Cuprins
1. Reglarea neoangiogenezei
2. Angiogeneza tumorii
Factorul de creștere vasculoendotelial
. Factorul de creștere vasculoendotelial C
. Factorul de creștere vasculoendotelial D
. receptorii VEGF
. Factorul de creștere a fibroblastelor
. Factorul de creștere epidermic
. Factorul de creștere transformator α
. Factorul de creștere transformator β
. Factorul de creștere derivat din trombocite
. Factorul de creștere placentară
. Factorul de creștere a hepatocitelor
. Angiogenina
. Angiopoietine-1 și -2
. Factorul pigmentar de origine epitelială
. Oxid de azot
. Metaloproteinazele matriceale
. Endostatină
. Factorul de celule stem
. Factorul inhibitor al celulei leucemice
. Factorul neurotrop derivat din creier
Secțiunea Abrevieri
EGF - factor de creștere epidermic
FGF - factor de creștere a fibroblastelor
HGF - factor de creștere a hepatocitelor
IGF - factori de creștere asemănătoare insulinei
MMPS - metaloproteinaze de matrice
PDGF - factor de creștere derivat din trombocite
PLGF - factor de creștere placentar
TGF - factori de creștere transformatori
inhibitori TIMP
MMP SCF - factor de celule stem
VEGF - factor de creștere vasculoendotelial
Factorii de creștere sunt polipeptide cu o greutate moleculară de 5-50 kDa, combinate într-un grup de substanțe reglatoare trofice. La fel ca hormonii, acești factori au o gamă largă de efecte biologice asupra multor celule - ei stimulează sau inhibă mitogeneza, chemotaxia și diferențierea. Spre deosebire de hormoni, factorii de creștere sunt produși de obicei de celule nespecializate care se găsesc în toate țesuturile și au efecte endocrine, paracrine și autocrine. Factorii endocrini sunt produși și transportați către celulele țintă îndepărtate prin fluxul sanguin. Atingându-și „obiectivul”, aceștia interacționează cu receptori specializați de mare afinitate ai celulelor țintă. Factorii paracrini diferă prin faptul că se răspândesc prin difuzie. Receptorii celulelor țintă sunt de obicei localizați în apropierea celulelor producătoare. Factorii autocrini afectează celulele care sunt sursa directă a acestor factori. Majoritatea factorilor de creștere polipeptidici acționează într-o manieră paracrină sau autocrină. Cu toate acestea, anumiți factori, cum ar fi factorul de creștere asemănător insulinei (IGF), pot avea efecte endocrine.
Reglarea neoangiogenezei
Funcționarea normală a țesuturilor depinde de livrarea regulată a oxigenului de către vasele de sânge. Înțelegerea modului în care se formează vasele de sânge a concentrat o mare parte din efortul de cercetare în ultimul deceniu. Vasculogeneza în embrioni este procesul prin care vasele de sânge sunt formate de novo din precursorii celulelor endoteliale. Angiogeneza este procesul de formare a unor noi vase de sânge dintr-un sistem vascular preexistent. Joacă un rol important în dezvoltarea, creșterea normală a țesuturilor, vindecarea rănilor, ciclul reproductiv la femei (dezvoltarea placentei și a corpului galben, ovulație) și, de asemenea, joacă un rol major în diferite boli. Un interes deosebit se concentrează asupra creșterii tumorii. Este formarea unui nou aport de sânge care permite tumorii să crească. Acest proces, descris ca angiogeneză tumorală, este, de asemenea, parte integrantă în răspândirea celulelor tumorale și în creșterea metastazelor. Procesul de neoangiogeneză este necesar pentru adaptarea pe termen lung a țesuturilor în condiții de deteriorare. În acest caz, are loc o eliberare parțială a factorilor de creștere în sânge, care are semnificație diagnostică.
Se disting următoarele etape ale neoangiogenezei:
1. creșterea permeabilității endoteliale și distrugerea membranei bazale;
2. migrarea celulelor endoteliale;
3. proliferarea celulelor endoteliale;
4. „maturarea” celulelor endoteliale și remodelarea vasculară.
Principalul mecanism de reglare a proceselor de neoangiogeneză este eliberarea de factori angiogeni, ale căror surse pot fi celulele endoteliale și mastocite, macrofagele etc. Sub influența factorilor angiogenici, celulele endoteliale sunt activate (în principal în venule postcapilare) și migrează dincolo de membrana bazala cu formarea de ramuri ale vaselor principale. Se presupune că în mecanismul migrării celulelor endoteliale mare importanță joacă activarea expresiei moleculelor de adeziune endotelială, de exemplu, E-selectina. Într-o stare stabilă, celulele endoteliale nu proliferează și doar ocazional (o dată la 7-10 ani) se divid. Sub influența factorilor de creștere angiogenici și a citokinelor, se activează proliferarea celulelor endoteliale, care se încheie cu remodelarea vaselor, după care vasul nou format capătă o stare stabilă.
Creșterea noilor vase este determinată de echilibrul dintre stimulatorii și inhibitorii săi. La un raport scăzut dintre stimulente și inhibitori ai formării vasculare, neoangiogeneza este blocată sau de intensitate scăzută; dimpotrivă, la rapoarte mari, neoangiogeneza este declanșată activ.
Stimulatori ai neoangiogenezei: factor de creștere vasculoendotelial (VEGF), factor de creștere a fibroblastelor (FGF), angiogenină, factor de creștere epidermică (EGF), factor de creștere derivat din trombocite (PDGF), factori de creștere transformanți α (TGF-α) și β (TGF-). β), factorul de creștere asemănător insulinei 1 (IGF-1), NO, interleukina-8 și factori nespecifici, cum ar fi metaloproteinazele matriceale (MMP).
Inhibitori de neoangiogeneză: endostatină, receptori VEGF solubili (sVEGFR), trombospondină, angiostatina (fragment de plasminogen), vasostatina, restin, inhibitori de MMP (TIMP-1, TIMP-2).
Angiogeneza tumorii
Spre deosebire de vascularizația normală, normală, care se maturizează și se stabilizează rapid, vasele de sânge tumorale au anomalii structurale și funcționale. Nu conțin pericite – celule asociate funcțional cu endoteliul vascular și extrem de importante pentru stabilizarea și maturarea structurilor vasculare. În plus, vascular1. 2. 3. 4. Această rețea tumorală are o organizare haotică, cu tortuozitate și permeabilitate vasculară crescută, iar supraviețuirea și proliferarea ei depind de factori de creștere. Aceste anomalii vasculare, care se datorează în mare parte producției excesive de factori de creștere, creează condiții favorabile creșterii tumorii.
Celulele canceroase se caracterizează printr-o creștere a nivelului de stimulatori ai neoangiogenezei. În absența aportului de sânge, tumorile obțin oxigen și substanțe nutritive prin difuzie și de obicei nu cresc mai mult de 1-2 mm în diametru. Debutul angiogenezei duce la formarea unui nou aport de sânge și facilitează creșterea rapidă și metastazarea tumorii, care a devenit astfel activă. Deși mulți factori de creștere sunt implicați în angiogeneza tumorii, VEGF s-a dovedit a fi cel mai puternic și dominant dintre ei. Întreruperea alimentării cu sânge a tumorii poate suprima creșterea ulterioară a acesteia. Se presupune că blocarea creșterii tumorii este posibilă prin suprimarea formării și activității factorilor de creștere ai angiogenezei sau prin afectarea directă a vaselor de sânge imature, nou formate. Această metodă de influențare a tumorii nu provoacă eradicarea, ci doar limitează creșterea acesteia, transformând boala într-un proces cronic lent. Terapia anti-VEGF suprimă creșterea noilor vase tumorale și provoacă inversarea paturilor vasculare nou formate.
Factorul de creștere vasculoendotelial (VEGF, VEGF A)
VEGF este un factor de creștere glicoproteic heterodimeric produs de diferite tipuri de celule. Au fost identificate cel puțin 5 variante de VEGF-A: VEGF 121, VEGF 165, VEGF 183, VEGF 189, VEGF 206. Alte variante de VEGF sunt denumite VEGF-B, -C, -D. VEGF 165 este forma predominantă în majoritatea țesuturilor. Sarcomul Kaposi exprimă VEGF 121 și VEGF 165. VEGF 121 și VEGF 165 sunt forme solubile, în timp ce VEGF 189 și VEGF 206 sunt legați de proteoglicanii membranari care conțin heparină. Spre deosebire de alți mitogeni de celule endoteliale, cum ar fi bFGF (forma majoră) și PDGF, VEGF este sintetizat ca un precursor de 226 de aminoacizi.
VEGF este un potențial mitogen pentru celulele epiteliale vasculare. Are un efect puternic asupra permeabilității vasculare, este o proteină angiogenă puternică în diferite sisteme experimentale și participă la procesele de neovascularizare în situații patologice. Există un efect sinergic între VEGF și bFGF asupra inducerii angiogenezei. Capacitatea VEGF de a influența permeabilitatea vasculară implică posibilitatea implicării acestui factor de creștere în modificarea funcțiilor barierei hematoencefalice în condiții subnormale și patologice. VEGF-A provoacă, de asemenea, vasodilatație prin calea NO sintetazei în celulele endoteliale și poate activa migrarea monocitelor.
VEGF-A poate fi detectat în plasma și serul pacienților, dar nivelul său în ser este semnificativ mai mare. Extrem niveluri înalte poate fi găsit în conținutul chisturilor formate la pacienții cu tumori cerebrale sau în lichidul de ascită. Trombocitele eliberează VEGFA la agregare și pot fi o altă sursă majoră pentru celulele tumorale. Diverse studii au arătat că asocierea nivelurilor serice ridicate de VEGF-A cu un prognostic prost la pacienții cu afecțiuni maligne poate fi corelată cu un număr crescut de trombocite. Tumorile pot secreta citokine si factori de crestere care stimuleaza productia de megacariocite in maduva osoasa si cresc numarul de trombocite. Aceasta, la rândul său, poate duce la o altă creștere indirectă a eliberării VEGF-A către tumoră. Mai mult, VEGF-A este implicat în multe alte procese patologice asociate cu angiogeneză crescută sau permeabilitate vasculară crescută. Exemplele în care VEGF-A joacă un rol important includ psoriazisul și artrita reumatoidă, precum și sindromul de hiperstimulare ovariană. Retinopatia diabetică este, de asemenea, asociată cu niveluri intraoculare ridicate de VEGF-A, iar inhibarea funcției VEGFA poate duce la infertilitate din cauza blocării funcției corpului galben. Importanța VEGF-A pentru creșterea tumorii a fost demonstrată în mod clar prin utilizarea receptorilor VEGF pentru a bloca proliferarea in vivo, precum și blocarea anticorpilor la VEGF sau unul dintre receptorii VEGF. În consecință, interferența cu funcția VEGF-A a devenit un domeniu major de interes pentru dezvoltarea medicamentelor care vizează blocarea angiogenezei și metastazelor. În prezent, peste 110 de companii farmaceutice din întreaga lume sunt implicate în dezvoltarea unor astfel de antagonişti. Abordările lor includ antagonişti ai VEGF-A sau ai receptorilor săi, inhibitori selectivi ai tirozin kinazei. Direcționarea semnalizării VEGF poate avea implicații terapeutice foarte importante pentru multe boli și poate servi drept bază pentru dezvoltarea viitoarelor terapii (anti)angiogene.
Factorul de creștere vasculoendotelial C (VEGF-C)
VEGF-C aparține familiei VEGF. S-a demonstrat că are proprietăți angiogene și limfangiogene. Familia VEGF și receptorii lor sunt implicați în dezvoltarea și creșterea endoteliului vascular. Două proteine din această familie, VEGF-C și -D, exercită un efect reglator asupra celulelor endoteliale ale vaselor limfatice prin receptorul VEGFR3, acționând ca mitogeni.
Exprimarea VEGF-C este asociată cu boli oncohematologice. Exprimarea VEGF-C împreună cu receptorii promovează supraviețuirea și proliferarea celulelor tumorale. Expresia crescută a VEGF-C a fost demonstrată în afecțiunile maligne gastrointestinale, unde se corelează cu invazia, metastazarea ganglionilor limfatici și scăderea supraviețuirii.
Factorul de creștere vasculoendotelial D (VEGF-D)
VEGF-D (cunoscut și ca factor inductibil c-fos sau FIGF) este foarte asemănător cu VEGF-C. Are omologie structurală și specificitate de receptor similare cu VEGF-C, așa că se crede că VEGF-D și VEGF-C pot fi clasificate în subfamilia VEGF. VEGF-D este inițial sintetizat ca o proteină precursoare care conține propeptide unice N- și C-terminale în plus față de domeniul central de omologie de legare a receptorului VEGF (VHD). Propeptidele N- și C-terminale nu au fost găsite la alți membri ai familiei VEGF. Aceste propeptide sunt scindate proteolitic în timpul biosintezei, rezultând formarea unei forme mature, secretate, constând din dimeri VHD monovalenți.
Ca și VEGF-C, VEGF-D se leagă pe suprafața celulei de receptorul 2 al tirozin kinazei VEGF (VEGF R2/Flk-1/KDR) și VEGFR3. Acești receptori sunt localizați pe celulele endoteliale vasculare și limfatice și sunt responsabili de angiogeneză și limfogeneză. Forma matură a VEGFD se leagă de acești receptori cu o afinitate mai mare decât forma originală pro a VEGF-D. S-a demonstrat expresia genei VEGF-D în embrioni în curs de dezvoltare, în special în mezenchimul pulmonar. VEGF-D este, de asemenea, localizat în celulele tumorale. În țesuturile adulte, ARNm VEGF-D este exprimat în inimă, plămâni, mușchi scheletici și intestinul subțire.
Receptori VEGF (sVEGFR-1, sVEGFR-2)
Mulți receptori de citokine există într-o formă solubilă în urma clivajului proteolitic și separării de suprafața celulei. Acești receptori solubili sunt capabili să lege și să neutralizeze citokinele din circulație. Există trei receptori pentru VEGF-A: VEGFR-1 (Flt-1), -2 (KDR) și -3 (Flt-4). Toate acestea conțin șapte repetări asemănătoare Ig în domeniile extracelulare. VEGFR1-R3 este exprimat în principal în endoteliul proliferativ al căptușelii vasculare și/sau în tumorile solide infiltrante. VEGFR2, totuși, este mai larg reprezentat decât VEGFR1 și este exprimat în toate celulele endoteliale de origine vasculară. VEGFR2 este prezent, de asemenea, în celulele capilare endoteliale și perivasculare din lamina tubilor seminiferi, celulele Leydig și celulele Sertoli. VEGFR2 leagă VEGF-A, -C și -D. Spre deosebire de VEGFR1, care leagă atât PlGF cât și VEGF cu afinitate mare, VEGFR2 leagă doar VEGF și nu PlGF cu afinitate mare.
Acești receptori joacă un rol important în angiogeneză. sVEGFR-1 este un inhibitor al acestui proces. Prin legarea de VEGF, împiedică VEGF să interacționeze cu celulele țintă. Inactivarea funcțională a VEGFR2 de către anticorpi poate perturba procesul de angiogeneză și poate preveni invazia celulelor tumorale. În celulele endoteliale vasculare, angiogeneza indusă de proteina HIV-1 Tat este mediată de VEGFR2. Tat leagă și activează în mod specific VEGFR2. Angiogeneza indusă de Tat este inhibată de agenți care pot bloca VEGFR2.
Factorul de creștere a fibroblastelor (FGF)
Familia FGF include în prezent 19 proteine diferite. Au fost inițial caracterizate două forme: acidă (aFGF) și bazică (bFGF).
a și bFGF sunt produse ale diferitelor gene și au până la 53% omologie. Molecula aFGF este reprezentată de un lanț polipeptidic simplu cu m.m. 16,8 kDa. Mm. diferitele forme de bFGF variază de la 16,8 la 25 kDa. Nu s-au găsit diferențe funcționale între formele bFGF.
Activitățile biologice ale FGF sunt diverse. Sunt mitogeni pentru diferite celule de origine neuroectodermală și mezenchimală, potențiali mitogeni și stimulatori ai angiogenezei, susțin și stimulează diferențierea celulelor de diferite tipuri neuronale in vivo și in vitro. În plus față de a și bFGF, familia include oncoproteinele int-2 (FGF-3) și hst (FGF-4), FGF-5, factorul de creștere a keratinocitelor și factorul de creștere a endoteliului vascular. FGF-3 și -4 sunt strâns legate de bFGF, care este probabil să fie o potențială oncogenă. Datele clinice susțin un rol pentru bFGF în neoangiogeneza tumorii. Astfel, o creștere a nivelului acestui factor se corelează cu gradul de agresivitate al procesului în multe tumori solide, leucemie, limfoame la copii și adulți și poate servi ca factor de prognostic pentru agresivitatea procesului tumoral. bFGF este necesar pentru dezvoltarea și menținerea sistemului vascular în timpul embriogenezei; este, de asemenea, principalul factor angiogenic în recuperarea timpurie și bolile cardiovasculare.
