Blotting imun pentru HIV. Imunoblotting HIV este pozitiv. I. Prepararea gelului și membranelor și electrotransferul proteinelor

Imunoblotul HIV detectează anticorpii la proteinele virale plasați pe o membrană specială de nitroceluloză. Acesta este un studiu extrem de precis care identifică prezența fracțiilor în care principalele proteine sunt situate sub formă de benzi mici.

Plicul virusului HIV-1 conține glicoproteine cu o greutate moleculară cuprinsă între 41 kd și 160 kd (kilodaltoni). Mare importanță pentru imunoblotting, are glicoproteina HIV-2 cu o greutate moleculară de la 32 kd la 140 kd. Proteinele de bază HIV-1 și enzimele virale sunt reprezentate de proteinele p17, p24, p55.

Agentul cauzal HIV-2 constă din proteine denumite p16, p25, p56. Ei îl formează înveliș interior. Genomul include 6 gene reglatoare și 3 gene structurale. Adesea, în timpul diviziunii celulare, apar inexactități genetice și apar mai multe subtipuri de agent patogen.

Teste pozitive

Pentru a elimina erorile în diagnosticul de laborator al infecției cu HIV, pacientului i se prescrie un test suplimentar. Rezultatele sale sunt integrate ca pozitive dacă sunt detectați anticorpi la 2 sau 3 proteine ale HIV-1 sau HIV-2.

Imunoblot confirmă totul rezultate bune ELISA. În acest caz, sunt detectați anticorpi la gp120/160, gp41 sau p24, care sunt unități structurale ale celor trei gene principale ale SIDA - gag, pol și env. La unii pacienți care au rezultate ELISA și PCR negative, imunoblotul prezintă mai multe dungi pozitive. Medicul prescrie un test suplimentar p24 pentru a pune un diagnostic corect și a exclude faza incipientă a infecției cu HIV.

Dacă rezultatele obținute sunt îndoielnice, pacientul este rugat să repete testul în următoarele 3 luni. Aproape toate cazurile de HIV sunt confirmate folosind un sistem de imunoblotting - un dispozitiv Sanofi. În cele mai multe cazuri, antigenele HIV, proteinele p25, gp110/120 și gp160 sunt detectate, indicând infecția cu virusul. Probele fals pozitive sunt înregistrate la pacienții care suferă de boli țesut conjunctiv având nivel crescut bilirubina, atunci când interacționează cu diverși antigeni virali.

Rezultat negativ

Dacă există o lipsă de linii pozitive corespunzătoare proteinelor virusului SIDA, imunoblotul este interpretat ca un rezultat negativ. Analiza confirmă în mod clar absența infecției cu virusul imunodeficienței sau indică o „perioadă fereastră”. Dacă imunoblot dă un rezultat negativ, persoana nu este purtătoare a virusului SIDA.

Pentru studiu sunt prelevate probe de ser de sânge de la pacienții infectați cu HIV. Se păstrează congelate la -20°C. Analiza se realizează folosind sisteme de testare:

Antigen;
Recombinant-HIV;
Peptoscreen.

Înregistrarea unui rezultat negativ indică absența anticorpilor la glicoproteinele anvelopei HIV gp120, gp160, Sp41 în ser.

Adesea, un pacient este interesat de întrebarea dacă un pacient care are un partener sexual infectat poate avea un rezultat negativ al imunoblot pentru HIV. După studiu, se obține adesea un rezultat discutabil sau sunt detectați anticorpi la proteinele gp120 și gp160, ceea ce indică o absență completă a datelor negative. Uneori, un răspuns îndoielnic este înregistrat la pacienții cu infecție asimptomatică.

Rezultate ininterpretabile

Testele efectuate folosind diferite teste de anticorpi HIV sunt uneori negative și nu îndeplinesc criteriile de seropozitivitate. Este dificil pentru un medic să determine cauza unui rezultat discutabil.

Unii pacienți nu sunt expuși riscului de infecție cu HIV. Medicul poate face greșeli în interpretarea rezultatelor testului dacă infecția este cauzată de un serotip diferit.

