HAN: Interferon alfa 2b

Producător: Sikor Biotech CJSC

Clasificare anatomo-terapeutico-chimică: Interferon alfa-2b

Număr de înregistrare în Republica Kazahstan: Nr. RK-BP-5Nr. 012842

Perioada de inscriere: 18.06.2014 - 18.06.2019

KNF (medicament inclus în Formularul național de medicamente din Kazahstan)

ALO (Inclus în Lista furnizării gratuite de medicamente în ambulatoriu)

ED (Inclus în Lista medicamentelor în cadrul volumului garantat de îngrijiri medicale gratuite, sub rezerva achiziției de la Distribuitorul Unic)

Limitarea prețului de achiziție în Republica Kazahstan: 33 116,64 KZT

Instrucțiuni

Nume comercial

Realdiron

Denumire comună internațională

Interferon alfa

Forma de dozare

Pulbere liofilizată pentru soluție injectabilă, 1000.000 UI, 3.000.000 UI, 6.000.000 UI, 9.000.000 UI și 18.000.000 UI

Compus

O sticlă conține

substanta activa: interferon alfa-2b uman recombinant

nantnogo 1 milion UI, 3 milioane UI, 6 milioane UI, 18 milioane UI

Excipienți: dextran 60, clorură de sodiu, fosfat acid disodic dodecahidrat, fosfat bihidrogen de sodiu dihidrat

Descriere

Pulbere albă sau masă poroasă

Fgrup de armacoterapie

Imunomodulatoare. interferoni. Interferon alfa

Cod ATX L03АВ05

Proprietăți farmacologice

Farmacocinetica

Timpul de apariție a concentrației maxime de interferon-alfa 2b după administrarea intramusculară este de 2 ore și durează până la 12 ore, după administrarea subcutanată este de 7,3 ore, după 20 de ore medicamentul nu este detectat.

T1/2 (timp de înjumătățire) la injecție intramusculară este de aproximativ 2-3 ore. Biodisponibilitate - 80%.

Medicamentul este distribuit uniform în organele și țesuturile. Biotransformat în rinichi și într-o mică măsură în ficat. Excretat parțial nemodificat, în principal prin rinichi.

Farmacodinamica

Interferonul alfa-2b este o proteină foarte purificată obținută prin ADN recombinant. Structura polipeptidică a moleculei, activitatea biologică și proprietățile farmacologice sunt identice cu interferonul alfa-2b al leucocitelor umane. Are efecte antivirale, antiproliferative, antitumorale și imunomodulatoare.

Medicamentul, interacționând cu receptorii înrudiți de pe suprafața celulei, inițiază un lanț complex de modificări în interiorul celulei. Se presupune că aceste procese sunt asociate cu prevenirea replicării virale în celulă, inhibarea proliferării celulare și efectul imunomodulator al interferonului. Interferonul alfa-2b are capacitatea de a stimula activitatea fagocitară a macrofagelor, precum și activitatea citotoxică a celulelor T și a celulelor NK (Natural Killers). Aceste proprietăți ale interferonului determină efectul terapeutic al medicamentului.

Indicatii de utilizare

Ca parte a terapiei combinate la adulți. Boli virale

- hepatita B cronica activa daca este imposibil de utilizat

interferoni pegilați

— hepatita cronică C dacă este imposibil de utilizat

interferoni pegilați

Boli oncologice - leucemie cu celule paroase - leucemie mieloida cronica - cancer de rinichi - melanom malign.

Instructiuni de utilizare si doze

Soluția de Realdiron se administrează intramuscular sau subcutanat. Înainte de utilizare, conținutul flaconului este dizolvat în 1 ml apă pentru preparate injectabile. Soluția medicamentoasă trebuie să fie transparentă, fără incluziuni străine. Pentru hepatita B cronică activă, Realdiron se administrează în doză de 3 milioane UI de trei ori pe săptămână timp de 6 luni. Dacă după terapie nu există o îmbunătățire clinică, biochimică și/sau dispariția AgHBs în decurs de 3 luni, medicamentul este întrerupt.

Pentru hepatita cronică C, Realdiron este prescris în doză de 3 milioane UI de 3 ori pe săptămână timp de 6 luni. Dacă după administrarea medicamentului în timpul unei luni de terapie nu există o scădere a activității ALT în plasma sanguină cu 50%, doza de medicament este crescută la 6 milioane UI de 3 ori pe săptămână. Dacă după 3 luni de terapie nu există nicio îmbunătățire clinică sau biochimică, medicamentul trebuie întrerupt.

Pentru leucemia cu celule păroase se administrează zilnic 3 milioane UI timp de 2 luni; la obținerea remisiunii hematologice - 3 milioane UI de 3 ori pe săptămână.

Pentru leucemia mieloidă cronică, doza inițială de medicament este de 3 milioane UI pe zi, administrată intramuscular sau subcutanat. Dacă este bine tolerată, doza de medicament este crescută în fiecare săptămână până la o doză maximă de 9 milioane UI pe zi. Odată ce numărul de celule albe din sânge s-a stabilizat, această doză poate fi administrată de trei ori pe săptămână. Cursul tratamentului se efectuează pe termen nelimitat, cu excepția cazurilor în care terapia trebuie oprită (de exemplu, cu progresia rapidă a bolii sau intoleranța la medicament).

Pentru cancerul de rinichi, Realdiron este utilizat la o doză de 3 milioane UI pe zi, timp de 10 zile. Dacă este bine tolerată, doza de medicament este crescută în fiecare săptămână până la o doză maximă de 18 milioane UI pe zi. După 3 luni de tratament se începe terapia de întreținere, administrând 18 milioane UI de trei ori pe săptămână timp de 6 luni.

Pentru melanomul malign, doza inițială de medicament este de 3 milioane UI pe zi, administrată intramuscular sau subcutanat. Dacă este bine tolerată, doza de medicament este crescută în fiecare săptămână până la o doză maximă de 9-18 milioane UI pe zi. După obținerea unui efect clinic, aceștia trec la terapia de întreținere de 9-18 milioane UI de 3 ori pe săptămână. Terapie adjuvantă cu Realdiron după îndepărtarea chirurgicală melanomul malign stadiul I-II poate prelungi timpul de recidivă.

Efecte secundare

de multe ori

Febră, oboseală, stare de rău, durere de cap, mialgii, frisoane, tremur, simptome asemănătoare gripei

Anorexie, greață

mai rar

Modificarea gustului, stomatită, gură uscată, afectarea suprafeței dinților și a mucoasei bucale, vărsături, diaree, constipație, scaun neformat, durere abdominală

Alopecie, mâncărime, piele uscată, erupție cutanată

Dureri de spate, dureri musculo-scheletice, dureri toracice, miozite, artralgii

Depresie, gânduri și acțiuni suicidare, sinucidere

Transpirație crescută, mai ales noaptea

Iritabilitate, insomnie, somnolență, anxietate, concentrare scăzută, labilitate emoțională, amețeli

Hipotensiune arterială, hipertensiune arterială

rareori

Inflamație, roșeață, iritație la locul injectării

Excitare, nervozitate, psihoză, inclusiv halucinații, comportament agresiv, agitație, tulburări de conștiență, neuropatii, polineuropatie, neuropatii periferice, parestezie, hipoestezie, convulsii, pierderea cunoștinței

Infecție virală, inclusiv herpes simplex

Eritem

Conjunctivită, dureri oculare, vedere încețoșată, hemoragii retiniene, retinopatie, modificări focale ale retinei, obstrucție a arterei sau venelor retiniene, scăderea acuității vizuale sau limitarea câmpului vizual, nevrită nervul optic, edem papilar

Disfuncția glandelor lacrimale

Sângerări nazale, congestie nazală, sinuzită, rinită

Migrenă

Tuse, faringită, infiltrate pulmonare, pneumonie, dispnee, tulburări respiratorii

Pierdere în greutate

Tahicardie, palpitații

Scăderea libidoului, nereguli menstruale (amenoree, menoragie)

Creșterea poftei de mâncare, glosită, sângerare a gingiilor

rabdomioliză (uneori severă)

Deficiență sau pierdere a auzului

Edem facial, disfuncție renală, sindrom nefrotic, renal

deficit, hiperuricemie

Hiper- și hipotiroidism, hepatotoxicitate (inclusiv deces)

Leucopenie

Tulburări dentare și parodontale (inclusiv cele care duc la pierderea dinților)

foarte rar

Creșterea poftei de mâncare, diabet zaharat, hiperglicemie, hipertrigliceridemie, colită, hepatomegalie, pancreatită

Ischemie cerebrovasculară, hemoragii cerebrovasculare

Sarcoidoza sau exacerbarea sarcoidozei

Reacții alergice, eritem multiform, sindrom Stevens-Johnson, necroliză epidermică toxică

Trombocitopenie, limfocitopenie, anemie aplastică

Limfadenopatie

Somnolenţă

Necroză la locul injectării

Tulburări autoimune și mediate imun, incl. purpură trombocitopenică idiopatică, artrită reumatoidă, lupus eritematos sistemic, vasculită și sindromul Vogt-Kayanagi-Harada

Zgomot în urechi

Infarct miocardic, aritmie (de obicei la pacienții cu boli a sistemului cardio-vascular antecedente sau terapie anterioară cu medicamente cardiotoxice), cardiomiopatie tranzitorie reversibilă (observată la pacienții fără antecedente semnificative ale sistemului cardiovascular)

Pneumonie

foarte rar(cu monoterapie sau în asociere cu ribavirină)

Aplazie roșie completă a măduvei osoase

Modificări ale parametrilor de laborator (mai des observate la prescripție

medicament în doze mai mari de 10 milioane UI pe zi): scăderea numărului de granulocite,

scăderea nivelului de hemoglobină, creșterea activității ALT, AST (observate atunci când sunt utilizate pentru toate indicațiile, cu excepția celor cronice hepatita virala), ALP, LDH, creatinina și nivelurile de azot ureic seric

La copii, inclusiv terapia combinată cu ribavirină (≥ 1% din numărul de pacienți care primesc terapie combinată cu ribavirină)

De multe ori

Anemie, neutropenie

Hipotiroidismul

Depresie, labilitate emoțională, insomnie, iritabilitate, cefalee, amețeli

Anorexie, greață, vărsături, dureri abdominale, diaree

Alopecie, erupție cutanată

Artralgie, mialgie

Reacții inflamatorii la locul injectării: durere, hiperemie

Slăbiciune, febră, frisoane, simptome asemănătoare gripei, stare de rău, infecție virală, faringită

