Duhoarea gropilor și a gropilor de gunoi, a resturilor organice putrezite - toate acestea provoacă un sentiment persistent de dezgust în oameni. Dar când prima reacție trece și bunul simț începe, se înțelege că acesta este un proces obligatoriu al vieții. În spatele oricărei putreziri poți vedea o nouă viață apărând. Acesta este ciclul etern al substanțelor din natură. Și oricât de diverse sunt organismele vii de pe planetă, este surprinzător că singurele care sunt responsabile de descompunere sunt bacteriile putrezite.
Ce se descompune
Procesele de descompunere reprezintă întreaga gamă de reacții în urma cărora substanțele complexe sunt descompuse în altele mai simple și mai persistente. Procesul de degradare (amonificare) este descompunerea substanțelor organice care conțin azot și sulf în molecule simple. Un proces similar - fermentația - este descompunerea substanțelor organice fără azot - zaharuri sau carbohidrați. Ambele procese sunt efectuate de microorganisme. Elucidarea mecanismului acestor procese a început cu experimentele lui Louis Pasteur (1822-1895). Dacă ne uităm la bacteriile putrezite exclusiv din punct de vedere chimic, vom vedea că cauzele acestor procese sunt instabilitatea compușilor organici, iar microorganismele acționează doar ca agenți cauzali ai reacțiilor chimice. Dar, deoarece proteinele, sângele și animalele suferă diferite tipuri de degradare sub influența bacteriilor, rolul dominant al microorganismelor este incontestabil.
Studiul subiectului continuă
Putregaiul are o mare importanță atât în economia naturii, cât și în activitatea umană: de la producția tehnică până la dezvoltarea bolilor. Bacterologia aplicată s-a născut cu doar aproximativ 50 de ani în urmă, iar dificultățile de studiu sunt și astăzi enorme. Dar perspectivele sunt enorme:
Cine sunt acești distrugători?
Bacteriile sunt un întreg regn de organisme procariote unicelulare (fără nucleu), care numără aproximativ 10 mii de specii. Dar acestea ne sunt cunoscute și, în general, se presupune că există mai mult de un milion de specii. Au apărut pe planetă cu mult înaintea noastră (cu 3-4 milioane de ani), au fost primii săi locuitori și, în mare măsură, datorită lor, Pământul a devenit potrivit pentru dezvoltarea altor forme de viață. Pentru prima dată, naturalistul olandez Antonie van Leeuwenhoek a văzut „animalcule” printr-un microscop pe care l-a făcut cu propriile sale mâini în 1676. Abia în 1828 și-au primit numele datorită lucrării lui Christian Ehrenberg. Dezvoltarea tehnologiei de mărire a permis lui Louis Pasteur în 1850 să descrie fiziologia și metabolismul bacteriilor de putrefacție și fermentație, inclusiv a celor patogene. A fost Pasteur, inventatorul vaccinului împotriva antraxului și a rabiei, care este considerat fondatorul bacteriologiei - știința bacteriilor. Al doilea bacteriolog remarcabil este medicul german Robert Koch (1843-1910), care a descoperit Vibrio holera și bacilul tuberculozei.
Atât de simplu și atât de complex
Forma bacteriilor poate fi sferică (coci), tije drepte (bacil), curbată (vibrio), spirală (spirila). Se pot uni - diplococi (doi coci), streptococi (lanț de coci), stafilococi (cluster de coci). Peretele celular al mureinei (un polizaharid combinat cu aminoacizi) dă formă corpului și protejează conținutul celulei. Membrana celulară formată din fosfolipide poate fi invaginată și conține complexe de organe de mișcare (flagela). Celulele nu au nucleu, dar citoplasma conține ribozomi și ADN circular (plasmide). Nu există organele, iar funcțiile mitocondriilor și cloroplastelor sunt îndeplinite de mezosomi - proeminențe membranare. Unele au vacuole: vacuolele gazoase îndeplinesc funcția de deplasare prin coloana de apă, în timp ce vacuolele de stocare conțin glicogen sau amidon, grăsimi și polifosfați.
Cum mănâncă ei
După tipul de nutriție, bacteriile sunt autotrofe (sintetizează ei înșiși substanțele organice) și heterotrofe (consumă substanțe organice gata preparate). Autotrofele pot fi fotosintetice (verzi și violete) și chemosintetice (nitrifiante, bacterii sulfuroase, bacterii de fier). Heterotrofele sunt saprotrofe (utilizați deșeuri, resturi moarte de animale și plante) și simbioți (utilizați materie organică a organismelor vii). Putrerea și fermentarea sunt efectuate de bacterii saprotrofe. Pentru a desfășura metabolismul, unele bacterii necesită oxigen (aerobi), în timp ce altele nu au nevoie de acesta (anaerobe).
Armata noastră este nenumărată
Bacteriile trăiesc peste tot. Literalmente. În fiecare picătură de apă, în fiecare băltoacă, pe pietre, în aer și sol. Să enumerăm doar câteva grupuri:
Conditii optime
Putrerea necesită anumite condiții și privarea bacteriilor de aceste condiții este cea care stă la baza gătirii noastre (sterilizare, pasteurizare, conserve și așa mai departe). Pentru un proces intensiv de degradare este necesar:
- Prezența bacteriilor în sine.
- Conditii externe - mediu umed, temperatura +30-40 °C.
Sunt posibile diverse opțiuni. Dar apa este un atribut integral al hidrolizei substanțelor organice. Și enzimele funcționează numai într-un anumit regim de temperatură.
Principalii amoniificatori
Bacteriile putrezite, care trăiesc în solul pământului, sunt cel mai comun grup de procariote. Ele joacă un rol important în ciclul azotului și returnează mineralele în sol (mineralizează) atât de necesare plantelor pentru procesele de fotosinteză. Forma bacteriilor, relația lor cu prezența oxigenului și metodele lor de hrănire sunt variate. Principalii reprezentanți ai acestui grup sunt clostridiile formatoare de spori, bacilii și enterobacterii care nu formează spori.
