Metode de diagnosticare a Helicobacter pylori: test de sânge pentru anticorpi, analiza scaunului prin PCR, teste de urează (cu FGDS, respirator), biopsie cu citologie. Analiză pentru Helicobacter pylori De unde să obțineți teste de scaun pentru Helicobacter

- una dintre cele mai bacterii periculoase, care provoacă dezvoltarea diverse boli stomacul şi duoden. Pentru a diagnostica patologia, nu este prescris doar un test de sânge, ci și un test de scaun.

Helicobacter pylori este o bacterie patogenă care, atunci când intră în organism, determină dezvoltarea helicobacteriozei. Este de dimensiuni mici și are o formă de spirală. Producând o cantitate mare de toxine, afectează stomacul și duodenul. Bacteria își trage numele de la faptul că se găsește în regiunea pilorică a stomacului.

Prin multiplicare, Helicobacter afectează toate celulele stomacului, ceea ce duce la procese inflamatorii. Această bacterie este rezistentă la mediile acide și se poate deplasa de-a lungul pereților stomacului folosind flageli.

Semnele de infecție pot să nu apară imediat. Boala se dezvoltă cu factori însoțitori: alimentație deficitară, situații stresante, imunitatea scăzută. Infecția poate apărea prin apă sau alimente contaminate sau prin contactul cu o persoană infectată în timp ce strănută sau tusește.

Următoarele simptome sunt caracteristice infecției cu Helicobacter pylori:

Arsuri la stomac
Greață și vărsături
Miros din gură
Pierderea poftei de mâncare
Balonare
Tulburarea scaunului
Disconfort după masă

Simptomele enumerate sunt similare cu cele ale gastritei și ulcerelor, prin urmare, pentru a identifica agentul patogen și a trata helicobacterioza, este necesar să se supună unei examinări.

Analiza scaunului: pregătirea și colectarea materialului

Cu 3-4 zile înainte de a trebui să încetați să luați antibiotice, laxative, supozitoare rectale. Este important să vă informați medicul despre utilizarea medicamentelor.
Materialul pentru analiză trebuie colectat într-un recipient curat. Farmacia vinde un recipient special pentru acest scop. Este interzisă colectarea materialului după clisme sau administrarea de laxative, deoarece rezultatele vor fi nesigure.
După colectare, materialul poate fi păstrat timp de 12 ore la o temperatură de 2-8 grade, dar pentru cercetare este mai bine să-l depuneți la 4-5 ore după mișcarea intestinală.
Dacă recoltarea scaunului se efectuează după terapia cu antibiotice pentru helicobacterioză, atunci aceasta ar trebui făcută la numai o lună după încheierea tratamentului cu antibiotice.

În laborator, materialul rezultat este examinat folosind metoda. Acesta este un diagnostic genetic molecular care vă permite să identificați Helicobacter chiar și un mic fragment de ADN bacterian din materialul colectat.Studiul se realizează în anumite condiții și condiții de temperatură.

Mai multe informații despre Helicobacter pylori pot fi găsite în videoclip:

Pentru depistarea infectiei cu Helicobacter pylori se pot folosi si alte metode: analiza culturala si imunologica. Metoda de cultură este de obicei înțeleasă ca inoculare bacteriologică a materialului studiat. Este plasat într-un mediu special pentru creșterea bacteriilor. De obicei este de aproximativ 10 zile. Apoi tipul de bacterie și capacitatea acesteia de a intra în reacții biochimice sunt examinate la microscop.Aceasta metoda vă permite să determinați sensibilitatea bacteriilor identificate la antibiotice, ceea ce vă permite să prescrieți un tratament corect și adecvat.

Metoda imunologică presupune aderența la antigene. Această metodă de cercetare este efectuată cu simptome severe și înainte metoda instrumentală examene. Alegerea unei metode specifice se face de către medic, luând în considerare diverși factori.

La examinarea scaunului folosind metoda PCR, rezultatul poate fi negativ sau pozitiv. În primul caz, nu au fost detectate bacterii în scaun, dar în celălalt caz a fost prezent un antigen al Helicobacter.

Analiza scaunului presupune calitativ şi cuantificare microorganismele din mediul de testare. Există 4 grade de creștere bacteriană:

gradul I. Într-un mediu lichid favorabil, creșterea bacteriilor identificate este slabă, iar într-un mediu solid nu se observă deloc.
gradul 2. Reproducerea și creșterea microflorei anumit tip ajunge până la 10 colonii.
gradul 3. Se distinge printr-o creștere semnificativă de până la 100 de colonii în medii solide.
gradul 4. Creșterea bacteriei este foarte mare și depășește 100 de colonii.

Al treilea și al patrulea grad indică un proces inflamator provocat de un anumit tip de bacterii.

Prezența în fecale nu indică un ulcer gastric sau alte boli ale tractului gastrointestinal, ci determină doar prezența unei bacterii patogene. Dacă, conform rezultatelor analizei, mucoasa gastrică este colonizată cu Helicobacter, atunci în multe cazuri aceasta este însoțită de patologii precum ulcer, gastrită, sindrom de colon iritabil, tumoră carcinogenă, pancreatită etc.

Numai testele de laborator nu sunt suficiente pentru a face un diagnostic precis. Examinarea trebuie să fie cuprinzătoare și să includă examen histologic.

Helicobacter în timpul sarcinii: pericol pentru făt și metode de tratament

În timpul sarcinii tract gastrointestinal supus unei sarcini grele. În acest caz, se observă foarte des arsuri la stomac, dureri în regiunea epigastrică etc. Riscul de apariție a unui ulcer este foarte mare, așa că viitoarea mamă trebuie examinată pentru a identifica această infecție pentru a evita posibile încălcări.

Este mai bine să efectuați examinarea în primele luni, deoarece diagnosticul devine mai dificil pe măsură ce perioada crește. Pentru diagnostic sunt utilizate metode de cercetare non-invazive. O metodă eficientă de diagnosticare pentru determinarea Helicobacter este intubația gastrică. Procedura se desfășoară într-un mod blând. Endoscopia se efectuează în cazuri rare și cu mare prudență, deoarece presiunea asupra organelor uterine crește.

Tratamentul helicobacteriozei în timpul sarcinii și alăptării este interzis, din cauza posibilității influență negativă antibiotice pentru făt.

Printre medicamentele care sunt permise se numără Phosphalugel și Maalox. Dintre antispastice, Drotaverine, Baralgin, Papaverine pot fi utilizate numai cu permisiunea unui medic.

Dacă infecția cu Helicobacter pylori se manifestă activ în timpul gestației, atunci simptomele toxicozei sunt pronunțate și apar foarte devreme. Toxicoza poate fi observată până la 5 luni.O femeie însărcinată ar trebui să respecte o dietă specială și să excludă din alimentație alimentele care irită mucoasa gastrică. Dieta nr. 1 este prescrisă în perioada acuta. Este interzis consumul de carne și pește gras, bulion bogat, afumaturi, varză, spanac, ridichi etc.

