KARVONSAROY: Interferon alfa 2b

Ishlab chiqaruvchi:"Sikor Biotech" YoAJ

Anatomik-terapevtik-kimyoviy tasnifi: Interferon alfa-2b

Qozog'iston Respublikasida ro'yxatga olish raqami: No RK-BP-5No 012842

Ro'yxatdan o'tish muddati: 18.06.2014 - 18.06.2019

KNF (Dori vositalarining Qozog'iston milliy formulasiga kiritilgan dori)

ALO (bepul ambulator dori vositalari ro'yxatiga kiritilgan)

ED (Yagona distribyutordan sotib olinishi shart bo'lgan bepul tibbiy yordamning kafolatlangan hajmi doirasidagi dori vositalari ro'yxatiga kiritilgan)

Qozog‘iston Respublikasida chegaralangan xarid narxi: 33 116,64 tn

Ko'rsatmalar

Savdo nomi

Realdiron

Xalqaro mulkiy nom

Interferon alfa

Dozalash shakli

Inyeksiya uchun eritma uchun liyofillangan kukun, 1000 000 IU, 3 000 000 IU, 6 000 000 IU, 9 000 000 IU va 18 000 000 IU

Murakkab

Bir shisha o'z ichiga oladi

faol modda: interferon alfa-2b inson rekombinanti

nantnogo 1 million IU, 3 million IU, 6 million IU, 18 million IU

Yordamchi moddalar: dekstran 60, natriy xlorid, natriy vodorod fosfat dodekahidrat, natriy dihidrogen fosfat dihidrat

Tavsif

Oq kukun yoki gözenekli massa

Farmoterapiya guruhi

Immunomodulyatorlar. Interferonlar. Interferon alfa

ATX kodi L03AV05

Farmakologik xossalari

Farmakokinetika

Mushak ichiga yuborilgandan keyin interferon-alfa 2b maksimal kontsentratsiyasining boshlanishi vaqti 2 soatni tashkil qiladi va 12 soatgacha davom etadi, teri ostiga yuborilgandan keyin 7,3 soatni tashkil qiladi, 20 soatdan keyin preparat aniqlanmaydi.

T1/2 (yarim yemirilish davri) da mushak ichiga in'ektsiya taxminan 2-3 soatni tashkil qiladi. Bioavailability - 80%.

Preparat barcha organlar va to'qimalarda teng ravishda taqsimlanadi. Buyraklarda va oz miqdorda jigarda biotransformatsiyalanadi. Qisman o'zgarmagan holda, asosan buyraklar orqali chiqariladi.

Farmakodinamikasi

Interferon alfa-2b rekombinant DNK orqali olingan yuqori darajada tozalangan oqsildir. Molekulaning polipeptid tuzilishi, biologik faolligi va farmakologik xususiyatlari inson leykotsitlari interferon alfa-2b bilan bir xil. Antiviral, antiproliferativ, antitumor va immunomodulyator ta'sirga ega.

Preparat hujayra yuzasida tegishli retseptorlar bilan o'zaro ta'sirlanib, hujayra ichidagi murakkab o'zgarishlar zanjirini boshlaydi. Ushbu jarayonlar hujayradagi virus replikatsiyasining oldini olish, hujayra proliferatsiyasini inhibe qilish va interferonning immunomodulyatsion ta'siri bilan bog'liq deb taxmin qilinadi. Interferon alfa-2b makrofaglarning fagotsitik faolligini, shuningdek, T hujayralari va NK hujayralarining (tabiiy qotillar) sitotoksik faolligini rag'batlantirish qobiliyatiga ega. Interferonning bu xususiyatlari preparatning terapevtik ta'sirini aniqlaydi.

Foydalanish uchun ko'rsatmalar

Kattalardagi kombinatsiyalangan terapiyaning bir qismi sifatida. Virusli kasalliklar

- surunkali faol gepatit B, agar foydalanish mumkin bo'lmasa

pegillangan interferonlar

- surunkali gepatit C, agar foydalanish mumkin bo'lmasa

pegillangan interferonlar

Onkologik kasalliklar - tukli hujayrali leykemiya - surunkali miyeloid leykemiya - buyrak saratoni - malign melanoma.

Foydalanish bo'yicha ko'rsatmalar va dozalar

Realdiron eritmasi mushak ichiga yoki teri ostiga kiritiladi. Ishlatishdan oldin shishaning tarkibi in'ektsiya uchun 1 ml suvda eritiladi. Dori eritmasi shaffof, begona qo'shimchalarsiz bo'lishi kerak. Surunkali faol gepatit B uchun Realdiron 6 oy davomida haftasiga uch marta 3 million IU dozada qo'llaniladi. Agar terapiyadan keyin 3 oy ichida klinik, biokimyoviy yaxshilanish va/yoki HBsAg yo'qolmasa, preparatni qo'llash to'xtatiladi.

Surunkali gepatit C uchun Realdiron 6 oy davomida haftasiga 3 marta 3 million IU dozada buyuriladi. Agar preparatni qabul qilgandan keyin bir oylik terapiya davomida qon plazmasida ALT faolligi 50% ga kamaymasa, preparatning dozasi haftasiga 3 marta 6 million IU ga oshiriladi. Agar 3 oylik terapiyadan keyin klinik yoki biokimyoviy yaxshilanish bo'lmasa, preparatni qo'llashni to'xtatish kerak.

Tukli hujayrali leykemiya uchun 2 oy davomida har kuni 3 million IU qo'llaniladi; gematologik remissiyaga erishilganda - haftasiga 3 marta 3 million IU.

Surunkali miyeloid leykemiya uchun preparatning boshlang'ich dozasi kuniga 3 million IU ni tashkil qiladi, mushak ichiga yoki teri ostiga kiritiladi. Yaxshi muhosaba qilingan taqdirda, preparatning dozasi har haftada kuniga 9 million IU maksimal dozaga oshiriladi. Oq qon hujayralari soni barqarorlashgandan so'ng, bu dozani haftasiga uch marta yuborish mumkin. Davolash kursi cheksiz muddatda amalga oshiriladi, terapiya to'xtatilishi kerak bo'lgan holatlar bundan mustasno (masalan, kasallikning tez rivojlanishi yoki preparatga nisbatan murosasizlik bilan).

Buyrak saratoni uchun Realdiron 10 kun davomida kuniga 3 million IU dozada qo'llaniladi. Yaxshi muhosaba qilingan taqdirda, preparatning dozasi har haftada kuniga maksimal 18 million IU dozaga oshiriladi. 3 oylik davolanishdan so'ng, 6 oy davomida haftasiga uch marta 18 million IU yuboradigan parvarishlash terapiyasi boshlanadi.

Malign melanoma uchun preparatning boshlang'ich dozasi kuniga 3 million IU ni tashkil qiladi, mushak ichiga yoki teri ostiga kiritiladi. Agar yaxshi muhosaba qilinsa, preparatning dozasi har hafta maksimal 9-18 million IU kunlik dozaga oshiriladi. Klinik ta'sirga erishgandan so'ng, ular haftasiga 3 marta 9-18 million IU saqlovchi terapiyaga o'tadilar. Realdiron bilan yordamchi terapiya jarrohlik yo'li bilan olib tashlash I-II bosqichdagi malign melanoma relaps vaqtini uzaytirishi mumkin.

Yon effektlar

tez-tez

Isitma, charchoq, bezovtalik, Bosh og'rig'i, miyalji, titroq, titroq, grippga o'xshash alomatlar

Anoreksiya, ko'ngil aynish

kamroq tez-tez

Ta'mning o'zgarishi, stomatit, quruq og'iz, tish yuzasi va og'iz bo'shlig'i shilliq qavatining shikastlanishi, qusish, diareya, ich qotishi, shaklsiz stul, Qorindagi og'riq

Alopesiya, qichishish, quruq teri, toshma

Orqa og'rig'i, mushak-skelet tizimining og'rig'i, ko'krak og'rig'i, miyozit, artralgiya

Depressiya, o'z joniga qasd qilish fikrlari va harakatlari, o'z joniga qasd qilish

Terlashning ko'payishi, ayniqsa kechasi

Achchiqlanish, uyqusizlik, uyquchanlik, tashvish, konsentratsiyaning pasayishi, hissiy labillik, bosh aylanishi

Arterial gipotenziya, gipertenziya

kamdan-kam hollarda

Inyeksiya joyida yallig'lanish, qizarish, tirnash xususiyati

Hayajonlanish, asabiylashish, psixoz, shu jumladan gallyutsinatsiyalar, tajovuzkor xatti-harakatlar, qo'zg'alish, ongning buzilishi, neyropatiyalar, polineyropatiya, periferik neyropatiyalar, paresteziya, gipoesteziya, konvulsiyalar, ongni yo'qotish

Virusli infektsiya, shu jumladan herpes simplex

Eritema

Kon'yunktivit, ko'z og'rig'i, ko'rishning buzilishi, retinal qon ketishlar, retinopatiya, retinal o'zgarishlar, retinal arteriya yoki tomir obstruktsiyasi, ko'rish keskinligining pasayishi yoki ko'rish maydonining cheklanganligi, nevrit optik asab, papilla shishi

Lakrimal bezlarning disfunktsiyasi

Burundan qon ketish, burun tiqilishi, sinusit, rinit

O'chokli

Yo'tal, faringit, o'pka infiltrati, pnevmoniya, nafas qisilishi, nafas olish buzilishi

Ozish

Taxikardiya, yurak urishi

Libidoning pasayishi, hayz davrining buzilishi (amenoreya, menorragiya)

Ishtahaning kuchayishi, glossit, milklarning qon ketishi

Rabdomiyoliz (ba'zan og'ir)

Eshitish qobiliyatining buzilishi yoki yo'qolishi

Yuzning shishishi, buyrak funktsiyasining buzilishi, nefrotik sindrom, buyrak

etishmovchilik, giperurikemiya

Giper- va hipotiroidizm, gepatotoksisite (shu jumladan o'lim)

Leykopeniya

Tish va periodontal kasalliklar (shu jumladan tishlarning yo'qolishiga olib keladiganlar)

kamdan kam

Ishtahaning oshishi, diabetes mellitus, giperglikemiya, gipertrigliseridemiya, kolit, gepatomegali, pankreatit

Miya qon tomirlari ishemiyasi, serebrovaskulyar qon ketishlar

Sarkoidoz yoki sarkoidozning kuchayishi

Allergik reaktsiyalar, eritema multiforme, Stivens-Jonson sindromi, toksik epidermal nekroliz

Trombotsitopeniya, limfotsitopeniya, aplastik anemiya

Limfadenopatiya

Uyquchanlik

In'ektsiya joyida nekroz

Otoimmün va immunitet bilan bog'liq kasalliklar, shu jumladan. idiopatik trombotsitopenik purpura, revmatoid artrit, tizimli qizil yuguruk, vaskulit va Vogt-Kayanagi-Harada sindromi

Quloqlarda shovqin

Miokard infarkti, aritmiya (odatda kasalliklarga chalingan bemorlarda). yurak-qon tomir tizimi anamnez yoki kardiotoksik dorilar bilan oldingi terapiya), qaytariladigan vaqtinchalik kardiyomiyopatiya (yurak-qon tomir tizimi tarixi bo'lmagan bemorlarda qayd etilgan)

Zotiljam

kamdan kam(monoterapiya bilan yoki ribavirin bilan birgalikda)

To'liq qizil suyak iligi aplaziyasi

Laboratoriya parametrlarining o'zgarishi (ko'pincha retseptlashda qayd etiladi

kuniga 10 million IU dan ortiq dozada preparat): granulotsitlar sonining kamayishi,

gemoglobin darajasining pasayishi, ALT, AST faolligining oshishi (surunkalidan tashqari barcha ko'rsatmalar uchun qo'llanganda qayd etilgan). virusli gepatit), ALP, LDH, kreatinin va sarum karbamid azot darajalari

Bolalarda, shu jumladan ribavirin bilan kombinatsiyalangan terapiya (ribavirin bilan kombinatsiyalangan davo olgan bemorlar sonining ≥ 1%)

juda tez-tez

Anemiya, neytropeniya

Gipotiroidizm

Depressiya, hissiy labillik, uyqusizlik, asabiylashish, bosh og'rig'i, bosh aylanishi

Anoreksiya, ko'ngil aynishi, qusish, qorin og'rig'i, diareya

Alopesiya, toshma

Artralgiya, miyalji

In'ektsiya joyida yallig'lanish reaktsiyalari: og'riq, giperemiya

Zaiflik, isitma, titroq, grippga o'xshash alomatlar, bezovtalik, virusli infektsiya, faringit