Factorul de creștere epidermică (EGF)
EGF este o proteină globulară cu m.m. 6,4 kDa, constând din 53 de resturi de aminoacizi, care acționează ca un mitogen puternic asupra diferitelor celule de origine endodermică, ectodermică și mezodermică. EGF se găsește în sânge, lichid cefalorahidian, lapte, salivă, suc gastric și pancreatic. Un factor de creștere în urină cunoscut sub numele de urogastron este, de asemenea, identic cu EGF. Locul principal al sintezei EGF este glandele salivare. EGF controlează și stimulează proliferarea celulelor epidermice și epiteliale, inclusiv fibroblastele, epiteliul renal, celulele gliale, celulele granuloasei ovariene și celulele tiroidiene in vitro. EGF stimulează, de asemenea, proliferarea celulelor embrionare și crește eliberarea de calciu din țesut osos. Promovează resorbția osoasă și este un chimioatractant puternic pentru fibroblaste și celulele epiteliale. EGF singur și în combinație cu alte citokine este cel mai important factor care mediază procesele de vindecare a rănilor și angiogeneză. De asemenea, acționează ca un inhibitor al secreției de acid gastric. În unele fluide biologice, cum ar fi saliva, urină, suc gastric, lichid seminal și lapte, sunt prezente niveluri ridicate de EGF.
EGF joacă un rol important în carcinogeneză. În anumite condiții, poate provoca malignitate celulară. EGF induce proto-oncogenele c-fos și c-myc. Efectele biologice ale EGF imunoreactiv sunt similare cu cele ale TGF-α. Este important de reținut că ambii factori se leagă de aceiași receptori. Cu toate acestea, eficacitatea EGF este cu 50% mai mare decât a TGF-α.
Factorul de creștere transformator α (TGF-α)
Principala sursă de TGF-α sunt carcinoamele. Macrofagele și keratinocitele (posibil alte celule epiteliale) secretă, de asemenea, TGF-α. TGF-α stimulează fibroblastele și dezvoltarea endotelială. Este un factor angiogenic. La fel ca EGF, TGF-α este implicat în reglarea proliferării celulare, precum și în reglarea creșterii celulelor tumorale.
Factorul de creștere transformator β (TGF-β)
Familia TGF-p include un grup de proteine heterodimerice omoloage TGFp-1, -2, -3 și -4. Principala izoforma secretată de celulele sistemului imunitar este TGF-β1. Toate TGF-β constau din 112 resturi de aminoacizi. Structura TGF-p2 are 50% omologie cu TGF-p1 peste primele 20 de resturi de aminoacizi și 85% pentru fragmentul 21-36. Nu s-au găsit diferențe în activitatea funcțională între TGF-β1 și -β2. TGF-β este produs de mai multe tipuri de celule și țesuturi: limfocite T și macrofage activate, trombocite, rinichi, placentă.
Factorul este produs într-o formă inactivă, care conține, împreună cu dimerul principal, fragmente de lanțuri suplimentare ale moleculei precursoare. Activarea are loc sub formă de scindare a acestor fragmente cu ajutorul proteinazelor (plasmină, catepsină etc.). TGF-p vizează, de asemenea, o varietate de celule, deoarece expresia receptorului său de mare afinitate este larg răspândită. Când TGFβ acționează asupra sistemului imunitar, predomină efectele inhibitoare. Factorul suprimă hematopoieza, sinteza citokinelor inflamatorii, răspunsul limfocitelor la IL-2, -4 și -7 și formarea celulelor NK și T citotoxice. În același timp, îmbunătățește sinteza proteinelor matricei intercelulare, promovează vindecarea rănilor și are un efect anabolic.
În relație cu leucocitele polimorfonucleare, TGF-β acționează ca un antagonist al citokinelor inflamatorii. Oprirea genei TGF-β duce la dezvoltarea unei patologii inflamatorii generalizate fatale, care se bazează pe un proces autoimun. Astfel, este un element al reglării prin feedback a răspunsului imun și, mai ales, a răspunsului inflamator. În același timp, TGF-β este, de asemenea, important pentru dezvoltarea răspunsului umoral: comută biosinteza imunoglobulinelor la izotipul IgA. Stimulează angiogeneza. Nivelurile plasmatice de TGF-β se corelează pozitiv cu vascularizarea tumorii.
Factorul de creștere derivat din trombocite (PDGF)
PDGF este una dintre potențialele polipeptide mitogenice găsite în sângele uman. Constă din două lanțuri: A și B, legate în izoformele AA-, BB- și AB. Aceste trei izoforme diferă atât prin proprietăți funcționale, cât și prin modul de secreție. În timp ce formele AA și AB sunt secretate rapid de celula producătoare, forma BB rămâne în principal asociată cu celula producătoare. Numai formele dimerice ale PDGF se pot lega de receptori. Au fost identificate două tipuri diferite de receptori. Receptorul α leagă fie polipeptida A, fie B, în timp ce receptorul β se leagă doar polipeptida B. Întregul spectru de efecte biologice se datorează acestor trei molecule PDGF și doi receptori, expresiei lor diferențiale și mecanismelor intracelulare complexe care le reglează activitatea. Sursa de PDGF în ser este granulele α plachetare, deși macrofagele și celulele endoteliale pot produce și ele acest factor. În anumite etape, celulele placentare și celulele musculare netede ale aortei nou-născutului servesc, de asemenea, ca sursă de PDGF.
Izoforma AA este secretată de preferință de fibroblaste, celule musculare netede vasculare, osteoblaste, astrocite, celule COLO (carcinom de colon) și celule WLM (tumoare Wilm). Sinteza BB este asociată cu macrofage, celule insulare ale lui Langerhans, epiteliu non-angiogenic și linie celulară SW (carcinom tiroidian). Celulele care produc ambele lanțuri (A și B) includ neuroni, celule mezangiale renale, linii celulare de gliom și mezoteliom și trombocite. Datele inițiale au sugerat că trombocitele umane au conținut aproximativ 70% PDGF-AB și 30% -BB. Cu toate acestea, studii mai recente au arătat că până la 70% PDGF-AA poate fi prezent, iar descoperirile anterioare sunt un artefact. Tipul de dimer(i) PDGF secretat depinde de ARNm produs și poate fi, de asemenea, influențat de eficiența translației, secreție și degradarea intracelulară.
Identitatea structurală a lanțului B și a proto-oncogenei c-sis sugerează că PDGF poate juca un rol în transformarea malignă indusă de virus a celulelor infectate. PDGF este implicat în reglarea inflamației acute, vindecarea rănilor și formarea cicatricilor. PDGF eliberat de macrofagele alveolare este implicat în dezvoltarea fibrozei pulmonare. De asemenea, s-a stabilit că PDGF este asociat cu dezvoltarea aterosclerozei, glomerulonefritei, mielofibrozei și formării cheloidelor. La fel ca EGF, PDGF induce expresia proto-oncogenelor cum ar fi fos, myc și jun. PDGF este, de asemenea, prezent omniprezent în neuronii SNC, unde se crede că joacă un rol important în supraviețuirea și regenerarea celulelor, mediand proliferarea și diferențierea celulelor gliale.
Factorul de creștere placentară (PlGF)
PlGF - glicoproteină cu m.m. 46-50 kDa, aparținând familiei VEGF (42% omologie cu VEGF). PlGF este, de asemenea, omolog, deși mai îndepărtat, cu familia de factori de creștere PDGF. Există două izoforme ale PlGF: -1 și -2, care diferă prin prezența unui domeniu de legare a heparinei în PlGF-2. PlGF mediază proliferarea trofoblastului extravilos. După cum sugerează și numele, PlGF a fost identificat pentru prima dată în conditii normaleîn placenta umană. Se exprimă în alte țesuturi, cum ar fi capilarele și endoteliul venei ombilicale, măduva osoasă, uterul, celulele NK și keratinocite. PlGF este, de asemenea, crescut în diferite condiții patologice, inclusiv vindecarea rănilor și formarea tumorii. În comparație cu VEGF, rolul PlGF în neovascularizare este mai puțin clar. Poate crește durata de viață, creșterea și migrarea celulelor endoteliale in vitro și poate promova formarea vasculară în unele modele in vivo. Activitatea PlGF poate apărea prin interacțiunea directă a factorului cu VEGFR1. S-a propus că VEGFR1 acționează ca un rezervor pentru VEGF și că PlGF se leagă de receptor, înlocuind VEGF, eliberându-l pentru a activa VEGFR2. PlGF poate îmbunătăți în mod sinergic angiogeneza indusă de VEGF și permeabilitatea vasculară. Concentrația de PlGF crește de 4 ori de la sfârșitul primului până la sfârșitul celui de-al doilea trimestru de sarcină fiziologică.
Factorul de creștere a hepatocitelor (HGF)
HGF, numit și factor de împrăștiere (SF), constă din două subunități legate printr-o legătură disulfurică: α (69 kDa) și β (34 kDa). HGF este o citokină multifuncțională care acționează ca un mitogen, care este asociat cu funcția sa în organogeneză și repararea țesuturilor. Are capacitatea de a stimula formarea vaselor de sânge și proliferarea celulară, sugerând implicarea sa în creșterea malignă și metastaze în plămâni, sâni, pancreatice, adenocarcinom, mielom multiplu și carcinom hepatocelular. În celulele tumorale de cancer de sân, HGF induce puternic expresia bcl-x și astfel inhibă apoptoza. HGF este produs continuu de celulele stromale din maduva osoasa si stimuleaza hematopoieza.
Angiogenina (ANG)
ANG este o polipeptidă neglicozilata cu catenă unică cu m.m. 14 kDa, care aparține familiei de ribonucleaze RISBASE (ribonucleaze cu funcții biologice speciale). Moleculele acestei familii prezintă nu numai activitate de ribonuclează, dar au și efecte biologice speciale. ANG are 35% identitate de secvență cu ribonucleaza pancreatică. S-a demonstrat că la nivel de aminoacizi, angiogenina umană este 75% identică cu ANG la șoarece și „funcționează” în sistemele de șoarece. ANG este exprimat de celule endoteliale, celule musculare netede, fibroblaste, epiteliu intestinal colonar, limfocite, celule de adenocarcinom primar și unele linii celulare tumorale. Receptorul angiogeninei este necunoscut. Se crede că actina, ca receptor sau moleculă de legare, este necesară pentru acțiunile angiogeninei.
Din punct de vedere funcțional, ANG este cel mai adesea asociat cu procesul de angiogeneză. Se crede că se leagă inițial de actină, urmată de disocierea complexului actină-ANG urmată de activare. activator tisular plasminogen. Ca urmare, se formează plasmină, care favorizează degradarea componentelor membranei bazale, cum ar fi laminina și fibronectina. Distrugerea membranei bazale este o precondiție necesară pentru migrarea celulelor endoteliale în timpul neovascularizării. Deși ANG pare să acționeze în principal extravascular sau perivascular, ANG circulant a fost detectat în ser normal la concentrații de ordinul ng/mL. În procesele patologice, au fost detectate niveluri crescute de ANG la pacienții care sufereau de cancer pancreatic și ocluzie arterială.
Angiopoietine-1 și -2 (Ang)
Ang-1 și -2 sunt glicoproteine aparținând familiei factorilor de creștere care reglează dezvoltarea țesutului vascular. Ang-1 constă din 498 de resturi de aminoacizi, Ang-2 - din 467. Secvențele AK ale Ang-1 și -2 sunt 60% identice. Ambele Angs interacționează cu receptorul tirozin kinaza-2 (Tie-2), care este prezent predominant pe celulele endoteliale. Cu toate acestea, există cel puțin trei variante alternative de îmbinare ale Ang-1, cu două forme alternative care nu reușesc să activeze Tie-2. Astfel, acţionează ca supresori endogeni ai formei active majore de Ang-1. În plus, Ang-1 și -2 acționează ca competitori pentru interacțiunea cu receptorul Tie-2, astfel încât Ang-2, în funcție de tipul de celulă, acționează fie ca supresor, fie ca activator al receptorului Tie-2.
Ang-1 și -2 sunt foarte exprimate în embrion în timpul dezvoltării rapide a țesutului vascular. Ștergerea genei Ang-1 duce la consecințe letale în embrion din cauza unor defecte grave în dezvoltarea inimii și a vaselor de sânge. Deși Ang-2 nu joacă un rol la fel de important ca Ang-1 în formarea sistemului vascular al embrionului, în absența acestuia vascularizația este și ea afectată, ceea ce provoacă moartea precoce. În organismul adult, Ang-1 este sintetizat predominant de celulele endoteliale, megacariocite și trombocite, iar Ang-2 este exprimat local: de către ovare, uter și placentă. Ang-1 reglează dezvoltarea și remodelarea vaselor de sânge și crește supraviețuirea celulelor endoteliale. Supraviețuirea celulelor endoteliale în timpul interacțiunii Ang-1 cu Tie-2 implică mecanismul PI3K/AKT, iar migrarea celulelor în timpul aceleiași interacțiuni (ligand/receptor) are loc cu participarea mai multor kinaze (PI3K, PAK, FAK). În contrast, Ang-2, acționând singur, inițiază moartea celulelor endoteliale și regresia vaselor, deși în mod sinergic cu VEGF poate promova formarea de noi vase. Dacă Ang-1 acționează sinergic cu VEGF, supraproducția acestuia duce la creșterea vascularizației tisulare. Astfel, Ang-1 și -2, de regulă, acționează ca antagoniști care reglează împreună creșterea vasculară.
Acțiunea angiopoietinelor nu se limitează la endoteliul vascular al fluxului sanguin - ele pot lua parte la formarea vaselor sistemului limfoid. Ang-1 are alte efecte biologice, de exemplu, îmbunătățește aderența și migrarea neutrofilelor și eozinofilelor și reglează permeabilitatea peretelui vascular. Ang-1 poate, de asemenea, induce creșterea și supraviețuirea celulelor nervoase și poate regla organizarea celulelor dendritice. Nivelurile crescute de Ang-1 și -2 sporesc angiogeneza afecțiunilor maligne. Concentrațiile mari de Ang-1 circulant sunt asociate cu hipertensiunea arterială și patologiile canceroase.
Factorul derivat din epiteliul pigmentar (PEDF)
PEDF (mw 50 kDa, aparține familiei serpinelor) a fost identificat pentru prima dată ca un factor secretat de celulele epiteliale retiniene și care promovează supraviețuirea neuronală in vitro și in vivo. Pe de altă parte, s-a demonstrat că PEDF are proprietatea de a induce apoptoza celulelor endoteliale capilare, menținând astfel natura avasculară a retinei. În multe boli oftalmice caracterizate prin dereglarea inervației retinei și a microvasculaturii, PEDF este un regulator important în bolile oculare. În plus, s-a demonstrat că PEDF are activitate antitumorală multifuncțională în neuroblastomul experimental, deoarece PEDF produs de celulele Schwann induce un fenotip diferențiat, mai puțin malign în celulele neuroblastomului, promovează creșterea și supraviețuirea în continuare a celulelor Schwann și inhibă angiogeneza.
oxid nitric (NO)
Efectele biologice ale NO au fost recunoscute pe scară largă în urma identificării acestuia ca factor de relaxare dependent de endoteliu (EDRF), responsabil pentru proprietățile sale vasodilatatoare puternice. De atunci, NO a fost identificat ca un mediator biologic pleiotrop care reglează funcții, de la activitatea nervoasă până la reglarea sistemului imunitar. Este un radical liber cu un timp de înjumătățire scurt in vivo de aproximativ câteva secunde. În acest sens, pentru determinarea indirectă a NO din fluidele biologice se utilizează nivelul metaboliților NO mai stabili, nitriți (NO 2-) și nitrați (NO 3-). Exemplele includ niveluri modificate asociate cu sepsis, reproducere, infecții, hipertensiune arterială, exerciții fizice, diabet de tip 2, hipoxie și cancer.
NO se formează prin oxidarea L-argininei cu participarea NADPH. Oxidarea are loc cu participarea uneia dintre cele trei izoforme de enzime din familia NO sintazei (NOS) cu formarea citrulinei. Membrii familiei NOS includ sintetazele neuronale (nNOS/NOS1), endoteliale (eNOS/NOS3) și inductibile (iNOS/NOS2). După cum sugerează și numele, nNOS cantitati mari exprimat de neuronii SNC și PNS și, de asemenea, găsit în celulele altor țesuturi, inclusiv miocitele mușchilor scheletici, celulele epiteliale pulmonare și mastocitele pielii; eNOS este exprimat de endoteliu și poate fi detectat și în neuroni, fibroblaste ale pielii, keratinocite, celule foliculare tiroidiene, hepatocite și celule musculare netede. iNOS este exprimat într-o varietate de țesuturi, inclusiv condrocite, celule epiteliale, hepatocite, țesut glial și diferite tipuri de celule ale sistemului imunitar. În general, expresia eNOS și nNOS are loc continuu și este reglată de calmodulină dependentă de Ca2+, în timp ce sinteza iNOS este indusă de endotoxină și citokine inflamatorii și este relativ insensibilă la Ca2+.