Helicobacterioza: tratament

Regimul de tratament pentru Helicobacter pylori este determinat de medic individual, luând în considerare severitatea simptomelor și rezultatele testelor. Terapia pentru helicobacterioză implică moartea bacteriei, precum și vindecarea ulcerelor:

Din medicamente antibacteriene Se utilizează metronidazol, claritromicină, tetraciclină, amoxicilină etc.
Pe lângă antibiotice, sunt prescrise medicamente antiacide: esomeprazol, lansoprazol, omeprazol etc. La utilizarea acestor medicamente, producția de de acid clorhidric.
Pentru a reduce aciditatea, este indicată utilizarea Almagel, Maalox, Alumag și alte medicamente similare. Aceste medicamente au efecte adsorbante, învelitoare și gastroprotectoare.
Pentru a restabili microflora intestinală, după utilizarea antibioticelor, se folosesc probiotice: Lactoferină, Vitaflor,

În timpul tratamentului, trebuie să respectați alimentație adecvată. Alimentele trebuie porționate, nici calde, nici reci. Ar trebui să mănânci alimente strict la anumite ore. Meniul de dietă trebuie aprobat de medic, dar recomandările pentru toți pacienții cu boli sunt aceleași: evitați alimentele grase, prăjite, sărate, condimentele, marinatele, alcoolul și băuturile carbogazoase.

Bacteria Helicobacter pylori (Helicobacter pylori) trăiește în celulele membranei mucoase a stomacului și duodenului uman. Unele tulpini (tipuri genetice) ale microorganismului secretă toxine specifice care distrug celulele și cresc riscul de patologii precum gastrita și duodenita cronică, ulcerul gastric și duodenal și unele tipuri de tumori maligne. Astfel de tulpini trebuie identificate și tratate prompt. O modalitate de a determina infecția cu Helicobacter pylori este efectuarea unui test de scaun.

Mecanismul de determinare a Helicobacter folosind analiza scaunului

PCR (reacția în lanț a polimerazei), testele culturale și imunologice ale scaunului sunt metode directe de cercetare. Spre deosebire de metodele indirecte, atunci când prezența unui agent patologic este judecată după prezența produselor metabolice sau a reacției sale sistem imunitar organism (producerea de anticorpi), metodele directe detectează direct microorganismul însuși sau ADN-ul acestuia.
Toate tipurile de teste de scaun pentru helicobacterioză sunt tipuri de cercetare non-invazive (non-traumatice), spre deosebire de prelevarea de sânge sau gastroduodenoscopia.

Diagnosticul molecular

Pentru a efectua PCR, se folosește un dispozitiv special - un amplificator.

Metoda PCR este unul dintre tipurile de diagnostic genetic molecular și vă permite să determinați prezența Helicobacter pylori chiar dacă un mic fragment de ADN bacterian este prezent în material.

Esența metodei este de a multiplica în mod repetat proba analizată a agentului patogen. Pentru a efectua reacția, este necesar un fel de „cadru”, constând din doi primeri - obținuți prin sinteza artificială a fragmentelor de ADN identice cu acidul nucleic al Helicobacter pylori. În timpul reacției dintre primeri, lanțul de ADN crește dacă un fragment de biomaterial de microorganism este prezent în fecale. Dacă este absent, nu are loc nicio reacție.

Reacția se desfășoară la anumite temperaturi și aciditate ale mediului, constă în câteva zeci de cicluri repetate, iar o enzimă specială, polimeraza, este utilizată pentru cataliză (accelerarea reacției). Peste 30 de cicluri, fragmentul de ADN al agentului patologic prezent în biomaterial este multiplicat de un miliard de ori, ceea ce face posibilă diagnosticarea cu exactitate a infecției.

Dacă sunt disponibili primeri corespunzători, poate fi detectată infecția cu specii citotoxice (celule dăunătoare ale mucoasei gastrice) Helicobacter pylori.

Analiza culturală

Analiza culturală (cultura bacteriologică) este o metodă de cercetare microbiologică.

Materialul biologic este plasat într-un mediu specific favorabil creșterii unei colonii bacteriene. După o anumită perioadă de timp (pentru Helicobacter pylori - mai mult de o săptămână), cultura este examinată la microscop, folosind colonii pentru a identifica corect diverse metode– culoare, capacitatea de a intra în anumite reacții biochimice.

Pe lângă identificarea antigenului patologic (agentul cauzal al bolii), metoda vă permite să testați sensibilitatea acestuia la medicamentele antibacteriene, ceea ce reduce timpul și costul tratamentului și crește eficacitatea terapiei.

Din păcate, în unele cazuri, rezultatele unui test de sensibilitate in vitro („in vitro”) pot să nu coincidă cu rezultatele tratamentului in vivo (un organism viu): în viața reală, antibioticele selectate printr-o metodă de laborator pot să nu fie așa. efectiv.

Metode imunologice de analiză

Metodele imunologice se bazează pe proprietatea anticorpilor de a se lipi de antigen. Pentru cercetare, anticorpii cu etichete speciale sunt combinați cu proba analizată, ca urmare, dacă Helicobacter pylori este prezent în material, se formează complexe antigen-anticorp.

Indicații pentru examinare

Toate tipurile de diagnostic ale infecției cu Helicobacter pylori au avantajele și dezavantajele lor. Recomandabilitatea utilizării unei anumite metode depinde de diverși factori și etape ale tratamentului. Metoda optimă de examinare este aleasă de un gastroenterolog.

Indicații pentru analiza PCR a scaunului:

ulcere și duoden;
atrofia mucoasei gastrice;
polipi, tumori stomacale;
reflux gastroesofagian (reflux al conținutului stomacului în esofag), ulcer esofagian;
predispoziție genetică: tumori maligne ale stomacului la rude apropiate (părinți, frați);

Un studiu PCR este prescris în mod optim pentru a evalua fezabilitatea unui tratament specific cu medicamente antibacteriene pentru daune organice existente.

Indicația pentru analiza culturală este de a determina sensibilitatea la medicamente atunci când tratamentul empiric este ineficient. Deoarece testul este complex (cultura necesită un mediu special și lipsă de oxigen) și pe termen lung, acest test nu este prescris pentru a diagnostica o infecție.

Cultura bacteriologică este capabilă să izoleze doar forme spiralate de Helicobacter pylori, dar nu formele cocice, care au primit În ultima vreme răspândită. Acest fapt reduce și mai mult valoarea studiului.

Indicații pentru metode imunologice:

simptome ale patologiilor funcționale și organice ale stomacului și intestinelor:
- , eructaţie;
- durere care apare periodic pe parcursul zilei cu exacerbări primăvara și toamna;
- diaree sau constipație;
- senzație de disconfort, plinătate a stomacului;
înainte de a prescrie terapie pe termen lung cu medicamente antiinflamatoare nesteroidiene sau inhibitori ai pompei de protoni (medicamente pentru reducerea producției de acid clorhidric);
anemie cu deficit de fier sau trombocitopenie de etiologie necunoscută;
predispozitie genetica;
infectarea mediului imediat;
monitorizarea eficacității terapiei cu antibiotice.

Metodele imunologice și PCR fără genotipare sunt prescrise în scopuri de screening - datorită simplității și costului relativ scăzut, studiul este realizat pentru publicul larg pentru a identifica grupurile cu risc de a dezvolta leziuni organice și tumorale ale stomacului și intestinelor.

Din păcate, screening-ul pentru Helicobacter pylori nu este larg răspândit în Rusia.

Analiza imunologică se efectuează înaintea metodelor instrumentale de cercetare cu simptome adecvate și sugerează infecția cu Helicobacter pylori. Pe baza rezultatelor analizei, dacă este necesar, sunt prescrise și alte metode de cercetare.