Jismoniy rivojlanishning kechikishi (yosh darajasiga nisbatan kechikkan o'sish va/yoki vazn)

tez-tez

Pallor

Burundan qon ketishi

Bakterial infektsiya, pnevmoniya, qo'ziqorin infektsiyasi, herpes simplex

Neoplazmalar, tasniflanmagan

Trombotsitopeniya, limfadenopatiya

Gipertiroidizm, virilizm

Gipertrigliseridemiya, giperurikemiya

Ajitasyon, tremor, uyquchanlik, tajovuzkor reaktsiya, tashvish, apatiya, asabiylashish, xatti-harakatlarning buzilishi, somnambulizm, o'z joniga qasd qilish fikrlari, tartibsizlik, g'ayritabiiy tushlar, uxlab qolish qiyinligi, giperkineziya, disfoniya, paresteziya, giperesteziya, kontsentratsiyaning pasayishi

Konyunktivit, ko'z og'rig'i, loyqa ko'rish, lakrimal bezlarning disfunktsiyasi

Raynaud kasalligi

Yo'tal, nafas qisilishi, otitis media, burun tiqilishi, burun shilliq qavatining tirnash xususiyati, rinoreya, hapşırma, taxipnea

Oshqozon-ichak traktining buzilishi, ishtahaning kuchayishi, ich qotishi, bo'shashgan axlat, rektal buzilishlar, dispepsiya, gastroezofagial reflyuks, gastroenterit, glossit, stomatit va boshqalar. oshqozon yarasi, tish og'rig'i, jigar disfunktsiyasi

Ko'krak qafasidagi og'riq, qorinning o'ng yuqori kvadrantida

Akne, ekzema, tirnoqlardagi o'zgarishlar, quruq teri, teri yoriqlari, fotosensitivlik reaktsiyalari, makulopapulyar toshmalar, teri pigmentatsiyasining o'zgarishi, eritema, terlash, gematoma, qichishish

Siydik chiqarish yo'llarining infektsiyalari, siydik buzilishi, enurez

Hayz davrining buzilishi, amenoreya, menorragiya, vaginal buzilishlar, vaginit, moyak og'rig'i (o'g'il bolalarda)

Qo'llash mumkin bo'lmagan holatlar

Faol yoki har qanday yordamchi moddalarga yuqori sezuvchanlik

Og'ir yurak kasalliklari, shu jumladan anamnez (nazorat qilinmagan yurak disfunktsiyasi, yaqinda miyokard infarkti, yurak ritmining og'ir buzilishi)

Buyrak yoki jigarning og'ir kasalliklari, shu jumladan ulardagi o'smalarning metastazlari, ribavirin bilan birgalikda buyurilganda kreatinin klirensi 50 ml/min dan kam bo'lgan buyrak etishmovchiligi

Jigarning dekompensatsiyalangan sirrozi

Surunkali gepatit siroz yoki jigar etishmovchiligining og'ir shakllari bilan birgalikda

O'tmishda immunosupressantlar yoki glyukokortikosteroidlar bilan davolangan surunkali gepatit

Otoimmün kasalliklar, shu jumladan. hozirda yoki tarixda otoimmün gepatit

Kasalliklar qalqonsimon bez standart muolajalar bilan nazorat qilinmaydi

Bolalar va o'smirlardagi ruhiy kasalliklarning mavjudligi yoki tarixi

Surunkali gepatit C bilan kasallangan 3 yoshgacha bo'lgan bolalar

Ribavirin bilan birgalikda buyurilganda homiladorlik va laktatsiya

Ribavirin bilan birgalikda buyurilganda, ribavirinni qo'llash bo'yicha yo'riqnomada keltirilgan kontrendikatsiyalar ham hisobga olinishi kerak.

Dori vositalarining o'zaro ta'siri

Interferon alfa mikrosomal jigar fermentlarini (sitoxrom P-450) inhibe qiladi va shuning uchun ko'plab dorilarning (teofillin va boshqalar) metabolizmini buzishi, ularning qondagi kontsentratsiyasini oshirishi mumkin.

Markaziy asab tizimidan salbiy reaktsiyalar xavfi tufayli, interferon alfa bilan bir vaqtda giyohvandlik, gipnoz va sedativ dorilarni qo'llash kerak.

Realdironning boshqa dorilar bilan o'zaro ta'siri to'liq o'rganilmagan. Realdironni miyelosupressiv ta'sirga ega bo'lgan dorilar bilan birgalikda ehtiyotkorlik bilan qo'llash kerak.

Realdiron va zidovudinni bir vaqtda qo'llash bilan leykotsitlar sonini kamaytirishga sinergik ta'sir ko'rsatishi mumkin. Ushbu terapiyani olgan bemorlarda zidovudin bilan monoterapiya bilan kutilganidan ko'ra tez-tez dozaga bog'liq neytropeniya holatlari kuzatildi. Realdironni ribavirin yoki zidovudin bilan kombinatsiyalangan davolashning bir qismi sifatida qabul qilgan bemorlarda anemiya rivojlanish xavfi ortadi.

Realdironni antiretrovirus dorilar bilan birgalikda qo'llash ta'siri noma'lum.

Interferonlar oksidlovchi metabolik jarayonlarga ta'sir qilishi mumkin. Oksidlanish bilan metabollanadigan dorilar (shu jumladan ksantin hosilalari - aminofilin va teofillin) bilan bir vaqtda qo'llanganda buni hisobga olish kerak. Realdironni teofillin bilan bir vaqtda qo'llashda qon zardobidagi kontsentratsiyasini kuzatish va kerak bo'lganda dozalash rejimini sozlash kerak.

Farmatsevtik o'zaro ta'sirlar

Realdironni boshqalar bilan aralashtirib yubormaslik kerak dorivor moddalar 0,9% natriy xlorid eritmasidan tashqari.

maxsus ko'rsatmalar

Gepatit B

Gepatit B bilan og'rigan bemorlarni davolashni boshlashdan oldin surunkali gepatitni tasdiqlash va zarar darajasini aniqlash uchun jigar biopsiyasini o'tkazish, shuningdek, ensefalopatiya, qizilo'ngach varikozlaridan, astsitlardan qon ketishi yoki tarixi yo'qligiga ishonch hosil qilish tavsiya etiladi. dekompensatsiyaning boshqa klinik belgilari.

Realdiron bilan terapiyani boshlashdan oldin siz quyidagi ko'rsatkichlarga e'tibor qaratishingiz kerak:

bilirubin normal

kattalardagi protrombin vaqti - 3 soniyadan ko'p bo'lmagan uzaytirish

bolalar - 2 soniyadan ko'p bo'lmagan uzaytirish

leykotsitlar ≥ 4000/mm3

kattalardagi trombotsitlar ≥ 100 000/mm3

bolalar ≥ 150 000/mm3

Gepatit C

Optimal davolash usuli ribavirin bilan kombinatsiyalangan terapiya hisoblanadi. Realdiron bilan monoterapiya asosan intolerans holatlarida yoki ribavirinni qo'llashga qarshi ko'rsatmalar mavjud bo'lganda amalga oshiriladi.

Surunkali gepatit C uchun Realdironni ribavirin bilan kombinatsiyalangan davolashning bir qismi sifatida ishlatganda, shuningdek, ko'rsatmalarni o'qing tibbiy foydalanish ribavirin.

Surunkali gepatit C bilan og'rigan barcha bemorlarga jigar biopsiyasini o'tkazish tavsiya etiladi, ammo ba'zi hollarda (masalan, virusli genotip 2 va 3 bo'lgan bemorlar) gistologik tasdiqlanmasdan davolash mumkin.

Kattalar. Realdiron bilan terapiyani boshlashdan oldin, siz quyidagi ko'rsatkichlarga e'tibor qaratgan holda, hozirgi yoki tarixda ensefalopatiya, qizilo'ngach varikozlaridan qon ketish, astsit yoki boshqa klinik dekompensatsiya belgilari yo'qligiga ishonch hosil qilishingiz kerak:

bilirubin ≤ 2 mg/dl

albumin barqaror va normal chegaralarda

protrombin vaqti kattalarda 3 soniyadan ko'p bo'lmagan, bolalarda 2 sekundga uzaytiriladi.

leykotsitlar ≥ 3000/mm3

trombotsitlar ≥ 70 000/mm3

qon zardobidagi kreatinin normal yoki me'yorga yaqin

Buyrak funktsiyasi buzilgan (kreatinin klirensi > 50 ml/min) bemorlarda Realdironni ribavirin bilan birgalikda qo‘llashda anemiya ehtimolini hisobga olgan holda umumiy qon ro‘yxatini, qon va siydikdagi kreatinin darajasini kuzatish kerak. 50 yoshdan oshgan bemorlarda ushbu monitoring haftada bir marta o'tkazilishi kerak.

Monoterapiya.

Realdiron bilan davolanish paytida qalqonsimon bezning disfunktsiyasi mumkin - hipotiroidizm yoki gipertiroidizm. Realdironni qo'llashni boshlashdan oldin, uning darajasini aniqlash kerak qalqonsimon bezni ogohlantiruvchi gormon(TSH) qon zardobida va qalqonsimon bezning ultratovush tekshiruvini o'tkazing. Agar biron bir anormallik aniqlansa, tegishli terapiya o'tkazilishi kerak.

OIV va gepatit C virusi bilan birgalikda infektsiya uchun foydalaning

Qo'shimcha ravishda OIV infektsiyasi bo'lgan va yuqori faol antiretrovirus terapiya (HAART) olayotgan bemorlarda laktik atsidoz xavfi oshishi mumkin. Realdiron va ribavirinni HAARTga qo'shganda ehtiyot bo'lish kerak.

Qo'shimcha ravishda OIV va gepatit C virusi bilan kasallangan, HAART olgan sirozli bemorlarda jigar dekompensatsiyasi va o'lim xavfi yuqori bo'lishi mumkin.

Alfa-interferonlarni alohida yoki ribavirin bilan birgalikda qo'shimcha ravishda qo'llash bemorlarning ushbu toifasida yuqorida qayd etilgan xavfni oshiradi.

Tish va periodontal kasalliklar

Laboratoriya tadqiqotlari

Realdiron bilan davolanishni boshlashdan oldin va vaqti-vaqti bilan terapiya paytida barcha bemorlar periferik qon rasmini (leykotsitlar formulasi va trombotsitlar sonini aniqlash bilan), qonning biokimyoviy ko'rsatkichlarini (elektrolitlar, jigar fermentlari, shu jumladan ALT, bilirubin darajasini aniqlash) nazorat qilinadi. umumiy oqsil va fraktsiyalar, shu jumladan albumin va kreatinin). Realdiron bilan davolashdan oldin va davolash paytida qon kontsentratsiyasi normal chegaralarda bo'lishi kerak.

Surunkali gepatit bilan og'rigan bemorlarni davolashda laboratoriya parametrlarini kuzatish uchun quyidagi sxema tavsiya etiladi: 1, 2, 4, 8, 12, 16 hafta va keyin butun davolash kursi davomida oyiga bir marta. Agar ALT terapiya boshlanishidan oldingi qiymatdan ikki yoki undan ko'p bo'lgan qiymatga oshsa, jigar etishmovchiligi belgilari paydo bo'lmasa, Realdiron bilan davolash davom ettirilishi mumkin. Bunday holda, har 2 haftada ALT, protrombin vaqti, gidroksidi fosfataza, albumin va bilirubinni aniqlash kerak.

Xatarli melanomasi bo'lgan bemorlarda jigar funktsiyasi va oq qon hujayralari soni (formula bilan) remissiya induksiyasi paytida har hafta va parvarishlash terapiyasi paytida har oyda kuzatilishi kerak.

Darhol yuqori sezuvchanlik

Vaqtinchalik teri toshmasi paydo bo'lishi davolanishni to'xtatishni talab qilmaydi.

Yordamchi kasalliklar

Realdiron og'ir bemorlarga ehtiyotkorlik bilan buyuriladi surunkali kasalliklar anamnez: surunkali obstruktiv o'pka kasalligi, ketoatsidozga moyil bo'lgan qandli diabet. Qon ketishining buzilishi bo'lgan bemorlarda preparatni qo'llashda ayniqsa ehtiyot bo'lish kerak

(tromboflebit, o'pka emboliyasi) yoki og'ir miyelosupressiya bilan.

Bir vaqtning o'zida kimyoterapiya

Realdironni boshqa kimyoterapevtik preparatlar (masalan, sitarabin, siklofosfamid, doksorubitsin, teniposid) bilan birgalikda qo'llash toksik ta'sirlarni (ularning zo'ravonligi va davomiyligi) rivojlanish xavfini oshiradi, bu birgalikda foydalanish tufayli hayot uchun xavfli yoki sabab bo'lishi mumkin. o'lim. Toksik ta'sirning kuchayishi xavfi tufayli Realdiron va kimyoterapevtik vositalarning dozalarini ehtiyotkorlik bilan tanlash kerak.

