mono- ili poliklonska antitijela, specifičnost proteina molekule.

51. Imuno-imunim analiza, imunoblotiranje. Krzno, komponente, upotreba.

Antitijela specifična za konformacijske epitope (ili područja, uključujući inkluziranje kontakata) obično nisu prikladni za uporabu u Western blot metodi.

Nakon prijenosa proteina, membrana se inkubira sekvencijalno s antitijelima specifičnim za protein u studiju, a zatim s sekundarnim antitijelima, specifičnim za FC fragmente primarnih antitijela konjugiranih s enzimom (ili drugim) oznakom (Sl.

1 a). U slučaju kada je oznaka konjugirana izravno primarna, specifična antitijela antigena, sekundarna antitijela nisu potrebna (sl. 1 b). Imuni kompleksi "se manifestiraju" formiraju u lokalizaciji ispitivanog proteina pomoću kromogenog supstrata (ovisno o vrsti oznake).

Osjetljivost i specifičnost metode uvelike ovise o tome koja se antitijela koriste tijekom istraživanja.

Antitijela koja se koriste trebaju biti specifične za jedinstvenu, karakterističnu za proučavani protein aminokiselinske sekvence. Inače, interakcija (posebno u slučaju grubih ekstrakta proteina) antitijela s nekoliko proteinskih molekula je moguća, što će pak dovesti do pojave nekoliko obojenih traka na membrani.

Identifikacija proteina u studiju u ovom slučaju često je teško ili nemoguće uopće.

Drugi važan čimbenik koji treba zapamtiti pri odabiru antitijela je afinitet. Što je veća afiniteta korištenih antitijela, svjetlija i jasnije proteinske trake su postignute, što je viša osjetljivost metode. Kada koristite preosjetljivost od vinafi, moguće je postići osjetljivost od 1 ng, a još više.

Za vizualizaciju rezultata interakcije membrane antigena i antitijela, koriste se sekundarna antitijela konjugirana sredstvima koja mogu dati određeni signal pod određenim uvjetima.

Obično se enzim (peroksidaza ili fosfataza) koristi kao takav agens, proizvod reakcije je obojen i pada na membranu kao netopljivi talog.

Također u ovoj metodi moguće je koristiti fluorescentne oznake.

Sl. 1. shema imunokemijskog bojenja proteina u studiji: a - upotrebom sekundarnih antitijela konjugiranih s oznakom enzima; B - primarno antitijelo izravno konjugirano s enzimskom oznakom.

Protokol:

I. Priprema gela i membrane i proteina

Poliakrilamidni gel nakon elektroforeze postavljen je u pufernoj kupelji u blovit (25 mM Tris, pH 8,3, 192 mM glicina, 10% etanola).

Dvije plahte filter papira, izrezane na obliku kasete za upijaju i navlažene sppuffom za blot, postavljene su na tom dijelu kasete koja će biti adresirana na anodu. Zatim se nitrocelulozna membrana postavlja na filter papir, koji prati mjehuriće zraka između membrane i papira.

Nakon toga, gel treba pažljivo postaviti na membranu, okreće posebnu pozornost na odsutnost mjehurića zraka između gela i membrane. Formiranje sendviča završava dva sloja navlaženog filtarskog papira, koji se stavljaju na površinu gela (Sl. 2). Dobiveni sendvič je stegnut u kaseti i smješten je između elektroda tako da se membrana okrenula s anodom.

Sl. 2. Shema električnih proteina na membrani.

Ii. Električna energija

Proteini električne energije na nitroceluloznoj membrani provode se u puferu koji sadrži 25 mM Tris, pH 8,3, 192 mM glicin, 10% etanola 30-50 min na konstantnom naponu od 100 V.

Električno vrijeme cijevi ovisi o veličini prijenosnih proteina, više proteina, duže se električna bačva provodi. Kvaliteta električne energije i mjesto proteinskih bendova procjenjuje se, bojeći se nitroceluloznu membranu s 0,3% otopinom PONCEAA S u 1% octenoj kiselini. Prije provođenja imunokemijskog bojenja, membrana treba iscrtati nekoliko puta slabo alkalnom vodenom otopinom Tris da se ukloni s proteinima.

Iii. Imunokemijsko bojenje proteina imobiliziranih na nitroceluloznoj membrani

Da bi se blokirala nespecifična mjesta vezanja antitijela, membrana se inkubira s konstantnom miješanjem na sobnoj temperaturi 30 minuta do PBST (za bolju bravu, može se koristiti PBST otopina koja sadrži 10% suhog obranog mlijeka).

Nakon blokiranja membrana se inkubira na sat na sobnoj temperaturi i konstantno miješanje u PBST-u koji sadrži 1-10 ug / ml specifičnih antitijela.

Optimalna koncentracija antitijela je empirijski odabrana i ovisi o afinitetu interakcije antitijela s antigenom.

Na kraju inkubacije, membrana ispere 5 puta PBST i prelazi u otopinu sekundarnih antitijela konjugiranih s peroksidazom hren. Uzgoj konjugata obično označava proizvođač na paketu ili je empirijski odabran od strane istraživača. U otopinu sekundarnih antitijela, membrana se inkubira 1 sat uz konstantno miješanje.

Nakon temeljitog pranja (minimalno 5 - 6 puta, PBST membrana se prenosi u otopinu kromogenog supstrata, koji sadrži 3 mg diaminobenzidina (DB) i 10 ul od 30% vodikovog peroksida u 10 ml 0,1 M tris-HCl , pH 7.6.

Inkubacija se provodi uz miješanje 5 - 10 minuta. Membrana nakon završetka inkubacije s podlogom treba isprati s PBST, suhim, užaren s filter papirom i odmah napraviti elektroničku kopiju, skeniranje u boji. Ako se membrana potpuno osuši, izgrebeni protein trake su blijeda, a slika je manje svijetla i kontrast.

Napomena: Dub je otrovna tvar i potencijalni karcinogen. Radite samo u gumenim rukavicama!

Njegovo ime pomaže Vyacheslavu Zalmanović tarantul

Imunobloting - dodatna neizravna metoda

Osim IFA, u određenim slučajevima, postupak nazvan "imunobloting" ili "imunološki blot" se koristi za testiranje HIV infekcije (ponekad se naziva "Western Blot"). Na preporuku Tko je imunoblotting koristi u dijagnozi HIV infekcije kao dodatnu stručnu metodu, koja mora potvrditi rezultate ELISA-e. Obično ova metoda ponovno provjerava pozitivan rezultat za ELFA, jer se smatra osjetljivijim i specifičnijim, iako složenije i skuplji. Ali prije potpisivanja konačne rečenice pacijentu, liječnik mora biti u potpunosti u ispravnosti dijagnoze. Dakle, pitanje složenosti i visoke cijene ovdje ne može biti odlučujuće.

