Toksoidai. Gavimas ir taikymas. Toksoidas Informacinis toksoido kiekio nustatymo metodas

Deja, mes gyvename pasaulyje, kuriame net nedidelis odos pjūvis gali kelti rimtą grėsmę žmogaus gyvybei. Šiandien mes su tokiais susipažinsime pavojinga ligakaip stabligė. Sveiki, mano brangieji! Liga, apie kurią kalbėsime šiandien, atgyveno nuo neatmenamų laikų ir iki šiol tebekelia tūkstančius žmonių gyvybių. Pirmą kartą išsamų stabligės aprašymą aprašė puikus praeities protas Hipokratas, kurio šeimadėl šios ligos ji neteko sūnaus. Iki XIX amžiaus pabaigos medicina negalėjo įsitvirtinti tikroji priežastis stabligės atsiradimas, tačiau gydytojai ir gydytojai pagrįstai susiejo jos vystymąsi su žaizdomis. Ligos sukėlėją - stabligės bacilą, išskirtinis rusų chirurgas Nestoras Dmitrijevič Monastyrsky nustatė 1883 m. Tačiau tik po beveik pusės amžiaus, dvidešimtojo amžiaus dvidešimtojo dešimtmečio viduryje, prancūzų imunologo G. Ramono pastangomis medicina padarė proveržį gydant stabligę. Būtent G. Ramonui priklauso stabligės toksoido gavimo metodas, kuris iki šiol taikomas skiepijimo metu, apsaugantis žmoniją nuo šios sunkios ligos. Nebūtų klaidinga sakyti, kad beveik visos neskiepytos Trečiojo pasaulio šalys kasmet turi daugiau nei 1 milijoną stabligės infekcijų. Pasaulio sveikatos organizacijos duomenimis, nuo jo pasekmių miršta apie 400 tūkst. Kas yra stabligė ir kodėl ji tokia pavojinga? Stabligė arba stabligė yra ūmi infekcinė liga, perduodama kontaktuojant. Stabligę galite gauti bet kurioje pasaulio vietoje, tačiau didelė infekcijos tikimybė sužalojimo atveju pastebima esant karštam, drėgnam klimatui, kai patogeno dirvožemyje yra ypač daug, o žaizdos gyja. ilgas laikas. Ligos sukėlėjas yra sporas formuojanti judri anaerobinė bakterija Clostridium tetani, gaminanti vieną iš galingiausių planetoje aptinkamų toksinų - tetanospazminą. Tik 2 ng kiekis 1 kg kūno svorio tetanospazmino organizme gali sukelti mirtį. Bakterija gyvena žolėdžių, paukščių ir žmonių žarnyne, kur patenka su užterštu maistu. Su išmatomis stabligės bacilos patenka į išorinę aplinką, kur ji egzistuoja sporų pavidalu, kurios yra labai atsparios agresyviam poveikiui. Pavyzdžiui, sporos dvi valandas gali atlaikyti 90 ° C temperatūrą. Būdama šeimininko žarnyne, bakterija nesukelia jokių sutrikimų. Bet kai patogenas patenka į žaizdą, kuriai trūksta deguonies, bakterijos vystosi ir toliau dauginasi iš sporų, kartu išsiskiria nervų sistemą veikiantys toksinai. Daugeliu atvejų stabligės infekcija atsiranda dėl kojų sužalojimų. Dėl šios priežasties stabligė liaudyje dar vadinama „basų kojų liga“. Žaizdos gali būti kitokio pobūdžio: įpjovimai, pradūrimai, įbrėžimai, nudegimai, nušalimai. Net banalus atplaiša gali sukelti stabligę. Pavojingiausios yra durtinės ir gilios žaizdos, kurioms trūksta deguonies. Susiformavęs dėl gyvybinės bakterijų veiklos, tetanospazminas per nervinių ląstelių procesus