Datorită faptului că NO este solubil în lipide, acesta nu este stocat, ci este sintetizat de novo și difuzează liber prin membrane. Efectele NO asupra celulelor țintă sunt mediate prin diferite mecanisme. De exemplu, activarea mediată de NO a enzimei guanilil ciclază (GC) catalizează formarea celui de-al doilea mesager 3',5'-guanozin monofosfat ciclic (cGMP). cGMP este implicat într-un număr de funcții biologice, cum ar fi reglarea contracției mușchilor netezi, durata de viață a celulei, proliferarea, funcția axonală, plasticitatea sinaptică, inflamația, angiogeneza și activitatea canalului ciclic nucleotid. NO este, de asemenea, un agent antitumoral și antimicrobian prin mecanisme de conversie în peroxinitrit (ONOO-), formarea de S-nitrozotioli și reducerea rezervelor de arginină. Un alt rol presupus al NO este inhibarea respirației mitocondriale prin inhibarea citocrom oxidazei. NO poate modifica, de asemenea, activitatea proteinei prin nitrozilarea post-translațională prin atașare prin grupul tiol al reziduurilor de cisteină.
Metaloproteinazele matriceale (MMP)
MMP-urile umane sunt o familie de enzime care degradează matricea. MMP-urile au capacitatea de a degrada aproape toate componentele matricei extracelulare găsite în țesuturile conjunctive (colagen, fibronectină, laminină, proteoglicani etc.). În plus față de asemănările la nivel de secvență de aminoacizi, toate MMP-urile sunt formate din precursori inactivi care sunt transformați în proteinaze active care degradează substratul sub influența factorilor extracelulari. Sursele formării MMP sunt fibroblastele, macrofagele, celulele musculare netede ale peretelui vascular și neutrofilele. Orice tumoră este un inductor puternic al formării de MMP în celulele stromale. În timp ce promovează invazia creșterii tumorii și a metastazelor, MMP-urile sunt în același timp stimulatori puternici ai neoangiogenezei. Inhibitorii MMP endogeni și sintetici sunt utilizați ca potențiali agenți antitumorali, al căror scop principal este de a suprima neoangiogeneza.
Endostatină
Fragment C-terminal activ din punct de vedere biologic al colagenului VIII cu m.m. 20 kDa. Aparține familiei de proteine asemănătoare colagenului. Pentru a evita creșterea vasculară excesivă în condiții normale, procesele de formare a vaselor noi și de remodelare a vaselor originale sunt controlate de factori de creștere adecvați. În timpul angiogenezei tumorale, se observă pătrunderea vaselor de sânge în masa tumorală în creștere. Endostatina inhibă în mod specific proliferarea celulelor endoteliale. În consecință, inhibă angiogeneza și creșterea tumorii. Terapia cu endostatină este în prezent în curs de studii clinice de fază 1.
Alți factori de creștere semnificativi din punct de vedere diagnostic
Factorul de celule stem (SCF)
Producătorii de SCF sunt celulele stromale ale măduvei osoase, fibroblastele, celulele endoteliale și celulele Sertoli. Principalele sale celule țintă sunt celulele stem hematopoietice, precursori angajați timpurii ai celulelor din diferite linii hematopoietice și mastocite. SCF activează diferențierea celulelor progenitoare multipotente în mod sinergic cu IL-3, GM-CSF și IL-7 și eritropoietina. Este implicat în menținerea proliferării celor mai tinere forme de precursori ai limfocitelor T în timus. În relație cu mastocitele, este un factor major de creștere și un agent chimiotactic.
SCF are o semnificație clinică importantă ca inductor al diferențierii precursorilor de limfocite și eritrocite. Determinarea SCF este de interes semnificativ în tratamentul sindromului mielodisplazic și după transplantul de măduvă osoasă.
Factorul inhibitor al celulei leucemiei (LIF)
LIF intensifică proliferarea precursorilor celulelor hematopoietice. S-a demonstrat că LIF provoacă dezvoltarea sindromului de cașexie la pacienții cu cancer. Componenta receptorului LIF gp130 (CD130) face parte din receptorii pentru IL-6 și -11.
Factorul neurotrofic derivat din creier (BDNF)
Alături de acest factor, familia include factorul de creștere a nervilor, neurotrofinele-3 și -4. BDNF stimulează creșterea țesutului nervos, în principal a neuronilor colinergici din creier. S-a demonstrat că BDNF afectează creșterea, metabolismul și structura internă a acestor celule. Scopul principal al factorilor neurotropi este de a proteja neuronii de apoptoză.UDC 616-006
FACTORUL DE CREȘTERE A ENDOTELIULUI VASCULAR - UN INDICATOR CLINIC SEMNIFICAT ÎN NEOPOLISMUL MALIGN
© E.S. Gershtein, D.N. Kushlinsky, L.V. Adamyan, N.A. Ognerubov
Cuvinte cheie: VEGF; VEGF-R; angiogeneza; tumori; prognoza.
Sunt prezentate rezultatele propriilor cercetări și cele mai semnificative date din literatură, care indică faptul că regulatorul pozitiv cheie al neoangiogenezei - factorul de creștere a endoteliului vascular (VEGF) - este un factor de prognostic semnificativ clinic în diferite boli oncologice, precum și ținta modernului. medicamente vizate cu diferite mecanisme de acțiune. Rolul său ca marker serologic pentru diagnostic și monitorizare necesită studii suplimentare.
Idei generale despre reglarea angiogenezei.
Angiogeneza este procesul de ramificare a noilor procese capilare din vasele de sânge preexistente. Acest proces complex include cel puțin patru etape: distrugerea proteolitică a membranei bazale vasculare și a matricei intercelulare, migrarea și atașarea celulelor endoteliale, proliferarea acestora și, în final, formarea structurilor tubulare.
În prezent, se acordă multă atenție problemei neoangiogenezei în tumorile maligne, deoarece nu mai există nicio îndoială că o tumoră nu se poate dezvolta și crește fără formarea unei rețele ramificate de vase în ea, asigurând furnizarea celulelor cu oxigen și substanțe nutritive. . Interesul pentru această problemă a apărut cu mai bine de 30 de ani în urmă, dar până relativ recent, principala caracteristică a activității neoangiogenezei în tumori a fost o evaluare microscopică a densității vaselor de sânge din țesutul tumoral (densitatea microvasculară). Și doar relativ recent, ca urmare a studierii mecanismelor moleculare ale angiogenezei, care s-a dezvoltat intens în ultimii 10-15 ani, prezența unui număr de factori reglatori angiogenici și antiangiogenici, al căror echilibru dinamic asigură formarea și a fost demonstrată proliferarea de noi vase în interiorul tumorii.
Mulți factori de creștere cunoscuți și citokine, cum ar fi factorii bazici și acizi de creștere a fibroblastelor (oFGF și cFGF), factorul de creștere epidermică (EGF), factorii de creștere cu transformare α și P (TGF), sunt implicați în reglarea angiogenezei într-un fel sau altul.), factorul de creștere a celulelor endoteliale derivate din trombocite/timidină fosforilază, factorul de necroză tumorală, interleukinele etc. Cu toate acestea, cel mai important regulator pozitiv al angiogenezei este, fără îndoială, factorul de creștere a endoteliului vascular (VEGF), numit și factor de permeabilitate vasculară. Unicitatea acestei proteine constă în faptul că, spre deosebire de toți ceilalți factori de creștere, este mitogenă numai în raport cu celulele endoteliale, deși date recente indică faptul că autocrin.
efectul VEGF asupra celulelor tumorale care îl produc.
VEGF este o proteină homodimerică, foarte glicozilată, cu un mol. cântărind 46-48 ^a, existent în cel puțin cinci izoforme cu activitate biologică similară, dar semnificativ diferită ca biodisponibilitate. Biodisponibilitatea VEGF este determinată în mare măsură de mărimea moleculei și este reglată la nivel genetic în timpul îmbinării alternative a ARNm, precum și epigenomic în timpul clivajului proteolitic al moleculelor sintetizate cu participarea sistemului de activare a plasminogenului. Un regulator cheie al creșterii vaselor de sânge este VEGF A, în timp ce VEGF C reglează în primul rând limfangiogeneza. Principalele forme solubile ale VEGF A sunt molecule cu dimensiuni de 121 și 165 de resturi de aminoacizi și sunt, de asemenea, principalele forme biologic active ale VEGF. În țesuturi, se crede că izoforma majoră a VEGF este VEGF-165.
Pe suprafața celulelor endoteliale există 3 receptori pentru VEGF, care sunt receptori tipici tirozin kinaze. Receptorul VEGF de tip 1 (VEGFR1) este produsul genei flt-1, receptorul de tip 2 (VEGFR2) se numește KDR și este omologul uman al produsului genei flk-1 de șoarece și, în sfârșit, receptorul de tip 3 (VEGFR3) este produs al genei flt-4. Spre deosebire de VEGFR1 și 2, nu interacționează cu VEGF clasic (VEGF A), ci cu omologul său -VEGF C. Toți receptorii sunt glicoproteine transmembranare cu un mol. cântărind 170235 ^a. Legarea eficientă a VEGF la receptori necesită interacțiunea acestuia cu componente asemănătoare heparinei ale matricei extracelulare.
Pe lângă cascada de protein kinaze activate de mitogen, comună majorității receptorilor kinazelor, care reglează expresia genelor asociate cu proliferarea, cele mai importante gene reglate de VEGF în celulele endoteliale includ proto-oncogena c-ets-1, care codifică factor de transcripție Ets-1. Studiile care utilizează hibridizarea in situ au arătat că c-ets-1 este exprimat în celulele endoteliale în primele etape ale formării sângelui.
vasele venoase. Produsul său Ets-1 promovează manifestarea fenotipului angiogenic al acestor celule, activând transcripția genelor și sinteza proteică ulterioară a celor mai importante proteaze care descompun matricea extracelulară (ECM), - activator de plasminogen de tip urokinază, stromelizina, colagenaza 1, MMP-1, 3 și 9, precum și p2-integrină. Aceste efecte ajung la maximum 2 ore după adăugarea VEGF (precum și a altor factori angiogeni - cFGF, oFGF și EGF) și sunt inhibate de oligonucleotidele antisens la ets-1. Activarea proteazelor are trei consecințe importante pentru stimularea angiogenezei: facilitează dezintegrarea celulelor endoteliale și invazia acestora în stratul bazal al vaselor de sânge, generează produse de degradare a ECM care favorizează chemotaxia celulelor endoteliale și, de asemenea, activează și mobilizează factorii de creștere localizați în ECM.
Rolul VEGF în reglarea angiogenezei în cancerul de sân. Prima dovadă a relației dintre expresia VEGF și activitatea angiogenezei în tumorile mamare a fost obținută din material clinic și publicat în 1994-1995. un grup de cercetători japonezi. În primul studiu, realizat de imunohistochimie și care a inclus 103 pacienți cu cancer de sân, au arătat că densitatea microvaselor și creșterea acesteia, determinată de colorarea imunochimică pentru antigenul factor VIII, au fost semnificativ mai mari în tumorile cu colorare intensă pentru VEGF decât în tumorile cu colorare slabă. . VEGF este localizat predominant în citoplasma celulelor tumorale. Ulterior, au extins grupul de pacienți examinat la 328 de persoane și, după ce au confirmat modelele de mai sus, au arătat, de asemenea, că expresia VEGF se corelează cu exprimarea unui alt factor angiogenic - factorul de creștere a celulelor endoteliale derivate din trombocite. Mai târziu, acești autori au efectuat o analiză imunosorbantă cantitativă legată de enzime a conținutului de VEGF în țesuturile primare ale cancerului de sân și au arătat că concentrația de VEGF în tumorile foarte vascularizate a fost semnificativ mai mare decât în cele slab vascularizate. Cu toate acestea, nu a fost găsită nicio relație între nivelurile tisulare ale VEGF și alți doi factori potențial angiogeni - oFGF și factorul de creștere a hepatocitelor. De asemenea, concentrațiile acestor doi factori nu s-au corelat cu parametrii densității microvaselor.
S-au obtinut si date interesante. Folosind o metodă imunohistochimică, ei au comparat expresia VEGF, receptorul său flt-1, de asemenea, oFGF și α- și P-TGF în cancerul de sân și țesutul mamar normal din jur. S-a dovedit că dintre toți parametrii studiați, doar expresia VEGF a fost semnificativ crescută în celulele tumorale comparativ cu cele normale. O creștere a expresiei VEGF în țesutul cancerului de sân în comparație cu țesutul mamar non-tumoral a fost, de asemenea, demonstrată prin metode de hibridizare a ARN. Toate aceste studii au oferit primele dovezi ale rolului important al VEGF în neoangiogeneza în cancerul de sân și importanța acestuia pentru creșterea tumorii. Pentru a demonstra mai direct această ipoteză, au fost necesare studii experimentale pentru a confirma efectul VEGF produs de celulele canceroase de sân asupra angiogenezei. Una dintre primele astfel de dovezi poate fi considerată lucrarea
H. Zhang şi colab. , în care gena VEGF-121 a fost transfectată în estrogen-
linia celulară dependentă de cancer de sân MCF-7. Expresia și secreția VEGF de către celulele transfectate (V12) a fost confirmată prin trei metode independente: un test competitiv al radioreceptorilor,
stimularea creșterii celulelor endoteliale umane in vitro și activarea angiogenezei în corneea iepurelui. Când au fost transplantate în șoareci nuzi, celulele clone V12 au produs mai multe tumori vascularizate cu o distribuție mai eterogenă a vaselor de sânge decât celulele parentale MCF-7. Rata de creștere a tumorilor care decurg din celulele V12 a fost mai mare decât cea a tumorilor din linia celulară originală, în timp ce dependența de hormoni a celulelor și sensibilitatea lor la tamoxifen au fost păstrate. Astfel, s-a demonstrat că celulele canceroase de sân care produc constant VEGF au anumite avantaje de creștere.
O altă dovadă a influenței VEGF asupra creșterii și metastazelor cancerului de sân sunt experimentele cu anticorpi la acest factor. Astfel, în experimente pe șoareci cu cancer de sân spontan, caracterizat printr-o frecvență ridicată a metastazelor la plămâni, s-a demonstrat că anticorpii policlonali împotriva VEGF inhibă creșterea tumorii cu 44% și reduc numărul și dimensiunea metastazelor pulmonare cu 73 și 84% , respectiv.
Un model interesant pentru testarea potențialului angiogenic al diferitelor țesuturi mamare in vivo a fost dezvoltat de H. Lichtenbeld și colab. . Ei au plasat bucăți de tumoră și țesut mamar normal într-o cameră formată din pliul dorsal al pielii de șoareci nuzi și au evaluat inducerea angiogenezei. S-a constatat că toate probele de cancer de sân, precum și țesutul mamar cu hiperplazie și metaplazie apocrină activează semnificativ angiogeneza. Zonele histologic neschimbate ale țesutului mamar de la pacienții cu cancer de sân au stimulat angiogeneza în 66% din cazuri, în timp ce țesutul mamar sănătos obținut prin chirurgie estetică nu a afectat angiogeneza. În toate cazurile, inducerea angiogenezei a avut loc în paralel cu producerea de VEGF de către celulele tumorale sau mamare.
Modelul clasic de reglare a angiogenezei în cancerul de sân (ca și în orice altă tumoare) prevede prezența unui sistem paracrin în care factorul de creștere (VEGF) este produs de celulele tumorale, iar receptorii săi care percep semnalul sunt localizați pe endoteliul vascular. celule. Existența unui astfel de sistem paracrin în cancerul de sân este bine ilustrată de datele lui L. Brown și colab. , care a studiat probe de țesut de la 68 de pacienți cu cancer de sân folosind hibridizarea ARN in situ și a arătat că în celulele carcinomului mamar invaziv, metastatic și intraductal există o expresie pronunțată a VEGF, iar în celulele endoteliale vasculare care pătrund în aceste tumori există o expresie pronunțată. expresia VEGFR1 și VEGFR2. S-au obţinut date similare
A. Kranz şi colab. Cu toate acestea, acești autori au găsit și VEGFR2 pe celulele epiteliale ductale mamare. Există și alte dovezi că celulele canceroase de sân conțin receptori VEGF, iar nivelul de exprimare a VEGF și VEGFR2 se corelează cu indicele de proliferare a celulelor tumorale, determinat de expresia antigenului Ki-67. S-a demonstrat că atât celulele tumorale, cât și cele stromale izolate din carcinoamele mamare primare umane produc VEGF in vitro și nivelurile acestuia.
producția este semnificativ mai mare decât cea a celulelor corespunzătoare izolate din glandele mamare normale. În acest caz, analiza PCR a arătat că VEGFR2 predomină în celulele tumorale și doar VEGFR1 este exprimat în celulele stromale. Astfel, pe lângă funcția sa directă - stimularea non-angiogenezei, VEGF în cancerul de sân poate juca și rolul de regulator auto/paracrin al proliferării celulelor tumorale și/sau stromale.
Se presupune că VEGF poate juca un alt rol în cancerul de sân: prin receptorii flt-1, stimulează migrarea macrofagelor în țesutul tumoral, care, la rândul lor, sunt stimulatori ai aniogenezei, deoarece sintetizează diverși factori angiogeni, incl. și VEGF însuși. În special, R. Leek și colab. , după ce au examinat probe de țesut de la 96 de pacienți cu cancer de sân, a demonstrat o corelație pozitivă între indicele de infiltrare a țesutului tumoral de către macrofage și nivelul de expresie a VEGF.