Avtoantikorlar va otoimmün kasalliklar

Realdiron bilan davolash otoantikorlarning paydo bo'lishiga va rivojlanishiga olib kelishi mumkin otoimmün kasalliklar. Irsiy moyilligi bo'lgan yoki otoimmün kasalliklarning alomatlarini rivojlanishiga shubha bo'lgan bemorlar erta tashxis qo'yish uchun doimiy ravishda kuzatilishi kerak. Surunkali gepatit C bilan og'rigan bemorlarda Vogt-Koyanagi-Harada sindromi shubha qilingan bo'lsa, antiviral terapiyani to'xtatish va kortikosteroid terapiyasi zarurligini muhokama qilish kerak.

Isitma

Isitma grippga o'xshash sindromning namoyon bo'lishi mumkin, bu ko'pincha interferon terapiyasi paytida yuzaga keladi, ammo uning paydo bo'lishining boshqa sabablarini istisno qilish kerak.

Realdiron bilan davolash paytida yuzaga kelishi mumkin bo'lgan grippga o'xshash sindrom paytida tana haroratini pasaytirish va bosh og'rig'ini kamaytirish uchun antipiretik terapiyadan foydalanish tavsiya etiladi.

Jigar disfunktsiyasi uchun foydalaning

Toksik gepatit tufayli o'lim kamdan-kam hollarda kuzatilgan. Agar Realdironni qo'llash paytida jigar disfunktsiyasi belgilari paydo bo'lsa, bemorni diqqat bilan kuzatib borish kerak, agar alomatlar kuchaysa, preparatni to'xtatish kerak.

Surunkali gepatit B bilan og'rigan, jigarning sintetik funktsiyasi pasaygan (masalan, albuminning kamayishi yoki protrombin vaqtining uzayishi), ammo davolanish uchun yaroqlilik mezonlariga javob beradigan bemorlarda aminotransferaza darajasi ko'tarilsa, klinik dekompensatsiyalanish xavfi yuqori bo'lishi mumkin. Bunday bemorlarni davolashdan oldin, Realdironni qo'llashning foydalari mumkin bo'lgan xavflarni aniqlash kerak.

Allograftni rad etish

Dastlabki dalillar interferon alfa terapiyasi buyrak transplantatsiyasini rad etish xavfini oshirishi mumkinligini ko'rsatadi. Alfa interferon terapiyasi bilan sababiy bog'liqlik aniqlanmagan bo'lsa-da, jigar transplantatsiyasini rad etish ham qayd etilgan.

Hidratsiya

Realdiron bilan davolashda tananing etarli darajada hidratsiyasini ta'minlash kerak, chunki ba'zi hollarda suvsizlanish tufayli arterial gipotenziya kuzatilgan (bu qo'shimcha suyuqlik kiritishni talab qilishi mumkin).

Yurak-qon tomir tizimi

Anamnezda yurak-qon tomir kasalliklari (surunkali yurak etishmovchiligi, miokard infarkti va/yoki aritmiyalar) bo'lgan bemorlar Realdironni buyurishda ehtiyotkorlik bilan tibbiy nazoratni talab qiladi. Kardiyomiyopatiyaning ayrim holatlari qayd etilgan, ba'zida Realdiron bilan davolash to'xtatilgandan keyin qaytadigan rivojlanish kuzatiladi. Yurak kasalligi tarixi bo'lgan bemorlarga tavsiya etiladi

Realdiron bilan davolashdan oldin va davolash paytida EKG. Aritmiyalar, asosan supraventrikulyar, yurak-qon tomir kasalliklari tarixi bo'lgan yoki kardiotoksik dorilar bilan oldindan davolangan bemorlarda kamdan-kam hollarda va asosan sodir bo'lgan. Bunday ritm buzilishlari odatda standart terapiyaga javob beradi, lekin dozani o'zgartirish yoki Realdironni to'xtatishni talab qilishi mumkin.

Nafas olish tizimi

Har qanday bemorda isitma, yo'tal, nafas qisilishi yoki boshqa nafas olish belgilari bo'lishi kerak Rentgen tekshiruvi ko'krak qafasi. Agar infiltratlar aniqlansa yoki o'pka funktsiyasi buzilgan bo'lsa, bemorni diqqat bilan kuzatib borish va kerak bo'lganda Realdiron bilan davolashni to'xtatish kerak. Bunday o'zgarishlar alfa interferon terapiyasini olgan surunkali gepatit C bilan og'rigan bemorlarda tez-tez sodir bo'ldi, ammo ular alfa interferon terapiyasini olgan saraton bilan kasallangan bemorlarda rivojlanishi haqida xabarlar mavjud. Interferon alfa terapiyasini o'z vaqtida bekor qilish va kortikosteroidlarni qo'llash salbiy o'pka reaktsiyalarining yo'qolishiga olib keladi. Bundan tashqari, ko'proq tez-tez sodir bo'lishi Shosaikoto (Xitoy o'simlik dorisi) alfa interferon bilan bir vaqtda qo'llanganda bu alomatlar.

Ruhiy buzilishlar va markaziy asab tizimi(CNS). Ba'zi bemorlarda Realdiron bilan davolanish paytida va hatto davolanishdan keyin, asosan, 6 oy ichida markaziy asab tizimining jiddiy buzilishlari, xususan depressiya, o'z joniga qasd qilish fikrlari va o'z joniga qasd qilishga urinishlar kuzatilgan. Realdironni ribavirin bilan birgalikda qabul qilgan bolalar va o'smirlar orasida o'z joniga qasd qilish fikrlari va o'z joniga qasd qilishga urinishlar kattalardagi bemorlarga qaraganda tez-tez kuzatilgan (2,4% ga nisbatan 1%). Katta yoshli bemorlarda, bolalar va o'smirlarda ruhiy tushkunlik, hissiy labillik va uyquchanlik kabi boshqa ruhiy kasalliklar ham kuzatilgan. Agar bunday alomatlar yuzaga kelsa, bunday noxush hodisalarning mumkin bo'lgan jiddiyligini hisobga olish kerak. Agar semptomlar davom etsa yoki kuchaysa yoki o'z joniga qasd qilish fikrlari yoki tajovuzkor xatti-harakatlar aniqlansa, davolanishni to'xtatish va bemorga tegishli psixiatrik yordam ko'rsatish tavsiya etiladi.

Mavjud yoki ruhiy kasalliklar tarixi bo'lgan bemorlar. Mavjud yoki psixiatrik kasalliklari bo'lgan bolalar va o'smirlarda interferon alfa-2b dan foydalanish kontrendikedir ("Qo'llash mumkin bo'lmagan holatlar" bo'limiga qarang).

Agar Realdiron terapiyasi mavjud bo'lgan yoki tarixda psixiatrik kasalliklar, shuningdek alkogolli va giyohvandlik, uni faqat tegishli individual tashxisdan so'ng va ruhiy holatning doimiy monitoringi ostida boshlash kerak.

Interferon bilan davolash simptomlarni kuchaytirishi mumkin ruhiy kasalliklar gepatit C virusi bilan kasallangan, ruhiy kasalliklar mavjud yoki tarixi bo'lgan, shuningdek alkogol va giyohvandlik bilan kasallangan bemorlarda. Agar bunday kasalliklarga chalingan bemorlar uchun interferonni davolash kerak bo'lsa, unda erishish uchun muvaffaqiyatli davolash Interferon psixiatrik simptomlarni to'g'ri davolash uchun ishlatiladi. Bundan tashqari, bemorlarning xatti-harakatlari va ruhiy salomatlik belgilarining chastotasini individual tekshirish majburiydir. Bunday bemorlarga psixiatrik alomatlar paydo bo'lishidan yoki rivojlanishidan oldin davolash tavsiya etiladi.

Oftalmologik kasalliklar

Davolashni boshlashdan oldin barcha bemorlar oftalmologik tekshiruvdan o'tishlari kerak. Agar yangi yoki kuchaygan oftalmologik kasalliklar paydo bo'lsa, Realdiron bilan davolash to'xtatilishi kerak.

Qalqonsimon bezdagi o'zgarishlar

Qalqonsimon bezning disfunktsiyasi bo'lsa, dori terapiyasi bilan TSH darajasini normal darajada ushlab turish mumkin bo'lsa, Realdiron bilan davolashni boshlash yoki davom ettirish mumkin. Realdironni qo'llashni to'xtatish davolash paytida buzilgan qalqonsimon funktsiyani normallashishiga olib kelmaydi.

Metabolik kasalliklar

Gipertrigliseridemiya rivojlanishi yoki og'ir shakllarga o'tishi bilan bog'liq holda, qon lipidlari darajasini kuzatish tavsiya etiladi.

Boshqa

Interferon alfa bilan davolash paytida psoriaz va sarkoidozning kuchayishining tavsiflangan holatlarini hisobga olgan holda, Realdironni bunday bemorlarga kutilgan foyda mumkin bo'lgan xavfdan yuqori bo'lgan taqdirdagina qo'llash kerak.

Pediatriyada foydalaning

Bolalarda kombinatsiyalangan terapiyani boshlash to'g'risida qaror kasallikning rivojlanishining ikkala belgisini (faoliyat) hisobga olgan holda individual ravishda qabul qilinishi kerak. yallig'lanish jarayoni jigar va fibrozda), shuningdek virusologik javob, HCV genotipi va virus yukining rivojlanishi uchun prognostik omillar. Shuni yodda tutish kerakki, kombinatsiyalangan terapiya bir yil davomida davolangan ba'zi bolalarda o'sishning kechikishi va vazn ortishiga olib kelishi mumkin, ularning qaytishi to'liq aniq emas. Shu munosabat bilan terapiya paytida va davolanish tugaganidan keyin 6 oy davomida bolalarning jismoniy rivojlanishini kuzatish tavsiya etiladi.

O'sishning kechikish xavfini kamaytirish uchun, agar iloji bo'lsa, balog'at yoshidagi tez o'sishdan keyin bolani davolash kerak. Taʼsir maʼlumotlari mavjud emas uzoq muddatli davolash balog'atga etish uchun.

Reproduktiv funktsiyaga ta'siri

Realdironni qabul qilgan ayollarda estradiol va progesteronning sarum kontsentratsiyasining pasayishi qayd etilgan. Shuning uchun Realdiron reproduktiv yoshdagi ayollarda foydalanish mumkin samarali vositalar kontratseptsiya. Realdiron reproduktiv yoshdagi erkaklarda ham ehtiyotkorlik bilan qo'llaniladi.

Homiladorlik va laktatsiya

Homiladorlik paytida Realdironni qo'llash bo'yicha ma'lumotlar etarli emas. Agar ona uchun potentsial foyda homila uchun potentsial xavfdan yuqori bo'lsa, Realdironni homiladorlik paytida qo'llash kerak.

Mumkin bo'lgan salbiy ta'sirlar tufayli chaqaloq Emizishni to'xtatish yoki preparatni qo'llashni to'xtatish to'g'risida qaror ona uchun ushbu terapiyaga bo'lgan ehtiyoj darajasini hisobga olgan holda qabul qilinishi kerak.

Preparatning transport vositalarini boshqarish qobiliyatiga ta'sirining xususiyatlari transport vositasi yoki potentsial xavfli mexanizmlar.

Bemorni terapiya paytida zaiflik, uyquchanlik va ongni buzilishining mumkin bo'lgan rivojlanishi haqida ogohlantirish va mashina haydash yoki murakkab jihozlardan foydalanishni tavsiya etmaslik kerak.

Dozani oshirib yuborish

Hozirgi vaqtda dori dozasini oshirib yuborish holatlari qayd etilmagan.

Dozani oshirib yuborish holatlarida simptomatik davolash ko'rsatiladi.

Ushbu bo'lim taqdim etadi alfa 2b va alfa 2a interferonlarini qo'llash bo'yicha ko'rsatmalar birinchi avlod, ular chiziqli, oddiy yoki qisqa muddatli deb ham ataladi. Ushbu preparatlarning yagona afzalligi ularning nisbatan past narxidir.

1943 yilda V. va J. Xeyle interferensiya deb ataladigan hodisani kashf etdilar. Interferonning dastlabki g'oyasi bu edi: viruslarning ko'payishiga to'sqinlik qiluvchi omil. 1957 yilda ingliz olimi Alik Isaacs va shveytsariyalik tadqiqotchi Jan Lindenman bu omilni ajratib, aniq tasvirlab berdilar va uni interferon deb atadilar.

Interferon (IFN) inson tanasida ishlab chiqariladigan oqsil molekulasidir. Inson genetik apparati uning sintezi (interferon geni) uchun "retsept" ni kodlaydi. Interferon ishda muhim rol o'ynaydigan sitokinlar, signalizatsiya molekulalaridan biridir immunitet tizimi.

IFN kashf etilganidan beri yarim asr davomida ushbu oqsilning o'nlab xususiyatlari o'rganildi. Tibbiyot nuqtai nazaridan, asosiylari antiviral va antitumor funktsiyalari.