prasiskverbia į centrinę nervų sistemą, sutrikdydamas nugaros smegenų ir smegenų veiklą. Nuo užkrėtimo momento iki pirmųjų stabligės simptomų vidutiniškai tai trunka apie dvi savaites, tačiau kartais šis laikotarpis gali sutrumpėti iki 1–4 dienų arba padidėti iki mėnesio, priklausomai nuo kurso sunkumo. Paprastai liga prasideda ūmiai. Pirmasis stabligės požymis yra tempimo skausmai ir raumenų trūkčiojimas infekcijos vietoje, kur šiuo metu dažnai jau įvyko visiškas žaizdos gijimas. Kitas dažniausiai pasitaikantis stabligės simptomas yra intensyvi kramtomųjų raumenų įtampa ir mėšlungis, sukeliantis sunkumus atveriant burną. Po to išsivysto veido raumenų traukuliai, suteikiantys veidui vadinamosios „sardoninės šypsenos“ išraišką. Panašu, kad žmogus tuo pačiu metu šypsosi ir verkia: ant kaktos atsiranda raukšlių, akis siaurėja, lūpos ištiesiasi, o burnos kampai krinta. Dėl ryklės raumenų spazmo pacientui tampa sunku ir skausminga nuryti. Dėl augančios įtampos tam tikroje raumenų grupėje pacientas gali atlikti įvairias, kartais keistas, pozas. Esant sunkiai stabligei, dėl aštraus spazmo nugaros raumenys, galva atmetama atgal, kūnas sulenkiamas taip, kad galėtumėte įkišti ranką tarp nugaros ir lovos. Kankinantys, labai skausmingi traukuliai pasklido po visą kūną, sukeldami uždusimą, širdies nepakankamumą ar sustojo kvėpavimą. Iš baisiausių stabligės komplikacijų reikia pažymėti kaulų lūžius, išnirimus, raumenų ir sausgyslių plyšimus, kuriuos sukelia sunkūs raumenų mėšlungiai ir kraujo užnuodijimas, kurį sukelia antrinės bakterinės infekcijos sluoksnis. Esant teigiamam ligos rezultatui, sveikimas įvyksta ne anksčiau kaip po 1,5-2 mėnesių, o reabilitacijos laikotarpis tęsiasi daugelį metų. Stabligės gydymas atliekamas tik intensyviosios terapijos ir intensyviosios terapijos skyrių medicinos klinikoje. Nesuteikus kvalifikuotos pagalbos, pacientas dažniausiai miršta. Kaip apsisaugoti ir apsisaugoti nuo stabligės infekcijos? Visų pirma, visas žaizdas ir įbrėžimus reikia nuplauti, apdoroti antiseptiku (vandenilio peroksidu, briliantiniu žaliu tirpalu ir kt.) Ir uždėti švarų, sausą tvarslą. Nepaisant to, kaip kruopščiai valoma žaizda, stabligės atveju to gali nepakakti. Šiuo metu tiek skubios, tiek įprastinės stabligės profilaktikos pagrindas yra vakcinacija, apie kurios poreikį mes pakankamai išsamiai kalbėjome ankstesniuose numeriuose. Jei sužalotas asmuo nebuvo paskiepytas nuo stabligės per pastaruosius 10 metų, tai norėdamas išvengti galimos infekcijos, jis turėtų nedelsdamas kreiptis į artimiausią gydymo įstaigą dėl stabligės toksoido vartojimo. Atminkite, kad stabligė yra labai klastinga ir sunki liga, dažnai sukelianti mirtį. Jei nesate paskiepyti nuo to, neignoruokite apsilankymo pas gydytoją. Skiepytis lengviau apsisaugoti, nei ilgai ir atkakliai išgydyti pačią ligą ir jos padarinius! Negalima sirgti! Patinka! Užsiprenumeruokite kanalą! Sveikatos tau!