Etape de descompunere organică
Etapele de descompunere a substanțelor organice de către bacteriile putrezite sunt destul de complexe din punct de vedere chimic. În general, acest proces se realizează după cum urmează:
Bacillus subtilis
Cea mai studiată bacterie este Bacillus subtilis, un amonifiant foarte eficient. Doar Escherichia coli, simbiotul nostru intestinal, a fost studiat mai bine decât acesta. Bacillus subtilis este o bacterie aerobă de degradare. Pe suprafața sa se află catalizatori enzimatici de protează produși de bacterie și folosiți pentru obținerea energiei vitale. Proteazele intră în reacții de hidroliză cu proteinele din mediu și le distrug legăturile peptidice, eliberând începutul lanțurilor mari de aminoacizi, iar apoi din ce în ce mai mici. Tot ceea ce are nevoie intră în celulă, iar ceea ce nu are nevoie este dat. Și rămân substanțe toxice - hidrogen sulfurat și amoniac. Din cauza acestor gaze, habitatele bastoanelor de fân miros atât de neplăcut.
Vecinii nostri
În intestinele noastre trăiesc aproximativ 50 de trilioane de microorganisme diferite, adică aproximativ două kilograme. Și acesta este de 1,5 ori mai mult decât numărul total de celule din întregul corp uman. Și cine este maestrul aici și cine este simbiotul? Aceasta este, desigur, o glumă. Dar printre această varietate de vecini există și bacterii putrezite. Beneficiile și daunele aduse organismului de la acestea depind de cantitatea și patogenitatea lor. Până la patruzeci de mii de bacterii trăiesc în cavitatea noastră bucală. Lactobacilii, unii streptococi și sarcina pot rezista mediului acid din stomacul nostru. Sucul pancreatic cu enzime digestive agresive (lipaze și amilaze) este secretat în duoden și îl face aproape complet steril.
Mediul din intestinul subțire și gros este alcalin; întreaga masă de microfloră este concentrată aici. Aici bacteriile ne ajută să absorbim vitaminele (bifidobacterii), să sintetizăm vitaminele (K și B) și să suprimăm flora patogenă (Escherichia coli), să descompună amidonul și celuloza, proteinele și grăsimile (bacteriile amonifiante), iar aceasta nu este întreaga listă. a funcţiilor utile ale vecinilor noştri. Fiecare persoană excretă aproximativ 18 miliarde de bacterii în scaun, ceea ce este mai mult decât există oameni pe întreaga planetă. Dar aceleași bacterii pot provoca, în anumite condiții, boli. De aceea mulți dintre ei sunt considerați oportuniști.
Importanța bacteriilor putrezite
Primele organisme vii ale acestei planete, cele mai eficiente în ocuparea tuturor nișelor ecologice existente pe planeta Pământ, sunt bacteriile. Ele mineralizează solul, făcându-l fertil. Readuceți substanțele anorganice în ciclu. Ei aruncă cadavrele și deșeurile tuturor organismelor vii de pe planetă. Oferiți omenirii resurse naturale. Ne ușurează viața și ajută la absorbția componentelor alimentare. Această listă poate fi continuată mult timp. Desigur, semnificația negativă a bacteriilor putrefactive este de asemenea mare. Dar natura știa ce face și sarcina noastră pe această planetă este să nu perturbăm echilibrul fragil la care a ajuns lumea din jurul nostru în aceste aproape patru milioane de ani.
În procesul de metabolism, microorganismele nu numai că sintetizează substanțe proteice complexe din propria lor citoplasmă, ci și distrug profund compușii proteici ai substratului. Procesul de mineralizare a substanțelor proteice organice de către microorganisme, care are loc odată cu eliberarea de amoniac sau formarea de săruri de amoniu, se numește în microbiologie putrezire sau amonificare a proteinelor.
Astfel, într-un sens strict microbiologic, putrezirea este mineralizarea proteinelor organice, deși în viața de zi cu zi „putrezirea” se referă la o serie de procese diferite care au similitudini pur aleatorii, incluzând în acest concept alterarea produselor alimentare (carne, pește, ouă, fructe, legume) și descompunerea cadavrelor de animale și plante și diferite procese care apar în gunoi de grajd, deșeuri vegetale etc.
Ammonificarea proteinelor este un proces complex în mai multe etape. Esența sa internă constă în transformările energetice ale aminoacizilor de către microorganisme folosind scheletul lor de carbon în sinteza compușilor citoplasmatici. În condiții naturale, descompunerea substanțelor bogate în proteine de origine vegetală și animală, excitate de diferite bacterii, mucegaiuri și actinomicete, se desfășoară extrem de ușor atât cu acces larg de aer, cât și în condiții de anaerobioză completă. În acest sens, chimia de descompunere a substanțelor proteice și natura produșilor de descompunere rezultați pot varia foarte mult în funcție de tipul de microorganism, natura chimică a proteinei și condițiile procesului: aerare, umiditate, temperatură.
Odată cu accesul aerului, de exemplu, procesul de degradare decurge foarte intens, până la mineralizarea completă a substanțelor proteice - se formează amoniac și chiar azot parțial elementar, se formează fie metan, fie dioxid de carbon, precum și hidrogen sulfurat și fosfor. săruri acide. În condiții anaerobe, de regulă, nu are loc mineralizarea completă a proteinelor, iar unele dintre produsele de degradare (intermediare) rezultate, care au de obicei un miros neplăcut, sunt reținute în substrat, dându-i un miros rău de putregai.
Temperatura scăzută previne amonificarea proteinelor. În straturile de permafrost ale pământului din Nordul Îndepărtat, de exemplu, s-au găsit cadavre de mamuți care zacuseră de zeci de mii de ani, dar nu suferiseră descompunere.
În funcție de proprietățile individuale ale microorganismelor - agenții cauzatori ai degradarii - are loc fie o dezintegrare superficială a moleculei proteice, fie divizarea ei profundă (mineralizarea completă). Dar există și microorganisme care participă la descompunere numai după ce produsele de hidroliză a substanțelor proteice apar în substrat ca urmare a activității vitale a altor microbi. De fapt, „putrefactivi” sunt acei microbi care stimulează descompunerea profundă a substanțelor proteice, determinând mineralizarea lor completă.
Substanțele proteice nu pot fi absorbite direct de celula microbiană în timpul nutriției. Structura coloidală a proteinelor împiedică intrarea lor în celulă prin membrana celulară. Numai după scindarea hidrolitică, produsele mai simple ale hidrolizei proteinelor pătrund în celula microbiană și sunt utilizate de aceasta în sinteza substanței celulare. Astfel, hidroliza proteinelor are loc în afara corpului microbian. În acest scop, microbul secretă exoenzime proteolitice (proteinaze) în substrat. Această metodă de nutriție determină descompunerea unor mase uriașe de substanțe proteice în substraturi, în timp ce în interiorul celulei microbiene doar o parte relativ mică din produsele de hidroliză proteică este transformată în formă proteică. Procesul de descompunere a substanțelor proteice în acest caz prevalează în mare măsură asupra procesului de sinteză a acestora. Din acest motiv, rolul biologic general al microbilor putrefactivi ca agenți de descompunere a substanțelor proteice este enorm.