Inson tanasi 20 ga yaqin turdagi interferonlarni ishlab chiqaradi - butun oila. IFN ikki turga bo'linadi: I va II.

I turdagi IFNlar - alfa, beta, omega, teta - viruslar va boshqa ba'zi agentlarning ta'siriga javoban tananing aksariyat hujayralari tomonidan ishlab chiqariladi va chiqariladi. II toifa IFNga chet el agentlarining ta'siriga javoban immun tizimining hujayralari tomonidan ishlab chiqariladigan interferon gamma kiradi.

Dastlab, interferon preparatlari faqat donor qon hujayralaridan olingan; Ular shunday deb nomlangan: leykotsitlar interferonlari. 1980 yilda rekombinant yoki genetik jihatdan yaratilgan interferonlar davri boshlandi. Rekombinant dorilarni ishlab chiqarish olishdan ko'ra sezilarli darajada arzonlashdi shunga o'xshash dorilar inson donor qoni yoki boshqa biologik xom ashyolardan; ularning ishlab chiqarilishi donor qonidan foydalanmaydi, bu infektsiya manbai bo'lib xizmat qilishi mumkin. Rekombinant dorilar tarkibida begona aralashmalar mavjud emas va shuning uchun kamroq yon ta'sirga ega. Ularning shifobaxsh potentsiali shunga o'xshash tabiiy dorilarga qaraganda yuqori.

Davolash uchun virusli kasalliklar, xususan gepatit C, asosan interferon alfa (IFN-a) ishlatiladi. "Oddiy" ("qisqa muddatli") interferonlar alfa 2b va alfa 2a va pegilatlangan (peginterferon alfa-2a va peginterferon alfa-2b) mavjud. "Oddiy" interferonlar Evropa Ittifoqi va AQShda deyarli qo'llanilmaydi, ammo bizning mamlakatimizda nisbatan arzonligi tufayli ular juda tez-tez ishlatiladi. Gepatit C ni davolashda "qisqa" IFN-a ning ikkala shakli qo'llaniladi: interferon alfa-2a va interferon alfa-2b (bir aminokislota bilan farqlanadi). Oddiy interferonlar bilan in'ektsiya odatda har kuni amalga oshiriladi (peginterferonlar bilan - haftada bir marta). Qisqa muddatli IFN bilan davolashning samaradorligi peginterferonlarga qaraganda pastroq. Ba'zi mutaxassislar har kuni "oddiy" IFN in'ektsiyasini tavsiya qiladilar, chunki AVT samaradorligi biroz yuqoriroq.

"Qisqa" IFN diapazoni juda keng. Ular turli ishlab chiqaruvchilar tomonidan turli nomlar ostida ishlab chiqariladi: Roferon-A, Intron A, Laferon, Reaferon-EC, Realdiron, Eberon, Interal, Altevir, Alfarona va boshqalar.
Eng ko'p o'rganilgan (va shuning uchun qimmat) Roferon-A va Intron-A. Ushbu IFNlarni ribavirin bilan birgalikda davolash samaradorligi, virusning genotipiga va boshqa omillarga qarab, 30% dan 60% gacha. Oddiy interferon ishlab chiqaruvchilarning asosiy brendlari ro'yxati va ularning tavsiflari jadvalda keltirilgan.

Barcha interferonlar muzlatgichda (+2 dan +8 darajagacha) saqlanishi kerak. Ular qizdirilmasligi yoki muzlatilmasligi kerak. Preparatni silkitmang yoki to'g'ridan-to'g'ri ta'sir qilmang quyosh nurlari. Dori vositalarini maxsus idishlarda tashish kerak.

Ixtiro genetik muhandislik, biotexnologiya, tibbiyot, farmakologiyaga tegishli. Yangi rekombinant ko'p nusxali plazmid DNK pSX50, inson leykotsitlari alfa-2b interferonining sintezini kodlovchi, uning ifodasi laktoza va triptofan promotorlari va transkripsiya terminatori nazorati ostida. Qabul qiluvchi E. coli BL21 shtammi hujayralarining pSX50 rekombinant plazmid DNKsi bilan transformatsiyasi natijasida E. coli SX50 shtammi - mahsuldorligi 0,9-1,0 g gacha bo'lgan rekombinant leykotsit inson alfa-2b interferon ishlab chiqaruvchisi olindi. 1 litr madaniy muhitdan alfa-2b interferon. Rekombinant alfa-2b interferonini ishlab chiqarish usuli E. coli SX50 ning yaratilgan rekombinant shtammidan foydalanishga asoslangan va uni biosintez jarayonida ozuqa substratlarini doimiy ravishda qo'shib, kamaytirilgan triptofanli ozuqaviy muhitda chuqur etishtirishni o'z ichiga oladi. davomida mikroorganizm hujayralarini mexanik ravishda yo'q qilish yuqori qon bosimi, agregatlangan oqsilni guanidin gidroxloridning konsentrlangan eritmasida eritib yuborish, so‘ngra xaotrop moddalar ishtirokida fiziologik bufer eritmalarda interferonni renaturatsiya qilish va uni Chelating Sepharose Fast Flow tipidagi Cuimmobilizatsiyalangan qatronlar bilan interferonni uch bosqichli xromatografik tozalash yordamida tozalash. +2 ionlari, SM tipidagi ion almashinadigan qatronlarda ion almashinish xromatografiyasi va Superdex 75 tipidagi smolalarda gel filtrlash xromatografiyasi bu usul elektroforez bo'yicha qaytaruvchi va bo'lmagan holda 99% dan ortiq tozalikdagi interferon moddasini olish imkonini beradi. RF HPLC bo'yicha jellarni kumush va 98% dan ortiq bo'yashda va 1 litr madaniy muhit uchun kamida 400-800 mg miqdorida pirogenlarni (LAL testi) o'z ichiga olmaydi. 3 n. va 3 ish haqi lavozimi, 6 kasal.

RF patenti uchun chizmalar 2242516

Ixtiro genetik muhandislik bilan bog'liq dorilar biotexnologik, ya'ni rekombinantni sanoat ishlab chiqarish usullarida olingan leykotsitlar interferon tibbiy maqsadlar uchun inson alfa-2b (keyingi o'rinlarda interferon deb yuritiladi), shuningdek, Escherichia coli (E.coli) ning rekombinant ishlab chiqaruvchi shtammlari va interferon sintezini kodlovchi plazmid DNKsi.

Interferonlar - molekulyar og'irligi 15 000 dan 21 000 daltongacha bo'lgan oqsil molekulalari virusli infektsiya yoki boshqa patogenlarga javoban hujayralar tomonidan ishlab chiqariladi va chiqariladi. Interferonlarning uchta asosiy guruhi mavjud: alfa, beta va gamma. Bu guruhlarning o'zlari bir hil emas va interferonning bir nechta turli molekulyar turlarini o'z ichiga olishi mumkin. Shunday qilib, interferon alfa ning 14 dan ortiq genetik navlari aniqlangan, ular qiziqish uyg'otadi va tibbiyotda antiviral, antiproliferativ va immunomodulyatorlar sifatida keng qo'llaniladi.

Viruslar va boshqa induktorlar (SU1713591, RU 2066188, RU 2080873) tomonidan qo'zg'atilgan inson donor qoni leykotsitlaridan inson leykotsitlari interferonini olishning ma'lum usullari mavjud.

Interferonlarni ishlab chiqarishning ushbu usullarining asosiy kamchiliklari - bu oxirgi mahsulotning inson viruslari, masalan, gepatit B va C virusi, immunitet tanqisligi virusi va boshqalar bilan ifloslanish ehtimoli.

Hozirgi vaqtda mikrobiologik sintez orqali interferon ishlab chiqarish usuli yanada istiqbolli deb tan olingan, bu esa nisbatan arzon boshlang'ich materiallardan sezilarli darajada yuqori rentabellikga ega maqsadli mahsulotni olish imkonini beradi. Bu erda qo'llaniladigan yondashuvlar bakterial ekspressiya uchun optimal bo'lgan strukturaviy gen variantlarini, shuningdek, uning ifodasini boshqaradigan tartibga soluvchi elementlarni yaratishga imkon beradi.

Manba mikroorganizmlari sifatida Pichia pastoris, Pseudomonas putida va Escherichia coli ning turli shtamm dizaynlari qo'llaniladi.

P. pastorisdan interferon ishlab chiqaruvchisi sifatida foydalanishning kamchiliklari (J.N. Garsiya, J.A. Aguiar va boshqalar. // Pichia pastorisda inson IFN-2b ning yuqori darajadagi ifodasi.//Biotecnologia Aplicada, 12 (3), 152-155, 1995 yil. ), Ushbu turdagi xamirturushning fermentatsiya sharoitlari juda qiyin, biosintez jarayonida induktorning, xususan, metanolning konsentratsiyasini qat'iy saqlash zarurati. Ps dan foydalanishning kamchiliklari. putida (SU1364343, SU1640996, SU1591484, RU1616143, RU2142508) past ifoda darajasida fermentatsiya jarayonining murakkabligi (1 litr madaniyat muhitiga 10 mg interferon). Escherichia coli shtammlarini qo'llash yanada samaralidir (Semin. Oncol., 1997, Iun; 24 (3 Suppl. 9): S9-41-S9-51).

Ma'lum katta miqdorda plazmidlar va ular asosida interferonni ifodalovchi E. coli shtammlari: E. coli shtammlari ATCC 31633 va 31644 Z-pBR322 (Psti) HclF-11-206 yoki Z-pBR 322(Pstl)/HclN SN 35-AHL6 (Psti) plazmidlari bilan. SU 1764515), E. coli shtammi pINF-AP2 (SU 1312961), E. coli shtammi pINF-F-Pa (AU 1312962), E. Coli shtammi SG 20050 plazmid p280/21FN (Kravchenko al. Chemis, Kravchenko va boshqalar. V. V.). 1987, v. 13, № 9, 1186-1193-bet), plazmid pINF14 (SU 1703691) bilan E. Coli SG 20050 shtammi, pINF16 asosidagi E. coli SG 20050 shtammi (RU 204ad). Ushbu shtammlardan foydalanish bo'yicha ularning beqarorligi, shuningdek, interferonning etarli darajada ifodalanmaganligi.

Amaldagi shtammlarning xususiyatlari bilan bir qatorda, jarayonning samaradorligi ko'p jihatdan interferonni izolyatsiya qilish va tozalash uchun ishlatiladigan texnologiyaga bog'liq.

Interferon ishlab chiqarishning ma'lum usuli mavjud, bu Ps hujayralarini etishtirishni o'z ichiga oladi. putida, biomassani yo'q qilish, polietilenimin bilan ishlov berish, ammoniy sulfat bilan fraksiyalash, fenilsiloxrom C-80 da hidrofobik xromatografiya, lizatning pH fraksiyasi, uning konsentratsiyasi va diafiltratsiyasi, tsellyuloza DE-52 ning ion almashinuvi xromatografiyasi, pH gradientida elyusiya, tsellyuloza SM -52 da hosil bo'lgan elyuentning almashinuv kromatografiyasi, filtr kassetasidan o'tish orqali konsentratsiya va Sephadex G-100 (SU 1640996) da gel filtrlash. Ushbu usulning nochorligi, murakkab ko'p bosqichli fermentatsiyaga qo'shimcha ravishda, yakuniy mahsulotni olishda ko'p bosqichli jarayondir.

Interferon ishlab chiqarishning ma'lum usuli ham mavjud bo'lib, u E. coli SG 20050/pIF16 shtammini LB bulonida termostatli shakerda kolbalarda etishtirish, biomassani santrifüj qilish, bufer eritmasi bilan yuvish va hujayralarni yo'q qilish uchun ultratovush bilan ishlov berishni o'z ichiga oladi. Olingan lizat santrifüjlanadi, buferdagi 3M karbamid eritmasi bilan yuviladi, buferdagi guanidin xlorid eritmasida eritiladi, ultratovush bilan ishlov beriladi, sentrifugalanadi, oksidlovchi sulfitoliz, 8 M karbamidga qarshi dializ, renaturatsiya va yakuniy ikki bosqichli xromatografiya. 52 tsellyuloza va Sephadex G-50 (RU 2054041). Ushbu usulning kamchiliklari izolyatsiya va tozalash jarayonining asosiy bosqichlarining nisbatan past mahsuldorligidir. Bu, ayniqsa, mahsulotni ultratovush bilan davolash, dializ va oksidlovchi sulfitolizga taalluqlidir, bu interferon hosildorligining beqarorligiga olib keladi, shuningdek, interferonni sanoat ishlab chiqarish uchun ushbu usuldan foydalanishning mumkin emasligi.

