ბაქტერიოლოგიური კვლევის ჩატარების ალგორითმი. ინფექციური დაავადებების დიაგნოსტიკის ბაქტერიოლოგიური მეთოდი. ანალიზის მახასიათებლები

კომპანიის შესახებ

არ ხართ კმაყოფილი ლაბორატორიისთვის მიწოდებული პროდუქციის ხარისხით? სცადეთ ჩვენთან მუშაობა. ჩვენი ყველა პროდუქტი დამზადებულია უმაღლესი საერთაშორისო სტანდარტების შესაბამისად და აქვს რეგისტრაციის სერთიფიკატი უკრაინის ჯანდაცვის სამინისტროსგან. ნახეთ ეს თქვენთვის. განათავსეთ საცდელი შეკვეთა.

ბაქტერიოლოგიური კვლევები

ბაქტერიოლოგიური კვლევა- განკუთვნილია ბაქტერიების იზოლირებისთვის და მათი თვისებების შესასწავლად მიკრობიოლოგიური დიაგნოზის დასადგენად.
ტესტის მასალა უნდა შეგროვდეს ასეპტიკურ პირობებში სტერილურ კონტეინერებში და მიწოდებული იქნას ლაბორატორიაში რაც შეიძლება მალე. საჭიროების შემთხვევაში, ნიმუშები უნდა ინახებოდეს მაცივარში. ნიმუშის აღების ტექნიკა დამოკიდებულია ობიექტზე, დაავადების ბუნებაზე და მიკროორგანიზმის თვისებებზე. ბაქტერიოლოგიური კვლევის ერთ-ერთი გავრცელებული მეთოდია ბაქტერიოსკოპია.
დაუმაგრებელი ბაქტერიების შესასწავლად გამოიყენება ორი მეთოდი: დამსხვრეული წვეთი (სლაიდსა და საფარის შუშას შორის) და ჩამოკიდებული წვეთი. უნდა გვახსოვდეს, რომ დაუფიქსირებელი ბაქტერიების პრეპარატები ინფექციურია.
ბაქტერიოლოგიური კვლევის ყველაზე მნიშვნელოვანი ელემენტებია ბაქტერიული კულტურების ინოკულაცია და სუბკულტურა, რომელიც შესრულებულია ბაქტერიული მარყუჟით ან პასტერის პიპეტით. მარყუჟი სტერილიზდება ცეცხლში დუღილით, შემდეგ გაცივდება დაუნოკულარი აგარის უბნის შეხებით ან სტერილურ სითხეში გამორეცხვით. პასტერის პიპეტის გამოყენებისას, ამოიღეთ წვერი პინცეტით, გაიარეთ პიპეტი სანთურის ცეცხლზე რამდენჯერმე და გაცივდით. თესვისას გამოიყენება თხევადი და მყარი საკვები ნივთიერებები. დახრილ აგარზე დათესვისას ბაქტერიულ კულტურას მარყუჟით ასხამენ აგარის ზედაპირზე. აგარის ან ჟელატინის სვეტის სისქეში დათესვისას მკვებავი გარემო იჭრება მილის ძირამდე მარყუჟით ან სპეციალური ნემსით. თხევად გარემოში დათესვისას სითხე არ დაიღვაროს და არ დაასველოს მილების და საცობების კიდეები. ინოკულაციები და სუბკულტურები უნდა ჩატარდეს გაზის სანთურის ცეცხლთან ახლოს, საცდელი მილები დიდხანს არ უნდა დარჩეს ღია, მარყუჟი ან პასტერის პიპეტი კულტურასთან არ უნდა ეხებოდეს არაფერს; სინჯარის დახურვამდე კიდეები უნდა დაიწვას. ინოკულირებული მილები დაუყოვნებლივ უნდა იყოს მარკირებული.

მიკრობიოლოგიური კვლევის მეთოდები იყოფაპაციენტის ორგანიზმში პათოგენების პირდაპირი გამოვლენის მეთოდები - ბაქტერიოსკოპიული და ბაქტერიოლოგიური კვლევები; პაციენტის სხეულში პათოგენის არსებობის არაპირდაპირი მტკიცებულების მეთოდები - სეროლოგიური კვლევები, რომლებიც მიზნად ისახავს ინფიცირებულ მასალაში სპეციფიკური ანტიგენების გამოვლენას ან სისხლის შრატში ანტისხეულებს და პაციენტის სხეულის სხვადასხვა სეკრეციას.
მრავალი ინფექციური დაავადების დროს გამოიყენება სისხლის, შარდის, ცერებროსპინალური სითხის, ყელის და ცხვირის ლორწოს, განავლის და სხვადასხვა პათოლოგიური სუბსტრატების ბაქტერიოსკოპიული გამოკვლევა პათოგენის არსებობისთვის. ამ მეთოდს საკმაოდ შეზღუდული აპლიკაციები აქვს, თუმცა ძალიან მნიშვნელოვანია. იგი გამოიყენება, კერძოდ, სისხლში მალარიის, მორეციდივე ცხელების და ლეპტოსპიროზის პათოგენების გამოსავლენად. ცერებროსპინალურ სითხეს იკვლევენ ჩირქოვან და ტუბერკულოზურ მენინგიტზე, ლორწოს ყელიდან და ცხვირიდან - დიფტერიაზე, ვინსენტის სტენოკარდიაზე, განავალზე - ამებიაზე, ბალანტიდიაზზე, გიარდიაზე; შარდი - ლეპტოსპიროზისთვის. ჭირისა და ჯილეხის ბაცილები ჩანს ჭირის ბუბოს წერტილში და ჯილეხის კარბუნკულიდან აღებული ნაცხის ანაბეჭდი; ძვლის ტვინიდან და ელენთა პუნქტიანი ნაცხის მიკროსკოპით, წყლულის გრანულაციებით შესაძლებელია ლეიშმანიის აღმოჩენა; ნახველში – Mycobacterium tuberculosis. ბაქტერიოსკოპიული მეთოდის უპირატესობა მისი სიჩქარეა. ანალიზის შედეგების მიღება შესაძლებელია რამდენიმე საათში. ზოგიერთ დაავადებაში (მალარია, ეპიდემიური ცერებროსპინალური მენინგიტი და ა.შ.) პათოგენების გამოვლენა შესაძლებელია პაციენტის ორგანიზმში უკვე დაავადების პირველ დღეს, რაც ძალზე მნიშვნელოვანია დროული დიაგნოსტიკისა და მკურნალობისთვის. ბაქტერიოსკოპიული დიაგნოსტიკის შესაძლებლობები მნიშვნელოვნად გაფართოვდა წამლების მკურნალობის გამო სპეციფიკური შრატებით, რომლებიც შეიცავს ანტისხეულებს მოცემულ პათოგენზე, ეტიკეტირებული ფტოროქრომებით (იმუნოფლუორესცენციის მეთოდი) ან ფერმენტებით (ფერმენტული იმუნოანალიზის მეთოდი). ამ შემთხვევაში, ეტიკეტირებული ანტისხეულები შერწყმულია ანტიგენთან, რომელიც გამოვლენილია იმუნოფლუორესცენტური მეთოდით ფლუორესცენტური მიკროსკოპის ქვეშ და ფერმენტული იმუნოანალიზის მეთოდით - ფერმენტული რეაქციის პროდუქტის შეღებვით სუბსტრატ-ინდიკატორის ნარევის შეყვანის შემდეგ.
ბაქტერიოლოგიური დიაგნოსტიკური მეთოდი ეფუძნება პათოგენის გამოყოფას სისხლიდან, ცერებროსპინალური სითხის, ნახველის, ყელისა და ცხვირის ლორწოს, განავლის, შარდის, პაციენტის ნაღვლისგან, ხოლო გარდაცვალების შემთხვევაში - ორგანოების ნაწილაკებისგან, რომლებიც ჩანერგილია. სპეციალურ საკვებ მასალაზე. ბაქტერიოლოგიური დიაგნოსტიკა ფართოდ გამოიყენება დიფტერიის ბაქტერიების ყელიდან და ცხვირიდან ლორწოს შესასწავლად, ნაწლავური ინფექციების პათოგენების (მაგალითად, ქოლერა, დიზენტერია, სალმონელოზი, ეშერიხიოზი) იზოლირებისთვის პაციენტის განავლიდან, პნევმონიის პათოგენები ნახველიდან და სხვა შემთხვევებში. . ამ შემთხვევაში მხედველობაში მიიღება საეჭვო ინფექციის მახასიათებლები, პათოგენის შერჩევითი ლოკალიზაციის ადგილი და გარემოში მისი გათავისუფლების გზები. კვლევა დადებით შედეგებს იძლევა უკვე ავადმყოფობის პირველ საათებში ან დღეებში. თუმცა, ლაბორატორია ინფექციურ დაავადებებზე საბოლოო პასუხს მხოლოდ 2-4 დღის შემდეგ ავრცელებს, ხოლო ბრუცელოზისა და ტუბერკულოზის შემთხვევაში - 3-4 კვირის შემდეგ. ეს დამოკიდებულია მიკროორგანიზმების ზრდისა და მათი იდენტიფიკაციისათვის საჭირო დროზე (ბიოქიმიური და სეროლოგიური). თითოეულ მიკრობს მისი ზრდისთვის სჭირდება შესაბამისი საკვები ნივთიერება. იმის მიხედვით, თუ რომელი მიკრობი უნდა იყოს იზოლირებული (რაც დგინდება პაციენტის კლინიკური და ეპიდემიოლოგიური გამოკვლევის დროს), შეირჩევა შესაბამისი მკვებავი საშუალება. ზოგჯერ თესვა ხორციელდება ერთდროულად რამდენიმე საკვებ გარემოზე. ბაქტერიოლოგიური კვლევების შედეგების ღირებულება დიდწილად განისაზღვრება იმით, რამდენად სწორად არის მიღებული მასალა პაციენტისგან და სწორად არის თუ არა მიწოდებული იგი ლაბორატორიაში. ინფექციური მასალა გროვდება სტერილურ კონტეინერებში ასეპტიკური წესების დაცვით.