Mecanismul de mineralizare a unei molecule de proteine complexe de către microbi putrefactiv poate fi reprezentat de următorul lanț de transformări chimice:
I. Hidroliza unei molecule mari de proteine la albumoze, peptone, polipeptide, dipeptide.
II. Hidroliza continuă și mai profundă a produselor de descompunere a proteinelor în aminoacizi.
III. Transformări ale aminoacizilor sub acțiunea enzimelor microbiene. Varietatea de aminoacizi și enzime prezente în complexul enzimatic al diferiților microbi, anumite condiții ale procesului, determină și diversitatea chimică extremă a produselor de transformare a aminoacizilor.
Astfel, aminoacizii pot suferi decarboxilare, dezaminare, atât oxidativă, cât și reductivă și hidrolitică. Carboxilaza viguroasă determină decarboxilarea aminoacizilor pentru a forma amine sau diamine volatile, care au un miros greață. Din aminoacidul lizină se formează cadaverină, din aminoacidul ornitină, putrescină:
Cadaverina și putrescina sunt numite „otrăvuri cadaverice” sau ptomaine (de la grecescul ptoma - cadavru, carăv). Anterior, se credea că ptomainele, care apar din descompunerea proteinelor, provoacă toxiinfecții alimentare. Cu toate acestea, acum s-a descoperit că nu ptomainele în sine sunt otrăvitoare, ci derivații lor însoțitori - neurină, muscarină, precum și unele substanțe de natură chimică necunoscută.
În timpul dezaminării, o grupare amino (NH2) este îndepărtată din aminoacizi, din care se formează amoniacul. Reacția substratului devine alcalină. În timpul dezaminării oxidative, pe lângă amoniac, se formează și acizi cetonici:
În timpul dezaminării reductive, apar acizi grași saturați:
Dezaminarea hidrolitică și decarboxilarea duc la formarea de alcooli:
În plus, pot fi formate și hidrocarburi (de exemplu, metan), acizi grași nesaturați și hidrogen.
Aminoacizii aromatici în condiții anaerobe produc produse de degradare urât mirositoare: fenol, indol, skatol. Indolul și skatolul se formează de obicei din triptofan. Din aminoacizii care conțin sulf, în condiții aerobe de degradare, apar hidrogen sulfurat sau mercaptani, care au și un miros neplăcut de ouă putrezite. Proteinele complexe - nucleoproteine - se descompun în acizi nucleici și proteine, care la rândul lor sunt descompuse. Acizii nucleici, atunci când sunt degradați, produc acid fosforic, riboză, dezoxiriboză și baze organice azotate. În fiecare caz specific, pot apărea doar o parte din transformările chimice indicate, și nu întregul ciclu.
Apariția amoniacului, aminelor și a altor produse de descompunere a aminoacizilor în alimente bogate în proteine (cum ar fi carnea sau peștele) este un indicator al alterarii microbiene.
Microorganismele care stimulează amonificarea substanțelor proteice sunt foarte răspândite în natură. Ele se găsesc peste tot: în sol, în apă, în aer - și sunt reprezentate în forme extrem de diverse - aerobe și anaerobe, anaerobe facultative, sporiforme și nesporante.
Microorganisme aerobe putrefactive
Bacillus subtilis (Fig. 35) este un bacil aerob larg răspândit în natură, izolat de obicei din fân, o tijă foarte mobilă (3-5 x 0,6 µm) cu cordon peritrichial. Dacă cultivarea se efectuează în medii lichide (de exemplu, în decoct de fân), atunci celulele bacilului devin oarecum mai mari și sunt conectate în lanțuri lungi, formând o peliculă șifonată și uscată argintiu-albicioasă pe suprafața lichidului. La dezvoltarea pe medii solide care conțin carbohidrați, se formează o colonie fin șifonată, uscată sau granulară, fuzionată cu substratul. Pe feliile de cartofi, coloniile de Bacillus subtilis sunt întotdeauna ușor șifonate, incolore sau ușor rozalii, amintesc de o acoperire catifelată.
Bacillus subtilis se dezvoltă într-un interval de temperatură foarte larg, fiind practic cosmopolit. Dar, în general, se crede că cea mai bună temperatură pentru dezvoltarea sa este de 37-50 °C. Sporii Bacillus subtilis sunt ovali, situati excentric, fara localizare stricta (dar totusi in multe cazuri mai aproape de centrul celulei). Germinarea sporilor este ecuatorială. Gram-pozitiv, descompune carbohidrații pentru a forma acetonă și acetaldehidă și are o capacitate proteolitică foarte mare. Sporii de Bacillus subtilis sunt foarte rezistenți la căldură - se păstrează adesea în conserve, sterilizate la 120°C.
Bacilul cartofului (Bac. mesentericus) (Fig. 36) nu este mai puțin răspândit în natură decât fânul. De obicei, bețișoarele de cartofi se găsesc pe cartofi, ajungând aici din sol.
Din punct de vedere morfologic, bacilul cartofului este foarte asemănător cu subtilajul: celulele acestuia (3-10 x 0,5-0,6 µm) au un cordon peritric; Sunt atât singure, cât și conectate într-un lanț. Sporii de bacil de cartofi, ca și bacilul de fân, sunt ovali, uneori alungiți, mari; sunt localizate în orice parte a celulei (dar mai des central). Când se formează sporii, celula nu se umflă; sporii germinează ecuatorial.
Când este cultivat pe felii de cartofi, bețișonul de cartofi formează un înveliș strălucitor, pliat, umed, abundent, maro-gălbui, care amintește de un mezenter, așa cum își ia numele microbul. Pe mediul de agar proteic formează colonii subțiri, uscate și ridate care nu cresc împreună cu substratul.
Potrivit lui Gram, batonul de cartofi se patează pozitiv. Temperatura optimă de dezvoltare, ca și cea a Bacillus subtilis, este de 35-45 °C. Când proteinele se descompun, produc multă hidrogen sulfurat. Sporii de bacil de cartofi sunt foarte rezistenți la căldură și, ca și sporii de Bacillus subtilis, pot rezista la fierbere prelungită, fiind adesea conservați în conserve.