Program, kao iu načinu izvršenja na imunološkom blotu, dobro poznati izraz "donijeti na vlažnu" je dobro prilagođena. Imunološka blot kombinira imunološki analizu (ELISA) s preliminarnim elektroforetskim odvajanjem virusnih proteina u gelu i njihovom prijenosu na nitroceluloznu membranu ("kovano"). Postupak imunoblota sastoji se od nekoliko faza (sl. 27). Prvo, prethodno pročišćeni i uništeni kompozitnim komponentama HIV-a podvrgnuti su elektroforezi, dok su svi antigeni uključeni u virus odvojeni molekulskom težinom. Zatim prtljagom (analog ekstruzije na "vlažnim" viškom tinte) antigeni se prenose iz gela na nitrocelulozu ili najlonsku filtarsku traku, koja od sada sadrži nevidljivo oko spektra proteina karakterističnih za HIV. Nadalje, traka je cijenjena materijala (serum, pacijentovu krvnu plazmu, itd.), A ako postoje specifična antitijela u uzorku, oni su povezani s strogo odgovarajućim trakama proteina-antigena. Kao rezultat naknadnih manipulacija (slično IFA), rezultat ove interakcije se vizualizira - to je učinjeno vidljivom. Naposljetku, prisutnost bendova na određenim dijelovima Strepa potvrđuje prisutnost u ispitivanoj serumi antitijela na strogo definirane HIV antigene.

Imunološka blot se najčešće koristi za potvrdu dijagnoze HIV infekcije. Tko razmatra pozitivne serume u kojima se imunološka blot detektiraju antitijela na bilo koji dva proteina HIV-ovih ljuske. Prema ovim preporukama, ako postoji reakcija samo s jednim od proteina ljuske (GP160, GP120, GP41), u kombinaciji ili bez reakcije s drugim proteinima, rezultat se smatra upitnim i ponovno proučava se skup drugog serija ili Druga tvrtka. Za sigurnosnu pohvalu ako

Sl. 27. Za imunoblotiranje u prvoj fazi proteini su sadržavali u serumu, odvojeni u gelu svojim molekulskom težinom i punjenjem pomoću električnog polja (elektroforezom u gelu). Tada se gel primjenjuje na nitrocelulozu ili najlon membranu i "klizanje" (to je blontranje). To se provodi u posebnoj komori koja vam omogućuje da obavite potpunu peritu gela materijala na membrani. Rezultat je slika mjesta proteina, koji je bio na gelu, reproduciran je na membrani (blot), od kojih se nadalje lako manipulira. U početku se membrana tretira s antitijelima do željenog antigena, a nakon što je ispiranje nepovezanog materijala, dodaje se radioaktivno obilježeni konjugat, koji se specifično veže na antitijela (kao u ELISA). Mjesto dobivenog kompleksa "antigen protutijela - obilježeni konjugat" određuje se pomoću autoradiografije pomoću rendgenskog filma. Nakon njegove manifestacije, postaje jasno da li postoje antigeni u krvi ili ne postoje ih i nakon toga rezultat je sumnjiv, naknadno promatranje se preporučuje šest mjeseci (istraživanje se nastavlja svaka tri mjeseca).

Prisutan u Ruskoj Federaciji za uporabu u dijagnozi HIV infekcije preporučuje se da koristi pet testnih sustava, među kojima su i ruski i strani.

Iz anesteziologije knjige i oživljavanja Autor Marina Aleksandrovna Kolesnikova

Iz knjige neobičnosti našeg tijela. Zabavna anatomija od Stephena Juang

Od načina prve pomoći Nikolai Berg.

Iz knjige kao 100% da prestane pušiti ili voljeti sebe i promijeniti svoj život Autor David Kyivovis

Iz knjige puni vodič za njegu pacijenta Autor Elena Yureevna Khrava

Iz reference za hitne slučajeve knjige Autor Elena Yureevna Khrava

Iz knjige Cesarean Sekcija: Siguran izlaz ili prijetnja budućnosti? od Michela Odena

Gary Griffin

Iz knjige Kako povećati veličinu muškog penisa Gary Griffin

Iz knjige flatfoota. Najučinkovitije metode liječenja Autor Alexandra vasilyev

Od knjiga knjiga i zdravlja žena Autor Vladislav Gennadevich Lifelyandsky

Iz knjige joge i seksualne prakse Author Nick Douglas

Kada su testovi proslijeđeni na STD-u, odlučio sam prenijeti HIV. Na dan sam dobio gotove testove na Etia, osim HIV-a na kraju sam našao Chlamydiju. Herpes i mikroamplazmoza. Ali HIV nije došao. Zovem me nakon 3 dana i kažu da se trebate pojaviti u centru AIDS-a da prođem, a ja sam bio izgradnja na Imubabot Imunuboti pokazao je pozitivan. Može li immanublotirati biti lažno pozitivno u bolestima klamidijske mikroplazmoze HPV herpes

Stručnjaci žene.ru.

Saznajte mišljenje stručnjaka na svojoj temi

Anastasia Sherterikova

Rusina Irina Vladimirovna

Psiholog, oslobađanje od stresa. Stručnjak s mjesta B17.ru

Olga Yureevanna Diganeyeva

Psiholog. Stručnjak s mjesta B17.ru

Olga Borisenko

Psiholog, gestalt terapeut. Stručnjak s mjesta B17.ru

Dmitry Valerievich Tishakov

Psiholog, supervizor, obiteljski terapeut. Stručnjak s mjesta B17.ru

Shyan Olga Vasilyevna

Psiholog, psiholog-konzultant. Stručnjak s mjesta B17.ru

Oksana lushankin

Psiholog, obiteljski odnos. Stručnjak s mjesta B17.ru

Anna Dashvskaya

Psiholog, savjetovanje u Skypeu. Stručnjak s mjesta B17.ru

Irina Bukina

Psiholog. Stručnjak s mjesta B17.ru

Aksenova Anna Mikhailovna

Psiholog, kandidat za grupenatiku. Stručnjak s mjesta B17.ru

ne želim vas uplašiti, ali kad uzrokuju središte gotovo uvijek pozitivno kao da ne prijeđe, sretno vam, glavna stvar da se terapija i živi dugo

Jedan prijatelj živi s HIV već deset godina, spašava se.
Kaže se da su godine nakon tri mogu pronaći lijek.
U svakom slučaju, ne očajavajte i ne distribuirajte ga, tretirani

