ვირუსოლოგიური კვლევის ძირითადი ეტაპები. ვირუსოლოგიური კვლევები. დროის მანქანის გამოყენებით

სულ უფრო აქტუალური ხდება ვირუსოლოგიური კვლევები ინფექციურ დაავადებათა კლინიკაში უფრო მაღალი ღირებულება, რაც უპირველეს ყოვლისა განპირობებულია ვირუსული ინფექციების პროპორციის ზრდით, რომელთა კლინიკური სურათი ყოველთვის არ არის დამახასიათებელი. ამავდროულად, ვირუსოლოგიური დიაგნოსტიკის სწრაფი და საიმედო მეთოდები არ არის შემუშავებული ყველა ინფექციური დაავადებისთვის, ბევრი მათგანი შრომატევადია და მოითხოვს განსაკუთრებული პირობები, ექსპერიმენტული ცხოველები, კულტურის მედია და გაწვრთნილი პერსონალი. ამჟამად დიაგნოსტიკური მიზნით ვირუსული ინფექციებიისინი იყენებენ კვლევის 3 ძირითად ტიპს.
1. ინფექციური მასალის მიკროსკოპული გამოკვლევა ვირუსული ანტიგენის ან ქსოვილებში პათოგნომონური ცვლილებების გამოსავლენად. დიაგნოსტიკური მიზნებისათვის, პირდაპირ მიკროსკოპული გამოკვლევაპაციენტების ინფექციური მასალა გამოიყენება შეზღუდული რაოდენობის ვირუსული ინფექციების დროს (ცოფი, ჩუტყვავილა, ყვითელი ცხელება, ჰერპესი და ა.შ.). ფლუორესცენტური ანტისხეულების გამოყენებით ვირუსული ანტიგენის გამოვლენაზე დაფუძნებული მეთოდი უფრო ფართოდ გამოიყენება. იმუნოფლუორესცენციის მეთოდი შეიძლება იყოს საიმედო მხოლოდ იმ შემთხვევაში, თუ მკაცრად არის დაცული ყველა ტექნიკური მოთხოვნა.
2. ვირუსოლოგიური მეთოდები.
3. სეროლოგიური კვლევები დაავადების მიმდინარეობისას ანტისხეულების ტიტრის ზრდის დასადგენად. სეროლოგიური კვლევის მეთოდები უფრო ხელმისაწვდომია ლაბორატორიულ პირობებში.
ამ კვლევებისთვის აუცილებელია სისხლის შრატის მიღება დაავადების მწვავე პერიოდში და გამოჯანმრთელების პერიოდში (დაწყვილებული შრატები). სისხლის ნიმუშები ამისთვის სეროლოგიური კვლევებიმიიღება სტერილურად ანტიკოაგულანტებისა და კონსერვანტების გარეშე.
ვირუსოლოგიური კვლევის ძირითადი ეტაპებია ვირუსების გამოყოფა, მათი იდენტიფიკაცია და ძირითადი ბიოლოგიური თვისებების დახასიათება. ამჟამად არ არსებობს ვირუსების სხვადასხვა ჯგუფის იზოლირების ერთიანი მეთოდი. ეს, უპირველეს ყოვლისა, განპირობებულია მათი თვისებების მრავალფეროვნებით და მასპინძელი ორგანიზმის გარეთ გაშენების თავისებურებებით. კვლევისთვის გამოიყენება ბიოსუბსტრატები (ლორწოვანი გარსების, სისხლიდან და მისი კომპონენტების გამორეცხვა, ცერებროსპინალური სითხე, შარდი და განავალი, ორგანოებისა და ქსოვილების ბიოფსია ან მათი ნაწილაკები აუტოფსიის დროს აღებული), რომლებიც ექვემდებარება სპეციალურ დამუშავებას, რასაც მოჰყვება მასალის გავლა. კვლევისთვის აღებული მასალა უნდა ინახებოდეს -20 °C-დან -70 °C-მდე ტემპერატურაზე. წინასწარი დიაგნოზიდან გამომდინარე, მასალის დამუშავებას აქვს საკუთარი მახასიათებლები, მაგრამ ყველა შემთხვევაში ვარაუდობენ სუბსტრატის მიღებას, რომელიც მაქსიმალურად არის გაწმენდილი ლორწოს მინარევებისაგან, ორგანოებისა და ქსოვილების უჯრედები ან მათი ფრაგმენტები და ბაქტერიები. ეს მიიღწევა შესასწავლი მასალის ჰომოგენიზაციის გზით სპეციალურ აპარატში ან ფაიფურის ნაღმტყორცნებში კვარცის მინით (ორგანოებისა და ქსოვილების ნაჭრები) სიცივეში დაფქვით, სტერილური გაცივებული (+4 C) 0.9-ის დამატებით. %