Eng yaqin analog (prototip) sifatida inson leykotsitlari interferonini ishlab chiqarish usuli ko'rsatilishi mumkin, bu E. coli rekombinant shtammini etishtirish, hosil bo'lgan biomassani -70 ° C dan yuqori bo'lmagan haroratda muzlatish, eritish, mikroorganizm hujayralarini yo'q qilishdan iborat. lizozim bilan, DNK va RNKni DNK lizatini kiritish orqali olib tashlash va interferonning ajratilgan erimaydigan shaklini yuvish vositalari bilan bufer eritmasi bilan yuvish, interferon cho'kmasini guanidin gidroxlorid eritmasida eritish, renaturatsiya va bir bosqichda tozalash. almashinish xromatografiyasi. Produser sifatida uchta promotorni o'z ichiga olgan pSS5 rekombinant plazmididan olingan E. coli SS5 shtammi ishlatiladi: P lac, P t7 va P trp va kiritilgan nukleotid o'rnini bosuvchi alfa-interferon geni.

Ushbu plazmidni o'z ichiga olgan E. coli SS5 shtammi tomonidan interferonning ekspressiyasi uchta promotor tomonidan boshqariladi: P lac, P t7 va P trp. Interferonni ifodalash darajasi 1 litr hujayra suspenziyasi uchun taxminan 800 mg (RU 2165455).

Ushbu usulning kamchiliklari mikroorganizmning hujayralarni, DNK va RNKlarini fermentativ yo'q qilish va interferonni bir bosqichli xromatografik tozalashdan foydalanishning past texnologik samaradorligidir. Bu interferonni chiqarish jarayonida beqarorlikni keltirib chiqaradi, uning sifatini pasayishiga olib keladi va interferonni sanoat ishlab chiqarish uchun yuqoridagi sxemadan foydalanish imkoniyatini cheklaydi. Ushbu plazmid va unga asoslangan shtammning kamchiliklari plazmidda E. coli shtammi BL21 (DE3)dagi T7 fagining kuchli tartibga solinmagan promouteridan foydalanish bo'lib, unda T7 RNK polimeraza geni promotor ostida joylashgan. lak operon va har doim "oqadigan". Binobarin, hujayrada interferon sintezi uzluksiz sodir bo'ladi, bu plazmidning dissotsiatsiyasiga va shtamm hujayralarining hayotiyligining pasayishiga olib keladi va natijada interferon unumining pasayishiga olib keladi.

Ushbu ixtironing maqsadi interferon biosintezining yuqori darajasiga ega bo'lgan yangi rekombinant plazmid DNK yordamida E. coli ning rekombinant sanoat ishlab chiqaruvchi shtammini yaratish va tibbiy maqsadlarda foydalanish uchun interferon moddasini ishlab chiqarishning samarali sanoat texnologiyasini ishlab chiqishdan iborat. interferon alfa-2b moddasi uchun "Yevropa farmakopeyasiga" sifat jihatidan.

Bu muammo VKPM B-8550 raqamli Davlat genetika instituti Federal davlat unitar korxonasining Butunrossiya sanoat shtammlari kollektsiyasida saqlanadigan rekombinant plazmid DNK pSX50 va Escherichia coli SX50 shtammini yaratish orqali hal qilindi.

shuningdek, E. coli SX50 ning rekombinant shtammidan foydalanishga asoslangan va uni triptofan miqdori kamaygan ozuqa muhitida chuqur o'stirishni o'z ichiga olgan rekombinant alfa-2b interferonini ishlab chiqarish usuli. biosintez, mikroorganizm hujayralarini yuqori bosimda mexanik ravishda yo'q qilish, agregatlangan oqsilni guanidin gidroxloridning konsentrlangan eritmasida eritish, so'ngra xaotrop moddalar ishtirokida fiziologik bufer eritmalarida interferonni renaturatsiya qilish va bunday qatronlarda interferonni uch bosqichli xromatografik tozalash. Cu +2 ionlari bilan immobilizatsiya qilingan chelating Sepharose Fast Flow, CM Sepharose Fast Flow kabi ion almashinadigan qatronlarda ion almashinadigan xromatografiya va Superdex 75 kabi qatronlarda gel filtrlash xromatografiyasi.

Ixtiroga ko'ra, laktoza va triptofan promotorlari va transkripsiya terminatori nazorati ostida bo'lgan inson leykotsitlari alfa-2b interferonining sintezini kodlaydigan yangi rekombinant multikopiya plazmid DNKsi pSX50 taklif etiladi. Plazmid pSX50 3218 ta asosiy juftlikka (bp) ega va quyidagi fragmentlarning mavjudligi bilan tavsiflanadi:

Nukleotid 1 dan nukleotid (nt) 176 gacha bo'lgan ketma-ketlik triptofan promouterini (P trp) o'z ichiga olgan 176 bp DNK fragmentini o'z ichiga oladi;

177 nt dan ketma-ketlik. 194 n gacha. tarjimaning boshlanishi uchun mas'ul Shine Delgarno ketma-ketligini o'z ichiga olgan 18 bp sintetik DNK fragmentini o'z ichiga oladi;

195 nt dan ketma-ketlik. 695 n gacha. 501 bp o'lchamdagi DNK fragmentini o'z ichiga oladi, interferon genining quyidagi nukleotidlar o'rnini bosuvchi ketma-ketligini o'z ichiga oladi: 37-pozitsiyada A ni C ga almashtirish, 39-pozitsiyada G ni T ga, 40-pozitsiyada A ni almashtirish C, 42-pozitsiyada, G ni T ga almashtirish, 67-pozitsiyada, A ni C bilan almashtirish, 69-pozitsiyada, G ni T bilan almashtirish, 70-pozitsiyada, A ni C bilan almashtirish, 72-pozitsiyada, A ni C bilan almashtirish. T, 96-pozitsiyada, G ni A bilan almashtirish, 100-pozitsiyada, A ni C bilan almashtirish, 102-da, A ni T bilan almashtirish, 114-pozitsiyada, A ni C bilan almashtirish, 120-pozitsiyada, C ni almashtirish G bilan, 126-pozitsiyada, G-ni A bilan almashtirish, 129-pozitsiyada, G-ni A bilan almashtirish, 330-da, C ni G bilan, 339-da, G o‘rnini A bilan, 342-da, Gni A bilan almashtirishda, 487-pozitsiyada A o‘rniga C, 489-pozitsiyada A o‘rniga T, 495-pozitsiyada G o‘rniga A;

696 nt dan ketma-ketlik. 713 n bo'yicha. sintetik polilinkerni o'z ichiga olgan 18 bp sintetik DNK fragmentini o'z ichiga oladi;

714 nt dan ketma-ketlik. 1138 n gacha. 4129 nt bilan pKK223-3 plazmidining DNK fragmentini o'z ichiga oladi. 4553 n gacha. rrnBT 1 T 2 qat'iy transkripsiya terminatorining ketma-ketligini o'z ichiga olgan o'lchami 425 bp;

1139-yildan boshlab ketma-ketlik b. 1229 n gacha. 2487 nt bo'lgan pUC19 plazmidining DNK fragmentini o'z ichiga oladi. 2577 n gacha. 91 bp o'lchamda, b-laktomaza genining promouterini o'z ichiga oladi (ampitsillinga qarshilik geni - Amp R);

1230 b dan ketma-ketlik. 2045 n gacha. 720 nt bilan pUC4K plazmidining DNK fragmentini o'z ichiga oladi. 1535 yilgacha 816 bp hajmda, kan genining strukturaviy hududini o'z ichiga oladi;

2046 yildan boshlab ketma-ketlik b. 3218 n gacha. 1625 dan 453 nt gacha bo'lgan pUC19 plazmidining DNK fragmentini o'z ichiga oladi. 1173 bp o'lchamda, plazmid replikatsiyasi (ori) va lak promotori (P lak) uchun mas'ul bo'lgan ketma-ketlikni o'z ichiga oladi.

1-5-rasmlarda pSX50 plazmidining qurilish sxemalari va fizik xaritasi ko'rsatilgan.

6-rasmda pSX50 plazmidi uchun aniqlangan to'liq nukleotidlar ketma-ketligi ko'rsatilgan.

Escherichia coli SX50 shtammi an'anaviy genetik muhandislik texnologiyasidan foydalangan holda Escherichia coli BL21 hujayralarini pSX50 plazmidi bilan o'zgartirish orqali olingan. E.Coli SX50 shtammi quyidagi xususiyatlar bilan tavsiflanadi.

Madaniy va morfologik xususiyatlar

Hujayralar mayda, toʻgʻri, qalinlashgan tayoqchali, gramm manfiy, sporasiz. Hujayralar oddiy oziq muhitida yaxshi rivojlanadi. Difko agarda o'sganda yumaloq, silliq, qavariq, loyqa, yaltiroq, qirrasi silliq bo'lgan kulrang koloniyalar hosil bo'ladi. Suyuq muhitda (glyukoza bilan minimal muhitda yoki LB bulonda) o'stirilganda, zich, bir xil loyqalik hosil bo'ladi.

Jismoniy va biologik xususiyatlar

Aerob. O'sish uchun harorat oralig'i 4-42 ° S, optimal pH 6,5-7,5.

Azot manbai sifatida ammiak va nitrat shaklidagi mineral tuzlar, shuningdek, organik birikmalar aminokislotalar, pepton, tripton, xamirturush ekstrakti va boshqalar shaklida.

Uglerod manbai sifatida aminokislotalar, glitserin va uglevodlar ishlatiladi. Antibiotiklarga qarshilik. Hujayralar kanamitsinga qarshilik ko'rsatadi (100 mkg / ml gacha).

Escherichia coli shtammi 8X50 interferon ishlab chiqaruvchisi hisoblanadi.

Shtammni saqlash muhitining usuli, shartlari va tarkibi

L-arapeda kanamitsin qo'shilgan holda 20 mkg/ml konsentratsiyali moy ostida, L-bulonda 15% glitserin va tegishli antibiotiklar ampulalarda minus 70 ° C haroratda, liyofillangan holatda ampulalarda +4 ° C harorat.

Escherichia coli SX50 shtammi Bergey qo'llanmasiga (1974) ko'ra ichak tayoqchasi turlarining shtammi sifatida aniqlangan.

Alfa-2b interferonni sanoat ishlab chiqarish usuli

Taklif etilayotgan usulning o'ziga xos xususiyati interferonni fermentatsiya jarayonida to'plangan erimaydigan shakldan ajratish imkonini beruvchi texnologiyani ishlab chiqishdir, bu izolyatsiya jarayonining texnologik sxemasini sezilarli darajada soddalashtirish va maqsadli mahsulotning hosildorligini oshirish imkonini beradi.

Usul Escherichia coli SH50 shtammini ozuqaviy muhitda o'stirishdan iborat bo'lib, doimiy ravishda ozuqa substratlari, yaxshisi glyukoza va xamirturush ekstrakti, biosintez jarayonida, yaxshisi kamaytirilgan triptofan bilan, yuqori bosimda mikroorganizm hujayralarini mexanik ravishda yo'q qilish. 700-900 bar, interferonning bufer guanidin gidroxlorid eritmasida erishi, xaotrop moddalar ishtirokida interferonning fiziologik bufer eritmalarida renaturatsiyasi, so'ngra Chelating Sepharose Fast Flow Cuimmobilizatsiyalangan turdagi qatronlar bilan interferonni uch bosqichli xromatografik tozalash2 + ionlar, CM Sepharose Fast Flow tipidagi ion almashinadigan qatronlarda ion almashinish xromatografiyasi va Superdex 75 kabi qatronlarda jel filtrlash xromatografiyasi.

Interferon ishlab chiqarishning alohida bosqichlarini o'tkazish uchun maqbul shartlar quyidagilardir:

Fermentatsiya butun jarayon davomida substratlarning uzluksiz qo'shilishi bilan amalga oshiriladi, bu esa interferon ifodasining yuqori darajasini keltirib chiqaradi;

Hujayralarni yo'q qilish Gaulin tipidagi parchalanuvchida 900 bar bosim ostida amalga oshiriladi;

Erituvchini olib tashlash uyali komponentlar(DNK, RNK, oqsillar, lipopolisaxaridlar va boshqalar) interferonning erimaydigan shaklini yuvish vositalarini (Triton XI00, karbamid va boshqalar) o'z ichiga olgan bufer eritmalar bilan yuvish natijasida hosil bo'ladi;

Hosil bo'lgan interferonli cho'kma 6 M guanidin gidroxloridning bufer eritmasida eritiladi;

Interferon renaturatsiyasi xaotropik moddalarni o'z ichiga olgan fiziologik tampon eritmasida amalga oshiriladi;

Interferonni uch bosqichli xromatografik tozalash Cu+2 ionlari bilan immobilizatsiya qilingan Chelating Sepharose Fast Flow da, kation almashinadigan SM Sepharose Fast Flow qatronida va Superdex 75 tipidagi smolada gel filtrlash xromatografiyasida amalga oshiriladi;

Har bir xromatografik tozalashdan so'ng, 0,22 mikron gözenek o'lchamlari bo'lgan pirogensiz filtrlar orqali sterilizatsiya filtrlash amalga oshiriladi.