Ne, IB ne može biti lažno pozitivno i ne utječe na ovu analizu, ako je pozitivan, onda nažalost, imate HIV, morate slijediti imunološke stanice i početi terapiju na vrijeme.

ne postoje nažalost ((ako se navodi u središte, za sigurno HIV

Koliko ja znam, prvi i čak kasniji rezultati imunoblota mogu biti sumnjičani. Ne lažno pozitivno, naime, sumnjivo. I zatim propisati ponovnu analizu. Dajem tekst s web-lokacije:
"Imunološki blot se najčešće koristi za potvrdu dijagnoze HIV infekcije. Tko razmatra pozitivne serume u kojima se imunološka blot detektiraju antitijela na bilo koji dva proteina HIV-ovih ljuske. Prema ovim preporukama, ako postoji reakcija sa samo jednim od bjelančevina ljuske (GP160, GP120, GP41) u kombinaciji ili bez reakcije s drugim proteinima, rezultat se smatra upitnim i ponovno ispitivanjem pomoću seta drugog serija ili druge tvrtke. Ako, nakon toga, rezultat ostaje sumnjiv, istraživanje se nastavlja svaka 3 mjeseca. "
možete Google. Ako je tako, nadam se da ne potvrdite HIV. Ali ako potvrdite, znajte da danas žive s ovom dijagnozom i žive onoliko zdravih ljudi i djece. Glavno stanje je disciplina u liječenju. Zdravlje za vas!

Antiretrovirusna terapija online

Kalkulatori

Stranica je namijenjena medicinskim i farmaceutskim radnicima 18+

Dekodiranje analiza - imunoblot

Pomoći da dešifrirate analizu
Env (GP160) +
Env (GP110 / 120) +
Env (GP41) +
Gag (p55) +
Gag (p40) +
Gag (p25) +
Pol (p68) +
Pol (p52) +
Pol (p34) +

Zdravo! Prije 2 godina predao sam HIV analizu, bilo je takav imunoblot:
GP-160 +, GP-110/120 +, GP-41 +, p17 +, p25 +, p31 +, p34 +, p52 +, p55 +, p68 +. Ali imunnoblot od 30.05.18 g.: GP-160 +, GP-41 +, Gag 1 -, anketa +, ENV2-. Nije jasno što roll + znači? Je li on postoji samo jedan ili ne otkriven? I gdje su ostali proteina?

Polj i env geni koji kodiraju proteinske skupine. Razmotrite da je samo zapis drugačiji. Pitanje je drugačije. I što čekamo? Zašto smatrate blot? Sve je prilično jasno. Učinite nešto što trebate.

Već je odskočio s onim što imam HIV. I spreman za terapiju.
Samo je zanimljivo slušati vaše mišljenje. To se ispostavilo, svježa infekcija ili ne razumijem nešto? Ili se ponekad događa da se imunoblot polako otkriva?

Danas sam pogledao svoje analize u osobnom slučaju (napravili smo u SC):
IFA na prvom ispitnom sustavu - stavite
IFA na drugom ispitnom sustavu je negativan (kako je?)

Dalje, IB (izrađen u Invitro i Sc mjesec prije):
imunoblot na prvom testnom sustavu: GP 160+, GP 41+
imunoblot na drugom ispitnom sustavu: GP41 +, P24 +, P17 +
imunoblot na trećem ispitnom sustavu: GP160 +, GP120 +, GP41 +, P24 +

Prema mojim prognozama, mogao sam zaraziti prije godinu dana (akutna faza bila je u travnju negdje), ili prije 9 mjeseci, ali općenito - XS kada je) uvijek spriječen i seks bez kondoma bio je samo jedan put u jesen 2017. godine.

Danas je jednom prošla na VN i IP. Thera će početi za mjesec dana, kako dođe red.

Stavite datume na navedene testove.

Prvi blot prije IFA? Ne bori se. Nema trenutka koji bi mi dopustio da kažem da postoji vrlo vjerojatna svježa infekcija, ili suprotno.
Ostat će misterija, ako ne pronađete slučajni izvor i ne usporedite.

Ako navedite, onda

Kupljeni za Invitro.
Prvi IFA - 11. svibnja.
Tada je isti serum otišao na blot i imao pozitivnu analizu, gdje su se otkrili dva proteina.
gP 160+, GP 41+

Zatim sam ponovno prošao u sc.
Krv je prolazila 29. svibnja.
A tamo je vođen preko nekoliko testnih sustava, gdje je prvi pokazao negativan, drugi pozitivan. Negativna IFA još je smiješna.
Zatim, isti serum ide na blot, gdje su podaci došli iz:

Prvi testni sustav: GP41 +, P24 +, P17 +
Drugi testni sustav: GP160 +, GP120 +, GP41 +, P24 +

Ali nemojte biti suština.
Došla je nova analiza - 754. to je zadovoljava. VN još nije spreman. Kao što će doći, vjerojatno ću započeti trgovcu.

Činjenica da je infekcija bila prije godinu dana - uvjeren sam u 80%. A činjenica da se mrlja polako otkriva i IFA je negativna - ovo je čudno. Ili je unutar normalnog raspona?

Negativna IFA još je smiješna. Znati naziv sustava i dalje bilježiti u crni notepad. Iako, ovaj trenutak, ako ne uzimate teoriju s brakom, snažno za ranu infekciju.
Činjenica da je infekcija bila prije godinu dana - uvjeren sam u 80%. Blot je loš za to vrijeme. Nije nemoguće, ali malo vjerojatno.

U nekom trenutku, čak sam počeo sumnjati u rezultate HIV testova - stoga čekam
Već postoji posljednja točka u pitanju.

Činjenica da je za mjesec porastao za 200 primjeraka bez Terra - je li također unutar normalnog raspona? Uzimam Ursosan sada iz polipa u žuči - u košuljici napisan je da lijek poboljšava imunitet.

Potrebno je procijeniti s relativnim sadržajem i uzeti u obzir podatke jednog laboratorija s jednom metodom brojanjem. Jer - Bog zna što je iz CD4.

Općenito, CD4 - 780 stanica / μl. VN - 250 primjeraka / ml.
Ovo nije terapija. To jest, CD4 od 486 mjesečno požurio je na 780.
VN pao s 550 na 250 primjeraka.

Ipak, to nije čudno ili takve skokove unutar normalnog raspona? Teorija je vrijeme za početak?)

Zdravo! Ja ću predati IFA tri puta, svaki put +, iz SC došao imunoblot p24 + p18 +. Potencijalni rizik je bio prije više od šest mjeseci. P24 označava da je to sve isti HIV?