Avantajele și dezavantajele analizei PCR a scaunului

Terapia specifică a helicobacteriozei cu medicamente antibacteriene este un proces lung, însoțit de tolerabilitate slabă la mulți pacienți și un risc ridicat de complicații.

Prescrierea antibioticelor tuturor celor infectați cu Helicobacter pylori este o practică proastă. Antibioterapie specifică este indicată numai pacienților cu tendință de progresie a leziunilor organice - eroziuni, ulcere, proces atrofic - infectați de obicei cu anumite tulpini de Helicobacter. Acești pacienți necesită terapie cu antibiotice pentru a obține remisia bolii ulcerului peptic și pentru a preveni riscul de a dezvolta neoplasme maligne.

Tipurile citotoxice de Helicobacter pylori pot fi detectate numai prin metoda PCR.

Avantajele analizei PCR a scaunului:

sensibilitate ridicată a metodei;
specificitate ridicată a testului;
simplitatea și neinvazivitatea colectării materialelor;
Siguranță;
capacitatea de a izola atât formele spiralate, cât și cele cocice ale Helicobacter pylori;
capacitatea de a izola diferite tulpini de bacterii.

Sensibilitatea testului este capacitatea de a produce rezultate pozitive adevărate. Cu cât sensibilitatea este mai mare, cu atât este mai mică proporția de rezultate fals pozitive, atunci când se presupune că antigenul este detectat la indivizii neinfectați.

Specificitatea testului este un indicator care depinde de numărul de rezultate fals negative (când antigenul nu este eliberat la un pacient infectat). Metoda PCR pentru testarea scaunului pentru Helicobacter pylori se caracterizează printr-o sensibilitate de 64-94% și o specificitate de 100%.

Colectarea fecalelor este ușoară și simplă. Spre deosebire de prelevarea de sânge sau gastroduodenoscopia, recoltarea de material nu necesită utilizarea anestezice locale, care se poate dezvolta reactie alergica, nu provoacă durere sau disconfort și este ferit de infecția cu un instrument „murdar”. Studiul nu necesită niciun efort deosebit, cum ar fi metoda de respirație, care o face accesibilă chiar și copiilor mici.

Dezavantajele analizei PCR a scaunului:

incapacitatea de a determina sensibilitatea la medicamentele antibacteriene;
incapacitatea de a distinge între o infecție actuală și una vindecată cu succes, când fragmentele de ADN ale bacteriei pot rămâne în fecale timp de aproximativ o lună;
sensibilitate mai mică comparativ cu studiul unei biopsii (probă de țesut sau masă celulară) a mucoasei gastrice;
cost relativ ridicat al analizei cu genotipare;
cerințe stricte pentru personal: calificări, respectarea strictă a regulilor, acuratețe.

Unul dintre principalele dezavantaje ale metodei PCR este continuarea principalului său avantaj: sensibilitatea ridicată a testului determină rezultate fals pozitive în cazul contaminării („contaminare” din exterior) a materialului analizat.

Pregătirea pentru test

Fiabilitatea rezultatului oricărei analize depinde de îndeplinirea strictă a anumitor condiții în toate etapele, iar eșantionarea materialului nu face excepție.

Reguli pentru preluarea materialelor:

cu trei zile înainte de analiză, antibioticele, laxativele, medicamentele care încetinesc peristaltismul, supozitoarele rectale și unele alte medicamente sunt întrerupte conform instrucțiunilor medicului, așa că ar trebui să avertizați medicul despre utilizarea anumitor medicamente;
Fecalele se colectează în recipiente eliberate de laborator, se recomandă prelevarea de probe din trei puncte diferite;
Este recomandabil să livrați imediat biomaterialul la laborator; dacă acest lucru nu este posibil, proba trebuie păstrată la o temperatură de 2-8 grade timp de cel mult 24 de ore;
dacă testul este efectuat pentru a evalua eficacitatea terapiei cu antibiotice prescrise anterior împotriva Helicobacter pylori, scaunul este recoltat nu mai devreme de patru săptămâni după încheierea tratamentului.

Încetinirea trecerii fecalelor și constipația poate duce la distrugerea Helicobacterului din fecale, ceea ce provoacă rezultate fals negative. Pentru a crește fiabilitatea rezultatului, medicul poate prescrie un laxativ ușor - lactuloză - înainte de analiză.

Cum și unde să fii testat

Testele sunt prescrise de un gastroenterolog, astfel încât consultația acestuia este necesară înainte de testarea pentru Helicobacter pylori.

Costul aproximativ al examinării scaunului:

Metoda PCR cu genotipare – 1200 de ruble;
PCR fără genotipare – 600 de ruble;
sensibilitate la antibiotice - 600 de ruble;
metode imunologice – 400-650 de ruble (în funcție de metodă).

Pentru cel mai precis diagnostic al Helicobacter pylori, este necesar să alegeți o instituție medicală care și-a câștigat o bună reputație.

Rezultatele cercetării

Timpul de procesare a testelor și fiabilitatea acestora depind de metoda de determinare a antigenului.

Momentul finalizării, fiabilitatea și interpretarea rezultatelor testelor de scaun pentru helicobacterioză.

	Termenele limită	Credibilitate	rezultate
PCR	de la 5–6 ore (metoda expres) la 2 zile	înalt	1) negativ – nu a fost identificat un singur genotip declarat al bacteriei; 2) pozitiv – helibacterioză (actuală sau în istorie), cel puțin unul dintre genotipurile declarate a fost identificat
Analiza bacteriologică pentru sensibilitatea la antibiotice	7-10 zile	ridicat – pentru sensibilitate; scăzut – pentru detectarea antigenului	1) număr de bacterii 0 – Helicobacter nu a fost izolat; 2) număr >0 - helibacterioză; 3) S – sensibilitate la antibioticul specificat; 4) R – rezistența (rezistența) la antibiotic; 5) I – sensibilitate moderată la antibiotic.
Metode imunologice	1 zi	scăzut	1) negativ - agentul patogen nu a fost identificat; 2) pozitiv - helicobacterioza

Fiabilitatea scăzută a analizei imunologice și culturale se explică prin conținutul scăzut de antigen din fecale: dacă analiza PCR este sensibilă chiar și în prezența a 10 celule, atunci pentru un rezultat fiabil al altor metode trebuie să existe de cel puțin 10 ori mai multe celule. .

Testarea scaunului pentru helibacterioză este sigură, netraumatică și poate fi efectuată folosind diferite metode pentru a detecta infecția, a determina tulpinile de virus și sensibilitatea agentului patogen la antibiotice.

Pe baza rezultatelor testelor, este posibil să se formeze un grup de risc, ai cărui reprezentanți au o probabilitate mare de a dezvolta ulcere gastrice și duodenale și tumori maligne ale stomacului; să evalueze gradul de risc și să-l minimizeze prin tratamentul antibacterian în timp util al tulpinilor citotoxice de helicobacterioză.

În plus, avantajul metodei este neinvazivitatea sa - nu este nevoie să folosiți proceduri mai mult sau mai puțin traumatice pentru a colecta material (puncția unei vene pentru a extrage sânge, inserarea unui tub duodenal).

Efectuarea unui test de scaun nu necesită prezența pacientului; livrarea la timp a scaunului la laborator este suficientă. Acest lucru este deosebit de important pentru examinarea copiilor.

Există diferite metode de identificare a Helicobacter pylori, fiecare cu propriile avantaje și dezavantaje.