Serul sanguin al pacientului trebuie examinat în timp. Dacă nu este observat în decurs de 6 luni manifestari clinice SIDA și nu există factori de risc, pacientul este înregistrat ca neavând infecție.

Rezultate discutabile ale testelor sunt obținute la pacienții cu risc scăzut de infecție. În unele cazuri, apariția unor date neclare este cauzată de complexele imune și autoanticorpii conținute în serul sanguin.

La unii pacienți, apariția unor rezultate îndoielnice este cauzată de dezvoltarea proceselor patologice:

boli infecțioase;
tumoră canceroasă;
reactie alergica.

Pacientul dezvoltă modificări ale testului clinic de sânge, o creștere a proteina C-reactiva sau creșterea VSH. În oamenii care suferă boli infecțioase, dezvăluie adesea o reacție imunoblot discutabilă la HIV.

Pacienții cu rezultate nedeterminate nu pot dona sânge și materiale biologice.

Metoda liniară

Principiul imunoblotării include:

Utilizarea substanței virale native în format HIV sau antigene în format Western Blot.
Combinația de proteine HIV cu anticorpi individuali detectați în serul sanguin.
Procesul de incubare care are loc cu adăugarea de anticorpi marcați la Ig umane.
Interpretarea dungilor colorate.

Analiza permite medicului să interpreteze în timp util rezultatele studiului. Un blot pozitiv este descifrat ca 2ENV+/- GAG+/POL, nedeterminat - 1 ENV+/- GAG+/POL. Un rezultat negativ înseamnă că nu există dungi.

Pentru efectuarea analizei se utilizează imunoblot recombinant și lizat. Studiul este specific și este de 99,5%.

Pacienții se întreabă dacă rezultatul testului poate fi interpretat ca fiind fals. Datele obținute pot fi generate ca urmare a stimulării apărării organismului (sarcină, hemodializă). Dacă se suspectează sindromul retroviral acut și se recomandă contactul cu un pacient cu infecție HIV, pacientului i se recomandă să doneze ser pentru o reacție PCR. Repetarea testelor serologice este confirmată prin măsurare încărcătura viralăîn imaginea prezentată a materialului biologic.

Diagnosticul HIV la nou-născuți

Testarea pentru SIDA la un copil vârstă fragedă efectuată dacă se stabilește contactul cu o mamă infectată cu HIV. Reacții serologice poate fi pozitiv timp de 1,5 ani. Anticorpii din serul sanguin al unui nou-născut sunt detectați prin ELISA, RIF și reacții de imunoblot.

Pe parcursul a 9 luni de viață a unui copil, apare un rezultat pozitiv datorită prezenței anticorpilor materni în serul sanguin. Antigenul p24 are o specificitate de aproximativ 65%. În unele cazuri, nu este posibil să se detecteze anticorpi la un copil bolnav dacă acesta este diagnosticat cu niveluri congenitale scăzute de globuline în sânge. Un rezultat negativ stabilit de imunoblot nu garantează absența infecției.

Testarea se realizează în mai multe etape:

1-2 zile după naștere;
la 1-2 luni;
la vârsta de șase luni.

Studiul suplimentar al anticorpilor este efectuat până la obținerea a 2 rezultate negative de imunoblot. Un diagnostic de SIDA la un copil născut dintr-o femeie infectată cu HIV este posibil pe baza a 2 rezultate pozitive PCR. Transmiterea agentului patogen HIV la un nou-născut este exclusă dacă femeia nu alăptează.

Test de sarcina

Viitoarei mame i se prescrie imunitate și blotting line dacă se obține un rezultat pozitiv pentru Metoda HIV ELISA. Dacă blot-ul este confirmat, pacientul are SIDA. În acest caz, începând cu a 14-a săptămână de sarcină, se prescrie terapia pentru a preveni infectarea copilului.