ბაქტერიოლოგიური კვლევის ყველაზე მნიშვნელოვანი ეტაპი იდენტიფიკაციაა- სუფთა კულტურის სახით მიღებული ბაქტერიების სახეობის ან ტიპის განსაზღვრა. ბაქტერიების იდენტიფიცირებისას შესწავლილია მათი ფიზიოლოგიური და ბიოქიმიური თვისებები და ტოქსინების წარმოქმნა. ფართოდ გამოიყენება ბაქტერიების იდენტიფიცირების სეროლოგიური მეთოდები. ხშირ შემთხვევაში ეფექტურია მიკროორგანიზმების იდენტიფიცირების ბიოლოგიური მეთოდი, რომელიც ეფუძნება ლაბორატორიული ცხოველების ინფიცირებას შესასწავლი მასალით ან შედეგად მიღებული ბაქტერიული კულტურით და ცხოველებში დამახასიათებელი პათოლოგიური ცვლილებების იდენტიფიცირებაზე.
სუფთა კულტურების იზოლირებისთვის გამოიყენება მექანიკური და ბიოლოგიური მეთოდები. მექანიკური მეთოდის მაგალითი: საცდელი მასალის წვეთი იფქვება იგივე სტერილური სპატულით ან ბაქტერიული მარყუჟით მკვრივი მკვებავი გარემოს ზედაპირზე, თანმიმდევრულად პირველ, მეორე და მესამე პეტრის ჭურჭელში. სუფთა კულტურის იზოლაცია ხდება მოზრდილი ცალკეული კოლონიებისგან და მოიცავს მათ გამოკვლევას და სკრინინგს ახალ საკვებ გარემოზე. სუფთა კულტურების გამოყოფის ბიოლოგიური მეთოდები ეფუძნება იზოლირებული მიკრობის ამა თუ იმ თვისების გათვალისწინებას, რაც განასხვავებს მას შესასწავლ მასალაში ნაპოვნი სხვა მიკრობებისგან.
ბიოლოგიური მეთოდი იყენებს ამ სახის მკვებავ მედიას, რომელშიც იქმნება პირობები, რომლებიც ხელსაყრელია გარკვეული ტიპის მიკრობის განვითარებისთვის. ბიოლოგიური მეთოდები ასევე მოიცავს ლაბორატორიული ცხოველების ინფექციას, რომლებიც მგრძნობიარეა ბაქტერიების იზოლირებული სახეობების მიმართ.
ბაქტერიოლოგიური კვლევა არის პათოგენური მიკროორგანიზმების იდენტიფიცირების მეთოდების ერთობლიობა პაციენტში, მატარებელში ან გარემო ობიექტებზე.

სუფთა კულტურის იზოლაცია;

ბაქტერიოლოგიური კვლევის მეთოდები სულ უფრო და უფრო ინერგება პრაქტიკაში პაციენტების უფრო დეტალური გამოკვლევისთვის, ანთებითი პროცესის ეტიოლოგიური ფაქტორის დასადგენად, რაციონალური თერაპიის დანიშვნასა და მისი ეფექტურობის დასადგენად.

კლინიკური მასალის მრავალფეროვნება და ცალკეული ორგანოების მიკროფლორას უნიკალურობა განსაზღვრავს ბაქტერიოლოგიური კვლევის მეთოდების მახასიათებლებს, რომლებიც მოითხოვს სპეციალური სინჯის აღების ტექნიკის გამოყენებას, საკვები ნივთიერებების ინოკულაციას და ანალიზს.

კლინიკური მასალის ბაქტერიოლოგიური გამოკვლევა რამდენიმე ეტაპისგან შედგება:

კვლევისთვის ნიმუშის აღება;

თესვა საკვებ ნიადაგზე;

სუფთა კულტურის იზოლაცია;

მიკროორგანიზმების იზოლირებული კულტურების იდენტიფიცირება და დიფერენცირება;

კვლევის შედეგების ანალიზი.

ბაქტერიოლოგიური გამოკვლევის დროს პაციენტისგან შეგროვებული მასალის ე.წ. თესვა ხდება მკვებავ გარემოზე, რაც ხელს უწყობს დაავადების გამომწვევი აგენტის ზრდას და გამრავლებას. კვლევის დროს შესაძლებელია გამოვლინდეს არა მხოლოდ არსებობის ფაქტი, არამედ პათოგენური მიკროორგანიზმების კონცენტრაცია კონკრეტულ ბიომასავალში.
ბაქტერიოლოგიური გამოკვლევის მეთოდი იკვლევს ნახველს, ცერებროსპინალურ სითხეს, სისხლს, ასევე გამონადენს სასქესო ორგანოებიდან, პირის ღრუდან, ფარინქსიდან და პაციენტის ჭრილობებიდან. ამრიგად, მიკროორგანიზმების დათესვა შესაძლებელია ადამიანის სხეულის თითქმის ნებისმიერი ნაწილიდან.
ბაქტერიოლოგიური კულტურის ტექნიკა უაღრესად მოსახერხებელი და ეფექტურია ბაქტერიების და სოკოების ტიპის აღმოსაჩენად და დასადგენად. ვირუსების აღმოჩენა გარკვეულ სირთულეს წარმოადგენს მათი ბიოლოგიის თავისებურებების გამო.
ბაქტერიოლოგიურ გამოკვლევას (კულტურას) დიდი მნიშვნელობა აქვს არა მხოლოდ მიკროორგანიზმის სპეციფიკური ტიპის დასადგენად, არამედ მის მიმართ კონკრეტული ანტიბიოტიკის მგრძნობელობის ხარისხის დასადგენად. ამრიგად, განისაზღვრება კონკრეტული ტიპის ანტიბიოტიკოთერაპიის მაქსიმალური ეფექტურობა.
ანალიზის ჩატარებისას მნიშვნელოვანია გვახსოვდეს, რომ ზოგიერთი მიკროორგანიზმი, როგორიცაა პნევმოკოკები, საკმაოდ სწრაფად იღუპება, რადგან მათ აქვთ გაზრდილი თვითგანადგურების ტენდენცია. ამრიგად, მოსავალი უნდა მოხდეს მოკლე დროში.

მიკრობიოლოგიური დიაგნოსტიკის ძირითადი მეთოდი და მიკრობიოლოგიის „ოქროს სტანდარტი“ არის ბაქტერიოლოგიური მეთოდი.

ბაქტერიოლოგიური მეთოდის მიზანიმოიცავს გამოკვლევის მასალისგან პათოგენის სუფთა კულტურის გამოყოფას, სუფთა კულტურის დაგროვებას და ამ კულტურის იდენტიფიცირებას თვისებების კომპლექტით: მორფოლოგიური, ტინქტური, კულტურული, ბიოქიმიური, ანტიგენური, პათოგენურობის ფაქტორების არსებობით, ტოქსიკურობა და მისი მგრძნობელობის განსაზღვრა. ანტიმიკრობული პრეპარატებისა და ბაქტერიოფაგების მიმართ.

ბაქტერიოლოგიური კვლევის მეთოდი მოიცავს:

1. საცდელი მასალის დანერგვა მკვებავ გარემოში

2. სუფთა კულტურის იზოლაცია

3. მიკროორგანიზმების იდენტიფიკაცია (სახეობების განსაზღვრა).

