Imunoblotting (Immunoblot) je zelo specifična in zelo občutljiva referenčna metoda, ki potrjuje diagnozo pri bolnikih s pozitivnimi ali negotovimi rezultati analiz, pridobljenih vklj. Z uporabo RPGA ali IFA .
Ta metoda odkrivanja protiteles na posamezne antigene patogena temelji na formulaciji ELISA na nitroceluloznih membranah, ki so v obliki ločenih pasov nagnjeni k specifičnim beljakovinam, ločenim z gel elektroforezo. Če obstajajo protitelesa proti določenim antigenom - se v ustreznem traku traku pojavi temna črta. Edinstvenost imunoblota je sestavljena iz njegove visoke informativnosti in zanesljivosti dobljenih rezultatov.
Material za raziskave Je serumska ali krvna plazma. Za študij na istem traku je potrebna 1,5-2 ml krvi ali 15-25 μl seruma.
Po priporočilu WHO se imunoblotiranje (Western blot) uporablja pri diagnozi okužbe s HIV kot dodatno strokovno metodo, ki mora potrditi rezultate ELISA. Običajno ta metoda preveri pozitiven rezultat za ELFA, saj se šteje za bolj občutljivo in specifično, čeprav bolj zapleteno in drago.
Imunsko blot združuje imunsko-imunimalno analizo (ELISA) s predhodno elektroforetno ločevanje virusnih beljakovin v gelu in njihovega prenosa na membrano nitroceluloze. Postopek imunoblota je sestavljen iz več faz. Prvič, predhodno prečiščeni in uničeni na kompozitne komponente HIV, je izpostavljen elektroforezi, medtem ko so vsi antigeni, vključeni v virus, ločeni z molekulsko maso. Nato se metoda za blotting antigena prenese iz gela v trak nitroceluloze ali najlonskega filtra, ki od zdaj naprej vsebuje neviden spekter beljakovin, značilnih za HIV. Nadalje, material (serum, pacient krvna plazma itd.), Se uporablja na traku, in če obstajajo posebna protitelesa v vzorcu, so povezane z strogo ustreznimi trakovi beljakovin-antigenov. Kot posledica naknadnih manipulacij (podobno IFA) je rezultat te interakcije vizualiziran - je narejen viden. Prisotnost trakov na določenih delih traku potrjuje prisotnost protiteles v preučevanem serumu, da strogo definirajo antigene HIV.
Imunsko blot se najpogosteje uporablja za potrditev diagnoze okužbe s HIV. Kdo meni, da pozitivne serumi, v katerih protitelesa na katere koli dve proteini HIV lupine zaznajo s imunskim blotom. Po teh priporočilih, če obstaja reakcija samo z enim od lupinskih proteinov (GP160, GP120, GP41) v kombinaciji ali brez reakcije z drugimi beljakovinami, je rezultat, ki se šteje za dvomljivo in ponovno preučevanje priporočamo z uporabo niza druge serije ali drugo podjetje. Če po tem rezultat ostaja dvomljivo, se raziskava nadaljuje vsake 3 mesece.
Lastnosti
Analiza Imunoblota je zanesljiva metoda, ki vam omogoča, da določite prisotnost protiteles do antigenov HIV prvega in drugega tipa. Če je oseba okužena, protitelesa, ki jih je mogoče zaznati, in veliko kasneje pa se pojavijo v dveh tednih. Značilnost HIV je, da se količina protiteles hitro poveča in se ohrani v pacientovi krvi. Tudi če so prisotni, se bolezen ne sme manifestirati v dveh ali več letih. Metoda ELISA ne natančno določa prisotnosti bolezni, zato potrditev rezultatov z imunoblotiranjem in PCR, če je imunskoasimenzionalna analiza pokazala pozitiven rezultat.
Indikacija za imenovanje.
Kaj je "Imunoblot" že ugotovljeno, toda kdo predpisuje to študijo? Razlog za preskuse za virus imunske pomanjkljivosti (HIV) z metodo imunablota postane pozitiven rezultat ELISA. Potrebno je iti skozi analizo imunoferancije bolnikom, ki bodo upravljani. Poleg tega je treba analizirati ženske, ki načrtujejo nosečnost, pa tudi vsakogar, ki vodi grdo spolno življenje. Imunoblotiranje bolnikov z virusom HIV, če rezultati IFA povzročajo dvome.
Naslednji moteči simptomi lahko postanejo razlog za privlačnost zdravnika:
- ostra hujšanja;
- šibkost, izguba uspešnosti;
- črevesne motnje (driska), ki se nadaljuje tri tedne;
- dehidracija telesa;
- vročina;
- povečanje bezgavk na telesu;
- razvoj kandidiaze, tuberkuloze, pljučnice, toksoplazmoze, poslabšanja herpes.
Pacienta ni treba pripraviti pred predaji venske krvi. 8-10 ur pred študijo ni mogoče jesti. Ni priporočljivo za dan, preden se krva uporablja za uporabo alkoholnih in kavnih napitkov, se ukvarjajo z močno vadbo, mahanje razburjenja.
Kako je študija?
Z vidika bolnika se imunoblot ne razlikuje od druge analize: venska krvi se preiskuje, rezultat pa se raziskuje in rezultat. Ampak, če greš malo več podrobnosti, ni zelo preprosta, vendar še vedno poskušam ugotoviti.
Sprva, na rastlini reagenta, se vzame "referenčni" virus človeške imunske pomanjkljivosti. Potem s pomočjo posebnega postopka (elektroforeza) v okolju gela, se virus uniči na svoje najmanjše komponente: beljakovine (virusne antigene). Potem, s pomočjo blotting samega (iz angleščine), se delci dajo na poseben material - nitroceluloza ali najlon filter, indikator je pripravljen za uporabo, tako imenovani trak. Strip je trak, v katerem so antigeni razdeljeni glede na njihovo molekulsko maso, v jasnem zaporedju, to je vsak milimetrski papir ustreza določenemu proteinu.
Kot veste, če obstajajo virusi v krvi osebe, telo začne proizvodnjo protiteles proti njihovim školjkam (definiranih beljakovin) protiteles in kaj za vsak virus ima svoj posamezni antigen beljakovin. Identifikacija protiteles do antigenov beljakovin v krvi je osnova metode imunoblota. Konec koncev, če protitelo se sooča z antigenom, zagotovo sodelujejo med seboj - "Stick".
Torej, antigeni so na traku traku in, v primeru prisotnosti v krvi osnovnih primernih antigenov, nujno nujno komunicirajo drug z drugim, in na tem mestu, na traku traku, se prikaže indikator - stanovanje (kot preskus nosečnosti). In na določenem kraju traku, zato bo zdravnik razumel, ali obstaja niz beljakovin, značilen za določen virus v krvi.
Torej, na primer, če je center zatemnitve na lokaciji beljakovin gP160, GP120, GP41hIV je diagnosticiran, za druge viruse, bo popolnoma drugačen sklop beljakovin.
Opozoriti je treba, da Imunoblot vam omogoča, da natančno vzpostavite prisotnost virusa samo, če je komplet protiteles v krvi končana, to je, če so beljakovine GP160, GP120, GP41 prisotni hkrati, potem je 100 Okužba z virusom HIV. Ampak, če vsaj eden ni, na primer: GP41 je odsoten, in obstaja samo GP160, GP120, potem se preskus šteje za dvomljiva in zahteva ponovitev.
FAQ.
Katere stopnje vključujejo imunoblot?
- Priprava traku.Pre-prečiščena in uničena na kompozitne komponente, imunsko pomanjkljivost (HIV) je izpostavljena elektroforezi, medtem ko so antigeni, vključeni v HIV, ločeni z molekulsko maso. Nato z blottingom (analog ekstrudiranja na "mokrih" odvečnih črnila "se antigeni prenesejo na nitrocelulozni trak, ki od zdaj naprej vsebuje nevidno podobo antigenske striptične spektra karakteristike HIV.
- Vzorčna študija.Preskusni material (serum, plazma v krvi bolnika itd.) Uporablja se na nitroceluloškem traku), in če obstajajo posebna protitelesa v vzorcu, so povezane s strogo ustrezajo jim (complimentary) antigenske trakove. Zaradi poznejših manipulacij je rezultat te interakcije vizualiziran - to je bilo vidno.
- Razlaga rezultata.Prisotnost pasov na nekaterih območjih nitrocelulozne plošče potrjuje prisotnost v preučevanih serumih protiteles do strogo opredeljenih antigenov HIV.
- Strip A - Pozitivna kontrola
- Strip In - slabosti
- Strip C - negativna kontrola
- Strip D je pozitiven vzorec (zaznana je bila prisotnost protiteles do HIV-1)
Kako dešifrirati analizo?
Če je IFA pokazala prisotnost vseh ali skoraj vseh protiteles do antigenov po tem preskusnem sistemu, to pomeni pozitivno analizo HIV. Če je odgovor po drugem serološkemu imunološke analize pozitiven, je treba izvesti imunoblot. Dekodiranje rezultatov bo bolj pravilno. Če je analiza encimske imunoasala dala pozitiven rezultat, je tudi naslednja analiza imunoblota pokazala HIV, nato pa je končni rezultat nastavljen.
Ko so analize dešifrirane, je treba vedeti, da je pozitiven preskus HIV določena z:
- od 60% do 65% 28 dni po okužbi;
- v 80% - po 42 dneh;
- 90% - po 56 dneh;
- 95% - po 84 dneh.
Če je prejeti pozitiven odziv HIV, bo to pomenilo, da se protitelesa na virus razkrijejo. Da bi se izognili lažnemu pozitivnemu odzivu, morate ponovno prenesti analize, je zaželeno dvakrat. Če se protitelesa proti imunske pomanjkljivosti razkrijejo med dobavo dveh analiz dveh ali z predajo 3 testov v 2, se šteje, da je rezultat pozitiven.
Antigen R 24 se lahko po 14 dneh od datuma okužbe razkrije v krvi. Z uporabo metode imunimalne analize se ta antigen zazna od 14 do 56 dni. Po 60 dneh ni več v krvi. Šele ko se v telesu oblikuje aids, se rast tega beljakovine P24 v krvi ponovi. Zato se preskusni sistemi analize imunoperja uporabljajo za zaznavanje HIV v prvih dneh okužbe, da se ugotovi, kako se bolezen pojavi in \u200b\u200bspremlja postopek zdravljenja. Visoka analitična občutljivost imunopermentalne analize zazna antigena P24 v biološkem materialu v HIV prvega podtipa pri koncentraciji od 5 do 10 pkg / ml, z drugim podtipom HIV 0,5 ng / ml / ml in manj.
Spodaj dvomljiv Rezultat imuno-encimske analize je namenjen, da se je med diagnozo nekje napačno zamenjal medicinski delavci, ali so pri ljudeh obstajali znaki okužbe, rezultat pa je negativen, kar povzroča sum, ki povzroča sum, oseba je posredovana ponovna ocena.
Spodaj lažno pozitiven Rezultat je rezultat, ko je bila izvedena preskuse krvi v naslednjih bolnikovih državah:
- nosečnost;
- Če ima oseba kršeno hormonsko ozadje;
- s podaljšano imunosupresijo.
Kako dešifrirati analizo v tem primeru? Lažni pozitivni rezultat je nameščen, če se razkrije vsaj en beljakovin. Zaradi dejstva, da je antigen P24 zelo odvisen od posameznih različic, nato z uporabo te metode, se v prvem obdobju okužbe zazna z 20% na 30% bolnikov.
Kako zanesljiv je pozitiven rezultat testa?