ნატრიუმის ქლორიდის ხსნარი 10-30%-იანი სუსპენზიის მიღებამდე და შემდგომ ცენტრიფუგირება 1500-3000 rpm-ზე 10-15 წუთის განმავლობაში. ამგვარად მიღებული სუპერნატანტური სითხე გამოიყენება შემდგომი კვლევისთვის.
მანამდე ინტენსიური განვითარებადა ფართოდ გავრცელებულ პრაქტიკაში გამოყენებული იქნა ქსოვილებისა და უჯრედების კულტურის მეთოდის, ექსპერიმენტული ცხოველების ან ქათმის ემბრიონის ინფექცია. ეს მეთოდები დღესაც გამოიყენება. ცხოველების გამოყენებით ვირუსების გამოვლენა ყველაზე მიზანშეწონილია იმ შემთხვევებში, როდესაც შესაძლებელია ტიპიური სურათის რეპროდუცირება ექსპერიმენტში. ინფექციური დაავადებაან მისი ინდივიდუალური გამოვლინებები. ამრიგად, არბოვირუსების და კოქსაკის ჯგუფის პათოგენები შეიძლება გამოვლინდეს ძუძუთი თაგვების ტვინში ინფექციით, გრიპით ქათმის ემბრიონის ინფექციით ან თაგვებისთვის ტესტის მასალის ინტრანაზალური შეყვანით. ვირუსოლოგიურ ლაბორატორიებში ქ ბოლო წლებიუჯრედებისა და ქსოვილების კულტურის ყველაზე ფართოდ გამოყენებული მეთოდი, რომელიც შესაძლებელს ხდის ადენოვირუსების, ჰერპეს ვირუსების, რესპირატორული სინციციალური ვირუსების, მიქსოვირუსების და სხვათა იზოლირებას და უკვე კვლევის პირველ ეტაპზე დაავადების ეტიოლოგიური დიაგნოზის ჩატარებას. ამის საფუძველია ვირუსებისა და უჯრედების უმეტესობის ურთიერთქმედების კარგად შესწავლილი ციტოლოგიური მახასიათებლები. ამრიგად, HeLa, Hep-2 უჯრედების ინფექცია მე-2 ტიპის ადენოვირუსის შემცველი მასალით, უკვე მე-3 დღეს იწვევს უჯრედის ერთფენის ზრდის ნიმუშის ცვლილებას და ტიპიური უჯრედების გამოჩენას ყურძნის მტევნების სახით და ა.შ. , კარგად განსაზღვრული ჩვეულებრივი სინათლის მიკროსკოპში დაბალი გადიდების დროს.
ინფექციური დაავადების ეტიოლოგიური დიაგნოსტიკისთვის განსაკუთრებული მნიშვნელობა აქვს ტესტის მასალისგან ვირუსის იზოლაციის სტანდარტიზაციას, რომელიც ამ სცენაზენამუშევარი გულისხმობს გენეტიკურად სუფთა ხაზოვანი ცხოველების გამოყენებას მათი ფენოტიპური (პირველ რიგში ასაკობრივი) მახასიათებლების გათვალისწინებით. ეს, უპირველეს ყოვლისა, განპირობებულია იმით, რომ სხვადასხვა გენეტიკური ხაზისა და ასაკის ექსპერიმენტული ცხოველები შედიან სხვადასხვა ხარისხითმგრძნობიარეა ვირუსების მიმართ. ამრიგად, გრიპის ვირუსის ნეიროტროპული შტამით WSN თაგვების ინტრაცერებრული ინფექციის დროს, BALB/c, A, CBA და გარე ხაზების ცხოველების მგრძნობელობა ყველაზე დიდი იყო ტესტის ინტრანაზალური შეყვანის შემთხვევაში მასალა. აუცილებელი ამისთვის საბოლოო შედეგებივირუსის იზოლაციაზე მუშაობა გულისხმობს ცხოველების, ქათმის ემბრიონების, უჯრედებისა და ქსოვილების კულტურების წინასწარ გამოკვლევას ლატენტური ვირუსის გადასატანად. ქათმის ემბრიონები, რომლებიც ფართოდ გამოიყენება ლაბორატორიულ პრაქტიკაში, შეიძლება დაინფიცირდეს ფრინველის ლეიკემიის, ფრინველის ენცეფალომიელიტის, ინფექციური სინუსიტის, ფსიტაკოზის, ნიუკასლის დაავადების ვირუსებით და ზოგიერთი პათოგენით. ბაქტერიული ინფექციები(პარატიფოიდური ცხელება და სხვ.), ასევე მიკოპლაზმა. მეტი უფრო დიდი რაოდენობაბაქტერიულ და განსაკუთრებით ვირუსულ აგენტებს შეუძლიათ სპონტანურად დაინფიცირონ კულტივირებული უჯრედები და ქსოვილები და გადარჩნენ მათში. მათი არსებობა მნიშვნელოვნად მოქმედებს შესასწავლი მასალის შეფასებაზე. მიკოპლაზმების ზოგიერთი ტიპი უჯრედულ კულტურაში
შეიძლება გამოიწვიოს ჰემაგლუტინაცია და ჰემადსორბცია და აგარის საფარის ქვეშ ვირუსების მიერ წარმოქმნილი დაფების მსგავსიც კი წარმოქმნას. ერთი ტიპის უჯრედული კულტურების სხვათა დაბინძურება ასევე არ არის მცირე მნიშვნელობა, რაც ყველაზე ხშირად ასოცირდება HeLa უჯრედებთან და შეინიშნება იმავე ოთახში სხვადასხვა ტიპის კულტურებთან მუშაობისას, როდესაც ლაბორატორიული მინის ჭურჭელი ცუდად არის დამუშავებული და ა.შ. უჯრედული კულტურების დაბინძურება ან ცხოველების ინფექცია ბაქტერიული აგენტებით, როგორიცაა, როგორც წესი, საკმაოდ მკაფიოდ ვლინდება (უჯრედების მონოფენის ზრდის ნიმუშის ცვლილება, კულტურის გარემოს თვისებები, ქათმის ემბრიონის ან ცხოველების სიკვდილი გარკვეული სიმპტომებით და სხვ.) და არ წარმოადგენს რაიმე განსაკუთრებულ სირთულეს შედეგების შეფასებისას. სიტუაცია უფრო გართულებულია ინფექციის ლატენტური ფორმებით, სადაც საჭიროა სეროლოგიური და სხვა მეთოდების გამოყენება. ეს ინსტრუქციები მხედველობაში უნდა იქნას მიღებული ვირუსოლოგის მუშაობისას, განსაკუთრებით დაავადების გაურკვეველი შემთხვევების ეტიოლოგიური დიაგნოზის ჩატარებისას.

ვირუსოლოგიური კვლევის მეთოდები

ვირუსების ბიოლოგიის შესწავლის მეთოდები და მათი იდენტიფიკაცია. ვირუსოლოგიაში ფართოდ გამოიყენება მოლეკულური ბიოლოგიის მეთოდები, რომელთა დახმარებით შესაძლებელი გახდა ვირუსული ნაწილაკების მოლეკულური სტრუქტურის, უჯრედში მათი შეღწევის მეთოდები და ვირუსული რეპროდუქციის მახასიათებლები, ვირუსული ნუკლეინის მჟავების და ცილების პირველადი სტრუქტურა. მუშავდება მეთოდები ვირუსული ნუკლეინის მჟავების და ცილოვანი ამინომჟავების შემადგენელი ელემენტების თანმიმდევრობის დასადგენად. შესაძლებელი ხდება ნუკლეინის მჟავების და მათში კოდირებული ცილების ფუნქციების დაკავშირება ნუკლეოტიდურ თანმიმდევრობასთან და დადგინდეს უჯრედშიდა პროცესების მიზეზები, რომლებიც მნიშვნელოვან როლს ასრულებენ ვირუსული ინფექციის პათოგენეზში.

ვირუსოლოგიური კვლევის მეთოდები ასევე ეფუძნება იმუნოლოგიურ პროცესებს (ანტიგენის ურთიერთქმედება ანტისხეულებთან), ვირუსის ბიოლოგიურ თვისებებზე (ჰემაგლუტინაციის უნარი, ჰემოლიზი, ფერმენტული აქტივობა), ვირუსის მასპინძელ უჯრედთან ურთიერთქმედების თავისებურებები (ციტოპათიური ეფექტის ბუნება). , უჯრედშიდა ჩანართების წარმოქმნა და სხვ.) .