აერობული და ანაერობული ბაქტერიების სუფთა კულტურების იზოლაცია და იდენტიფიკაცია მოიცავს შემდეგ კვლევებს:

I ეტაპი (მუშაობა მშობლიურ მასალასთან)

მიზანი: იზოლირებული კოლონიების მოპოვება

1. წინასწარი მიკროსკოპია იძლევა მიახლოებით წარმოდგენას მიკროფლორაზე

2. მასალის მომზადება კვლევისთვის

3. თესვა მყარ საკვებ ნიადაგზე იზოლირებული კოლონიების მისაღებად

4. ინკუბაცია ოპტიმალურ ტემპერატურაზე, ყველაზე ხშირად 37°C, 18-24 საათის განმავლობაში

II ეტაპი

მიზანი: სუფთა კულტურის მიღება

1. კოლონიების მაკროსკოპული შესწავლა გადაცემულ და არეკლილი სინათლეში (ზომის, ფორმის, ფერის, გამჭვირვალობის, კონსისტენციის, აგებულების, კონტურის, კოლონიების ზედაპირის მახასიათებლები).

2. იზოლირებული კოლონიების მიკროსკოპული გამოკვლევა

3. ტესტირება აეროტოლერანტობაზე (სატესტო მასალაში მკაცრი ანაერობების არსებობის დასადასტურებლად).

4. კონკრეტული სახეობისთვის დამახასიათებელი კოლონიების დათესვა სუფთა კულტურის დაგროვების ნიადაგზე ან სელექციურ გარემოზე და ინკუბაცია ოპტიმალურ პირობებში.

III ეტაპი

მიზანი: იზოლირებული სუფთა კულტურის იდენტიფიცირება

1. შერჩეული კულტურის იდენტიფიცირებისთვის ბიოლოგიური თვისებების ნაკრებიდან გამომდინარე, შესწავლილია:

· მორფოლოგია და ტინქტური თვისებები

· კულტურული თვისებები (მკვებავ გარემოზე ზრდის ხასიათი)

· ბიოქიმიური თვისებები (მიკროორგანიზმების ფერმენტული აქტივობა)

სეროლოგიური თვისებები (ანტიგენური)

ვირუსული თვისებები (პათოგენურობის ფაქტორების წარმოქმნის უნარი: ტოქსინები, ფერმენტები, თავდაცვითი და აგრესიული ფაქტორები)

პათოგენურობა ცხოველებისთვის

· ფაგოლიზებადობა (მგრძნობელობა სადიაგნოსტიკო ბაქტერიოფაგების მიმართ)

მგრძნობელობა ანტიბიოტიკების მიმართ

· სხვა ინდივიდუალური თვისებები

IV ეტაპი (დასკვნა)

შესწავლილი თვისებებიდან გამომდინარე კეთდება დასკვნა შერჩეული კულტურის შესახებ.

კვლევის პირველი ეტაპი.პათოლოგიური მასალის გამოკვლევა იწყება მიკროსკოპით. შეღებილი ბუნებრივი მასალის მიკროსკოპია შესაძლებელს ხდის დაახლოებით დადგინდეს შესასწავლი ობიექტის მიკრობული ლანდშაფტის შემადგენლობა და მიკროორგანიზმების ზოგიერთი მორფოლოგიური თავისებურება. ადგილობრივი მასალის მიკროსკოპიის შედეგები დიდწილად განსაზღვრავს შემდგომი კვლევის კურსს;

თუ ნიმუშში პათოგენური მიკროორგანიზმების საკმარისი შემცველობაა, ინოკულაცია ტარდება მყარ საკვებ გარემოზე (იზოლირებული კოლონიების მისაღებად). თუ საცდელ მასალაში ცოტა ბაქტერიაა, მაშინ ინოკულაცია ტარდება თხევადი გამდიდრების მკვებავი საშუალებებით. მკვებავი საშუალებები შეირჩევა მიკროორგანიზმების მოთხოვნების მიხედვით.

მიკროორგანიზმების გაშენება შესაძლებელია მხოლოდ იმ შემთხვევაში, თუ შეიქმნება მათი სასიცოცხლო საქმიანობის ოპტიმალური პირობები და დაცული იქნება წესები, რომლებიც გამორიცხავს შესასწავლი მასალის დაბინძურებას (უცხო მიკრობებით შემთხვევით დაბინძურებას). ხელოვნური პირობები, რომლებიც ხელს უშლის კულტურის სხვა სახეობებით დაბინძურებას, შეიძლება შეიქმნას სინჯარაში, კოლბაში ან პეტრის ჭურჭელში. ყველა მინის ჭურჭელი და კულტურის საშუალება უნდა იყოს სტერილური და მიკრობული მასალის ინოკულაციის შემდეგ დაცული იყოს გარეგანი დაბინძურებისგან, რაც მიიღწევა საცობების ან ლითონის თავსახურებისა და ხუფების გამოყენებით. სატესტო მასალით მანიპულაციები უნდა განხორციელდეს ალკოჰოლური ნათურის ცეცხლოვან ზონაში, რათა თავიდან იქნას აცილებული მასალის გარე გარემოდან დაბინძურება, ასევე უსაფრთხოების წესების დაცვის მიზნით.

მკვებავ გარემოზე მასალის ინოკულაცია უნდა მოხდეს შეგროვების მომენტიდან არაუგვიანეს 2 საათისა.

კვლევის მეორე ეტაპი.კოლონიების შესწავლა და სუფთა კულტურების იზოლაცია. ინკუბაციური დღის შემდეგ ჭურჭელზე იზრდებიან კოლონიები და პირველ დარტყმაზე ზრდა უწყვეტია, ხოლო მომდევნო დარტყმებზე - იზოლირებული კოლონიები. კოლონია არის ერთი და იგივე სახეობის მიკრობების კოლექცია, რომელიც იზრდება ერთი უჯრედიდან. ვინაიდან მასალა ყველაზე ხშირად მიკრობების ნაზავია, იზრდება რამდენიმე ტიპის კოლონიები. ფანქრით მონიშნულია სხვადასხვა კოლონიები, ქვემოდან წრით გამოკვეთილი და შესწავლილი (ცხრილი 11). უპირველეს ყოვლისა, კოლონიების შესწავლა ხდება შეუიარაღებელი თვალით: მაკროსკოპული ნიშნები. ფინჯანს უყურებენ (გახსნის გარეშე) ქვემოდან გადამცემ შუქზე, აღინიშნება კოლონიების გამჭვირვალობა (გამჭვირვალე, თუ არ ბლოკავს სინათლეს; გამჭვირვალე, თუ ნაწილობრივ ბლოკავს სინათლეს; გაუმჭვირვალე, თუ სინათლე არ გადის კოლონია), ხოლო კოლონიების ზომა იზომება (მმ). შემდეგ ისინი სწავლობენ კოლონიებს სახურავის მხრიდან, აღნიშნავენ ფორმას (რეგულარული მრგვალი, არარეგულარული, ბრტყელი, ამოზნექილი), ზედაპირის ბუნებას (გლუვი, მბზინავი, მოსაწყენი, უხეში, დანაოჭებული, სველი, მშრალი, ლორწოვანი), ფერი. (უფერო, ფერადი).

ცხრილი 11. კოლონიების შესწავლის სქემა

№	Ნიშანი	კოლონიების შესაძლო მახასიათებლები
1.	ფორმა	ბრტყელი, ამოზნექილი, გუმბათოვანი, დეპრესიული, მრგვალი, როზეტი, ვარსკვლავი
2.	ზომა, მმ	დიდი (4-5 მმ), საშუალო (2-4 მმ), პატარა (1-2 მმ), ჯუჯა (< 1 мм)
3.	ზედაპირის ხასიათი	გლუვი (S-ფორმა), უხეში (R-ფორმა), ლორწოვანი (M-ფორმა), განივზოლიანი, ერთიანად, მქრქალი, მბზინავი
4.	ფერი	უფერო, ფერადი
5.	გამჭვირვალობა	გამჭვირვალე, გაუმჭვირვალე, გამჭვირვალე
6.	კიდეების ხასიათი	გლუვი, დაკბილული, ფრაგმენტული, ბოჭკოვანი, სკალპიანი
7.	შიდა სტრუქტურა	ერთგვაროვანი, მარცვლოვანი, ჰეტეროგენული
8.	თანმიმდევრულობა	ბლანტი, ლორწოვანი, დამსხვრეული
9.	ემულსიფიკაცია წყლის წვეთში	Კარგი ცუდი

შენიშვნა: 5-7 პუნქტები შესწავლილია მიკროსკოპის დაბალი გადიდების დროს.

თქვენ შეგიძლიათ ნახოთ განსხვავებები კოლონიებს შორის გადიდებისას. ამისათვის მოათავსეთ დახურული ჭიქა ქვემოდან ზევით სცენაზე, ოდნავ ჩამოწიეთ კონდენსატორი, გამოიყენეთ ლინზის ოდნავ გადიდება (x8), ჭიქის გადაადგილება, შეისწავლეთ კოლონიების მიკროსკოპული მახასიათებლები: კიდეების ბუნება ( გლუვი, ტალღოვანი, დაკბილული, დახრილი), სტრუქტურა (ერთგვაროვანი, მარცვლოვანი, ბოჭკოვანი, ერთგვაროვანი ან განსხვავებული ცენტრში და პერიფერიაზე).