Dezvoltare fizică întârziată (întârziere de creștere și/sau greutate în comparație cu nivelurile de vârstă)

de multe ori

Paloare

Sângerare din nas

Infecție bacteriană, pneumonie, infecție fungică, herpes simplex

Neoplasme, neclasificate

Trombocitopenie, limfadenopatie

Hipertiroidism, virilism

Hipertrigliceridemie, hiperuricemie

Agitație, tremor, somnolență, reacție agresivă, anxietate, apatie, nervozitate, tulburări de comportament, somnambulism, gânduri suicidare, confuzie, vise anormale, dificultăți de adormire, hiperkinezie, disfonie, parestezie, hiperestezie, hipoestezie, concentrație scăzută

Conjunctivită, dureri oculare, vedere încețoșată, disfuncție a glandei lacrimale

boala Raynaud

Tuse, dispnee, otita medie, congestie nazală, iritație a mucoasei nazale, rinoree, strănut, tahipnee

Tulburări gastrointestinale, creșterea apetitului, constipație, scaune moale, tulburări rectale, dispepsie, reflux gastroesofagian, gastroenterită, glosită, stomatită etc. ulcerativ, durere de dinți, disfuncție hepatică

Durere în piept, în cadranul superior drept al abdomenului

Acnee, eczeme, modificări ale unghiilor, piele uscată, crăpături ale pielii, reacții de fotosensibilitate, erupții cutanate maculopapulare, modificări ale pigmentării pielii, eritem, transpirație, hematom, mâncărime

Infecții ale tractului urinar, tulburări urinare, enurezis

Nereguli menstruale, amenoree, menoragie, tulburări vaginale, vaginită, dureri testiculare (la băieți)

Contraindicații

Hipersensibilitate la substanța activă sau la oricare dintre excipienți

Boli cardiace severe, inclusiv antecedente (disfuncție cardiacă necontrolată, infarct miocardic recent, tulburări severe ale ritmului cardiac)

Boli severe ale rinichilor sau ficatului, inclusiv metastaze ale tumorilor în acestea, insuficiență renală cu clearance-ul creatininei sub 50 ml/min, atunci când este prescris în asociere cu ribavirină

Ciroza hepatică decompensată

Hepatită cronică în combinație cu forme severe de ciroză sau insuficiență hepatică

Hepatită cronică tratată în trecut cu imunosupresoare sau glucocorticosteroizi

Boli autoimune, inclusiv. hepatită autoimună în prezent sau în istorie

Boli glanda tiroida necontrolate de tratamente standard

Existența sau antecedentele de tulburări mintale la copii și adolescenți

Copii sub 3 ani cu hepatită cronică C

Sarcina și alăptarea atunci când sunt prescrise în asociere cu ribavirină

Atunci când este prescris în asociere cu ribavirină, trebuie luate în considerare și contraindicațiile enumerate în instrucțiunile de utilizare a ribavirinei.

Interacțiuni medicamentoase

Interferonul alfa inhibă enzimele hepatice microzomale (citocromul P-450) și, prin urmare, poate perturba metabolismul multor medicamente (teofilină etc.), crescând concentrația acestora în sânge.

Datorită riscului de reacții adverse din partea sistemului nervos central, medicamentele narcotice, hipnotice și sedative trebuie utilizate simultan cu interferonul alfa.

Interacțiunile medicamentoase dintre Realdiron și alte medicamente nu au fost pe deplin studiate. Realdiron trebuie utilizat cu prudență în asociere cu medicamente care pot avea un efect mielosupresor.

Cu utilizarea simultană a Realdiron și zidovudină, se poate observa un efect sinergic asupra reducerii numărului de leucocite. La pacienţii care au primit această terapie, s-au observat cazuri de neutropenie mai frecvente, legate de doză, decât era de aşteptat în cazul monoterapiei cu zidovudină. Pacienții cărora li se administrează Realdiron ca parte a terapiei combinate cu ribavirină sau zidovudină prezintă un risc crescut de a dezvolta anemie.

Efectele utilizării Realdiron în asociere cu medicamente antiretrovirale sunt necunoscute.

Interferonii pot influența procesele metabolice oxidative. Acest lucru trebuie luat în considerare atunci când sunt utilizate simultan cu medicamente care sunt metabolizate prin oxidare (inclusiv derivați de xantină - aminofilină și teofilină). Când utilizați Realdiron cu teofilină simultan, este necesar să monitorizați concentrația acesteia din urmă în serul sanguin și, dacă este necesar, să ajustați regimul de dozare.

Interacțiuni farmaceutice

Realdiron nu trebuie amestecat cu altele substante medicinale cu excepția soluției de clorură de sodiu 0,9%.

Instrucțiuni Speciale

Hepatita B

Înainte de începerea tratamentului la pacienții cu hepatită B, se recomandă efectuarea unei biopsii hepatice pentru a confirma hepatita cronică și a determina amploarea leziunii, precum și pentru a se asigura că nu există actual sau istoric de encefalopatie, sângerare din varice esofagiene, ascită sau alte semne clinice de decompensare.

Înainte de a începe terapia cu Realdiron, trebuie să vă concentrați pe următorii indicatori:

bilirubina normală

timp de protrombină adulți - prelungire cu cel mult 3 secunde

copii - prelungire nu mai mult de 2 secunde

leucocite ≥ 4.000/mm3

trombocite adulte ≥ 100.000/mm3

copii ≥ 150.000/mm3

Hepatita C

Calea optimă de tratament este terapia combinată cu ribavirină. Monoterapia cu Realdiron se efectuează în principal în cazuri de intoleranță sau în prezența contraindicațiilor la utilizarea ribavirinei.

Când utilizați Realdiron ca parte a terapiei combinate cu ribavirină pentru hepatita cronică C, citiți și instrucțiunile pentru uz medical ribavirină.

Tuturor pacienților cu hepatită cronică C li se recomandă efectuarea unei biopsii hepatice, dar în anumite cazuri (de exemplu, pacienții cu genotip viral 2 și 3), tratamentul este posibil fără confirmare histologică.

Adulti.Înainte de a începe terapia cu Realdiron, trebuie să vă asigurați că nu există actual sau istoric de encefalopatie, sângerare din varice esofagiene, ascită sau alte semne clinice de decompensare, concentrându-vă în același timp pe următorii indicatori:

bilirubina ≤ 2 mg/dl

albumina este stabilă şi în limite normale

timpul de protrombină este prelungit cu cel mult 3 secunde la adulți, cu 2 secunde la copii

leucocite ≥ 3.000/mm3

trombocite ≥ 70.000/mm3

creatinina serica este normala sau aproape de normal

Când se utilizează Realdiron în asociere cu ribavirină la pacienții cu insuficiență renală (clearance-ul creatininei > 50 ml/min), trebuie monitorizate o hemoleucogramă completă, nivelul creatininei în sânge și urină, ținând cont de posibilitatea de anemie. La pacienții cu vârsta peste 50 de ani, această monitorizare trebuie efectuată o dată pe săptămână.

Monoterapia.

În timpul tratamentului cu Realdiron, este posibilă disfuncția glandei tiroide - hipotiroidie sau hipertiroidie. Înainte de a începe să utilizați Realdiron, ar trebui să determinați nivelul hormon de stimulare a tiroidei(TSH) în serul sanguin și efectuați o ecografie a glandei tiroide. Dacă sunt detectate anomalii, trebuie efectuată o terapie adecvată.

Utilizați pentru co-infecția cu HIV și virusul hepatitei C

Pacienții care sunt infectați suplimentar cu HIV și care primesc terapie antiretrovială foarte activă (HAART) pot avea un risc crescut de acidoză lactică. Trebuie avută prudență atunci când se adaugă Realdiron și ribavirină la HAART.

Pacienții cu ciroză infectați suplimentar cu HIV și virusul hepatitei C care primesc HAART pot avea un risc crescut de decompensare hepatică și deces.

Utilizarea suplimentară a interferonilor alfa în monoterapie sau în combinație cu ribavirină crește riscul menționat mai sus la această categorie de pacienți.

Afecțiuni dentare și parodontale

Cercetare de laborator

Înainte de începerea tratamentului cu Realdiron și periodic în timpul terapiei, toți pacienții sunt supuși monitorizării imaginii sângelui periferic (cu determinarea formulei leucocitelor și a numărului de trombocite), a parametrilor biochimici din sânge (determinarea nivelului de electroliți, enzime hepatice, inclusiv ALT, bilirubină, proteine totale și fracții, inclusiv albumina și creatinina). Înainte și în timpul tratamentului cu Realdiron, concentrațiile sanguine trebuie să fie în limite normale.

În timpul terapiei pentru pacienții cu hepatită cronică, se recomandă următoarea schemă de monitorizare a parametrilor de laborator: 1, 2, 4, 8, 12, 16 săptămâni și apoi o dată pe lună pe parcursul întregului curs de tratament. Dacă ALT crește la o valoare care este de două ori sau mai mult decât valoarea care era înainte de începerea terapiei, tratamentul cu Realdiron poate fi continuat, cu excepția cazului în care apar semne de insuficiență hepatică. În acest caz, determinarea ALT, a timpului de protrombină, a fosfatazei alcaline, a albuminei și a bilirubinei trebuie efectuată la fiecare 2 săptămâni.

La pacienții cu melanom malign, funcția hepatică și numărul de celule albe din sânge (cu formulă) trebuie monitorizate săptămânal în timpul inducerii remisiunii și lunar în timpul terapiei de întreținere.

Hipersensibilitate imediată

Apariția unei erupții cutanate tranzitorii nu necesită întreruperea tratamentului.

Boli însoțitoare

Realdiron este prescris cu prudență pacienților cu grave boli cronice istoric: boală pulmonară obstructivă cronică, diabet zaharat cu tendință la cetoacidoză. Este necesară o atenție deosebită atunci când se utilizează medicamentul la pacienții cu tulburări de sângerare

(tromboflebită, embolie pulmonară) sau cu mielosupresie severă.

Chimioterapia simultană

Utilizarea Realdiron în combinație cu alte medicamente chimioterapeutice (de exemplu, citarabină, ciclofosfamidă, doxorubicină, teniposidă) crește riscul de apariție a efectelor toxice (severitatea și durata acestora), care, datorită utilizării în comun, pot pune viața în pericol sau pot provoca moarte. Datorită riscului de toxicitate crescută, dozele de Realdiron și agenții chimioterapeutici concomitenți trebuie selectate cu atenție.

