Immunoblotting (immunoblot) to wysoce swoista i bardzo czuła metoda referencyjna, która potwierdza diagnozę u pacjentów z uzyskanymi pozytywnymi lub niepewnymi wynikami badań, m.in. za pomocą RPGA lub ELISA .

Ta metoda wykrywania przeciwciał przeciwko poszczególnym antygenom patogenu opiera się na teście ELISA na błonach nitrocelulozowych, na które nanosi się specyficzne białka w postaci oddzielnych prążków oddzielonych elektroforezą żelową. Jeśli istnieją przeciwciała przeciwko określonym antygenom, w odpowiednim miejscu paska pojawia się ciemna linia. Wyjątkowość immunoblotu polega na wysokiej zawartości informacji i wiarygodności uzyskanych wyników.

Materiał do badań to ludzka surowica lub osocze. Do badań na jednym pasku wymagane jest 1,5-2 ml krwi lub 15-25 μl surowicy.

Zgodnie z zaleceniem WHO, Western blot jest stosowany w diagnostyce zakażenia wirusem HIV jako dodatkowa metoda ekspercka, która musi potwierdzić wyniki testu ELISA. Zwykle ta metoda służy do podwójnego sprawdzenia pozytywnego wyniku za pomocą testu ELISA, ponieważ jest uważana za bardziej czułą i specyficzną, chociaż bardziej skomplikowaną i kosztowną.

Immunoblotting łączy test immunoenzymatyczny (ELISA) ze wstępną elektroforetyczną separacją białek wirusowych w żelu i ich przeniesieniem na błonę nitrocelulozową. Procedura immunoblot składa się z kilku etapów. Najpierw wirus HIV, wcześniej oczyszczony i zdegradowany do składowych składników, poddawany jest elektroforezie, podczas gdy wszystkie antygeny tworzące wirusa są rozdzielone masą cząsteczkową. Antygeny są następnie przenoszone z żelu na nitrocelulozowy lub nylonowy pasek filtrujący, który teraz zawiera spektrum białek HIV niewidocznych dla oka. Następnie materiał testowy nakłada się na pasek (surowicę, osocze krwi pacjenta itp.), A jeśli w próbce znajdują się specyficzne przeciwciała, wiążą się one z paskami białek antygenowych ściśle im odpowiadających. W wyniku kolejnych manipulacji (np. ELISA) wynik tej interakcji jest wizualizowany – staje się widoczny. Obecność prążków w niektórych częściach paska potwierdza obecność w badanej surowicy przeciwciał przeciwko ściśle określonym antygenom HIV.

Do potwierdzenia diagnozy zakażenia wirusem HIV najczęściej stosuje się immunoblotting. WHO uważa surowice pozytywne, w których przeciwciała przeciwko dowolnym dwóm białkom otoczki HIV są wykrywane przez immunoblotting. Zgodnie z tymi zaleceniami, jeśli dojdzie do reakcji tylko z jednym z białek otoczki (gp160, gp120, gp41) w połączeniu lub bez reakcji z innymi białkami, wynik jest wątpliwy i zaleca się ponowne badanie przy użyciu zestawu innego seria lub inna firma. Jeśli nawet po tym wynik pozostaje wątpliwy, badania są kontynuowane co 3 miesiące.

Osobliwości

Analiza Immunoblot to niezawodna metoda, która pozwala określić obecność przeciwciał przeciwko antygenom HIV pierwszego i drugiego typu. Jeśli dana osoba jest zarażona, przeciwciała pojawiają się w ciągu dwóch tygodni, co można wykryć znacznie później. Osobliwością wirusa HIV jest to, że liczba przeciwciał gwałtownie wzrasta i pozostaje we krwi pacjenta. Nawet jeśli są obecne, choroba może nie objawiać się przez dwa lub więcej lat. Metoda ELISA nie zawsze dokładnie określa obecność choroby, dlatego wymagane jest potwierdzenie wyników za pomocą immunoblottingu i PCR, jeśli test immunoenzymatyczny wykazał wynik pozytywny.

Wskazania do wizyty

Czym jest ten „immunoblot” został już odkryty, ale komu przydzielono to badanie? Powodem przejścia testów na wirusa ludzkiego niedoboru odporności (HIV) metodą immunoblottingu jest pozytywny wynik testu ELISA. Konieczne jest poddanie się testowi immunoabsorpcji enzymatycznej w przypadku pacjentów, którzy będą operowani. Ponadto należy przeprowadzić analizę dla kobiet planujących ciążę, a także dla wszystkich, którzy prowadzą rozwiązłe życie seksualne. Przydziel immunoblotting pacjentom z HIV, jeśli wyniki testu ELISA są wątpliwe.