Včasih ima IFA lažne pozitivne rezultate (približno 1% primerov), vzrok tega rezultata je lahko nosečnost, različne virusne okužbe, kot tudi preprosta nesreča. Po prejemu pozitivnega rezultata je bolj natančen test - imunoblot, ki temelji na rezultatih, od katerih je izdelana diagnoza. Pozitivni rezultat imunoblota po pozitivni ELISA je zanesljiv za 99,9% - to je največja natančnost za vsak medicinski preskus. Če je imunoblot negativen, to pomeni, da je bil prvi test napačen pozitiven, in v resnici HIV pri ljudeh.
Kaj je nedoločen (dvomljiv) rezultat?
Če je IFA pozitivna ali negativna, je lahko imunoblot pozitiven, negativen ali negotov. Nedoločen rezultat imunoblota, t.j. Prisotnost vsaj enega proteina v imunoblotu se lahko opazi, če se je okužba pred kratkim zgodila, in obstaja manj protiteles za HIV v krvi, v tem primeru bo imunoblot po nekaj časa postal pozitiven. Tudi nedoločen rezultat se lahko pojavi v odsotnosti okužbe s HIV v hepatitisu, nekatere kronične presnovne bolezni ali med nosečnostjo. V tem primeru bo imunoblot negativen, ali pa bo ugotovljen vzrok negotovega rezultata.
Koliko je analiza?
Imunoblot na HIV ne velja za poceni raziskave. V povprečju, pregled presejanja z imunoferment metode stane od 500 do 900 rubljev. Imunoblotiranje je študija preverjanja, katere stroške se gibljejo od tri do pet tisoč rubljev. Bolj zapletene metode so veliko dražje. Na primer, za analizo verižne reakcije polimeraze (PCR), bo potrebno plačati približno 12.000 rubljev.
Kje narediti analizo?
Kje lahko prenesem HIV? ELISA, Imunoblotova raziskava se izvaja v mestnih zasebnih klinikah, rezultati se izdajo čez dan. Nujna diagnostika je možna. V državnih zdravstvenih ustanovah se preskusi IFA in imunobrotiranje izvajajo brezplačno, v skladu z zakonodajo Ruske federacije. V obveznih, so nosečnice pregledane za nalezljive bolezni, pa tudi bolnike, ki imajo hospitalizacijo ali operativno posredovanje.
IMMUNOBLOTING -(Iz angleščine. «Blot je madež) - metoda identifikacije antigenov (ali protiteles) z znanimi serumi (ali antigeni). To je kombinacija gel elektroforeze iz ELISA. Sprva se bakterijske celice ali virione uničijo z ultrazvokom, nato pa metoda elektroforeze ločuje vse antigene virusa ali bakterijskih celic in prejmejo komercialni reagent na posebnem nitroceluloškem filmu. Pri izvajanju imunablota na filmu z znanimi antigeni, se uporablja preučen serum bolnikov. Po inkubaciji in pranju nepovezanih protiteles se je začela v ELISA - antiserum se nanese na imunoglobulin osebe, označena z encimom, in kromogeni substrat, ki spreminja sliko, ko se medsebojno vpliva na encim. V prisotnosti kompleksov antigena protitelesa-anti-SVENS na imunoglobulin-encim na nosilcu, pobarvane madeži. Metoda imunoblotiranja vam omogoča ločeno zaznavanje protiteles na različne antigene patogena (na primer z okužbo z virusom HIV, imunobrotina razkriva protitelesa na GP120, GP24 in druge virusne antigene).
Radioimunska analiza (RIA)
Metoda temelji na reakciji antigena protitelesa z oznako antigena ali radionuklidom protitelesa. Kot nalepka uporablja 125i, 14c, 3H, 51CR in drugih radionuklidov. Nastali imunski kompleksi so izolirani iz sistema in določijo radioaktivnost na števcih (β-sevanje). Intenzivnost sevanja je neposredno sorazmerna s številom priključenih antigenov in protiteles molekul.
Solidna fazna različica RIA z uporabo označenih protiteles ali antigenov, sorbed v luknjah polistirenskih plošč, je zelo razširjena.
RIA se uporablja za identifikacijo mikrobov, virusov, različnih hormonov, encimov, zdravilnih snovi, imunoglobulins, kot tudi druge snovi, ki jih vsebuje gradivo, ki je predmet študija v manjših koncentracijah 10-12-10-15 g / l.
Nadzorna vprašanja.
Reakcija imunske bakteriolizacije: Kakšna je ta reakcija; Kaj je antigen, ki - protitelesa, reakcijski mehanizem, metode formulacije, praktična uporaba. Reakcija imunske hemolize: potrebne sestavine, metode formulacije; Nadzor, praktična uporaba. Odziv lokalne hemolize v gel (reakcija zlata): načelo reakcije, metode formulacije, praktične uporabe. Dopolnilo zavezujoča reakcija: Načelo reakcije; ki se oblikuje v interakciji imunskih serumov s posebnim antigenom; Kaj se zgodi z dopolnilom, če je prisoten hkrati? Kakšna je usoda dopolnila v primeru, da med antigenom in protitelesa ni specifične afinitete? S pomočjo, katere reakcije se lahko določi, kaj se je zgodilo z dopolnilom; zakaj se ta reakcija uporablja; Kakšen je viden pozitiven rezultat RSK? Zakaj? Kakšna je lastnina v prvi fazi RSK? V drugi fazi? Če je končni RSK hemoliza, kaj to pomeni - pozitiven ali negativen rezultat? Pojasnite rezultate: RSK + + + +, RSK + + +, RSK + +, RSK +. Poimenujte sestavine prvega sistema RSK in sestavin drugega RSK sistema. Zakaj bi se testni serum inaktiviran? Kako titrirati dopolnilo? Hemolitični serum: Kaj vsebuje, kako dobijo, kaj je titer in kako ga določiti? Katere živali se uporabljajo za pridobitev RSK komponent? Metodologija RSK na mrazu. Pri določanju, iz katerega je potrebno od naštetih reakcij, ki so potrebni za dopolnitev, je treba padavine, flokulacija, aglutinacija, odkrivanje nepopolnih protiteles, imunska bakteriolizacija, imunska hemoliza, raziskava, RSK? Imunofluorescenčna reakcija (greben) - Podajte zaporedje dogodkov z neposredno reakcijo Kuns; Potrebne sestavine. Kaj je antigen, ki - protitelesa kot označena protitelesa, saj se upošteva rezultat reakcije, kakšen je pozitiven rezultat? Praktična aplikacija - Kaj je mogoče določiti s to reakcijo? Posredna imunofluorescenčna reakcija - Podajte zaporedje dogodkov s to reakcijo, potrebne sestavine, ki so antigen, ki se uporabljajo imunski serumi; praktična uporaba; Prednost posrednega grebena v primerjavi z neposredno reakcijo. Analiza imunoenimen (IFA) - načelo reakcije; potrebne sestavine; Podajte zaporedje dogodkov, ko reakcijska formulacija, da se antigen odkrije v materialu v študiji; potrebne sestavine; Kaj se zgodi s pozitivnim rezultatom, kaj izgleda? Navedite zaporedje ukrepanja pri izvajanju ELISA, da se odkrijete protitelesa v preskusnem serumu; potrebne sestavine; Kaj se zgodi s pozitivnim rezultatom? Imunoblotting je načelo reakcije; Glavni koraki; potrebne sestavine; Ker se rezultat upošteva; Prednosti reakcije. Radioimunska analiza (RIA) - iz katere osnovne faze je reakcija reakcija; Kaj je označeno z protitelesa ali antigeni, kako se upošteva rezultat? Načelo metode imunoelektronske mikroskopije; Glavni koraki; potrebne sestavine; kot označena protitelesa; Kot je posledica reakcije. Imobilizacijske reakcije - načelo metode, proizvodnja tehnik, komponente, računovodske rezultate.
Naloge za izvajanje v procesu samoizvajanja.
Izpolnite tabelo "reakcijo imunitete" glede na reakcije, ki so bile razstavljene v okviru te teme.
Odzive na odpornost
Študentsko delo v praktični lekciji
Delo takoj začnete z nastavitvijo 1 faze RSK, vendar za snemanje prenosnika pozneje (glejte spodaj).
1. Reakcija imunske hemolize. Oglejte si demonstracijsko reakcijo imunske hemolize, skico v obliki sheme, razložite rezultat v izkušenih in kontrolnih cevi.
2. Dopolnitev zavezujočega odziva
a) razstavljanje RSK na tabeli;
b) narišite prenosni računalnik, ki je nastavitev RSK v obliki tabele;
c) postavite drugo fazo RSK (prva faza je nameščena na začetku razreda);
d) razstavljanje diagnostičnih pripravkov, potrebnih za RSK;
e) upošteva rezultat. Oblikovati zaključek o prisotnosti posebnih protiteles v preskusnem serumu.
3. Imunofluorescenčna reakcija. Raziščite tabelo, naredite grafikon reakcijske formulacije v prenosniku; Poglejte diagnostični serum; Določite - ki vsebuje serum, kot je kuhano, za katero reakcijo (neposredni ali posredni greben), ki ga uporablja. Oglejte si demonstracijski rezultat grebena v luminiscenčnem mikroskopu.
4. Analiza Imuno Encim (ELISA). V prenosni računalnik je diagram reakcijske formulacije v dveh različicah: za zaznavanje antigena v materialu v študiju in zaznavanje serumskih protiteles. Oglejte si niz sestavin za diagnosticiranje okužbe s HIV in hepatitisom V. Ugotovite, da vsebuje vsako sestavino in za katero se uporablja.
5. Imunoblotiranje. V prenosni računalnik naredite reakcijsko shemo; Poglejte demonstracijo - rezultat reakcije.
6. Radioimunska analiza (RIA). V prenosni računalnik naredite reakcijsko shemo.
7. Imunska elektronska mikroskopija (IEM). Poglejte demonstracijo - rezultat reakcije, je reakcijska shema v prenosnem računalniku, navedite roke antigen (virus) in označena protitelesa.
Imunoblotting je zelo občutljiva metoda za odkrivanje beljakovin, ki temelji na kombinaciji elektroforeze in ELISA ali RIA. Imunoblotiranje se uporablja kot diagnostična metoda za okužbo s HIV itd.
V splošnem smislu Immunoblotting razume analizo mešanice beljakovin, prenesenih na trdno podlago-membrano, s katero so povezane s kovalentnimi vezi, ki mu sledi imunodekcija.
Zmes beljakovin, ki se neposredno uporabljajo za analizo substrata - ali po njegovi predhodni frakcioniranju z metodami elektro-elektroforeze ali dvodimenzionalne elektroforeze - Western blot analize (Western blotting).
Antigeni patogena so ločeni z elektroforezo v poliakrilamidnem gelu, nato jih prenesejo iz gela na aktiviran papir ali nitrocelulozno membrano in se manifestirajo z uporabo ELISA.
Podjetja proizvajajo takšne trakove z "bloti" antigenov. Za te trakove se uporablja bolni serum. . Potem, po inkubaciji, se ukradejo iz nereaktivnih protiteles bolnika in seruma proti humanim imunoglobulinom, označeno z encimom . Kompleks (antigen + protitelo + protitelo + protitelesa + antigen + antigena + protitelo) je zaznana z dodatkom kromogenega substrata, ki spreminja barvo pod delovanjem encima.
Takšna metodologija se uporablja tudi za izbiro bakterij, fagel ali virusov, ki izražajo ciljne klonirane genske izdelke.
Prenos beljakovin na membrano se izvede pasivno ali z uporabo opreme za elektriko. Na učinkovitost prenosa beljakovin na membrano vplivajo številni dejavniki, kot so molekulska masa beljakovin, gelsko poroznost, čas prenosa in sestava uporabljene puferske raztopine (transfer).
Glede na naloge in pogoje eksperimenta so izbrani prenosni pogoji, ki zagotavljajo najboljše rezultate. Nitrocelulozna, polivinildendyluorid (PVDF) ali pozitivno napolnjene najlonske membrane se običajno uporabljajo kot substrati. Nitroceluloza se lahko veže na 80 - 100 μg beljakovin na 1 cm2.