Autoanticorpi și boli autoimune

Tratamentul cu Realdiron poate duce la apariția și dezvoltarea autoanticorpilor boală autoimună. Pacienții cu predispoziție ereditară sau suspiciune de a dezvolta simptome de boli autoimune trebuie monitorizați în mod constant pentru diagnosticul precoce. Dacă sindromul Vogt-Koyanagi-Harada este suspectat la pacienții cu hepatită cronică C, tratamentul antiviral trebuie întrerupt și trebuie discutată necesitatea terapiei cu corticosteroizi.

Febră

Febra poate fi o manifestare a unui sindrom asemănător gripei, care apare adesea în timpul terapiei cu interferon, dar alte cauze ale apariției sale trebuie excluse.

Pentru a reduce temperatura corpului și a reduce durerile de cap în timpul sindromului asemănător gripei, care poate apărea în timpul terapiei cu Realdiron, se recomandă utilizarea terapiei antipiretice.

Utilizați pentru disfuncția ficatului

Rareori au fost observate decese din cauza hepatitei toxice. Dacă apar semne de disfuncție hepatică în timpul utilizării Realdiron, pacientul are nevoie de monitorizare atentă și, dacă simptomele progresează, întreruperea medicamentului.

Pacienții cu hepatită cronică B care au scăderea funcției sintetice a ficatului (de exemplu, albumină scăzută sau timp de protrombină prelungit) dar care îndeplinesc criteriile de eligibilitate pentru tratament pot prezenta un risc crescut de a dezvolta decompensare clinică dacă nivelul aminotransferazei crește în timpul tratamentului. Înainte de a trata astfel de pacienți, beneficiile utilizării Realdiron trebuie determinate în raport cu posibilele riscuri.

Respingerea alogrefei

Dovezile preliminare sugerează că terapia cu interferon alfa poate crește riscul de respingere a transplantului renal. De asemenea, a fost raportată respingerea grefei hepatice, deși nu a fost stabilită o relație cauzală cu terapia cu interferon alfa.

Hidratarea

La tratarea cu Realdiron, este necesar să se asigure o hidratare adecvată a organismului, deoarece în unele cazuri s-a observat hipotensiune arterială cauzată de deshidratare (care poate necesita administrarea suplimentară de lichide).

Sistemul cardiovascular

Pacienții cu antecedente de boli cardiovasculare (insuficiență cardiacă cronică, infarct miocardic și/sau aritmii) necesită supraveghere medicală atentă atunci când prescriu Realdiron. Au fost raportate cazuri izolate de cardiomiopatie, uneori cu dezvoltare reversibilă după întreruperea tratamentului cu Realdiron. La pacienţii cu antecedente de boli de inimă, se recomandă ca

ECG înainte și în timpul terapiei cu Realdiron. Aritmiile, în principal supraventriculare, au apărut rar și predominant la pacienții cu antecedente de boli cardiovasculare sau cu tratament anterior cu medicamente cardiotoxice. Astfel de tulburări de ritm răspund de obicei la terapia standard, dar pot necesita modificarea dozei sau întreruperea tratamentului cu Realdiron.

Sistemul respirator

Orice pacient cu febră, tuse, dificultăți de respirație sau alte simptome respiratorii ar trebui să sufere examinare cu raze X cufăr. Dacă sunt detectate infiltrate sau este prezentă afectarea funcției pulmonare, este necesară o monitorizare atentă a pacientului și, dacă este necesar, întreruperea terapiei cu Realdiron. Astfel de modificări au apărut mai frecvent la pacienții cu hepatită cronică C care au primit terapie cu interferon alfa, dar au existat rapoarte despre dezvoltarea lor la pacienții cu cancer care au primit și terapie cu interferon alfa. Retragerea în timp util a terapiei cu interferon alfa și utilizarea corticosteroizilor duce la dispariția reacțiilor pulmonare adverse. În plus, mai mult decât apariție frecventă dintre aceste simptome atunci când se utilizează Shosaikoto (un medicament din plante chinezești) simultan cu interferon alfa.

Tulburări mintale și centrale sistem nervos(CNS). Tulburări grave ale sistemului nervos central, în special depresie, gânduri suicidare și tentative de suicid, au fost observate la unii pacienți în timpul tratamentului cu Realdiron și chiar după tratament, în principal în decurs de 6 luni. La copiii și adolescenții care au luat Realdiron în asociere cu ribavirină, gândurile suicidare și încercările de sinucidere au fost observate mai des în comparație cu pacienții adulți (2,4% față de 1%). Alte tulburări mentale, cum ar fi depresia, labilitatea emoțională și somnolența, au fost, de asemenea, observate la pacienți adulți, copii și adolescenți. Dacă apar astfel de simptome, trebuie luată în considerare severitatea potențială a unor astfel de evenimente adverse. Dacă simptomele persistă sau cresc, sau dacă sunt detectate gânduri suicidare sau comportament agresiv, se recomandă întreruperea tratamentului și acordarea pacientului cu îngrijire psihiatrică adecvată.

Pacienți cu tulburări mintale existente sau în antecedente. Utilizarea interferonului alfa-2b la copii și adolescenți cu tulburări psihice existente sau antecedente este contraindicată (vezi pct. „Contraindicații”).

Dacă s-a decis că terapia cu Realdiron este necesară pentru pacienții adulți cu tulburări psihice existente sau cu antecedente, precum și consumul de alcool și dependența de droguri, ar trebui început numai după un diagnostic individual adecvat și sub monitorizarea constantă a stării psihice.

Tratamentul cu interferon poate agrava simptomele probleme mentale la pacienții infectați cu virusul hepatitei C, cu tulburări psihice existente sau un istoric al acestora, precum și cu dependență de alcool și droguri. Dacă tratamentul cu interferon este necesar pentru pacienții cu astfel de tulburări, atunci pentru a obține tratament de succes Interferonul este utilizat pentru a trata în mod corespunzător simptomele psihiatrice. În plus, screening-ul individual al comportamentului pacienților și al frecvenței simptomelor de sănătate mintală este obligatoriu. Tratamentul prealabil este recomandat acestor pacienți înainte de apariția sau dezvoltarea simptomelor psihiatrice.

Tulburări oftalmologice

Toți pacienții trebuie să fie supuși unui examen oftalmologic înainte de a începe terapia. Terapia cu Realdiron trebuie întreruptă dacă apar tulburări oftalmologice noi sau care se agravează.

Modificări ale tiroidei

Dacă există o disfuncție a glandei tiroide, tratamentul cu Realdiron poate fi început sau continuat dacă nivelul TSH poate fi menținut la un nivel normal cu terapia medicamentoasă. Întreruperea utilizării Realdiron nu duce la normalizarea funcției tiroidiene care a fost afectată în timpul tratamentului.

Tulburări metabolice

În legătură cu cazurile de dezvoltare sau progresie a hipertrigliceridemiei la forme severe, se recomandă monitorizarea nivelului lipidelor din sânge.

Alte

Având în vedere cazurile descrise de exacerbare a psoriazisului și a sarcoidozei în timpul tratamentului cu interferon alfa, Realdiron trebuie utilizat la astfel de pacienți numai dacă beneficiul așteptat depășește riscul posibil.

Utilizare în pediatrie

Decizia de a iniția terapia combinată la copii trebuie luată individual, luând în considerare ambele semne de progresie a bolii (activitate proces inflamatorîn ficat și fibroză), precum și factori de prognostic pentru dezvoltarea răspunsului virusologic, genotipului VHC și încărcăturii virale. Este important de reținut că terapia combinată poate provoca întârziere de creștere și creștere în greutate la unii copii tratați timp de un an, a căror reversibilitate nu este complet clară. În acest sens, se recomandă monitorizarea dezvoltării fizice a copiilor în timpul terapiei și timp de 6 luni după terminarea tratamentului.

Pentru a reduce riscul de întârziere a creșterii, copilul trebuie tratat dacă este posibil după o creștere rapidă în timpul pubertății. Nu sunt disponibile date de impact tratament pe termen lung pentru pubertate.

Efectul asupra funcției de reproducere

Au fost raportate scăderi ale concentrațiilor serice de estradiol și progesteron la femeile cărora li se administrează Realdiron. Prin urmare, Realdiron poate fi utilizat la femeile în vârstă de reproducere dacă folosesc mijloace eficiente contraceptie. Realdiron este, de asemenea, utilizat cu prudență la bărbații de vârstă reproductivă.

Sarcina și alăptarea

Nu există date suficiente despre utilizarea Realdiron în timpul sarcinii. Realdiron trebuie utilizat în timpul sarcinii dacă beneficiul potențial pentru mamă depășește potențiala amenințare pentru făt.

Datorită posibilelor efecte adverse asupra copil Decizia de a opri alăptarea sau de a întrerupe medicamentul trebuie luată ținând cont de gradul de necesitate a acestei terapii pentru mamă.

Caracteristicile efectului medicamentului asupra capacității de a conduce vehicul sau mecanisme potențial periculoase.

Este necesar să se avertizeze pacientul cu privire la posibila dezvoltare a slăbiciunii, somnolenței și tulburărilor de conștiență în timpul terapiei și se recomandă evitarea conducerii unei mașini sau folosirea de echipamente complexe.

Supradozaj

În prezent, nu au fost raportate cazuri de supradozaj.

În caz de supradozaj este indicat tratamentul simptomatic.

Această secțiune prezintă instrucțiuni de utilizare a interferonilor alfa 2b și alfa 2a prima generație, care sunt numite și liniare, simple sau de scurtă durată. Singurul avantaj al acestor preparate este prețul lor relativ scăzut.

În 1943, V. și J. Heile au descoperit așa-numitul fenomen de interferență. Ideea inițială a interferonului a fost aceasta: un factor care împiedică reproducerea virușilor. În 1957, omul de știință englez Alik Isaacs și cercetătorul elvețian Jean Lindenman au izolat acest factor, l-au descris clar și l-au numit interferon.

Interferonul (IFN) este o moleculă proteică care este produsă în corpul uman. Aparatul genetic uman codifică o „rețetă” pentru sinteza sa (gena interferonului). Interferonul este una dintre citokine, molecule de semnalizare care joacă un rol important în lucru sistem imunitar.

Peste o jumătate de secol de la descoperirea IFN-ului, au fost studiate zeci de proprietăți ale acestei proteine. Din punct de vedere medical, principalele sunt funcțiile antivirale și antitumorale.