Ta'riflangan usulni qo'llash natijasida interferonning unumi 1 litr madaniy muhit uchun taxminan 400-800 mg interferonni tashkil qiladi. Olingan mahsulot sifati alfa-2b interferon moddasi bo'yicha "Yevropa farmakopeyasi" standartlari va talablariga javob beradi.

Taklif etilgan usul va prototip o'rtasidagi sezilarli farqlar:

Biosintez jarayonida 1 litr madaniy muhitdan ko'proq miqdorda interferon olish imkonini beradigan yuqori mahsuldorlikka ega shtamm dizaynidan foydalanish;

Uyali biomassani samarali mexanik yo'q qilishdan foydalanish, bu interferonning erimaydigan shaklining toza ekstraktini qisqa vaqt ichida, kamroq yo'qotish bilan olish imkonini beradi;

Fiziologik bufer eritmalarini renaturatsiya jarayonida xaotrop moddalar ishtirokida qo'llash interferonning to'g'ri renaturatsiya qilingan shaklining hosildorligini oshirishga imkon beradi;

Interferonni uch bosqichli xromatografik tozalash jellarni kumush bilan bo'yashda va RF HPLC bo'yicha 98% dan ortiq va deyarli pirogenlardan xoli bo'lganida qaytaruvchi va qaytarmaydigan sharoitlarda elektroforez bo'yicha 99% dan ortiq tozalikdagi interferon moddasini olish imkonini beradi. (LAL testi).

Talab qilingan ixtirolar guruhining mohiyati va afzalliklari quyidagi misollar orqali ko'rsatilgan.

Misol 1. Rekombinant plazmid pSH50 ning qurilishi

pSX50 plazmidini yaratish usuli quyidagi bosqichlarni o'z ichiga oladi:

pSX10 vektor plazmidini qurish;

1. pSX3 plazmidining tuzilishi (2641 bp)

2. pSX10 vektor plazmidini qurish (2553 bp)

pSX41 rekombinant plazmidini qurish (3218 bp);

pSX43 rekombinant plazmidini qurish (3218 bp);

pSX45 rekombinant plazmidini qurish (3218 bp);

pSX50 rekombinant plazmidini qurish (3218 bp).

pSX10 vektor plazmidini qurish

pSX10 vektor plazmidi pUC19 vektor bo'lib, unda ampitsillinga qarshilik ko'rsatadigan beta-laktomaza genining kodlash ketma-ketligi kan genining kodlash ketma-ketligi bilan almashtiriladi va pKK223-3 plazmididan transkripsiya terminatorini o'z ichiga oladi.

pSS10 vektor plazmidini qurish ikki bosqichda amalga oshiriladi:

Plazmid pSX3 (2641 bp) ni tayyorlash, bu pUC19 plazmidi bo'lib, unda amp genining kodlash hududi kan genining kodlash hududi bilan almashtiriladi;

pSX10 vektor plazmidini (2553 bp) tayyorlash, bu pSX3 plazmidi bo'lib, unda rBT 1 T 2 transkripsiya terminatorini kodlovchi DNK fragmenti BamHI saytining orqasiga kiritilgan.

pSX3 plazmidini olish uchun DNKni kuchaytirishning besh bosqichi amalga oshiriladi. PCR usuli(polimeraza zanjiri reaktsiyasi). Birinchi turda pUC19 plazmid DNK dan shablon sifatida foydalanilganda, hajmi 1828 bp bo'lgan DNK fragmenti kuchaytiriladi. (PU1-PU2 fragmenti) primerlar yordamida:

Bu va undan keyingi PCR reaksiyalari quyidagi sharoitlarda amalga oshiriladi: 20 mM Tis-HCl, pH 8,8, 10 mM (NH 4) 2 SO 4, 10 mM KCl, 2 tM MgCl 2, 0,1% Triton X100, 0,1 mg/ml BSA, har bir dNTP dan 0,2 mM, 1,25 birlik. Pfu DNK polimeraza, 100 ng DNK. Kuchaytirish jarayoni quyidagi bosqichlardan iborat: 95°C da 5 minut qizdirish, 35 PCR tsikli (30 sek 95°C, 30 sek 56°C, 2 min 72°C) va 72°C da 10 minut inkubatsiya. Amplifikatsiyadan so'ng (va keyingi kuchaytirilgandan keyin) DNK fragmenti 1% agaroz jelida elektroforez bilan tozalanadi. Ikkinchi va uchinchi turlarda pUC4K plazmid DNK dan shablon sifatida foydalanib, 555 bp DNK fragmenti kuchaytiriladi. (Fragment KM1-KM2) primerlar yordamida:

va 258 bp DNK fragmentini kuchaytirish. (KMZ-KM4) astarlardan

PCRning beshinchi bosqichida fragmentlar (PU1-PU2) va (KM1-KM4) quyidagi sharoitlarda birlashtiriladi: 95 ° C da 5 daqiqa davomida isitish, 5 PCR tsikli (30 sek 95 ° C, 30 sek 56 ° C) , 10 min 72°C) va 72°C da 10 minut inkubatsiya. Oxirgi PCRdan so'ng olingan DNK to'g'ridan-to'g'ri E. coli DH5 shtammi hujayralariga aylanadi va 20 mkg/ml kanamitsinni o'z ichiga olgan LA muhitiga qo'yiladi. 37°C da 12 soat davomida inkubatsiyadan so‘ng klonlar yo‘q qilinadi, plazmid DNK ajratiladi va cheklov tahlili o‘tkaziladi. Natijada, o'lchami 2641 bp bo'lgan pSX3 plazmidi olinadi.

pSX10 vektor plazmidini olish uchun PCR yordamida DNKni kuchaytirishning uch bosqichi amalga oshiriladi. Birinchi turda pSX3 plazmid DNK dan shablon sifatida foydalanib, 2025 bp DNK fragmenti kuchaytiriladi. (10.1-10.2 fragmentlari) primerlar yordamida:

Ikkinchi turda pKK223-3 plazmidining DNKsidan shablon sifatida foydalanib, 528 bp o'lchamdagi DNK fragmenti kuchaytiriladi. (KK1-KK2 fragmenti) astarlardan foydalangan holda:

PCR ning uchinchi bosqichida fragmentlar (10.1-10.2) va (KK1-KK2) quyidagi sharoitlarda birlashtiriladi: 5 daqiqa davomida 95 ° C da isitish, 5 PCR tsikli (30 sek 95 ° C, 30 sek 56 ° C) , 10 min 72°C) va 72°C da 10 minut inkubatsiya. Oxirgi PCRdan so'ng olingan DNK to'g'ridan-to'g'ri E. coli DH5 shtammi hujayralariga aylanadi va 20 mkg/ml kanamitsinni o'z ichiga olgan LA muhitiga qo'yiladi. 37°C da 12 soat davomida inkubatsiyadan so‘ng klonlar yo‘q qilinadi, plazmid DNK ajratiladi va cheklov tahlili o‘tkaziladi. Natijada, o'lchami 2553 bp bo'lgan pSX10 plazmidi olinadi.

pSX41 rekombinant plazmidini qurish

pSX41 rekombinant plazmidi Hind III - BamHI DNK fragmenti pSX3 vektor plazmidi (2529 bp), Hind III - EcoRI DNK fragmenti 168 bp, E. coli triptofan operon (P trp) promotorini kodlovchi, EcoRI-XbaI a sintetik. SD ketma-ketligini (Shine-Delgarno) kodlovchi 20 bp DNK fragmenti va inson interferon alfa 2b genini kodlovchi 501 bp bo'lgan XbaI-BamHI DNK fragmenti.

pSX3 vektor plazmidining Hind III - BamHI DNK fragmentini (2529 bp) olish uchun pSX3 plazmidining DNKsi HindIII va BamHI cheklash fermentlari bilan ishlanadi, so'ngra 1% agaroz jelida elektroforetik tozalash amalga oshiriladi. Triptofan operon (P trp) promotorini kodlovchi 168 bp boʻlgan Hind III EcoRI DNK fragmenti shablon sifatida jami E. coli DNKsi va TRP1 va PRP2 primerlaridan foydalangan holda PCR orqali olinadi, soʻngra kuchaytirilgan fragment Hindll va EcoRI cheklovi bilan ishlov beriladi. fermentlar:

EcoRI-Xbal ni SD ketma-ketligini (Shine-Delgarno) kodlovchi 20 bp sintetik DNK fragmentini olish uchun quyidagi komplementar oligonukleotidlar sintezlanadi:

Odam alfa 2b interferon genini kodlovchi 501 bp hajmdagi XbaI-BamIII DNK fragmenti shablon sifatida jami inson DNKsi va IFN1 va IFN2 primerlaridan foydalangan holda PCR yo'li bilan olinadi, so'ngra kuchaytirilgan fragmentni Xbal va BamIII cheklash fermentlari bilan qayta ishlanadi:

Keyinchalik, elektroforetik tozalangan bo'laklar birlashtiriladi, T4 faj ligaza fermenti bilan bog'lanadi, DNK E. coli DH5 shtammi hujayralariga aylanadi va 20 mkg / ml kanamitsinni o'z ichiga olgan LA muhitiga qoplanadi. 37°C da 12 soat davomida inkubatsiyadan so‘ng klonlar yo‘q qilinadi, plazmid DNK ajratiladi, cheklanish tahlili o‘tkaziladi va birlamchi DNK tuzilishi aniqlanadi. Natijada 3218 bp kattalikdagi pSX41 plazmidi olinadi. Keyinchalik, maqsadli mahsulotning ifoda darajasini oshirish uchun interferon genining bosqichma-bosqich mutagenezi amalga oshiriladi. Interferon genining mutagenezi E. coli da kam uchraydigan, mos keladigan aminokislotalarni kodlovchi uchliklarni, koʻpincha E. coli da uchraydigan, bir xil aminokislotalarni kodlovchi tripletlarni almashtirishdan iborat. Interferon genining DNK mutagenezi PCR usuli yordamida amalga oshiriladi.

pSX43 rekombinant plazmidini qurish

pSX43 rekombinant plazmidini olish uchun DNKni kuchaytirishning bir bosqichi PCR yordamida pSX41 plazmidining DNKsidan shablon sifatida va IFN3 va IFN4 primerlari yordamida amalga oshiriladi:

PCR quyidagi sharoitlarda amalga oshiriladi: 95 ° C da 5 daqiqa davomida isitish, 20 PCR tsikli (30 sek 95 ° C, 30 sek 56 ° C, 10 min 72 ° C) va 72 ° C da 20 minut inkubatsiya. PCRdan so'ng olingan DNK to'g'ridan-to'g'ri E. coli DH5 shtammi hujayralariga aylanadi va 20 mkg / ml kanamitsinni o'z ichiga olgan LA muhitida qoplanadi. 37°C da 12 soat davomida inkubatsiyadan so‘ng klonlar yo‘q qilinadi, plazmid DNK ajratiladi, cheklanish tahlili o‘tkaziladi va birlamchi DNK tuzilishi aniqlanadi. Natijada 3218 bp kattalikdagi pSX43 plazmidi olinadi.

pSX45 rekombinant plazmidini qurish

pSX45 rekombinant plazmidini olish uchun DNKni kuchaytirishning bir bosqichi PCR orqali pSX43 plazmidining DNKsidan shablon sifatida va IFN5 va IFN6 primerlaridan foydalangan holda amalga oshiriladi:

PCR quyidagi sharoitlarda amalga oshiriladi: 95 ° C da 5 daqiqa davomida isitish, 20 PCR tsikli (30 sek 95 ° C, 30 sek 56 ° C, 10 min 72 ° C) va 72 ° C da 20 minut inkubatsiya. PCRdan so'ng olingan DNK to'g'ridan-to'g'ri E. coli DH5 shtammi hujayralariga aylanadi va 20 mkg / ml kanamitsinni o'z ichiga olgan LA muhitida qoplanadi. 37°C da 12 soat davomida inkubatsiyadan so‘ng klonlar yo‘q qilinadi, plazmid DNK ajratiladi, cheklanish tahlili o‘tkaziladi va birlamchi DNK tuzilishi aniqlanadi. Natijada 3218 bp kattalikdagi pSX45 plazmidi olinadi.

pSX50 rekombinant plazmidini qurish.

pSX50 rekombinant plazmidini olish uchun DNKni kuchaytirishning bir bosqichi PCR orqali pSX45 plazmidining DNKsidan shablon sifatida va IFN7 va IFN8 primerlaridan foydalangan holda amalga oshiriladi:

PCR quyidagi sharoitlarda amalga oshiriladi: 95 ° C da 5 daqiqa davomida isitish, 20 PCR tsikli (30 sek 95 ° C, 30 sek 56 ° C, 10 min 72 ° C) va 72 ° C da 20 minut inkubatsiya. PCRdan so'ng olingan DNK to'g'ridan-to'g'ri E. coli DH5 shtammi hujayralariga aylanadi va 20 mkg / ml kanamitsinni o'z ichiga olgan LA muhitida qoplanadi. 37°C da 12 soat davomida inkubatsiyadan so‘ng klonlar yo‘q qilinadi, plazmid DNK ajratiladi, cheklanish tahlili o‘tkaziladi va birlamchi DNK tuzilishi aniqlanadi. Natijada 3218 bp kattalikdagi pSX50 plazmidi olinadi.