Bac. Cereus. Acestea sunt tije (3-5 x 1-1,5 microni) cu capete drepte, simple sau conectate în lanțuri complicate. Există și opțiuni cu celule mai scurte. Citoplasma celulelor este vizibil granulară sau vacuolată, iar la capetele celulelor se formează adesea boabe strălucitoare asemănătoare grăsimii. Celulele bacilului sunt mobile, cu cordon peritrichial. Te contestă. cereus formează oval sau elipsoid, de obicei situat central și crescând polar. Când se dezvoltă pe MPA (agar peptonă de carne), bacilul formează colonii mari compacte cu un centru pliat și margini ondulate rizoide. Uneori, coloniile sunt mici-buloase, cu margini franjuri și excrescențe flagelate, cu granule caracteristice care refractează lumina. Bac. cereus este un aerob. Cu toate acestea, în unele cazuri se dezvoltă și atunci când accesul la oxigen este dificil. Acest bacil se găsește în sol, apă și substraturi vegetale. Lichefiază gelatina, peptonizează laptele și hidrolizează amidonul. Temperatura optimă pentru dezvoltarea Bac. cereus 30 °C, maxim 37-48 °C. Când este dezvoltat în bulion de carne-peptonă, formează un nor abundent, omogen, cu un sediment moale care se dezintegrează ușor și o peliculă delicată la suprafață.
Printre alți microbi putrefactiv aerobi, putem remarca bastonul de pământ (Bac. mycoides), Bac. megatherium, precum și bacterii pigmentare fără spori - „tija minunată” (Bact. prodigiosum), Pseudomonas fluorescens.
Bacilul de pământ (Bac. mycoides) (Fig. 37) este unul dintre bacilii putrefactivi ai solului foarte comun, are celule unice destul de mari (5-7 x 0,8-1,2 microni) sau celule conectate în lanțuri lungi. Pe medii solide, batonul de pământ formează colonii foarte caracteristice - pufoase, rizoide sau miceliale, răspândite pe suprafața mediului, ca miceliul ciupercilor. Pentru această asemănare, bacilul a primit denumirea de Bac. mycoides, care înseamnă „în formă de ciupercă”.
Bac. megaterium este un bacil mare, motiv pentru care și-a primit numele, adică „animal mare”. Se găsește constant în sol și pe suprafața materialelor putrezite. Celulele tinere sunt de obicei groase - până la 2 microni în diametru, cu o lungime de 3,5 până la 7 microni. Conținutul celulelor are granulație grosieră, cu un număr mare de incluziuni mari de substanțe asemănătoare grăsimii sau glicogenului. Adesea incluziunile umplu aproape întreaga celulă, dându-i o structură foarte caracteristică, prin care această specie este ușor de recunoscut. Coloniile de pe mediul de agar sunt netede, aproape albe și strălucitoare grase. Marginile coloniei sunt tăiate ascuțit, uneori cu franjuri ondulate.
Bacteria pigmentară Pseudomonas fluorescens este o tijă mică (1-2 x 0,6 µm), gram-negativă, nepurtă de spori, mobilă, cu cordon lofotrihial. Bacteria produce un pigment fluorescent galben-verzui, care, pătrunzând în substrat, îl colorează în galben-verde.
Bacteria pigmentară Bacterium prodigiosum (Fig. 38) este cunoscută pe scară largă sub denumirea de „bețișor minunat” sau „beton de sânge minunat”. O tijă mobilă foarte mică, gram-negativă, fără spori, cu cordon peritrichial. Când se dezvoltă pe medii de agar și gelatină, formează colonii de culoare roșu închis cu un luciu metalic, care amintește de picăturile de sânge.
Apariția unor astfel de colonii pe pâine și cartofi în Evul Mediu a provocat groază superstițioasă în rândul oamenilor religioși și a fost asociată cu intrigile „ereticilor” și „obsesie diavolească”. Din cauza acestei bacterii inofensive, Sfânta Inchiziție a ars pe rug mai mult de o mie de oameni complet nevinovați.
Bacteriile anaerobe facultative
Proteus stick, sau proteus vulgaris (Proteus vulgaris) (Fig. 39). Acest microb este unul dintre cei mai tipici agenți patogeni ai substanțelor proteice putrezite. Se găsește adesea pe carnea putrezită spontan, în intestinele animalelor și ale oamenilor, în apă, în sol etc. Celulele acestei bacterii sunt foarte polimorfe. În culturile vechi de o zi în bulion de carne-peptonă, acestea sunt mici (1-3 x 0,5 µm), cu un număr mare de flageli peritrichiali. Apoi încep să apară celule filamentoase contorte, atingând o lungime de 10-20 microni sau mai mult. Datorită unei astfel de diversități în structura morfologică a celulelor, bacteria a primit numele zeului mării Proteus, căruia mitologia greacă antică i-a atribuit capacitatea de a-și schimba imaginea și de a se transforma după bunul plac în diverse animale și monștri.
Atât celulele Proteus mici, cât și cele mari au o mișcare puternică. Acest lucru conferă coloniilor bacteriene de pe medii solide caracteristica caracteristică „roirii”. Procesul de „roire” constă în faptul că celulele individuale ies din colonie, alunecă de-a lungul suprafeței substratului și se opresc la o anumită distanță de acesta, se înmulțesc, dând naștere unei noi creșteri. Rezultatul este o masă de mici colonii albicioase, abia vizibile cu ochiul liber. Celulele noi se separă din nou de aceste colonii și formează noi centre de reproducere, etc., în partea mediului liberă de placă microbiană.
Proteus vulgaris este un microb gram-negativ. Temperatura optimă pentru dezvoltarea sa este de 25-37°C. La o temperatură de aproximativ 5 °C se oprește din creștere. Capacitatea proteolitică a lui Proteus este foarte mare: descompune proteinele cu formarea de indol și hidrogen sulfurat, provocând o schimbare bruscă a acidității mediului - mediul devine extrem de alcalin. Când se dezvoltă pe medii de carbohidrați, Proteus produce o mulțime de gaze (CO2 și H2).
În condiții de acces moderat la aer, atunci când se dezvoltă pe medii peptonice, E. coli (Escherichia coli) are o anumită capacitate proteolitică. Aceasta se caracterizează prin formarea indolului. Dar E. coli nu este un microorganism putrefactiv tipic și, în medii de carbohidrați în condiții anaerobe, provoacă fermentație atipică a acidului lactic cu formarea acidului lactic și a unui număr de produse secundare.