შემდეგ შესწავლილია კოლონიებიდან მიკრობული უჯრედების მორფოლოგია. ამისთვის, თითოეული მონიშნული კოლონიის ნაწილისგან კეთდება ნაცხი და შეღებილია გრამით. კოლონიების აღებისას ყურადღება მიაქციეთ კონსისტენციას (მშრალი, თუ კოლონია იშლება და ძნელად ასაღებია; რბილი, თუ ადვილად მიიღება მარყუჟით; ლორწოვანი, თუ კოლონიას მარყუჟით აზიდავს; მძიმე, თუ ნაწილი კოლონია არ არის აღებული მარყუჟით, თქვენ შეგიძლიათ მხოლოდ ამოიღოთ მთელი კოლონია) .

ნაცხის ნახვისას დადგენილია, რომ კოლონია წარმოდგენილია ერთი ტიპის მიკრობით, შესაბამისად, შესაძლებელია ბაქტერიების სუფთა კულტურების იზოლირება. ამისათვის შესწავლილი კოლონიები ხელახლა დათესეს დახრილ აგარზე. კოლონიებიდან ხელახლა დათესვისას, ყურადღება უნდა მიექცეს ზუსტად განზრახ კოლონიებს, ახლომდებარე კოლონიებს მარყუჟით შეხების გარეშე. მილები ეტიკეტირებულია და ინკუბირებულია თერმოსტატში 37°C ტემპერატურაზე 24 საათის განმავლობაში.

კვლევის მესამე ეტაპი.იზოლირებული კულტურის იდენტიფიკაცია. მიკრობების იდენტიფიკაცია - მასალისგან სახეობაზე და ვარიანტში გამოყოფილი კულტურის სისტემატური პოზიციის განსაზღვრა. საიმედო იდენტიფიკაციის პირველი პირობა კულტურის უპირობო სისუფთავეა. მიკრობების იდენტიფიცირებისთვის გამოიყენება მახასიათებლების ნაკრები: მორფოლოგიური (ფორმა, ზომა, დროშების არსებობა, კაფსულები, სპორები, ნაცხის შედარებითი პოზიცია), ტინქტორული (გრემის შეღებვასთან ან სხვა მეთოდებთან მიმართებაში), ქიმიური (გუანინი + ციტოზინის თანაფარდობა). in დნმ-ის მოლეკულა), კულტურული (კვებითი მოთხოვნილებები, კულტივირების პირობები, ზრდის ტემპი და ბუნება სხვადასხვა საკვებ ნივთიერებებზე), ფერმენტული (სხვადასხვა ნივთიერების დაშლა შუალედური და საბოლოო პროდუქტების წარმოქმნით), სეროლოგიური (ანტიგენური სტრუქტურა, სპეციფიკა), ბიოლოგიური (ვირულენტობა). ცხოველებისთვის, ტოქსიკურობა, ალერგენობა, ანტიბიოტიკების გავლენა და ა.შ.).

ბიოქიმიური დიფერენციაციისთვის, ბაქტერიების უნარი ნახშირწყლების დუღილის წარმოქმნით შუალედური და საბოლოო პროდუქტები, ცილების და პეპტონების დაშლის უნარი და რედოქს ფერმენტების შესწავლა.

საქაროლიზური ფერმენტების შესასწავლად, იზოლირებული კულტურები ინოკულირებულია საცდელ მილებში ნახევრად თხევადი მედიით, რომელიც შეიცავს ლაქტოზას, გლუკოზას და სხვა ნახშირწყლებს და პოლიჰიდრულ სპირტებს. ნახევრად თხევადი მედიისთვის ინოკულაცია ხდება საშუალების სიღრმეში ინექციის გზით. საინექციო თესვისას საცდელი მილაკი გარემოსთან დახრილად იჭერენ, საცობი ამოღებულია და საცდელი მილის კიდე იწვება. მასალა აღებულია სტერილური მარყუჟით და მკვებავი საშუალების სვეტი იჭრება მასთან თითქმის ძირამდე.

პროტეოლიზური ფერმენტების დასადგენად, იზოლირებული კულტურა ინოკულირებულია პეპტონ წყალზე ან MPB-ზე. ამისათვის აიღეთ საცდელი მილი, რომლის ინოკულაცია უფრო ახლოს არის თქვენს ხელში, ხოლო სინჯარა საშუალებით თქვენგან უფრო შორს. ორივე საცდელი მილი ერთდროულად იხსნება, აჭერს მათ შტეფსელს პატარა თითით და ხელის კიდით, წვავს სინჯარის კიდეებს, კალცინირებული გაცივებული მარყუჟის გამოყენებით, რომ აიღოს მცირე კულტურა და გადაიტანოს მეორე სინჯარაში. , გახეხეთ თხევად გარემოში სინჯარის კედელზე და ჩამოიბანეთ საშუალებით.

თესვისა და ხელახალი დათესვისას ყურადღება უნდა მიექცეს უნაყოფობის წესების დაცვას, რათა არ დაბინძურდეს თქვენი მოსავალი უცხო მიკროფლორით, ასევე არ დაბინძურდეს გარემო. მილები ეტიკეტირებულია და მოთავსებულია თერმოსტატში ინკუბაციისთვის 37°C ტემპერატურაზე 24 საათის განმავლობაში.

დასკვნა

შედეგების აღრიცხვა. კვლევის დასკვნა. გათვალისწინებულია იდენტიფიკაციის შედეგები და მიღებული მონაცემების მთლიანობიდან გამომდინარე, სახელმძღვანელოში აღწერილი ტიპიური შტამების კლასიფიკაციისა და მახასიათებლების საფუძველზე (Burgee's key, 1994-1996), განისაზღვრება იზოლირებული კულტურების ტიპი.

გარკვეული ბაქტერიების არსებობის ნიმუშების შესამოწმებლად გამოიყენება სხვადასხვა დიაგნოსტიკური მეთოდი, მათ შორის ბაქტერიოსკოპიული მეთოდი. ამ მეთოდის თავისებურებები, ისევე როგორც ბაქტერიოლოგიური კვლევის მეთოდი, განხილული იქნება ამ სტატიაში.

ბაქტერიოსკოპიული დიაგნოსტიკური მეთოდის არსი

ნიმუშის გამოკვლევის ბაქტერიოსკოპიული მეთოდი მიზნად ისახავს შესწავლილ ნივთიერებაში მიკროორგანიზმების იდენტიფიცირებას, აგრეთვე ამ მიკროორგანიზმების თვისებების დეტალურ შესწავლას, მათი რაოდენობისა და ქცევის გარკვევას განსახილველ გარემოში. ანალიზის ამ მეთოდის უპირატესობაა სიმარტივე, სიჩქარე და ხელმისაწვდომობა. მისი ჩატარება შესაძლებელია თითქმის ნებისმიერ ლაბორატორიაში ინსტრუმენტებისა და ქიმიური რეაგენტების მინიმალური რაოდენობის გამოყენებით. მისი ნაკლოვანებები მოიცავს მიკრობების ქცევის სრული სურათის მიღების შეუძლებლობას.

კვლევისთვის საჭირო მასალები

ბაქტერიოსკოპიული მეთოდით ანალიზების შესასწავლად საჭიროა შემდეგი ინსტრუმენტები:

1. ლითონის მარყუჟი.
2. სლაიდი. ეს ელემენტი უნდა იყოს სუფთა, რადგან ნებისმიერმა დაბინძურებამ შეიძლება გავლენა მოახდინოს ნიმუშის მდგომარეობაზე.
3. პინცეტი.
4. ფილტრის ქაღალდი.

ახალი სლაიდები იწმინდება 1% სოდა ხსნარის გამოყენებით. ასეთ ხსნარში ადუღების შემდეგ ჭიქას რეცხავენ გამოხდილი წყლით, მარილმჟავას სუსტი ხსნარით, შემდეგ ისევ გამოხდილი წყლით. მეორადი მინა იწმინდება რამდენიმე ეტაპად: ჯერ ათავსებენ გოგირდმჟავას ხსნარში 60-120 წუთის განმავლობაში, შემდეგ ადუღებენ სოდის ხსნარში, რის შემდეგაც ჭიქა რეცხავენ წყლით. ამის შემდეგ ჭიქა ასველებენ სამედიცინო სპირტში.

ინსტრუმენტის სათვალეები უნდა ინახებოდეს ალკოჰოლში ან მჭიდროდ დახურულ კონტეინერებში. უფრო მეტიც, ამ უკანასკნელ შემთხვევაში, მინა მშრალი უნდა იყოს.

ამ კვლევისთვის ასევე დაგჭირდებათ შემდეგი ქიმიური რეაგენტები:

• ალკოჰოლი;
• ლუგოლის ხსნარი;
• საღებავები.