Beljakovine nizke molekulske mase (z molekulsko maso manj kot 20 kDa) se lahko izgubijo zaradi umivanja sposobnosti, da pre-raziskovanje polimorfizma nekaterih genetskih lokus na dolžine ustreznih fragmentov omejitve DNA.
Poleg tega, uporaba hibridizacije po SAREW, je enostavno ugotoviti, ali ima ciljni gen del hidrolize določene omejitve v svojem notranjem delu, ki vam omogoča, da izberete optimalno strategijo za kloniranje preučenega genoma območja.
S podobno shemo agaroza gela na nitroceluloškem filtru se lahko prenesejo molekule RNA. Ta metoda je imenovala severno blotting (severno blotting), v nasprotju z južnim blottingom, saj priimek južnega južnega jezika pomeni "južno".
Prenos na filtre iz beljakovinskega gela je bil imenovan zahodni blotting (zahodni blotting). Velike beljakovine (več kot 100 kDa), denaturirano v raztopini natrijevega dodecil sulfata (SDS), se lahko šibko prenesejo na membrano, če je etanol prisoten v transferju Trans. Alkohol bistveno izboljša prenos beljakovin s SDS poliakrilamidnim gelu, vendar zože pore v gelu, kar vodi do zamude velikih beljakovin.
Membrana PVDF je optimizirana za imunodezijo in je sposobna obdržati posebej povezane beljakovine do 160 μg / cm2 na zelo nizki ravni nespecifične vezave.
Imunobloting.
Pomembna lastnost te membrane je možnost ponavljajoče se uporabe. Zeta-sonda najlonske membrane učinkovito povezujejo beljakovine SDS v odsotnosti alkohola, ta vezava pa je odporna na nadaljnje zdravljenje. Prav tako se učinkovito odkrijejo beljakovine z nizko molekulsko maso. Zaradi visoke zmogljivosti vezave - približno 480 μg beljakovin za 1 CM2 - Zeta-sonde membrane omogočajo odkrivanje sledenih količin proteina v analiziranih mešanicah.
Ko se antigen izkaže, da je na membrana imobilizirana, preostali vezivni centri blokirajo želatinske raztopine ali goveje serumski albumin ali posneto mleko.
Membrana je nato inkubirana v raztopini poliklonskih ali monoklonskih protiteles do anti-gena v študiji. Po pranju nevezanih protiteles, membrana inkubiramo v raztopini sekundarnih protiteles, ki so alkalni fosfataze encimski konjugat (alkalna fosfataza, AR) ali horseradish peroksidaza (horseradish peroksidaza, HRP) z anti-ljubezenskimi protitelesi (kozje protitelesa na imunoglobulinu zajec, miško ali ljudstvo) ali beljakovin (Staphylococcus aureus protein) ali g (protein streptococcus sp.), ki imajo visoko afiniteto na FC regije imunoglobulinov.
Odkrivanje izobraženih imunskih kompleksov se izvaja s kemičnim ali kemikalnim načinom. Substrati za kemično reakcijo z alkalnim fosfatazo konjugates so 5-broma-4-klor-3-indolilfosfat (BCIP) ali tetrazolium modra (NBT), in pri uporabi Krena peroksidaze konjugatov - 4-klor-1-naftola in vodikovega peroksida.
Kot posledica encimskih reakcij na membrani, je pobarvan trak ali mesto tvorijo na lokalizacijskem mestu kompleksa antigena protitelesa.
Občutljivost te metode je 100 GHG protein pri uporabi AR in 100-500 GH konjugatov pri uporabi HRP konjugatov. Kemiluminescenčni zaznavanje imunskih kompleksov vam omogoča, da določite manj kot 5 Pg antigena. Načelo te metode je v tem, da se pri reakciji HRP z vodikovim peroksidom in cikličnim diasilhilhidrazinluminom, emisija svetlobe valovne dolžine 428 Nm, ki se lahko pritrdi na fotosenzitivni film.
Imunoblotirna reakcija (RI) se razvija na podlagi ELISA. To je najbolj specifična in občutljiva metoda imunokemične analize. Imunoblotting (iz angleškega blota - sijaj, madež) združuje IFA z elektroforezo. Uporablja se za prepoznavanje nedeflekska protitelesa na HIV, in protitelesa na svoje ločene strukturne beljakovine (proteins-p24, glikoprotein-GR120, GR 41 itd.). Glejte strokovne (podporne) reakcije diagnostike okužbe s HIV.
Reakcijo izvedemo v več fazah:
Virus uničujejo komponente - antigeni (P24, GR120, GR 41 itd.), Ki so podvrženi elektroforezi v poliakrilamidnem gelu, to je ločitev antigenov na frakcijah molekulske mase.
2. Gel je prekrit z membrano nitroceluloze in frakcije antigenov se prenesejo na uporabo elektroforeze. Nitroceluloza se obnaša kot zalivanje papir. Membrana je narezana na trakove (trakovi). Podjetja proizvajajo takšne trakove z "bloti" antigenov.
Imunoblotiranje - dodatna posredna metoda
Streaps s HIV antigeni, ki se uporabljajo na njem, so potopljeni v serum pregledanega in nato izperite od nepristranskega materiala.
4. STREAP-ji inkubiramo z antihilobulinski serumom, označeno peroksidazo, oprati.
Opozan je substrat in številu poslikanih frakcij (točk), ki ustrezajo lokalizacijski coni AG-AG-AG kompleksa.
Prisotnost trakov na določenih delih traku potrjuje prisotnost protiteles v preučevanem serumu, da strogo definirajo antigene HIV. Rezultat imunobrotiranja se šteje za pozitivno, če membrana prikazuje pasove, ki ustrezajo kateri koli dvema od treh HIV antigenov - P24, GP41 in GP 120 (Sl. 37).
Slike.
Seznam rabljenih literatura
Glavna literatura.
Medicinska mikrobiologija, virologija in imunologija: učbenik za študente medu. Univerze 2. Ed., Univerza. in dodajte. - 702 str. Ed. A.A. Sparrow. M.: MIA, 2012.
2. Mikrobiologija, virologija in imunologija: priročnik za laboratorijske razrede: študije. Žrtve / (V.B.subacov itd.); Ed. VB Subachakova, M.M. Karapatsa. M .: Gootar Media, 2014.- 3202.: IL.
3. Medicinska mikrobiologija, imunologija in virologija [Elektronski vir]: Vadnica za medu.
univerze - 760 str. - Način dostopa: http://www.studmedlib.ru/book/isbn9785299004250.html Kijiyev a.i., Badichev S.A. St. Petersburg: speclit, 2010.
4. Medicinska mikrobiologija, virologija in imunologija [Elektronski vir]: Vadnica: v 2 t. / T. 1. - 448 str. - Dostop do načina dostopa: http://www.studmedlib.ru/book/isbn97859704142241.html ZverEV V.V., Boychenko M.N.
M.: Gootar Media, 2010.
5. Medicinska mikrobiologija, virologija in imunologija [Elektronski vir]: Vadnica: 2 ton. T. 2. - 480 str. Način dostopa: http://www.studmedlib.ru/book/isbn97859704142242.html ZverEV V.V., Boychenko M.N. M.: Gootar Media, 2010.
Dodatna literatura.
1. Imunodiagnostične reakcije: Vadnica / Stroški: G. K. DAGLETSHINA, Z.G. GAGABIDULLIN, A.A. AAHTARIEVA, M.M.TUIGUNOV, A.K. BULGAKOV, T.A. SAVCHENKO, R.F.
Hunarizanova, Yu.z. Gabidullin, M.M. Elsynbaev - UFA: Založba GBOU VPO BGMU na Ministrstvu za zdravje Rusije, 2016. - 86c.
2. Značilnosti nekaterih lastnosti, ki določajo patogeni potencial Enterobacter, Citrobacter, Serratia, E. coli, Proteus, Serracija, E. coli, Proteus: Znanstvena izdaja / Yu. Z. Gabidullin, Rs Sufiyarov, II Dolgushin - UFA, 2015. - 250 s.
Domov »Imunoblot - kaj je to? Imunoblot pri diagnozi nalezljivih bolezni
Imunoblot - kaj je to? Imunoblot pri diagnozi nalezljivih bolezni
Kaj je imunoblot? To je skupna metoda laboratorijske diagnostike človeških virusnih okužb. To je eden najbolj natančnih in zanesljivih načinov za odkrivanje HIV.
Za zanesljivost, je še več kot encimsko povezan test imunosorbent (ELISA). Rezultati imunoblota se štejejo za neizpodbitno in končno.
Imunoblot - kaj je to? Da bi prepoznali osebo HIV, morate opraviti laboratorijsko preskusno metodo krvnih serumov za protitelesa.
Oddelki zahodnega blota se imenujejo tudi zahodni blot (zahodni blot). Uporablja se za odkrivanje človeških virusnih okužb kot dodatno strokovno metodo. To je potrebno potrditi študijo ELISA - laboratorij, ki omogoča, da se določi prisotnost protiteles do HIV v krvi. Imunoblot se je odpovedal pozitivne ELISA.
Šteje se, da je najbolj občutljiva, kompleksna in draga.
Namen
Kaj je imunoblot? Ta metoda laboratorijskih testnih serumskih testov za prisotnost protiteles na virus.
Med posebnimi raziskavami so skupne virusne beljakovine v gelu in nitroceluloznih membranih.
Imunoblotiranje (odkrivanje protiteles v serumskih bolnikih do nekaterih antigenov patogena)
Oblikovani postopek za odseke zahodnih blotov za določitev okužbe s HIV na različnih fazah. V prvi fazi je prečiščeni virus iz sestavnih delov izpostavljen elektroforezi in antigenom, ki so vključeni v njegovo razdeljeno na molekulsko maso.
Virus humane imunske pomanjkljivosti v živih celicah, ki se izvajajo v njegovih genetskih informacijah. Na tej stopnji, oseba postane nosilec virusa HIV, če ste bili okuženi.
Posebnosti te bolezni je v tem, da se dolgo ne manifestira dolgo časa. Virus uničuje limfocite, zato oseba zmanjšuje imuniteto in telo ne more obravnavati okužb.
Če je HIV pravilen in pravočasen zdravljen, bo bolnik živel v globoki starosti. Pomanjkanje zdravljenja neizogibno vodi do smrti. Od okužbe, vendar brez zdravljenja, največje obdobje največ deset let.
Lastnosti
Analiza imunoblota je zanesljiva metoda, ki vam omogoča, da določite prisotnost protiteles do antigenov HIV prve in druge vrste.
Če je oseba okužena, po dveh tednih protitelesa, ki jih je mogoče ponovno odkriti pozneje. Značilnost HIV je, da se količina protiteles hitro poveča in ostane v pacientovi krvi. Tudi če so prisotni, se bolezen morda ne manifestira za dve ali več let. Metoda ELISA ne natančno označuje bolezni, ki zahteva potrditev rezultatov iz razdelkov PCR in zahodnih blotov, če je imuno-improstinalna analiza pokazala pozitiven rezultat.
Indikacije K.
Kakšno "imunoblot" je že izvedel, vendar se uvedejo v študijo?
Razlog za pregled virusa humane imunske pomanjkljivosti (HIV) Immunoblot bo postal pozitiven rezultat ELISA. Pri bolnikih, ki morajo imeti operacijo, je treba iti skozi analno analizo trdne faze. Poleg tega morate analizirati nosečnost žensk, kot tudi tiste, ki dvigujejo grdo življenje. Oddelki zahodnega blota so predpisani bolnikom z okužbo s HIV, če so rezultati ELISA dvomljivi.