Blot sumnjiv, ponovite nakon 6-8 tjedana. Najvjerojatnije lažni alarm.

Dobar dan!
Došli su rezultati analiza, uključujući blot:

Opasni kontakt: 04/24/2018
Analiza na HIV IFA 23.05.2018 (4 tjedna od opasnog kontakta ili 29 dana) rezultat "+"
Analiza na HIV IFA 05/28/2018 (5 tjedana od opasnih kontakta ili 34 dana) rezultat "sjećaš"
Analiza na HIV IFA 06/01/2018 (5 tjedana od opasnih kontakta ili 38 dana) rezultat "+"

Blot je došao iz prve analize (05.23.18):
GP160 SL.
P24 sl.

Uređeni su novi testovi 06.06.2018. ELISA i PCR RNA HIV u središtu lokalnog pomagala. Rezultati još uvijek čekaju.

Blot pitanja:
1. Ako je prisutan P24, je li potrebno antigen HIV-a ili takvog proteina može se otkriti s drugim bolestima?
2. Što je kratica "sl" znači pored proteina? Obično u opisanoj floti + ili -
3. Što ovisi o raspoređivanju flote? Od pojma ili od pojedinačnih obilježja tijela?
4. S takvom blot 4. tjedna iz opasnog kontakta postoji mogućnost da to nije HIV?

Ugodan dan i hvala.

1. Ne, to može biti sličan protein druge prirode. 2. Slabo. oni. Sumnjivo. 3. Uvjeti i implementirajte pojedinačnu značajku, ali u prosjeku, sve je vrlo blisko. 4. Pitanje je netočno, uvijek postoji mogućnost dok se ne postavi dijagnoza.

Zdravo!
Pomoć, molimo vas da krenite rezultatima testova i razumjeti kako se ponašati ispravno, tako da su ponovljene analize točne.

Analize su predane 05/25/2018
Ib HIV
New Lav Blot 1 - razumjeti. od 05/29/2018
IB HIV markeri
gP 160 +.
gP 120 -
gP 41 -
p55 +.
p40 -
p 24 +.
p18 -
p 68 -
p 52 -
p 34 -
IFA HIV
AdVatia Centaur HIV AG-AB reaktivnost IFA 12,00 položaj (05/28/2018)
Preporučena analiza ponovite u 2 tjedna.

U studenom 2017. postojao je spavanje, nakon čega su testovi predani HIV AG Combot Abbott Architecy sustav testiranja, onda je rezultat bio negativan.

Paralelno predao opći test krvi. Limfociti su blago povišeni, eozinofili su točno 0 (ali sam imao takve pokazatelje za eozinofile prije.

Glavno pitanje je:
koji lijekovi se mogu i ne mogu uzeti u ova dva tjedna? (Ne želim ništa "Phonil")
Povremeno prolazim napade alergija, obično pijem tugeuil. Trebam li ga odbiti?
Je li moguće uzeti prije analitičara antibiotika? (ako su propisani liječnik za liječenje drugih infekcija i bolesti)

Imunološka blot u dijagnostici HIV-a

Imunološki blot (imunoblot, Western Blot, Western Blot) - kombinira imuno-enzimsku analizu (ELISA) s preliminarnim elektroforetskim prijenosom na nitroceluloznu traku (traku) virusnih antigena.

U ovom prekrasnom znanstvenom imenu "Blot" prevodi najvjerojatnije kao "mrlje", i "zapadni" - kao "zapadni" odražava smjer širenja ovog "mrlja" na papiru s lijeva na desno, to jest, na geografskoj karti , to odgovara smjeru sa zapadnog na istoku. " Suština metode "imunološka blot" je da se imuno-imunulna reakcija ne provodi ne sa smjesom antigena, već s HIV antigenima, prethodno raspoređenom imunoforezom koristeći frakcije, smještene u skladu s molekulskom težinom preko površine nitroceluloze membrana. Kao rezultat toga, glavni proteini HIV-a, nosači antigenskih determinanti raspoređeni su preko površine u obliku pojedinačnih traka, koji se manifestiraju pri provođenju reakcije imunofermenata.

Imunoblot uključuje nekoliko faza:

Priprema trake. Pre-pročišćeni i uništeni na kompozitne komponente, imunodeficijencija (HIV) podvrgava se elektroforezi, dok su antigeni uključeni u HIV odvojeni molekulskom težinom. Zatim se blotiranjem (analog ekstruzije na "mokro" višak tinte) prenose na nitroceluloznu traku, koji od sada sadrži nevidljivu sliku antigenske trake spektra karakteristike HIV-a.

Uzorak studija. Ispitni materijal (serum, krvna plazma pacijenta, itd.) Nanosi se na nitroceluloznoj traci), a ako postoje specifična antitijela u uzorku, oni su povezani s strogo odgovarajućim njima (besplatne) antigenske trake. Kao rezultat naknadnih manipulacija, rezultat ove interakcije se vizualizira - to je učinjeno vidljivom.

Tumačenje rezultata. Prisutnost bendova u određenim područjima nitroceluloznog ploča potvrđuje prisutnost u ispitivanoj serumi antitijela na strogo definirane HIV antigene.

Trenutno, imunološki blot (imunoblot) je glavna metoda za potvrdu prisutnosti virusa specifičnih antitijela u testom serumu. U nekim slučajevima, infekcija HIV, prije razvoja serokonverzije, specifična antitijela su učinkovitije detektiraju metodom imunog blota od ELISA-e. U studiji metodom imunološkom blotu utvrđeno je da se antitijela na GP 41 detektiraju u serumima u serumima, a detekcija P24 u osobama koje su prožeti s profilaktičkim ciljem zahtijeva dodatne studije za njihovu HIV infekciju. Ispitni sustav za imunološki blontranje na temelju rekombinantnih proteina dobivenih genetskom inženjeringom pokazalo se specifičnijim od konvencionalnih sustava na temelju pročišćenog virusnog lizata. Kada se koristi rekombinantni antigen, ne difuzan, ali jasno izražena uska antigen traka, lako dostupna za računovodstvo i evaluaciju.

Serumi osoba zaraženih HIV-1 detektiraju se antitijelima na slijedećim glavnim proteinima i glikoproteinima - strukturne proteine \u200b\u200bljuske (ENV) - GP160, GP120, GP41; Kernels (GAG) - P17, P24, P55, kao i virusne enzime (POL) - P31, p51, p66. Za HIV-2 tipična antitijela za ENV - GP140, GP105, GP36; Gag - p16, p25, p56; Pol - p68.