Corpul uman produce aproximativ 20 de tipuri - o întreagă familie - de interferoni. IFN este împărțit în două tipuri: I și II.

IFN-urile de tip I - alfa, beta, omega, teta - sunt produse și secretate de majoritatea celulelor corpului ca răspuns la acțiunea virușilor și a altor agenți. IFN de tip II include interferonul gamma, care este produs de celulele sistemului imunitar ca răspuns la acțiunea agenților străini.

Inițial, preparatele cu interferon au fost obținute numai din celule sanguine donatoare; Se numeau astfel: interferoni leucocitari. În 1980, a început era interferonilor recombinanți sau modificați genetic. Producția de medicamente recombinante a devenit semnificativ mai ieftină decât obținerea medicamente similare din sânge de la donator uman sau din alte materii prime biologice; producția lor nu folosește sânge de la donator, care poate servi ca sursă de infecție. Medicamentele recombinante nu conțin impurități străine și, prin urmare, au mai puține efecte secundare. Potențialul lor de vindecare este mai mare decât cel al medicamentelor naturale similare.

Pentru tratament boli virale, în special hepatita C, se utilizează predominant interferon alfa (IFN-α). Există interferoni „simpli” („de scurtă durată”) alfa 2b și alfa 2a și pegilați (peginterferon alfa-2a și peginterferon alfa-2b). Interferonii „simpli” practic nu sunt folosiți în UE și SUA, dar în țara noastră, datorită ieftinității lor comparative, sunt folosiți destul de des. În tratamentul hepatitei C, se folosesc ambele forme de IFN-α „scurt”: interferon alfa-2a și interferon alfa-2b (diferind cu un aminoacid). Injecțiile cu interferoni simpli se fac de obicei o dată la două zile (cu peginterferoni - o dată pe săptămână). Eficacitatea tratamentului cu IFN de scurtă durată atunci când este administrat o dată la două zile este mai mică decât cu peginterferoni. Unii experți recomandă injecții zilnice cu IFN „simple”, deoarece eficacitatea AVT este puțin mai mare.

Gama de IFN-uri „scurte” este destul de largă. Sunt produse de diferiți producători sub diferite denumiri: Roferon-A, Intron A, Laferon, Reaferon-EC, Realdiron, Eberon, Interal, Altevir, Alfarona și altele.
Cele mai studiate (și deci scumpe) sunt Roferon-A și Intron-A. Eficacitatea tratamentului cu aceste IFN în combinație cu ribavirină, în funcție de genotipul virusului și de alți factori, variază de la 30% la 60%. O listă a principalelor mărci ale producătorilor de interferon simplu și descrierile acestora sunt prezentate în tabel.

Toți interferonii trebuie păstrați la frigider (de la +2 la +8 grade Celsius). Nu trebuie încălzite sau congelate. Nu agitați și nu expuneți medicamentul direct razele de soare. Este necesar să transportați medicamentele în containere speciale.

Invenția se referă la inginerie genetică, biotehnologie, medicină, farmacologie. Un nou ADN plasmid recombinant multicopie pSX50, care codifică sinteza interferonului alfa-2b leucocitar uman, a cărui expresie este sub controlul promotorilor de lactoză și triptofan și un terminator de transcripție. Ca rezultat al transformării celulelor tulpinii receptoare E. coli BL21 cu ADN plasmid recombinant pSX50, s-a obţinut tulpina E. coli SX50 - un producător de interferon alfa-2b uman recombinant leucocitar cu o productivitate de până la 0,9-1,0 g de interferon alfa-2b din 1 litru de mediu de cultură. Metoda de producere a interferonului alfa-2b recombinant se bazează pe utilizarea unei tulpini recombinate create de E. coli SX50 și implică cultivarea ei profundă pe un mediu nutritiv cu un conținut redus de triptofan cu adăugarea continuă de substraturi nutritive în timpul procesului de biosinteză, distrugerea mecanică a celulelor microorganismelor în timpul tensiune arterială crescută, dizolvarea proteinei agregate într-o soluție concentrată de clorhidrat de guanidină, urmată de renaturarea interferonului în soluții tampon fiziologice în prezența agenților haotropi și purificarea acesteia folosind purificarea cromatografică în trei etape a interferonului pe rășini de tip Chelating Sepharose Fast Flow imobilizate cu Cu +2 ioni, cromatografia schimbătoare de ioni pe rășini schimbătoare de ioni de tip SM Sephsrose Fast Flow și cromatografia de filtrare pe gel pe rășini de tip Superdex 75. Metoda face posibilă obținerea unei substanțe interferon cu puritate mai mare de 99% conform electroforezei în reducție și non- condiții reducătoare la colorarea gelurilor cu argint și mai mult de 98% conform RF HPLC și nu conține pirogeni (test LAL) în cantități de minim 400-800 mg la 1 litru de mediu de cultură. 3 n. si 3 posturi salariale, 6 bolnavi.

Desene pentru brevetul RF 2242516

Invenția se referă la inginerie genetică medicamente obținut biotehnologic și anume la metodele de producție industrială de recombinant interferonul leucocitar alfa-2b uman în scopuri medicale (denumit în continuare interferon), precum și la tulpini producătoare de recombinant de Escherichia coli (E.coli) și ADN plasmid care codifică sinteza interferonului.

Interferonii sunt molecule de proteine cu o greutate moleculară de 15.000 până la 21.000 daltoni, produse și secretate de celule ca răspuns la infecția virală sau la alți agenți patogeni. Există trei grupe principale de interferoni: alfa, beta și gamma. Aceste grupuri în sine nu sunt omogene și pot conține mai multe specii moleculare diferite de interferon. Astfel, au fost identificate peste 14 soiuri genetice de interferon alfa, care prezintă interes și sunt utilizate pe scară largă în medicină ca agenți antivirali, antiproliferativi și imunomodulatori.

Există metode cunoscute pentru obţinerea interferonului leucocitar uman din leucocite din sângele donatorului uman induse de viruşi şi alţi inductori (SU1713591, RU 2066188, RU 2080873).

Principalul dezavantaj al acestor metode de producere a interferonilor este probabilitatea contaminării produsului final cu viruși umani, cum ar fi virusul hepatitei B și C, virusul imunodeficienței etc.

În prezent, metoda de producere a interferonului prin sinteză microbiologică a fost recunoscută ca fiind mai promițătoare, ceea ce face posibilă obținerea produsului țintă cu un randament semnificativ mai mare din materii prime relativ ieftine. Abordările utilizate aici fac posibilă crearea unor variante ale unei gene structurale care sunt optime pentru expresia bacteriană, precum și elemente de reglementare care controlează exprimarea acesteia.

Ca sursă de microorganisme sunt utilizate diferite modele de tulpini de Pichia pastoris, Pseudomonas putida și Escherichia coli.

Dezavantajul utilizării P. pastoris ca producător de interferon (J.N. Garcia, J.A. Aguiar et. al. //Expresia la nivel înalt a IFN-2b uman în Pichia pastoris.//Biotecnologia Aplicada, 12(3),152-155, 1995 ), Condițiile de fermentație ale acestui tip de drojdie sunt extrem de dificile, necesitatea menținerii stricte a concentrației inductorului, în special a metanolului, în timpul procesului de biosinteză. Dezavantajul folosirii Ps. putida (SU1364343, SU1640996, SU1591484, RU1616143, RU2142508) reprezintă complexitatea procesului de fermentație la un nivel scăzut de expresie (10 mg interferon la 1 litru de mediu de cultură). Mai productivă este utilizarea tulpinilor de Escherichia coli (Semin. Oncol., 1997, Iun; 24 (3 Suppl. 9): S9-41-S9-51).

Cunoscut un numar mare de plasmide și tulpini de E. coli create pe baza lor care exprimă interferon: tulpini de E. coli ATCC 31633 și 31644 cu plasmidele Z-pBR322 (Psti) HclF-11-206 sau Z-pBR 322(Pstl)/HclN SN 35-AHL6 ( SU 1764515), tulpină de E. coli pINF-AP2 (SU 1312961), tulpină de E. coli pINF-F-Pa (AU 1312962), tulpină de E. coli SG 20050 cu plasmida p280/21FN (Kravchenko V.V. et al., Bioorganic. 1987, v. 13, nr. 9, p. 1186-1193), tulpina E. Coli SG 20050 cu plasmida pINF14 (SU 1703691), tulpina E. coli SG 20050 cu plasmida pINF16 (RU 2054041), etc. asupra utilizării acestor tulpini este instabilitatea lor, precum și nivelul insuficient de expresie a interferonului.

Alături de caracteristicile tulpinilor utilizate, eficiența procesului depinde în mare măsură de tehnologia utilizată pentru izolarea și purificarea interferonului.

Există o metodă cunoscută pentru producerea interferonului, care include cultivarea celulelor Ps. putida, distrugerea biomasei, tratament cu polietilenimină, fracţionare cu sulfat de amoniu, cromatografia hidrofobă pe fenilsilocrom C-80, fracţionarea pH-ului lizatului, concentraţia şi diafiltrarea acestuia, cromatografia cu schimb ionic pe celuloză DE-52, eluare în gradient de pH, ion cromatografia de schimb a eluentului rezultat pe celuloză SM-52, concentrare prin trecerea printr-o casetă de filtru și filtrare pe gel pe Sephadex G-100 (SU 1640996). Dezavantajul acestei metode, pe lângă fermentarea complexă în mai multe etape, este procesul în mai multe etape în obținerea produsului final.

Există, de asemenea, o metodă cunoscută pentru producerea interferonului, care include cultivarea tulpinii de E. coli SG 20050/pIF16 în bulion LB în baloane într-un agitator termostatat, centrifugarea biomasei, spălarea acesteia cu o soluție tampon și tratamentul cu ultrasunete pentru distrugerea celulelor. Lizatul rezultat este centrifugat, spălat cu o soluție de uree 3M în tampon, dizolvat într-o soluție de clorură de guanidină în tampon, tratat cu ultrasunete, centrifugat, sulfitoliză oxidativă, dializă împotriva ureei 8 M, renaturare și cromatografie finală în două etape pe CM- 52 celuloză și Sephadex G-50 (RU 2054041). Dezavantajele acestei metode sunt productivitatea relativ scăzută a principalelor etape ale procesului de izolare și purificare. Acest lucru se aplică în special tratamentului cu ultrasunete al produsului, dializei și sulfitolizei oxidative, ceea ce duce la instabilitatea randamentului de interferon, precum și imposibilitatea utilizării acestei metode pentru producția industrială a interferonului.