ვირუსული ინფექციების დიაგნოსტიკაში, ვირუსების კულტივირებაში, იზოლაციაში და იდენტიფიკაციაში, ასევე ვაქცინის პრეპარატების წარმოებაში ფართოდ გამოიყენება ქსოვილისა და უჯრედის კულტურის მეთოდი. გამოიყენება პირველადი, მეორადი, სტაბილური უწყვეტი და დიპლოიდური უჯრედების კულტურები. პირველადი კულტურები მიიღება ქსოვილის დისპერსიით პროტეოლიზური ფერმენტებით (ტრიფსინი, კოლაგენაზა). უჯრედების წყარო შეიძლება იყოს ადამიანის და ცხოველის ემბრიონის ქსოვილები და ორგანოები (ჩვეულებრივ თირკმელები). მკვებავ გარემოში უჯრედების სუსპენზია თავსდება ეგრეთ წოდებულ ლეიბებში, ბოთლებში ან პეტრის ჭურჭელში, სადაც ჭურჭლის ზედაპირზე მიმაგრების შემდეგ უჯრედები იწყებენ გამრავლებას. ვირუსული ინფექციისთვის ჩვეულებრივ გამოიყენება უჯრედის მონოფენა. მკვებავი სითხე დრენირებულია, ვირუსულ სუსპენზიას ემატება გარკვეული განზავებით და უჯრედებთან კონტაქტის შემდეგ ემატება ახალი საკვები ნივთიერება, როგორც წესი, შრატის გარეშე.

პირველადი კულტურების უმეტესობის უჯრედები შეიძლება იყოს სუბკულტურული. უჯრედების შემდგომი გავლისას იქმნება ფიბრობლასტის მსგავსი უჯრედების პოპულაცია, რომელსაც შეუძლია სწრაფი გამრავლება, უმეტესობარომელიც ინარჩუნებს ქრომოსომების თავდაპირველ კომპლექტს. ეს არის ეგრეთ წოდებული დიპლოიდური უჯრედები. უჯრედების სერიული კულტივირებით მიიღება სტაბილური უწყვეტი უჯრედული კულტურები. გავლის დროს ჩნდება სწრაფად გამყოფი ჰომოგენური უჯრედები ქრომოსომების ჰეტეროპლოიდური ნაკრებით. სტაბილური უჯრედული ხაზები შეიძლება იყოს ერთშრიანი ან შეჩერებული. ერთშრიანი კულტურები იზრდება უწყვეტი ფენის სახით მინის ზედაპირზე, ხოლო სუსპენზიის კულტურები იზრდება სუსპენზიების სახით სხვადასხვა ჭურჭელში შერევის მოწყობილობების გამოყენებით. 40-დან გამომდინარეობს 400-ზე მეტი უჯრედის ხაზი სხვადასხვა სახისცხოველები (მათ შორის პრიმატები, ფრინველები, ქვეწარმავლები, ამფიბიები, თევზები, მწერები) და ადამიანები.

ცალკეული ორგანოებისა და ქსოვილების ნაწილები (ორგანოკულტურები) შეიძლება კულტივირებული იყოს ხელოვნურ საკვებ გარემოში. ამ ტიპის კულტურები ინარჩუნებენ ქსოვილის სტრუქტურას, რაც განსაკუთრებით მნიშვნელოვანია ვირუსების იზოლაციისა და გავლისთვის, რომლებიც არ მრავლდებიან არადიფერენცირებულ ქსოვილოვან კულტურებში (მაგალითად, კოროვირუსები).

ინფიცირებულ უჯრედულ კულტურებში ვირუსების აღმოჩენა შესაძლებელია უჯრედის მორფოლოგიის ცვლილებებით, ციტოპათიური ეფექტებით, რომლებიც შეიძლება იყოს სპეციფიკური, ჩანართების გაჩენით, უჯრედში და კულტურის სითხეში ვირუსული ანტიგენების განსაზღვრით; ვირუსული შთამომავლების ბიოლოგიური თვისებების დადგენა კულტურის სითხეში და ვირუსების ტიტრირება ქსოვილის კულტურაში, ქათმის ემბრიონებში ან მგრძნობიარე ცხოველებში; უჯრედებში ცალკეული ვირუსული ნუკლეინის მჟავების იდენტიფიცირებით მოლეკულური ჰიბრიდიზაციით ან ნუკლეინის მჟავების დაგროვებით ციტოქიმიური მეთოდით ფლუორესცენტური მიკროსკოპის გამოყენებით.

ვირუსების იზოლირება შრომატევადი და შრომატევადი პროცესია. ტარდება მოსახლეობაში მოცირკულირე ვირუსის ტიპის ან ვარიანტის დასადგენად (მაგალითად, გრიპის ვირუსის სეროვარიანტის, პოლიომიელიტის ვირუსის ველური ან ვაქცინის შტამის იდენტიფიცირება და ა.შ.); იმ შემთხვევებში, როდესაც აუცილებელია გადაუდებელი ეპიდემიოლოგიური ღონისძიებების გატარება; როდესაც ჩნდება ვირუსების ახალი ტიპები ან ვარიანტები; საჭიროების შემთხვევაში დაადასტურეთ წინასწარი დიაგნოზი; ობიექტებში ვირუსების მითითება გარემო. ვირუსების იზოლირებისას მხედველობაში მიიღება ადამიანის ორგანიზმში მათი შენარჩუნების შესაძლებლობა, აგრეთვე ორი ან მეტი ვირუსით გამოწვეული შერეული ინფექციის გაჩენა. ერთი ვირიონიდან მიღებულ ვირუსის გენეტიკურად ერთგვაროვან პოპულაციას ვირუსული კლონი ეწოდება, ხოლო მიღების პროცესს კლონირება.

ვირუსების იზოლირებისთვის გამოიყენება მგრძნობიარე ლაბორატორიული ცხოველებისა და ქათმის ემბრიონების ინფექცია, მაგრამ ყველაზე ხშირად გამოიყენება ქსოვილის კულტურა. ვირუსის არსებობა ჩვეულებრივ განისაზღვრება უჯრედების სპეციფიკური დეგენერაციით (ციტოპათიური ეფექტი), სიმპლასტებისა და სინციტიების წარმოქმნით, უჯრედშიდა ჩანართების გამოვლენით, აგრეთვე სპეციფიკური ანტიგენით, რომელიც გამოვლენილია იმუნოფლუორესცენციის, ჰემადსორბციის, ჰემაგლუტინაციით (ჰემაგლუტინირებადი ვირუსებისთვის) და ა.შ. . ეს ნიშნები შეიძლება გამოვლინდეს მხოლოდ ვირუსის 2-3 გავლის შემდეგ.

რიგი ვირუსების იზოლირებისთვის, როგორიცაა გრიპის ვირუსები, გამოიყენება ქათმის ემბრიონები, ხოლო ზოგიერთი კოქსაკის ვირუსის და რიგი არბოვირუსების იზოლირებისთვის გამოიყენება ახალშობილი თაგვები. იზოლირებული ვირუსების იდენტიფიკაცია ხორციელდება გამოყენებით სეროლოგიური რეაქციებიდა სხვა მეთოდები.