Misol 2. E. coli SX50 shtammini tayyorlash - interferon ishlab chiqaruvchisi

Interferon ishlab chiqaruvchi E. coli SX50 shtammi E. coli shtammi BL21 hujayralarini pSX50 rekombinant plazmidi bilan o'zgartirish orqali olinadi. Interferon ishlab chiqaruvchi shtamm 30 litrli fermentatorda optik zichligi 25,0-30,0 p.u.gacha yetishtiriladi. 1% kazein kislota gidrolizat (Difco), 1% glyukoza, 40 mkg/ml kanamitsinni o'z ichiga olgan M9 muhitida 38-39°C haroratda. Fermentatsiya jarayonida gravimetrik kontroller yordamida ozuqa substratining uzluksiz qo'shilishi amalga oshiriladi.

Misol 3. SX50 E. coli shtammidan interferonni ajratib olish usuli

Interferon 4 bosqichda olinadi:

1-bosqich. E. coli SX50 shtammini yetishtirish.

2-bosqich. Interferonning erimaydigan shaklini ajratish va tozalash.

3-bosqich. Interferonning erishi va renaturatsiyasi.

4-bosqich. Interferonni xromatografik tozalash.

1-bosqich. E. coli SX50 shtammini yetishtirish

E. coli SX50 shtammining 3 litr boy LB muhitida 12 soat davomida 26 ° C da o'stirilgan emlash aseptik tarzda M9, ​​1% kazein kislota gidrolizati, 1% glyukoza, 27 litr steril muhitni o'z ichiga olgan fermentatorga kiritiladi. 1 mM MgCl 2, 0,1 mM CaCl 2, 40 mg / ml kanamitsin. Fermentatorda kultivatsiya 40% natriy gidroksid eritmasi bilan avtomatik titrlash orqali pH 7±0,15 ni saqlab, 38-39°S haroratda amalga oshiriladi. To'yinganlikning (50±10)% oralig'ida erigan kislorod konsentratsiyasi aralashtirgichning tezligini 100 dan 800 rpm gacha va havo berishni 1 dan 15 l / min gacha o'zgartirish orqali saqlanadi. Substratlarning kontsentratsiyasi, xususan, glyukoza va xamirturush ekstrakti fermentatsiya paytida o'lchanadi va ularning konsentratsiyasi gravimetrik regulyator yordamida peristaltik nasoslar orqali konsentrlangan eritmalarni etkazib berish tezligini o'zgartirish orqali saqlanadi.

Interferonning erimaydigan shaklda to'planishi fazali kontrastli mikroskop, 15% poliakrilamid gel elektroforezi (SDS-PAAG) va teskari fazali yuqori samarali xromatografiya (RF HPLC) yordamida nazorat qilinadi. Maksimal optik zichlikka (~ 25-30 p.u.) erishilganda va interferon sintezi to'xtaganda fermentatsiya to'xtatiladi. Fermentatsiya oxirida madaniy suyuqlik oqim rotorida 5000-10000 rpm aylanish tezligida santrifüjlash orqali ajratiladi. Biomassa plastik qoplarga qadoqlanadi va minus 70°C da muzlatiladi.

2-bosqich. Interferonning erimaydigan shaklini ajratish va tozalash

E. coli SX50 shtammining 300-400 g muzlatilgan biomassasi 3000 ml 1-buferda (20 mM Tris-HCl, pH 8,0, 10 mM EDTA, 0,1% Triton X100) to'xtatiladi. Suspenziya Gaulin tipidagi oqim gomogenizatoridan o'tkaziladi, 900 bar bosimda saqlanadi va oqim rotorida 15000 aylanish tezligida santrifüj qilinadi. Olingan cho'kma shunga o'xshash sharoitda ketma-ket yuviladi buferlar 2 (20 mM Tris-HCl, pH 8,0, 1 mM EDTA, 3 M karbamid) va bufer 3 (20 mM Tris-HCl pH 8,0, 1 mM EDTA) va nihoyat interferon. cho'kma 200 ml buferda to'xtatiladi 3. Bu holda, interferonning erimaydigan shaklini izolyatsiya qilish va tozalash vaqti 5 soatdan oshmaydi.

3-bosqich. Interferonning erishi va renaturatsiyasi

Oldingi bosqichda olingan interferonning erimaydigan shakli suspenziyasiga 6 M konsentratsiyaga quruq guanidin gidroxlorid qo'shing, 50 mM konsentratsiyaga ditiotreitol, 50 mM konsentratsiyaga Tris-HCl pH 8,0, NaCl - a. konsentratsiyasi 150 mM va Triton X100 konsentratsiyasi 0,1% gacha, 2 soat davomida xona haroratida inkubatsiya qilinadi erimagan material 0,22 mikron gözenek diametrli membranalar orqali filtrlash orqali ajratiladi.

Interferonning renaturatsiyasi hosil bo'lgan eritmani 4-bufer (20 mM Tris-HCl pH 8,0, 100 mM NaCl, 0,1 mM EDTA) bilan 100-200 marta sekin suyultirish orqali amalga oshiriladi. Shundan so'ng, renaturatsiya aralashmasi 4-8 ° S haroratda 12-15 soat davomida doimiy aralashtirish bilan inkubatsiya qilinadi. Keyin magniy sulfat 1 mM konsentratsiyaga qo'shiladi va yig'ilgan material 0,22 mikron teshik diametri bo'lgan membranali filtr orqali filtrlash orqali sterilizatsiya qilinadi.

4-bosqich. Interferonni xromatografik tozalash

Interferonni xromatografik tozalash uch bosqichda amalga oshiriladi.

1. Olingan renaturatsiyalangan interferon avval Cu+2 ionlari bilan immobilizatsiyalangan Chelating Sepharose Fast Flow qatronida (Amersham Biosciences) yaqinlik xromatografiyasi yordamida tozalanadi. Buning uchun interferon eritmasi Cu +2 Chelating Sepharose Fast Flow bilan kolonkaga surtiladi va interferon 0,1 M bufer bilan elutsiya qilinadi. limon kislotasi pH 2,2.

2. Xromatografik tozalashning ikkinchi bosqichida interferon eritmasi CM Sepharose Fast Flow tipidagi kation almashinadigan qatronga (Amersham Biosciences) surtiladi va interferon eritmalar gradienti (0,0-0,5 M NaCl) bilan 50 mM lik eritmada elutiladi. Na(CH 3 COO) bufer, pH 5,5.

3. Interferonning monomerik shaklini interferonning polimer shakllari qoldiqlaridan tozalash interferonni tozalashning uchinchi bosqichida Superdex 75 qatronida (Amersham Biosciences) gel filtrlash orqali amalga oshiriladi. Xromatografiya 50 mM Na(CH 3 COO), pH 5,0, tarkibida 0,15 M NaCl bo'lgan buferda amalga oshiriladi.

Interferonni ajratib olish va tozalashning tavsiflangan usuli 10 litr madaniy muhitdan olingan biomassadan 7-10 kun davomida bir izolyatsiya siklida 4-8 g yuqori darajada tozalangan interferonni olish imkonini beradi. Olingan interferonning sifati to'liq interferon alfa-2b moddasi uchun "Yevropa farmakopeyasi" talablariga javob beradi, xususan:

Interferon konsentratsiyasi 2 × 10 8 IU / ml dan kam emas;

Interferonning o'ziga xos faolligi 2,0 × 10 8 IU / mg dan kam emas;

Jellarni kumush bilan bo'yashda kamaytiruvchi va qaytarilmaydigan sharoitlarda preparatning elektroforetik tozaligi kamida 99% ni tashkil qiladi;

Izolyatsiya qilingan interferonning izoelektrik nuqtasi pH 5,8-6,3 mintaqasida;

Izolyatsiya qilingan interferonning peptid xaritasi Evropa standartidagi interferon alfa 2b CRS uchun peptid xaritasidan tubdan farq qilmaydi;

Keltirilgan misollardan ko'rinib turibdiki, da'vo qilingan ixtirolar guruhi nisbatan sodda va ishonchli texnologiya yordamida yuqori mahsuldorlikka ega interferon alfa-2b olish imkonini beradi.

TALAB

1. Rekombinant inson alfa-2b interferonining sintezini kodlovchi pSX50 rekombinant plazmid DNKsi, uning o'lchami 3218 ta asosiy juftlik (bp) bo'lishi va quyidagi fragmentlardan iboratligi bilan tavsiflanadi: 1 dan 176 gacha nukleotidlar (bp) ketma-ketligi o'z ichiga oladi. triptofan promotorini (P trp) o'z ichiga olgan 176 bp bo'lgan DNK parchasi, 177 dan 194 nt gacha bo'lgan ketma-ketlik. tarjimaning boshlanishi uchun mas'ul bo'lgan Shine Delgarno ketma-ketligini o'z ichiga olgan 18 bp kattalikdagi sintetik DNK fragmentini o'z ichiga oladi, 195 dan 695 nt gacha. nukleotidlar almashinuvi bilan interferon alfa-2b genini o'z ichiga olgan 501 bp DNK fragmentini o'z ichiga oladi: 37 (A>C), 39 (G>T), 40 (A>C), 42 (G>T), 67 ( A> C), 69 (G>T), 70 (A>C), 72 (A>T), 96 (G>A), 100 (A>C), 102 (A>T), 114 (A >S) ), 120 (C>G), 126 (G>A), 129 (G>A), 330 (C>G), 339 (G>A), 342 (G>A), 487 (A> C) , 489 (A>T), 495 (G>A), 696 dan 713 nt gacha ketma-ketlik. 714 dan 1138 nt gacha bo'lgan ketma-ketlikda sintetik polilinkerni o'z ichiga olgan 18 bp sintetik DNK fragmentini o'z ichiga oladi. 4129 dan 4553 nt gacha bo'lgan pKK223-3 plazmidining DNK fragmentini o'z ichiga oladi. 425 bp o'lchamli, qat'iy transkripsiya terminatori rrnBT 1 T 2 ketma-ketligini, 1139 dan 1229 nt gacha bo'lgan ketma-ketlikni o'z ichiga oladi. 2487 dan 2577 nt gacha bo'lgan pUC19 plazmidining DNK fragmentini o'z ichiga oladi. 91 bp o'lchamda, -laktomaza genining promotorini o'z ichiga oladi (ampitsillin qarshilik geni -Amp R), 1230 dan 2045 nt gacha bo'lgan ketma-ketlik. 720 nt bilan pUC4K plazmidining DNK fragmentini o'z ichiga oladi. 1535 yilgacha 816 bp o'lchamda, kan genining strukturaviy hududini o'z ichiga oladi, ketma-ketlik 2046 bp. 3218 n gacha. 1625 dan 453 nt gacha bo'lgan pUC19 plazmidining DNK fragmentini o'z ichiga oladi. 1173 bp o'lchamda, plazmid replikatsiyasi (ori) va lak promotori (P lak) uchun mas'ul bo'lgan ketma-ketlikni o'z ichiga oladi.

2. 1-bandga muvofiq rekombinant plazmid bilan o'zgartirilgan Eschcerichia coli SX50 bakterial shtammi rekombinant inson leykotsitlari interferon alfa-2b ishlab chiqaruvchisi hisoblanadi.

3. Inson interferon alfa-2b ishlab chiqarish usuli, shu jumladan, 2-bandga muvofiq Escherichia coli SX5 shtammini biosintez jarayonida doimiy ravishda ozuqaviy substratlar qo'shilishi bilan oziq muhitida etishtirish, 700- bosim ostida mikroorganizm hujayralarini mexanik ravishda yo'q qilish. 900 bar, interferonni guanidin gidroxloridning bufer eritmasida eritish, xaotrop moddalar ishtirokida interferonni fiziologik bufer eritmalarida renaturatsiya qilish, Chelating Sepharose Fast Flow tipidagi qatronlarda interferonni uch bosqichli xromatografik tozalash, Cuion bilan almashinish +2 CM Sepharose Fast Flow tipidagi ion almashinadigan qatronlarda xromatografiya va Superdex 75 tipidagi qatronlarda jel filtrlash kromatografiyasi.

4. 3-bandga muvofiq usul bo'lib, unda etishtirish ozuqaviy substratlar, afzalroq glyukoza va xamirturush ekstrakti doimiy qo'shilishi bilan kamaytirilgan triptofanli ozuqa muhitida amalga oshiriladi.