Medicul curant determină necesitatea și alegerea metodei de cercetare. Disponibilitatea analizei pentru un anumit pacient din cauza prețului este de o importanță considerabilă. Majoritatea efectuat numai în clinici și laboratoare private, deoarece necesită echipamente scumpe.

Scopul studiului este de a identifica relația cauzală a bolii cu Helicobacter și de a prescrie un curs de tratament țintit pentru a scăpa de agentul patogen.

Ce este Helicobacter?

Numele Helicobacter pylori se traduce prin „spiral piloric”. Este legat de forma caracteristică a bacteriei, localizarea în regiunea pilorică (zona de frontieră a stomacului cu duodenul). Microorganismul are flageli care îl ajută să se miște chiar și în mucusul gros.

Helicobacter poate rezista la medii acide suc gastric. Pentru susținerea vieții, folosește energia moleculelor de hidrogen produse de bacteriile intestinale.

Bacteria sintetizează aproximativ 20 de enzime

Cele mai cunoscute enzime Helicobacter:

Caracteristicile microorganismului includ:

dificultatea izolării prin cultură, deoarece Helicobacter nu crește pe medii nutritive convenționale;
o perioadă lungă de absență a simptomelor care indică infecția;
capacitatea într-o situație „periculoasă” de a se transforma într-o formă sferică și de a fi acoperit cu o peliculă de protecție.

Este imposibil să se detecteze o formă de spirală în fecale, deoarece mediul intestinal este nefavorabil pentru existența Helicobacterului. Nu există aciditate necesară, puțin oxigen și enzime puternice distructive ale bilei și pancreasului. Prin urmare, forma cocică a bacteriei se găsește în scaun.

Simptomele leziunilor gastrice cauzate de Helicobacter pot fi minime sau pot corespunde tabloului clinic al unei exacerbări a bolii. Pacientul are:

balonare;
râgâială;
arsuri la stomac;
sindrom de durere, în special în timpul exacerbărilor primăvara și toamna;
constipație sau diaree;
senzație de greutate în epigastru;
scăderea apetitului;
pierdere bruscă în greutate.

Indicațiile pentru cercetare pot fi:

trebuie verificat inainte curs lung terapia cu medicamente antiinflamatoare nesteroidiene, inhibitori ai pompei de protoni, deoarece reduc producția de acid clorhidric în stomac;
semne de anemie cu deficit de fier;
trombocitopenie neclară;
posibilitatea infectarii membrilor familiei;
controlul cursului terapiei cu antibiotice;
elucidarea legăturii cu predispoziţia genetică.

La un copil, semnele de infecție includ plângeri de greață, dureri abdominale vagi, apetit scăzut și refuz de a mânca, regurgitare frecventă abundentă, precum și balonare și zgomot în abdomen.

Metoda culturii bacteriologice

Izolarea unei culturi de patogen este un tip de cercetare microbiologică. Metoda clasică necesită inocularea materialului pe un mediu nutritiv, numărarea coloniilor crescute și examinarea microorganismului din colonie la microscop. De asemenea, este necesar să se efectueze teste biochimice pentru a studia proprietățile sale și o inoculare suplimentară pe un mediu cu antibiotice pentru a identifica sensibilitatea la diferite medicamente.

Mediul de semănat este destul de scump, este preparat special

Este dificil să se efectueze un test de scaun pentru Helicobacter pylori folosind o metodă de cultură:

însămânțarea trebuie să aibă loc fără acces la oxigen;
se pot distinge doar forme în formă de spirală, care ajung rar în fecale, iar nu cele cocice;
rezultatele testului de sensibilitate la antibiotice in vitro (in vitro înseamnă „pe sticlă, într-o eprubetă”) în practică se dovedesc a fi înșelătoare și, în unele cazuri, nu coincid cu utilizarea efectivă la pacient (in vivo), antibioticul optim descoperit nu este suficient de eficient;
analiza necesită termen lung(7–10 zile) pentru implementare completă.

Metode de cercetare imunologică

Esența analizei imunologice este identificarea complexelor anticorp + antigen în care agentul străin este Helicobacter. Utilizarea mai frecventă este pentru testele de sânge. Dar, de fapt, semnele indirecte ale prezenței antigenului pot fi confirmate de prezența în scaun, salivă, urină și la femeile însărcinate în lichidul amniotic.

Metodele folosesc anticorpi „etichetate” gata preparate. Când tratează scaunul pacientului care conține antigene (rămășițe de Helicobacter), apare o reacție compusă cu anticorpii standard. Durata studiului este de o zi. Un test de scaun pentru antigenul Helicobacter este prescris dacă pacientul are orice simptome de tulburări digestive.

Cea mai comună opțiune este screeningul primar al populației (examinarea tuturor solicitanților sau a anumitor grupuri) care nu au plângeri specifice. Nu este utilizat în Rusia din cauza lipsei unui număr suficient de teste imunologice în laboratoarele clinice.

Metoda PCR

Reacția în lanț a polimerazei (PCR) se referă la diagnosticarea genetică moleculară. Cu ajutorul ei, nu bacteria este detectată, ci ADN-ul ei specific. Chiar și cu o cantitate mică, în cazul recuperării sau transportului asimptomatic, metoda face posibilă legarea modificărilor din organism cu efectul Helicobacter cu suficientă precizie.

Durata analizei folosind metoda expresă este de 5-6 ore, metoda obișnuită este de 2-3 zile.

Tehnica este concepută pentru sinteza artificială piese individuale ADN, duplicarea și construcția unui lanț de 30 de cicluri. Procesul nu are loc în absența celui mai mic reziduu de biomaterial. Pentru reacție este necesar un dispozitiv amplificator. Polimeraza este o enzimă care accelerează procesul.

Stool PCR este prescris pentru a confirma rolul Helicobacter în patologie și pentru a determina oportunitatea terapiei specifice:

pentru eroziuni și ulcere la nivelul stomacului, esofagului și duodenului;
reflux gastroesofagian (reflux de conținut în direcția opusă);
leziuni atrofice ale mucoasei gastrice;
polipi;
tumori de stomac;
identificarea predispoziției ereditare în cazul rudelor cu tumori maligne ale organelor digestive;
monitorizarea rezultatelor terapiei cu antibiotice.

sensibilitate și specificitate ridicate (definite ca 94% și respectiv 100%); reacția este pozitivă chiar și în prezența a 10 bacterii;
ușurința de implementare;
siguranța pacientului, absența traumei în timpul colectării materialelor;
capacitatea de a determina ADN-ul atât în formele elicoidale, cât și în cele cocice ale Helicobacter;
izolarea și studiul diferitelor modificări genetice și tulpini.

nu se poate determina antibioticul optim prin sensibilitate;
nu este nicio diferenta intre curent boala acutaȘi efecte reziduale după o exacerbare, ADN-ul bacterian rămâne în scaun aproape o lună după recuperarea clinică;
sensibilitatea este încă mai mică decât la examinarea unei biopsii din peretele stomacului;
cost relativ ridicat;
necesitatea instruirii personalului și achiziționării de echipamente;
reacție pozitivă în cazurile de contaminare a personalului a materialului din eșantionul altcuiva (contaminare externă).

Laboratorul PCR dispune de tehnologie avansată care vă permite să obțineți rezultate de încredere diagnostice

Cum se evaluează rezultatele testelor?