Toksoidas (toksoidas) yra biologiškai aktyvus vaistas, gautas neutralizuojant bakterinius toksinus veikiant t ° 39–40 ° temperatūroje (Ramono metodas) ar kitomis priemonėmis. Toksoidas pasižymi specifinėmis pirminio toksino antigeninėmis ir imunogeninėmis savybėmis ir įgyja naujų - nekenksmingumo, stabilumo. Svarbiausia toksoido savybė yra imunogeniškumas, tai yra gebėjimas sukelti žmogaus imuniteto vystymąsi. Didžiausias imunogeniškumas esant stabligei, difterijai, botulino toksoidui.

Anatoksinas (Anatoxinum; iš graikų kalbos ana - prieš + toksiną; sinonimas toksoidas) yra nekenksmingas toksino darinys, kuris veikdamas formaliną ir šilumą visiškai prarado toksines pirminio toksino savybes ir išlaikė antigenines bei imunogenines savybės.

Toksoidas yra visiškai nekenksmingas, negrįžtamas (joks cheminis ir fizinis poveikis negali atstatyti vaisto pirminio toksiškumo). Toksoidas yra labai stabilus (toleruoja pakartotinį užšalimą ir atitirpimą, gerai atsparus aukštos temperatūros) ir yra labai stabilus ilgalaikis saugojimas... Toksogeno antigenines savybes (t. Y. Jo tinkamumą aktyviai imunizacijai) lemia flokuliacijos reakcija (žr.) Ir flokuliuojančių (antigeninių) vienetų (Lf) kiekis 1 ml vaisto. Veiksmingumas (pavyzdžiui, difterijos toksoidas) buvo įrodytas daugeliu eksperimentų su gyvūnais ir vaikų, suaugusiųjų, imunizuotų šiuo vaistu nuo difterijos, imuniteto tyrimo rezultatais.

Vietiniame difterijos toksoide 1 ml turi būti ne mažiau kaip 20 Lf. Šiuo metu aktyviam imunizavimui nuo difterijos vietoj vietinio difterijos toksoido naudojamas išgrynintas sorbuoto difterijos toksoidas. Difterijos toksoido vartojimas žmogui daugeliu atvejų nėra susijęs su nepageidaujama reakcija į skiepijimą. Kuo mažesnis vakcinuotų amžius, tuo rečiau pastebima „vakcinacijos reakcija“ (per 24–48 valandas), išreikšta t ° padidėjimu iki 38,5 ° ir bloga savijauta... Difterijos toksoido naudojimas aktyviai imunizacijai nuo difterijos žymiai sumažino sergamumą. Nustatytas aktyvios imunizacijos nuo stabligės stabligės toksoidu veiksmingumas, įrodytas jos pranašumas prieš stabligės seroprofilaktiką.

Veikiant bakterinius toksinus su tam tikra formalino koncentracija ir palaikant toksiną t ° 37–40 ° temperatūroje tiek laiko, kiek reikia visiškam neutralizavimui ir toksino perėjimui prie toksoido, buvo galima gauti vaistų, naudojamų specifinė prevencija ir įvairių infekcijų terapija. Tai toksoidinis stafilokokas, botulinas, dizenterija, toksoidas iš toksinų, kuriuos gamina dujų gangrenos sukėlėjai, toksoidas iš kai kurių nuodingų gyvačių nuodų, toksoidas iš abrino.

Šiuo metu toksoidai yra gryninami iš balastinių baltymų ir kitų azoto turinčių medžiagų, o specifiniai antigenai koncentruojami mažesniais kiekiais. Dažniausi toksoido gydymo metodai yra natūralaus toksoido nusodinimas. neutralios druskos (amonio sulfatas), sunkiųjų metalų druskos, nusodinimas rūgštimis (druskos, trichloracto, metafosforo) izoelektriniame taške, taip pat nusodinimas etanoliu ir metanoliu žemoje temperatūroje ir kt. Dėl to galima gauti vaistų kurios yra antigeninės ir imunogeninės savybės, yra žymiai pranašesnės už pirminį vietinį toksoidą. Nemažai susijusių išgrynintų, koncentruotų toksoidų, sorbuotų ant aliuminio hidroksido, naudojami vienu metu imunizacijai nuo kelių infekcijų: susijęs difterijos-stabligės toksoidas aktyviai imunizacijai nuo difterijos ir stabligės, difterijos-stabligės-kokliušo vakcina, skirta tuo pačiu metu aktyviai imunizuoti nuo šių infekcijų. Imunizacija su sorbuotu difterijos-stabligės toksoidu atliekama du kartus po oda po 0,5 ml dozes, tarp jų 30–45 dienų pertrauka, atliekant pirminę pakartotinę imunizaciją, kuri atliekama skiepijant 0,5 ml vaisto po 6–9 mėnesių. Vėlesnė vaikų reimunizacija atliekama su 0,5 ml vaisto doze. Taip pat žr. „Toksinai“.

Toksoidai (nuo neigimo, toksiniai nuodai) - preparatai, gauti iš bakterinių egzotoksinų, visiškai neturintys toksinių savybių, tačiau išlaikantys antigenines ir imunogenines savybes. Toksoido gavimo būdą 1923 m. Pasiūlė prancūzų mokslininkas Ramonas.

Dėl toksoidų paruošimo bakterijos, gaminančios egzotoksinus, yra auginamos skystose maistinėse terpėse, kad kauptųsi nuodai, ir tada filtruojamos per bakterijų filtrus, kad būtų pašalinti mikrobų kūnai. Į filtratą pridedamas 0,3–0,4% formalino tirpalas ir 3-4 savaites dedamas į 37–40 ° C temperatūros termostatą, kol toksinės savybės visiškai išnyks. Gautas toksoidas tikrinamas dėl sterilumo, nekenksmingumo ir imunogeniškumo.