Secreția de VEGF de către celulele canceroase de sân este indusă de diverși factori externi și interni. P. Scott şi colab. , studiind influența hipoxiei, hipoglicemiei, acidității, hormonilor steroizi sexuali feminini și vitaminei D asupra expresiei celor 4 izoforme principale de VEGF de către celulele canceroase de sân cultivate cu fenotipuri biologice diferite, a arătat că aceste celule diferă semnificativ atât în expresia bazală a ARNm VEGF. şi în sensibilitatea sa la diverşi stimuli. În același timp, hipoxia s-a dovedit a fi cel mai puternic stimul care induce VEGF pentru toate tipurile de celule, iar hormonii steroizi nu au avut practic niciun efect asupra expresiei VEGF. R. Bos şi colab. a arătat că în stimularea neoangiogenezei sub influența hipoxiei, un rol important îl joacă HIF-1, un factor de transcripție indus în condiții de hipoxie, al cărui nivel ridicat în țesutul cancerului de sân se corelează cu un indice ridicat de proliferare, expresie crescută a VEGF și receptorii de estrogeni (ER). Expresia HIF-1 și VEGF în celulele cancerului de sân nu este asociată cu nivelul de expresie al inductorului de apoptoză p53. În același timp, inhibitorul de apoptoză bcl-2 sporește efectul stimulator al hipoxiei asupra sintezei VEGF în celulele canceroase de sân. Analiza de hibridizare a arătat că clonele de celule MCF-7 care supraexprimă bcl-2 și care au potențial metastatic și rezistență crescută la adriamicină au un nivel mai ridicat de exprimare a ARNm a celor mai angiogenice izoforme VEGF - VEGF-121 și VEGF-165 - decât clona MCF originală. 7. În experimentele in vivo, celulele transfectate cu bcl-2 au format tumori cu un grad mai mare de vascularizare și o expresie mai mare a VEGF decât celulele parentale.
Pe de altă parte, s-a demonstrat că VEGF, care este un factor de supraviețuire pentru celulele endoteliale, nu numai că stimulează proliferarea acestora, ci și suprimă apoptoza prin inducerea expresiei bcl-2. Interesant, VEGF a avut un efect similar asupra celulelor canceroase de sân, adică a fost un factor anti-apoptotic nu numai pentru celulele endoteliale, ci și pentru celulele tumorale în sine.
Diferiți factori de creștere și sisteme de semnalizare sunt implicați în reglarea expresiei VEGF în celulele canceroase de sân. În special, mai multe studii au demonstrat rolul important al familiei erbB a receptorilor tirozin kinazelor și al unor liganzi ai acestora. Astfel, L. Yen et al. prin examinarea unui panou de linii celulare
Cancerul de sân cu supraexprimarea stabilă a „receptorului manager” fără liganzi erbB-2 a arătat că heregulina-P1, interacționând cu receptorii erbB-3 și erbB-4, induce secreția de VEGF în majoritatea liniilor celulare de cancer de sân studiate, dar nu. în glandele celulelor mamare normale. Secreția bazală de VEGF a fost crescută în celulele cu niveluri crescute de erbB-2, iar în celulele T47D cu erbB-2 inactivat funcțional, nu numai secreția bazală de VEGF a fost redusă, ci și inducerea acesteia de către heregulină. Ulterior s-a demonstrat că efectul heregulinei asupra sintezei VEGF implică una dintre căile clasice de semnalizare care implică fosfatidilinozitol 3-kinaza și protein kinaza B (Akt), urmată de inducerea factorului de transcripție HIF-1, care stimulează expresia. a genei VEGF.
Regulatorii exprimării VEGF în celulele cancerului de sân sunt aparent, de asemenea, unii factori de creștere ai familiei TGF-β. Concentrațiile de TGF-P1 și VEGF în tumorile și serul sanguin al pacienților cu cancer de sân au corelat pozitiv între ele, iar în experimentele in vitro, TGF-P1 a indus producția de VEGF de către celulele MDA-MB-231 cultivate. Un alt studiu a arătat că expresia simultană ridicată a TGF-β2 și a receptorilor săi este caracteristică tumorilor cu o densitate mare a microvaselor.
Până acum, problema reglării hormonale a sintezei VEGF în celulele canceroase de sân de către steroizi sexuali, în special estrogeni, rămâne controversată. Deși inducerea angiogenezei mediate de VEGF în endometru de către estrogen este practic sigură, existența unui mecanism similar în cancerul de sân nu a fost demonstrată clar. J. Rujhola şi colab. folosind cultura celulară MCF-7 a arătat că 17P-estradiolul (E2) determină o creștere bifazică a sintezei ARNm VEGF, însoțită de acumularea proteinei corespunzătoare în mediul de cultură. Acest efect a fost blocat de antiestrogenul pur ICI 182.780, ceea ce sugerează participarea ER la implementarea sa. În același timp, astfel de antiestrogeni clasici precum tamoxifenul și toremifenul, care au un efect estrogenic parțial, nu numai că nu au inhibat efectul de inducere a VEGF al E2, dar au indus ei înșiși sinteza VEGF. Participarea RE la reglarea sintezei VEGF în celulele canceroase de sân este confirmată și de studiile de biologie moleculară realizate de S. Hyder și colab. care a demonstrat că gena VEGF conține două secvențe care sunt omoloage elementelor clasice sensibile la estrogen și leagă în mod specific ambele forme de ER - ER-a și ER-r.
Cu toate acestea, natura acțiunii estrogenilor și antiestrogenilor asupra sintezei VEGF pare să depindă de tipul de celule canceroase de sân. Astfel, J. Kurebayashi et al. a descris linia celulară de cancer de sân uman KPL-1, a cărei creștere a fost stimulată de ICI 182.780 și suprimată de E2 in vivo. În același timp, E2-propionatul a suprimat angiogeneza și a stimulat apoptoza în tumorile formate de celule KPL-1. În condiții in vitro, E2 nu a afectat nici sinteza VEGF, nici rata de proliferare celulară. Interesant, expresia VEGF în celulele KPL-1 a fost indusă de acetatul de medroxiprogesteron.
Efectul inductor al progestinelor asupra sintezei VEGF de către celulele canceroase de sân a fost, de asemenea, observat de S. Hyder și colab. . Studiind linia celulară T47-D, au descoperit
S-a descoperit că în mod dependent de doză de progesteron a crescut nivelul de VEGF în mediul de cultură de 3-4 ori cu un efect maxim la o concentrație de 10 nM. În același timp, alți hormoni steroizi (estrogeni, androgeni și glucocorticoizi) nu au afectat producția de VEGF, iar efectul progestinelor nu s-a manifestat în alte linii celulare de cancer de sân - MCF-7, ZR-75 și hormon dependent de hormoni. -MDA-MB^L independent Efectul progesteronului asupra celulelor T47- D a fost blocat de antiprogestinul RU-486, sugerând implicarea unui mecanism clasic de receptor. Interesant, conform lui K. Heer et al. , nivelul de VEGF din serul sanguin al femeilor este redus semnificativ în faza luteală a ciclului menstrual și este invers legat de nivelul de progesteron din serul sanguin. Serul obținut în această perioadă a stimulat producția de VEGF de către celulele MCF-7 într-o măsură mai mică decât serul obținut în prima fază a ciclului menstrual.
Modele interesante privind reglarea hormonală a angiogenezei în glanda mamară au fost demonstrate de R. Greb și colab. . După ce au studiat expresia principalelor izoforme ale VEGF-A utilizând analiza PCR în tumori și țesutul mamar nemodificat din jurul a 19 pacienți cu cancer de sân, ei au descoperit că nivelurile de expresie a VEGF în glanda nemodificată au fost semnificativ mai mari la pacienții în premenopauză decât la postmenopauză. pacienți și scad semnificativ odată cu creșterea vârstei pacienților. În același timp, expresia VEGF în țesutul tumoral nu a depins de vârsta și starea de menopauză a pacienților. Autorii cred că în glandele mamare normale angiogeneza este sub control hormonal, dar în timpul transformării maligne acest control se pierde.
În plus față de cel mai cunoscut și răspândit factor angiogenic VEGF-A, descris mai sus, există mai mulți membri ai familiei VEGF - VEGF-B, C și D. Funcția VEGF-C este cel mai clar definită până în prezent: se crede că stimulează limfangiogeneza prin interacțiunea cu receptorii VEGF de tip 3 (flt-4), localizați pe celulele endoteliale ale vaselor limfatice. Studiile experimentale pe șoareci nuzi folosind un nou marker endotelial limfatic LYVE-1 au arătat că supraexprimarea VEGF-C în celulele cancerului de sân îmbunătățește semnificativ limfangiogeneza intratumorală și stimulează formarea de metastaze în ganglionii limfatici regionali și plămâni. Anterior, J. Kurebayashi et al. folosind analiza PCR a demonstrat că, spre deosebire de VEGF-A și B, care sunt prezente în țesutul cancerului de sân, indiferent de stadiul său, VEGF-C este detectat numai în tumorile care au metastazat la ganglionii limfatici, iar VEGF-D este detectat numai în cazul inflamatori. cancer mamar. Pe de altă parte, conform lui R. Valtola și colab. Expresia receptorului VEGF-C este într-adevăr crescută în carcinoamele mamare invazive și intraductale în comparație cu sânul normal și fibroadenoamele, dar a fost observată o expresie crescută a receptorilor VEGF de tip 3 pe celulele endoteliale ale vaselor de sânge, nu vaselor limfatice. În acest sens, autorii consideră că VEGF-C, ca și VEGF-A, este un factor angiogenic în primul rând pentru vasele de sânge, deși nu exclud participarea sa la reglarea limfangiogenezei.
În general, rolul limfangiogenezei și al sistemelor ligand-receptoare care o reglează în procesele de metastazare a tumorilor solide și, în special, a cancerului de sân a primit recent o atenție sporită.
Astfel, VEGF joacă un rol important și divers în cancerul de sân, stimulând creșterea tumorii și răspândirea prin efecte complexe paracrine și autocrine atât direct asupra endoteliului vaselor de sânge, cât și asupra celulelor tumorale și stromei tumorale, macrofagelor infiltrante tumorale și celulelor vaselor limfatice. Toate acestea ne permit să considerăm VEGF ca un marker biologic foarte promițător pentru prognosticul cancerului de sân și una dintre principalele ținte ale terapiei antiangiogenice antitumorale.
Semnificația clinică a determinării VEGF în cancerul de sân. Mai sus, am citat deja o serie de lucrări în care, folosind material clinic folosind diverse metode (imunohistochimic, imunosorbent legat de enzime, hibridizare), exprimarea crescută a VEGF în țesutul cancerului de sân și relația acestuia cu indicatorii tradiționali care caracterizează activitatea neoangiogenezei în a fost demonstrat tesutul tumoral. În total, conform rezultatelor unei analize a bazei de date Medline, studiul semnificației clinice a nivelurilor de VEGF tisulare în cancerul de sân a fost realizat de 14 grupuri de cercetători. Trebuie remarcat din nou că aproape toți cercetătorii care au făcut astfel de comparații, indiferent de metodele utilizate, constată o creștere a expresiei VEGF în țesutul cancerului de sân în comparație cu țesutul mamar din jur, nemodificat histologic, precum și cu tumorile benigne. De asemenea, nu există controverse cu privire la corelarea directă a nivelului de expresie a VEGF cu activitatea neoangiogenezei în țesutul tumoral.
Pentru prima dată, valoarea prognostică nefavorabilă a exprimării ridicate a VEGF în cancerul de sân a fost observată de M. Toi și colab. . Analizând retrospectiv rezultatele observării a 328 de pacienți în tumorile cărora expresia VEGF a fost evaluată prin metoda imunohistochimică, ei au arătat că, într-o analiză univariată, prognosticul de supraviețuire fără recidivă la pacienții cu tumori VEGF pozitive a fost semnificativ mai rău decât la pacienții cu tumori VEGF pozitive. Tumori VEGF-negative. Importanța VEGF pentru prezicerea supraviețuirii fără boală a fost demonstrată și de M. Relf și colab. , care a determinat exprimarea ARN-ului corespunzător în țesuturile tumorale a 64 de pacienți cu cancer de sân. În același timp, conform lui A. Obermair și colab. , nivelul de VEGF măsurat prin imunotestul enzimatic nu a avut un efect semnificativ asupra prognosticului supraviețuirii fără recidivă a celor 89 de pacienți cu cancer de sân pe care i-au examinat.
Cele mai interesante studii ar trebui să fie cele în care valoarea prognostică a VEGF a fost evaluată la diferite grupuri clinice de paciente cu cancer de sân, ținând cont de tratament. Rezultatele unei astfel de analize detaliate au fost publicate de două grupuri: G. Gasparini et al. şi B. Linderholm şi colab. . Într-o lucrare din 1997, G. Gasparini et al. au prezentat rezultatele unei determinări imunosorbente cantitative legate de enzime a concentrației de VEGF în citosolurile tumorilor a 260 de pacienți cu cancer de sân fără metastaze la ganglionii limfatici. Pacienții au fost urmăriți în medie 66 de luni. În același timp, VEGF într-o gamă largă
zona de concentrație (de la 5 la 6523 pg/mg proteină) a fost găsită în 95% dintre tumori. Nivelul său nu s-a corelat cu factorii de prognostic cunoscuți: vârsta și starea de menopauză a pacienților, tipul histologic, dimensiunea și starea receptorului tumorii, dar s-a dovedit a fi un predictor semnificativ statistic al supraviețuirii fără recidivă și globală, conform rezultatelor atât analiza univariată cât și multivariată. Astfel, nivelul citosolic al VEGF este un indicator de prognostic la pacientii cu stadii incipiente de cancer de san, permitand formarea unui grup risc crescut recidive și metastaze.
Într-o publicație ulterioară a acestui grup de autori, a fost efectuată o evaluare comparativă a valorii prognostice a VEGF și a unui alt factor angiogenic timidin fosforilază (TF - factor de creștere a celulelor endoteliale derivate din trombocite) la pacienții cu cancer de sân cu metastaze la ganglionii limfatici. care au primit chimioterapie conform regimului SMR (137 pacienți) sau terapie hormonală cu tamoxifen (164 bolnavi). Concentrațiile citosolice de VEGF au fost similare în ambele grupuri. În grupul de pacienți cărora li s-a administrat tamoxifen, nivelul de VEGF a fost corelat pozitiv cu vârsta pacienților și a fost invers legat de nivelul receptorilor hormonilor steroizi. În acest grup, nivelul VEGF, împreună cu numărul de ganglioni limfatici afectați și concentrațiile de ER și RP, a fost un factor de prognostic independent semnificativ în rezultatele analizei univariate și multivariate. Cele mai bune rezultate Tratamentul cu tamoxifen este de așteptat la pacienții cu niveluri scăzute de VEGF în tumoră și implicarea a mai puțin de trei ganglioni limfatici în procesul tumoral. Un nivel scăzut de VEGF sa dovedit a fi un factor independent de prognostic favorabil în grupul de pacienți care au primit chimioterapie. În acest grup, TF este, de asemenea, un factor de prognostic semnificativ, iar prognosticul este favorabil cu niveluri ridicate ale acestei proteine.
Într-unul din cele mai recente studii ale lui O. Oa8ragipii a1. Modelul de prognostic multifactorial pentru pacienții cu stadii incipiente ale cancerului de sân a inclus și inhibitori naturali ai angiogenezei - trombospondinele 1 și 2, dar contribuția acestora la predicția supraviețuirii fără recidivă și a supraviețuirii globale nu a fost semnificativă statistic.
Astfel, conform datelor acestui grup de cercetare, rezumate în mai multe articole de recenzie, VEGF este cel mai promițător indicator de prognostic al activității angiogenezei în cancerul de sân. Nivelul său ridicat indică
despre prognosticul nefavorabil atât pentru cancerul de sân precoce, cât și pentru cel avansat. Printre alți regulatori ai angiogenezei, doar TF aduce o anumită contribuție la prognostic, iar semnificația sa se manifestă doar în timpul chimioterapiei pentru cancerul de sân avansat.
Valoarea prognostică a VEGF în cancerul de sân non-avansat a fost, de asemenea, studiată și confirmată de B. biliary et al. . Ei au determinat prin imunotest enzimatic conținutul de VEGF în citosolurile tumorilor a 525 de pacienți fără metastaze în ganglionii limfatici (T1.2K0M0), dintre care 500 nu au primit niciun tratament postoperator. Urmărirea mediană a fost de 46 de luni. Spre deosebire de cercetătorii citați anterior, aceștia au găsit o corelație directă între nivelul de VEGF și dimensiunea tumorii, precum și gradul de malignitate a acesteia și o corelație inversă.
stabilirea nivelurilor de VEGF și RE. Rata de supraviețuire a pacienților cu concentrații citosolice de VEGF sub nivelul median (2,4 pg/pg ADN) a fost semnificativ mai mare decât la pacienții cu niveluri mai scăzute de VEGF. În analiza multivariată, nivelul VEGF a fost cel mai semnificativ factor de prognostic independent, superior altor indicatori cunoscuți. O scădere semnificativă a supraviețuirii cu un nivel ridicat de VEGF în tumoră a fost găsită și în grupul favorabil din punct de vedere prognostic de pacienți ER-pozitivi.