Decodificarea rezultatelor cercetării este treaba unui medic specialist. Nu trebuie să apelați la interpretare independentă sau să utilizați serviciile prietenilor. Evaluarea se realizează pe baza unui set de caracteristici. PCR dă următorul rezultat:

negativ, dacă genotipul Helicobacter nu a fost izolat, se găsește în mod normal;
pozitiv dacă pacientul este la apogeul bolii sau are antecedente de infecție.

În timpul examinării bacteriologice:

a fost detectat un număr zero de bacterii sau Helicobacter este absent;
dacă numărul de microorganisme este mai mare decât zero, se confirmă helibacterioza;
semnul S înseamnă sensibilitate la antibioticul declarat;
R - indică rezistența (rezistența) la medicament;
I - sensibilitate moderată.

Cultura scaunului ne permite să oferim nu numai caracteristici calitative, ci și cantitative ale infecției cu Helicobacter pylori. Pentru a face acest lucru, se ia în considerare gradul de creștere bacteriană:

Gradul 1 - se observă creștere slabă pe mediu lichid, pe probe solide - fără creștere;
gradul 2 - crește până la 10 colonii;
gradul 3 - numărul de colonii crescute ajunge la 100;
Gradul 4 - prevalența și activitatea agentului patogen este foarte activă, cresc peste 100 de colonii.

Testarea se efectuează folosind metoda imunotestul enzimatic cu seruri standard

Testele imunologice arată un rezultat negativ dacă antigenul patogen nu este detectat, un rezultat pozitiv în prezența helicobacteriozei. Fiabilitatea metodelor imunologice și culturale este semnificativ inferioară PCR; implementarea lor necesită o prevalență masivă a agentului patogen în fecale.

Cum să te pregătești pentru test?

Medicul vă va indica unde vă puteți testa. De asemenea, trebuie să familiarizeze pacientul cu regulile de colectare a materialului și pregătire. Unele clinici private oferă vizitatorilor instrucțiuni tipărite „Cum să faci teste”. Eficacitatea studiului depinde de respectarea acestor condiții.

Regulile generale pentru colectarea fecalelor pentru a identifica Helicobacter sunt:

încetați să luați agenți antibacterieni cu trei zile înainte de test;
Un test de control al scaunului se efectuează la o lună după terminarea cursului de tratament;
unele teste necesită trei zile înainte de test pentru a trece la o dietă fără alimente cu fibre alimentare, pentru a elimina murăturile și băuturile alcoolice;
interzicerea utilizării laxativelor și supozitoarelor rectale; dacă tratamentul necesită utilizarea zilnică, trebuie să vă informați medicul;
Fecalele trebuie colectate în recipiente curate de laborator (eliberate la clinică sau achiziționate de la farmacie), se recomandă prelevarea de probe din trei puncte;
Fecalele cu impurități de mucus, puroi, sânge, urină sunt considerate nepotrivite;
livrarea materialului la laborator trebuie să fie asigurată în primele 2 ore; dacă este necesar, acesta poate fi păstrat la frigider pentru cel mult o zi la o temperatură de 2 până la 8 grade.

Un kit special pentru colectarea scaunului pentru analiză poate fi achiziționat de la o farmacie

Cercetare suplimentară

În timpul diagnosticului, pacientul nu trebuie să insiste asupra unei examinări izolate a scaunului. Folosind tipuri suplimentare, medicul crește fiabilitatea informațiilor despre infecția cu Helicobacter.

Testele respiratorii cu ureaza sunt foarte populare.

Un tip de examinare de necontestat este examinarea citologică a unei probe de mucoasă gastrică obținută prin biopsie în timpul unui examen fibrogastroscopic. Cu un microscop de înaltă rezoluție, asistentul de laborator vede un Helicobacter colorat.

Imaginea fibrogastroscopică a membranei mucoase însăși cu eroziuni caracteristice, atrofie și ulcerație indică semne indirecte ale prezenței unui agent patogen în stomac. Diagnosticarea cu raze X face posibilă, de asemenea, judecarea patologiei organice cauzate de Helicobacter prin anomalii în direcția pliurilor și contururilor stomacului.

Pe baza rezultatelor testelor, medicul poate plasa pacientul într-un grup de risc cu o probabilitate crescută de a dezvolta un ulcer gastric, tumori maligne. Utilizarea prealabilă a unui tratament specific poate reduce riscul. Atunci când alegeți o instituție medicală pentru a efectua cercetări plătite, trebuie să vă consultați despre reputația și responsabilitatea angajaților săi.

Analiza scaunului pentru Helicobacter pylori: pregătire și interpretare

Helicobacter pylori este una dintre cele mai periculoase bacterii care provoacă dezvoltarea diferitelor boli ale stomacului și duodenului. Pentru a diagnostica patologia, nu este prescris doar un test de sânge, ci și un test de scaun.

Helicobacter pylori: cauze și simptome

Helicobacter pylori este o bacterie patogenă care infectează duodenul și stomacul

Următoarele simptome sunt caracteristice infecției cu Helicobacter pylori:

Arsuri la stomac
Greață și vărsături
Miros din gură
Pierderea poftei de mâncare
Balonare
Tulburarea scaunului
Disconfort după masă

Simptomele enumerate sunt similare cu cele ale gastritei și ulcerelor, prin urmare, pentru a identifica agentul patogen și a trata helicobacterioza, este necesar să se supună unei examinări.

Analiza scaunului: pregătirea și colectarea materialului

Recipiente medicale de unică folosință pentru colectarea scaunului pentru analiză

În laborator, materialul rezultat este examinat folosind metoda PCR. Acesta este un diagnostic genetic molecular care vă permite să identificați Helicobacter chiar și un mic fragment de ADN bacterian din materialul colectat. Studiul se realizează în anumite condiții și condiții de temperatură.

Mai multe informații despre Helicobacter pylori pot fi găsite în videoclip:

Pentru depistarea infectiei cu Helicobacter pylori se pot folosi si alte metode: analiza culturala si imunologica. Metoda de cultură este de obicei înțeleasă ca inoculare bacteriologică a materialului studiat. Este plasat într-un mediu special pentru creșterea bacteriilor. De obicei este de aproximativ 10 zile. Apoi tipul de bacterie și capacitatea acesteia de a intra în reacții biochimice sunt examinate la microscop. Această metodă vă permite să determinați sensibilitatea bacteriilor identificate la antibiotice, ceea ce vă permite să prescrieți un tratament corect și adecvat.

Metoda imunologică presupune aderarea anticorpilor la antigeni. Această metodă de examinare se efectuează în caz de simptome severe și înaintea metodei de examinare instrumentală. Alegerea unei metode specifice se face de către medic, luând în considerare diverși factori.

Decodificarea analizei scaunului

La examinarea scaunului folosind PCR pentru Helicobacter pylori, rezultatul poate fi negativ sau pozitiv. În primul caz, nu au fost detectate bacterii în scaun, dar în celălalt caz a fost prezent un antigen al Helicobacter.

Analiza culturii bacteriene din scaun implică o evaluare calitativă și cantitativă a microorganismelor din mediul de testare. Există 4 grade de creștere bacteriană:

gradul I. Într-un mediu lichid favorabil, creșterea bacteriilor identificate este slabă, iar într-un mediu solid nu se observă deloc.
gradul 2. Reproducerea și creșterea unui anumit tip de microfloră ajunge până la 10 colonii.
gradul 3. Se distinge printr-o creștere semnificativă de până la 100 de colonii în medii solide.
gradul 4. Creșterea bacteriei este foarte mare și depășește 100 de colonii.