Među laboratorijskim metodama potrebnim za utvrđivanje specifičnosti reakcije, najveće prepoznavanje ima detekciju antitijela na proteine \u200b\u200bproteina HIV-1-GP41, GP120, GP160 i HIV-2-GP36, GP105, GP140.

Tko razmatra pozitivne serume u kojima se nalaze antitijela na bilo koji dva HIV glikoproteina metodom imunološkom blot. Prema ovim preporukama, u prisutnosti reakcije samo s jednim od proteina ljuske (GP 160, GP 120, GP 41), u kombinaciji ili bez reakcije s drugim proteinima, rezultat se smatra upitnim i ponovno ispitivanjem skup druge serije ili druge tvrtke. Ako, nakon toga, rezultat ostaje sumnjiv, promatranje se preporučuje 6 mjeseci (studij nakon 3 mjeseca).

Prisutnost pozitivne reakcije s antigenom P24 može ukazivati \u200b\u200bna razdoblje serokaurusa, jer se antitijela ponekad pojavljuju na ovom proteinu. U ovom slučaju, preporučuje se, ovisno o kliničkim i epidemiološkim podacima, ponovite studiju s uzorom seruma, uzet barem za 2 tjedna, a to je slučaj kada je HIV infekcija potrebno proučiti serume par.

Pozitivne reakcije s GAG i POL proteinima bez reakcije s ENV proteinima mogu odražavati korak rane serokonverzije, a mogu također ukazati na infekciju HIV-2 ili nespecifični odgovor. Osobe s takvim rezultatima nakon testiranja na HIV-2 ponovno su pregledane nakon 3 mjeseca (u roku od 6 mjeseci).

Pitanje: Ponovljena HIV analiza?

Ispitani su za infekcije primljene seksualnim putem (bez simptoma - željeno povjerenje u odnose sa ženom). HIV test je bio pozitivan. Sljedeći ultrazvuk pokazao je tumor na bubregu, uklonjen (pokazao se malignim).
Pročitao sam knjigu Sazonova i.m., kaže da maligne tumor može dati pozitivan rezultat HIV testova.
Može li biti tako, ili nadam se da ne?

Morate provesti kontrolnu analizu za HIV. Ako je prva HIV test određena ELISA-om, rezultat može biti lažno pozitivan. Njegova pouzdanost može se provjeriti osjetljivija dijagnostička metoda - PCR (lančana reakcija polimeraze), koja definira DNK virusa u krvi.

pomozite. 12/16/10 IFA (+) IB (+) zatim od 03/23/11 do 19.05.11, devet negativnih ELISA (-) i PCR kvantitativno. neće se odrediti. U 2002. godini, tijekom trudnoće, IFA je (+) da (-), ali IB je uvijek (-). Od 2004. do 2008. godine predao sam 2 puta godišnje IFA (-). Ali 30. travnja 2007. godine, IFA (+) i IB-nesigurno. Onda opet svakih 2 mjeseca uvijek sam ga predao (-). A od prosinca 2010. godine napisan je gore. Nikad nisam bio nazvan, moj muž uvijek ima IFA (-). Sd4 980 stanica. Čak i krv na sifilisu iz 29.04 dala je 3 +++. I tri puta. Dekuli. Navoj svakih 10 dana. Hepatitis sve (-). Bio je netko takav. Hvala vam.

Molimo navedite je li provedena ribta (reakcija imobilizacije blijedog treponama), ako je tako, koji su rezultati ove studije.

ne, nitko nije sugerirao da napravi takvu analizu. I što će on pokazati? Nadam se da ste shvatili da govorim o HIV testovima. Hvala vam. U vašoj praksi su bili slični slučajevi? Da, usput o IB-u 2008. bio je neodređen jer Bio je protein P24 / 25. U 2010, IB (+) proteini GP160.41.120 p24.17.31. Tada kada je IFA ponovno 3. travnja poslana na IB. Rezultat je došao pozitivan, ali GP 120 i 41 proteina su prekriženi crvenom tijestom i na dnu crvenog IB ponavljanja. Ali PCR je odbijen iz istog broja. Nakon 4. travnja, položio sam Elisu 4 puta. Sve u centru AIDS-a, uključujući antigen i antitijelo. Sada čekam ponoviti IB i visokokvalitetni PCR. to je to. Jako umoran da mislim i čekati. Nadajući se najboljem. HVALA VAM. Čekaju odgovor jako puno.

Ako pitate bilo koje pitanje, pokušajte ga formulirati točnije, uz pojašnjenje dijagnoze. Ribt se koristi za potvrdu dijagnoze sifilisa. Da biste točno dijagnosticirali infekciju HIV-a, provodi se definicija antitijela za HIV u krvi IFA metode i metoda imunoblot. Dijagnoza se potvrđuje samo ako su oba ova rezultati pozitivni.

Žao mi je što je netočno formuliralo pitanje. Napisao sam da je u prosincu i IFA i Imunoblot na HIV došao pozitivan. Ali od ožujka mjeseca IFA na HIV je negativan 9 puta. Ako sam bio registriran u AIDS-u u AIDS-u, onda se to događa u načelu. HIV je uvijek stavio ili negativno. I kako IFA odluči o HIV-u biti odbijen od strane IFA-e? Onda će sve poricati IFA da provjeri Imhunoblot, pa ako se ispostavi? U našem centru za AIDS ne može odgovoriti na mene. Tako sam vam se okrenuo. Hvala vam.

Nažalost, i ELISA i imunoblot mogu dati lažne pozitivne rezultate. Zbog toga se dijagnoza HIV smatra konačnom, samo uz istodobno otkrivanje HIV-a uz pomoć IFA-e i imunoblot metode.

pozdrav. Danas je dobio rezultate PCR za HIV HIV HIV. Rezultat nije otkriven i ponavljao imunoblot na HIV-u. Rezultat je bio neodređen zbog proteina 41. U Centru za AIDS-u, najvjerojatnije nemaju HIV-a, iu mom Tijela su tijela slična HIV-u. A što mislite, ako razmislite o mojim pitanjima od 15. i 16. lipnja (vidi) HIV ili ne. HVALA VAM.

U tom slučaju dijagnoza HIV infekcije je upitna.

pišete da samo uz istodobno otkrivanje HIV-a uz pomoć ELISA-e i imunoblota, dijagnoza HIV-a smatra se finalom. I kako je onda u mom slučaju? Uostalom, svi PCR će poreći. I blotu i IFA će cijelo vrijeme skočiti. 9 godina. Recite mi ako je virus bio u krvi, onda bi se mogla definirati njegova RNA i DNA. I može li razdoblje inkubacije ili "Windows" trajati toliko godina? Jesu li rezultati PCR-a na HIV bolesnima, uzimajući u obzir takvo razdoblje? Da, zaboravio sam reći da su Express HIV testovi za HIV prolazili uvijek negativni. I ne bi se trebali oslanjati na njih? Hvala vam.