Ca cel mai apropiat analog (prototip), poate fi indicată o metodă de obținere a interferonului leucocitar uman care constă în cultivarea unei tulpini recombinate de E. coli, congelarea biomasei rezultate la o temperatură care nu depășește -70°C, decongelarea, distrugerea celulelor microorganismelor. cu lizozim, îndepărtarea ADN și ARN prin introducerea în lizat de ADNază și purificarea formei izolate insolubile de interferon prin spălare cu o soluție tampon cu detergenți, dizolvarea precipitatului de interferon într-o soluție de clorhidrat de guanidină, renaturare și purificare într-o singură etapă prin ion cromatografia de schimb. Tulpina de E. coli SS5 obţinută folosind plasmida recombinantă pSS5 conţinând trei promotori: Plac, P t7 şi P trp, şi gena alfa-interferonului cu substituţii de nucleotide introduse este utilizată ca producător.

Exprimarea interferonului de către tulpina E. coli SS5 care conține această plasmidă este controlată de trei promotori: Plac, Pt7 și Ptrp. Nivelul de expresie a interferonului este de aproximativ 800 mg per 1 litru de suspensie celulară (RU 2165455).

Dezavantajul acestei metode este eficiența tehnologică scăzută a utilizării distrugerii enzimatice a celulelor, ADN-ului și ARN-ului microorganismului și purificării cromatografice într-o singură etapă a interferonului. Acest lucru provoacă instabilitate în procesul de eliberare a interferonului, duce la o scădere a calității acestuia și limitează posibilitatea utilizării schemei de mai sus pentru producția industrială de interferon. Dezavantajele acestei plasmide și ale tulpinii bazate pe ea sunt utilizarea în plasmidă a unui promotor puternic nereglat al fagului T7 din tulpina E. coli BL21 (DE3), în care gena ARN polimerazei T7 este situată sub promotorul de operonul lac și care este mereu „curgător”. În consecință, sinteza interferonului are loc în mod continuu în celulă, ceea ce duce la disocierea plasmidei și la o scădere a viabilității celulelor tulpinii și, ca urmare, la o scădere a randamentului de interferon.

Obiectivul acestei invenții este de a construi o tulpină producător industrial recombinant de E. coli folosind un nou ADN plasmid recombinant, care are un nivel ridicat de biosinteză a interferonului și de a dezvolta o tehnologie industrială eficientă pentru producerea unei substanțe interferon pentru uz medical, corespunzătoare în calitate la „Farmacopeea Europeană” pentru substanța interferon alfa-2b.

Această problemă a fost rezolvată prin crearea ADN-ului plasmid recombinant pSX50 și a tulpinii de Escherichia coli SX50, depuse în Colecția Rusă de Tulpini Industriale a Institutului de Cercetare de Stat al Întreprinderilor Unitare de Stat Federal de Genetică, numărul VKPM B-8550,

precum și o metodă de producere a interferonului alfa-2b recombinant, bazată pe utilizarea unei tulpini recombinate de E. coli SX50 și care implică cultivarea în profunzime a acesteia pe un mediu nutritiv cu un conținut redus de triptofan cu adăugarea continuă de substraturi nutritive în proces de biosinteză, distrugerea mecanică a celulelor microorganismelor la presiune înaltă, dizolvarea proteinei agregate într-o soluție concentrată de clorhidrat de guanidină, urmată de renaturarea interferonului în soluții tampon fiziologice în prezența agenților haotropi și purificarea cromatografică în trei etape a interferonului pe rășini precum ca Chelating Sepharose Fast Flow, imobilizat cu ioni de Cu +2, cromatografia de schimb ionic pe rășini schimbătoare de ioni precum CM Sepharose Fast Flow și cromatografia de filtrare pe gel pe rășini precum Superdex 75.

Conform invenţiei, este propus un nou ADN plasmidic multicopie recombinant pSX50, care codifică sinteza interferonului alfa-2b leucocitar uman, a cărui expresie se află sub controlul promotorilor lactozei şi triptofanului şi al unui terminator de transcripţie. Plasmida pSX50 are 3218 perechi de baze (bp) și se caracterizează prin prezența următoarelor fragmente:

Secvenţa de la nucleotida 1 la nucleotida (nt) 176 include un fragment de ADN de 176 bp care conţine promotorul triptofan (P trp);

Secvența de la 177 nt. la 194 n. include un fragment de ADN sintetic de 18 bp care conține secvența Shine Delgarno, responsabilă pentru inițierea translației;

Secvență de la 195 nt. la 695 n. include un fragment de ADN cu dimensiunea de 501 bp care conține secvența genei interferonului cu următoarele substituții de nucleotide: la poziția 37, substituția lui A la C, la poziția 39, substituirea lui G la T, la poziția 40, substituirea lui A la C, la poziția 42, înlocuirea lui G cu T , în poziția 67, înlocuirea lui A cu C, în poziția 69, înlocuirea lui G cu T, în poziția 70, înlocuirea lui A cu C, în poziția 72, înlocuirea lui A cu T, în poziţia 96, înlocuirea lui G cu A, în poziţia 100, înlocuirea lui A cu C, în poziţia 102, înlocuirea lui A cu T, în poziţia 114, înlocuirea lui A cu C, în poziţia 120, înlocuirea lui C cu G, în poziţia 126, înlocuirea lui G cu A, în poziţia 129, înlocuirea lui G cu A, în poziţia 330, înlocuirea lui C cu G, în poziţia 339 înlocuind G cu A, în poziţia 342 înlocuind G cu A, în poziţia 487 înlocuind A cu C, în poziţia 489 înlocuind A cu T, în poziţia 495 înlocuind G cu A;

Secvență de la 696 nt. conform 713 n. include un fragment de ADN sintetic de 18 bp care conţine un polilinker sintetic;

Secvența de la 714 nt. la 1138 n. include un fragment de ADN al plasmidei pKK223-3 cu 4129 nt. la 4553 n. 425 bp în dimensiune, care conţine secvenţa terminatorului strict de transcripţie rrnBT 1 T 2;

Secvență din 1139 b. la 1229 n. include un fragment de ADN al plasmidei pUC19 cu 2487 nt. la 2577 n. 91 bp în mărime, conţinând promotorul genei β-lactomazei (gena de rezistenţă la ampicilină - Amp R);

Secvență din 1230 b. la 2045 n. include un fragment de ADN al plasmidei pUC4K cu 720 nt. până în 1535 d.Hr 816 bp în dimensiune, care conține regiunea structurală a genei kan;

Secvență din 2046 b. la 3218 n. include un fragment de ADN al plasmidei pUC19 de la 1625 la 453 nt. 1173 bp în dimensiune, care conține secvența responsabilă pentru replicarea plasmidei (ori) și promotorul lac (P lac).

Figurile 1-5 prezintă diagrame de construcție și o hartă fizică a plasmidei pSX50.

Figura 6 prezintă secvenţa completă de nucleotide determinată pentru plasmida pSX50.

Tulpina SX50 de Escherichia coli a fost obținută prin transformarea celulelor BL21 de Escherichia coli cu plasmida pSX50 utilizând tehnologia tradițională de inginerie genetică. Tulpina E.Coli SX50 se caracterizează prin următoarele caracteristici.

Caracteristici culturale și morfologice

Celulele sunt mici, drepte, în formă de tijă îngroșată, gram-negative, fără spori. Celulele cresc bine pe medii nutritive simple. La creșterea pe agar Difco, se formează colonii rotunde, netede, convexe, tulburi, strălucitoare, gri cu margini netede. La cultivat în mediu lichid (în mediu minim cu glucoză sau în bulion LB), se formează o turbiditate intensă, uniformă.

Caracteristici fizice și biologice

Aerob. Intervalul de temperatură pentru creștere este de 4-42°C cu un pH optim de 6,5-7,5.

Ca sursă de azot, se folosesc atât săruri minerale sub formă de amoniu și nitrat, cât și compusi organici sub formă de aminoacizi, peptonă, triptonă, extract de drojdie etc.

Aminoacizii, glicerolul și carbohidrații sunt utilizați ca sursă de carbon. Rezistență la antibiotic. Celulele prezintă rezistență la kanamicină (până la 100 μg/ml).

Tulpina 8X50 de Escherichia coli este un producător de interferon.

Metoda, condițiile și compoziția mediului de stocare a tulpinilor

În L-arape cu adaos de kanamicină la o concentrație de 20 mcg/ml sub ulei, în L-bulion care conține 15% glicerol și antibiotice adecvate în fiole la o temperatură de minus 70°C, în stare liofilizată în fiole la un temperatura de plus 4°C.

Tulpina SX50 de Escherichia coli a fost identificată conform Ghidului lui Bergey (1974) ca o tulpină a speciei Escherichia coli.

Metodă de producere industrială a interferonului alfa-2b

O caracteristică a metodei propuse este dezvoltarea unei tehnologii care permite izolarea interferonului dintr-o formă insolubilă care se acumulează în timpul fermentației, ceea ce face posibilă simplificarea semnificativă a schemei tehnologice a procesului de izolare și creșterea randamentului produsului țintă.

Metoda constă în cultivarea tulpinii Escherichia coli SH50 într-un mediu nutritiv, cu adaos constant de substraturi nutritive, de preferință glucoză și extract de drojdie, în procesul de biosinteză, de preferință cu conținut redus de triptofan, distrugerea mecanică a celulelor microorganismelor la presiune ridicată. 700-900 bar, dizolvarea interferonului într-o soluție tampon de clorhidrat de guanidină, renaturarea interferonului în soluții tampon fiziologice în prezența agenților haotropi, urmată de purificarea cromatografică în trei etape a interferonului pe rășini de tip Chelating Sepharose Fast Flow imobilizate cu Cu +2 ioni, cromatografia de schimb ionic pe rășini schimbătoare de ioni de tip CM Sepharose Fast Flow și cromatografia de filtrare pe gel pe rășini precum Superdex 75.