Poate un specialist să greșească atunci când efectuează un test de ser sanguin în timpul sarcinii, întreabă pacienții medicul curant. El este obligat să ofere femeii însărcinate copii ale testelor PCR și ELISA pentru a elimina îndoielile cu privire la fiabilitatea acestora.

Probleme apar uneori la efectuarea imunoblotării, dar dacă ELISA, blot și PCR sunt pozitive, diagnosticul de infecție cu HIV este în sfârșit confirmat. Probabilitatea de a primi analiză fals pozitivă este mare în timpul sarcinii. Dacă ELISA este (+) și imunoblotul este (-), femeii i se cere să reia serul de sânge.

Cardul de schimb al femeii însărcinate indică rezultatul studiului. Cu el valoare pozitivă unei femei îi este interzis să-și hrănească copilul după naștere, pentru a nu o infecta cu virusul SIDA. Concluziile finale se fac pe baza unor studii de laborator, clinice și epidemiologice. Abia după descifrarea acestora pacientul este diagnosticat cu infecție HIV.

In contact cu

Numele lui este SIDA Vyacheslav Zalmanovich Tarantul

Imunoblotting - o metodă indirectă suplimentară

În plus față de ELISA, în anumite cazuri, o procedură numită „immunoblotting” sau „immunoblotting” (uneori numită „Western blot”) este utilizată pentru a testa infecția cu HIV. Conform recomandărilor OMS, imunoblotarea este utilizată în diagnosticul infecției cu HIV ca metodă suplimentară expertă, care ar trebui să confirme rezultatele ELISA. De obicei, această metodă verifică de două ori un rezultat ELISA pozitiv, deoarece este considerată mai sensibilă și mai specifică, deși mai complexă și mai costisitoare. Dar înainte de a semna verdictul final asupra pacientului, medicul trebuie să fie complet sigur de corectitudinea diagnosticului. Prin urmare, problema complexității și a costului ridicat nu poate fi decisivă aici.

Atât din punct de vedere al scopului, cât și al modului de execuție, cunoscuta expresie „puneți-l pe un blotter” se potrivește bine imunoblotării. Imunoblotting combina test imunosorbent legat(ELISA) cu separarea electroforetică preliminară a proteinelor virale într-un gel și transferul lor pe o membrană de nitroceluloză („blotter”). Procedura de imunoblot constă din mai multe etape (Fig. 27). În primul rând, HIV, purificat anterior și distrus în componentele sale constitutive, este supus electroforezei și toți antigenii incluși în virus sunt separați prin greutatea moleculară. Apoi, folosind metoda blotting (analoga cu stoarcerea excesului de cerneală pe un tampon de blotting), antigenele sunt transferate din gel pe o bandă de nitroceluloză sau filtru de nailon, care acum conține un spectru de proteine caracteristice HIV, invizibile pentru ochi. . Apoi, materialul de testat (ser, plasma sanguină a pacientului etc.) este aplicat pe bandă, iar dacă proba conține anticorpi specifici, aceștia se leagă de benzile proteice antigene care le corespund strict. Ca urmare a manipulărilor ulterioare (similar cu ELISA), rezultatul acestei interacțiuni este vizualizat - făcut vizibil. În cele din urmă, prezența benzilor în anumite zone ale benzii confirmă prezența anticorpilor la strict anumiti antigeni HIV.

Imunoblotting este cel mai adesea utilizat pentru a confirma diagnosticul de infecție cu HIV. OMS consideră seruri pozitive în care anticorpii la oricare două proteine ale anvelopei HIV sunt detectați prin imunoblot. Conform acestor recomandări, dacă există o reacție doar cu una dintre proteinele învelișului (gp160, gp120, gp41) în combinație sau fără o reacție cu alte proteine, rezultatul este considerat îndoielnic și se recomandă re-testarea folosind un kit de la un diferite serii sau de la o altă companie. Pentru a fi în siguranță, dacă