Al treilea și al patrulea grad indică un proces inflamator provocat de un anumit tip de bacterii.

Prezența Helicobacterului în fecale nu indică un ulcer gastric sau alte boli ale tractului gastrointestinal, ci determină doar prezența unei bacterii patogene. Dacă, conform rezultatelor analizei, mucoasa gastrică este colonizată cu Helicobacter, atunci în multe cazuri aceasta este însoțită de patologii precum ulcer, gastrită, sindrom de colon iritabil, tumoră carcinogenă, pancreatită etc.

Numai testele de laborator nu sunt suficiente pentru a face un diagnostic precis. Examinarea trebuie să fie cuprinzătoare și să includă o biopsie și un examen histologic.

Helicobacter în timpul sarcinii: pericol pentru făt și metode de tratament

Bacteria patogenă nu afectează cursul sarcinii și starea copilului

În timpul sarcinii, tractul gastrointestinal este supus unei sarcini grele. În acest caz, se observă foarte des arsuri la stomac, dureri în regiunea epigastrică etc. Riscul de apariție a unui ulcer este foarte mare, așa că viitoarea mamă trebuie examinată pentru a identifica această infecție pentru a evita posibile încălcări.

Tratamentul helicobacteriozei în timpul sarcinii și alăptării este interzis din cauza posibilului efect negativ al antibioticelor asupra fătului.

Printre medicamentele care sunt permise se numără Phosphalugel și Maalox. Dintre antispastice, Drotaverine, Baralgin, Papaverine pot fi utilizate numai cu permisiunea unui medic.

Dacă infecția cu Helicobacter pylori se manifestă activ în timpul gestației, atunci simptomele toxicozei sunt pronunțate și apar foarte devreme. Toxicoza poate fi observată până la 5 luni. O femeie însărcinată ar trebui să respecte o dietă specială și să excludă din alimentație alimentele care irită mucoasa gastrică. Dieta nr. 1 este prescrisă în perioada acută. Este interzis consumul de carne și pește gras, bulion bogat, afumaturi, varză, spanac, ridichi etc.

Helicobacterioza: tratament

Dacă este detectată infecția cu Helicobacter pylori, este prescrisă terapia cu antibiotice

Medicamentele antibacteriene utilizate includ metronidazol, claritromicină, tetraciclină, amoxicilină etc.
Pe lângă antibiotice, se prescriu medicamente anti-acide: esomeprazol, lansoprazol, omeprazol etc. La utilizarea acestor medicamente, producția de acid clorhidric scade.
Pentru a reduce aciditatea, este indicată utilizarea Almagel, Maalox, Alumag și alte medicamente similare. Aceste medicamente au efecte adsorbante, învelitoare și gastroprotectoare.
Pentru a restabili microflora intestinală, după utilizarea antibioticelor, se folosesc probiotice: Lactoferină, Vitaflor,

În timpul tratamentului, trebuie să respectați o alimentație adecvată. Alimentele trebuie porționate, nici calde, nici reci. Ar trebui să mănânci alimente strict la anumite ore. Meniul dietei trebuie aprobat de un medic, dar recomandarile pentru toti pacientii cu afectiuni gastrointestinale sunt aceleasi: evitati mancarurile grase, prajite, sarate, condimentele, marinatele, alcoolul si bauturile carbogazoase.

Adaugă un comentariu Anulează răspunsul

În continuarea articolului

Suntem pe rețelele de socializare retelelor

Comentarii

GRANT – 25.09.2017
Tatiana – 25.09.2017
Ilona – 24.09.2017
Lara – 22.09.2017
Tatyana – 22.09.2017
Mila – 21.09.2017

Subiecte de întrebări

Analize

Ecografia/RMN

Facebook

Noi întrebări și răspunsuri

Conținutul acestei pagini are doar scop educațional și informativ și nu poate și nu constituie o ofertă publică, care este definită de art. Nr. 437 din Codul civil al Federației Ruse. Informațiile furnizate au doar scop informativ și nu înlocuiesc examinarea și consultarea unui medic. Există contraindicații și posibile efecte secundare, consultați un specialist

Cum se face un test de scaun pentru Helicobacter pylori

Modern metode de diagnostic Ele vă permit să învățați multe despre sănătatea unei persoane din fluidele sale biologice: sânge, urină, fecale.

Examinând scaunul, puteți afla dacă bacteria H. pylori, care poate provoca gastrită, ulcer gastric și poate provoca patologia cancerului, s-a instalat în organism.

Fecalele pentru prezența sau absența acestui microbi pot fi studiate în trei moduri: cultural, imunologic și cea mai fiabilă și răspândită metodă - reacția în lanț a polimerazei (PCR).

Determinarea Helicobacter prin metoda de cultură

Bacteria în sine se găsește extrem de rar în fecale în forma sa obișnuită în S. Intestinul gros și fecalele nu sunt un mediu favorabil pentru microorganism, prin urmare, atunci când acesta pătrunde în ele, poate lua o formă rotundă de coc, apărând ocazional în fecale sub această formă.

Metoda de cultură presupune însămânțarea unei părți din materialul de testat pe un mediu nutritiv în care bacteriile se vor simți bine și vor începe să se înmulțească.

Se dezvoltă colonii, care sunt analizate, colorate cu reactivi speciali și examinate la microscop. În acest fel, microbii patogeni sunt cultivați literalmente în scopul unor studii ulterioare.

Pe lângă detectarea bacteriei în sine, metoda permite determinarea sensibilității agentului patogen la un anumit antibiotic. Dacă la adăugare medicament creșterea coloniei este menținută - H. pylori este rezistent la agentul antibacterian, iar dacă microorganismele mor, este logic să prescrieți acest medicament pacientului în scopul tratamentului și eradicării, bacteriile sunt sensibile la acesta.

Metoda de cultură este foarte fiabilă, dar numai dacă forma S a microbilor se găsește în materialul biologic prelevat. Metoda are dezavantajele sale și, din acest motiv, nu este foarte răspândită:

Perioada de cercetare durează de la 6 la 12 zile
Medii scumpe pentru însămânțarea bacteriilor Helicobacter
Condiții specifice pentru mediile care asigură creșterea coloniilor greu de reprodus în laborator
Apariția rară a bacteriilor în formă de S în fecale potrivite pentru creștere în condiții de nutrienți (formele cocice nu sunt studiate)

Determinarea antigenului Helicobacter pylori în fecale prin metoda imunologică

Fecalele pacientului pot fi supuse cercetărilor imunologice, ceea ce permite identificarea nu a microorganismului în sine, ci a părților sale - antigene.

Anticorpii speciali sunt utilizați pentru a detecta un antigen străin - părți ale unei bacterii, produsele sale metabolice, materialul genetic.

Interacționând cu un agent străin, anticorpii formează un complex specific, care este determinat prin imunotest enzimatic.

Această metodă de studiu a scaunului este rar folosită în Rusia; nu sunt multe laboratoare echipate reactivii necesariși testele necesare.

Dar în viitor este posibil să se includă aceasta metoda detectarea Helicobacterului ca teste de screening: studii pe grupuri mari de populație pentru infecția cu bacterie.

Analiza PCR a scaunului pentru Helicobacter pylori

Aceasta este cea mai comună metodă de examinare a fecalelor pentru această bacterie, cu mare precizie.