ყველაზე ხშირად გამოყენებული საღებავებია Ziehl fuchsin, methylene blue და carbolic gentian violet. ბოლო საღებავი არის ჩვეულებრივი ფუქსინის ხსნარი ხუთ პროცენტიან კარბოლულ წყალში

კვლევის მიმდინარეობა

თქვენ შეგიძლიათ შეისწავლოთ კულტურა როგორც ორიგინალური, ასევე ფერადი სახით. ამ უკანასკნელ შემთხვევაში, როგორც მიკროორგანიზმების, ისე ცალკეული ბაქტერიების კოლონიები მკვდარი იქნება, რაც საშუალებას გვაძლევს უკეთ გავეცნოთ ამ მარტივი ორგანიზმების სტრუქტურას. პრეპარატის ორიგინალური ფორმით შესწავლისას, ლაბორატორიის ტექნიკოსი, თავის მხრივ, იღებს მეტ ინფორმაციას მიკრობების აქტივობის შესახებ. ორივე შემთხვევაში პრეპარატის გამოკვლევა ხდება მიკროსკოპის გამოყენებით.

საშუალების შეღებვა ორ ეტაპად ტარდება: ჯერ ამზადებენ პრეპარატს პროცედურისთვის და მხოლოდ ამის შემდეგ ხდება მისი შეღებვა. ნიმუშის მომზადება მიმდინარეობს შემდეგნაირად:

1. კვლევისთვის განკუთვნილი ნიმუში თანაბრად ნაწილდება ინსტრუმენტის მინაზე წრის ან ოვალის სახით. თუ მასალაში არის უცხო მინარევები (მაგალითად, ჩირქოვანი), საცდელი ნიმუშის დამატებამდე ჭიქაზე სვამენ 1-2 წვეთ წყალს.
2. ამის შემდეგ მიღებული ნაცხი უნდა გაშრეს.
3. მას შემდეგ, რაც ნაცხი გაშრება, ის უნდა დაფიქსირდეს სანთურის ცეცხლის გამოყენებით.

ამ გზით გამოსასწორებლად, ინსტრუმენტის შუშა ცეცხლზე სამჯერ დგას. თუ ნაცხი საკმარისად მყარად არის დამაგრებული, ლაბორანტი, რომელიც ატარებს ექსპერიმენტს, იგრძნობს წვის შეგრძნებას თითებში.

ამ პროცედურის დასასრულს, ნიმუში შეღებილია.

ნიმუშის შეღებვის მეთოდები

შეღებვა შეიძლება იყოს ისეთივე მარტივი, როგორც ერთი საღებავის გამოყენება. და კომპლექსი, რომელშიც, ბაქტერიული უჯრედების ზუსტი დიფერენცირების მიზნით, მათი დამახასიათებელი ნიშნების მიხედვით, რამდენიმე განსხვავებული შეღებვის ქიმიური რეაგენტი თანმიმდევრულად გამოიყენება ნიმუშზე. კომპლექსური შეღებვის მაგალითია გრამი და ზიჰლ-ნილსენის მეთოდები.

გრამ მეთოდი

გრამის მეთოდი საშუალებას გაძლევთ განსაზღვროთ უჯრედის მემბრანის ქიმიური შემადგენლობა. ამ მეთოდის წყალობით დაინერგა ბაქტერიების გრამ კლასიფიკაცია: გრამდადებითი ბაქტერიები (რომლებიც მოიცავს მრავალი დაავადების გამომწვევ აგენტებს) შეღებვის შემდეგ იძენენ მუქ მეწამულ ფერს, ხოლო გრამუარყოფითი ბაქტერიები - დამახასიათებელი წითელი ელფერით. გრამის მეთოდი შედგება შემდეგი ნაბიჯებისგან:

1. პირველ რიგში, პრეპარატი მუშავდება ლუგოლის ხსნარით ერთი წუთის განმავლობაში.
2. ლუგოლით დამუშავების შემდეგ ნიმუში გათეთრებულია სპირტით.
3. შემდეგ პრეპარატს რეცხავენ გამოხდილი წყლით და დამატებით ღებავენ ფუქსინით.

Ziehl-Neelsen მეთოდი

Ziehl-Neelsen მეთოდი გამოიყენება მჟავას მგრძნობიარე ბაქტერიების დასადგენად, რომელთა უჯრედის მემბრანა შეიცავს დიდი რაოდენობით ლიპიდებს, მაგალითად, ტუბერკულოზის გამომწვევ აგენტებს. ამ მეთოდის გამოყენებით მუშაობა ხუთ ეტაპად ხორციელდება:

1. ფილტრის ქაღალდი მოთავსებულია შუშის სლაიდზე, რომელზედაც შემდეგ დაიტანება მცირე რაოდენობით Ziehl fuchsin.
2. შემდეგ სლაიდი თბება, სანამ დამახასიათებელი ორთქლი არ გამოჩნდება. ორთქლის გაჩენის შემდეგ, ჭიქას აძლევენ გაგრილებას. ეს პროცედურა კიდევ ორჯერ მეორდება, რის შემდეგაც ჭიქას ისევ გაცივება ეძლევა.
3. ამის შემდეგ, ქაღალდის ამოღების შემდეგ ჩამოიბანეთ მეჯენტა ინსტრუმენტის ჭიქიდან გამოხდილი წყლით.
4. შემდეგ მინა მოთავსებულია მარილმჟავას ან გოგირდმჟავას ხსნარში, სანამ ნიმუში მთლიანად არ დაკარგავს ფერს.
5. ბოლოს, გათეთრებულ პრეპარატს სვამენ მეთილენის ლურჯის ხსნარს, შუშას რეცხავენ გამოხდილი წყლით და აძლევენ გაშრობას მიღებული პრეპარატის შემდგომი გამოკვლევისთვის მიკროსკოპის ქვეშ.

ლეფლერის მეთოდი

შეღებვის მარტივი მეთოდები მოიცავს ლეფლერის მეთოდს. მასთან ერთად ყველა ბაქტერია ლურჯდება. ეს მეთოდი ხორციელდება ორ ეტაპად:

1. ნაცხზე იდება ფილტრის ქაღალდი, რომელზედაც დატანილია ლოფლერის მეთილენის ლურჯი ხსნარი. პრეპარატი ამ მდგომარეობაში რჩება 3-5 წუთის განმავლობაში.
2. ამ დროის გასვლის შემდეგ პრეპარატს რეცხავენ წყლით და აშრობენ, რის შემდეგაც შესაძლებელია მისი გამოკვლევა მიკროსკოპის ქვეშ.

ბაქტერიოსკოპიული მეთოდით იღებება სულ მცირე ორი პრეპარატი, ერთი მარტივი მეთოდით, ხოლო ერთი რთული მეთოდით.

ბაქტერიოლოგიური მეთოდი

ხშირად ტესტების შესწავლისას საჭირო ხდება პათოგენის მგრძნობელობის დადგენა კონკრეტული პრეპარატის მიმართ. ამ შემთხვევაში ნიმუშის გამოკვლევა ხდება ბაქტერიოლოგიური მეთოდით. ეს მეთოდი შედგება შემდეგი ნაბიჯებისგან:

• უპირველეს ყოვლისა, აუცილებელია კულტურის გაწმენდა მიკრობების სპეციფიკური ტიპების იდენტიფიცირების მიზნით. ამისთვის ნიმუში უნდა განთავსდეს ისეთ გარემოში, რომელშიც ყველაზე სავარაუდოა გამოსავლენი ბაქტერიების განვითარება. ასევე შესაძლებელია ბიომასალის მექანიკური გამოყოფა დათესვისას.
• სუფთა კულტურის მოპოვების შემდეგ მისგან აღებული ნიმუშების გამოკვლევა ხდება ბაქტერიოსკოპიული მეთოდით.

ქვემოთ მოცემულია მედიის მაგალითები, რომლებიც გამოიყენება მიკროორგანიზმების გამოსავლენად:

• ელშნიგის საშუალო, რომელიც შედგება ერთი მესამედი ცხენის შრატისგან და ორი მესამედის ბულიონისგან.
• ლოფლერის შრატი, რომელიც გამოიყენება დიფტერიის პათოგენების იდენტიფიცირებისთვის. ეს მასალა შედგება ცხენის ან მსხვილფეხა რქოსანი შრატის სამი მეოთხედისგან და 1% გლუკოზის შემცველი ბულიონის ერთი მეოთხედისაგან.
• სისხლის აგარი გამოიყენება სტრეპტოკოკის იდენტიფიცირებისთვის და მათი მგრძნობელობის შესამოწმებლად ანტიბაქტერიული პრეპარატების მიმართ. ეს გარემო შედგება 5-10% ცხოველის სისხლის შრატისა და აგარისგან.