Orez. 27. Pentru efectuarea imunoblotării, în prima etapă, proteinele conținute în serul sanguin sunt separate într-un gel în funcție de greutatea lor moleculară și de încărcare folosind câmp electric(folosind electroforeza pe gel). Apoi, o membrană de nitroceluloză sau de nailon este plasată pe gel și „bătată” (aceasta este blotting). Acest lucru se realizează într-o cameră specială, care permite transferul complet al materialului de la gel la membrană. Ca urmare, modelul de aranjament al proteinelor care a fost pe gel este reprodus pe membrană (blot), care poate fi apoi ușor manipulat. Inițial, membrana este tratată cu anticorpi la antigenul dorit și, după spălarea materialului nelegat, se adaugă un conjugat marcat radioactiv care se leagă în mod specific la anticorpi (ca în ELISA). Locația complexului conjugat marcat antigen-anticorp rezultat este determinată utilizând autoradiografie folosind film cu raze X. După manifestarea acesteia, devine clar dacă există sau nu antigene în sânge, iar după aceea rezultatul rămâne îndoielnic, se recomandă urmărirea timp de șase luni (cercetarea continuă la fiecare trei luni).

În prezent, în Federația Rusă, se recomandă utilizarea a cinci sisteme de testare pentru diagnosticarea infecției cu HIV, printre care se numără atât cele rusești, cât și cele străine.

Din cartea Anesteziologie și reanimatologie autor Marina Aleksandrovna Kolesnikova

Din cartea Ciudățeniile corpului nostru. Anatomie distractivă de Stephen Juan

Din cartea Manual de prim ajutor de Nikolay Berg

Din cartea Cum să te lași 100% de fumat sau Iubește-te și schimbă-ți viața de David Kipnis

Din carte Ghid complet asistență medicală autor Elena Iurievna Hramova

Din cartea Directory îngrijire de urgență autor Elena Iurievna Hramova

Din cartea CEZARIANĂ: O ieșire sigură sau o amenințare pentru viitor? de Michelle Oden

de Gary Griffin

Din cartea Cum să măresc dimensiunea penisului masculin de Gary Griffin

Din cartea Flatfoot. Cel mai metode eficiente tratament autor Alexandra Vasilieva

Din cartea Frumusețea și sănătatea femeii autor Vladislav Gennadievici Liflyandsky

Din cartea Yoga și practici sexuale de Nick Douglas Setul de reactivi „MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2” este destinat să confirme detectarea anticorpilor la proteinele individuale (antigene) HIV-1 și/sau HIV-1 grup O și/sau HIV-2 în ser sau plasmă sânge uman prin metoda imunoblotting.

Trăsături distinctive:

Setul de reactivi „MPBA - Blot - HIV-1, HIV-2” conține proteine virale lizate purificate ale HIV 1 și o peptidă - determinantul antigenic gp36 al HIV-2;
Oferă detectarea anticorpilor la HIV-1, HIV-1 grup O, HIV 2 pe o bandă;
Procedura simplă pentru pregătirea și efectuarea testelor;
Controlul intern al calității reacției*
Viteza maximă de analiză (3 ore);
Volumul mic al probei de testat - 20 µl;
Nu necesita echipament adițional pentru cercetare;
Calitatea setului este garantată de utilizarea mostrelor standard rusești și internaționale**

* Controlul intern al calitatii este asigurat de prezenta:

benzi de control intern, asigură controlul asupra introducerii unei probe de ser sau plasmă;
ser de control negativ (K-);
ser control pozitiv (K+), care permite identificarea benzilor detectate pe banda;
controlează serul slab pozitiv (K+cl), care asigură controlul asupra sensibilității trusei de reactivi.

**Asigurarea calității:

Caracteristicile trusei de reactivi MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2 au fost determinate prin testarea probelor dintr-un eșantion aleatoriu de donatori, pacienți diagnosticați cu infecție HIV, panouri comerciale de seroconversie, panouri standard și probe cu „potențial interferență cu determinarea” componente.

Setul de reactivi nu dă rezultate fals pozitive la examinarea serurilor standard care nu conțin anticorpi împotriva antigenului HIV 1,2 și HIV-1 („Standard HIV AT (-)”, nr. FSR 2007/00953 din 25.10.2007 ). Specificitate - 100%.