Microorganisme anaerobe putrefactive
Clostridium putrificum (Fig. 40) este un agent cauzal energetic al descompunerii anaerobe a substanțelor proteice, efectuând această defalcare cu eliberare abundentă de gaze - amoniac și hidrogen sulfurat. Cl. putricum se găsește destul de des în sol, apă, în cavitatea bucală, în intestinele animalelor și pe diferite alimente putrezite. Uneori poate fi găsit în conserve. Cl. putrificum - tije mobile cu cordon peritrichial, alungite si subtiri (7-9 x 0,4-0,7 µm). Există și celule mai lungi, conectate în lanțuri și simple. Temperatura optimă pentru dezvoltarea clostridiilor este de 37 °C. Dezvoltându-se în profunzimea agarului peptonă-carne, formează colonii fulgioase, libere. Sporii sunt sferici și localizați terminal. Când apare sporularea, celula se umflă foarte mult la locul sporului. Celulele purtătoare de spori Cl. putrificum seamănă cu celulele purtătoare de spori ale bacilului botulismului.
Rezistența la căldură a Cl. putricum este destul de mare. Dacă sporii nu sunt distruși în timpul producției de conserve, la depozitarea produselor finite într-un depozit, aceștia se pot dezvolta și pot provoca alterarea (bombardament microbiologic) a conservelor. Proprietățile zaharolitice ale Cl. putricum nu are.
Clostridium sporogenes (Fig. 41) - după caracteristicile morfologice, este o tijă destul de mare cu capete rotunjite, formând ușor lanțuri. Microbul este foarte mobil datorită flagelilor săi peritrichiali. Denumirea Clostridium sporogenes, dată de I.I. Mechnikov (1908), caracterizează capacitatea acestui microb de a forma rapid spori. După 24 de ore, multe tije și spori liberi pot fi observați la microscop. După 72 de ore, procesul de sporulare se încheie și nu mai rămân forme vegetative. Microbul formează spori ovali, situați central sau mai aproape de unul dintre capetele bastonului (subterminal). Nu formează capsule. Dezvoltarea optimă este de 37 °C.
Cl. sporogenes - anaerobe. Nu are proprietăți toxice sau patogene. În condiții anaerobe pe medii de agar, formează colonii superficiale, mici, de formă neregulată, care sunt inițial transparente și apoi se transformă în colonii opace alb-gălbui cu margini franjuri. În profunzimile agarului, coloniile sunt „umbrite”, rotunde, cu un centru dens. În mod similar, în condiții anaerobe, microbul provoacă tulburarea rapidă a bulionului de carne-peptonă, formarea de gaze și apariția unui miros putrefactiv neplăcut. Complexul enzimatic al Clostridium sporogenes conține enzime proteolitice foarte active care pot descompune proteinele până la ultima etapă. Sub influența Clostridium sporogenes, laptele se peptonizează după 2-3 zile și se coagulează vag, gelatina se lichefiază. Pe mediile care conțin ficat, se formează uneori un pigment negru cu cristale de tirozină albe remarcabile. Microbul provoacă înnegrirea și digestia mediului creierului și un miros înțepător putrefactiv. Bucățile de țesătură sunt rapid digerate, slăbite și topite aproape complet în câteva zile.
Clostridium sporogenes are și proprietăți zaharolitice. Prevalența acestui microb în natură, proprietățile proteolitice pronunțate și rezistența ridicată la căldură a sporilor îl caracterizează ca fiind unul dintre principalii agenți cauzali ai proceselor de putrefacție în produsele alimentare.
Cl. sporogenes este agentul cauzal al alterarii conservelor de carne și carne și legume. Cel mai adesea, tocanele de carne conservate și mâncărurile de primă prânz cu și fără carne (borș, rassolnik, supă de varză etc.) sunt stricate. Prezența unei cantități mici de spori rămase în produs după sterilizare poate provoca alterarea alimentelor conservate atunci când sunt păstrate la temperatura camerei. În primul rând, se observă roșeața cărnii, apoi se înnegrește, apare un miros ascuțit putred și se observă adesea bombardarea conservelor.
Diverse mucegaiuri și actinomicete participă, de asemenea, la descompunerea putrefactivă a proteinelor - Penicillium, Mucor mucedo, Botrytis, Aspergillus, Trichoderma etc.
Sensul procesului de putrezire
Semnificația biologică generală a procesului de dezintegrare este enormă. Microorganismele putrefactive sunt „ordinele pământului”. Determinând mineralizarea unei cantități uriașe de substanțe proteice care intră în sol, efectuând descompunerea cadavrelor de animale și a deșeurilor vegetale, acestea produc purificarea biologică a pământului. Defalcarea profundă a proteinelor este cauzată de aerobi de spori, mai puțin profunde - de anaerobi de spori. În condiții naturale, acest proces are loc în etape în colaborarea multor tipuri de microorganisme.
Dar în producția de alimente, putrezirea este un proces dăunător și provoacă mari pagube materiale. Alterarea cărnii, peștelui, legumelor, ouălor, fructelor și altor produse alimentare se produce rapid și se produce foarte viguros dacă sunt depozitate neprotejate în condiții favorabile dezvoltării microbilor.
Numai în unele cazuri în producția de alimente putrezirea poate fi folosită ca proces util - în timpul coacerii heringului și brânzeturilor sărate. Putreirea este utilizată în industria tăbăcirii pentru cusătura pieilor (înlăturarea părului de pe pielea animalelor în timpul producției de piele). Cunoscând cauzele proceselor de degradare, oamenii au învățat să protejeze produsele alimentare de origine proteică de degradarea lor folosind o mare varietate de metode de conservare.
Putrerea este descompunerea substanțelor proteice de către microorganisme. Aceasta este deteriorarea cărnii, peștelui, fructelor, legumelor, lemnului, precum și procesele care au loc în sol, gunoi de grajd etc.
Într-un sens mai restrâns, putrefacția este considerată a fi procesul de descompunere a proteinelor sau a substraturilor bogate în proteine sub influența microorganismelor.
Proteinele sunt o componentă importantă a lumii organice vii și moarte și se găsesc în multe alimente. Proteinele se caracterizează printr-o mare diversitate și complexitate structurală.