Condițiile optime pentru realizarea etapelor individuale ale producției de interferon sunt următoarele:

Fermentarea se realizează cu adăugarea continuă de substraturi pe tot parcursul procesului, ceea ce determină un nivel ridicat de expresie a interferonului;

Distrugerea celulelor se realizează într-un dezintegrator de tip Gaulin la o presiune de 900 bar;

Îndepărtarea solubilului componentele celulare(ADN, ARN, proteine, lipopolizaharide etc.) sunt produse prin spălarea formei insolubile a interferonului cu soluții tampon care conțin detergenți (Triton XI00, uree etc.);

Precipitatul rezultat care conţine interferon este dizolvat într-o soluţie tampon de clorhidrat de guanidină 6 M;

Renaturarea interferonului se realizează într-o soluție tampon fiziologică care conține agenți haotropi;

Purificarea cromatografică în trei etape a interferonului se efectuează pe Chelating Sepharose Fast Flow, imobilizat cu ioni de Cu +2, pe rășină schimbătoare de cationi SM Sepharose Fast Flow și cromatografie de filtrare pe gel pe o rășină de tip Superdex 75;

După fiecare purificare cromatografică, se efectuează filtrarea de sterilizare prin filtre apirogene cu dimensiunea porilor de 0,22 microni.

Randamentul de interferon ca rezultat al utilizării metodei descrise este de aproximativ 400-800 mg de interferon per 1 litru de mediu de cultură. Calitatea produsului rezultat respectă standardele și cerințele „Farmacopeei Europene” pentru substanța interferon alfa-2b.

Diferențele semnificative între metoda propusă și prototip sunt:

Utilizarea unui design de tulpină cu productivitate mai mare, care face posibilă obținerea unei cantități mai mari de interferon din 1 litru de mediu de cultură în timpul biosintezei;

Utilizarea distrugerii mecanice eficiente a biomasei celulare, care face posibilă obținerea unui extract mai pur al formei insolubile de interferon într-un timp mai scurt, cu pierderi mai mici;

Utilizarea soluțiilor tampon fiziologice în timpul renaturarii în prezența agenților haotropi face posibilă creșterea randamentului formei corect renaturate de interferon;

Purificarea cromatografică în trei etape a interferonului face posibilă obținerea unei substanțe interferon cu puritate mai mare de 99% conform electroforezei în condiții reducătoare și nereducătoare la colorarea gelurilor cu argint și mai mult de 98% conform HPLC RF și practic lipsită de pirogeni. (testul LAL).

Esenţa şi avantajele grupului de invenţii revendicat sunt ilustrate prin următoarele exemple.

Exemplul 1. Construcția plasmidei recombinante pSH50

Metoda de construire a plasmidei pSX50 include următorii pași:

Construcția plasmidei vector pSX10;

1. construcția plasmidei pSX3 (2641 bp)

2. construcția plasmidei vector pSX10 (2553 bp)

Construcția plasmidei recombinante pSX41 (3218 pb);

Construcția plasmidei recombinante pSX43 (3218 pb);

Construcția plasmidei recombinante pSX45 (3218 bp);

Construcția plasmidei recombinante pSX50 (3218 bp).

Construcția plasmidei vector pSX10

Plasmida vectorială pSX10 este un vector pUC19 în care secvența de codificare a genei beta lactomazei, care asigură rezistență la ampicilină, este înlocuită cu secvența de codificare a genei kan și conține terminatorul de transcripție din plasmida pKK223-3.

Construcția plasmidei vector pSS10 se realizează în două etape:

Prepararea plasmidei pSX3 (2641 bp), care este plasmida pUC19, în care regiunea de codificare a genei amp este înlocuită cu regiunea de codificare a genei kan;

Prepararea plasmidei vector pSX10 (2553 bp), care este o plasmidă pSX3 în care un fragment de ADN care codifică terminatorul de transcripţie rBT1T2 este inserat în spatele situsului BamHI.

Se efectuează cinci runde de amplificare a ADN-ului pentru a obține plasmida pSX3. Metoda PCR(reacția în lanț a polimerazei). În timpul primei runde, folosind ADN plasmid pUC19 ca șablon, este amplificat un fragment de ADN de 1828 bp în dimensiune. (fragment PU1-PU2) folosind grunduri:

Aceasta și reacțiile PCR ulterioare sunt efectuate în următoarele condiții: 20 mM Tis-HCI, pH 8,8, 10 mM (NH4)2S04, 10 mM KCI, 2 tM MgCl2, 0,1% Triton X100, 0,1 mg/ml BSA, 0,2 mM din fiecare dNTP, 1,25 unități. ADN polimerază Pfu, 100 ng ADN. Procesul de amplificare constă din următoarele etape: încălzire la 95°C timp de 5 min, 35 de cicluri PCR (30 sec 95°C, 30 sec 56°C, 2 min 72°C) și incubare timp de 10 min la 72°C. După amplificare (și după amplificările ulterioare), fragmentul de ADN este purificat prin electroforeză într-un gel de agaroză 1%. În timpul celei de-a doua și a treia runde, folosind ADN plasmid pUC4K ca șablon, un fragment de ADN de 555 bp este amplificat. (fragment KM1-KM2) folosind primeri:

şi amplificarea unui fragment de ADN de 258 bp. (KMZ-KM4) din grunduri

În a cincea rundă de PCR, fragmentele (PU1-PU2) și (KM1-KM4) sunt combinate în următoarele condiții: încălzire la 95°C timp de 5 minute, 5 cicluri PCR (30 sec 95°C, 30 sec 56°C , 10 min 72°C) și incubare timp de 10 min la 72°C. ADN-ul obținut după ultima PCR este transformat direct în celule ale tulpinii DH5 de E. coli și placat pe mediu LA care conține 20 μg/ml kanamicină. După incubare timp de 12 ore la 37°C, clonele sunt eliminate, ADN-ul plasmidic este izolat și se efectuează analiza de restricție. Ca rezultat, se obține plasmida pSX3 cu o dimensiune de 2641 bp.

Pentru a obține plasmida vector pSX10, se efectuează trei runde de amplificare ADN folosind PCR. În prima rundă, folosind ADN plasmid pSX3 ca șablon, un fragment de ADN de 2025 bp este amplificat. (fragmentul 10.1-10.2) folosind primeri:

În timpul celei de-a doua runde, folosind ca matriță ADN-ul plasmidei pKK223-3, este amplificat un fragment de ADN cu dimensiunea de 528 bp. (fragment KK1-KK2) folosind primeri:

În a treia rundă de PCR, fragmentele (10.1-10.2) și (KK1-KK2) sunt combinate în următoarele condiții: încălzire la 95°C timp de 5 minute, 5 cicluri PCR (30 sec 95°C, 30 sec 56°C , 10 min 72°C) și incubare timp de 10 min la 72°C. ADN-ul obținut după ultima PCR este transformat direct în celule ale tulpinii DH5 de E. coli și placat pe mediu LA care conține 20 μg/ml kanamicină. După incubare timp de 12 ore la 37°C, clonele sunt eliminate, ADN-ul plasmidic este izolat și se efectuează analiza de restricție. Ca rezultat, se obține plasmida pSX10 cu o dimensiune de 2553 bp.

Construcția plasmidei recombinante pSX41

Plasmida recombinantă pSX41 este un fragment de ADN Hind III - BamHI al plasmidei vector pSX3 (2529 bp), fragmentul de ADN Hind III - EcoRI de 168 bp, care codifică promotorul operonului triptofan E. coli (P trp), EcoRI-XbaI un sintetic Fragment de ADN de 20 bp care codifică secvența SD (Shine-Delgarno) și un fragment de ADN Xbal-BamHI de 501 bp care codifică gena interferonului alfa 2b uman.

Pentru a obține fragmentul ADN Hind III - BamHI al plasmidei vector pSX3 (2529 bp), ADN-ul plasmidei pSX3 este tratat cu enzimele de restricție HindIII și BamHI, urmată de purificare electroforetică în gel de agaroză 1%. Fragmentul de ADN EcoRI Hind III de 168 bp care codifică promotorul operonului triptofan (P trp) este obținut prin PCR utilizând ADN-ul total de E. coli ca matriță și primerii TRP1 și PRP2, urmat de tratamentul fragmentului amplificat cu restricție Hindll și EcoRI enzime:

Pentru a obține EcoRI-Xbal un fragment de ADN sintetic de 20 bp care codifică secvența SD (Shine-Delgarno), sunt sintetizate următoarele oligonucleotide complementare:

Fragmentul de ADN XbaI-BamIII cu dimensiunea de 501 pb, care codifică gena interferonului alfa 2b uman, este obținut prin PCR utilizând ADN uman total ca matriță și primerii IFN1 și IFN2, urmat de procesarea fragmentului amplificat cu enzimele de restricție Xbal și BamIII:

Apoi, fragmentele purificate electroforetic sunt combinate, ligate cu enzima fago-ligaza T4, ADN-ul este transformat în celule ale tulpinii DH5 de E. coli și placat pe mediu LA care conține 20 μg/ml kanamicină. După incubare timp de 12 ore la 37°C, clonele sunt eliminate, ADN-ul plasmidic este izolat, se efectuează analiza de restricție și se determină structura ADN-ului primar. Ca rezultat, se obține plasmida pSX41 cu o dimensiune de 3218 bp. Apoi, mutageneza pas cu pas a genei interferonului este efectuată pentru a crește nivelul de exprimare a produsului țintă. Mutageneza genei interferonului constă în înlocuirea tripleților care se găsesc rar în E. coli, care codifică aminoacizii corespunzători, cu tripleți care se găsesc adesea în E. coli, care codifică aceiași aminoacizi. Mutageneza ADN-ului genei interferonului se realizează prin metoda PCR.

Construcția plasmidei recombinante pSX43

Pentru a obține plasmida recombinantă pSX43, o rundă de amplificare a ADN-ului este efectuată prin PCR utilizând ADN-ul plasmidei pSX41 ca șablon și primerii IFN3 și IFN4:

PCR se efectuează în următoarele condiţii: încălzire la 95°C timp de 5 min, 20 cicluri PCR (30 sec 95°C, 30 sec 56°C, 10 min 72°C) şi incubare timp de 20 min la 72°C. ADN-ul obținut după PCR este transformat direct în celule ale tulpinii DH5 de E. coli și placat pe mediu LA care conține 20 μg/ml kanamicină. După incubare timp de 12 ore la 37°C, clonele sunt eliminate, ADN-ul plasmidic este izolat, se efectuează analiza de restricție și se determină structura ADN-ului primar. Ca rezultat, se obține plasmida pSX43 cu o dimensiune de 3218 bp.

Construcția plasmidei recombinante pSX45

Pentru a obține plasmida recombinantă pSX45, o rundă de amplificare a ADN-ului este efectuată prin PCR folosind ADN-ul plasmidei pSX43 ca șablon și primerii IFN5 și IFN6:

Construcția plasmidei recombinante pSX50.