Esența metodei este următoarea:

O secțiune de ADN bacterian este izolată din materialul biologic al pacientului, care este apoi duplicat artificial de mai multe ori pe un aparat special, astfel este restaurat codul genetic al H. pylori.

Când fragmentul genomic al unui microb atinge o dimensiune suficientă, acesta este comparat cu cel de referință și se face o concluzie despre microorganismul studiat: dacă este Helicobacter sau alt agent patogen.

Un test PCR pozitiv înseamnă prezența infecției cu Helicobacter pylori în corpul uman: bacteria este prezentă în stomac, fragmentele sale de ADN au fost găsite în scaun și au coincis cu cele de referință.

Precizie ridicată: chiar și o cantitate mică de material genetic este suficientă pentru cercetare cu un procent mare de încredere, apropiindu-se de 99%.
Viteza cercetării. 2 zile sunt suficiente pentru analiză, dar există metode exprese care vă permit să stabiliți un diagnostic în câteva ore.
Nedureroasă. Metoda este atraumatică și neinvazivă. Vă permite să examinați copii mici, vârstnici, pacienți debilitați pentru care FGDS cu biopsie și alte manipulări endoscopice sunt contraindicate.
Pentru un rezultat precis, nu este necesar să se detecteze fragmente de ADN de forme exacte S sau elicoidale; părțile microbilor cocici (cele mai frecvente în fecale) sunt, de asemenea, potrivite pentru analiză.

Diagnosticul PCR are mult mai multe avantaje decât dezavantaje. Dezavantajele includ:

Costul de analiză relativ ridicat.
Conservarea fragmentelor de ADN microbian în fecale și după eradicare. Chiar dacă tratamentul este reușit și bacteria este absentă din organism, după un timp sunt găsite fragmente de ADN în materialul biologic și un test de scaun pentru Helicobacter poate da un rezultat pozitiv. Prin urmare, pentru a monitoriza vindecarea, diagnosticul PCR este recomandat nu mai devreme de 1 lună de la terminarea terapiei.
Echipament special scump de înaltă tehnologie, care necesită personal instruit și instruit pentru a funcționa.

Test de scaun in vitro pentru antigenul Helicobacter pylori

Toate studiile de diagnostic efectuate cu fecalele pacientului se referă la manipulări in vitro - „in vitro”, „în sticlă”, în afara corpului uman.

Au o acuratețe și un conținut de informații destul de ridicat dacă urmăresc scopul de a detecta un microbi.

Dar nu toate procesele care au loc „in vivo” - în interiorul corpului uman, pot fi recreate „in vitro” cu aceeași fiabilitate. De exemplu, determinarea sensibilității la antibiotice, analizată prin cultură.

La studierea sensibilității antibacteriene a coloniilor microbiene pe culturi de nutrienți, s-a dezvăluit că cele mai potrivite medicamente pentru bacterii in vitro „nu au funcționat” și s-au dovedit a fi ineficiente în tratarea pacientului.

Rezultatele studiilor in vitro ale sensibilității bacteriene la antibiotice nu sunt întotdeauna exacte.

Cum se face un test de scaun pentru Helicobacter pylori

Conținutul informațional al unui test de diagnostic depinde nu numai de studiul ales, de calitatea echipamentului și de calificarea personalului, ci și de modul în care pacientul s-a pregătit pentru analiză.

Fecalele pentru cercetare trebuie colectate corect:

După defecare, o parte din materiile fecale trebuie plasate într-un recipient steril pentru colectarea materialului biologic, care trebuie achiziționat în prealabil de la o farmacie sau un laborator.
Preveniți pătrunderea sângelui, urinei, salivei, puroiului și a altor impurități străine în materialul biologic, care pot distorsiona rezultatele analizei.
Recipientul cu conținutul trebuie închis ermetic și livrat la laborator cu cel puțin 4-5 ore înainte de studiu.

Pe lângă respectarea aspectelor tehnice ale colectării materialului pentru analiză, cu câteva zile înainte de a dona scaun, trebuie să urmați următoarele recomandări:

Cu o săptămână înainte de test, nu mai luați antibiotice.
Timp de trei zile, nu beți alcool, alimente bogate în fibre, sau cele care pot colora scaunele: sfeclă, băuturi cu coloranți.
Nu utilizați supozitoare rectale sau unguente, nu utilizați laxative.

Respectarea regulilor de mai sus va permite medicului diagnostic de laborator evaluează cât mai precis posibil starea de sănătate a pacientului și trage concluziile corecte în timpul analizei.

Fiabilitatea analizei scaunului pentru Helicobacter

PCR - diagnosticul fecalelor este cea mai fiabilă dintre toate cele trei metode descrise mai sus, este într-o oarecare măsură inferioară doar examinării endoscopice prin biopsie.

Analiza PCR a fecalelor dă rareori rezultate fals pozitive, este foarte specifică și permite examinarea materialului ADN al formelor cocice frecvent întâlnite de Helicobacter în fecale.

Fiabilitatea metodei culturale și imunologice este mai mică decât PCR. Aceste metode sunt predispuse la rezultate fals-pozitive, dar în combinație cu alte metode de detectare a Helicobacter pylori, sunt un instrument excelent pentru stabilirea unui diagnostic.

Antigenul H. pylori din fecale

Dacă în scaun este detectat antigenul Helicobacter pylori sau un fragment de ADN al microorganismului studiat, aceasta înseamnă că:

Persoana este infectată cu H. pylori.
Terapia de eradicare nu este suficient de eficientă și microbul nu a dispărut din mucoasa gastrointestinală.
A trecut mai puțin de o lună de la terapie și antigenele agenților patogeni morți rămân în scaun.

Pentru a exclude un rezultat fals pozitiv după ce ați fost supus unui regim de terapie anti-Helicobacter (atunci când testul este pozitiv și corpul uman nu conține H. pylori), nu trebuie să vă grăbiți să aflați eficacitatea tratamentului, ci așteptați cel puțin o dată. lună de la finalizarea acestuia.

Dacă tratamentul bacteriilor are succes, la 1 lună de la eradicare, antigenele și ADN-ul microbilor nu sunt detectate în scaun. Rezultatul examenului este negativ.

Dacă în timpul analizei inițiale sunt detectați antigeni, medicul va recomanda pacientului să se supună unui curs de terapie specială care vizează distrugerea H. pylori.

[09-053 ] Helicobacter pylori, ADN [PCR în timp real]

1025 rub.

Ordin

Detectarea Helicobacter pylori (H. pylori), în timpul căreia materialul genetic (ADN) al microorganismului dintr-o probă de biomaterial este determinat folosind metoda reacției în lanț a polimerazei în timp real (RT-PCR).

Sinonime rusă

Helicobacter [reacție în lanț a polimerazei în timp real].

Sinonime în engleză

H. pylori, Helicobacter pyloridis, ADN.

Metodă de cercetare

Reacție în lanț a polimerazei în timp real.

Ce biomaterial poate fi folosit pentru cercetare?

Biopsie, cal.

Informații generale despre studiu

H. pylori este o bacterie gram-negativă, mobilă, care este rezistentă la acidul clorhidric și poate coloniza membrana mucoasă a stomacului și a duodenului. De regulă, infecția primară apare în copilărie și este asimptomatică, dar la unii oameni duce la dezvoltarea unor boli grave în timp. H. pylori se găsește în marea majoritate a cazurilor de gastrită și ulcer peptic și, în plus, crește foarte mult riscul de a dezvolta adenocarcinom și limfom cu celule B la stomac. Diagnosticare modernă a acestor boli este imposibil fără identificarea precisă și rapidă a H. pylori.