Specificitatea diagnosticului a fost determinată prin studierea unui eșantion aleatoriu de 200 de donatori din diverse centre de sânge și clinici cu absența confirmată anterior a infecției cu HIV-1 și HIV-2. Specificitatea la studierea unui eșantion aleatoriu de donatori a fost de 100%;

Specificitatea trusei de reactivi a fost determinată prin testarea a 250 de probe, inclusiv probe de ser sau plasmă obținute de la femei gravide, pacienți internați, pacienți cu hepatită C și E și probe cu componente „potențial interferente”. Când se utilizează kitul MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2 pentru aceste probe, nu au fost detectate rezultate fals pozitive.

Sensibilitatea diagnosticului a fost determinată folosind:
- probe de plasmă de la panoul Boston Biomedica, Inc HIV-1 (WWRB 301) din diferite regiuni care conțin diferite subtipuri de HIV-1: grupa M (subtipurile A, B, C, D, E, F) și grupa O; sensibilitatea trusei de reactivi a fost de 100%;

Sensibilitatea trusei de reactivi a fost determinată într-un studiu al panourilor internaționale de seroconversie Boston Biomedica, Inc (SeraCare Life Sciences), cat. nr. PRB 903, PRB 904, PRB 909, PRB 912, PRB 916, PRB 917, PRB 918, PRB 919, PRB 921, PRB 923, PRB 924, PRB 927, PRB 928, PRB 934.

Setul de reactivi detectează anticorpi la HIV-1 în serurile unui panou standard care conține anticorpi la HIV-1 („Standard AT (+) HIV-1”, nr. FSR 2007/00953 din 25 octombrie 2007), detectează anticorpi la HIV-2 în seruri standard care conţin anticorpi la HIV-2 („Standard AT (+) HIV-2”, Nr. FSR 2007/00953 din 25 octombrie 2007). Sensibilitate - 100%.

Certificat de inregistrare nr. FSR 2010/07958 din 13 iulie 2011 (valabilitate nelimitata)

Compus:

Imunosorbent. Benzi de membrană de nitroceluloză alb cu proteine individuale HIV-1 (gp160, gp120, p66, p55, p51, gp41, p31, p24, p17) absorbite pe ele prin electrotransfer și aplicate pe bandă cu o peptidă HIV-2 sintetică, un analog al proteinei gp36 și IgG anti-umană ( control intern) - 18 buc;
K- - ser de control negativ. Serul din sânge uman care nu conține anticorpi împotriva HIV-1,2, HCV, antigen HIV, HBsAg, este inactivat prin încălzire la 560C; lichid transparent galben deschis - 1 eprubetă (0,08 ml). Conține conservanți: timerosal și azidă de sodiu;
K+ - ser control pozitiv. Serul din sânge uman care conține anticorpi la HIV-1,2 (titru nu mai puțin de 1:10000), care nu conține HBsAg, antigen HIV, anticorpi la HCV, este inactivat prin încălzire la 560C; lichid transparent galben deschis - 1 eprubeta (0,08 ml).Contine conservanti: timerosal si azida de sodiu;
K+sl - control slab pozitiv ser. Serul de sânge uman care conține anticorpi la HIV-1,2 (titru nu mai mult de 1:200), care nu conține HBsAg, antigen HIV, anticorpi împotriva HCV, este inactivat prin încălzire la 560C; lichid transparent galben deschis - 1 eprubetă (0,08 ml). Conține conservanți: timerosal și azidă de sodiu;
RPOKk (x10) - soluție pentru diluarea probelor și conjugat. Concentrat - tampon Tris care conține ser normal de capră pretratat; lichid gri opac - 1 flacon (10 ml). Conține conservant: timerosal;
PRk (x20) - soluție de spălare. Concentrat - tampon Tris care conține Tween-20; lichid transparent incolor - 1 flacon (70 ml). Conține conservant: timerosal;
Conjuga. Anticorpi de capră anti-IgG uman conjugați la fosfatază alcalină; lichid limpede incolor - 1 eprubetă (0,06 ml);
Substrat (soluție de colorare). O soluție de fosfat de 5-bromo-4-fluoro-indolil (BCIP) și tetrazoliu nitroblue (NBT); lichid transparent galben deschis - 1 flacon (50 ml);
Pulbere pentru imunoblotting. Conţinut scăzut de grăsimi lapte praf- pulbere amorfă albă sau galben deschis - 5 pachete x 1g;
Tabletă cu capac pentru stabilirea reacției - 2 bucăți;
Pensetă din plastic - 1 bucată.