ბაქტერიოსკოპიული ტესტების სახეები

განავლის ტესტების ბაქტერიოსკოპია

განავლის ანალიზის ბაქტერიოსკოპიული გამოკვლევისთვის საჭიროა პაციენტის ნიმუში. თუ საჭიროა ნაწლავის მიკროფლორას ანალიზი, რომლის შემადგენლობაში არსებული დარღვევები მიუთითებს საჭმლის მომნელებელი სისტემის დისბაქტერიოზის ან ინფექციური დაავადებების არსებობაზე, ნიმუში აღებულია მარყუჟის გამოყენებით, რომელიც შეჰყავთ ანუსში დაახლოებით 10 სანტიმეტრის სიღრმეზე.

განავლის ნიმუშის გამოკვლევისას შეიძლება გამოვლინდეს შემდეგი საშიში მიკროორგანიზმები:

• სტაფილოკოკები.
• კლებსიელა, რომლის არსებობა მიუთითებს მსხვილი ნაწლავის დაზიანებაზე.
• Pseudomonas aeruginosa, რომელიც გამოიმუშავებს ტოქსინებს, რომლებიც უკიდურესად საშიშია ადამიანისთვის.

ადამიანის ორგანიზმში Pseudomonas aeruginosa-ს არსებობამ შეიძლება გამოიწვიოს სისხლის მოწამვლა და მენინგიტი - დაავადებები, რომლებიც შეიძლება ფატალური იყოს.

შარდის ტესტების ბაქტერიოსკოპია

შარდის ტესტი ბაქტერიოსკოპიული გამოკვლევისთვის ტარდება, თუ არსებობს ეჭვი საშარდე სისტემის ანთებაზე და ისეთი დაავადებების არსებობაზე, როგორიცაა პიელონეფრიტი და ცისტიტი, რომელთა გამომწვევი აგენტია E. coli, შესაბამისად, სქესობრივი გზით გადამდები დაავადებების ზოგიერთი პათოგენი. ასეთი ტესტისთვის საჭიროა 50-დან 100 მლ-მდე შარდი, ხოლო შარდი უნდა ინახებოდეს სტერილურ ჭურჭელში. ტესტის ჩატარებამდე კარგად უნდა დაიბანოთ თავი, რომ შარდში ნაკლები უცხო მინარევები იყოს. მენსტრუაციის დროს არ არის რეკომენდებული შარდის დონაცია.

ბაქტერიოსკოპიული შარდის ანალიზი შეუცვლელია ჩვილებში შარდსასქესო სისტემის დაავადებების გამოსავლენად. ამ შემთხვევაში, შარდი გროვდება კათეტერის მეშვეობით სტერილურ კონტეინერში. შარდის ნიმუშის გამოკვლევა უნდა ჩატარდეს რაც შეიძლება მალე, წინააღმდეგ შემთხვევაში პათოგენების გამოვლენა გაძნელდება.

ნახველის ბაქტერიოსკოპია

ნახველის გაანალიზებისას გამოკვლეულია ორი ნაცხი. ერთ-ერთი მათგანი ტუბერკულოზის გამომწვევი აგენტის, კოხის ბაცილის არსებობის საკითხზე მიმდინარეობს. მეორე კვლევის შედეგებზე დაყრდნობით კეთდება დასკვნები ნახველში სხვა მიკრობების არსებობის შესახებ.

ტუბერკულოზის ნახველის გასაანალიზებლად ნიმუში შეღებილია Ziehl-Neelsen მეთოდით.

სხვა მიკრობების არსებობის შესამოწმებლად ნიმუში შეღებილია გრამით. გრამის შეღებვის გამოყენებით ბაქტერიოსკოპიული მეთოდის გამოყენებით შესაძლებელია პნევმოკოკის იდენტიფიცირება, ბაქტერია, რომელიც იწვევს პნევმონიას. ასევე, ამ სქემის მიხედვით ნიმუშთან მუშაობისას შესაძლებელია გამოვლინდეს ნახველში სტრეპტოკოკის არსებობა - ყელის ტკივილის გამომწვევი აგენტები, ასევე Staphylococcus aureus. ეს უკანასკნელი მიკროორგანიზმი განსაკუთრებულ საფრთხეს უქმნის ადამიანის ჯანმრთელობას. ეს იწვევს ჩირქოვან პროცესებს და აბსცესების წარმოქმნას, მათ შორის შინაგან ორგანოებზე.

მოდით შევაჯამოთ

ბაქტერიოსკოპიული დიაგნოსტიკური მეთოდი მიკრობიოლოგიაში კვლევის ერთ-ერთი მთავარი მეთოდია. მიუხედავად ნაკლოვანებებისა, ეს მეთოდი ფართოდ გამოიყენება თანამედროვე მედიცინაში მრავალფეროვანი დაავადების დიაგნოსტიკისთვის, რომელთაგან ზოგიერთი, მაგალითად, ტუბერკულოზი, განსაკუთრებულ საფრთხეს უქმნის ადამიანს.

9971 0

ბაქტერიოლოგიური მეთოდის გამოყენება შესაძლებელს ხდის პათოგენის იზოლირებას სუფთა კულტურაში პაციენტისგან მიღებული მასალისგან და მისი იდენტიფიცირება თვისებების ნაკრების შესწავლის საფუძველზე. ბაქტერიების უმეტესობას შეუძლია გაშენდეს სხვადასხვა ხელოვნურ საკვებ გარემოზე (გარდა ქლამიდიისა და რიკეტსიისა), ამიტომ ბაქტერიოლოგიური მეთოდი მნიშვნელოვანია მრავალი ინფექციური დაავადების დიაგნოსტიკაში.

თუ დადებითი შედეგი მიიღება, ბაქტერიოლოგიური მეთოდი საშუალებას იძლევა განისაზღვროს იზოლირებული პათოგენის მგრძნობელობა ანტიმიკრობული პრეპარატების მიმართ. თუმცა, ამ კვლევის ეფექტურობა დამოკიდებულია ბევრ პარამეტრზე, კერძოდ მასალის შეგროვების პირობებიდა მას ტრანსპორტირებალაბორატორიამდე.

TO ძირითადი მოთხოვნებიბაქტერიოლოგიური კვლევისთვის მასალის შერჩევისა და ტრანსპორტირების მოთხოვნები მოიცავს:

• მასალის მიღება ეტიოტროპული მკურნალობის დაწყებამდე;
• მასალის შეგროვებისას სტერილური პირობების დაცვა;
• მასალის შეგროვების ტექნიკური სისწორე;
• საკმარისი რაოდენობის მასალა;
• მასალის შენახვისა და ტრანსპორტირების ტემპერატურული პირობების უზრუნველყოფა;
• მასალის შეგროვებასა და მყარ საკვებ ნიადაგზე თესვას შორის დროის ინტერვალის მინიმუმამდე შემცირება.

მასალის ტრანსპორტირება ლაბორატორიაში უნდა განხორციელდეს რაც შეიძლება მალე, მაგრამ არა უმეტეს მისი შეგროვებიდან 1-2 საათისა. მასალის ნიმუშები უნდა ინახებოდეს გარკვეულ ტემპერატურაზე; კერძოდ, ჩვეულებრივ სტერილური მასალები (სისხლი, ცერებროსპინალური სითხე) ინახება და მიეწოდება ლაბორატორიას 37 °C ტემპერატურაზე. არასტერილური მასალები (შარდი, რესპირატორული სეკრეცია და ა.შ.) ინახება ოთახის ტემპერატურაზე არა უმეტეს 1-2 საათისა ან არა უმეტეს ერთი დღისა 4 °C ტემპერატურაზე (შინაური მაცივრის პირობებში). თუ შეუძლებელია ნიმუშების ლაბორატორიაში მიტანა რეგულირებულ დროში, რეკომენდებულია სატრანსპორტო საშუალებების გამოყენება, რომლებიც შექმნილია პათოგენების სიცოცხლისუნარიანობის შესანარჩუნებლად შენარჩუნების პირობებში.

სისხლი კვლევისთვისუნდა იქნას მიღებული პაციენტისგან სხეულის ტემპერატურის მომატების პერიოდში, სიცხის დაწყების დასაწყისში. რეკომენდებულია 4-6 საათის ინტერვალით აღებული 3-4 სისხლის სინჯის გამოკვლევა, რაც გამართლებულია გარდამავალი ბაქტერიემიის „დაკარგვის“ რისკის შემცირებისა და იზოლირებული ოპორტუნისტული მიკროფლორის ეტიოლოგიური როლის დადასტურების უნარის გაზრდის თვალსაზრისით. სისხლიდან, თუ ეს მიკროფლორა გამოვლინდა რამდენიმე ვენურ სისხლში. სისხლის ნიმუში 10 მლ მოზრდილებში და 5 მლ ბავშვებისთვის ინოკულირებულია მინიმუმ ორ ბოთლში აერობული და ანაერობული მიკროორგანიზმებისთვის განკუთვნილი გარემოთი 1:10 თანაფარდობით. მიზანშეწონილია არტერიული სისხლის ერთჯერადი შესწავლა.