U tom slučaju, PCR dijagnostika nije glavna metoda identificiranja procesne dinamike - više informativnih seroloških metoda. U tom slučaju, vjerojatnost lažnih negativnih rezultata je visoka. Express HIV testovi imaju visok prag osjetljivosti, stoga također može dati lažni negativan rezultat.

oprosti. Definitivno nisam napisao tamo. Odgovorite na HIV ili ne HIV. Hvala vam.

U slučaju da niste primili obavijest o primitku odgovora na pošti, možete vidjeti odgovor na pitanje koje ste napisali na ovoj adresi http://tiensmed.ru/news/answers/vich-ili-vich -.html

Zdravo! Molim vas recite mi što se registrirati u LCD-u (sada 10 tjedana trudnoće) prošao testove za HIV, prije nekoliko dana nazvao je liječniku i rekao da su preliminarni testovi za HIV pozitivno (prvi u Kirovogradu, a tu je i tamo Nijedan službeni rezultat iz Kijev još) na isti dan je u našem gradskom laboratoriju dva ekspresna testovi tvrtke "Pharmaski" Cito Test HIV 1/2, obje rezultate su negativni, laboratorijski asistent da su ti testovi pouzdani i ne mogu se brinuti , jer se tijekom trudnoće događa, a ti testovi mogu jednostavno zbuniti. Liječnik je rekao da ponovno prođe krv i ja dvaput prolazim krv za analizu u različitim bolnicama (nitko od triju rezultata i dalje ne). Vrlo sam zabrinut, nisam ovisnik o drogama, nije bilo sumnjivog seksualnog odnosa, ako je vrlo rijetko, druge analize su u redu. Je li moguće vjerovati Express testovima? Da li se to stvarno događa tijekom trudnoće? Boli me puno liječnika. Hvala vam

Morate se prvo smiriti i ne razmišljati o lošem. Ponekad tijekom trudnoće postoje lažni pozitivni rezultati. Potrebno je ponovno podsjetiti krv za HIV i čekati rezultate istraživanja.

zdravo! Činjenica je da sam imao seksualni kontakt s djevojkom prije 2 mjeseca (mi se još uvijek susrećemo). Nakon 1,5 tjedna, temperatura od 37,4 ruže. Uskoro je spavao. Za samopouzdanje smo prošli analizu EIF-a za 2 tjedna i ponovno nakon 1,5 mjeseci. Odgovore i negativne. Ali još uvijek imam temperaturu i kašljanje s promjenjivom poboljšanjem. Reci mi, molim te je moguće riskirati? Osim toga, dugo sam radio bez vikenda i prije tjedan dana bio na bolovanju (Orvi). Krvi test i pluća u redu. Hvala vam.

Ova temperatura može biti povezana s prenesenom virusnom bolešću, tijelo još nije oporavio, ili kronični premošćivanje. U slučaju da je isključena organska patologija, opća analiza krvi i mokraće unutar norme, kao i podatke o fluorografskim istraživanjima, kao i unutar norme, potrebno je isključiti spolno prenosive bolesti: klamidija, mikoplazmoza, ureaplasmoza To može uzrokovati upalu malih organa zdjelice i uretre i kao rezultat toga, povećanje tjelesne temperature. Pročitajte više o razlozima povećanja tjelesne temperature. Čitanje klikom na vezu: visoka temperatura.

Zdravo. Bilo je takvo poduzeće - prije više od godinu dana bilo nezaštićenog seksualnog kontakta s pješačkom djevojkom. Uvjeravala je da nije bolesna, ali ne mogu vjerovati joj 100 posto. Također je uvjeravala da je liječnik prije nego što uređaj radi (radila je kao prodavatelj) i sve je bilo u redu. 7 mjeseci nakon kontakta, još sam prošao analizu HIV-a u laboratoriju, a grad se pokazao negativnim. Ali u posljednje vrijeme često sam se razbolio, za sada 3 tjedna, kao što imam crveno upaljeno grlo i ne mogu ga izliječiti. Ponovno se počeo bojati, a onda se iznenada još uvijek pokupilo? Reci mi, je li moguće, i je li vrijedno vjerovati analizi iz Sitilaba? Još jednom se bojim, živci to neće podnijeti.

U slučaju da je rezultat negativan, onda najvjerojatnije niste bolesni i ne zaraženi HIV / AIDS-om. Međutim, razjasniti dijagnozu, preporuča se ponovno analizirati u specijaliziranim laboratorijima pod vladinim agencijama, ovaj se ispit provodi anonimno. U slučaju da neovisno liječenje ne donosi željeni rezultat. Preporučuje se konzultiranje s otoolaryngologom, za adekvatan pregled i imenovanje odgovarajućeg liječenja. Pročitajte više o ispitu za HIV, pročitajte ciklus članaka klikom na vezu: HIV.

Reci mi, možeš li dati bilo kakvu karakteristiku satilab laboratorija? Svejedno, nije uvijek moguće proći analizu u državnoj ustanovi. A što je vjerojatnost u postocima za čovjeka da se zarazi s nezaštićenim kontaktom?

Nažalost, ne dajemo komparativnu procjenu laboratorija i privatnih medicinskih ustanova. U slučaju da sumnjate u pouzdanost rezultata, provodite anketu u drugom centru i najprije pitajte licencu za pružanje podataka iz medicinskih usluga, bilo da ovaj centar ima pravo provesti ovu anketu i da li su svi standardi usvojeni. Rizik od infekcije je isti za oba spola s nezaštićenim seksom. Pročitajte više o ispitu za HIV, pročitajte ciklus članaka klikom na vezu: HIV.