Sângele este luat dintr-o venă. Apoi studiul se desfășoară conform instrucțiunilor:

proba este plasată într-un gel pentru separare electroforetică, rezultând proteine specifice care sunt sensibile la virus;
pe gelul tratat se aplică hârtie de nitroceluloză;
proba preparată este plasată într-un aparat de blotting.

Pentru a identifica anumite enzime, este necesar să pregătiți corect hârtia pentru cercetare de laborator. Pentru a face acest lucru, i se aplică anticorpi și un conjugat radioactiv marcat. Rezultatul studiului este evaluat vizual, sunt examinate lanțurile de enzime construite.

Decodificarea rezultatelor

După manipulare, pe hârtie rămân dungi. Ele sunt localizate acolo unde a avut loc conjugarea, adică medicamentul aplicat a reacționat cu proteina virală. În acest fel puteți detecta părți ale proteinei:

din nucleul HIV-1 – p17, p24, p55;
patogen HIV-2 – p16, p26, p56.

Rezultatele imunoblotting sunt considerate pozitive dacă sunt detectate 2 din 3 proteine HIV-1 sau HIV-2. Deoarece Western blot (al doilea nume al studiului) este adesea folosit pentru a confirma ELISA pozitiv, apoi se verifică reacția pentru proteine specifice: gp120/160, gp41 sau p24. Ele fac parte din cele trei gene principale ale SIDA - gag, pol și env. În timpul diagnosticului inițial, testul se efectuează numai pentru proteinele p25, gp110/120 și gp160; dacă dă un rezultat pozitiv, atunci testul este efectuat pentru p24. Această parte a proteinei permite virusului să fie detectat într-un stadiu incipient.

Un rezultat pozitiv este un motiv pentru a căuta diagnostice mai complexe. Este fals doar in 3 cazuri:

la pacientii cu nivel inalt bilirubina;
la contactul cu antigeni virali;
pentru patologiile țesutului conjunctiv.

Dacă pacientul nu are linii corespunzătoare proteinelor SIDA, atunci rezultatul este evaluat ca fiind negativ. Aceasta înseamnă că persoana nu este infectată cu HIV sau se află în perioada fereastră. Aceasta din urmă înseamnă că virusul ar fi putut pătrunde în organism, dar nu s-a dezvoltat încă în el. Pentru a crește acuratețea diagnosticului, se folosesc sisteme de testare:

Recombinant-HIV;
Antigen;
Peptoscreen.

După verificarea acestora, rezultatul este considerat negativ dacă proteinele gp120, gp160, Sp4 nu se găsesc în probă.

Există o altă opțiune de interpretare - un rezultat neutru sau dubios. Apare la cei care au contact sexual cu un partener infectat cu HIV. Anticorpii la proteinele gp120 și gp160 se găsesc în sângele lor. De asemenea, un răspuns îndoielnic în timpul blotting-ului este dat atunci când infecția este asimptomatică, adică este într-o stare latentă.

Este important să verificați cu atenție un rezultat discutabil. În acest scop, se folosește un studiu dinamic al serului sanguin, adică verificări regulate folosind metode de imunoblot și ELISA timp de șase luni. De asemenea, numit examinări suplimentare, deoarece prezența autoanticorpilor și a complexelor imune în sânge se poate datora:

boli infecțioase;
prezența tumorilor canceroase;
alergii.