მიიღეთ ცერებროსპინალური სითხე(CSF) გამომუშავდება ექიმის მიერ წელის პუნქციის დროს 1-2 მლ ოდენობით მშრალ სტერილურ მილში. ნიმუში დაუყოვნებლივ გადაეცემა ლაბორატორიას, სადაც ასევე დაუყოვნებლივ იწყება მისი გამოკვლევა. თუ ეს შეუძლებელია, მასალა ინახება 37 °C ტემპერატურაზე რამდენიმე საათის განმავლობაში. საგრძნობლად ზრდის ბაქტერიოლოგიური გამოკვლევის დადებითი შედეგების რაოდენობას 1-2 წვეთი CSF-ის ჩანერგვით სინჯარაში, რომელიც შეიცავს ნახევრად თხევად გარემოს გლუკოზით და პეტრის ჭურჭელში „სისხლის“ აგარით. მასალის გასაგზავნად გამოიყენეთ იზოთერმული ყუთები, გამაცხელებელი ბალიშები, თერმოსები ან ნებისმიერი სხვა შეფუთვა, სადაც ტემპერატურა შენარჩუნებულია დაახლოებით 37 °C-ზე.

გამონადენიბაქტერიოლოგიური კვლევისთვის 3-5 გ მიიღება სტერილური ხის სპატულების გამოყენებით სტერილურ ჭურჭელში მჭიდროდ დახურული სახურავით. შეგროვებული მასალის დათვალიერება უნდა დაიწყოს არაუგვიანეს 2 საათისა, თუ ამ დროში შეუძლებელი გახდა შემოწმების დაწყება, უნდა შეგროვდეს მცირე რაოდენობით მასალა და მოათავსოთ შესაბამის სატრანსპორტო საშუალებაში. განავლის შეგროვებისას უნდა ვცდილობთ გამოგზავნოთ პათოლოგიური მინარევები (ლორწო, ჩირქი, ეპითელიუმის ნაწილაკები და ა.შ.) გამოკვლევისთვის, ასეთის არსებობის შემთხვევაში, რათა თავიდან იქნას აცილებული სისხლის მინარევები, რომლებსაც აქვთ ბაქტერიციდული თვისებები, მასალაში.

მასალის შესაგროვებლად შეიძლება გამოყენებულ იქნას სწორი ნაწლავის ტამპონი (ბამბის წვერით). ტამპონი უნდა იყოს დატენიანებული სტერილური იზოტონური ნატრიუმის ქლორიდის ხსნარით ან სატრანსპორტო საშუალებით (მაგრამ არა ზეთის გელით). იგი შეჰყავთ სწორ ნაწლავზე 5-6 სმ სიღრმეზე და ტამპონის მობრუნებით, ფრთხილად ამოიღეთ იგი, აკვირდებით ტამპონზე განავლის ფერის გამოჩენას. ტამპონი მოთავსებულია მშრალ სინჯარაში, თუ მასალის შესწავლა იწყება 2 საათის განმავლობაში, წინააღმდეგ შემთხვევაში - სატრანსპორტო საშუალებებში.

ვგიჟდები(თავისუფლად გამოთავისუფლებული შარდის საშუალო ნაწილი) 3-5 მლ ოდენობით გროვდება სტერილურ ჭურჭელში გარეთა სასქესო ორგანოების საფუძვლიანი ტუალეტის შემდეგ. შარდის შეგროვება სასურველია დილით.

ნაღველიშეგროვებული თორმეტგოჯა ნაწლავის ინტუბაციის დროს სამკურნალო ოთახში ცალ-ცალკე A, B და C ნაწილებად სამ სტერილურ მილში, ასეპსისის წესების დაცვით.

კუჭის ამორეცხვის წყალიგროვდება სტერილურ ქილებში 20-50 მლ რაოდენობით. გასათვალისწინებელია, რომ ამ შემთხვევებში კუჭის ამორეცხვა ტარდება მხოლოდ ინდიფერენტული (რომელსაც არ აქვს ბაქტერიოსტატიკური ან ბაქტერიციდული მოქმედება მიკროორგანიზმებზე) ხსნარებით - სასურველია ადუღებული წყალი (სოდის, კალიუმის პერმანგანატის და ა.შ. დამატების გარეშე).

ნახველი. ხველის შეტევის დროს გამოთავისუფლებული დილის ნახველი გროვდება სტერილურ ქილაში. ხველებამდე ავადმყოფი იხეხავს კბილებს და იბანს პირს ადუღებული წყლით, რათა მექანიკურად მოიცილოს საკვების ნარჩენები, გახეხილი ეპითელიუმი და პირის ღრუს მიკროფლორა.

ბრონქული ამორეცხვის წყალი. ბრონქოსკოპიის დროს შეჰყავთ არაუმეტეს 5 მლ იზოტონური ნატრიუმის ქლორიდის ხსნარი, რასაც მოჰყვება შეწოვა სტერილურ მილში.

გამონადენი ფარინქსიდან, პირიდან და ცხვირიდან. მასალა პირის ღრუდან მიიღება უზმოზე ან ჭამიდან 2 საათის შემდეგ სტერილური ბამბის ტამპონით ან კოვზით ლორწოვანი გარსიდან და მისი დაზიანებული უბნებიდან სანერწყვე ჯირკვლების სადინრების შესასვლელთან, ენის ზედაპირზე და წყლულებისგან. თუ არის ფილმი, ამოიღეთ იგი სტერილური პინცეტით. ცხვირის ღრუდან მიღებული მასალა იღება მშრალი სტერილური ბამბის ტამპონით, რომელიც ღრმად შეჰყავთ ცხვირის ღრუში. ნაზოფარინქსიდან მასალა მიიღება სტერილური უკანა ფარინგეალური ბამბის ტამპონით, რომელიც ფრთხილად შეჰყავთ ცხვირის ღიობიდან ნაზოფარინქსში. თუ ხველა იწყება, ტამპონი არ მოიხსნება ხველების დასრულებამდე. დიფტერიის შესამოწმებლად, პარალელურად ათვალიერებენ ფილებსა და ლორწოს ცხვირიდან და ყელიდან, იღებენ მასალას სხვადასხვა ნაცხით.

სატესტო მასალა ინოკულირებულია მყარ საკვებ გარემოზე სპეციალური ტექნიკის გამოყენებით მიკროორგანიზმების ცალკეული კოლონიების ზრდის მისაღებად, რომლებიც შემდეგ სკრინინგდება პათოგენის სუფთა კულტურის იზოლირების მიზნით.

ბაქტერიების გარკვეული ტიპები იზოლირებულია შერჩევითი მედიის გამოყენებით, რომელიც აფერხებს უცხო მიკროორგანიზმების ზრდას ან შეიცავს ნივთიერებებს, რომლებიც ასტიმულირებენ გარკვეული პათოგენური მიკრობების ზრდას.

მიკროორგანიზმები იზოლირებული საკვები ნივთიერებებზე იდენტიფიცირება, ე.ი. განსაზღვრეთ მათი სახეობა ან ტიპი. ბოლო დროს ჯანდაცვის პრაქტიკაში იდენტიფიკაციისთვის გამოიყენება მიკროტესტის სისტემები, რომლებიც წარმოადგენს პანელს დიფერენციალური დიაგნოსტიკური გარემოს კომპლექტით, რაც აჩქარებს კვლევას. მიკროტესტის სისტემები ასევე გამოიყენება მიკროორგანიზმების მგრძნობელობის დასადგენად ანტიმიკრობული პრეპარატების მიმართ ანტიბიოტიკის განზავებით თხევად საკვებ გარემოში.

ბაქტერიოლოგიური კვლევის შედეგების შეფასებისას ექიმმა უნდა გაითვალისწინოს, რომ უარყოფითი შედეგი ყოველთვის არ ნიშნავს პათოგენის არარსებობას და შეიძლება დაკავშირებული იყოს ანტიმიკრობული პრეპარატების გამოყენებასთან, სისხლის მაღალ მიკროციდულ აქტივობასთან და ტექნიკურ შეცდომებთან. პაციენტის მასალაში პათოგენური მიკრობის გამოვლენა, კლინიკური სურათის მიუხედავად, შესაძლებელია გამოჯანმრთელების, ჯანსაღი ან გარდამავალი ბაქტერიული გადაზიდვის შემთხვევაში.

ოპორტუნისტული მიკროორგანიზმების (staphylococcus epidermidis, Escherichia coli) და თუნდაც საპროფიტების სისხლიდან იზოლაცია, ყველა ასეპტიკური წესის დაცვით, უნდა ჩაითვალოს ბაქტერიემიის გამოვლინებად, განსაკუთრებით თუ ეს მიკრობები გვხვდება მასალის ერთზე მეტ ნიმუშში ან სხვადასხვა სუბსტრატში. სისხლი, შარდი), რადგან ორგანიზმის იმუნორეაქტიულობის შემცირებით, ეს და სხვა „არაპათოგენური“ მიკროორგანიზმები შეიძლება იყვნენ ინფექციური პროცესების გამომწვევი აგენტები, მათ შორის სეფსისი.