Potrivit acelorași autori, un nivel ridicat de VEGF are o valoare prognostică nefavorabilă atunci când pacienții cu stadii incipiente ale cancerului de sân suferă locoreginal. terapie cu radiatii. 302 pacienți au fost examinați cu o urmărire mediană de 56 de luni. VEGF a fost singurul predictor independent al supraviețuirii globale (risc relativ 3,6) în întregul grup, precum și al supraviețuirii fără recădere în grupurile cele mai favorabile prognostic de pacienți cu tumori mici (T1) și tumori ER-pozitive. Autorii sugerează că nivelurile ridicate de VEGF intratumoral pot corespunde unui fenotip radiorezistent și indică necesitatea unui tratament sistemic suplimentar.
B. Linderholm şi colab. a examinat, de asemenea, un grup de 362 de pacienți cu cancer de sân cu metastaze ganglionare, dintre care 250 au primit terapie hormonală adjuvantă și 112 - chimioterapie adjuvantă. Într-o analiză univariată, VEGF s-a dovedit a fi un predictor semnificativ al supraviețuirii fără boală și globală în întreaga populație de pacienți, precum și în grupul care a primit terapie endocrină. În grupul de pacienți care au primit chimioterapie, nivelul VEGF a avut un efect numai asupra supraviețuirii globale. În analiza multivariată, VEGF a rămas semnificativ doar pentru supraviețuirea globală.
Astfel, acest grup de cercetători a demonstrat, de asemenea, semnificația prognostică a VEGF pentru diferite grupuri clinice de pacienți cu cancer de sân, care a fost rezumată într-o publicație din 2000 care a inclus date despre 83 de pacienți cu diferite stadii de cancer mamar. Această lucrare a demonstrat, de asemenea, semnificația prognostică a studiului simultan al VEGF și al mutantului p53. Riscul relativ de deces a crescut de 2,7 ori în grupul cu conținut ridicat de VEGF și p53 pozitiv și numai în
1,7 în grupuri cu unul dintre acești factori nefavorabili.
Într-un studiu cooperant, care a inclus un total de 495 de pacienți din doi diverse clinici, pe baza datelor din analize univariate și multivariate, care au inclus, alături de indicatorii tradiționali, și angiogenină, oFGF și activatori de plasminogen, s-a demonstrat că VEGF este cel mai important parametru de prognostic pentru pacienții cu cancer de sân fără metastaze la ganglionii limfatici. Și recent, un alt grup de cercetători a confirmat că nivelul intratumoral al VEGF aduce o contribuție suplimentară la așa-numitul indice de prognostic Nottingham, folosit pentru a forma grupuri cu risc ridicat în rândul pacienților cu stadii incipiente ale cancerului de sân.
Un loc aparte îl ocupă studiul lui J. Foekens et al. [b1], care a determinat concentrația de VEGF în extractele conservate utilizând metoda imunotestării enzimatice.
total de 845 de pacienți cu cancer de sân avansat care au dezvoltat o recidivă a bolii. 618 dintre acești pacienți au primit terapie hormonală postoperatorie adjuvantă cu tamoxifen, iar 227 pacienți au primit chimioterapie postoperatorie. S-a dovedit că concentrația citosolică de VEGF în tumorile pacienților la care au apărut recidive în timpul primului an de observație a fost semnificativ mai mare decât la pacienții cu o perioadă mai lungă fără recidivă. S-a remarcat, de asemenea, că nivelul de VEGF în tumora primară este mai mare la pacienții cu metastaze primare la organele interne decât la pacienții cu metastaze la oase și țesuturi moi. Nivelurile ridicate de VEGF, conform analizei univariate și multivariate, s-au dovedit a fi un indicator independent al sensibilității scăzute atât la tamoxifen, cât și la chimioterapie.
În general, 13 din 14 studii publicate de 8 grupuri independente de cercetători au demonstrat că un nivel ridicat de VEGF este un factor independent în prognosticul nefavorabil al cancerului de sân în stadiile incipiente și/sau sensibilitatea sa scăzută la tipurile tradiționale de hormoni sau chimioterapie în cancer mamar avansat. În acest sens, s-a propus să se ia în considerare posibilitatea includerii diferitelor medicamente antiangiogenice în regimurile de tratament adjuvant pentru pacienții cu concentrații mari de VEGF intratumoral. Trebuie remarcat faptul că abordările metodologice și criteriile unificate pentru identificarea pacienților cu niveluri ridicate de VEGF nu au fost încă dezvoltate și vor fi necesare studii de cooperare suplimentare pentru a le crea.
În paralel cu studiul semnificației clinice a nivelului tisular de VEGF în cancerul de sân, întrebarea dacă expresia crescută a VEGF în tumoră se reflectă în nivelul acestei proteine în ser/plasmă și dacă concentrația de VEGF circulant este se studiază o caracteristică adecvată a conţinutului său şi a activităţii de angiogeneză în tumoră. În 1996-1997 Au fost publicate primele studii care au demonstrat o creștere a nivelului de VEGF în sângele bolnavilor de cancer. Astfel, Y. Yamamoto et al. [b2], după ce a examinat un grup mare de pacienți și donatori, inclusiv 137 de pacienți cu cancer de sân, a constatat că nivelul de VEGF în serul sanguin al 8,8% dintre pacienții cu cancer de sân a depășit pragul stabilit de 180 pg/ml. Nivelul seric al VEGF a corelat cu amploarea procesului și cu nivelul de expresie a VEGF în țesutul tumoral, iar izoforma principală a VEGF în ser a fost VEGF-^5.
L. Dirix et al. [b3] a examinat un grup de 132 de pacienți cu cancer metastatic cu diagnostice primare diferite. Ei au considerat că nivelul VEGF este ridicat dacă depășește intervalul de încredere de 95% al grupului de control și se ridica la 500 pg/ml. VEGF a fost crescut la 57% dintre pacienții cu cancer metastatic netratat, indiferent de localizare. În timpul tratamentului, nivelurile de VEGF au crescut la 2/3 pacienți cu progresie a bolii și la mai puțin de 10% dintre pacienții cu dinamică pozitivă.
P. Salven şi colab. [b4] a mai arătat că în diferite tipuri de tumori (inclusiv cancerul de sân), nivelul seric de VEGF în cancerul diseminat (171.711 pg/ml; mediana - 214 pg/ml) este semnificativ mai mare decât la donatorii sănătoși (1-177 pg). /ml; mediană - 17 pg/ml) și la pacienții cu proces localizat (8-664 pg/ml; mediană - 158 pg/ml). La 74% dintre pacienții netratați
La pacienții cu cancer diseminat, nivelul VEGF în serul sanguin a depășit 200 pg/ml, iar cu un tratament de succes a scăzut. Modele similare au fost observate de A. Kraft et al. [b5]: conform datelor lor, se observă un nivel crescut de VEGF în serul a 0-2G% dintre pacienții cu proces tumoral localizat și 11-65% dintre pacienții cu proces metastatic. Cu toate acestea, trebuie remarcat faptul că, în acest studiu, nivelurile de VEGF la donatorii sănătoși (30-1752 pg/ml; mediana - 294 pg/ml; intervalul de încredere superior de 95% - 883 pg/ml) au fost semnificativ mai mari decât cele raportate de alte autorii. În acest studiu, ca și în lucrarea lui B. Zebrowski și colab. [bb], a fost demonstrată o creștere semnificativă a concentrației de VEGF în lichidele ascitice la pacienții cu cancer în comparație cu ascita de origine non-tumorală.
În lucrări mai recente, P. Salven și colab. [b7] prezintă rezultatele determinării concentrației de VEGF în serul sanguin la 105 pacienți cu tumori mamare benigne și maligne. S-a demonstrat că nivelurile de VEGF în serul sanguin la pacientele cu cancer de sân metastatic (7-1347 pg/ml; mediană - 186 pg/ml) sunt semnificativ crescute în comparație cu pacienții cu tumori benigne (2-328 pg/ml; mediană). -57 pg/ml). Nivelurile de VEGF la pacientii cu cancer de san local avansat (11-539 pg/ml; mediana - 104 pg/ml) sunt de asemenea mai mari decat la pacientii cu tumori benigne, dar diferenta nu este semnificativa statistic. La pacienții cu cancer metastatic care au primit tratament specific, nivelul VEGF a fost semnificativ mai scăzut decât la pacienții care au primit doar tratament simptomatic. De asemenea, este interesant faptul că, cu un proces local avansat, nivelul de VEGF în serul sanguin al pacienților cu cancer ductal invaziv (mediana - 107 pg/ml) a fost semnificativ mai mare decât la pacienții cu cancer lobular invaziv (mediana - 44 pg/ml). ), iar la acestea din urmă a fost chiar mai mică decât pentru tumorile benigne. Această observație este în acord cu datele lui A. Lee și colab. [b8], care a arătat că în țesutul cancerului de sân ductal conținutul de ARNm și proteine VEGF este semnificativ mai mare decât în țesutul cancerului lobular. În același timp, cancerul ductal și cel lobular nu diferă în densitatea microvaselor și numai în cancerul ductal a existat o corelație directă între nivelurile de ARNm VEGF și proteine și indicatorii densității vaselor. Se poate presupune că VEGF este un regulator al angiogenezei în primul rând în cancerul de sân ductal.
De interes sunt studiile comparative în care conținutul/expresia VEGF în țesutul tumoral și serul sanguin a fost determinat simultan. G. Callagy și colab. [b9], care a determinat expresia tisulară a VEGF folosind o metodă imunohistochimică, a ajuns la concluzia că acest indicator, dar nu concentrația serică a VEGF, se corelează cu densitatea microvaselor și stadiul cancerului de sân și, prin urmare, este un factor de prognostic mai fiabil decât nivelul de VEGF din serul sanguin. De asemenea, ei nu au găsit o relație între nivelurile serice de VEGF și expresia acestuia în tumoră.
Cel mai reprezentativ studiu comparativ a fost realizat de J. Adams et al. . Ei au determinat conținutul de VEGF în ser și plasmă și expresia VEGF în tumori (imunohistochimic) la 201 de pacienți cu cancer de sân localizat și avansat, tumori benigne de sân
păduri şi femei sanatoase. În cancerul de sân metastatic, a fost observată o creștere semnificativă a nivelului de VEGF atât în plasmă, cât și în ser, comparativ cu normalul. Conținutul de VEGF în plasma sanguină la pacienții cu cancer de sân metastatic a fost, de asemenea, semnificativ crescut în comparație cu pacienții cu tumori benigne și cancer mamar localizat. În cancerul de sân localizat, s-a observat doar o creștere a nivelului de VEGF în plasma sanguină în comparație cu martor. Autorii cred că măsurarea VEGF în plasma sanguină reflectă în mare măsură producția sa de către tumoră, deoarece VEGF seric este predominant de origine trombocitară. În mod paradoxal, cele mai ridicate niveluri de VEGF în ser și plasmă au fost găsite la pacienții cu cancer de sân care au fost în remisie în timpul tratamentului cu tamoxifen. Nivelurile circulante de VEGF nu s-au corelat cu niciunul dintre factorii clinicopatologici cunoscuți, inclusiv densitatea microvasculară și expresia tisulară a UROR.
Astfel, posibilitatea utilizării nivelurilor de VEGF în sânge (atât ser, cât și plasmă) ca înlocuitor adecvat pentru expresia tisulară a acestei proteine atunci când se evaluează activitatea angiogenezei în cancerul de sân și se prezică rezultatul bolii și eficacitatea terapiei a avut nu a fost încă dovedit.
Angiogeneza dependentă de ECEC ca țintă pentru terapia antitumorală în cancerul de sân. Având în vedere rolul critic al angiogenezei în menținerea creșterii și răspândirii cancerului de sân și rolul cheie al VEGF în acest proces, mulți autori au concluzionat de mult timp că suprimarea țintită a exprimării VEGF și/sau efectele sale poate fi o abordare promițătoare pentru dezvoltarea noi regimuri de tratament adjuvant pentru această boală. S-a propus să se utilizeze substanțe care blochează relativ nespecific interacțiunea diferiților factori de creștere cu receptorii tirozin kinazei, în special, analogi mai puțin toxici ai suraminei, ca agenți antiangiogeni. S-a presupus, de asemenea, că agenții antiangiogeni ar putea fi deosebit de eficienți atunci când sunt combinați cu medicamente activate în condiții de hipoxie, deoarece suprimarea angiogenezei ar crea condiții favorabile pentru activarea acestor medicamente. Un accent deosebit a fost pus pe faptul că terapia pur antiangiogenă va duce cel mai probabil nu la regresia tumorii, ci la oprirea creșterii acesteia în continuare. În acest sens, s-a subliniat necesitatea dezvoltării unor criterii clinice și biochimice pentru evaluarea eficacității medicamentelor antiangiogenice.
În prezent, numai în Statele Unite, peste 20 de medicamente care afectează angiogeneza într-un fel sau altul sunt supuse unor studii clinice, în principal faza I. Printre acestea se numără medicamente atât de specifice, cum ar fi anticorpii monoclonali din VEOP (Genereil) și receptorii săi (IMC-1C11), inhibitori ai tirozin kinazei interne a receptorului VEGF (de exemplu, 7B6474), blocanți ai transmisiei semnalului mitogen VEGF (SIII668 și SV416), inhibitori naturali (Leova8-M) și sintetici (Magita8la1, Propita8a1, VMB-275291, COb-3) ai proteinazelor matriceale, inhibitori naturali (angiostatina și endostatină) și sintetici (TYP-470) ai proliferării sau inductori ai apoptozei ( Combre8la1m) a celulelor endoteliale si
Există, de asemenea, o serie de medicamente cu mecanisme de acțiune diferite sau neclare.
I Roictap împarte medicamentele antiangiogene în inhibitori direcți și indirecti ai angiogenezei. El se referă la inhibitorii direcți ca fiind substanțe care afectează direct celulele endoteliale. Acestea sunt deja menționate angiostatina, endostatin, TYP-470, CotbhaPn, precum și inhibitori naturali ai angiogenezei, cum ar fi trombospondinele și factorul epitelial pigmentar. O trăsătură caracteristică a unor astfel de medicamente este că acestea, de regulă, nu induc rezistență în celulele endoteliale și, prin urmare, pot fi utilizate pentru o lungă perioadă de timp. Inhibitorii indirecti includ medicamente care afectează producția de factori angiogeni de către celulele tumorale sau blochează acțiunea acestor factori într-un stadiu sau altul. Aceștia sunt anticorpi monoclonali sau nucleotide antisens la VEGF și receptorii săi. Deoarece acțiunea inhibitorilor indirecți este direct legată de celula tumorală și de capacitatea acesteia de a produce factori angiogeni, probabilitatea de apariție a rezistenței la aceste medicamente este aproximativ aceeași ca și pentru agenții antitumorali tradiționali.
Interesul pentru terapia antitumorală antiangiogenă este în prezent atât de mare încât numărul publicațiilor dedicate studiilor preclinice și clinice în acest domeniu este măsurat în sute, așa că în această recenzie ne vom concentra doar asupra lucrărilor legate direct de cancerul de sân.
Cel mai avansat din punct de vedere clinic este un medicament cu un mecanism necunoscut de acțiune antiangiogenă - talidomida. În anii 1970 a fost folosit ca sedativ și a fost interzis datorită efectelor sale secundare teratogene, care se datorau proprietăților sale antiangiogene. În prezent, se încearcă exploatarea potențialului antiangiogenic al talidomidei în tratamentul tumori maligneși este deja în curs de studii clinice de fază II. Printre cei 66 de pacienți incluși în acest studiu care au primit 100 mg talidomidă în fiecare noapte, au existat 12 pacienți cu cancer de sân. Nu a existat un răspuns obiectiv la medicament la pacienții cu cancer de sân, deși un răspuns parțial sau o stabilizare a fost observată la 6 din 18 pacienți cu cancer de rinichi incluși în același studiu.
În același timp, experimentele anterioare privind inducerea angiogenezei în corneea de iepure sub influența clonei producătoare de VEOP a celulelor MCP-7 au arătat că analogul de talidomidă linomida la o doză de 100 mg/kg greutate corporală inhibă eficient acest proces. .
M. A8apo e1 a1. , a arătat că anticorpul monoclonal anti-VEGF MY833 suprimă creșterea xenogrefelor de cancer de sân uman la șoarecii nuzi. Cu toate acestea, efectul inhibitor al MY833 nu s-a corelat nici cu cantitatea de VEGF secretată de tumoare, nici cu expresia receptorului VEGF. În alte experimente, la transplantarea sferoizilor formați din celulele canceroase de sân ale liniilor MCP-7, 7YA-75 și BK-VYA-3 în camera dorsală subcutanată a șoarecilor atimici, s-a demonstrat că anticorpul monoclonal la VEGF A.4.6. 1 la o doză zilnică de 200 μg suprimă semnificativ activitatea angiogenă a acestor linii celulare și îmbunătățește activitatea antitumorală a doxorubicinei în aceste modele.