Naslednji moteči simptomi so lahko razlog za dostop do zdravnika: hitra hujšanje; šibkost, izguba funkcij; črevesne motnje (driska), ki traja tri tedne; dehidracija; zvišana telesna temperatura; povečanje kandidatov v telesu; razvoj kandidatov , tuberkuloza, pljučnica, toksoplazmoza, poslabšanje herpes.
Pacienta ni treba pripraviti pred predajo venske krvi.
Za 8-10 ur pred preskusom ne jejte. Ne priporočamo dan pred krvi pitja alkohola in kavnih pijač, težka vaja, obupanost.
Kje narediti analizo?
Kje lahko prenašam testiranje HIV?
ELISA, Analiza Imunoblota, ki se izvajajo v mestnih zasebnih klinikah, so rezultati dani čez dan. Nujna diagnostika je možna. V javnih ustanovah, ELISA medicinskih testih in zahodni blot razdelek brezplačno, v skladu z zakonodajo Ruske federacije.
Obvezen pregled na infekcijskih boleznih nosečnic in bolnikov, ki potrebujejo hospitalizacijo ali operacijo. Kako se ta študija odvija?
Kako držati ELISA? Imunoblot pozitiven / negativno potrjuje ali zavrača rezultate ELISA. Postopek je precej preprost. Specialist vzame ograjo venske krvi, traja manj kot pet minut s časom.
Po vzorčenju je treba mesto injiciranja razkužiti in obtičati z ometom. Ograja se izvede na prazen želodec, tako da po postopku ne bo bolelo, da bi jedli grenko čokoladno ploščico ali sladko toplo pijačo.
Da bi dobili napotitev za brezplačno analizo v državni medicinski ustanovi, morate obiskati terapevt.
Na splošno se imunoblot ne razlikuje od drugih študij krvi z ograjo. Metodologija študije je preprosta. Če je virus prisoten v krvi osebe, se telo za njegovo uničenje začne proizvajati protitelesa. Za vsak virus je veliko antigenov beljakovin. Odkrivanje teh protiteles je osnova oddelkov zahodnega blota. Stane
Koliko analize? IMMUNOBLOT HIV se nanaša na poceni raziskave.
V povprečju so metode presejanja imunOasay od 500 do 900 rubljev. Western blots oddelkov je preučiti pregled, katere stroške se gibljejo od tri do pet tisoč rubljev. Bolj zapletene metode so veliko dražje. Na primer, za analizo verižne reakcije polimeraze (PCR), bo treba plačati približno 12.000 rubljev.
Razlaga rezultatov
Najpogostejše metode diagnosticiranja okužbe z virusom HIV je imuno-immonalna analiza in imunoblot.
Za določanje protiteles do virusa človeške imunske pomanjkljivosti. Okužbe običajno potrjujejo dva preskusa: pregledovanje in potrjevanje. Razlaga rezultatov je treba opraviti zdravnik, diagnosticira in predpisuje zdravljenje. Če je imunoblot pozitiven, to pomeni, da je v človeškem telesu virus.
Pozitivni rezultat ne bi smel biti razlog za samozdravljenje, saj lahko vsak bolnik ima svoje bolezni bolezni.
Kvalitativna analiza vključuje pregledovanje in certificiranje. Če bolnik ne zazna virusa, rezultat kaže "negativno". Ko je bilo to potrdilo zaznano, se pregledovanje izvaja dodatne raziskave. Analiza imunoblota, ki potrjuje ali zavrača pregled. Če se preskusni trakovi pojavijo v zatemnitvi nekaterih območij (lokalizacija beljakovin), se diagnoza HIV diagnosticira.
Če so rezultati dvomljivi, se preskusi izvedejo v treh mesecih.
Da bi preprečili okužbo virusa humane imunske pomanjkljivosti, je mogoče izpolniti določena pravila: Izogibajte se naključnim spolnim stikom, uporabite kondome pri stiku, ne uporabljajte zdravil.
Če je bolezen zaznana v nosečnicah, je pomembno, da sledite priporočili zdravnika, ne pozabite na preskuse za prisotnost virusa.
Kaj je zahodno blotting?
Identifikacija beljakovin srčnih mešanic ali izvlečkov različnih tkiv je ena najpogostejših nalog. Z uporabo takšnega orodja kot specifičnih protiteles lahko definirate preučevano protein z minimalnimi začasnimi in finančnimi stroški.
V zahodni metodi za blotting (Western Blotting) v prvi fazi je mešanica beljakovin ločena z elektroforezo v prisotnosti natrijevega dodecil sulfata (DSN), nato prenese na nitrocelulozno membrano z metodo elektropterja.
Bistvo te metode je, da se gel po elektroforezi postavljen na nitrocelulozno membrano med plastmi filtrirnega papirja. Na ta način se "sendvič" sestavlja na električni polju, tako da se kompleksi proteina-DSN gibljejo po ploščni plošči ploščo in so imobilizirani (kot posledica nespecifične sorpcije) na površini nitrocelulozne membrane.
V vezavi kompleksa protein-DSN z membrano nitroceluloze, so sodelujejo v glavni sili električne narave, in ta interakcija je večtočja in vodi do "oblikovanje" beljakovin na površini membrane. Tako, po električnem sodu, smo dobili repliko gel na nitrocelulozo z beljakovine, ki se nahajajo na enak način kot v poliakrilamidni gel.
Po izvedbi DSN - elektroforeza, električne poti in sorpcijo beljakovin iz gela na nitrocelulozno membrano, se terciarna konformacija proteina močno spreminja, če na splošno pravilno govori o obstoju terciarne strukture za protein po taki togi predelavi. Zato se za imunokemično odkrivanje proteina v študiju, samo mono- ali poliklonska protitelesa, specifičnost beljakovinske molekule, običajno uporabljajo.
51. Imuno-imunimalna analiza, imunoblotiranje. Krzno, komponente, uporaba.
Protitelesa, specifična za konformacijske epitope (ali območja, vključno s stiki v Interpreshing), običajno niso primerna za uporabo v metodi Western Blot.
Po prenosu beljakovin je membrana zaporedno inkubirana s protitelesi, specifičnimi za protein, in nato s sekundarnimi protitelesi, specifičnimi za FC fragmente primarnih protiteles, konjugiramo z encimsko (ali drugo) nalepko (sl.
1 a). V primeru, ko je oznaka konjugirana neposredno primarni, specifični antigen protitelesa, sekundarna protitelesa niso potrebna (sl. 1 b). Imunski kompleksi "se manifestirajo", ki so nastali v lokalizaciji preučevanega proteina z uporabo kromogenega substrata (odvisno od vrste oznake).
Občutljivost in specifičnost metode je zelo odvisna od tega, katera protitelesa se uporabljajo med raziskavami.
Uporabljena protitelesa mora biti specifična za edinstveno, značilnost preučevanega proteina aminokislinske sekvence. V nasprotnem primeru je možno interakcijo (zlasti v primeru grobih izvlečkov beljakovin) protiteles z več beljakovinskimi molekulami, kar bo povzročilo videz več barvnih trakov na membrani.
Identifikacija proteina v tem primeru v tem primeru je pogosto težko ali nemogoča.
Drugi pomemben dejavnik, ki ga je treba spomniti pri izbiri protiteles, je afiniteta. Višja je afiniteta uporabljenih protiteles, svetlejši in bolj jasno, da so beljakovinski trakovi doseženi, višja je občutljivost metode. Pri uporabi zdravila Enafiet protitelesa je mogoče doseči občutljivost 1 ng in še višje.
Da bi vizualizirali rezultat interakcije membrane antigena in protiteles, se uporabljajo sekundarna protitelesa, konjugirana s sredstvi, ki omogočajo določen signal pod določenimi pogoji.
Običajno se encim (peroksidaza ali fosfataza) uporablja kot tak sredstvo, produkt reakcije pa je pobarvan in pade na membrano kot netopno oborino.
Tudi v tej metodi je mogoče uporabiti fluorescentne oznake.
Sl. 1. Shema imunokemičnega obarvanja beljakovin v študiji: a - uporaba sekundarnih protiteles, konjugiranih z encimsko oznako; B - Primarno protitelo neposredno konjugiramo z encimsko oznako.
Protokol:
I. Priprava gela in membrane in beljakovin Elektrika
Poliakrilamidni gel po elektroforezi, ki se nahaja v puferski kopeli za blottiranje (25 mm tris, pH 8,3, 192 mm glicin, 10% etanola).
Dva lista filtrirnega papirja, narezana na obliki kasete za blotting in navlažena s smuči za blot, so nameščena na tisti del kasete, ki bo naslovljena na anodo. Potem je nitrocelulozna membrana nameščena na filtrirni papir, ki sledi zračnim mehurčkom med membrano in papirjem.
Po tem je treba gel skrbno postaviti na membrano, ki posebno pozornost nameni odsotnosti zračnih mehurčkov med gelom in membrano. Nastanek sendviča je zaključen dva sloja navlaženega filtrirnega papirja, ki se namesti na gelno površino (sl. 2). Nastali sendvič je vpeljan v kaseti in je nameščen med elektrodami, tako da se membrana sooča s anodo.
Sl. 2. Shema električnih beljakovin na membrani.
II. Elektrika
Proteini električne energije na nitrocelulozni membrani se izvajajo v pufru, ki vsebuje 25 mm Tris, pH 8,3, 192 mm glicin, 10% etanola za 30-50 minut pri konstantni napetosti 100 V.
Čas električnega soda je odvisen od velikosti prenosnih beljakovin, več beljakovin, daljši je električni sod. Ocenjena je kakovost električne energije in lokacija beljakovinskih pasov, obarvamo nitrocelulozno membrano z 0,3% raztopino Ponceau s v 1% ocetne kisline. Pred vodenjem imunokemičnega obarvanja je treba membrano večkrat splakniti šibko alkalno vodno raztopino Trisovo raztopino, da odstranite barvanje z beljakovinami.
III. Imunokemično obarvanje beljakovin imobilizirano na nitrocelulozni membrani
Če želite blokirati nonspecifične vezavne kraje protiteles, se membrana inkubira s konstantnim mešanjem pri sobni temperaturi 30 minut do PBST (za boljšo ključavnico, raztopino PBST, ki vsebuje 10% suho posneto mleko).
Po blokiranju je membrana inkubirana za eno uro pri sobni temperaturi in konstantni mešanje v PBST, ki vsebuje 1-10 μg / ml specifičnih protiteles.
Optimalna koncentracija protiteles je izbran empirično in je odvisna od afinitete interakcije protiteles z antigenom.
Na koncu inkubacije je membrana oprana 5-krat PBST in prenos na raztopino sekundarnih protiteles, konjugiramo s hrenom peroksidazo. Konjugata vzreje običajno označuje proizvajalec na embalaži, ali ga izbere raziskovalec empirično. V raztopini sekundarnih protiteles se membrana inkubira 1 uro s stalnim mešanjem.
Po temeljiti pranju (najmanj 5 - 6-krat, se PBST membrana prenese na raztopino kromogenega substrata, ki vsebuje 3 mg diaminobenzidina (dB) in 10 μl 30% vodikovega peroksida v 10 ml 0,1 M TRIS-HCl , pH 7.6.
Inkubacija se izvaja z mešanjem 5 - 10 minut. Membrana po koncu inkubacije s substratom je treba speremo s PBST, suho, žarečim s filtrirnim papirjem in takoj naredite elektronsko kopijo, skeniranje v barvi. Če je membrana popolnoma posušena, so opraskani beljakovinski trakovi bledi, slika pa je manj svetla in kontrast.
Opomba: Dub je strupena snov in potencialni rakotvorni. Delo samo v gumijastih rokavicah!