H. pylori poate fi detectat prin mai multe metode. În prezent, sunt disponibile metode de diagnostic neinvazive, care au avantajul simplității și siguranței prelevării unui eșantion pentru cercetare (examinarea scaunului), ceea ce are o importanță deosebită atunci când se examinează vârstnici, copii și, de asemenea, în ambulatoriu.

Helicobacter este foarte sensibil la efectele acizilor biliari și a conținutului scăzut de oxigen, prin urmare, atunci când chimul trece prin duoden și colon, numărul de bacterii este redus semnificativ. În plus, bacteriile active în formă de spirală suferă modificări morfologice, oferind o mai mare stabilitate în conditii nefavorabile. Rezultatul este o concentrație scăzută de microorganisme și o predominanță a formelor cocice în fecale, care trebuie luate în considerare la alegere. metoda de laborator cercetarea acestui biomaterial. Printre multe metode non-invazive, cercetarea care utilizează reacția în lanț a polimerazei în timp real ocupă un loc special.

Reacția în lanț a polimerazei în timp real (RT-PCR) este o metodă de diagnostic molecular care vă permite să detectați fragmente de material genetic (ADN) ale unui agent infecțios în materialul biologic (de exemplu, în fecale). RT-PCR se caracterizează printr-o sensibilitate foarte mare (93-95%), ceea ce reprezintă un avantaj atunci când se analizează scaunul. Spre deosebire de cultura bacteriologică, acest test poate detecta atât formele spiralate, cât și cele cocice (necultivabile) ale H. pylori. Datorită faptului că reacția dezvăluie ADN-ul unui microorganism, testul nu este utilizat pentru diagnostic diferentiat infecție curentă sau infecție în istorie - rezultatul testului va fi pozitiv pentru ceva timp după eradicarea completă a H. pylori, care se datorează identificării fragmentelor de ADN distrus ale microorganismului.

Pe mucoasa gastrică pot fi prezenți și alți reprezentanți ai genului Helicobacter (H. suis, H. baculiformis). Deși importanța lor în dezvoltarea bolilor gastrointestinale nu a fost încă pe deplin stabilită, ele joacă un rol în identificarea H. pylori. De exemplu, cercetare de laborator, pe baza identificării unui antigen comun tuturor speciilor de Helicobacter, va fi caracterizat un numar mare rezultate fals pozitive pentru H. pylori datorită detectării altor specii (cum este cazul ELISA). Acest lucru este practic exclus într-un studiu care utilizează RT-PCR, deoarece reacția se bazează pe detectarea unui fragment de ADN specific H. pylori.

Diagnosticul helicobacteriozei la copii prezintă anumite dificultăți. Acest lucru se datorează eșecului copilului de a efectua manevra de respirație atunci când se utilizează testul respirator cu urează, precum și nevoii de anestezie atunci când se utilizează metode invazive. Testarea scaunului folosind RT-PCR este o alternativă bună la aceste metode și, prin urmare, poate fi utilizată cu succes în practica pediatrică.

Conținutul ridicat de săruri anorganice (fosfați, calciu), enzime gastrointestinale, polizaharide, acizi și săruri biliare, fibre vegetale, mucus și alte componente ale fecalelor pot inhiba RT-PCR, astfel încât pregătirea pentru test necesită atenția cuvenită din partea pacientului iar doctorul. Interpretarea rezultatului analizei se realizează ținând cont de date suplimentare de laborator și instrumentale.

La ce se folosește cercetarea?

Pentru a diagnostica bolile cauzate de H. pylori:

gastrită atrofică sau antrală;
ulcere ale stomacului și duodenului.

Când este programat studiul?

Dacă bănuiți gastrită sau ulcer peptic la copii si varstnici.
Dacă este imposibil să se utilizeze metode invazive pentru identificarea H. pylori la pacienții de orice vârstă.

Ce înseamnă rezultatele?

Valori de referinta: negativ.

Rezultat pozitiv:

infecția actuală cu H. pylori;
Istoricul infecției cu H. pylori.

Rezultat negativ:

absența infecției cu H. pylori.

Ce poate influența rezultatul?

Prezența sângelui, a bilei, a excesului de săruri anorganice și a altor componente în proba de scaun poate duce la un rezultat fals negativ.
Tratamentul cu tetraciclină, penicilină (aminopeniciline), macrolide (claritromicină, azitromicină) și metronidazol poate duce la un rezultat fals negativ.

Notite importante

Helicobacter pylori

Reacția în lanț a polimerazei (PCR) crește numărul de copii ADN al bacteriilor sau virușilor de milioane de ori folosind enzima ADN polimerază. O moleculă de ADN este suficientă pentru diagnostic. Cantitatea de ADN sintetizată este identificată prin imunotest enzimatic sau electroforeză. Diagnosticarea PCR vă permite să detectați agentul patogen în primele etape ale procesului infecțios, în orice mediu biologic al organismului, cu posibilitatea determinării cantitative a virușilor sau bacteriilor.

Helicobacter pylori este o bacterie spirală gram-negativă care a fost descoperită pe mucoasa gastrică în urmă cu mai bine de jumătate de secol, dar nu a atras prea mult interes până la începutul anilor 1980, când a fost dezvoltată o metodă de cultivare a organismelor din biopsiile mucoasei.

În 1983, medicul australian Barry Marshall a descoperit că H. pylori era aproape întotdeauna prezent în stomacul pacienților care sufereau de gastrită cronică sau un ulcer. Bacteriile, prin ele însele, nu provoacă ulcere gastrice sau duodenale, dar provoacă procese inflamatoriiîn stomac și slăbesc protectie naturala membrana mucoasă de la expunere mediu acid stomac; in acelasi timp, H. pylori stimuleaza hipersecretia de acid clorhidric, afectand mecanismele de reglare a acestuia. Dacă terapia duce la o scădere a acidității stomacului, ulcerul se poate vindeca, dar după oprirea tratamentului există posibilitatea reapariției acestuia. Observațiile pe termen lung au arătat că la pacienții care nu au primit tratament împotriva H. pylori, ulcerul recidivează după 2 ani în 100%, iar la pacienții tratați recidivează (de obicei din cauza reinfectării cu H. pylori) în doar 5-10. %. Sursa infecției cu H. pylori este o persoană infectată, pisici, porci, mari bovineși maimuțe (macac rhesus). Mai des, infecția are loc prin apă și alimente contaminate cu fecale (legume care au fost udate cu apă contaminată). Obiectul transmiterii principiului infecțios poate fi mâinile contaminate, saliva, picăturile de salivă sau spută în timpul tusei. Studiile efectuate de medici din SUA au arătat că H. pylori poate fi considerată o infecție familială, iar dacă într-o familie este identificat un purtător de H. pylori, atunci probabilitatea ca alți membri ai familiei să fie infectați este de 95%. Detectarea Helicobacter prin PCR face posibilă stabilirea unui diagnostic mult mai rapid și monitorizarea tratamentului. Materialele pentru cercetare pot include aspirate gastrice, fecale și saliva.

Vă rugăm să rețineți că luarea unui frotiu urogenital, frotiu din gât, nas și cavitatea bucală este plătită.