Descriere

Metoda de determinare Imunoblot.

Material în studiu Ser de sânge

Vizita la domiciliu disponibila

Anticorpii antinucleari sunt o familie de autoanticorpi care se leagă de acizii ribonucleici și proteinele asociate acestora. Acestea apar la mai mult de 90% dintre pacienții cu boli difuze ale țesutului conjunctiv și sunt, de asemenea, adesea observate cu boală autoimună ficat și o serie de alte afecțiuni. Până în prezent, au fost caracterizate aproximativ 200 de soiuri din această familie de autoanticorpi, dar nu toate pot fi utilizate în practica clinică.

Imunoblot de anticorpi antinucleari vă permite să studiați simultan 15 tipuri principale de anticorpi antinucleari într-un singur test, ceea ce asigură diagnostic diferentiat principalele boli reumatismale sistemice. Fiecare tip de autoanticorp detectat prin imunblot este de obicei observat la pacienții cu o caracteristică tablou clinic, prin urmare, spectrul de autoanticorpi permite nu numai diagnosticarea bolii, ci și stabilirea riscului de apariție a anumitor manifestări clinice.

Este recomandabil să se folosească imunoblot de anticorpi antinucleari în a doua etapă examen serologic la rezultat pozitiv alte teste care indică prezența anticorpilor antinucleari în serul pacientului. Astfel de teste includ determinarea anticorpilor antinucleari (screening ELISA), detectarea factorului antinuclear (ANF) pe celulele Hep2 (), anticorpi antinucleari și anticorpi la antigenul nuclear extractibil (ENA).

Metoda de imunoblotare a anticorpilor antinucleari în diagnosticul bolilor reumatice sistemice se caracterizează printr-o specificitate clinică ridicată. Dar specificitatea anticorpilor antinucleari, chiar și cu titruri mari de ANF (), nu poate fi întotdeauna stabilită, deoarece o serie de antigeni de anticorpi antinucleari rămân încă necaracterizate. Un rezultat negativ al imunoblot în acest caz nu exclude diagnosticul bolilor reumatice sistemice. O serie de anticorpi antinucleari pot fi detectați folosind imunblot - un panou de autoanticorpi specifici miozitei () și imunoblot - un panou de autoanticorpi pentru sclerodermie ().

Literatură

Lapin S.V. Totolian A.A. Diagnosticul de laborator imunologic al bolilor autoimune / Editura „Man”, Sankt Petersburg - 2010. 272 p.
Nasonov E.L., Alexandrova E.N. Standarde moderne diagnostic de laborator boli reumatismale. Ghiduri clinice/ BHM, M - 2006.
Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantibodies in Organ Specific Autoimmune Diseases: A Diagnostic Reference/ PABST, Dresda – 2011. 300 p.
Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantibodies in Systemic Autoimmune Diseases: A Diagnostic Reference/ PABST, Dresda – 2007. 300 p.
Gershvin ME, Meroni PL, Shoenfeld Y. Autoantibodies Ed. a 2-a/ Elsevier Science – 2006. 862 p.
Shoenfeld Y., Cervera R, Gershvin ME Criterii de diagnosticare în bolile autoimune / Humana Press – 2008. 598 p.
Instrucțiuni pentru trusa de reactivi.

Pregătirea

Este de preferat să așteptați 4 ore după ultima masă; nu există cerințe obligatorii.

Indicatii de utilizare

Testul este indicat pentru diagnosticul și diagnosticul diferențial al următoarelor afecțiuni:

lupus eritematos sistemic;
lupus cutanat subacut și alte tipuri de lupus cutanat;
boala mixtă a țesutului conjunctiv;
sindromul Sjögren și bolile asociate;
sclerodermie difuză și localizată, sindrom CREST;
miopatii inflamatorii (polimiozită și dermatomiozită);
artrită cronică juvenilă;
hepatită autoimună;
ciroză biliară primară și colangită sclerozantă;
utilizare acest test indicat atunci când sunt detectate titruri mari de factor antinuclear, anticorpi antinucleari, anticorpi la antigen nuclear extractibil, anticorpi la ADN, anticorpi la nucleozomi și anticorpi antifosfolipidici.