ვირუსებთან მუშაობისას მათი ტიტრი განისაზღვრება. ვირუსების ტიტრირება ჩვეულებრივ ხორციელდება ქსოვილის კულტურაში, რაც განსაზღვრავს ვირუსის შემცველი სითხის ყველაზე მაღალ განზავებას, რომლის დროსაც ხდება ქსოვილის დეგენერაცია, წარმოიქმნება ჩანართები და ვირუსის სპეციფიკური ანტიგენები. დაფის მეთოდი შეიძლება გამოყენებულ იქნას რიგი ვირუსების ტიტრირებისთვის. დაფები, ან ვირუსების უარყოფითი კოლონიები, არის ვირუსის მიერ განადგურებული უჯრედების კერები ერთი ფენის ქსოვილის კულტურაში, აგარის საფარის ქვეშ. კოლონიების დათვლა საშუალებას იძლევა რაოდენობრივი ანალიზივირუსების ინფექციური აქტივობა დაფუძნებული გაანგარიშებით, რომ ერთი ინფექციური ვირუსის ნაწილაკი ქმნის ერთ დაფას. დაფები აღმოჩენილია კულტურის შეღებვით ინტრავიტალური საღებავებით, ჩვეულებრივ ნეიტრალური წითელით; დაფები არ შთანთქავს საღებავს და, შესაბამისად, შესამჩნევია როგორც მსუბუქი ლაქები შეღებილი ცოცხალი უჯრედების ფონზე. ვირუსის ტიტრი გამოიხატება, როგორც დაფის წარმომქმნელი ერთეულების რაოდენობა 1-ზე მლ.

ვირუსების გაწმენდა და კონცენტრაცია ჩვეულებრივ ხორციელდება დიფერენციალური ულტრაცენტრიფუგაციით, რასაც მოჰყვება კონცენტრაციის ან სიმკვრივის გრადიენტური ცენტრიფუგა. ვირუსების გასაწმენდად გამოიყენება იმუნოლოგიური მეთოდები, იონგაცვლის ქრომატოგრაფია, იმუნოსორბენტები და ა.შ.

ვირუსული ინფექციების ლაბორატორიული დიაგნოზი მოიცავს პათოგენის ან მისი კომპონენტების გამოვლენას კლინიკურ მასალაში; ვირუსის იზოლირება ამ მასალისგან; სეროდიაგნოსტიკა. თითოეულში ლაბორატორიული დიაგნოსტიკური მეთოდის არჩევა განსაკუთრებული შემთხვევადამოკიდებულია დაავადების ბუნებაზე, ავადმყოფობის პერიოდზე და ლაბორატორიის შესაძლებლობებზე. თანამედროვე დიაგნოსტიკავირუსული ინფექციები ეფუძნება ექსპრეს მეთოდებს, რომლებიც საშუალებას გაძლევთ მიიღოთ პასუხი კლინიკური მასალის მიღებიდან რამდენიმე საათის შემდეგ ადრეული თარიღებიდაავადების შემდეგ, ეს მოიცავს ელექტრონულ და იმუნურ ელექტრონულ მიკროსკოპიას, ასევე იმუნოფლუორესცენციას, მოლეკულური ჰიბრიდიზაციის მეთოდს, IgM კლასის ანტისხეულების გამოვლენას და ა.შ.

უარყოფითად შეღებილი ვირუსების ელექტრონული მიკროსკოპია შესაძლებელს ხდის ვირუსების დიფერენცირებას და მათი კონცენტრაციის განსაზღვრას. ელექტრონული მიკროსკოპის გამოყენება ვირუსული ინფექციების დიაგნოსტიკაში შემოიფარგლება იმ შემთხვევებით, როდესაც ვირუსული ნაწილაკების კონცენტრაცია კლინიკურ მასალაში საკმაოდ მაღალია (10 5 1-ში მლდა უფრო მაღალი). მეთოდის მინუსი არის იგივე ტაქსონომიური ჯგუფის ვირუსების გარჩევის შეუძლებლობა. ამ დეფიციტის დაძლევა ხდება იმუნური ელექტრონული მიკროსკოპის გამოყენებით. მეთოდი ეფუძნება იმუნური კომპლექსების ფორმირებას ვირუსულ ნაწილაკებზე სპეციფიური შრატის დამატებით, ვირუსული ნაწილაკების ერთდროულად კონცენტრაციით, რაც მათ იდენტიფიცირების საშუალებას იძლევა. მეთოდი ასევე გამოიყენება ანტისხეულების გამოსავლენად. ექსპრეს დიაგნოსტიკური მიზნებისათვის ტარდება ქსოვილის ექსტრაქტების, განავლის, ვეზიკულებიდან სითხის და ნაზოფარინქსის სეკრეციის ელექტრონული მიკროსკოპული გამოკვლევა. ელექტრონული მიკროსკოპია ფართოდ გამოიყენება ვირუსის მორფოგენეზის შესასწავლად, მისი შესაძლებლობები ფართოვდება ეტიკეტირებული ანტისხეულების გამოყენებით.

მოლეკულური ჰიბრიდიზაციის მეთოდი, რომელიც დაფუძნებულია ვირუსისთვის სპეციფიკური ნუკლეინის მჟავების გამოვლენაზე, შესაძლებელს ხდის გენების ცალკეული ასლების აღმოჩენას და არ აქვს თანაბარი მგრძნობელობით. რეაქცია ემყარება დამატებითი დნმ-ის ან რნმ-ის ჯაჭვების (ზონდების) ჰიბრიდიზაციას და ორჯაჭვიანი სტრუქტურების ფორმირებას. ყველაზე იაფი ზონდი არის კლონირებული რეკომბინანტული დნმ. ზონდი მონიშნულია რადიოაქტიური წინამორბედებით (ჩვეულებრივ რადიოაქტიური ფოსფორით). პერსპექტიულია კოლორიმეტრული რეაქციების გამოყენება. მოლეკულური ჰიბრიდიზაციის რამდენიმე ვარიანტი არსებობს: ლაქების ჰიბრიდიზაცია, ბლოტის ჰიბრიდიზაცია, სენდვიჩის ჰიბრიდიზაცია, in situ ჰიბრიდიზაცია და ა.შ.

IgM კლასის ანტისხეულები უფრო ადრე ჩნდება, ვიდრე G კლასის ანტისხეულები (დაავადების მე-3-5 დღეს) და ქრება რამდენიმე კვირის შემდეგ, ამიტომ მათი აღმოჩენა მიუთითებს ბოლო ინფექციაზე. IgM კლასის ანტისხეულები გამოვლენილია იმუნოფლუორესცენციით ან გამოყენებით ფერმენტის იმუნოანალიზიანტი-μ ანტიშრატების გამოყენებით (ანტი-IgM მძიმე ჯაჭვის შრატები).