Njegovo ime aids Vyacheslav Zalmovich Tarantul
Imunoblotiranje - dodatna posredna metoda
Poleg IFA, v nekaterih primerih, se postopek, imenovan "Imunoblotting" ali "imunski blot", uporablja za preskušanje okužbe s HIV (včasih imenovano "Western Blot"). Na priporočilu WHO se imunoblotiranje uporablja pri diagnozi okužbe s HIV kot dodatno strokovno metodo, ki mora potrditi rezultate ELISA. Običajno ta metoda preveri pozitiven rezultat za ELFA, saj se šteje za bolj občutljivo in specifično, čeprav bolj zapleteno in drago. Toda pred podpisom zadnjega stavka bolniku mora zdravnik zagotoviti popolnoma v pravilnosti diagnoze. Zato se vprašanje zapletenosti in visokih stroškov ne more biti odločilno.
Program, kot tudi pri načinu izvršitve na imunsko blotting, je dobro znano izražanje "prinese na mokro", je zelo primerna. Imunsko blot združuje analizo imunoasay (ELISA) s predhodno elektroforetno ločevanje virusnih beljakovin v gelu in njihovega prenosa na membrano nitroceluloze ("kovana"). Postopek imunoblota je sestavljen iz več stopenj (sl. 27). Prvič, predhodno prečiščeni in uničeni na kompozitne komponente HIV, je izpostavljen elektroforezi, medtem ko so vsi antigeni, vključeni v virus, ločeni z molekulsko maso. Nato z blottingom (analog ekstrudiranja na "mokrih" odvečnih črnila "se antigeni prenesejo iz gela na nitrocelulozo ali najlon filtrirni trak, ki od zdaj naprej vsebuje nevidno oko spektra beljakovin, značilnih za HIV. Poleg tega je trak cenjen material (serum, pacientova krvna plazma itd.), In če obstajajo posebna protitelesa v vzorcu, so povezane s strogimi ustreznimi trakovi beljakovin-antigenov. Kot posledica naknadnih manipulacij (podobno IFA) je rezultat te interakcije vizualiziran - je narejen viden. Navsezadnje prisotnost pasov na določenih delih Strepa potrjuje prisotnost v preučevanih serumih protiteles do strogo opredeljenih antigenov HIV.
Imunsko blot se najpogosteje uporablja za potrditev diagnoze okužbe s HIV. Kdo meni, da pozitivne serumi, v katerih protitelesa na katere koli dve proteini HIV lupine zaznajo s imunskim blotom. Po teh priporočilih, če obstaja reakcija z le eno od beljakovin lupin (GP160, GP120, GP41), v kombinaciji ali brez reakcije z drugimi beljakovinami, se rezultat šteje za dvomljivo in ponovno preučiti z uporabo niza druge serije ali drugo podjetje. Za varnostne pohvale, če
Sl. 27. Za imunoblotiranje na prvi stopnji, beljakovine, ki jih v serumu, ločeno v gelu z njihovo molekulsko maso in polnjenje z uporabo električnega polja (z elektroforezo v gelu). Nato se gel uporablja za nitrocelulozo ali najlonsko membrano in "zagozditev" (to je blotting). To se izvaja v posebni komori, ki vam omogoča, da izvedete popoln perilo gelnega materiala na membrani. Rezultat je slika lokacije beljakovin, ki je bila na gelu, je reproducirana na membrani (blot), iz katere se še bolj enostavno manipulira. Na začetku se membrana zdravi s protitelesi na želeno antigen, po tem pa se doda nepovezan material, se doda radioaktivno označen konjugat, ki se posebej veže na protitelesa (kot v ELISA). Lokacija nastalega kompleksa "antigenska protitelo - označena s konjugatom" se določi z uporabo avtoradiografije z rentgenskim filmom. Po njegovi manifestaciji postane jasno, ali obstajajo antigeni v krvi ali pa jih ni, potem pa rezultat ostaja dvomljiv, se poznejše opazovanje priporoča šest mesecev (raziskava se nadaljuje vsake tri mesece).
Sedanjost v Ruski federaciji za uporabo pri diagnosticiranju okužbe s HIV je priporočljiva za uporabo petih preskusnih sistemov, med katerimi so tako ruske kot tuje.
Iz knjige anesteziologije in oživljanja Avtor Marina Aleksandrovna Kolesnikova. Iz knjige čudenosti našega telesa. Zabavno anatomijo Stephen Juang. Iz metode prve pomoči Nikolai Berg. Iz knjige kot 100% za prenehanje kajenja, ali ljubezen in spremeniti svoje življenje Avtor David Kyivovis Od knjige Popoln vodnik za oskrbo bolnikov Avtor Elena Yuryevna Khramova. Iz reference v sili knjige Avtor Elena Yuryevna Khramova. Iz Knjiga CESANEGA ODDELKA: Varna proizvodnja ali nevarnost za prihodnost? Michel Oden. Gary Griffin. Iz knjige Kako povečati velikost moškega penisa Gary Griffin. Iz knjige Flatfoot. Najučinkovitejše metode zdravljenja Avtor Alexandra Vasilyev. Iz knjige Lepota in zdravje Ženske Avtor Vladislav Gennadevich Liflyandsky. Iz knjige joge in spolnih praks Avtor Nicka Douglas.Ko se preskusi prenesejo na STD, sem se odločil, da bom prenesel HIV. Na dan, sem prejel pripravljene teste na Etiki, razen HIV na koncu sem našel Chlamydia. Herpes in mikarprosmoza. Toda HIV ni prišel. Kličem me po 3 dneh in pravijo, da se morate pojaviti v centru AIDS, da bi mimo, da sem gradil na Inubabot Inuboti je pokazal pozitivno. Lahko Immanoublot lažno pozitivno pri boleznih Chlamydia Micraplasmosis HPV Herpes
Strokovnjaki ženska.ru.
Ugotovite mnenje strokovnjaka na vaši temi
Anastasia SHERRIKOVA.
Rusina Irina Vladimirovna.
Psiholog, da se znebi stresa. Specialist iz spletnega mesta B17.RU
Olga Yuryevna Divandeyeva.
Psiholog. Specialist iz spletnega mesta B17.RU
Olga Borisenko.
Psiholog, Gestalt terapevt. Specialist iz spletnega mesta B17.RU
Dmitry valeryeeieich tishakov.
Psiholog, nadzornik, sistemski družinski terapevt. Specialist iz spletnega mesta B17.RU
Shyan Olga Vasilyevna.
Psiholog, svetovalec za psiholog. Specialist iz spletnega mesta B17.RU
Oksana Lughankin.
Psiholog, družinski odnos. Specialist iz spletnega mesta B17.RU
Anna Dashevskaya.
Psiholog, svetovanje v Skypeu. Specialist iz spletnega mesta B17.RU
Irina Bukina.
Psiholog. Specialist iz spletnega mesta B17.RU
Aksova Anna Mikhailovna.
Psiholog, kandidat za skupine. Specialist iz spletnega mesta B17.RU
ne želite, da bi vas prestrašili, toda ko povzročajo, da je center skoraj vedno pozitiven, kot da vas ne prečkajte, veliko sreče, glavna stvar, da vzamete terapijo in živijo dolgo
En prijatelj živi z HIV deset let, se shrani.
Rečeno je, da lahko leta po treh najdejo zdravilo.
V vsakem primeru ne obupajte in ga ne razdelite, obravnavamo
Ne, IB ne more biti lažno pozitivna in nobena STD vpliva na to analizo, če je pozitivna, potem Alas, imate HIV, morate slediti imunske celice in začeti terapijo v času.
ni alas ((če se kličete v središče, potem zagotovo HIV
Kolikor vem, so lahko prvi in \u200b\u200bcelo naknadni rezultati imunoblota dvomljivi. Ne lažno pozitivno, in sicer, dvomljiva. In nato predpišejo ponavljajoča se analiza. Dajem besedilo s spletnega mesta:
"Imunsko blotting se najpogosteje uporablja za potrditev diagnoze okužbe s HIV. Kdo meni, da pozitivne serumi, v katerih protitelesa na katere koli dve proteini HIV lupine zaznajo s imunskim blotom. Po teh priporočilih, če obstaja reakcija samo z enim od lupinskih proteinov (GP160, GP120, GP41) v kombinaciji ali brez reakcije z drugimi beljakovinami, je rezultat, ki se šteje za dvomljivo in ponovno preučevanje priporočamo z uporabo niza druge serije ali drugo podjetje. Če po tem rezultat ostaja dvomljivo, se raziskava nadaljuje vsake 3 mesece. "
lahko Google. Če je tako, upam, da ne potrdite HIV. Ampak, če potrdite, veste, da danes živijo s to diagnozo in živijo tako, kot zdravi ljudje in otroci rodijo. Glavni pogoj je disciplina pri zdravljenju. Zdravje vam!
Antiretrovirusna terapija na spletu
Kalkulatorji
Spletna stran je namenjena medicinskim in farmacevtskim delavcem 18+
Dekodiranje Analiza - Imunoblot
Pomoč prosim dešifriranje analize
Env (GP160) +
ENV (GP110 / 120) +
Env (GP41) +
Gag (P55) +
Gag (P40) +
Gag (P25) +
Pol (P68) +
Pol (P52) +
POL (P34) +
Zdravo! Pred 2,5 leti sem predal analizo HIV, taka imunoblota:
GP-160 +, GP-110/120 +, GP-41 +, P17 +, P25 +, P31 +, P34 +, P52 +, P55 +, P68 +. Ampak Imunnoblot od 30.05,18 g.: GP-160 +, GP-41 +, GAG 1 -, Anketa +, ENV2-. Ni jasno, kaj zvitek + pomeni? Ali je on samo eden ali ne razkrit? In kje so preostale beljakovine?
Pol in ENP geni, ki kodirajo skupine beljakovin. Razmislite, da je samo zapis drugačen. Vprašanje je drugačno. In kaj čakamo? Zakaj menite na bloto? Vse je precej jasno. Naredite nekaj, kar potrebujete.
Že se je odbil s tem, kar imam HIV. In pripravljen za terapijo.
Samo zanimivo je poslušati svoje mnenje. To se izkaže, sveže okužbe ali ne razumem nekaj? Ali včasih se zgodi, da se imunoblot počasi zelo razkrije?
Danes sem pogledal svoje analize v mojem osebnem primeru (smo bili narejeni na SC):
IFA na prvem preskusnem sistemu - Postavite
IFA na drugem preskusnem sistemu je negativna (kako je?)
Naprej, IB (narejen v Invitro in SC pred meseci):
imunoblot na prvem preskusnem sistemu: GP 160+, GP 41+
imunoblot na drugem testnem sistemu: GP41 +, P24 +, P17 +
imunoblot na tretjem testnem sistemu: GP160 +, GP120 +, GP41 +, P24 +
Glede na moje napovedi, bi lahko okužil pred letom dni (akutna faza je bila aprila nekje), ali pred 9 meseci, vendar na splošno - XS, ko) vedno preprečiti in seks brez kondomov je bil samo enkrat v padcu leta 2017.
Danes je nekoč prešla na VN in IP. Thera se bo začela v enem mesecu, ko pride naročilo.
Datume na omenjene preskuse.
Prvi blot pred IFA? Se ne bori. Ni trenutka, kar bi mi omogočilo, da rečem, da obstaja zelo verjetno sveže okužbo, ali nasprotno.
Ostala bo skrivnost, če ne najdete naključnega vira in se ne primerjajte.
Če določite, potem
Kupljen v Invitro.
Prva IFA - 11. maj.
Potem je isti serum šel na blot in imel pozitivno analizo, kjer sta razkrila dva beljakovina.
gP 160+, GP 41+
Nato sem spet še prešel v SC.
Kri je bila sprejeta 29. maja.
In tam je bil vozil več preskusnih sistemov, kjer je prvi pokazal negativen, drugi pozitiven. Negativna IFA je še smešna.