Dobar dan! Dijete je bilo 8 mjeseci, analiza HIV metoda IFA u krvi je otkrivena od strane GP160 + i P25 + ostatak svega minus, zaključak IB-sumnjivog. Kako sudac o tim analizama ispada da dijete +? GP160 + GP110 / 120 - p68 - p55 - p52 - GP41 - p34 - p25 + p18 -

Nažalost, na temelju dobivenih podataka nemoguće je dijagnosticirati sa 100 postotna vjerojatnost, budući da lažni pozitivni rezultat nije isključen. Da bi se stvorila točna dijagnoza, trebat će proći broj anketa, uključujući i da ponovi ovu analizu pomoću IFA metode, kao i proći analizu prema PCR tehnici. Nakon toga, trebali biste kontaktirati specijaliziranu medicinsku ustanovu, gdje će liječnik infektivni igrač moći procijeniti rezultate dobivene u kompleksu. Više o manifestacijama HIV infekcija možete saznati u tematskom dijelu naše stranice klikom na link: HIV

Može pokazati lažni pozitivan rezultat s "ORZ" ili više akutno nastale zarazne bolesti? Negdje sam pročitao da na 58 bolesti ili čak i iznad može pokazati "+", uključujući cijepljenje od hepatitisa B ako bubrezi pate od itd?

Vjerojatnost lažno pozitivnog rezultata je, pa preporučujem da učinite kako slijedi: Napravite ponovno analizu - metodom IFA i PCR metodom, nakon čega je ponovno posjećena od strane zaraznog liječnika. Pročitajte više o dijagnozi HIV infekcije Možete učiti iz tematskog dijela: HIV

Dobar dan! Imunoblot je neodređen zbog proteina p25. Koja je vjerojatnost HIV-a?

U takvoj situaciji, nužno je temeljito proučavanje protokola studija u kompleksu s drugim pokazateljima, jer na temelju tih podataka nije moguće napraviti pretpostavku. Vjerojatno se rezultat može smatrati upitnim i ponovno proučavanje je potrebno nakon 3 mjeseca. Više u odjeljku naše web stranice: HIV

Dobar dan.
Možete komentirati IFA na HIV
1 serum +3,559 k \u003d 13.3
+2,121 k \u003d 4.9
r 24 ot.
2 serum +3,696 k \u003d 13.9
+2,477 k \u003d 5.7

U tom slučaju, lažni pozitivan rezultat nije isključen, s obzirom na to da je IFA metoda neizravno, tako da vam preporučujem da prođete analizu na drugoj, osjetljiviji način - imunološki blot. Možete saznati detaljnije informacije o ovom pitanju u odgovarajućem dijelu naše web-lokacije klikom na sljedeći link: HIV

Dobar dan, reci mi što konfigurirati? Prije godinu dana sa svojim suprugom, pri planiranju djeteta, prošli su svi testovi, uključujući HIV (tretirano vrlo ozbiljno i ispravno), ispitana sam u Kirgisu. Muž u Kijevu, imao je negativan odgovor na mene da nisam radio O tome se reagens mora ponovno koristiti u središnjim pomagalima u Kijevu. Trčanje analize u središnjem odgovoru i mene je došlo negativno. Sada sam u položaju 14 tjedana tj. Registrirao se u prolazu svih testova i opet je odgovor bio odgovor na HIV neizvjesno, ponovno prošao u klinici i otišao u "doviru" ekspresni test za umirujuće, ali nije uvjerio da je Express test pokazao pozitivan rezultat ( Druga traka bila je manje izražena), odmah nakon svih ovih postupaka nisam izgubio vrijeme pretvoreno u AIDS centar također je prošao analizu, očekujem rezultat. (Ne mogu se smiriti) Molim vas da kažete kako vjerovati Express analiza i zašto ne postoji odgovor na HIV analizu od prvog puta? (Moj suprug i ja ponašamo zdrav način života i volite jedni druge). Hvala vam.

Nije potrebno paničar ispred vremena - Express Diagnostics nije razlog za dijagnozu HIV-a, omogućuje vam da identificirate skupine pacijenata kojima je potrebna dubinska studija. U takvim situacijama preporuča se provesti imunološko blotiranje i osobno konzultirati s infektivnim liječnikom. Možete saznati detaljnije informacije o ovom pitanju u tematskom dijelu naše stranice klikom na sljedeći link: HIV. Za više informacija možete dobiti iu sljedećem odjeljku naše web stranice: Laboratorijska dijagnostika

Pozdrav, ležao je u zaraznom vremenu, samo danas je bio otpušten kada me je nazvao liječnika i objasnio da sam imao pozitivnu ELISA, najprije kad sam ušao u bolnicu, bio je negativan, a onda kad je bio spreman za ožujak tjedan dana, ležao Bolnica s anginom i virusima Paragripe, stiže u šok, još uvijek ne razumijem kako ga smatrati, izvadak za moju kliniku također je sastavljena s naznakom da je IFA pronađena i niža od imunoblota na poslu, Ako sutra ispušta u ovom iscjedku, sve će biti označeno u ovom pražnjenje, što se tiče vjerojatnosti HIV-a Elisa?

Vjerojatnost lažno pozitivnog rezultata je vrlo velika. Prisutnost jednog pozitivnog rezultata ne pruža osnova za podizanje dijagnoze HIV-a, tako da preporučujemo da čekate rezultat imunoblotiranja, nakon čega se osobno konzultira s liječnikom zaraznim igračem na daljnju istraživanja i promatranje. Angina, paragrapp i druge prehlade značajnog utjecaja na rezultate analize nemaju.