Tokie vaistai vadinami vietinis toksoidasnes juose yra didelis skaičius maistinės terpės medžiagos, kurios yra balastas ir gali prisidėti prie nepageidaujamų organizmo reakcijų vystymosi, kai yra skiriamas vaistas. Todėl šiuo metu naudojami daugiausia išgryninti toksoidai, kuriems vietiniai toksoidai gydomi įvairiais fiziniais ir cheminiai metodai (jonų mainų chromatografija, nusodinimas rūgštimis ir kt.), kad išsiskirtų visos balastinės medžiagos ir koncentruotų vaistą mažesniu tūriu. Tačiau sumažėjus toksoido dalelių dydžiui, buvo būtina adsorbuoti vaistą ant adjuvantų. Taigi naudojamas toksoidas yra adsorbuoti labai išgryninti koncentruoti preparatai. Specifinis toksoido aktyvumas nustatomas flokuliacijos reakcijoje, vadinamuosiuose flokuliacijos vienetuose, arba toksoidų jungimosi reakcijoje, išreikštoje jungimosi vienetais (EC).

Toksoidų titravimas flokuliacijos reakcijoje (pagal Ramono metodą) jis gaminamas pagal standartinį flokuliuojantį antitoksinį serumą, kuriame žinomas tarptautinių antitoksinių vienetų (ME) skaičius 1 ml. Vienas antigeninis toksoido vienetas žymimas Limes flocculationis (Lf - flokuliacijos slenkstis); tai toksoido kiekis, kuris visiškai susijungia su vienu antitoksiniu antitoksino vienetu.

Antigeninės toksoidų savybės taip pat nurodomos jungiantis. EC nustatymui reikalingas tiriamasis toksoido, standartinio antitoksinio serumo preparatas (kuriame yra 0,1 TV 1 ml), eksperimentinė toksino dozė (titruojama iki 0,1 TV standartinio serumo), baltos pelės.

Susiejimo reakcija atliekama taip: į daugelį mėgintuvėlių, turinčių tą patį tūrį standartinio antitoksinio serumo, pridedami skirtingi tiriamojo toksoido praskiedimai. Susiejimui skirtas mišinys laikomas termostate 45 min., Tada į kiekvieną mėgintuvėlį pridedama eksperimentinė toksino dozė ir vėl paliekama termostate 45 min. Po to iš kiekvieno mėgintuvėlio mišinys (serumas + toksoidas + toksinas) suleidžiamas į 2–4 peles ir jų būklė stebima 4 dienas. Jei visas toksidas, pridėtas prie serumo, jį suriša, toksino pridėjimas ir tolesnis mišinio įvedimas pelėms lemia jų mirtį. Jei toksoido dozės nepakanka visam serumui surišti, pridėtas toksinas serumu neutralizuojamas, o pelės nemiršta.

Toksoidai naudojami toksineminių infekcijų (difterijos, dujų gangrenos, botulizmo, stabligės ir kai kurių stafilokokų sukeltų ligų) profilaktikai ir rečiau gydymui. Toksoidai gaminami kaip monopreparatai ir kaip susijusios vakcinos, skirtos imunizacijai nuo kelių ligų.

Vadinami vaistai, skirti imunizacijai nuo bet kurios infekcijos vienkartinės vakcinos, nuo dviejų infekcinių ligų - divakcinų, nuo trijų - trivakinos, nuo kelių infekcijų - polivakcinos... Susijusios vakcinos yra preparatai, turintys įvairių bakterijų ir toksoidų antigenų mišinį. Susijusių vakcinų, tokių kaip DTP ar TABte, vartojimas gali sukurti imunitetą nuo daugybės infekcijų ir sumažinti skiepijimų skaičių.

Daugiavalentes vakcinas įprasta vadinti vaistais, į kuriuos įeina kelios vienos infekcijos patogenų veislės arba serologiniai tipai (pavyzdžiui, gripas, leptospirozė ir kt.).