Nato, isti serum gre na blot, kjer so podatki prišli iz:
Prvi preskusni sistem: GP41 +, P24 +, P17 +
Drugi testni sistem: GP160 +, GP120 +, GP41 +, P24 +
Vendar ne bi bilo bistvenega pomena.
Prišla je nova analiza - 754. V veselje je. VN še ni pripravljen. Ko bo prišel, verjetno bom začel.
Dejstvo, da je bila okužba pred letom dni - prepričan sem na 80%. In dejstvo, da je blot počasi razkrit in IFA je negativen - to je čudno. Ali je v normalnem območju?
Negativna IFA je še smešna. Spoznajte ime sistema, ki je še zanemariti v črni notepad. Čeprav, ta trenutek, če ne vzamete teorije s poroko, močno za zgodnjo okužbo.
Dejstvo, da je bila okužba pred letom dni - prepričan sem na 80%. Blot je za ta čas slab. Ne nemogoče, ampak malo verjetno.
V nekem trenutku sem tudi začel dvomiti v rezultate preskusov HIV - zato čakam
V vprašanju je že zadnja točka.
Dejstvo, da je mesec za mesec povečal za 200 izvodov brez Terra - je tudi v normalnem območju? Ursosan zdaj vzamem iz polipa v žolčku - v liniji je napisana, da zdravilo izboljšuje imuniteto.
Potrebno je oceniti z relativno vsebino in upoštevati podatke o enem laboratoriju z eno metodo štetja. Ker - Bog ve, kaj je iz CD4.
Na splošno, CD4 - 780 celic / μl. VN - 250 kopij / ml.
To ni terapija. To pomeni, da je CD4 486 na mesec pobegnil na 780.
VN padel od 550 na 250 kopij.
Vendar v normalnem območju ni čudno ali takšnih skokov? Teorija je čas za začetek?)
Zdravo! Predala bom IFA trikrat, vsakič +, iz SC je prišel imunoblot P24 + P18 +. Možno tveganje je bilo pred šestimi meseci. P24 Označuje, da je to vse enako HIV?
Blot Dubious, ponovite po 6-8 tednih. Najverjetnejši lažni alarm.
Dober dan!
Prišli so rezultati analiz, vključno z blotom:
Nevarn stik: 04/24/2018
Analiza na HIV IFA 23.05.2018 (4 tedne iz nevarnega kontakta ali 29 dni) Rezultat "+"
Analiza HIV IFA 05/28/2018 (5 tednov iz nevarnega stika ali 34 dni) Rezultat "Ne pozabite"
Analiza na HIV IFA 06/01/2018 (5 tednov iz nevarnega kontakta ali 38 dni) Rezultat "+"
Blot je prišel iz prve analize (05.23.18):
GP160 SL.
P24 SL.
Novi preskusi so naročili 06.06.2018 ELISA in PCR RNA HIV v lokalni center za pomoč. Rezultati še vedno čakajo.
Vprašanja za blot:
1. Če je P24 prisoten, je potrebno antigen HIV ali takega proteina mogoče zaznati z drugimi boleznimi?
2. Kaj pomeni kratica "SL", ki pomeni poleg beljakovin? Ponavadi v opisani floti ima + ali -
3. Kaj je odvisna od razporejanja flote? Iz izraza ali posameznih značilnosti telesa?
4. S takšnim blotom na 4. tednu od nevarnega stika obstaja možnost, da to ni HIV?
Lep dan in hvala.
1. Ne, lahko je samo podobna protein druge narave. 2. Slabo. ti. Dvomljiv. 3. Pogoji in izvajajo posamezno funkcijo, vendar v povprečju je vse zelo blizu. 4. Vprašanje je napačno, vedno obstaja možnost, dokler ni nastavljena diagnoza.
Zdravo!
Pomagajte, navigajte rezultate preskusov in razumete, kako se pravilno obnašati, tako da so ponavljajoče se analize pravilne.
Analize, izročene več kot 05/25/2018
IB HIV.
New Lav Blot 1 - Razumeti. od 05/29/2018.
IB označevalci HIV
gP 160 +.
gP 120 -
gP 41 -
p55 +.
p40 -
p 24 +.
p18 -
p 68 -
p 52 -
p 34 -
Ifa hiv.
Advia Centaur HIV AG-AB reaktivnost IFA 12.00 Položaj (05/28/2018)
Priporočena analiza ponovite v 2 tednih.
Novembra 2017 je bilo, po katerem so bili preskusi izročili na Hiv AG ABBBOTT Architect Test sistem, potem je bil rezultat negativen.
Vzporednica izročila splošni krvni test. Simpfocite so rahlo povišane, eozinofili so točno 0 (vendar sem imel takšne kazalnike za eozinofile.
Glavno vprašanje je:
katera zdravila se lahko in ne morejo sprejeti v teh dveh tednih? (Hočem nič "fonil")
Občasno prenašam napade alergij, ponavadi pijem Tueguil. Naj to zavrnem?
Ali je mogoče prevzeti pred analitiki antibiotikov? (če so predpisani zdravniku za zdravljenje drugih okužb in bolezni)
Imunsko blot v diagnozi HIV
Imunsko blotting (Immunoblot, Western Blot, Western Blot) - združuje analizo imuno-encima (ELISA) s predhodnim elektroforetskim prenosom na nitrocelulozni trak (trak) virusnih antigenov.
V tem čudovitem znanstvenem imenu "Blot" pomeni najverjetneje kot "blots", in "zahodna" - kot "zahodna" odraža smer širjenja tega "blots" na papirju od leve proti desni, to je na geografskem zemljevidu , to ustreza smeri od zahoda proti vzhodu. " Bistvo "imunskega blota" metoda je, da se imunsko-imunimalna reakcija izvede ne z mešanico antigenov, vendar z antigenom HIV, ki jih imunoforeza, ki uporablja frakcije, ki se nahaja v skladu z molekulsko maso na površini nitroceluloze membrana. Kot rezultat, glavne beljakovine HIV, so nosilci antigenskih determinantov razdeljeni na površino v obliki posameznih pasov, ki se manifestirajo pri izvajanju imunofinančne reakcije.
Imunoblot vključuje več faz:
Priprava traku. Pre-prečiščena in uničena na kompozitne komponente, imunsko pomanjkljivost (HIV) je izpostavljena elektroforezi, medtem ko so antigeni, vključeni v HIV, ločeni z molekulsko maso. Nato z blottingom (analog ekstrudiranja na "mokrih" odvečnih črnila "se antigeni prenesejo na nitrocelulozni trak, ki od zdaj naprej vsebuje nevidno podobo antigenske striptične spektra karakteristike HIV.
Vzorčna študija. Preskusni material (serum, plazma v krvi bolnika itd.) Uporablja se na nitroceluloškem traku), in če obstajajo posebna protitelesa v vzorcu, so povezane s strogo ustrezajo jim (complimentary) antigenske trakove. Zaradi poznejših manipulacij je rezultat te interakcije vizualiziran - to je bilo vidno.
Razlaga rezultata. Prisotnost pasov na nekaterih območjih nitrocelulozne plošče potrjuje prisotnost v preučevanih serumih protiteles do strogo opredeljenih antigenov HIV.
Trenutno je imunsko blotting (imunoblot) glavna metoda za potrditev prisotnosti virus specifičnih protiteles v preskusnem serumu. V nekaterih primerih, okužba s HIV, pred razvojem serokonverzije, so specifična protitelesa učinkoviteje zaznana z metodo imunskega blota od ELISA. V študiji po metodi imunskega blotanja je bilo ugotovljeno, da se protitelesa na GP 41 zaznajo v serumh v serumh, odkrivanje P24 v osebah, ki so bile anketirane s profilaktičnim ciljem, zahteva dodatne študije za okužbo s HIV. Preskusni sistem za imunsko blot, ki temelji na rekombinantnih beljakovinah, pridobljenih z genetskim inženirstvom, se je izkazal za bolj specifičen kot konvencionalni sistemi, ki temeljijo na prečiščenem virusni lizat. Pri uporabi rekombinantnega antigena, ki ni razpršena, ampak jasno izrazita ozka antigenska trak, lahko dostopna za računovodstvo in vrednotenje.
Serumi oseb, okuženih z HIV-1, se odkrijejo s protitelesi na naslednje glavne beljakovine in glikoproteine \u200b\u200b- konstrukcijske beljakovine lupine (ENV) - GP160, GP120, GP41; Jedro (gag) - P17, P24, P55, kot tudi virusni encimi (Pol) - P31, P51, P66. Za tipična protitelesa HIV-2 na ENV-GP140, GP105, GP36; Gag - P16, P25, P56; POL - P68.
Med laboratorijskimi metodami, ki so potrebne za vzpostavitev specifičnosti reakcije, ima največje priznanje protiteles na beljakovine iz HIV-1-GP41 Shell Protein, GP120, GP160 in HIV-2 - GP36, GP105, GP140.
Kdo meni, da so pozitivni serumi, v katerih se protitelesa na vsakih dveh HIV glikoproteinov najdemo z metodo imunskega blotanja. Po teh priporočilih, v prisotnosti reakcije z le eno od beljakovin lupine (GP 160, GP 120, GP 41), v kombinaciji ali brez reakcije z drugimi beljakovinami, je rezultat, ki se šteje za dvomljivi in \u200b\u200bponovno preučitev priporočamo uporabo niz drugih serij ali drugih podjetij. Če po tem, rezultat ostane dvomljivo, se opazovanje priporoča 6 mesecev (študije po 3 mesecih).
Prisotnost pozitivne reakcije z antigenom P24 lahko navaja obdobje serokaurusa, saj se protitelesa najprej pojavijo na tem proteinu. V tem primeru se priporoča, odvisno od kliničnih in epidemioloških podatkov, ponovite študijo s serumskim vzorcem, ki jemljete vsaj v 2 tednih, in to je tako, če je z okužbo s HIV potrebno študirati veru serumov.
Pozitivne reakcije z gagovimi in poli beljakovin brez reakcije z an jestim beljakovinami lahko odražajo korak zgodnje serokonverzije in lahko kažejo na okužbo s HIV-2 ali nespecifičnim odzivom. Osebe s takšnimi rezultati po preskušanju na HIV-2 se ponovno pregledajo po 3 mesecih (v 6 mesecih).
VPRAŠANJE: Ponavljajoča analiza HIV?
Pregledan je bil za okužbe, ki jih je sprejel spolni način (ne simptomi - želeli je zaupanje v odnose z žensko). Test HIV je bil pozitiven. Naslednji ultrazvok je pokazal tumor na ledvicah, odstranjen (izkazalo se je, da je maligne).
Prebral sem knjigo Sazonovo i.m., pravi, da lahko maligni tumor da pozitivno rezultat HIV testov.
Ali je to tako, ali upamo, da ne?
Opraviti morate nadzorno analizo za HIV. Če je bil prvi preskus HIV določil ELISA, je lahko rezultat napačen pozitiven. Njegova zanesljivost se lahko preveri z bolj občutljivo diagnostično metodo - PCR (verižna reakcija polimeraze), ki opredeljuje DNK virusa v krvi.
pomoč. 12/16/10 IFA (+) IB (+) Nato od 03/21/11 do 19.05.11, devet negativnih ELISA (-) in PCR kvantitativno. ne bo določena. Leta 2002, med nosečnostjo, IFA (+), da (-), vendar IB je vedno (-). Od leta 2004 do leta 2008 sem izročil 2-krat na leto IFA (-). Toda 30. aprila 2007, IFA (+) in IB-negotovosti. Potem spet vsaka 2 meseca, ki sem jo vedno izročil (-). In od decembra 2010, je navedeno zgoraj. Nikoli nisem bil imenovan, moj mož ima vedno IFA (-). SD4 980 celice. In celo kri na sifilis od 29.04 je dala 3 +++. In nato trikrat. Depuls. Nit vsakih 10 dni. Hepatitis vse (-). Je bil nekdo taki. Hvala vam.