Activitate antitumorală semnificativă pe xenogrefele de cancer de sân a fost observată, de asemenea, în inhibitorul specific cu greutate moleculară mică al tirozin kinazei receptorului vEGF (ambele tipuri 1 și 2) - 7B4190. O singură administrare orală a acestui medicament în doze care nu au avut un efect antiproliferativ direct asupra celulelor tumorale a suprimat semnificativ creșterea tumorilor stabilite care măsoară aproximativ 0,5 cm3. Un alt inhibitor al tirozin kinazei are activitate antiangiogenă împotriva xenogrefelor de cancer de sân - cunoscutul medicament 7B1839 (Ige88a), care este un inhibitor selectiv al receptorului EGF tirozin kinazei și este deja în curs de studii clinice. Se presupune că acest medicament nu acționează direct asupra receptorilor VEGF, ci suprimă inducerea sintezei VEGF sub influența liganzilor receptorilor EGF. Aparent, un alt blocant al căii dependente de EGF de transmitere a semnalului mitogen, Herceptin, un anticorp monoclonal umanizat la Herb2/neu, are un efect indirect similar asupra angiogenezei.
Medicamentele care perturbă funcția microtubulilor sunt, de asemenea, inhibitori eficienți ai angiogenezei. Deci, în 1997, Klauber N. eii a1. a arătat că 2-metoxiestradiolul și taxolul, care au proprietăți similare, inhibă angiogeneza indusă de VEGF cu 54 și, respectiv, 37%. În același timp, 2-metoxiestradiolul a suprimat creșterea cancerului de sân uman implantat la șoareci atimici cu 60%. Proprietățile antiangiogenice ale taxolului au fost demonstrate și de B. bau e1 a1. pe șoareci cu o tumoare de sân transgenică bine vascularizată MeH. Efectul a fost observat la doze necitotoxice de taxol (3-6 mg/kg/zi) și a fost asociat cu suprimarea secreției de VEGF.
Această proprietate a taxolului a fost propusă a fi utilizată pentru a evalua eficacitatea tratamentului pacienților cu cancer de sân metastatic. Studiul lor a inclus 14 pacienți care au primit monoterapie cu taxol la o doză de 175 mg/m2 IV timp de trei cure a câte 21 de zile fiecare. La toți pacienții, nivelul seric al VEGF a fost determinat utilizând metoda imunosorbantă legată de enzime înainte de începerea tratamentului și după fiecare dintre cursurile de 21 de zile. La 3 pacienți a existat un răspuns parțial la tratament, la 6 - stabilizarea și la 5 - progresia bolii. Nivelurile serice de VEGF înainte de tratament au fost semnificativ crescute la 8 din 14 pacienți. Nivelul mediu de VEGF a scăzut după tratament la pacienții cu efect parțial și stabilizare și nu s-a modificat semnificativ la pacienții cu progresie. Mai mult, procentul de normalizare a nivelurilor VEGF sau reducerea acestuia cu mai mult de 50% a fost semnificativ mai mare la pacienții cu răspuns parțial (5/9) decât la pacienții cu progresie (0/5). Autorii cred că efectul stabilizator al taxolului la pacienții cu cancer de sân avansat poate fi asociat cu suprimarea secreției VEGF și, în consecință, cu inhibarea angiogenezei.
Experimentele publicate pe șoareci imunodeficienți au demonstrat posibilitatea utilizării terapia genică pentru a suprima angiogeneza și a inhiba creșterea cancerului de sân. Șoarecii cu tumori mature Mca-4 au fost injectați de două ori cu un interval de 7 zile în tumoră cu o plasmidă care conține gena pentru endostatină, inhibitor natural al angiogenezei. La 14 zile de la prima administrare a fost depistat
reducerea greutății tumorilor la șoarecii experimentali cu 51% comparativ cu grupul martor. În același timp, s-a observat o creștere a distanței dintre celulele tumorale și cele mai apropiate vase, o scădere a densității generale a vaselor și o creștere a apoptozei în tumorile care conțin și exprimă gena endostatin.
O altă abordare de inginerie genetică a terapiei antiangiogenice pentru cancerul de sân este utilizarea ADNc anti-sens la VEGF. S.A. Im și colab. celule de cancer de sân uman transfectate ale liniei MDA231-MB cu un vector adenoviral care conține același ADNc pentru VEGF-165 (Ad5CMV-alphaVEGF). Într-un sistem in vitro, această transfecție a dus la scăderea secreției de VEGF fără a afecta semnificativ creșterea celulelor. Injectarea de Ad5CMV-alphaVEGF in vivo în tumorile formate de celule MDA231-MB la șoarecii nuzi a dus la suprimarea creșterii tumorii, scăderea expresiei proteinei VEGF în țesutul tumoral și scăderea densității microvasculare în comparație cu grupul injectat cu un vector care nu conține anti- ADNc VEGF.
Astfel, posibilitatea de utilizare tipuri variate terapia antiangiogenică directă și indirectă în tratamentul pacienților cu cancer de sân. Din păcate, niciuna dintre aceste metode nu și-a dovedit încă eficacitatea în clinică. Mai mult, majoritatea autorilor sunt înclinați să creadă că terapia antiangiogenă (în special directă), care este predominant citostatică, mai degrabă decât citotoxică pentru tumorile mari, nu ar trebui utilizată ca metodă independentă de tratament, ci ca o completare importantă la regimurile de terapie standard.
LITERATURĂ
1. Pintucci G., Bikfalvi A., Klein S., Rifkin D.B. Angiogeneza si sistemul fibrinolitic // Semin. Tromb. Hemost. 1996. V. 22. Nr. 6. P. 517-524.
2. Ferrara N. Rolul factorului de creștere endotelial vascular în angiogeneza patologică // Breast Cancer Res. Trata. 1995. V. 36. Nr. 2. P. 127137.
3. Vandenbunder B., Wernert N., Queva C., Desbiens X., Stehelin D. Factorul de transcripție c-ets1 participă la reglarea angiogenezei și a invaziei tumorale? // Folia Biol. (Praha). 1994. V. 40. Nr. 5. P. 301-313.
4. Sato Y. Factorul de transcripție ETS-1 ca țintă moleculară pentru inhibarea angiogenezei // Hum. Celulă. 1998. V. 11. Nr. 4. P. 207-214.
5. Iwasaka C., Tanaka K., Abe M., Sato Y. Ets-1 reglează angiogeneza prin inducerea expresiei activatorului plasminogenului de tip urokinază și a metaloproteinazei-1 matriceale și migrarea celulelor endoteliale vasculare // J. Cell Physiol . 1996. V. 169. Nr. 3. P. 522-531.
6. Mignatti P., Rifkin D.B. Activatori de plasminogen și metaloproteinaze ale matricei în angiogeneză // Enzyme Protein. 1996. V. 49. P. 117-137.
7. Toi M., Hoshina S., Takayanagi T., Tominaga T. Asociația expresiei factorului de creștere endotelial vascular cu angiogeneza tumorală și cu recidivă precoce în cancerul de sân primar // Jpn. J. Cancer Res. 1994. V. 85. Nr. 10. P. 1045-1049.
8. Toi M., Inada K., Hoshina S., Suzuki H., Kondo S., Tominaga T. Factorul de creștere a endoteliului vascular și factorul de creștere a celulelor endoteliale derivate din trombocite sunt frecvent coexprimați în cancerul de sân uman foarte vascularizat. Cancer Res. 1995. V. 1. Nr. 9. P. 961-964.
9. Toi M., Inada K., Suzuki H., Tominaga T. Angiogeneza tumorală în cancerul de sân: importanța sa ca indicator de prognostic și asocierea cu expresia factorului de creștere endotelial vascular Breast Cancer Res. Trata. 1995. V. 36. Nr. 2. P. 193-204.
10. Toi M., Kondo S., Suzuki H., Yamamoto Y., Inada K., Imazawa T., Taniguchi T., Tominaga T. Analiza cantitativă a factorului de creștere endotelial vascular în cancerul de sân primar. 1996. V. 77. Nr. 6. P. 1101-1106.
11. Toi M., Yamamoto Y., Taniguchi T., Saji S., Hayashi K., Tominaga T. Reglarea expresiilor factorului de creștere endotelial în cancerul de sân // Gan To Kagaku Ryoho. 1996. V. 23. Suppl. 1. P. 75-79.
12. Yoshiji H., Gomez D.E., Shibuya M., Thorgeirsson U.P. Exprimarea factorului de creștere a endoteliului vascular, a receptorului său și a altor angiogeni
factori în cancerul de sân uman // Cancer Res. 1996. V. 56. Nr. 9. P. 2013-2016.
13. Anan K., Morisaki T., Katano M., Ikubo A., Kitsuki H., Uchiyama A., Kuroki S., Tanaka M., Torisu M. Factorul de creștere endotelial vascular și factorul de creștere derivat din trombocite sunt potențial angiogenic și factorii metastatici în cancerul de sân uman // Chirurgie. 1996. V. 119. Nr. 3.
14. Anan K., Morisaki T., Katano M., Ikubo A., Tsukahara Y., Kojima M., Uchiyama A., Kuroki S., Torisu M., Tanaka M. Evaluarea c-erbB2 și a creșterii endoteliale vasculare expresia factorului ARNm în aspiratele cu ac fin din carcinoamele mamare precoce: determinarea preoperatorie a potențialului malign // Eur. J. Surg. Oncol. 1998. V. 24. Nr. 1. P. 28-33.
15. Guidi A.J., Schnitt S.J., Fischer L., Tognazzi K., Harris J.R., Dvorak H.F., Brown L.F. Expresia și angiogeneza factorului de permeabilitate vasculară (factorul de creștere vascular endotelial) la pacienții cu carcinom ductal in situ al sânului // Cancer. 1997. V. 80. Nr. 10. P. 1945-1953.
16. Zhang H.T., Craft P., Scott P.A., Ziche M., Weich H.A., Harris A.L., Bicknell R. Îmbunătățirea creșterii tumorii și a densității vasculare prin transfecția factorului de creștere a celulelor endoteliale vasculare în celulele de carcinom mamar uman MCF-7 J. Natl. Cancer Inst. 1995. V. 87. Nr. 3. P. 213-219.
17. Wang G., Dong Z., Xu G., Yang Z., Shou C., Wang N., Liu T. Efectul anticorpului împotriva factorului de creștere endotelial vascular asupra creșterii tumorii și metastazei J. Cancer Res. Clin. Oncol. 1998. V. 124. Nr. 11. P. 615-620.
18. Wang G., Yang Z., Shou C. // Chung Hua Chung Liu Tsa Chih. 1997. V. 19. Nr. 6. P. 407-409.
19. Lichtenbeld H.C., Barendsz-Janson A.F., van Essen H., Struijker Boudier H., Grifioen A.W., Hillen H.F. Potențialul angiogenic al țesuturilor mamare umane maligne și nemaligne într-un model de angiogeneză in vivo // Int. J. Cancer. 1998. V. 77. Nr. 3. P. 455-459.
20. Brown L.F., Guidi A.J., Schnitt S.J., Van De Water L., Iruela-Arispe M.L., Yeo T.K., Tognazzi K., Dvorak H.F. Formarea stromei vasculare în carcinomul in situ, carcinomul invaziv și carcinomul metastatic al sânului // Clin. Cancer Res. 1999. V. 5. Nr. 5. P. 1041-1056.
21. Kranz A., Mattfeldt T., Waltenberger J. Mediatori moleculari ai angiogenezei tumorale: expresie și activare îmbunătățite a receptorului factorului de creștere endotelial vascular KDR în cancerul de sân primar // Int. J. Cancer. 1999. V. 84. Nr. 3. P. 293-298.
22. Xie B., Tam N.N., Tsao S.W., Wong Y.C. Co-exprimarea factorului de creștere endotelial vascular (VEGF) și a receptorilor săi (flk-1 și flt-1) în cancerul mamar indus de hormoni la șobolanul Noble // Br. J. Cancer.
1999. V. 81. Nr. 8. P. 1335-1343.
23. Speirs V., Atkin S.L. Producerea VEGF și exprimarea receptorilor VEGF Flt-1 și KDR în culturi primare de celule epiteliale și stromale derivate din tumorile mamare // Br. J. Cancer. 1999. V. 80. Nr. 5-6. p. 898-903.
24. Leek R.D., Hunt N.C., Landers R.J., Lewis C.E., Royds J.A., Harris A.L. Infiltrarea macrofagelor este asociată cu expresia VEGF și EGFR în cancerul de sân // J. Pathol. 2000. V. 190. Nr. 4. P. 430-436.
25. Scott P.A., Gleadle J.M., Bicknell R., Harris A.L. Rolul sistemului de detectare a hipoxiei, acidității și hormonilor reproductivi în variabilitatea inducerii factorului de creștere a endoteliului vascular în liniile celulare de carcinom mamar uman // Int. J. Cancer. 1998. V. 75. Nr. 5. P. 706-712.
26. Bos R., Zhong H., Hanrahan C.F., Mommers E.C., Semenza G.L., Pinedo H.M., Abeloff M.D., Simons J.W., van Diest P.J., van der Wall
E. Nivelurile factorului 1 alfa inductibil de hipoxie în timpul carcinogenezei mamare // J. Natl. Cancer Inst. 2001. V. 93. Nr. 4. P. 309-314.
27. Biroccio A., Candiloro A., Mottolese M., Sapora O., Albini A., Zupi G., Del Bufalo D. Supraexprimarea și hipoxia Bcl-2 acționează sinergic pentru a modula expresia factorului de creștere endotelial vascular și an- vivo in vivo. giogeneza într-o linie de carcinom mamar // FASEB J. 2000. V. 14. Nr. 5. P. 652-660.
28. Pidgeon G.P., Barr M.P., Harmey J.H., Foley D.A., Bouchier Hayes D.J. Factorul de creștere a endoteliului vascular (VEGF) suprareglează BCL-2 și inhibă apoptoza în celulele de adenocarcinom mamar uman și murin // Br. J. Cancer. 2001. V. 85. Nr. 2. P. 273-278.
29. Yen L., You X.L., Al Moustafa A.E., Batist G., Hynes N.E., Mader S., Meloche S., Alaoui-Jamali M.A. Heregulina reglează selectiv secreția factorului de creștere endotelial vascular în celulele canceroase și stimulează angiogeneza // Oncogene. 2000. V. 19. Nr. 31. P. 3460-3469.
30. Laughner E., Taghavi P., Chiles K., Mahon P.C., Semenza G.L. Semnalizarea HER2 (neu) crește rata sintezei factorului 1alfa inductibil de hipoxie (HIF-1alfa): mecanism nou pentru exprimarea factorului de creștere endotelial vascular mediat de HIF-1 // Mol. Cell Biol. 2001. V. 21. Nr. 12. P. 3995-4004.
31. Blancher C., Moore J.W., Robertson N., Harris A.L. Efectele mutațiilor genelor ras și von Hippel-Lindau (VHL) asupra factorului inductibil de hipoxie (HIF)-1alfa, HIF-2alfa și expresiei factorului de creștere endotelial vascular și reglarea acestora de către fosfatidilinozitol 3"-
Calea de semnalizare a kinazei/Akt // Cancer Res. 2001. V. 61. Nr. 19. P. 7349-7355.
32. Donovan D., Harmey J.H., Toomey D., Osborne D.H., Redmond H.P., Bouchier-Hayes D.J. Reglarea TGF beta-1 a producției de VEGF de către celulele canceroase de sân // Ann. Surg. Oncol. 1997. V. 4. Nr. 8. P. 621-627.
33. de Jong J.S., van Diest P.J., van der Valk P., Baak J.P. Exprimarea factorilor de creștere, a factorilor de inhibare a creșterii și a receptorilor acestora în cancerul mamar invaziv. I: Un inventar în căutarea buclelor autocrine și paracrine // J. Pathol. 1998. V. 184. Nr. 1. P. 44-52.
34. de Jong J.S., van Diest P.J., van der Valk, P., Baak, J.P. Exprimarea factorilor de creștere, a factorilor de inhibare a creșterii și a receptorilor acestora în cancerul mamar invaziv. II: Corelaţii cu proliferarea şi angiogeneza // J. Pathol. 1998. V. 184. Nr. 1. P. 53-57.
35. De Jong J.S., van Diest P.J., van der Valk P., Baak J.P. Exprimarea factorilor de creștere, a receptorilor factorilor de creștere și a proteinelor legate de apoptoză în cancerul de sân invaziv: relație cu rata apoptotică // Breast Cancer Res. Trata. 2001. V. 66. Nr. 3. P. 201-208.
36. Hyder S.M., Stancel G.M. Reglarea VEGF în tractul reproducător de către hormonii steroizi sexuali // Histol. Histopatol. 2000. V. 15. Nr. 1. P. 325-234.
37. Ruohola J.K., Valve E.M., Karkkainen M.J., Joukov V., Alitalo K., Harkonen P.L. Factorii de creștere a endoteliului vascular sunt reglați diferențial de hormonii steroizi și antiestrogeni în celulele canceroase de sân // Mol. Endocrinol celular. 1999. V. 149. Nr. 1-2. P. 29-40.
38. Hyder S.M., Nawaz Z., Chiappetta C., Stancel G.M. Identificarea elementelor funcționale de răspuns la estrogen în gena care codifică factorul angiogenic puternic factor de creștere endotelial vascular // Cancer Res. 2000. V. 60. Nr. 12. P. 3183-3190.