Toksoidai (anatoxinum iš graikų kalbos - "an" - neigimas ir tokso "- nuodai) yra preparatai, gauti iš bakterinių egzotoksinų, visiškai neturintys toksinių savybių, tačiau išlaikantys antigenines ir imunogenines savybes. Toksoido gavimo būdą 1923 m. Pasiūlė didžiausias prancūzų mokslininkas G. Ramonas. Ruošiant toksoidus, toksinų kaupimui skystose maistinėse terpėse (didelės talpos reaktoriuose) auginamos bakterijų kultūros, toksineminių infekcijų sukėlėjai, gaminantys egzotoksinus. Tada filtruojama per bakterijų filtrus, kad būtų pašalinti mikrobų kūnai. Į filtratą pridedama 0,3–0,4% formalino ir 3-4 savaites dedama į 37–40 ° C temperatūros termostatą, kol toksinės savybės visiškai išnyks.

Gautas toksoidas tikrinamas dėl sterilumo, nekenksmingumo ir imunogeniškumo. Tokie vaistai vadinami natūraliais toksoidais, nes juose yra daug maistinių medžiagų, kurios yra balastinės ir gali prisidėti prie nepageidaujamų organizmo reakcijų vystymosi, kai švirkščiamas vaistas.

Vietiniai toksoidai turi būti vartojami didelėmis dozėmis dėl mažo jų specifinio aktyvumo. Todėl šiuo metu naudojami daugiausia išgryninti toksoidai, kuriems vietiniai toksoidai yra apdorojami įvairiais fizikiniais ir cheminiais metodais (jonų mainų chromatografija, nusodinimas rūgštimis ir kt.), Kad išsiskirtų visos balastinės medžiagos ir koncentruotųsi vaistas mažesnėje apimtis. Tačiau sumažėjus toksoido dalelių dydžiui, buvo būtina adsorbuoti vaistą ant adjutantų.

Taigi naudojamas toksoidas yra adsorbuoti labai išgryninti koncentruoti preparatai: "Specifinis toksoido aktyvumas ar stiprumas nustatomas flokuliacijos reakcijoje vadinamuosiuose flokuliacijos vienetuose - (Lf) arba toksoidų jungimosi reakcijose, išreikštose jungimosi vienetais - (EC). Toksokų titravimas flokuliacijos reakcijoje (pagal Ramono metodą) atliekamas pagal standartinį flokuliuojantį antitoksinį serumą, kuriame žinomas tarptautinių antitoksinių vienetų (ME, žr. P. 23) skaičius 1 ml. antigeninis toksoido vienetas yra vadinamas Limes flocculationis (Lf yra flokuliacijos slenkstis), tai yra toksoido kiekis, kuris pradeda flokuliacijos reakciją su vienu difterijos antitoksino vienetu.

Nustačius toksoido dozę, kuri sukėlė pradinę (pirminę) flokuliacijos reakciją su vienu antitoksiniu serumo vienetu, apskaičiuokite vaisto Lf kiekį 1 ml. Stabligės toksoido (ir kai kurių kitų) antigeninės savybės nurodomos surišimo vienetais (EC). Norint nustatyti EC, jums reikia: tiriamojo toksoido preparato, standartinio antitoksinio serumo (kurio sudėtyje yra 0,1 TV 1 ml), eksperimentinės toksino dozės (titruojamos iki 0,1 TV standartinio serumo), baltųjų pelių. atliekamas taip: į mėgintuvėlių eilę su tokiu pačiu tūrio etaloniniu serumu įpilkite skirtingų tiriamojo toksoido praskiedimų. Susiejimo mišinys 45 minutes laikomas termostate, tada į kiekvieną mėgintuvėlį pridedama eksperimentinė toksino dozė ir vėl palikta termostate 45 minutėms.

Po to 2–4 pelėms iš kiekvieno mėgintuvėlio suleidžiamas mišinys (serumas - toksoidas - toksinas) ir 4 dienas stebima gyvūnų būklė. Jei visas toksidas, pridėtas prie serumo, yra jo surištas, toksino pridėjimas ir vėlesnė pelių infekcija lemia jų mirtį. Jei toksoido dozės nepakanka surišti visam serumui, pridėtas toksinas serumu neutralizuojamas, o pelės lieka gyvos. Norint apskaičiuoti EC 1 ml nustatyto toksoido, imamas toksoido skiedimas, per kurį 4% miršta 50% baltųjų pelių. Šiame toksoido kiekyje yra dozė, surišanti 0,1 TV serumo. Toksoidai naudojami toksineminių infekcijų (difterijos, dujų gangrenos, botulizmo, stabligės) ir kai kurių stafilokokų sukeltų ligų profilaktikai ir rečiau.