Navedite, ali je bil RIRT izveden (reakcija imobilizacije bled Treponama), če je tako, kakšni so rezultati te študije.
ne, nihče ni predlagal, da bi takšno analizo. In kaj bo pokazal? Upam, da ste spoznali, da sem govoril o preskusih HIV. Hvala vam. V vaši praksi so bili podobni primeri? Da, mimogrede za IB v letu 2008 je bil nedoločen, ker Bila je protein P24 / 25. V letu 2010, IB (+) beljakovine GP160.41.120 P24.17.31. Potem, ko je bil IFA ponovno 3. aprila (-) poslana v IB 4. aprila. Rezultat je bil pozitiven, vendar se GP 120 in 41 beljakovin prečrtata z rdečo pasto in na dnu Red IB ponovitve. Vendar PCR zavrne iz iste številke. Po 4. aprilu sem 4-krat opravil ELISA. Vse v centru AIDS, vključno z antigenom in protitelesom. Zdaj čakam na ponavljajočega se IB in visokokakovostne PCR. To je to. Zelo utrujen, da razmišljam in čakam. V upanju na najboljše. HVALA VAM. Čaka na odgovor zelo veliko.
Če vprašate kakršnokoli vprašanje, poskusite ga natančneje oblikovati, s pojasnitvijo diagnoze. Ribk se uporablja za potrditev diagnoze sifilisa. Za natančno diagnosticiranje okužbe s HIV se izvede definicija protiteles proti HIV v krvi metode IFA in metoda imunoblota. Diagnoza je potrjena le, če sta oba rezultata pozitivna.
Žal mi je, da je vprašanje netočno oblikovalo vprašanje. Napisal sem, da je v decembru, IFA in Inunoblot na HIV sta prišla pozitivna. Od marca v mesecu IFA na HIV je negativen 9-krat. Če bi bil registriran v aidsu v aidsu, se to načeloma zgodi. HIV bodisi vedno bodisi negativno. In kako se IFA odloča o HIV? Potem bo vse zanikalo IFA, da preveri Imhunoblot, tako da se izkaže? V našem centru AIDS mi ne more odgovoriti na nič. Zato sem se obrnil k tebi. Hvala vam.
Na žalost lahko Elisa kot Immunoblot daje lažne pozitivne rezultate. Zato se diagnoza HIV šteje za končno, samo s hkratnim odkrivanjem HIV s pomočjo IFA in metode imunoblota.
pozdravljeni. Danes je prejel rezultate PCR za HIV HIV HIV. Rezultat ni bil zaznan in ponavljajočega se imunoblota na HIV. Rezultat je bil nedoločen zaradi proteina 41. V centru AIDS-a najverjetneje nimajo HIV, in v mojem telo so telesa, podobna HIV. In kaj mislite, če menite, da moja vprašanja od 15. in 16. junija (glej) HIV ali ne. HVALA VAM.
V tem primeru je diagnoza okužbe s HIV dvomljiva.
ti pišete, da je samo s hkratnim odkrivanjem HIV s pomočjo ELISA in IMMUNOBOT, diagnoza HIV se šteje za končno. In kako potem je v mojem primeru? Navsezadnje bo vse PCR zavrnilo. In blot in IFA bo skočil ves čas. 9 let. Povejte mi, če je bil virus v moji krvi, potem bi bilo mogoče opredeliti njeno RNA in DNA za toliko let. Ali lahko obdobje inkubacije ali "Windows" traja toliko let? Ali so rezultati PCR na HIV bolni, ob upoštevanju takega časa? Da, pozabil sem povedati, da je Express HIV test za HIV mimo mene, vedno negativen. In ne bi se smeli zanašati na njih? Hvala vam.
V tem primeru PCR diagnostika ni glavna metoda identifikacije procesne dinamike - bolj informativne serološke metode. V tem primeru je verjetnost lažnih negativnih rezultatov visoka. Express HIV testi imajo visok prag občutljivosti, zato lahko dajo tudi napačen negativni rezultat.
oprosti. Vsekakor nisem napisal. Prosimo, odgovorite na HIV ali ne HIV. Hvala vam.
V primeru, da niste prejeli obvestila o prejemu odgovora na pošti, si lahko ogledate odgovor na vprašanje, ki ste ga podali na tem naslovu http://tiensmed.ru/news/answers/vich-ili-ne-vich -.html.
Zdravo! Prosim, povejte mi, kaj naj se registrirate v LCD (zdaj 10 tednov nosečnosti), opravila preskuse za HIV, pred nekaj dnevi, imenovanim zdravnika in rekel, da so predhodni preskusi za HIV pozitivno (prvi je bil narejen v Kirovogradu, in tam je Noben uradni rezultat iz Kiev še) na isti dan je v našem mestnem laboratoriju dva Express Testos družbe "Pharmaško" CITO test HIV 1/2, Oba rezultati sta negativna, laboratorijski asistent, da so ti preskusi zanesljivi in \u200b\u200bne morem skrbeti Ker se med nosečnostjo zgodi, in tisti testi se lahko preprosto zmedejo. Zdravnik je rekel, naj ponovno prenese kri in dvakrat prenašam svojo kri za analizo v različnih bolnišnicah (ni še enega od treh rezultatov še vedno ne). Zelo me skrbi, nisem odvisen od drog, ni bilo dvomljivega spolnega odnosa, če je zelo redko, druge analize so v redu. Ali je mogoče zaupati izrecnim testom? Ali se res zgodi med nosečnostjo? Boli me veliko zdravnika me je prestrašilo. Hvala vam
Najprej se morate umiriti in ne pomislite na slabo. Včasih med nosečnostjo obstajajo lažni pozitivni rezultati. Potrebno je ponovno opozoriti na krvi za HIV in počakati na rezultate ankete.
zdravo! Dejstvo je, da sem imel spolni stik z dekletom pred 2 meseci (še vedno se srečamo). Po 1,5 tednih se je temperatura 37,4 vrtnica. Kmalu je spal. Za zaupanje smo opravili analizo EIF v 2 tednih in ponovno po 1,5 mesecih. Odgovori na negativno. Toda še vedno imam temperaturo in kašelj s spremenljivo izboljšanjem. Povej mi, prosim, je mogoče tveganje? Poleg tega sem dolgo delal brez vikendov in pred enim tednom je bil na bolniškem dopustu (Orvi). Krvni test in pljuča v redu. Hvala vam.
Ta temperatura je lahko povezana s preneseno virusno boleznijo, telo se še ni izterjalo ali kronično preobremenitev. V primeru, da je ekološka patologija izključena, splošna analiza krvi in \u200b\u200burina v normo, kot tudi podatke fluorografskih raziskav, kot tudi v normi, je treba izključiti spolno prenosljivih bolezni: Chlamydia, mikoplazmoza, ureaplasmoza To lahko povzroči vnetljivost majhnih organov medenice in sečnice in kot rezultat, povečanje telesne temperature. Preberite več o razlogih za povečanje telesne temperature. Preberite s klikom na povezavo: Visoka temperatura.
Zdravo. Takšno podjetje - pred več kot letom dni je bil nezaščiten spolni stik s hoje. Zagotovila je, da ni bila bolna, vendar ji ne morem verjeti 100-odstotnim. Prav tako je zagotovila, da je bil zdravniški pregled, preden je naprava delala (delala je kot prodajalec) in vse je bilo v redu. 7 mesecev po stiku, še vedno sem opravil analizo HIV v laboratoriju, izvleček mesta izkazalo, da je negativen. Ampak v zadnjem času sem pogosto postal bolan, za zdaj 3 teden, kot imam rdeče vneto grlo in ne morem ga ozdraviti. Spet se je začel bati, in nenadoma še vedno pobral? Povej mi, ali je mogoče, in ali je vredno zaupati analizi iz SITILAB? Še enkrat se bojim, živci ne bodo stali ..
V primeru, da je rezultat negativen, potem najverjetneje nisi bolan in ne okužen z virusom HIV / AIDS. Da bi pojasnili diagnozo, je priporočljivo ponovno analizirati v specializiranih laboratorijih v okviru vladnih agencij, ta pregled se izvaja anonimno. V primeru, da samostojno zdravljenje ne prinaša želenega rezultata. Priporočljivo je, da se posvetuje z otolaringologom, za ustrezen pregled in imenovanje ustreznega zdravljenja. Preberite več o pregledu za HIV, preberite cikel izdelkov s klikom na povezavo: HIV.
Povej mi, ali lahko daš kakršno koli značilnost laboratorija Satilab? Vseeno ni mogoče prenesti analize v državni instituciji. In kaj je verjetnost v odstotkih za človeka, da se okuži z nezaščitenim stikom?
Na žalost ne dajemo primerjalne ocene laboratorijev in zasebnih zdravstvenih ustanov. V primeru, da dvomite na zanesljivost rezultatov, izvedite anketo v drugem centru in najprej zahtevajte licenco za zagotovitev podatkov iz zdravstvenih storitev, ali ima ta center pravico izvajati to raziskavo in ali sprejeti vsi sprejeti standardi. Tveganje okužbe je enako za oba spola z nezaščitenim spolnim odnosom. Preberite več o pregledu za HIV, preberite cikel izdelkov s klikom na povezavo: HIV.
Dober dan! Otrok je bil star 8 mesecev, analizo HIV z metodo IFA v krvi je zaznal GP160 + in P25 + preostanek vsega minus, zaključek IB-Dupve. Kako sodnik na teh analizah izkaže, da je otrok +? GP160 + GP110 / 120 - P68 - P55 - P52 - GP41 - P34 - P25 + P18 -
Na žalost, na podlagi pridobljenih podatkov, je nemogoče diagnosticirati s 100 odstotki verjetnosti, saj lažni pozitivni rezultat ni izključen. Če želite oblikovati natančno diagnozo, bo treba prenesti število raziskav, vključno s ponovitvijo te analize z metodo IFA, kot tudi opraviti analizo po tehniki PCR. Po tem se morate obrniti na specializirano medicinsko ustanovo, kjer bo zdravnik nalezljiv igralec lahko oceni rezultate, dobljene v kompleksu. Več o manifestacijah okužb s HIV v tematskem delu našega spletnega mesta lahko izveste s klikom na povezavo: HIV
Lahko pokaže napačen pozitivni rezultat z "ORZ" ali bolj akutno nastavljenimi nalezljivimi boleznimi? Nekje sem prebral, da lahko pri 58 boleznih ali celo zgoraj kažejo "+", vključno s cepljenjem iz hepatitisa B, če imajo ledvice itd.?
Verjetnost lažnega pozitivnega rezultata je, zato vam priporočam, da storite naslednje: Naredite ponovno analizo - po metodi IFA in metodi PCR, po katerem se ponovno obišče nalezljiv zdravnik. Preberite več o diagnozi okužbe s HIV, ki jo lahko naučite iz tematskega oddelka: HIV
Dober dan! Imunoblot je nedoločen zaradi beljakovin P25. Kakšna je verjetnost HIV?
V tem primeru je potrebna temeljita študija protokolov študijskih protokolov v kompleksu z drugimi kazalniki, saj na podlagi teh podatkov ni mogoče, da bi bila možna predpostavka. Predvidoma se lahko rezultat šteje za dvomljive in po 3 mesecih zahteva ponovna študija. Preberite več V razdelku naše spletne strani: HIV
Dober dan.
Lahko komentirate IFA na HIV
1 serum +3,559 k \u003d 13,3
+2,121 k \u003d 4.9
r 24 OTR.