39. Kurebayashi J., Kunisue H., Yamamoto S., Kurosumi M., Otsuki T., Sonoo H. Răspunsuri hormonale paradoxale ale celulelor de cancer de sân KPL-1 in vivo: un rol semnificativ al angiogenezei în creșterea tumorii // Oncologie. 2000. V. 59. Nr. 2. P. 158-165.
40. Hyder S.M., Murthy L., Stancel G.M. Reglarea progestativă a factorului de creștere a endoteliului vascular în celulele cancerului de sân uman // Cancer Res.
1998. V. 58. Nr. 3. P. 392-395.
41. Hyder S.M., Chiappetta C., Stancel G.M. Progestinele farmacologice și endogene induc expresia factorului de creștere endotelial vascular în celulele canceroase de sân umane // Int. J. Cancer. 2001. V. 92. Nr. 4. P. 469473.
42. Heer K., Kumar H., Speirs V., Greenman J., Drew P.J., Fox J.N., Carleton P.J., Monson J.R., Kerin M.J. Factorul de creștere a endoteliului vascular la femeile aflate în premenopauză – indicator al celui mai bun moment pentru operația de cancer mamar? // Br. J. Cancer. 1998. V. 78. Nr. 9. P. 1203-1207.
43. Greb R.R., Maier I., Wallwiener D., Kiesel L. Nivelurile de expresie a ARNm a factorului de creștere a endoteliului vascular A (VEGF-A) scad după menopauză în țesutul mamar normal, dar nu și în leziunile cancerului de sân // Br. J. Cancer. 1999. V. 81. Nr. 2. P. 225-231.
44. Skobe M., Hawighorst T., Jackson D.G., Prevo R., Janes L., Velasco P., Riccardi L., Alitalo K., Claffey K., DetmarM. Inducerea limfangiogenezei tumorale de către VEGF-C promovează metastaza cancerului de sân // Nat. Med. 2001. V. 7. Nr. 2. P. 192-198.
45. Kurebayashi J., Otsuki T., Kunisue H., Mikami Y., Tanaka K., Yamamoto S., Sonoo H. Expresia membrilor familiei factorului de creștere endotelial vascular (VEGF) în cancerul de sân // Jpn. J. Cancer Res. 1999. V. 90. Nr. 9. P. 977-981.
46. Valtola R., Salven P., Heikkila P., Taipale J., Joensuu H., Rehn M., Pihlajaniemi T., Weich H., deWaal R., Alitalo K. VEGFR-3 și ligandul său VEGF -C sunt asociate cu angiogeneza in cancerul de san // Am. J. Pathol. 1999. V. 154. Nr. 5. P. 1381-1390.
47. Ohhashi T. // Nippon Geka Gakkai Zasshi. 2001. V. 102. Nr. 6. P. 435-439.
48. Obermair A., Kucera E., Mayerhofer K., Speiser P., Seifert M., Czer-wenka K., Kaider A., Leodolter S., Kainz C., Zeillinger R. Creșterea endotelială vasculară factor (VEGF) în cancerul de sân uman: corelație cu supraviețuirea fără boală // Int. J. Cancer. 1997. V. 74. Nr. 4. P. 455458.
49. Relf M., LeJeune S., Scott P.A., Fox S., Smith K., Leek R., Moghaddam A., Whitehouse R., Bicknell R., Harris A.L. Exprimarea factorilor angiogenici factorul de creștere a celulelor endoteliale vasculare, factorul de creștere a fibroblastelor acid și bazic, factorul de creștere tumorală beta-1, factorul de creștere a celulelor endoteliale derivate din trombocite, factorul de creștere a placentei și pleiotrofina în cancerul mamar primar uman și relația sa cu angiogeneza // Cancer Res. 1997. V. 57. Nr. 5. P. 963-969.
50. Gasparini G., Toi M., Gion M., Verderio P., Dittadi R., Hanatani M., Matsubara I., Vinante O., Bonoldi E., Boracchi P., Gatti C., Suzuki H., Tominaga T. Semnificația prognostică a proteinei factorului de creștere endotelial vascular în carcinomul de sân cu nod negativ // J. Natl. Cancer Inst.
1997. V. 89. Nr. 2. P. 139-147.
51. Gasparini G., Toi M., Miceli R., Vermeulen P.B., Dittadi R., Bigan-zoli E., Morabito A., Fanelli M., Gatti C., Suzuki H., Tominaga T., Di-rix L.Y., Gion M. Relevanța clinică a factorului de creștere endotelial vascular și a timidin fosforilazei la pacienții cu sân cu ganglioni pozitivi
cancer tratat fie cu chimioterapie adjuvantă, fie cu terapie hormonală // Cancer J. Sci. A.m. 1999. V. 5. Nr. 2. P. 101-111.
52. Gasparini G. Valoarea prognostică a factorului de creștere endotelial vascular în cancerul de sân // Oncolog. 2000. V. 5. Suppl. 1. P. 37-44.
53. Gasparini G. Semnificația clinică a determinării markerilor surogat ai angiogenezei în cancerul de sân // Crit. Rev. Oncol. Hematol. 2001. V. 37. Nr. 2. P. 97-114.
54. Gasparini G., ToiM., Biganzoli E., Dittadi R., Fanelli M., Morabito A., Boracchi P., Gion M. Thrombospondin-1 and -2 in node-negative breast cancer: corelation with angiogenic factors, p53, catepsină D, receptori hormonali și prognostic // Oncologie. 2001. V. 60. Nr. 1. P. 72-
55. Linderholm B., Tavelin B., Grankvist K., Henriksson R. Factorul de creștere endotelial vascular (VEGF) prezice recidiva locală și supraviețuirea în cancerul de sân cu ganglioni negativi tratat cu radioterapie? // Br. J. Cancer.
1999. V. 81. Nr. 4. P. 727-732.
56. Linderholm B., Lindh B., Tavelin B., Grankvist K., Henriksson R. p53 și expresia factorului de creștere vascular-endotelial (VEGF) prezice rezultatul la 833 de pacienți cu carcinom mamar primar. J. Cancer.
2000. V. 89. Nr. 1. P. 51 -62.
57. Linderholm B., Grankvist K., Wilking N., Johansson M., Tavelin B., Henriksson R. Corelația conținutului factorului de creștere endotelial vascular cu recurențe, supraviețuire și primul loc de recidivă în carcinomul mamar primar cu ganglioni pozitivi după adjuvant tratament / / J. Clin. Oncol.
2000. V. 18. Nr. 7. P. 1423-1431.
58. Locopo N., Fanelli M., Gasparini G. Semnificația clinică a factorilor angiogenici în cancerul de sân // Breast Cancer Res. Trata. 1998. V. 52. Nr. 1-3. P. 159-173.
59. Eppenberger U., Kueng W., Schlaeppi J.M., Roesel J.L., Benz C., Mueller H., Matter A., Zuber M., Luescher K., Litschgi M., SchmittM., Foekens J.A., Eppenberger- Castori S. Markerii angiogenezei tumorale și proteolizei definesc în mod independent subseturile cu risc ridicat și scăzut de pacienți cu cancer de sân cu ganglioni negativi // J. Clin. Oncol. 1998. V. 16. Nr. 9. P. 3129-3136.
60. Coradini D., Boracchi P., Daidone M.G., Pellizzaro C., Miodini P., Ammatuna M., Tomasic G., Biganzoli E. Contribuția factorului de creștere endotelial vascular la indicele de prognostic Nottingham în cancerul de sân cu ganglioni negativi / / Br . J. Cancer. 2001. V. 85. Nr. 6. P. 795-797.
61. Foekens J.A., Peters H.A., Grebenchtchikov N., LookM.P., Meijer van Gelder M.E., Geurts Moespot A., van der Kwast T.H., Sweep C.G., Klijn J.G. Nivelurile tumorale ridicate ale factorului de creștere endotelial vascular prezic un răspuns slab la terapia sistemică în cancerul de sân avansat // Cancer Res. 2001. V. 61. Nr. 14. P. 5407-5414.
62. Yamamoto Y., Toi M., Kondo S., Matsumoto T., Suzuki H., Kitamu-raM., Tsuruta K., Taniguchi T., Okamoto A., Mori T., YoshidaM., Ike-da T. . ., Tominaga T. Concentraţiile factorului de creştere endotelial vascular în serurile martorilor normali şi pacienţilor cu cancer // Clin. Cancer Res. 1996. V. 2. Nr. 5. P. 821-826.
63. Dirix L.Y., Vermeulen P.B., Pawinski A., Prove A., Benoy I., De Pooter C., Martin M., Van Oosterom A.T. Niveluri crescute ale factorului de creștere a fibroblastelor de bază ale citokinelor angiogene și ale factorului de creștere a endoteliului vascular în serurile pacienților cu cancer // Br. J. Cancer. 1997. V. 76. Nr. 2. P. 238-243.
64. Salven P., Manpaa H., Orpana A., Alitalo K., Joensuu H. Serum vascular endothelial growth factor is often elevated in diseminated cancer // Clin. Cancer Res. 1997. V. 3. Nr. 5. P. 647-651.
65. Kraft A., Weindel K., Ochs A., Marth C., Zmija J., Schumacher P., Unger C., Marme D., Gastl G. Vascular endothelial growth factor in serurile și efuziunile pacienților cu malignitate și boala nemalignă // Cancer. 1999. V. 85. Nr. 1. P. 178-187.
66. Zebrowski B.K., Yano S., Liu W., Shaheen R.M., Hicklin D.J., Putnam J.B. Jr., Ellis L.M. Nivelurile factorului de creștere endotelial vascular și inducerea permeabilității în revărsările pleurale maligne // Clin. Cancer Res. 1999. V. 5. Nr. 11. P. 3364-3368.
67. Salven P., Perhoniemi V., Tykka H., Maenpaa H., Joensuu H. Nivelurile serice de VEGF la femeile cu o tumoare benignă de sân sau cancer de sân // Breast Cancer Res. Trata. 1999. V. 53. Nr. 2. P. 161-166.
68. Lee A.H., Dublin E.A., Bobrow L.G., Poulsom R. Carcinomul invaziv lobular și ductal invaziv al sânului prezintă modele distincte de expresie a factorului de creștere endotelial vascular și angiogeneză // J. Pathol.
1998. V. 185. Nr. 4. P. 394-401.
69. Callagy G., Dimitriadis E., Harmey J., Bouchier-Hayes D., Leader M., Kay E. Măsurarea imunohistochimică a factorului de creștere a endoteliului vascular tumoral în cancerul de sân. Un predictor mai fiabil al stadiului tumorii decât densitatea microvaselor sau factorul seric de creștere a endoteliului vascular // Appl. Imunohistochimie. Molecul. Morphol. 2000. V. 8. Nr. 2. P. 104-109.
70. Adams J., Carder P.J., Downey S., Forbes M.A., MacLennan K., Allgar V., Kaufman S., Hallam S., Bicknell R., Walker J.J., Cairnduff
F., Selby P.J., Perren T.J., Lansdown M., Banks R.E. Factorul de creștere a endoteliului vascular (VEGF) în cancerul de sân: comparație a VEGF în plasmă, ser și țesut și densitatea microvaselor și efectele tamoxifenului // Cancer Res. 2000. V. 60. Nr. 11. P. 2898-2905.
71. Harris A.L. Terapia antiangiogeneză și strategii de integrare a acesteia cu terapia adjuvantă // Rezultate recente Cancer Res. 1998. V. 152. P. 341-352.
72. Harris A.L., Zhang H., Moghaddam A., Fox S., Scott P., Pattison A., Gatter K., Stratford I., Bicknell R. Angiogeneza cancerului de sân — noi abordări ale terapiei prin antiangiogeneză, medicamente activate hipoxic , și țintirea vasculară // Breast Cancer Res. Trata. 1996. V. 38. Nr. 1. P. 97108.
73. Kerbel R.S., Viloria Petit A., Klement G., Rak J. Medicamente anti-angiogenice „accidentale”. inhibitori de transducție a semnalului direcționat anti-oncogene și agenți chimioterapeutici convenționali ca exemple // Eur. J. Cancer. 2000. V. 36. Nr. 10. P. 1248-1257.
74. Folkman J. Angiogenesis // Harrison’s Textbook of Internal Medicine, ed. a XV-a. /ed. de E. Braunwald, A.S. Fauci, D. L. Kasper, S.L. Hauser, D.L. Longo, J.L. Jameson. N. Y.: McGraw-Hill, 2001. P. 517-530.
75. Eisen T., Boshoff C., Mak I., Sapunar F., Vaughan M.M., Pyle L., Johnston S.R., Ahern R., Smith I.E., Gore M.E. Talidomidă în doză scăzută continuă: un studiu de fază II în cancerul avansat de melanom, celule renale, ovarian și de sân // Br. J. Cancer. 2000. V. 82. Nr. 4. P. 812-817.
76. Ziche M., Donnini S., Morbidelli L., Parenti A., Gasparini G., Ledda F. Linomide blochează angiogeneza prin transfectanți ai factorului de creștere endotelial vascular al carcinomului de sân // Br. J. Cancer. 1998. V. 77. Nr. 7. P. 11231129.
77. Asano M., Yukita A., Suzuki H. Spectru larg de activitate antitumorală a unui anticorp monoclonal neutralizant la factorul de creștere endotelial vascular uman // Jpn. J. Cancer Res. 1999. V. 90. Nr. 1. P. 93-100.
78. Borgstrom P., Gold D.P., Hillan K.J., Ferrara N. Importanța VEGF pentru angiogeneza cancerului de sân in vivo: implicații din microscopia intravitală a tratamentelor combinate cu un anticorp monoclonal neutralizant anti-VEGF și doxorubicină // Anticancer Res. 1999. V. 19. Nr 5B. p. 4203-4214.
79. Wedge S.R., Ogilvie D.J., DukesM., Kendrew J., Curwen J.O., Hennequin L.F., Thomas A.P., Stokes E.S., Curry B., Richmond G.H., Wadsworth P.F. ZD4190: un inhibitor activ oral al semnalizării factorului de creștere endotelial vascular cu eficacitate antitumorală cu spectru larg // Cancer Res. 2000. V. 60. Nr. 4. P. 970-975.
80. Ciardiello F., Caputo R., Bianco R. Damiano V., Fontanini G., Cuccato S., De Placido S., Bianco A.R., Tortora G. Inhibirea producției de factor de creștere și a angiogenezei în celulele canceroase umane de către ZD1839 ( Iressa), un inhibitor selectiv al receptorului factorului de creștere epidermică tirozin kinazei // Clin. Cancer Res. 2001. V. 7. Nr. 5. P. 1459-1465.
81. Kerbel R.S. Rezistența dobândită la efectul antitumoral al anticorpilor care blochează receptorul factorului de creștere epidermic in vivo: un rol pentru angiogeneza tumorală alterată. 2001. V. 61. Nr. 13. P. 5090-5101.
82. Klauber N., Parangi S., Flynn E., Hamel E., D'Amato R.J. Inhibarea angiogenezei și a cancerului de sân la șoareci de către inhibitorii de microtubuli 2-metoxiestradiol și taxol // Cancer Res. 1997. V. 57. Nr. 1. P. 81-86.
83. Lau D.H., Xue L., Young L.J., Burke P.A., Cheung A.T. Paclitaxel (Taxol): un inhibitor al angiogenezei într-un cancer de sân transgenic foarte vascularizat // Cancer Biother. Radiopharm. 1999. V. 14. Nr. 1. P. 31-36.
84. Lissoni P., Fugamalli E., Malugani F., Ardizzoia A., Secondino S., Tancini G., Gardani G.S. Chimioterapia și angiogeneza în cancerul avansat: declinul factorului de creștere endotelial vascular (VEGF) ca predictor al controlului bolii în timpul terapiei cu taxol în cancerul de sân metastatic // Int. J Biol. Markere. 2000. V. 15. Nr. 4. P. 308-311.
85. Ding I., Sun J.Z., Fenton B., Liu W.M., Kimsely P., Okunieff P., Min W. Administrarea intratumorală a plasmidei endostatin inhibă creșterea vasculară și perfuzia în carcinoamele mamare murine MCa-4. Cancer Res. 2001. V. 61. Nr. 2. P. 526-531.
86. Jm S.A., Kim J.S., Gomez Manzano C., Fueyo J., Liu T.J., Cho M.S., Seong C.M., Lee S.N., Hong Y.K., Yung W.K. Inhibarea creșterii cancerului de sân in vivo prin terapia genică antiangiogeneză cu VEGF antisens mediat de adenovirus // Br. J. Cancer. 2001. V. 84. Nr. 9. P. 12521257.
nocTynma b pegaKunro 16 Hoa6pa 2013
Gershtein E.S., Kushlinskiy D.N., Adamyan L.V., Ognerubov N.A. FACTOR DE CREȘTERE ENDOTELIAL VASCULAR-MARKER CLINIC VALOOS ÎN NEOPLASME MALIGNE
Rezultatele investigațiilor autorilor și cele mai reprezentative date din literatură care indică faptul că regulatorul cheie pozitiv al neoangiogenezei - factorul de creștere a endotelialului vascular (VEGF) - este un
factor de prognostic semnificativ clinic în diferite boli oncologice și ținte moleculare pentru mai multe medicamente moderne cu mecanisme de acțiune diferite sunt demonstrate. Rolul său ca factor serologic pentru diagnostic și monitorizare necesită investigații suplimentare.