სეროლოგიური მეთოდები ვირუსოლოგიაში ეფუძნება კლასიკურ იმუნოლოგიურ რეაქციებს (იხ. იმუნოლოგიური კვლევის მეთოდები) : კომპლემენტის ფიქსაციის რეაქციები, ჰემაგლუტინაციის ინჰიბირება, ბიოლოგიური ნეიტრალიზაცია, იმუნოდიფუზია, არაპირდაპირი ჰემაგლუტინაცია, რადიალური ჰემოლიზი, იმუნოფლუორესცენცია, ფერმენტული იმუნოანალიზი, რადიოიმუნოანალიზი. შემუშავებულია მრავალი რეაქციის მიკრომეთოდები და მათი ტექნიკა მუდმივად იხვეწება. ეს მეთოდები გამოიყენება ვირუსების იდენტიფიცირებისთვის ცნობილი შრატების ნაკრების გამოყენებით და სეროდიაგნოსტიკისთვის მეორე შრატში ანტისხეულების მატების დასადგენად პირველთან შედარებით (პირველი შრატი მიიღება დაავადების შემდეგ პირველ დღეებში, მეორე - 2-ის შემდეგ. 3 კვირა). დიაგნოსტიკური მნიშვნელობა არის არანაკლებ ოთხჯერ გაზრდილი ანტისხეულების მეორე შრატში. თუ IgM კლასის ანტისხეულების აღმოჩენა მიუთითებს ბოლოდროინდელ ინფექციაზე, მაშინ IgC კლასის ანტისხეულები შენარჩუნებულია რამდენიმე წლის განმავლობაში, ზოგჯერ კი სიცოცხლისთვის.

ვირუსების ინდივიდუალური ანტიგენების და მათ მიმართ ანტისხეულების იდენტიფიცირებისთვის კომპლექსურ ნარევებში ცილების წინასწარი გაწმენდის გარეშე, გამოიყენება იმუნობლოტირება. მეთოდი აერთიანებს ცილების ფრაქციებს პოლიაკრილამიდური გელის ელექტროფორეზის გამოყენებით ცილების შემდგომი იმუნოჩვენებით ფერმენტული იმუნოანალიზის მეთოდის გამოყენებით. ცილების გამოყოფა ამცირებს მოთხოვნებს ანტიგენის ქიმიურ სისუფთავეზე და შესაძლებელს ხდის ინდივიდუალური ანტიგენ-ანტისხეულების წყვილების იდენტიფიცირებას. ეს ამოცანა აქტუალურია, მაგალითად, აივ ინფექციის სეროდიაგნოსტიკაში, სადაც მცდარია დადებითი რეაქციებიფერმენტული იმუნოანალიზი გამოწვეულია უჯრედული ანტიგენების მიმართ ანტისხეულების არსებობით, რომლებიც წარმოდგენილია ვირუსული ცილების არასაკმარისი გაწმენდის შედეგად. პაციენტთა შრატში ანტისხეულების იდენტიფიცირება შიდა და გარე ვირუსული ანტიგენების მიმართ შესაძლებელს ხდის დაავადების სტადიის დადგენა და პოპულაციების გაანალიზებისას ვირუსული ცილების ცვალებადობა. აივ ინფექციის იმუნობლოტირება გამოიყენება როგორც დამადასტურებელი ტესტი ინდივიდუალური ვირუსული ანტიგენებისა და მათ მიმართ ანტისხეულების იდენტიფიცირებისთვის. პოპულაციების ანალიზისას მეთოდი გამოიყენება ვირუსული ცილების ცვალებადობის დასადგენად. მეთოდის დიდი მნიშვნელობა მდგომარეობს რეკომბინანტული დნმ-ის ტექნოლოგიის გამოყენებით სინთეზირებული ანტიგენების ანალიზის შესაძლებლობაში, მათი ზომების დადგენა და ანტიგენური დეტერმინანტების არსებობა.

ვირუსოლოგიური კვლევები არის კვლევები, რომლებიც შექმნილია ვირუსების იზოლირებისთვის და მათი თვისებების შესასწავლად, ასევე ვირუსების ეტიოლოგიური კავშირის დასადგენად გარკვეულ დაავადებებთან.

კვლევისთვის მასალა მიიღება პაციენტის სხეულში უპირატესი ვირუსების ადგილმდებარეობისა და გარე გარემოში მათი გათავისუფლების მარშრუტების მიხედვით. მასალა გროვდება სტერილურ კონტეინერებში, მიეწოდება ლაბორატორიას რაც შეიძლება სწრაფად და ინახება გაყინულ ან ყინულზე გამოკვლევამდე. გამოყენებამდე ვირუსის იზოლაციისთვის განკუთვნილი მასალა მუშავდება (და) უცხო მიკროფლორას დასათრგუნად და მუშავდება დიდი ნაწილაკების მოსაშორებლად.

ვირუსები იზოლირებულია ლაბორატორიული ცხოველების, ქათმის ემბრიონებისა და ქსოვილების კულტურების ვირუსის შემცველი მასალით ინფიცირებით. იზოლაციის მეთოდის არჩევანი დამოკიდებულია დაავადების საეჭვო გამომწვევ აგენტზე. ამრიგად, ქსოვილის კულტურები (იხ.) გამოიყენება ვირუსებთან მუშაობისას, რომლებიც არ არის პათოგენური ლაბორატორიული ცხოველებისთვის, ან როდესაც ისინი აღმოჩენილია ქსოვილის კულტურაში უფრო ადრე, ვიდრე ცხოველების ინფიცირებისას. ქათმის ემბრიონები ინფიცირდება პათოგენების იზოლირებისთვის, ინფექციური ყბაყურა (ამნიონურ და ალანტოზურ ღრუში), (იყვითლის პარკში), ჩუტყვავილა (ქორიოალლანტოზურ გარსში).

ლაბორატორიულ ცხოველებს შორის თეთრი თაგვები ყველაზე ხშირად გამოიყენება ვირუსების იზოლირებისთვის, შემდეგ კურდღლები, ვირთხები, გვინეის ღორები, მაიმუნები. არბოვირუსებისთვის ყველაზე ეფექტურია ვირუსის შემცველი მასალის შეყვანა თავში ან პნევმოტროპული ვირუსებისთვის ლორწოვან გარსზე. სასუნთქი გზები, ჩუტყვავილას ვირუსებზე, - სკარიფიცირებულ რქოვანაზე.

ვირუსის იზოლაცია ყველაზე ეფექტურია მწვავე პერიოდიდაავადებები. დაავადების ვირუსული ბუნების დადგენაში არსებითი პუნქტია იმავე პაციენტისგან განმეორებით მიღებული შრატების სეროლოგიური კვლევების შედეგები დაავადების დაწყებისას და გამოჯანმრთელების პერიოდში. მეორე შრატში იზოლირებული ვირუსების მიმართ ანტისხეულების გამოვლენა ტიტრში, რომელიც 4 ან მეტჯერ აღემატება პირველ შრატში, მიუთითებს ვირუსების ეტიოლოგიურ კავშირზე ამ დაავადებასთან.