Želim vjerovati, ali krajem kolovoza imao sam bolest, temperatura porasla, 37.5-38 bila je tekuća stolica oko 4 dana, bilo je na odmoru gdje je bilo puno diska, pio sam vodu ispod Dizalica koliko i mnogih drugih, jer je to bila vrlo skupa čaša vode trošak 300R, spojio sam tekuću stolicu s takvom temperaturom s nekom vrstom crijevne infekcije s izabranim u vodi, ne sjećam se točno, ali bilo je malo osip u gornjem dijelu tijela, dolazim kući s temperaturom koja se naziva liječnik, napisala je rotavirusnu infekciju, nakon 5 dana liječnika, volontirao sam ga ostaviti i otići na posao gdje se trči za nekoliko dana s sinusitisom , (u to vrijeme razdoblje, morao sam biti na ulici) vezan je da je velika temperaturna razlika od odmora i trovanja hvale moj imunitet i stoga se ponovno pojavio s sinusitisom, a to je opet bolnička veličina , Prema režiji Laure, Collid CP 500 je predložen u roku od 10 dana, prošao je, ponovno izašao na posao nakon 3 tjedna bio na poslovnom putovanju Zemlja luka 3 dana. Klima uređaji u transportu i hotelu su nemilosrdni i na povratku kući, u ravnini sam već imao temperaturu 39.5.The kod kuće s temperaturom od 40, nazvanim liječnikom u kuću napisao je Arvi i rekao misli o PTS crveno, i imaju kronika tonzilitis i rekao da je Laura sama napisala da pije antibiotik koji levira R. Skoring jer nisam napustio tempo od 40 i nije pao, hospitalizacija nije ponuđena, sljedećeg dana iste povijesti učinio je antipiretik ubrizgavanje i lijevo. Treći put sam inzistirao na hospitalizaciji, jedva jedva u infektivnoj bolnici, gdje je infekcija smjese bila zaražena s paragragrama i adenovirusnom infekcijom, ali ako je liječnik bio otpušten, podružnica je izvijestila da sam imao pozitivan HIV pozitivan i Što su učinili dvaput, šokiran sam, ne znam što da učinim ne mogu jesti i piti. Rekla je da imam jasno izraženu akutnu infekciju HIV-a i provjeru su poslali analizu moje krvi na imunoblot u AIDS-u Centar,
sada provodim analogiju događaja koji su mi se posljednji put dogodili, kao i 3 bolnička listova za redom, sve simptome za sebe i ja sam prestravljen iz onoga što bi moglo biti, nakon ispuštanja istog dana, otišao sam Da biste prošli analizu u Invitro Ananinu i sljedećeg dana rezultat IFA je također +
opraštam oprost za tako detaljne informacije, ali ja sam u razbojnika i ubijen, pijem teške sedative i nemam apetit i nemam gotovo mnogo izgubio mnogo
još uvijek imam takvo pitanje da je liječnik s ispuštanjem iz bolnice ukazao na rezultat HIV -a na IFA je otkriven i niži od imunnoblota u radu, ali kao što sam zatvorio BL u mojoj klinici na mjestu, sve će biti napisao tamo. Kako mogu biti? To neće biti povjerljivo. Pitao sam liječnika da ne napiše u iscjednju ove analize na ono što mi je odbijeno, koliko mi se prate prava o Nespras informacijama.

Nažalost, rezultati studija provedenih u bolnici uklapaju se u ekstrakt, budući da bi liječnik polaznika trebao imati informacije o vašem zdravstvenom statusu u cijelosti. U ovoj situaciji ne govorimo o otkrivanju informacija, jer se prenosi samo drugom liječniku koji će vas dodatno promatrati.

Zdravo! Predao sam HIV testove. Budući da mi je trebala potvrdu za FMS, testovi nisu dali nekoliko tjedana kasnije pozvani su na glavu i izdali rezultat rezultatom, uzeli su hrpu primitaka i poslali mnogo Pomažu regionalnom centru za daljnje otkupljenje. Želim proći u drugoj klinici, a zatim već ići na regionalnu ili nema smisla? Samo ne razumijete zašto imaju toliko dugo da nikada ne pažljivo, liječnik je rekao da su navodno učinili neku vrstu analize i još uvijek imam 4t rubalja. Kako bih to trebao učiniti uz Dalibi certifikat detaljne informacije o bolesti?

U takvoj situaciji ne bi trebalo biti paniranje prije vremena - primitak jednog pozitivnog rezultata ne dopušta pouzdano suditi o mogućoj infekciji, budući da lažni pozitivni rezultati nisu isključeni. Preporučujemo da ponovno prođete analizu i ako postoji pozitivan rezultat, trebat će vam još jedan anketi - imunobloting. U pravilu, u laboratoriju za detaljne informacije o rezultatima ne daju, što je normalna i obična praksa. Za sva pitanja koja se pojavljuju, možete odgovoriti na liječnika nakon inspekcije na osobnu konzultaciju.

zaboravio sam dodati da je od početka lipnja do sredine rujna do sredine rujna, učinio sam anabolički steroidni tečaj, naime I sve mi se dogodilo.

Oštećenje imuniteta, kao i prisutnost autoimunih bolesti, može dati lažne pozitivne rezultate HIV analize. Zbog toga u slučaju primitka 2 pozitivne rezultate, IFA metoda preporučuje da se preporučuje imunoblotiranje, što će vam omogućiti da odgovorite na pitanje s točnosti, postoji infekcija ili ne.

Što znači autoimiluinsku bolest? Što su oni?
općenito, mogu reći da sam često bolestan od ranog djetinjstva, pa čak i par od prije tri godine, pitao sam od liječnika da napravim moj imunitet, jer je postojao stalni umor i često bolestan, uglavnom ušni grlo, ali cijelo vrijeme tamo bili su negativni rezultati na HIV-u, imam cijelo vrijeme koje su prošli s dovoljnom lakoćom bez razmišljanja.

Lažno pozitivan rezultat HIV analize može biti nakon nedavno prenesene virusne infekcije, cijepljenje protiv hepatitisa B, s tuberkulozom, hepatitisom, herpesom, te na pozadini autoimunih bolesti, kao što su: reumatoidni artritis, sistemski crveni lupus, dermatomyomiomija, sklerodemija, sklerodermija, sklerodermija, povezivanje bolesti tkiva i itd.

Želim dodati na moje pitanje, moj imunoblot je došao negativan, ali liječnik je rekao da je od dva IFA -A + kad sam ležala u zaraznoj bolnici, onda se i dalje moram prisjetiti analize, ali malo kasnije

U tom slučaju medicinske taktike su opravdane - preporučujemo nakon 1.5-2 mjeseca da ponovno prođe imunoblot.

Koja je vjerojatnost: 2 ELISA + razlika između krvnih ograda je oko 2 dana, imunoblot -; Ležio sam u infektivnoj bolnici s adenovirusnom infekcijom i paragrapp, gdje je bila krvna ograda, imunoblot poslao u AIDS

Dobar dan! Registrirao sam se u LCD-u, prošao sve testove liječnika kaže da imam herpes u svojoj krvi, a zatim nazovem iz AIDS-a i kažem da mi je potrebno odskočiti, rečeno mi je i rečeno mi je da imam pozitivan HIV, otišao sam donirati u paniku koja je prolazila analiza i imam Elisu i imunoblot + njezin muž -, bilo je za mjesec dana. Imam + moj muž - sada sam na 23 tjedna trudnoće!

U ovoj situaciji, nažalost, postoji vjerojatnost HIV infekcije, ali konačna dijagnoza je nemoguće staviti čak i s pozitivnim imunoblotom, s obzirom na stanje trudnoće. U takvoj situaciji je potrebno uklanjanje lažnih pozitivnih rezultata, tako da preporučujemo da prođe analizu da se ponovno i osobno konzultiramo s infektivnim liječnikom.

ako je imunoblot pokazao pozitivan rezultat na HIV-u, a probiranje je negativno što rezultira da vjeruje?

Imunoblot je točnija studija, pa s ovom studijom, ako je primljen pozitivan rezultat, potrebno je nastaviti studij i osobno posjetiti infektivni ispit.