2 serum +3,696 k \u003d 13,9
+2,477 k \u003d 5.7
V tem primeru lažni pozitivni rezultat ni izključen, saj je metoda IFA posredno, zato vam priporočam, da opravite analizo na drugi, bolj občutljiva metoda - imunskega blotanja. Podrobnejše informacije o tem vprašanju lahko naučite na ustreznem delu našega spletnega mesta s klikom na naslednjo povezavo: HIV
Dober dan, povej mi, kaj naj konfiguriram? Pred letom dni s svojim možem, ko je načrtoval otroka, so vsi preskusi opravljeni, vključno z HIV (zelo resno in pravilno obdelano), sem bil preučen v Kirgiške republike. Mož v Kijevu, je imel negativen odgovor na mene, da nisem delal Kaj je treba ponovno uporabiti reagent v centru AIDS v Kijevu. Vodenje analize v centru odziva je tudi zame negativno. Zdaj sem v položaju za 14 tednov. Registriram se pri sprejemanju vseh testov in spet odgovor je bil odgovor na HIV negotovo, ponovno prenašal v kliniki in odšel na "Dovira" Express test za pomirjujočo, vendar ni prepričal izrecno test je pokazal pozitiven rezultat ( Drugi trak je bil manj izrazit), takoj po vseh teh postopkih nisem izgubil časa, ki se je spremenil v center AIDS, je tudi analizo opravil tudi analizo, kar pričakujem rezultat. (Ne morem se umiriti) Prosim vas, da poveste, kako zaupati Express Analize in zakaj ni odgovora na HIV analizo od prvega časa? (Moj mož in obnašam zdrav način življenja in se ljubim drug drugega). Hvala vam.
Ni potrebno, da bi panike pred časom - Express Diagnostics ni razlog za diagnozo HIV, vam omogoča, da prepoznajo skupine bolnikov, ki potrebujejo bolj poglobljeno študijo. V takih situacijah je priporočljivo opraviti imunsko blottiranje in osebno posvetovati z nalezljivim zdravnikom. Več podrobnejših informacij o tem vprašanju lahko naučite na tematskem delu našega spletnega mesta s klikom na naslednjo povezavo: HIV. Za več informacij lahko dobite tudi v naslednjem delu naše spletne strani: Laboratorijska diagnostika
Pozdravljeni, ležijo v infekcijskem času, le danes je bil odvajan, ko je merilo zdravnik me je poklical in pojasnil, da sem imel pozitivno ELISA, najprej, ko sem vstopil v bolnišnico, je bil negativen, potem pa so poslali raziskave o imunoblu v Sokolniki, ki je rekel, bo pripravljen na marec teden, v bolnišnici z angino in virusi Paragrippa, prišli v šok, še vedno ne razumem, kako ga obravnavati, izvleček za mojo kliniko je bil sestavljen tudi Navedba, da je bila IFA ugotovljena in nižja od imunoblota pri delu, če se jutri odvaja v tem odvajanje, bo vse označeno v tem odvajanju, kar je, kolikor je verjetnost HIV prisotna? Ali je mogoče, da je to dejstvo, da sem jaz je bila obravnavana od angine paragrippiranja virusa kažejo pozitivne rezultate na ELISA?
Verjetnost lažnega pozitivnega rezultata je zelo velika. Prisotnost enega pozitivnega rezultata ne predvideva razlogov za dvig diagnoze HIV, zato vam priporočamo, da počakate na rezultat imunoblotting, po katerem se osebno posvetuje z zdravnikom infekcijskim igralcem o nadaljnjih raziskavah in opazovanju. Angina, Paragripp in drugi prehladi pomembnega vpliva na rezultate analize, nimajo.
Želim verjeti, toda konec avgusta sem imel bolezen, temperatura, 37,5-38 je bila tekoči stol za približno 4 dni, na počitnicah, kjer je bilo veliko disco, sem pila vodo od pod Žerjav toliko drugih, ker je bilo to zelo drago kozarec vodnih stroškov 300R, sem priključil tekoči stol s takšno temperaturo z neke vrste črevesne okužbe z izbrano v vodi, ne spomnim se natančno, vendar je bil majhen Izpuščaj v zgornjem delu telesa, prihajajo domov s temperaturo, imenovanim zdravniku, je napisala okužbo z rotavirusom, po 5 dneh zdravnika, sem se prostovoljno zapustila, da bi jo pustila in šla na delo, kjer potekajo v nekaj dneh s sinusitisom , (takrat sem potreboval čas, moral sem biti na ulici), ki sem ga vezal, da je velika temperaturna razlika od počitnic in zastrupitve pohvalil mojo imuniteto in se zato spet prišla do sinusitisa, in to je spet bolni , kot je režiral Laura, je bil COLDID CP 500 predlagan v 10 dneh, opravljen, je prišel spet na delo po 3 tednih na poslovnem potovanju Država arch za 3 dni. Klimatske naprave v prometu in hotelu so bili neusmiljeni in na vrnitvi domov, v letalu sem imel temperaturo že 39.5.The doma s temperaturo 40, imenovan zdravnik v hišo napisal Arvi in \u200b\u200brekel misli PTS rdeče, i imajo kronilen tonzilitis in mu povedal, da Laura sama je pisala piti antibiotik Levieveth R. Skording, ker nisem zapustil hitrosti 40 in ni padel, hospitalizacija ni bila na voljo, na naslednji dan vbrizgavanje in levo. Tretjič sem vztrajal pri hospitalizaciji, komaj komaj v infekciozni bolnišnici, kjer je bila okužba zmesi okužena s paragripsko in adenovirusno okužbo, če pa je bil zdravnik izpraznjen, je podružnica poročala, da sem imel pozitiven HIV pozitivno in Kaj so naredili dvakrat, sem šokiran, ne vem, kaj naj naredim, ne morem jesti in piti. Rekla je, da imam jasno izraženo akutno okužbo s HIV in za preverjanje, da so poslali analizo moje krvi v Immunnoblotu Center,
zdaj izvejem analogijo dogodkov, ki se mi je zgodilo zadnjič, kot tudi 3 bolnišnične liste zapored, vse simptome za sebe in sem prestrašen od tega, kar bi lahko bilo, po izpustu istega dne, sem šel Da bi opravili analizo v Invitro Ananinu in naslednji dan rezultat IFA je bil tudi +
odpuščam odpuščanje za tako podrobne informacije, vendar sem v razbitju in ubil, pijem hude sedative in nimam apetita in nimam skoraj izgubljenega
Še vedno imam tako vprašanje, da je zdravnik z izpustom iz bolnišnice poudaril rezultat HIV na IFA, je bil odkrit in nižji od Inunnoblota v delu, toda ko bom zaprl BL v svoji kliniki na mestu, bo vse tam. Kako sem lahko? To ne bo zaupno. Vprašal sem zdravnika, naj ne piše v razrešnici, to analizo, kaj me je zavrnila, koliko so moji pravice do informacij NeSPRAS.
Na žalost, rezultati študij, ki se izvajajo v bolnišnici, se prilegajo v izvleček, saj bi moral obisk okrožnega zdravnika imeti informacije o vašem zdravstvenem stanju v celoti. V tem primeru ne govorimo o razkrivanju informacij, saj se posreduje samo drugim zdravnikom, ki vas bo še bolj opazoval.
Zdravo! Predal sem preskuse HIV. Odkar sem potreboval certifikat za FMS, preskusi niso dali nekaj tednov kasneje, so bili povabljeni na glavo in izdal rezultat, da so vzeli veliko računov in poslali veliko Pomoč regionalnemu centru za nadaljnje odkup. Želim iti v drugo kliniko in nato že šel v regionalni ali pa nima smisla? Samo ne razumem, zakaj so tako dolgo, da nikoli niso skrbno, zdravnik je dejal, da domnevno so storili nekakšno analizo in še vedno imam 4t rubljev. Kako naj to storim poleg potrdila Daliba podrobno informacijo o bolezni?
V tem primeru ne bi smelo biti spremljanje pred časom - prejem enega pozitivnega rezultata ne omogoča zanesljivo presojanja glede morebitne okužbe, saj lažni pozitivni rezultati niso izključeni. Priporočamo, da ponovno opravite analizo in če obstaja pozitiven rezultat, boste potrebovali drugo anketo - imunoblotting. Praviloma v laboratoriju za podrobne informacije o rezultatih ne dajejo, ki je normalna in navadna praksa. Za vsa vprašanja, ki se pojavijo, lahko odgovorite na doktor po pregledu osebnega posvetovanja.
pozabil sem dodati, da sem od začetka junija do sredine septembra, sem naredil anabolični steroidni tečaj, in sicer Sumon250 je mešanica testosterona in stanozolola s Primabolanom, želela se je pripraviti za poletje in počitnice, bi lahko potrkala mojo imuniteto In vse se mi je zgodilo.
Oslabitev odpornosti, pa tudi prisotnost avtoimunskih bolezni, lahko dajo lažne pozitivne rezultate analize HIV. Zato v primeru prejema 2 pozitivnih rezultatov, metoda IFA priporoča, da se priporoča imunoblotiranje, ki vam bo omogočilo, da odgovorite na vprašanje s točnostjo, je okužba ali ne.
kaj pomeni Autoimluine bolezen? Kaj so?
na splošno lahko rečem, da sem pogosto bolan od zgodnjega otroštva in celo nekaj pred tremi leti, sem prosil, da se udeležite zdravnika, da opravi svojo imuniteto, ker je bila stalna utrujenost in pogosto bolna, večinoma ušesna grlo, ampak ves čas tam Ali so bili negativni rezultati na HIV, imam ves čas, ko so minili dovolj enostavnost brez razmišljanja.
Lažni pozitivni rezultat analize HIV je lahko po nedavno preneseno virusno okužbo, cepljenje proti hepatitisu B, s tuberkulozo, hepatitisom, herpesom in na ozadju avtoimunskih bolezni, kot so: revmatoidni artritis, sistemski rdeči lupus, dermatomyomiomija, sklerodermija, Povezovanje bolezni tkiva in itd.
Želim dodati svoje vprašanje, moj imunoblot je negativen, vendar je zdravnik rekel, da od dveh IFA sta bila +, ko sem ležala v infektivni bolnišnici, potem se še vedno moram spomniti analizo, vendar malo kasneje
V tem primeru so medicinske taktike upravičene - priporočamo, da po 1,5-2 meseca ponovno prenesemo imunoblot.
Kaj je verjetnost: 2 ELISA + Razlika med krvnimi ograjami je približno 2 dni, Imunoblot -; Ležal sem v infekciozni bolnišnici z adenovirusno okužbo in Paragrippom, kjer je bila krvna ograja, Imunoblot, ki je bil poslan na aids
Dober dan! V LCD-ju sem dobil registrirano, prestal vse teste zdravnika pravi, da imam herpes v moji krvi, nato pa pokličite pomoč in recimo, da moram ponovno okrepiti, in mi je bilo povedano, da imam pozitivno HIV, šel sem darovati v paniki, ki jo je analiza opravila in imam Eliso in Imunoblot + njen mož -, spet je bilo v mesecu. Imam + mojega moža - zdaj sem na 23 tednu nosečnosti!
V tem primeru na žalost obstaja verjetnost okužbe s HIV, vendar je končna diagnoza nemogoče, da se celo s pozitivnim imunoblotom, glede na stanje nosečnosti. V tem primeru je potrebna odprava lažnih pozitivnih rezultatov, zato priporočamo, da analizo prenesete na ponovno in osebno posvetujte z nalezljivim zdravnikom.
Če je Immunoblot pokazal pozitiven rezultat na HIV, in pregled je negativen, kakšen rezultat verjame?
Imunoblot je bolj natančna študija, tako da s to študijo, če je bil sprejet pozitiven rezultat, je treba nadaljevati študijo in osebno obiskati nalezljive preiskave.