ადრეული და სწრაფი მეთოდივირუსული ანტიგენების გამოვლენა არის ფლუორესცენტური ანტისხეულების მეთოდი, რომელიც ეფუძნება ანტიგენის ზედაპირზე ფლუოროქრომით მარკირებული ანტისხეულების სპეციფიკურ ფიქსაციას. ანტიგენი ადვილად გამოვლენილია ფლუორესცენტური მიკროსკოპით (იხ.) ანტიგენზე ადსორბირებული ანტისხეულების ნათელი ფლუორესცენციის გამო. ფლუორესცენტური ანტისხეულების მეთოდი გამოიყენება პაციენტებისგან აღებული ნაცხის, დაზარალებული ქსოვილების ჰისტოლოგიური მონაკვეთების და ქსოვილის კულტურის პრეპარატების შესამოწმებლად. ისინი ასევე გამოიყენება ელემენტარული სხეულების (ვირიონების) აღმოსაჩენად (იხ.). სხვა მორფოლოგიურ მეთოდებს შორის გამოიყენება ის, რაც აღმოაჩენს უჯრედშიდა ვირუსულ ჩანართებს დაზარალებული ორგანოებისა და ქსოვილების მონაკვეთებში. ჩანართების გამოვლენა მიუთითებს ინფექციაზე და ზოგიერთ შემთხვევაში ხელს უწყობს ვირუსული დაავადების დიაგნოზს. სხვადასხვა გამოიყენება პაციენტების სისხლში ვირუსული ანტისხეულების გამოსავლენად და ვირუსების ანტიგენური სტრუქტურის შესასწავლად. ნეიტრალიზაციის რეაქცია გამოიყენება თითქმის ყველა ვირუსული ინფექციის დროს. იგი დაფუძნებულია იმუნური ანტისხეულების უნარზე, გაანეიტრალონ ვირუსების ინფექციური თვისებები, როდესაც ნარევი შეჰყავთ მგრძნობიარე ცხოველების სხეულში ან ქსოვილის კულტურაში. ნეიტრალიზაციის ინდექსის დასადგენად, შრატის მუდმივი დოზა ურევენ ვირუსების სხვადასხვა განზავებას, ხოლო ანტისხეულების ტიტრის დასადგენად, ურევენ შრატის სხვადასხვა განზავებას ვირუსების მუდმივი დოზით. კონტროლი არის ცხოველების ინფექცია (ან ქსოვილის კულტურა) ვირუსების ნარევით ნორმალური შრატით ან მასთან ერთად ფიზიოლოგიური ხსნარი. ნეიტრალიზაციის რეაქცია ტარდება არა მხოლოდ ანტისხეულების აღმოსაჩენად, არამედ ვირუსების ტიპისა და ტიპის დასადგენად.

კომპლემენტის ფიქსაციის რეაქცია [მაგალითად, ბორდე-გიანგუს რეაქცია (იხ.)] გამოიყენება როგორც ვირუსული ანტიგენების, ასევე ანტისხეულების გამოსავლენად. პირველ შემთხვევაში, რეაქცია მოიცავს ცნობილი იმუნური შრატისა და მასალის ურთიერთქმედებას, რომელშიც ანტიგენების არსებობაა ნავარაუდევი: სისხლის შრატი, ცხვირ-ხახის ნაცხი, ინფიცირებული ორგანიზმის ქსოვილის ექსტრაქტები. მეორე შემთხვევაში - ცნობილი ანტიგენი (diagnosticum) და პაციენტის ან გამოჯანმრთელების შრატი.

RSK გამოიყენება გრიპის ვირუსებით, ჩუტყვავილას ვირუსებით, ადენოვირუსებით და არბოვირუსებით გამოწვეული დაავადებების დიაგნოსტიკისთვის.

IN ლაბორატორიული დიაგნოსტიკავირუსული ინფექციები სამი ძირითადი მიდგომაა

1) მასალის პირდაპირი გამოკვლევა ვირუსული ანტიგენის ან ნუკლეინის მჟავების არსებობისთვის;

2) კლინიკური მასალისგან ვირუსის გამოყოფა და იდენტიფიკაცია;

კლინიკური მასალის დიაგნოსტიკის პირდაპირი მეთოდები

პირდაპირი მეთოდები არის მეთოდები, რომლებიც საშუალებას იძლევა ვირუსის, ვირუსული ანტიგენის ან ვირუსული ნუკლეინის მჟავის (NA) გამოვლენა უშუალოდ კლინიკურ მასალაში, ანუ ისინი ყველაზე სწრაფია (2-24 საათი).

ელექტრონული მიკროსკოპია (EM). ამ მეთოდის გამოყენებით, თქვენ შეგიძლიათ თავად ამოიცნოთ ვირუსი.

იმუნური ელექტრონული მიკროსკოპია (IEM), რომელიც იყენებს სპეციფიკურ ანტისხეულებს ვირუსების მიმართ. ანტისხეულების ვირუსებთან ურთიერთქმედების შედეგად წარმოიქმნება კომპლექსები, რომელთა აღმოჩენაც უფრო ადვილია უარყოფითი კონტრასტის შემდეგ.

იმუნოფლუორესცენციის რეაქცია (RIF). მეთოდი ეფუძნება საღებავთან დაკავშირებული ანტისხეულების გამოყენებას

RIF მეთოდი ფართოდ გამოიყენება მწვავე რესპირატორული ვირუსული ინფექციების ეტიოლოგიის სწრაფად გასაშიფრად ზედა სასუნთქი გზების ლორწოვანი გარსიდან თითის ანაბეჭდის ნაცხის ანალიზის დროს.

ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტული ანალიზი (ELISA). ვირუსული ანტიგენების განსაზღვრის ფერმენტული იმუნოანალიზის მეთოდები პრინციპში RIF-ის მსგავსია, მაგრამ დაფუძნებულია ანტისხეულების ეტიკეტირებაზე ფერმენტებით და არა საღებავებით.

რადიოიმუნოანალიზი (RIA). მეთოდი ეფუძნება ანტისხეულების ეტიკეტირებას რადიოიზოტოპებით, რაც უზრუნველყოფს მაღალ მგრძნობელობას ვირუსული ანტიგენის განსაზღვრისას.

მოლეკულური მეთოდები. თავდაპირველად, NK ჰიბრიდიზაციის უაღრესად სპეციფიური მეთოდი ითვლებოდა ვირუსული გენომის იდენტიფიცირების კლასიკურ მეთოდად, მაგრამ დღესდღეობით სულ უფრო ხშირად გამოიყენება ვირუსული გენომის იზოლაცია პოლიმერაზას გამოყენებით. ჯაჭვური რეაქცია(PCR).

ნუკლეინის მჟავების მოლეკულური ჰიბრიდიზაცია. მეთოდი ეფუძნება დნმ-ის ან რნმ-ის დამატებითი ჯაჭვების ჰიბრიდიზაციას ორჯაჭვიანი სტრუქტურების წარმოქმნით და მათ იდენტიფიცირებაზე.

PCR ეფუძნება ბუნებრივი დნმ-ის რეპლიკაციის პრინციპს. მეთოდის არსი არის ვირუსის სპეციფიკური დნმ-ის თანმიმდევრობის სინთეზის (ამპლიფიკაციის) მრავალჯერადი ციკლის გამეორება თერმოსტაბილური Taq დნმ პოლიმერაზასა და ორი სპეციფიკური პრაიმერის - ე.წ.