Interpretarea rezultatelor

Interpretarea rezultatelor cercetării conține informații pentru medicul curant și nu reprezintă un diagnostic. Informațiile din această secțiune nu trebuie utilizate pentru auto-diagnosticare sau auto-tratament. Medicul face un diagnostic precis folosind rezultatele acest sondaj, precum și informațiile necesare din alte surse: istoric medical, rezultate ale altor examinări etc.

Unități de măsură: test calitativ, rezultatul este prezentat sub formă de „detectat” sau „nedetectat”.

Când este detectată o bandă care caracterizează prezența oricărui tip de anticorp, intensitatea culorii benzii este descrisă suplimentar de numărul de plusuri („cruci”) pentru fiecare dintre tipurile de anticorpi identificate. O creștere a gradului de pozitivitate reflectă indirect conținutul și afinitatea autoanticorpilor.

Valori de referință: anticorpi la Sm, RNP/Sm, SS-A (60 kDa), SS-A (52 kDa), SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENP-B, dsDNA, histonă, nucleozom , Rib P, AMA-M2, Jo-1 nu au fost detectate.

Rezultatul determinării autoanticorpilor este prezentat în „încrucișări” pentru fiecare antigen corespunzător. O creștere a gradului de seropozitivitate reflectă indirect conținutul și afinitatea autoanticorpilor. Opțiunile pentru rezultatul evaluării seropozitivității sunt prezentate mai jos:

Nu au fost detectați anticorpi.
+/- - rezultat limită;
+ – conținut scăzut de autoanticorpi la un antigen specific;
++ – conținut mediu de autoanticorpi la un antigen specific;
+++ – continut ridicat autoanticorpi la un antigen specific.

Principalele boli asociate cu detectarea anticorpilor antinucleari:

Antigenul	Sens
Sm (Smith)	Un marker specific pentru lupusul eritematos sistemic (inclus în al 10-lea criteriu pentru LES al Colegiului American de Reumatologie, ACR)
SS-A (Ro52)	Se observă în diferite boli autoimune, mai des cu lupusul eritematos sistemic și formele sale cutanate, sistemic boli reumatismale, artrita reumatoida, boli hepatice autoimune etc.
SS-A (Ro60)	Lupus eritematos sistemic, forme cutanate de lupus eritematos, fotosensibilitate în lupusul eritematos sistemic, risc ridicat de lupus eritematos congenital și afectare cardiacă fetală. Principalul indicator serologic al sindromului Sjögren. Adesea notat împreună cu anticorpi la antigenul SS-A (Ro52).
SS-B	sindromul Sjögren, lupus eritematos sistemic.
PCNA	Lupus eritematos sistemic, risc de nefrită lupică.
Ribozomi (RiboP)	Lupus eritematos sistemic, risc de afectare a sistemului nervos central.
Nucleozomi	Lupus eritematos sistemic, risc ridicat de glomerulonefrită lupică.
ADN dublu catenar	Un marker specific al lupusului eritematos sistemic (inclus în al 10-lea criteriu ACR pentru LES), risc ridicat de nefrită lupică.
snRNP/Sm	Boală mixtă a țesutului conjunctiv, lupus eritematos sistemic cu risc scăzut de afectare a rinichilor, sclerodermie.
Histones	Lupus eritematos sistemic, lupus indus de medicamente, sclerodermie.
Scl-70	Scleroza sistemică cu afectare difuză a pielii și a organelor interne.
PM-Scl	Sclerodermie însoțită de polimiozită.
CENP-B	Sindrom CREST cu sclerodactilie, telangiectazie, calcificări subcutanate, sindrom Raynaud, esofagită.
Jo-1	Polimiozită sub formă de sindrom antisintetază.
AMA-M2	Ciroza biliară primară, sindromul Sjögren.