Pentru a obține plasmida recombinantă pSX50, o rundă de amplificare a ADN-ului este efectuată prin PCR utilizând ADN-ul plasmidei pSX45 ca șablon și primerii IFN7 și IFN8:

Exemplul 2. Prepararea tulpinii E. coli SX50 - producător de interferon

Tulpina producătoare de interferon E. coli SX50 este obţinută prin transformarea celulelor tulpinii E. coli BL21 cu plasmida recombinantă pSX50. Tulpina producătoare de interferon este crescută într-un fermentator de 30 de litri până la o densitate optică de 25,0-30,0 p.u. în mediu M9 conţinând 1% hidrolizat acid de cazeină (Difco), 1% glucoză, 40 ug/ml kanamicină, la o temperatură de 38-39°C. În timpul procesului de fermentație, se efectuează o adăugare continuă de substrat nutritiv folosind un controler gravimetric.

Exemplul 3. Metodă pentru izolarea interferonului din tulpina SX50 de E. coli

Interferonul a fost obținut în 4 etape:

Etapa 1. Cultivarea tulpinii de E. coli SX50.

Etapa 2. Izolarea și purificarea formei insolubile de interferon.

Etapa 3. Dizolvarea și renaturarea interferonului.

Etapa 4. Purificarea cromatografică a interferonului.

Etapa 1. Cultivarea tulpinii de E. coli SX50

Inoculul crescut de E. coli tulpina SX50 într-un volum de 3 litri de mediu bogat LB timp de 12 ore la 26°C este introdus aseptic într-un fermentator care conține 27 de litri de mediu steril care conține M9, 1% hidrolizat acid de cazeină, 1% glucoză, 1 mM MgCI2, 0,1 mM CaCI2, 40 mg/ml kanamicina. Cultivarea în fermentator se realizează la o temperatură de 38-39°C, menținându-se un pH de 7±0,15 prin titrare automată cu o soluție de hidroxid de sodiu 40%. Concentrația de oxigen dizolvat în intervalul (50±10)% din saturație este menținută prin schimbarea vitezei agitatorului de la 100 la 800 rpm și a alimentării cu aer de la 1 la 15 l/min. Concentrația substraturilor, în special glucoză și extract de drojdie, este măsurată în timpul fermentației și concentrația lor este menținută prin variarea ratei de alimentare a soluțiilor concentrate prin pompe peristaltice folosind un controler gravimetric.

Acumularea interferonului în formă insolubilă este monitorizată folosind microscopie cu contrast de fază, electroforeză pe gel de poliacrilamidă 15% (SDS-PAAG) și cromatografie de înaltă performanță în fază inversă (RF HPLC). Fermentarea este oprită când se atinge densitatea optică maximă (~ 25-30 p.u.) și sinteza interferonului se oprește. La sfârșitul fermentației, lichidul de cultură este separat prin centrifugare într-un rotor de curgere la o viteză de rotație de 5000-10000 rpm. Biomasa este ambalată în pungi de plastic și congelată la minus 70°C.

Etapa 2. Izolarea și purificarea formei insolubile de interferon

300-400 g de biomasă congelată de E. coli tulpina SX50 sunt suspendate în 3000 ml de tampon 1 (20 mM Tris-HCI, pH 8,0, 10 mM EDTA, 0,1% Triton X100). Suspensia este trecută printr-un omogenizator de curgere de tip Gaulin, menținut la o presiune de 900 bar și centrifugat într-un rotor de curgere la 15.000 rpm. Precipitatul rezultat este spălat în condiţii similare secvenţial cu soluţii tampon 2 (20 mM Tris-HCI, pH 8,0, 1 mM EDTA, 3 M uree) şi tampon 3 (20 mM Tris-HCI pH 8,0, 1 mM EDTA) şi în final interferonul precipitatul este suspendat în 200 ml tampon 3. În acest caz, timpul de izolare și purificare a formei insolubile de interferon nu este mai mare de 5 ore.

Etapa 3. Dizolvarea și renaturarea interferonului

La suspensia formei insolubile de interferon obținute în etapa anterioară, se adaugă clorhidrat de guanidină uscată la o concentrație de 6 M, se adaugă ditiotreitol la o concentrație de 50 mM, Tris-HCI pH 8,0 la o concentrație de 50 mM, NaCl la o concentrație de 50 mM. concentrație de 150 mM și Triton X100 la o concentrație de 0,1%, se incubează la temperatura camerei timp de 2 ore.Materialul nedizolvat se separă prin filtrare sterilizantă prin membrane cu diametrul porilor de 0,22 microni.

Renaturarea interferonului este efectuată prin diluarea lent a soluţiei rezultate de 100-200 de ori cu tamponul 4 (20 mM Tris-HCI pH 8,0, 100 mM NaCI, 0,1 mM EDTA). După care amestecul de renaturare este incubat cu agitare constantă timp de 12-15 ore la o temperatură de 4-8°C. Se adaugă apoi sulfat de magneziu la o concentrație de 1 mM și materialul agregat este îndepărtat prin filtrare prin sterilizare printr-un filtru cu membrană cu un diametru al porilor de 0,22 microni.

Etapa 4. Purificarea cromatografică a interferonului

Purificarea cromatografică a interferonului se realizează în trei etape.

1. Interferonul renaturat rezultat este mai întâi purificat utilizând cromatografia de afinitate pe o rășină Chelating Sepharose Fast Flow (Amersham Biosciences) imobilizată cu ioni Cu+2. Pentru a face acest lucru, soluția de interferon este aplicată pe o coloană cu Cu +2 Chelating Sepharose Fast Flow și interferonul este eluat cu tampon 0,1 M. acid citric pH 2,2.

2. La a doua etapă a purificării cromatografice, soluția de interferon este aplicată pe o rășină schimbătoare de cationi de tip CM Sepharose Fast Flow (Amersham Biosciences) și interferonul este eluat cu un gradient de soluții (0,0-0,5 M NaCl) într-o 50 mM. Tampon de Na(CH3COO), pH 5,5.

3. Purificarea formei monomerice de interferon din resturile formelor polimerice de interferon se realizează în a treia etapă de purificare a interferonului prin filtrare pe gel pe rășină Superdex 75 (Amersham Biosciences). Cromatografia este efectuată într-un tampon de 50 mM Na(CH3COO), pH 5,0, conţinând 0,15 M NaCI.

Metoda descrisă pentru izolarea și purificarea interferonului face posibilă obținerea a 4-8 g de interferon înalt purificat într-un ciclu de izolare timp de 7-10 zile din biomasă obținută din 10 litri de mediu de cultură. Calitatea interferonului rezultat în la maximîndeplinește cerințele „Farmacopeei Europene” pentru substanța interferon alfa-2b și anume:

Concentrația interferonului nu este mai mică de 2×10 8 UI/ml;

Activitatea specifică a interferonului nu este mai mică de 2,0×108 UI/mg;

Puritatea electroforetică a medicamentului este de cel puțin 99% în condiții reducătoare și nereducătoare la colorarea gelurilor cu argint;

Punctul izoelectric al interferonului izolat este în regiunea pH-ului 5,8-6,3;

Harta peptidică a interferonului izolat nu este fundamental diferită de harta peptidelor pentru interferonul alfa 2b CRS standard european;

După cum rezultă din exemplele date, grupul de invenţii revendicat face posibilă obţinerea interferonului alfa-2b cu randament ridicat utilizând o tehnologie relativ simplă şi fiabilă.

REVENDICARE

1. ADN plasmid recombinant pSX50, care codifică sinteza interferonului alfa-2b uman recombinant, caracterizat prin aceea că are o dimensiune de 3218 perechi de baze (bp) și constă din următoarele fragmente: secvența de la 1 la 176 de nucleotide (bp) include un fragment de ADN cu dimensiunea de 176 bp care conţine promotorul triptofanului (P trp), secvenţă de la 177 la 194 nt. include un fragment de ADN sintetic cu dimensiunea de 18 bp care conține secvența Shine Delgarno, responsabilă pentru inițierea translației, secvență de la 195 la 695 nt. include un fragment de ADN de 501 pb care conține gena interferonului alfa-2b cu substituții de nucleotide: 37 (A>C), 39 (G>T), 40 (A>C), 42 (G>T), 67 (A> C), 69 (G>T), 70 (A>C), 72 (A>T), 96 (G>A), 100 (A>C), 102 (A>T), 114 (A>С ), 120 (C>G), 126 (G>A), 129 (G>A), 330 (C>G), 339 (G>A), 342 (G>A), 487 (A>C) , 489 (A>T), 495 (G>A), secvenţă de la 696 la 713 nt. include un fragment de ADN sintetic de 18 bp care conține un polilinker sintetic, secvența de la 714 la 1138 nt. include un fragment de ADN al plasmidei pKK223-3 de la 4129 la 4553 nt. 425 bp în dimensiune, care conține secvența terminatorului strict de transcripție rrnBT 1 T 2, secvența de la 1139 la 1229 nt. include un fragment de ADN al plasmidei pUC19 de la 2487 la 2577 nt. 91 bp în dimensiune, care conține promotorul genei -lactomază (gena de rezistență la ampicilină -Amp R), secvență de la 1230 la 2045 nt. include un fragment de ADN al plasmidei pUC4K cu 720 nt. până în 1535 d.Hr 816 bp în dimensiune, care conține regiunea structurală a genei kan, secvență cu 2046 bp. la 3218 n. include un fragment de ADN al plasmidei pUC19 de la 1625 la 453 nt. 1173 bp în dimensiune, care conține secvența responsabilă pentru replicarea plasmidei (ori) și promotorul lac (P lac).

2. Tulpina bacteriană Eschcerichia coli SX50 transformată cu plasmida recombinată conform revendicării 1 este un producător de interferon alfa-2b leucocitar uman recombinant.

3. Metodă pentru producerea interferonului alfa-2b uman, incluzând cultivarea tulpinii de Escherichia coli SX5 conform revendicării 2 într-un mediu nutritiv cu adăugarea constantă de substraturi nutritive în timpul procesului de biosinteză, distrugerea mecanică a celulelor microorganismelor la o presiune de 700- 900 bar, dizolvarea interferonului într-o soluție tampon de clorhidrat de guanidină, renaturarea interferonului în soluții tampon fiziologice în prezența agenților haotropi, purificarea cromatografică în trei etape a interferonului pe rășini de tip Chelating Sepharose Fast Flow imobilizate cu ioni Cu +2, schimb ionic cromatografia pe rășini schimbătoare de ioni de tip CM Sepharose Fast Flow și cromatografia de filtrare pe gel pe rășini de tip Superdex 75 .