ციტოლოგიური მეთოდები ამჟამად შეზღუდულია დიაგნოსტიკური ღირებულება, მაგრამ რიგი ინფექციების დროს ისინი მაინც უნდა იქნას გამოყენებული. გაკვეთის მასალები, ბიოფსიები და ნაცხი გამოკვლეულია, რომელიც შესაბამისი დამუშავების შემდეგ ხდება შეღებვა და ანალიზი მიკროსკოპის ქვეშ.

ვირუსის წარმატებული იზოლაციისთვის კლინიკური მასალაუნდა იქნას მიღებული საეჭვო დაავადების პათოგენეზის შესაბამისად და რაც შეიძლება ადრეულ ვადაში.

როგორც წესი, ისინი იღებენ:

- რესპირატორული ინფექციების დროს - ცხვირ-ხახის გამრეცხვა;

– ენტეროვირუსული ინფექციების დროს – გამორეცხვა და განავალი (რეო-, ენტეროვირუსები);

– კანისა და ლორწოვანი გარსების დაზიანებების დროს – ნაკაწრები, ბუშტუკების შემცველობა (ჰერპესი, ჩუტყვავილა);

– ეგზანთემა ინფექციების დროს – გამორეცხვები (წითელა, წითურა);

– არბოვირუსული ინფექციების დროს – სისხლი, ცერებროსპინალური სითხე.

ვირუსების იზოლირებისთვის გამოიყენება უჯრედული კულტურები, ლაბორატორიული ცხოველები და ქათმის ემბრიონები. პროცესი ხანგრძლივია, ზოგჯერ მოითხოვს რამდენიმე პასაჟს ვირუსის აღმოჩენამდე და იდენტიფიცირებამდე ერთი ან რამდენიმე მეთოდის გამოყენებით - ნეიტრალიზაციის რეაქცია (RN), RIF, ELISA ან PCR.

სეროდიაგნოსტიკა

სეროლოგიური დიაგნოზი, რომელიც ეფუძნება ანტიგენ-ანტისხეულის რეაქციას, შეიძლება გამოყენებულ იქნას ორივეს დასადგენად და თამაშობს როლს ვირუსული ინფექციის ეტიოლოგიის დადგენაშიც კი უარყოფითი შედეგებივირუსის იზოლაცია.

RSK არის ერთ-ერთი ტრადიციული სეროლოგიური ტესტი და გამოიყენება მრავალი ვირუსული ინფექციის დიაგნოსტიკისთვის. რეაქციაში მონაწილეობს ორი სისტემა: ანტისხეულები პაციენტის შრატში + სტანდარტული ვირუსი და ცხვრის სისხლის წითელი უჯრედები + ანტისხეულები მათ მიმართ, ასევე ტიტრირებული კომპლემენტი. თუ ანტისხეულები და ვირუსი ემთხვევა, ეს კომპლექსი აკავშირებს კომპლემენტს და ცხვრის სისხლის წითელი უჯრედების ლიზისი არ ხდება (დადებითი რეაქცია). უარყოფითი RSC-ით, კომპლემენტი ხელს უწყობს ერითროციტების ლიზას. მეთოდის მინუსი არის მისი არასაკმარისი მგრძნობელობა და რეაგენტების სტანდარტიზაციის სირთულე. IF მეთოდი, ისევე როგორც ELISA, გამოიყენება შრატში ანტისხეულების დასადგენად.

ვირუსული ხასიათის დაავადებების დიაგნოსტიკის კვლევა. ეს აუცილებელია ვირუსის იდენტიფიცირებისთვის, მისი ბიოლოგიის და ცხოველთა და ადამიანის უჯრედებზე ზემოქმედების უნარის შესასწავლად. ამრიგად, შესაძლებელი ხდება პათოგენეზის გაგება ვირუსული დაავადებებიდა, შესაბამისად, აირჩიეთ სწორი მკურნალობის მეთოდი.

რა არის დიაგნოზი?

ცოცხალ უჯრედებში. მის შესასწავლად აუცილებელია მისი გაშენება ექსპერიმენტული ორგანიზმის დონეზე ან ამ მიზნით ქ სამედიცინო პრაქტიკადა ზოგადად მიკრობიოლოგია ტარდება ვირუსოლოგიური კვლევის მეთოდები, რომლებსაც აქვთ შემდეგი ძირითადი მიდგომები:

• სწორი;
• ირიბი;
• სეროლოგიური.

მასალის უშუალოდ გამოკვლევა შესაძლებელია ნუკლეინის მჟავების, ვირუსული ანტიგენის არსებობისთვის ან, მაგალითად, ვირუსის იზოლირება და იდენტიფიცირება კლინიკური მასალისგან.

დაავადების ეტიოლოგიის დადგენისა და თერაპიული ეფექტის მონიტორინგის შესაძლებლობის გარდა, ვირუსოლოგიური კვლევის მეთოდები მნიშვნელოვან როლს ასრულებს ანტიეპიდემიურ ღონისძიებებში. იზოლირებისთვის გამოიყენება ქათმის ემბრიონები, ლაბორატორიული ცხოველები ან უჯრედული კულტურები.

როგორ არის გამოკვლეული?

ყველაზე სწრაფი არის პირდაპირი მეთოდი. ის საშუალებას გაძლევთ აღმოაჩინოთ ვირუსი, ანტიგენი ან NA (ნუკლეინის მჟავა) თავად კლინიკურ მასალაში. ორი საათიდან ერთ დღეში სჭირდება.

1. EM - ელექტრონული მიკროსკოპია. აღმოაჩენს ვირუსს პირდაპირ.
2. IEM - იმუნური ელექტრონული მიკროსკოპია. იყენებს სპეციფიკურ ანტისხეულებს ვირუსების მიმართ.
3. RIF - იმუნოფლუორესცენციის რეაქცია. იყენებს საღებავთან დაკავშირებულ ანტისხეულებს. ასეთი ვირუსოლოგიური კვლევის მეთოდები ფართოდ გამოიყენება ARVI-ის (მწვავე რესპირატორული ვირუსული ინფექციების) ეტიოლოგიის სწრაფად გასაშიფრად, როდესაც თითის ანაბეჭდის ნაცხი აღებულია ზედა სასუნთქი გზების ლორწოვანი გარსიდან.
4. ELISA - ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტული ანალიზი - ვირუსული ანტიგენების განსაზღვრა, RIF-ის მსგავსი, მაგრამ დაფუძნებული ანტისხეულების ფერმენტებით მარკირებაზე.
5. RIA - რადიოიმუნოანალიზი. იყენებს ანტისხეულების რადიო მარკირებას, რათა უზრუნველყოს მაღალი მგრძნობელობა ვირუსული ანტიგენის გამოვლენისას.
6. მოლეკულური - NK ჰიბრიდიზაცია ან ვირუსის გენომის იზოლაცია PCR (პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქცია) გამოყენებით.
7. ციტოლოგია იშვიათად გამოიყენება, მაგრამ გარკვეული ინფექციებისთვის ეს ვირუსოლოგიური კვლევის მეთოდები ძალიან ეფექტურია. ბიოფსიის მასალები, გაკვეთები და მიკროსკოპის ქვეშ შეღებვისა და ანალიზისთვის დამუშავებული ნაცხი შესწავლილია.