Capacitatea de a distruge substanțele proteice este inerentă multor microorganisme. Unele microorganisme provoacă descompunerea superficială a proteinelor, în timp ce altele le pot distruge mai profund. Procesele putrefactive apar în mod constant în condiții naturale și apar adesea în produsele și produsele care conțin substanțe proteice. Descompunerea proteinelor începe cu hidroliza sub influența enzimelor proteolitice eliberate de microbi în mediu. Putrerea are loc în prezența temperaturii și umidității ridicate.
putrezire aerobă. Apare în prezența oxigenului atmosferic. Produșii finali ai putrezirii aerobe sunt, pe lângă amoniac, dioxidul de carbon, hidrogenul sulfurat și mercaptanii (care au miros de ouă putrezite). Hidrogenul sulfurat și mercaptanii se formează în timpul descompunerii aminoacizilor care conțin sulf (cistină, cisteină, metionină). Bacilul se numără și printre bacteriile putrefactive care distrug substanțele proteice în condiții aerobe. mycoides. Această bacterie este răspândită în sol. Este o tijă mobilă care formează spori.
putrezirea anaerobă. Apare în condiții anaerobe. Produșii finali ai degradarii anaerobe sunt produsele decarboxilării aminoacizilor (eliminarea grupării carboxil) cu formarea de substanțe urât mirositoare: indol, acatol, fenol, crezol, diamine (derivații lor sunt otrăvuri cadaverice și pot provoca intoxicații) .
Cei mai comuni și activi agenți patogeni ai cariilor în condiții anaerobe sunt Bacillus putrificus și Bacillus sporogenes.
Temperatura optimă de dezvoltare pentru majoritatea microorganismelor putrefactive este în intervalul 25-35°C. Temperaturile scăzute nu le provoacă moartea, ci doar opresc dezvoltarea lor. La o temperatură de 4-6°C, activitatea vitală a microorganismelor putrefactive este suprimată. Bacteriile putrefactive non-spori mor la temperaturi de peste 60°C, iar bacteriile care formează spori pot rezista la încălzire până la 100°C.
Rolul microorganismelor putrefactive în natură, în procesele de alterare a alimentelor.
În natură, degradarea joacă un rol pozitiv important. Este o parte integrantă a ciclului de substanțe. Procesele de degradare asigură că solul este îmbogățit cu formele de azot de care au nevoie plantele.
În urmă cu un secol și jumătate, marele microbiolog francez L. Pasteur și-a dat seama că fără microorganisme de degradare și fermentație, care transformă materia organică în compuși anorganici, viața pe Pământ ar deveni imposibilă. Cel mai mare număr de specii din acest grup trăiește în sol - 1 g de sol arabil fertil conține câteva miliarde dintre ele.Flora solului este reprezentată în principal de bacterii de descompunere. Ele descompun reziduurile organice (corpuri moarte ale plantelor și animalelor) în substanțe pe care plantele le consumă: dioxid de carbon, apă și săruri minerale. Acest proces la scară planetară se numește mineralizarea reziduurilor organice; cu cât sunt mai multe bacterii în sol, cu atât procesul de mineralizare are loc mai intens, prin urmare, cu atât fertilitatea solului este mai mare. Cu toate acestea, microorganismele putrefactive și procesele pe care le provoacă în industria alimentară provoacă alterarea produselor, în special de origine animală și a materialelor care conțin substanțe proteice. Pentru a preveni deteriorarea produselor de către microorganismele putrefactive, este necesar să se asigure un regim de depozitare care să excludă dezvoltarea acestor microorganisme.
Pentru a proteja produsele alimentare de putrezire se folosesc sterilizarea, sararea, fumatul, congelarea etc.. Cu toate acestea, printre bacteriile putrefactive se numara formele purtătoare de spori, halofile și psihrofile, forme care provoacă alterarea alimentelor sărate sau congelate.
Subiectul 1.2. Influența condițiilor de mediu asupra microorganismelor. Distribuția microorganismelor în natură.
Factori care influențează microorganismele (temperatură, umiditate, concentrație în mediu, radiații)
Plan
1. Efectul temperaturii: microorganisme psihrofile, mezofile și termofile. Principii microbiologice ale depozitării alimentelor în formă refrigerată și congelată. Stabilitatea termică a celulelor vegetative și a sporilor: pasteurizare și sterilizare. Influența prelucrării termice a produselor alimentare asupra microflorei.
2. Influența umidității produsului și a mediului asupra microorganismelor. Importanța umidității relative a aerului pentru dezvoltarea microorganismelor pe produsele uscate.
3. Influența concentrației de substanțe dizolvate în habitatul microorganismelor. Influența radiațiilor, utilizarea razelor UV pentru dezinfecția aerului.
Efectul temperaturii: microorganisme psihrofile, mezofile și termofile. Principii microbiologice ale depozitării alimentelor în formă refrigerată și congelată. Stabilitatea termică a celulelor vegetative și a sporilor: pasteurizare și sterilizare. Influența prelucrării termice a produselor alimentare asupra microflorei.
Temperatura este cel mai important factor pentru dezvoltarea microorganismelor. Pentru fiecare microorganism există un regim de temperatură minim, optim și maxim pentru creștere. Pe baza acestei proprietăți, microbii sunt împărțiți în trei grupuri:
§ psicrofili - microorganisme care cresc bine la temperaturi scăzute cu minim la -10-0 °C, optim la 10-15 °C;
§ mezofili - microorganisme la care se observă o creștere optimă la 25-35 °C, minim la 5-10 °C, maxim la 50-60 °C;
§ termofile - microorganisme care cresc bine la temperaturi relativ ridicate cu creștere optimă la 50-65 °C, maxim la temperaturi peste 70 °C.
Majoritatea microorganismelor sunt mezofile, pentru care temperatura optimă este de 25-35 °C. Prin urmare, depozitarea produselor alimentare la această temperatură duce la proliferarea rapidă a microorganismelor în ele și la alterarea alimentelor. Unii microbi, atunci când se acumulează semnificativ în alimente, pot duce la otrăviri alimentare la oameni. Microorganismele patogene, de ex. care provoacă boli infecțioase la oameni sunt, de asemenea, clasificate drept mezofili.