Cuvinte cheie: VEGF; VEGF-R; angiogeneza; tumori; prognoză.
Gershtein Elena Sergeevna, Centrul de Cercetare Oncologică din Rusia, numit după. N.N. Blokhin RAMS, Moscova, Federația Rusă, doctor în științe biologice, profesor, cercetător principal la Laboratorul de biochimie clinică al Institutului de Cercetare în Oncologie Clinică, e-mail: [email protected]
Gerstein Elena Sergeyevna, N.N. Centrul științific oncologic rusesc Blokhin RAMS, Moscova, Federația Rusă, doctor în biologie, profesor, cercetător principal în domeniul biochimiei clinice al SRI al laboratorului de oncologie clinică, e-mail: [email protected]
Kushlinsky Dmitry Nikolaevich, Centrul Științific Rus de Obstetrică, Ginecologie și Perinatologie numit după. IN SI. Kulakova, Moscova, Federația Rusă, medic oncolog ginecolog, e-mail: [email protected]
Kushlinskiy Dmitriy Nikolayevich, Centrul de Cercetare pentru Obstetrică, Ginecologie și Perinatologie, numit după V.I. Kulakov, Moscova, Federația Rusă, medic oncolog ginecologic, e-mail: [email protected]
Adamyan Leila Vladimirovna, Centrul Științific Rus de Obstetrică, Ginecologie și Perinatologie, numit după.
IN SI. Kulakova, Moscova, Federația Rusă, Doctor în Științe Medicale, Profesor, Academician al Academiei Ruse de Științe Medicale, Adjunct. director, e-mail: [email protected]
Adamyan Leyla Vladimirovna, Centrul de Cercetare pentru Obstetrică, Ginecologie și Perinatologie, numit după V.I. Kulakov, Moscova, Federația Rusă, doctor în medicină, profesor, academician al RAMS, director adjunct, e-mail: [email protected]
Ognerubov Nikolay Alekseevici, Tambovsky Universitate de stat lor. G.R. Derzhavina, Tambov, Federația Rusă, doctor în științe medicale, profesor, șef. departamentul de oncologie, operatie chirurgicalași anatomie topografică, e-mail: [email protected]
Ognerubov Nikolay Alekseyevich, Universitatea de Stat Tambov numită după G.R. Derzhavin, Tambov, Federația Rusă, doctor în medicină, profesor, șef al Departamentului de Oncologie, Chirurgie Operativă și Anatomie Topografică, e-mail: [email protected]
Timp de 30 de ani, s-a sugerat că angiogeneza, procesul de formare a noilor vase de sânge, ar putea deveni o țintă importantă pentru terapia anticancer. Și abia recent această oportunitate a fost realizată. Datele clinice au demonstrat că medicamentul anticorp monoclonal umanizat bevacizumab, care vizează o moleculă proangiogenă cheie, factorul de creștere a endoteliului vascular (VEGF), poate prelungi viața pacienților cu cancer colorectal metastatic atunci când este administrat ca terapie de primă linie în combinație cu medicamente pentru chimioterapie. Aici discutăm funcțiile și semnificația VECF pentru a demonstra că VEGF este o țintă rezonabilă pentru terapia anticancer.
Ce este VEGF?
VEGF este unul dintre membrii unei familii de proteine înrudite structural care sunt liganzi pentru familia receptorilor VEGF. VEGF influențează dezvoltarea de noi vase de sânge (angiogeneza) și supraviețuirea vaselor de sânge imature (suport vascular) prin legarea și activarea a doi receptori membranari tirozin kinazei strâns legați (receptorul VEGF-1 și receptorul VEGF-2). Acești receptori sunt exprimați de celulele endoteliale din peretele vaselor de sânge (Tabelul 1). Legarea VEGF la acești receptori inițiază o cascadă de semnalizare care stimulează în cele din urmă creșterea, supraviețuirea și proliferarea celulelor endoteliale vasculare. Celulele endoteliale sunt implicate în procese atât de diverse precum vasoconstricția și vasodilatația, prezentarea antigenului și, de asemenea, servesc ca elemente foarte importante ale tuturor vaselor de sânge - atât capilare, cât și vene sau artere. Astfel, prin stimularea celulelor endoteliale, VEGF joacă un rol central în procesul de angiogeneză.
De ce este important să facem factorul de creștere a endoteliului vascular (VEGF uman)?
VEGF este extrem de important pentru formarea unui sistem vascular care funcționează adecvat în timpul embriogenezei și în perioada postnatală timpurie, dar la adulți activitatea sa fiziologică este limitată. Experimentele pe șoareci au arătat următoarele:
- Deteriorarea țintită a uneia sau două alele ale genei VEGF duce la moartea embrionului
- Inactivarea VEGF în timpul dezvoltării postnatale timpurii este, de asemenea, fatală
- Deteriorarea VEGF la șoarecii adulți nu este însoțită de anomalii evidente, deoarece rolul său este limitat la dezvoltarea foliculară, vindecarea rănilor și ciclul reproductiv la femele.
Importanța limitată a angiogenezei la adulți înseamnă că inhibarea activității VEGF reprezintă un scop terapeutic fezabil.
Deja în iulie poate apărea pe piață primul medicament rusesc de terapie genică pentru tratamentul ischemiei vasculare la nivelul picioarelor. În septembrie anul trecut, neovasculgen (cum se numește) a fost înregistrat la Roszdravnadzor. Este posibil ca în curând să fie oferit pentru achiziții publice. Compania de biotehnologie care a creat medicamentul, Human Stem Cell Institute, care dezvoltă și încearcă să promoveze medicamente și servicii „bazate pe tehnologii celulare, genice și post-genomice”, vorbește despre noul produs ca fiind o descoperire în știință. Cu toate acestea, mulți experți văd noul medicament în mod diferit, susținând că este vorba de fapt despre „confuzia pacientului”.
În discursul său din 3 iunie, directorul medical al Institutului de celule stem umane (HSCI), Roman Deev, a remarcat că în prezent sunt înregistrate în lume doar trei medicamente de terapie genică, dintre care unul este neovasculgen, iar în Europa acesta este în general primul medicament de terapie genică. „Din 1.500 de studii clinice în domeniul terapiei genice, aproximativ 20 au ca scop tratarea pacienților cu patologia vasculară, iar neovasculgenul și-a demonstrat deja eficacitatea, în timp ce unele medicamente au căzut din circulație”, a subliniat Deev. Se pare că producătorii autohtoni de medicamente au cu ce să fie mândri! Dar este noul medicament cu adevărat eficient și sigur și cât de mult va costa utilizarea sa pacienților?
În Societatea Specialiştilor Medicina bazată pe dovezi atrageți atenția asupra faptului că Institutul de celule stem umane nu este o instituție științifică, ci o organizație comercială.Medicamentul creat de geneticieni a fost testat în clinici din Yaroslavl, Ryazan și Moscova, prescris pentru formele inoperabile de ischemie cronică a picioarelor pacienților cu vârsta peste 40 de ani. S-au făcut două injecții. Medicii au dovezi că după administrarea medicamentului, pacientul ar putea merge fără durere nu 100 de metri ca înainte de injectare, ci până la 800 de metri.
Costul a două injecții este de aproximativ 100 de mii de ruble. „Mecanismul de acțiune al neovasculgenului se bazează pe principiul angiogenezei terapeutice”, a explicat directorul HSCI, Artur Isaev. – Medicamentul este o moleculă circulară de ADN care conține o regiune responsabilă pentru sinteza factorului de creștere endotelial vascular. Administrarea locală a medicamentului stimulează creșterea și dezvoltarea de noi vase de sânge.” Cercetătorii sunt încrezători că pentru mulți pacienți medicamentul poate deveni o alternativă la amputare. Procentul de „succes” al terapiei, potrivit profesorului R.E. Kalinin (Universitatea de Stat Medicală Ryazan), a fost de 93,6%.
În Rusia, sistemul de angioplastie și tratamentul vascular al vaselor de sânge nu a fost stabilit. Ceea ce este considerat „îngrijire de înaltă tehnologie” pentru prevenirea amputațiilor a devenit o practică de rutină în majoritatea țărilor în urmă cu mulți ani.
Lucrurile stau rău și în Rusia cu medicamentele. Cercetător principal la Institutul de Chirurgie numit după. Vishnevsky Leonid Blatun spune că, în ciuda disponibilității unguentelor și medicamentelor avansate, pacienții din clinicile din Federația Rusă „au într-adevăr acces doar la cele mai învechite mijloace”, deoarece mijloacele moderne nu sunt incluse în standardele de tratament.
Cât de sigur este neovasculgenul? Trebuie subliniat că atunci când o nouă genă este introdusă într-o celulă umană, pacientul poate prezenta riscuri de cancer. Acesta este motivul pentru care medicamentele cu acest mod de acțiune nu au primit aprobare anterior. „Teoria conform căreia un cercetător poate acționa asupra unui factor de creștere celulară, să-l stimuleze prin introducerea unui autogen care va produce creșterea proteinelor, este în general corectă”, spune Valentin Vlasov, directorul Institutului de Biologie Chimică și Medicină Fundamentală, Academician al Rusiei. Academia de Științe. - Adică cu ajutorul tehnologie genetică este luat un virus și eliberează gena necesară în celulă.
Pe această temă
Oamenii legii nu au inițiat un dosar penal împotriva locuinței moscovite Elena Bogolyubova, care a comandat prin poștă un medicament neînregistrat în Rusia pentru fiul ei bolnav de terminal.
„Sunt familiarizat cu proiectul Institutului de celule stem și cu medicamentul neovasculgen”, spune Valentin Vlasov. – În acest caz, nu se pune problema unui vector de virus. Nu exclud ca la foarte scurt timp de la injectare sa se produca sinteza proteinelor cu ajutorul acestui produs, si nu pare sa aduca ceva rau pacientului, ci daca aduce ceva bun, pentru a afirma acest lucru. , este nevoie de o bază de dovezi foarte serioasă "
Expertul a remarcat că este destul de dificil să trageți o astfel de concluzie din fotografiile furnizate: „Cum să le privim, cu ce rezoluție au fost luate razele X, cum au fost dezvoltate - totul depinde de conștiința cercetătorilor. Se pare că vasele mici se ramifică. Raportul despre medicament a fost pompos, dar pot spune că dacă un astfel de efect există, este foarte scurt în timp, poate dura doar câteva zile. Și nu există niciun motiv să ne așteptăm la un efect miraculos de la medicament.” Potrivit academicianului Vlasov, oamenii de știință trebuie să realizeze producția de proteine pe termen lung, iar acest lucru poate fi realizat doar prin „inserarea” genei dorite într-o celulă, dar cercetătorii nu au reușit încă să facă acest lucru în siguranță pentru pacient.
Chiar și jurnalul în care au fost publicate rezultatele studiului medicamentului neovasculgen pare să aparțină aceleiași companii. Potrivit experților, întrebările apar din graba în efectuarea studiilor clinice și lipsa de randomizare a acestora (un algoritm special pentru efectuarea acestora care exclude interesul pentru rezultate). Locul de administrare a medicamentului și descrierea acestuia – „construct plasmidic” – au ridicat îndoieli.
Drept urmare, experții au ajuns la concluzia că acesta poate fi un caz de „confuzie a consumatorilor”, deoarece vasele mari în care nu există flux sanguin nu sunt restabilite. Cercetătorii au promis beneficii pentru pacienți timp de doi ani, dar studiul a durat de fapt doar șase luni. Absența efectelor secundare declarate ale unui astfel de medicament este, de asemenea, suspectă, dorința oamenilor de știință de a găsi noi opțiuni de tratament nu este contestată. Dar toate acestea necesită de ani lungi căutări și dovezi semnificative înainte de utilizare.
Pacienții cu ischemie critică a extremităților inferioare în 20-50% din cazuri suferă așa-numitele amputații primare, dar doar puțin mai mult de jumătate dintre cei operați păstrează ambele picioare după un an. Fiecare a cincea persoană moare și în fiecare al patrulea caz se efectuează o „amputare majoră”. Evident, mulți pacienți vor sta literalmente la coadă pentru un leac miraculos. Printre aceștia va fi un număr mare de diabetici.
În Rusia, numărul pacienților cu diabet zaharat complicat de sindromul piciorului diabetic este de aproximativ 4 milioane de oameni. O astfel de complicație în jumătate din cazuri este principalul indicator al amputației. La aproape jumătate dintre pacienți, tratamentul pentru această complicație începe târziu. În același timp, în comparație cu țările europene, în Rusia se efectuează foarte puține operații endovasculare cu traumatism scăzut pe vasele picioarelor. Potrivit Universității Medicale de Stat din Rusia. N.I. Pirogov, în țările UE 8% din complicațiile vaselor periferice ale picioarelor se termină prin amputare, în timp ce în Rusia această cifră este semnificativ mai mare, iar în diabetul zaharat ajunge la peste 50%. Potrivit președintelui Academiei Ruse de Științe Medicale, directorul Centrului de Cercetare Endocrinologică al Ministerului Sănătății și Dezvoltării Sociale Ivan Dedov, aproximativ 8-10% dintre pacienții cu diabet sunt afectați de sindromul piciorului diabetic și până la 50% dintre ele pot fi clasificate ca fiind expuse riscului. După amputații, rata mortalității pacienților se dublează, dar dacă astfel de pacienți nu sunt operați, vor muri de cangrenă în termen de doi ani.
În timpul intervențiilor chirurgicale la pacienții cu diabet zaharat de tip 2
În diabetul de tip 2 există un dezechilibru în angiogeneză. Diabetul se caracterizează prin hiperglicemie și diverse tulburări metabolice. Ele perturbă echilibrul dintre regulatorii proangiogenici și antiangiogenici și conduc la formarea inadecvată de noi vase în diabetul zaharat (DM). La rândul lor, tulburările de angiogeneză și vasculogeneză sunt mecanisme importante în dezvoltare complicatii vasculare SD. Astfel, dezvoltarea complicațiilor macrovasculare este însoțită de suprimarea intensității angiogenezei și vasculogenezei.
În diabetul zaharat (DM) slab controlat, procesul de vindecare a țesuturilor moi este încetinit. În acest caz, unul dintre factori este scăderea nivelului factorilor locali de creștere, ceea ce limitează posibilitatea formării țesutului gingival moale ca parte a intervenției chirurgicale cu implant. De asemenea, s-a dovedit că la pacienții cu diabet zaharat, cantitatea de colagen produsă de fibroblaste este redusă, ceea ce duce la o încetinire a contracției plăgii. Deteriorarea metabolismului carbohidraților implică o creștere a metaloproteazelor de matrice (MMP) și o scădere a oxidului nitric (NO), factorul de creștere transformator beta 1 (TGFβ1), ceea ce determină o încetinire a formării ECM. Studiile clinice arată că în diabetul zaharat, dezechilibrul angiogenezei poate fi realizat atât folosind inhibitori de angiogeneză, cât și stimulatori ai săi. Stimularea angiogenezei și vasculogenezei cu ajutorul celulelor stem și a factorilor de creștere este o direcție promițătoare pentru tratamentul insuficienței agnogenezei în diabetul zaharat, care afectează reducerea procesului de vindecare a țesuturilor moi și formarea macroagniopatiei.
Ținând cont de cele de mai sus, în perioada postoperatorie La pacienții cu diabet, pare promițător să stimuleze procesul de angiogeneză folosind citotine și factor de creștere endotelial vascular.
Se știe că factorul de creștere a endoteliului vascular și citotina stimulează angiogeneza și astfel cresc saturația tisulară în oxigen (pO2), care este unul dintre factorii pentru repararea țesuturilor moi. O scădere a nivelului acestui factor de creștere duce la o încetinire a procesului de epitelizare. Rezultatele cercetărilor arată că factorii de creștere și citokinele au o influență decisivă asupra vitezei și calității proceselor reparatorii la pacienții cu diabet zaharat.
Deci, în stomatologie, atunci când creșteți țesutul gingival, operațiile implantologice, puteți utiliza membrane de colagen saturate cu factor de creștere endotelial vascular sau puteți efectua procedura „Plasmodent”, bazată pe introducerea de plasmă bogată în trombocite prelevată din sângele pacientului. O astfel de plasmă conține factori de creștere și este un stimulator al procesului de angiogeneză. În prezent, operațiile implantologice se efectuează la pacienții cu diabet zaharat doar când nivelul hemoglobinei glicate este mai mic de 6,0. Acest indicator se realizează prin transferul temporar al pacientului la injecții cu insulină în timpul operației și în perioada postoperatorie. Cu toate acestea, în diabetul de tip 2 pacientul are hiperinsulinemie din cauza rezistenței la insulină. Este posibil ca utilizarea factorului de creștere endotelial vascular pentru stimularea procesului de reparare a țesuturilor moi să permită deplasarea indicatorului hemoglobinei glicate la valori mai mari, compensând tulburările de agnogeneză din hiperglicemie cu factorul de creștere a endoteliului vascular. Se pare că procedura de administrare a plasmei bogate în trombocite poate fi utilizată în orice procedură chirurgicală pentru pacienții cu diabet.