რა აზრი აქვს კვლევას?

ვირუსების წარმატებით იზოლირებისთვის კლინიკურ მასალას იღებენ პათოგენეზის შესაბამისად და რაც შეიძლება ადრე. ხშირად ეს პროცესი მოითხოვს რამდენიმე პასაჟს გარკვეული ვირუსოლოგიური კვლევის მეთოდების გამოყენებამდე.

მიკრობიოლოგია არის მიკროსკოპული არსებების შესწავლა. და მისი სფერო არ არის მხოლოდ მედიცინა. ეს არის ფუნდამენტური მეცნიერება სოფლის მეურნეობავეტერინარია, კოსმოსური და ტექნიკური მრეწველობა, გეოლოგია.

მაგრამ, რა თქმა უნდა, ყველაფერი შეიქმნა ადამიანისთვის და მისი განვითარებისთვის ამ მშვენიერ პლანეტაზე. ამიტომ ძალიან მნიშვნელოვანია საფრთხის დროულად გამოვლენა და მისი განეიტრალება. ვირუსები განსხვავდება ბაქტერიებისგან. ეს არის სტრუქტურები, რომლებიც შედიან სხეულში და იწვევენ ახალი თაობის ჩამოყალიბებას. ისინი კრისტალებს ჰგვანან და მიმართულია მათი გამრავლების პროცესის კონტროლისკენ, თუმცა თვითონ არ იკვებებიან, არ იზრდებიან და არ გამოყოფენ მეტაბოლურ პროდუქტებს.

ვირუსს შეუძლია გამოიწვიოს მძიმე დაავადება ნებისმიერ ცოცხალ ორგანიზმში, რომელშიც ის შედის. გარდა ამისა, ის შეიძლება განვითარდეს. ამიტომ მიკრობიოლოგიაში ვირუსოლოგიური კვლევის მეთოდები უნდა განვითარდეს და დაიხვეწოს, ვინაიდან მთლიანობაში ადამიანის ცივილიზაცია შეიძლება საფრთხის ქვეშ აღმოჩნდეს.

მასალები

მედიცინაში ვირუსების გამოსავლენად და იდენტიფიცირებისთვის, როგორც წესი, მიიღება შემდეგი:

• ნაზოფარინქსის გამორეცხვა ( რესპირატორული ინფექციები);
• გამორეცხვა და განავალი ( ენტეროვირუსული ინფექციები);
• ნაკაწრები, ბუშტუკების შემცველობა (კანის დაზიანებები, ლორწოვანი გარსები, როგორიცაა ჰერპესი, ჩუტყვავილა);
• ციმციმები (ეგზანთემული ინფექციები, როგორიცაა წითელა, წითურა);
• სისხლი, ცერებროსპინალური სითხე (არბოვირუსული ინფექციები).

ფაზები

ვირუსოლოგიური კვლევის მეთოდის ყველა ეტაპი მოიცავს:

• მასალის შეგროვება;
• შერჩევა, ტესტირების სისტემის მოპოვება, მისი სიცოცხლისუნარიანობის დადგენა;
• ტესტის სისტემის ინფექცია;
• ვირუსის ჩვენება;
• ვირუსის ტიპის განსაზღვრა.

ძირითადად, პათოგენური ვირუსები განსხვავდება ქსოვილისა და ტიპის სპეციფიკის არსებობით. ავიღოთ, მაგალითად, პოლიოვირუსი, რომელიც მრავლდება მხოლოდ პრიმატებში (მათ უჯრედებში). შესაბამისად, სპეციფიკური ქსოვილის კულტურა გამოიყენება კონკრეტული ვირუსის იზოლირებისთვის. თუ ჩვენ ვსაუბრობთ უცნობ პათოგენზე, მაშინ მიზანშეწონილი იქნება სამი, ან კიდევ უკეთესი, ოთხი უჯრედული კულტურის ერთდროულად დაინფიცირება.

ამგვარად, შესაძლოა, რომელიმე მათგანი მგრძნობიარე იყოს. ინფიცირებულ კულტურებში ვირუსის არსებობის დასადგენად, ისინი უყურებენ სპეციფიკური უჯრედების გადაგვარების განვითარებას, უჯრედშიდა ჩანართებს, სპეციფიკური ანტიგენის იდენტიფიკაციას, დადებით ჰემაგლუტინაციის და ჰემადსორბციის რეაქციებს.

ვირუსოლოგიური კვლევის ყველა მეთოდი (პირდაპირი და არაპირდაპირი, სეროლოგიური) უნდა იყოს შერჩეული, როგორც ყველაზე შესაფერისი საეჭვო ინფექციის კონკრეტული შემთხვევისთვის.

არაპირდაპირი მეთოდები ეფუძნება ვირუსის იზოლაციას და იდენტიფიკაციას. ისინი შრომატევადი, შრომატევადი, მაგრამ ზუსტი.

სეროდიაგნოსტიკა

ეს დიაგნოზი ეხება მეთოდს, რომელიც დაფუძნებულია ანტიგენ-ანტისხეულის რეაქციაზე. ყველაზე ხშირად, დაწყვილებული სისხლის შრატები გამოიყენება რამდენიმე კვირის ინტერვალით. თუ ანტისხეულების ტიტრი იზრდება 4-ჯერ ან მეტჯერ, რეაქცია ითვლება დადებითად. ვირუსის ტიპის სპეციფიკის დასადგენად გამოიყენება ვირუსის ნეიტრალიზაციის რეაქცია. ჯგუფის სპეციფიკის დასადგენად აუცილებელია კომპლემენტის ფიქსაციის რეაქციის მიღება.

Ფართოდ გამოყენებული სხვადასხვა ვარიანტებიფერმენტის იმუნოანალიზი, ჰემაგლუტინაციის დათრგუნვის რეაქცია, პასიური ჰემაგლუტინაცია, საპირისპირო პასიური ჰემაგლუტინაცია, RIF. გენური ინჟინერიაშიც კი შემუშავდა მონოკლონური ანტისხეულების წარმოქმნის მეთოდი. მონოკლონების ვიწრო სპეციფიკა შეიძლება დაიძლიოს რამდენიმე მონოკლონური ანტისხეულების გამოყენებით სხვადასხვა ვირუსული დეტერმინანტების მიმართ. ამრიგად, გაიზარდა ანტიგენის გამოვლენის ტესტის სპეციფიკა და მგრძნობელობა.

ზოგიერთი ფუნქცია

დღეს მრავალი განსხვავებული ტესტის სისტემა შეიქმნა ცოცხალ ორგანიზმში ვირუსის შეყვანის შედეგად გამოწვეული ინფექციების იმუნოლოგიური დიაგნოსტიკისთვის.

ამრიგად, ვირუსოლოგიური კვლევის მეთოდები არის ვირუსების იზოლირების, მათი თვისებების შესწავლისა და ეტიოლოგიური კავშირის დამყარება გარკვეულ დაავადებებთან.