Temperaturile scăzute încetinesc creșterea microorganismelor, dar nu le omoară. În alimentele refrigerate, creșterea microbiană este lentă, dar continuă. La temperaturi sub 0°C, majoritatea microbilor încetează să se reproducă, adică. Când alimentele sunt înghețate, creșterea microbilor se oprește, unii dintre ei mor treptat. S-a stabilit că la temperaturi sub 0 °C, majoritatea microorganismelor intră într-o stare similară cu anabioza, își păstrează viabilitatea și își continuă dezvoltarea pe măsură ce temperatura crește. Această proprietate a microorganismelor trebuie luată în considerare în timpul depozitării și al prelucrării ulterioare culinare a produselor alimentare. De exemplu, salmonella poate persista mult timp în carnea congelată, iar după dezghețarea cărnii, în condiții favorabile, se acumulează rapid până la o cantitate periculoasă pentru oameni.
Când sunt expuse la temperaturi ridicate care depășesc rezistența maximă a microorganismelor, acestea mor. Bacteriile care nu au capacitatea de a forma spori mor atunci când sunt încălzite într-un mediu umed la 60-70 °C în 15-30 de minute, la 80-100 °C în câteva secunde sau minute. Sporii bacterieni au o rezistență mult mai mare la căldură. Sunt capabili să reziste la 100 °C timp de 1-6 ore; la o temperatură de 120-130 °C, sporii bacterieni într-un mediu umed mor după 20-30 de minute. Sporii de mucegai sunt mai puțin rezistenți la căldură.
Prelucrarea termică culinară a produselor alimentare în alimentația publică, pasteurizarea și sterilizarea produselor din industria alimentară duc la moartea parțială sau completă (sterilizarea) a celulelor vegetative ale microorganismelor.
În timpul pasteurizării, produsul alimentar este expus la efecte minime de temperatură. În funcție de regimul de temperatură, se disting pasteurizarea scăzută și înaltă.
Pasteurizarea scăzută se efectuează la o temperatură care nu depășește 65-80 ° C, timp de cel puțin 20 de minute pentru a garanta mai bine siguranța produsului.
Pasteurizarea ridicată este o expunere pe termen scurt (nu mai mult de 1 minut) a produsului pasteurizat la o temperatură de peste 90 °C, care duce la moartea microflorei patogene nepurtătoare de spori și, în același timp, nu implică modificări semnificative. în proprietăţile naturale ale produselor pasteurizate. Alimentele pasteurizate nu pot fi păstrate fără refrigerare.
Sterilizarea presupune eliberarea produsului de toate formele de microorganisme, inclusiv de spori. Sterilizarea conservelor se realizează în dispozitive speciale - autoclave (sub presiune de abur) la o temperatură de 110-125 ° C timp de 20-60 de minute. Sterilizarea oferă posibilitatea păstrării pe termen lung a conservelor. Laptele este sterilizat prin tratament la temperaturi ultra-înalte (la temperaturi peste 130 ° C) timp de câteva secunde, ceea ce vă permite să păstrați toate proprietățile benefice ale laptelui.
Putrerea este procesul de descompunere profundă a substanțelor proteice de către microorganisme. Microorganismele folosesc produsele de descompunere a proteinelor pentru sinteza substanțelor celulare și ca material energetic.
Putregaiul este un proces biochimic complex, în mai multe etape, a cărui natură și rezultatul final depind de compoziția proteinelor, condițiile procesului și tipurile de microorganisme care îl provoacă.
Substanțele proteice nu pot pătrunde direct în celulele microorganismelor, prin urmare numai microbii care posedă enzime - exoproteaze - pot folosi proteine.
Procesul de descompunere a proteinelor simple începe cu hidroliza lor. Produșii primari ai hidrolizei sunt peptidele. Ele intră în celulă și sunt hidrolizate de proteaze intracelulare la aminoacizi.
Nucleoproteinele, sub influența microbilor putrefactivi, sunt descompuse în complexe proteice și acizi nucleici. Proteinele sunt apoi descompuse în aminoacizi, iar acizii nucleici sunt descompuse în acid fosforic, carbohidrați și un amestec de baze care conțin azot.
Aminoacizii sunt utilizați de microorganisme pentru sinteza celulară sau sunt supuși unor modificări ulterioare, cum ar fi dezaminarea. Dezaminarea se distinge: hidrolitică, oxidativă și reductivă.
Dezaminarea hidrolitică este însoțită de formarea de hidroxiacizi și amoniac. Dacă are loc decarboxilarea unui aminoacid, se formează alcool, amoniac și dioxid de carbon.
Dezaminarea oxidativă produce acizi ceto și amoniac.
Dezaminarea reductivă produce acizi carboxilici și amoniac.
Printre produșii de descompunere ai aminoacizilor, în funcție de structura radicalilor acestora, se găsesc diverși acizi organici și alcooli. În timpul descompunerii aminoacizilor grași, se pot acumula acizi formic, acetic, propionic, butiric și alți acizi; propil, butilic, amil și alți alcooli. În timpul descompunerii aminoacizilor aromatici, produsele intermediare sunt produse de putrezire caracteristice: fenol, crezol, skatol, indol - substanțe cu miros foarte neplăcut. Descompunerea aminoacizilor care conțin sulf produce hidrogen sulfurat sau derivații săi - mercaptani. Mercaptanii au un miros de ou stricat, care este vizibil chiar și la concentrații neglijabile.
Diaminoacizii formați în timpul hidrolizei proteinelor pot suferi decarboxilare fără eliminarea amoniacului, rezultând diamine și CO2.
Cadaverina, putrescina și alte amine formate în timpul degradarii sunt adesea grupate sub denumirea generală de ptomaine (otrăvuri cadaverice). Unii derivați de ptomaină au proprietăți toxice.
Sub influența microorganismelor aerobe, compușii organici azotați și neazoți suferă oxidare, astfel încât să poată fi complet mineralizați. În acest caz, produsele finale ale degradarii sunt amoniacul, dioxidul de carbon, apa, sărurile acizilor sulfuric și fosforic. În condiții anaerobe, nu are loc oxidarea completă a produselor intermediare de descompunere a aminoacizilor. În acest sens, pe lângă NH3 și CO2, se acumulează diverși compuși organici menționați mai sus, care pot include substanțe cu proprietăți toxice și substanțe care conferă un miros dezgustător materialului putrezitor.
Cei mai activi agenți cauzali ai proceselor putrefactive sunt bacteriile. Printre acestea se numără spori și non-spori, aerobi și anaerobi. Mezofili, rezistenți la frig și rezistenți la căldură, majoritatea sunt sensibili la aciditatea mediului și la conținutul ridicat de sare de masă din acesta. Cele mai comune bacterii putrefactive sunt următoarele.