5. Interferonni eritishdan oldin DNK, RNK, oqsillar, lipopolisaxaridlar, Triton XI 00, karbamid kabi yuvish vositalarini o'z ichiga olgan bufer eritmalar bilan yuvish, eruvchan hujayra komponentlarini olib tashlash yo'li bilan tozalanadi.

6. 3-bandga muvofiq usul bo'lib, unda har bir xromatografik tozalashdan so'ng, 0,22 mikron teshik o'lchamli filtrlar orqali sterilizatsiya filtrlash amalga oshiriladi.

2018-02-02T17:43:00+03:00

Interferon alfa 2b ning tasdiqlangan samaradorligi

Dunyo birinchi marta inson organizmidagi tabiiy oqsil bo'lgan interferon haqida 1957 yilda, olimlar Alik Isaacs va Jan Lindenmann interferensiya hodisasini, biologik jarayonlarning murakkab mexanizmini, buning natijasida organizm turli kasalliklarga qarshi kurashishga qodirligini kashf qilganlarida bilib oldi. Ammo o'tgan asrda ular, ehtimol, bu protein ko'plab dorilarning asosiy tarkibiy qismiga aylanishiga shubha qilmaganlar.

Interferonlar tana hujayralariga viruslar kirib kelganda ishlab chiqariladigan oqsillardir. Ularning yordami bilan himoya hujayra ichidagi molekulalarning sintezi uchun mas'ul bo'lgan genlar faollashadi, ular virusli oqsillarning sintezini bostirish va uning ko'payishini oldini olish orqali antiviral ta'sir ko'rsatadi. Boshqacha qilib aytadigan bo'lsak, tanamizdagi bu oqsillar (ularni sitokinlar deb ham ataladi) sog'lig'imizni qo'riqlaydigan va qattiq hushyorlikni saqlaydigan kuchli himoyachilar sifatida ishlaydi, shunda kerak bo'lsa, biz viruslarning hujumini darhol qaytarishimiz va kasallikni engishimiz mumkin.

Viruslar bilan kasallangan tanani himoya qilish uchun interferon tanamizning deyarli barcha hujayralari tomonidan ishlab chiqariladi. Bundan tashqari, uning shakllanishi nafaqat viruslar, balki bakterial toksinlar tomonidan ham rag'batlantirilishi mumkin, shuning uchun bu oqsil ham ba'zi bakterial infektsiyalarga qarshi samarali bo'ladi. Shunday qilib, biz bu sitokin inson immunitet tizimining juda muhim tarkibiy qismi ekanligi haqida xulosa qilishimiz mumkin. Busiz, insoniyat uzoq vaqt oldin ko'plab viruslar va bakteriyalar tomonidan mag'lub bo'lgan bo'lar edi.

Interferonlarning turlari

Interferonlar uch turga bo'linadi: alfa, beta va gamma, ular turli hujayralar tomonidan ishlab chiqariladi.

• Interferon alfa viruslar, bakteriyalar va boshqa "dushman" agentlarni yo'q qiladigan tabiiy qotil hujayralar - leykotsitlarni faollashtiradi.
• Interferon beta fibroblastlar, epiteliya hujayralari va makrofaglarda ishlab chiqariladi, ular yuqumli agentlarni o'zlashtiradi.
• Interferon gamma T-limfotsitlar tomonidan ishlab chiqariladi, uning asosiy vazifasi, boshqa turlar kabi, immunitetni tartibga solishdir.

ARVI uchun interferonning samaradorligi qanday isbotlangan?

Ma'lumki, o'z faoliyatida terapiyani tayinlashda shifokorlar o'zlarining tajribalariga va allaqachon o'rnatilgan bilim tizimiga tayanadilar. Ammo tibbiyot jadal rivojlanmoqda: har yili butun dunyo bo'ylab yangi samarali davolash usullari ishlab chiqiladi va yangi dorilar patentlanadi. Shu sababli, tibbiyotdagi so'nggi yutuqlar va kashfiyotlarni tizimlashtirish zarurati tug'ildi, buning natijasida klinik tavsiyalar va davolash standartlari paydo bo'ldi. Tasdiqlangan klinik tajribaga asoslangan ushbu hujjatlashtirilgan algoritmlar diagnostika, davolash, reabilitatsiya, kasalliklarning oldini olish bo'yicha zarur ko'rsatmalarni tavsiflaydi va shifokorga muayyan vaziyatda davolash taktikasini tanlash bo'yicha qaror qabul qilishga yordam beradi.

Masalan, ta'minlash bo'yicha tibbiy yordam ARVI va gripp muammosi bo'yicha bolalar, rivojlanish guruhi taxminan 40 kishidan iborat bo'lib, turli muassasalar va bo'limlarning yuqumli kasalliklar sohasidagi etakchi rus mutaxassislarini o'z ichiga oladi. Bu mantiqan Maxsus e'tibor mutaxassislar to'laydilar tibbiy preparatlar, imkon qadar tezroq kasalliklarni engishga qodir va shu bilan birga minimal yon ta'sirga ega. Endi biz kattalar va bolalarda ARVI bilan kurashishga yordam beradigan interferonni o'z ichiga olgan preparatlar haqida gapiramiz.

Yuqorida aytib o'tilganidek, ularning viruslarga qarshi kurashish qobiliyati olimlar Isaacs va Lindenmann tomonidan interferensiyani o'rganish jarayonida aniqlangan. Ular interferonni “jonli yoki faolsizlangan viruslar bilan kasallanganidan keyin organizm hujayralari tomonidan ishlab chiqariladigan immunoglobulinlardan ancha kichikroq oqsil; hujayralar uchun toksik bo'lmagan dozalarda turli xil viruslarning o'sishini inhibe qilishga qodir. Bugungi kunda ma'lumki, bu oqsillar etiologiyasidan qat'i nazar (viruslar, zamburug'lar, bakteriyalar, hujayra ichidagi patogenlar, onkogenlar) begona ma'lumotlarning kiritilishiga javoban tananing deyarli barcha hujayralari tomonidan ishlab chiqarilishi mumkin. Va ularning asosiy biologik ta'siri bu begona ma'lumotlarni tanib olish va olib tashlash jarayonlarida yotadi. Boshqacha qilib aytadigan bo'lsak, bu himoya molekulalari hujayralarni egallab olgan viruslarni hujayralarning o'ziga zarar bermasdan, yumshoq va aniq tarzda yo'q qilishni "biladi". Bu ko'plab ilmiy tadqiqotlar bilan tasdiqlangan.

Interferonlarni o'z ichiga olgan preparatlarni qo'llash usullariga kelsak, ba'zi nuanslarni eslatib o'tish kerak. Interferon terapiyasining asosiy muammolaridan biri bu preparatning samarali dozasini qo'zg'atmasdan "etkazib berish" dir. salbiy oqibatlar. Ba'zi hollarda interferonni o'z ichiga olgan dorilarni mushak ichiga yoki tomir ichiga yuborish isitma, titroq, bosh og'rig'i va boshqa kiruvchi ta'sirlar kabi nojo'ya ta'sirlarga olib keladi. Bu alomatlar tana uchun juda muhim emas va tez orada yo'qoladi, ammo davolanish jarayonida ular noqulaylik tug'diradi.

Minimallashtirish yon effektlar interferon terapiyasi yoki ularsiz butunlay amalga oshirish interferon alfa-2b o'z ichiga olgan shamlardan foydalanish orqali mumkin bo'ldi. Ga binoan ilmiy tadqiqot, rektal dastur o'tkir respirator virusli infektsiyaning birinchi kunlarida insonning rekombinant interferoni isitmaning davomiyligini pasaytiradi, burun oqishi bilan kurashadi va kasallikni tezda engishga imkon beradi 2. Interferon alfa-2b o'z ichiga olgan dori-darmonlarni intranazal qo'llash (dori burun shilliq qavatiga qo'llanganda) davolanishni to'ldiradi va terapiyaning optimal ta'sirini ta'minlaydi. Kasallikning har qanday bosqichida gripp va boshqa o'tkir respirator virusli infektsiyalarga qarshi kurashish uchun mos bo'lgan dorilardan biri VIFERON hisoblanadi. U shamlar (shamlar), jel va malham shaklida mavjud.

Interferon alfa-2b o'z ichiga olgan preparatlarni qo'llash va tolerantlik bo'yicha qisqacha ko'rsatmalar

VIFERON preparatlarini kim qabul qilishi mumkin:

• kattalar;
• hayotning birinchi kunlaridan boshlab bolalar;
• homiladorlikning 4-haftasidan boshlab homilador ayollar.

Ilmiy hamjamiyat tomonidan tan olinishi

Interferon alfa-2b (VIFERON) gripp va ARVIni davolash uchun tavsiya etilgan dori sifatida tibbiy yordamning uchta federal standartiga, shuningdek, ushbu kasalliklarni davolash bo'yicha uchta Federal protokolga kiritilgan. 1 Agar biz nafaqat gripp va ARVI, balki boshqa kasalliklarni ham hisobga olsak, ushbu dori bo'yicha standartlar va tavsiyalar soni yanada ko'proq - interferon (VIFERON) 30 ga kiritilgan. federal standartlar Rossiya Federatsiyasi Sog'liqni saqlash vazirligi tomonidan tasdiqlangan kattalar va bolalarga tibbiy yordam ko'rsatish, shuningdek 21-bayonnomada ( Klinik ko'rsatmalar) kattalar, shu jumladan homilador ayollar va bolalarga tibbiy yordam ko'rsatish.

Preparatning ta'sir qilish printsipi

VIFERON preparatining bir qismi bo'lgan inson rekombinant interferon alfa-2b antiviral, immunomodulyatsion xususiyatlarga ega va RNK va DNK viruslarining replikatsiyasini bostiradi. Grippga qarshi antiviral terapiya kasallikning har qanday bosqichida boshlanishi mumkin. Bu holatni yaxshilashga yordam beradi va asoratlar rivojlanishining oldini oladi 2. VIFERON preparati umumiy e'tirof etilgan yuqori faol antioksidantlarni o'z ichiga oladi: bular shamlarda E va C vitaminlari, malhamlarda - E vitamini, jelda - E vitamini, limon va benzoik kislotalar. Bunday antioksidant yordam fonida interferonlarning antiviral faolligining oshishi qayd etilgan.

Giyohvand moddalarni tekshirish natijalari

VIFERON bilan klinik sinovlarning to'liq tsiklidan o'tdi keng Rossiyaning etakchi klinikalarida turli kasalliklar. Tadqiqotlar natijalari kattalar va bolalarda, shu jumladan yangi tug'ilgan chaqaloqlarda va homilador ayollarda VIFERON preparatining turli yuqumli va yallig'lanish kasalliklari uchun terapevtik va profilaktik samaradorligini isbotladi. Murakkab tarkibi va chiqarilish shakli VIFERON preparatini o'ziga xos farmakokinetik xususiyatlarga ega bo'lishi, rekombinant interferonlarning parenteral preparatlariga xos bo'lgan nojo'ya ta'sirlar bo'lmasa, interferonning ta'sirini uzaytirishi ilmiy jihatdan isbotlangan.

Qaysi kasalliklar uchun interferonga asoslangan preparatlar qo'llaniladi?alfa-2 b

VIFERON preparati sham, jel va malham shaklida quyidagi kasalliklarni davolash uchun ishlatiladi:

• ARVI, shu jumladan gripp;
• gerpes;
• papillomavirus infektsiyasi;
• enterovirus infektsiyasi;
• laringotraxeobronxit;
• surunkali gepatit B, C, D, shu jumladan jigar sirrozi bilan asoratlangan;
• bakterial vaginoz;
• kandidoz;
• mikoplazmoz;
• ureaplazmoz;
• gardnerellyoz.

VIFERON preparatini kompleks antiviral terapiyaning bir qismi sifatida qo'llashni kamaytirish mumkin terapevtik dozalar antibakterial va gormonal dorilar, shuningdek, ushbu terapiyaning toksik ta'sirini kamaytiradi.

Umumiy shifokor

1. http://www.rosminzdrav.ru, Sog'liqni saqlash vazirligining buyrug'i Rossiya Federatsiyasi, http://www.raspm.ru; http://www.niidi.ru; http://www.pediatr-russia.ru; http://www.nnoi.ru
2. Nesterova I.V. "Interferon preparatlari klinik amaliyot: qachon va qanday”, “Davom etuvchi shifokor”, 2017 yil sentyabr.
3. "VIFERON - perinatologiyada yuqumli va yallig'lanish kasalliklarini davolash uchun murakkab antiviral va immunomodulyatsion dori." (Shifokorlar uchun qo'llanma), Moskva, 2014 yil.

Foydalanilgan manbalar: http://www.lsgeotar.ru