არის გარკვეული სირთულე არასტერილური მედიის ბაქტერიოლოგიური გამოკვლევის შედეგების ინტერპრეტაციაკერძოდ, ოპორტუნისტული მიკროორგანიზმების ეტიოლოგიური როლის დადასტურება. ამ შემთხვევაში მხედველობაში მიიღება ისეთი ინდიკატორები, როგორიცაა იზოლირებული კულტურების ტიპი, მოცემული ტიპის მიკრობული უჯრედების რაოდენობა მასალაში, მათი განმეორებითი იზოლაცია დაავადების დროს, მონოკულტურის არსებობა ან მიკროორგანიზმის ასოციაცია.

იუშჩუკი ნ.დ., ვენგეროვი იუ.ია.

ბაქტერიოლოგიური (კულტურული) მეთოდი

მიკროორგანიზმების მკვებავ გარემოზე ხელოვნური გაშენების მეთოდების ერთობლიობა მათი იდენტიფიცირებისას ინფექციური დაავადების ან მიკრობებით გამოწვეული სხვა პროცესის დადგენისას და რიგი ფიზიოლოგიური თვისებების განსაზღვრისას სხვა მიზნებისთვის, მაგალითად, ქიმიოთერაპიული პრეპარატის არჩევისას. ბიოლების უმეტესობის შესწავლის თანამედროვე მეთოდები. ბაქტერიების თვისებები შესაძლებელია მხოლოდ იმ შემთხვევაში, თუ არსებობს სუფთა წყალი(სმ.). ბალახის სხვა სახის მიკრობებით დაბინძურება, როგორც წესი, იწვევს დამახინჯებულ შედეგებს და არასწორ დასკვნებს. ამიტომ, პირველი დავალება ბ.მ. არის ნებისმიერი ტიპის (var) სუფთა ბალახის მიღება მიკრობული ასოციაციისგან და კვლევის ყველა ეტაპზე მასალის უცხო მიკროფლორით დაბინძურების თავიდან აცილება კვლევისა და მიკრობული კულტურისთვის. ეს შესაძლებელია სტერილურ კონტეინერებში მასალის სტერილურ პირობებში შეგროვებისას, მასალის სტერილურ გარემოში სტერილური ხელსაწყოს ინოკულაციისას, მიწოდების, მასალის შენახვისა და ინკუბაციის დროს ჰაერიდან მიკრობების შეღწევისას. მეორე დავალება ბ.მ. - მიკრობული იდენტიფიკაცია(იხ.) იზოლირებული სუფთა მწვანილი, მესამე არის დამატებითი თვისებების განსაზღვრა, მაგალითად, ანტიბიოტიკების მიმართ მგრძნობელობა, ვირულენტობა. ბ.მ.-ის ეტაპები: 1) მასალის შეგროვება (იხ. მასალები კვლევისთვის)და მისი მიწოდება ბაქტერიებისთვის. ლაბორატორია; 2) მიკროსკოპული კვლევა. მასალა (იხ ბაქტერიოსკოპიული მეთოდი).ეს ნაბიჯი ხშირად არ სრულდება, თუმცა, დაბალი მგრძნობელობის მიუხედავად, ზოგიერთში წინასწარი მიკროსკოპია შემთხვევებიგვაწვდის სავარაუდო ინფორმაციას გამომწვევის შესახებ და საშუალებას გაძლევთ აირჩიოთ ინოკულაციისთვის აუცილებელი მედია; 3) კვლევის დამუშავება. ფიზიკური მასალა ან ქიმ. ფაქტორები უცხო მიკროფლორას მოსაშორებლად ან შესამცირებლად. ეს ღონისძიება გამოიყენება, მაგალითად, ნახველის გამოკვლევისას, მჟავა-სწრაფი და სპორის წარმომქმნელი მიკრობების იზოლირებისას; 4) სათესი კვლევა. მასალა (იხ ბაქტერიოლოგიური კულტურები)მკვებავ გარემოზე იზოლირებული კოლონიების მისაღებად; 5) ინკუბირებული საკვები ნივთიერებების ინკუბაცია. ინკუბაციის დრო და ტემპერატურა დამოკიდებულია მცენარის მოსალოდნელ სახეობაზე. როგორც წესი, ნათესები ინახება თერმოსტატში 37°C ტემპერატურაზე 1-2 დღის განმავლობაში. თუ ზრდა არ არის, ინკუბაციური პერიოდი შეიძლება გაგრძელდეს კიდევ 2-დან 3 დღემდე. ხანგრძლივად ინკუბაციისთვის აუცილებელია გარემოს გამოშრობა თავიდან ავიცილოთ, რისთვისაც ნათესებს ათავსებენ დეზიკატორში წყლით ან მილის საცობებს ავსებენ პარაფინით; 6) კვლევა კოლონიები(სმ.). შესასწავლად ირჩევენ ერთგვაროვან იზოლირებულ კოლონიებს, რომლებიც მდებარეობენ ჭურჭლის კიდეებიდან შორს და მარყუჟის მონაკვეთის გასწვრივ, გარშემორტყმული ხაზით და დანომრილია. თუ კვლევა ტარდება დაუსაბუთებლად (პოლიეტიოლოგიური პროცესი და ა.შ.), მაშინ ვიზუალური დათვალიერების შედეგების საფუძველზე არჩევენ თეფშზე არსებული ყველა ტიპის 2-3 კოლონიას და კეთდება მათგან ნაცხი; 7) შერჩეული კოლონიებიდან ხელახალი დათესვა დაგროვების მედიაზე. ამისათვის კოლონიის დარჩენილი ნაცხიდან გამოვლინდა ერთიანი ფორმისა და ფერის ბაქტერიები, რომლებიც ცდილობენ არ შეეხონ მეზობელ კოლონიებს. MPA დახრილი სინჯარაში ან სპეციალურ საშუალებებში ზოლებით; 8) კულტურების ინკუბაცია თერმოსტატში უწყვეტი ზრდის გამოჩენამდე (ჩვეულებრივ 1-2 დღე); 9) დახრილ გარემოზე მოყვანილი ბალახის სისუფთავის განსაზღვრა ზრდის მაკროსკოპული გამოკვლევით და მისგან ნაცხის მიკროსკოპით; 10) იზოლირებული სუფთა ბალახის იდენტიფიცირება და საჭიროების შემთხვევაში (კლინიცისტის, ეპიდემიოლოგის მოთხოვნით), სხვადასხვა ბიოლების დადგენა. სვ-ვ; 11) დასკვნა შერჩეული სახეობის სახეობრივი იდენტურობისა და მისი მახასიათებლების შესახებ. დასკვნა მოცემულია ოფიციალურ ფორმაში ნომრის მითითებით, ყირიმის ქვეშ ეს მცენარე შეყვანილია ლაბორატორიულ ჟურნალში. ბ.მ. არის მთავარი ბაქტერიების დიეტაში. ინფექციები. მას, როგორც წესი, აქვს მაღალი მგრძნობელობა, რაც საშუალებას იძლევა გამოირჩეოდეს კვლევისგან. სუფთა მასალა, მაშინაც კი, თუ მასალის სათესლე დოზა შეიცავდა რამდენიმე ათეულ ინდივიდს. ბ.მ. ხასიათდება მაღალი სპეციფიკურობით. ამა თუ იმ ტიპის ბაქტერიების იზოლაცია პათოლოგიური მასალისგან, ექვემდებარება მთელ რიგ პირობებს (იხ. დაავადების გამომწვევი აგენტი)საიმედოდ ადგენს პათოლოგიური პროცესის ეტიოლოგიას. გამონაკლისი არის ოპორტუნისტული ბაქტერიები, რომლებიც ავტოქტონურია კონკრეტული ბიოტოპისთვის, ეტიოლის დასადგენად. რომლის როლი მოითხოვს სპეციალურ კრიტერიუმებს, ასევე განსხვავებას ტარებასა და დაავადებას შორის (მაგალითად, დიფტერიის გადატანა სტრეპტოკოკური ყელის ტკივილით). ღირებულება B.m. ასევე მდგომარეობს იმაში, რომ მისი დახმარებით შეიძლება დადგინდეს ქიმიოთერაპიისა და სეროთერაპიის დასანიშნად აუცილებელი მედიკამენტები, ინფექციის წყაროსა და პათოგენის გადაცემის მექანიზმების იდენტიფიცირება და ეპიდემიის საწინააღმდეგო ღონისძიებების არჩევა. ბოლოს ბ.მ. ეხება d-ki-ს ადრეულ მეთოდებს. B.m-ის ნაკლოვანებები - ინფექციის საშიშროება, სირთულე, მშობიარობის ინტენსივობა, ხანგრძლივობა. მიკროფლორის შემადგენლობისა და მისი თვისებების შესახებ სანდო მონაცემების მიღება შესაძლებელია მხოლოდ 3-10 ფლორის ნიმუშის შესწავლით.