Bacilii de cartofi și fân sunt bacterii aerobe, mobili, gram-pozitive, care formează spori. Sporii lor sunt rezistenți la căldură. Temperatura optimă este în intervalul 30-450C, creșterea maximă este la t0 55-600C, la t0 sub 50 nu se reproduc.
Bacteriile din genul Pseudomonas sunt tije aerobe, mobile, cu un cordon polar, fără spori, gram-negative. Unele specii sintetizează pigmenți, se numesc pseudomonas fluorescent. Există temperaturi de creștere rezistente la frig de la -20 la -50 C. Sunt capabile să oxideze carbohidrații cu formarea de acizi și să secrete mucus. Dezvoltarea și activitatea biochimică sunt inhibate la un pH sub 5,5 și 5-6% din concentrația NaCI în mediu. Pseudomonas sunt larg răspândite în natură și sunt antagoniști ai unui număr de bacterii și ciuperci filamentoase.
Proteus vulgaris - tije mici, gram-negative, nepurtătoare de spori, cu proprietăți putrefactive pronunțate, anaerobi facultativi. Fermentează carbohidrații pentru a produce gaz și acid. În funcție de condițiile de viață, aceste bacterii își pot schimba vizibil forma și dimensiunea. Se dezvoltă bine la t0 250 C și 370 C, încetează să se înmulțească la t0 aproximativ 5-100 C, dar se poate păstra și în alimente congelate.
Particularitatea sa este mobilitatea sa energetică. Această proprietate stă la baza unei metode de identificare a Proteus în produsele alimentare și separarea acestuia de bacteriile asociate. Unele specii produc substanțe care sunt toxice pentru oameni.
Clostridium sporogenes este o tijă anaerobă, mobilă, purtătoare de spori. Sporii sunt rezistenți la căldură și sunt localizați central în celulă. Ea produce spori foarte repede. Fermentează carbohidrații cu formarea de acizi și gaze, are capacitate lipolitică. Când proteinele se descompun, hidrogenul sulfurat este eliberat din abundență. Dezvoltarea optimă t0 este de 35-400 C, cea minimă este de aproximativ 50 C.
Microorganismele putrefactive cauzează daune mari economiei naționale, provocând deteriorarea produselor alimentare valoroase, bogate în proteine, cum ar fi peștele și produsele din pește, carnea și produsele din carne, ouăle și laptele. Dar aceleași microorganisme joacă un rol pozitiv mare în ciclul azotului din natură, mineralizând substanțele proteice care ajung în apa stricata.
Putrerea este procesul de descompunere a proteinelor cauzat de microorganisme. Putregaiul implică o serie de procese care diferă semnificativ unul de celălalt. Există diferite căi pe care poate avea loc descompunerea moleculelor de proteine complexe, iar adâncimea acestei descompunere este diferită.
Descompunerea unei molecule de proteine servește pentru unele microorganisme ca o modalitate de a o transforma într-o stare asimilabilă, în timp ce alte microorganisme folosesc proteine în scopuri plastice și ca material energetic. Aceste microorganisme provoacă o descompunere mai profundă a proteinelor și formează produse de putrezire mai diverse. Cele mai importante bacterii putrefactive: Bact. proteus vulgare - un anaerob facultativ care descompune proteinele în amoniac și hidrogen sulfurat; Tu. subtilis, tu. mycoides și tu. mezenteric. Primele două tipuri, în timpul procesului de putrezire în timpul descompunerii proteinei, formează amoniac în absența hidrogenului sulfurat; B. mesentericus produce multă hidrogen sulfurat.
Biochimia procesului de dezintegrare
În stadiile inițiale, descompunerea putrefactivă a moleculei proteice este aparent similară cu ceea ce are loc în timpul hidrolizei acide sau alcaline, adică molecula proteică, adăugând apă, se descompune cu formarea de albumoze și peptone, apropiate de polipeptide, compuși formați din mai multe decât doi aminoacizi. Aceste substanțe se descompun rapid în continuare și prin hidroliză în aminoacizi, care suferă rapid transformări ulterioare - dezaminarea (eliminarea NH2) și decarboxilarea (eliminarea COOH) și parțial clivaj chiar mai profund. Amoniacul și dioxidul de carbon formați în timpul acestui proces sunt produse caracteristice ale descompunerii putrefactive a proteinelor. Mirosul putred este determinat în mare măsură de alți produși de degradare ai aminoacizilor caracteristici procesului de descompunere (indol, skatol, mercaptani); se formează și substanțe toxice: histamina, tiramină. Totuși, toxiinfecțiile alimentare observate la consumul de alimente stricate nu sunt cauzate de aceste substanțe, ci de toxine produse de anumite tipuri de bacterii. Indolul și skatolul se formează din cauza descompunerii triptofanului. Mercaptanii, precum hidrogenul sulfurat, sunt formați prin descompunerea aminoacizilor care conțin sulf, cistina și metionina. La crearea mirosului proteinelor putrezite, împreună cu amoniacul, hidrogenul sulfurat, mercaptanii, indolul, skatolul și fenolul, participă fără îndoială și alte substanțe care sunt produse intermediare ale degradarii.
Microorganismele putrefactive sunt răspândite peste tot și, prin urmare, atunci când o substanță proteică este depozitată neprotejată de microorganisme și în condiții care le permit să se înmulțească, putrefacția are loc în cel mai scurt timp posibil și se dezvoltă foarte viguros.
Utilizări și semnificație ale procesului de putrezire
În scopuri tehnice, procesele putrefactive sunt utilizate în unele industrii - fabricarea brânzeturilor, tăbăcirea și decaparea heringului. Procesul de degradare joacă un rol în natură, deoarece prin intermediul acestuia, azotul substanțelor proteice conținute în reziduurile animale și vegetale este transformat în amoniac, adică într-o formă care este ușor asimilată de plantele superioare.
Articolul a fost pregătit și editat de: chirurgVideo:
Sănătos:
Articole similare:
- Proteinele (proteinele) sunt substanțe organice cu conținut molecular ridicat, care conțin azot, care alcătuiesc cele mai multe...
- Sportul modern de elită s-a transformat treptat dintr-o activitate într-o marfă: modificări ale regulilor competițiilor pentru...
- Deficiența de proteine și aminoacizi individuali este eliminată prin îmbogățirea produselor cu aminoacizi lipsă sau hidrolizate de proteine. Aplica...