4. Metodă conform revendicării 3, în care cultivarea se realizează pe un mediu nutritiv cu un conţinut redus de triptofan cu adăugare continuă de substraturi nutritive, de preferinţă glucoză şi extract de drojdie.

5. Metodă conform revendicării 3, în care înainte de dizolvarea interferonului, acesta este purificat prin îndepărtarea componentelor celulare solubile, inclusiv ADN, ARN, proteine, lipopolizaharide, spălare cu soluţii tampon care conţin detergenţi precum Triton XI 00, uree.

6. Metodă conform revendicării 3, în care după fiecare purificare cromatografică se efectuează filtrarea sterilizantă prin filtre cu dimensiunea porilor de 0,22 microni.

2018-02-02T17:43:00+03:00

Eficacitatea dovedită a interferonului alfa 2b

Lumea a aflat pentru prima dată despre interferon, o proteină naturală din corpul uman, în 1957, când oamenii de știință Alik Isaacs și Jean Lindenmann au descoperit fenomenul interferenței, un mecanism complex al proceselor biologice datorită căruia organismul este capabil să lupte împotriva diferitelor boli. Dar în secolul trecut probabil că nu bănuiau că această proteină va deveni componenta principală a multor medicamente.

Interferonii sunt proteine care sunt produse de celulele corpului atunci când virușii le invadează. Datorită acestora, sunt activate genele responsabile de sinteza moleculelor intracelulare protectoare, care asigură un efect antiviral prin suprimarea sintezei proteinelor virale și împiedicarea reproducerii acesteia. Cu alte cuvinte, aceste proteine (se mai numesc și citokine) din corpul nostru acționează ca apărători puternici care ne păzesc sănătatea și țin o veghe strictă pentru ca, dacă este necesar, să respingem imediat atacul virușilor și să învingem boala.

Pentru a proteja organismul infectat cu viruși, interferonul este produs de aproape toate celulele corpului nostru. În plus, formarea sa poate fi stimulată nu numai de viruși, ci și de toxinele bacteriene, astfel că această proteină este eficientă și împotriva unor infecții bacteriene. Astfel, putem concluziona că această citokină este o componentă foarte importantă a sistemului imunitar uman. Fără el, omenirea ar fi fost învinsă cu mult timp în urmă de numeroși viruși și bacterii.

Tipuri de interferoni

Interferonii sunt împărțiți în trei tipuri: alfa, beta și gamma, care sunt produși de diferite celule.

Interferonul alfa activează așa-numitele celule ucigașe naturale - leucocitele, care distrug virușii, bacteriile și alți agenți „inamici”.
Interferonul beta este produs în fibroblaste, celule epiteliale și macrofage, care absorb agenții infecțioși.
Interferonul gamma este produs de limfocitele T, funcția sa principală, ca și alte tipuri, este reglarea imunității.

Cum a fost dovedită eficacitatea interferonului pentru ARVI?

După cum se știe, în activitățile lor, atunci când prescriu terapii, medicii se bazează pe experiența lor și pe un sistem de cunoștințe deja consacrat. Dar medicina se dezvoltă rapid: în fiecare an sunt dezvoltate noi metode eficiente de tratament în întreaga lume și noi medicamente sunt brevetate. Prin urmare, a fost nevoie de sistematizarea celor mai recente realizări și descoperiri în medicină, care au dus la recomandări clinice și standarde de tratament. Acești algoritmi documentați, bazați pe experiența clinică dovedită, descriu instrucțiunile necesare pentru diagnostic, tratament, reabilitare, prevenirea bolilor și ajută medicul să ia decizii cu privire la alegerea tacticii de tratament într-o situație dată.

De exemplu, în ceea ce privește furnizarea de îngrijire medicală copiii cu problema ARVI și gripă, grupul de dezvoltare este format din aproximativ 40 de persoane și include specialiști ruși de top în domeniul bolilor infecțioase din diverse instituții și departamente. Este logic ca Atentie speciala specialiștii plătesc medicamentele medicale, care sunt capabili să facă față bolilor cât mai repede posibil și, în același timp, au un minim de efecte secundare. Acum vorbim despre medicamentele care conțin interferon, care ajută la combaterea ARVI la adulți și copii.

După cum sa menționat mai sus, capacitatea lor de a lupta împotriva virușilor a fost descoperită în timpul studiului interferenței de către oamenii de știință Isaacs și Lindenmann. Ei au descris interferonul ca fiind „o proteină, mult mai mică decât imunoglobulinele, care este produsă de celulele corpului după infectarea cu viruși vii sau inactivați; capabile să inhibe creșterea unei varietăți de viruși în doze care nu sunt toxice pentru celule.” Astăzi se știe că aceste proteine pot fi produse de aproape toate celulele organismului ca răspuns la introducerea de informații străine, indiferent de etiologia acesteia (viruși, ciuperci, bacterii, agenți patogeni intracelulari, oncogene). Și principalul lor efect biologic constă în procesele de recunoaștere și eliminare a acestor informații străine. Cu alte cuvinte, aceste molecule protectoare „știu cum” să distrugă ușor și precis virușii care au ocupat celule, fără a deteriora celulele în sine. Acest lucru a fost confirmat de numeroase studii științifice.

În ceea ce privește metodele de utilizare a medicamentelor care conțin interferoni, este necesar să se menționeze câteva nuanțe. Una dintre principalele probleme ale terapiei cu interferon este „livrarea” a dozei eficiente de medicament fără a provoca consecințe negative. În unele cazuri, administrarea intramusculară sau intravenoasă a medicamentelor care conțin interferon duce la reacții adverse precum febră, frisoane, dureri de cap și alte reacții nedorite. Aceste simptome nu sunt critice pentru organism și dispar în curând, dar în timpul procesului de tratament provoacă disconfort.

Minimizați efecte secundare Terapia cu interferon sau a face fără ele complet a fost posibilă prin utilizarea supozitoarelor care conțin interferon alfa-2b. Conform cercetare științifică, aplicare rectală Interferonul uman recombinant în primele zile ale infecției virale respiratorii acute reduce durata febrei, luptă împotriva secreției nazale și vă permite să învingeți rapid boala 2. Utilizarea intranazală a medicamentelor (când medicamentul este aplicat pe mucoasa nazală) care conțin interferon alfa-2b completează tratamentul și asigură efectul optim al terapiei. Unul dintre medicamentele potrivite pentru combaterea gripei și a altor infecții virale respiratorii acute în orice stadiu al bolii este VIFERON. Este disponibil sub formă de supozitoare (lumânări), gel și unguent.

Instrucțiuni scurte de utilizare și toleranță a medicamentelor care conțin interferon alfa-2b

Cine poate lua medicamente VIFERON:

adulti;
copii din primele zile de viață;
femeile însărcinate din a 4-a săptămână de gestație.

Recunoaștere de către comunitatea științifică

Interferonul alfa-2b (VIFERON) este inclus în trei standarde federale de îngrijire medicală ca medicament recomandat pentru tratamentul gripei și ARVI, precum și în trei protocoale federale pentru tratamentul acestor boli. 1 Dacă luăm în considerare nu numai gripa și ARVI, ci și alte boli, atunci numărul de standarde și recomandări cu privire la acest medicament este și mai mare - interferonul (VIFERON) este inclus în 30. standardele federale furnizarea de îngrijiri medicale adulților și copiilor, aprobată de Ministerul Sănătății al Federației Ruse, precum și în Protocolul 21 ( Ghiduri clinice) acordarea de îngrijiri medicale adulților, inclusiv femeilor însărcinate și copiilor.

Principiul de acțiune al medicamentului

Interferonul alfa-2b recombinant uman, care face parte din medicamentul VIFERON, are proprietăți antivirale, imunomodulatoare și suprimă replicarea virusurilor ARN și ADN. Terapia antivirală împotriva gripei poate fi începută în orice fază a bolii. Acest lucru va ajuta la îmbunătățirea stării și la prevenirea dezvoltării complicațiilor 2. Medicamentul VIFERON include antioxidanți foarte activi recunoscuți în general: în supozitoare acestea sunt vitaminele E și C, în unguente - vitamina E, în gel - vitamina E, acizi citric și benzoic. Pe fondul unui astfel de suport antioxidant, se observă o creștere a activității antivirale a interferonilor.

Rezultatele testelor antidrog

VIFERON a trecut un ciclu complet de studii clinice cu gamă largă diverse boli în clinici de top din Rusia. Rezultatul studiilor a fost dovada eficacității terapeutice și profilactice a medicamentului VIFERON pentru diferite boli infecțioase și inflamatorii la adulți și copii, inclusiv nou-născuți și femeile însărcinate. S-a dovedit științific că compoziția complexă și forma de eliberare oferă medicamentului VIFERON caracteristici farmacocinetice unice, cu prelungirea acțiunii interferonului în absența efectelor secundare inerente preparatelor parenterale ale interferonului recombinant 3.

Pentru ce boli se folosesc medicamentele pe bază de interferon?alfa-2 b

Medicamentul VIFERON sub formă de supozitoare, gel și unguent este utilizat pentru a trata următoarele boli:

ARVI, inclusiv gripa;
herpes;
infecție cu papilomavirus;
infecție cu enterovirus;
laringotraheobronșită;
hepatita cronică B, C, D, inclusiv cele complicate de ciroza hepatică;
vaginoza bacteriană;
candidoza;
micoplasmoza;
ureaplasmoza;
gardnereloza.

Utilizarea medicamentului VIFERON ca parte a terapiei antivirale complexe poate reduce doze terapeutice medicamentele antibacteriene și hormonale, precum și reducerea efectelor toxice ale acestei terapii.

medic generalist

http://www.rosminzdrav.ru, Ordinul Ministerului Sănătății Federația Rusă, http://www.raspm.ru; http://www.niidi.ru; http://www.pediatr-russia.ru; http://www.nnoi.ru
Nesterova I.V. „Pregătirile cu interferon în practica clinica: când și cum”, „Attending Physician”, septembrie 2017.
„VIFERON este un medicament complex antiviral și imunomodulator pentru tratamentul bolilor infecțioase și inflamatorii în perinatologie.” (Ghid pentru medici), Moscova, 2014.

Surse utilizate: http://www.lsgeotar.ru