Powodem kontaktu z lekarzem mogą stać się następujące niepokojące objawy:

• drastyczna utrata wagi;
• osłabienie, utrata wydajności;
• zaburzenia wypróżnień (biegunka), które trwają przez trzy tygodnie;
• odwodnienie organizmu;
• gorączka;
• powiększone węzły chłonne na ciele;
• rozwój kandydozy, gruźlicy, zapalenia płuc, toksoplazmozy, zaostrzenia opryszczki.

Pacjent nie musi przygotowywać się przed oddaniem krwi żylnej. Nie należy spożywać pokarmu 8-10 godzin przed badaniem. Nie zaleca się picia napojów alkoholowych i kawowych na dzień przed oddaniem krwi, wykonywania ciężkich ćwiczeń fizycznych, odczuwania niepokoju.

Jak prowadzone są badania?

Z punktu widzenia pacjenta immunoblot nie różni się niczym od innych analiz: pobierana jest krew żylna, badana i uzyskiwany wynik. Ale jeśli przejdziesz do techniki bardziej szczegółowo, to nie jest to bardzo proste, ale spróbujmy to rozgryźć.

Najpierw w zakładzie produkującym odczynnik pobierany jest „wzorcowy” ludzki wirus niedoboru odporności. Następnie za pomocą specjalnej procedury (elektroforezy) w pożywce żelowej wirus jest niszczony do najmniejszych składników: białek (antygenów wirusa). Następnie za pomocą samego blottingu (z angielskiego blotting) drobinki umieszcza się na specjalnym materiale – nitrocelulozie lub filtrze nylonowym, w wyniku czego powstaje gotowy do użycia wskaźnik tzw. pasek. Pasek to pasek, w którym antygeny są rozmieszczone, w zależności od ich masy cząsteczkowej, w wyraźnej kolejności, to znaczy, że pewne białko odpowiada każdemu milimetrowi papieru.

Jak być może wiesz, jeśli wirusy są obecne w ludzkiej krwi, organizm zaczyna wytwarzać przeciwciała przeciwko ich błonom (niektóre białka), a każdy wirus ma swój indywidualny zestaw białek antygenowych. Podstawą metody immunoblot jest wykrywanie przeciwciał przeciwko białkom antygenowym we krwi. W końcu, jeśli przeciwciało zderzy się z antygenem, z pewnością będą ze sobą oddziaływać - „przykleją się”.

Tak więc antygeny znajdują się na pasku paska i jeśli we krwi osoby badanej znajdują się odpowiednie antygeny, koniecznie będą ze sobą oddziaływać i w tym miejscu na pasku paska pojawi się wskaźnik - będzie płaski ( jak test ciążowy). Co więcej, w określonym miejscu na pasku, dzięki czemu lekarz zrozumie, czy we krwi znajduje się zestaw białek charakterystycznych dla konkretnego wirusa.

Czyli np. jeśli na pasku jest ciemnienie w miejscach lokalizacji białek GP160, GP120, GP41 Zdiagnozowano HIV, dla innych wirusów będzie to zupełnie inny zestaw białek.

Należy zauważyć, że immunoblot pozwala dokładnie ustalić obecność wirusa tylko wtedy, gdy zestaw przeciwciał we krwi jest kompletny, to znaczy, jeśli białka gp160, gp120, gp41 są obecne jednocześnie, to jest to 100% HIV zakażenie. Ale jeśli brakuje chociaż jednego, na przykład: brak gp41, ale jest tylko gp160, gp120, to test uważa się za wątpliwy i należy go powtórzyć.

FAQ

Jakie etapy obejmuje immunoblot?

1. Przygotowanie paska. Wirus niedoboru odporności (HIV), wcześniej oczyszczony i zdegradowany do swoich składowych składników, poddawany jest elektroforezie, podczas gdy antygeny będące częścią wirusa HIV są rozdzielane masą cząsteczkową. Następnie za pomocą blottingu (analogicznie do wyciskania nadmiaru atramentu na blotterze) antygeny są przenoszone na pasek nitrocelulozy, który teraz zawiera spektrum niewidocznych dla oka prążków antygenowych, charakterystycznych dla wirusa HIV.
2. Przykładowe badania. Materiał testowy (surowica, osocze krwi pacjenta itp.) Nanosi się na pasek nitrocelulozowy, a jeśli w próbce znajdują się specyficzne przeciwciała, wiążą się one z ściśle odpowiadającymi (komplementarnymi) prążkami antygenowymi. W wyniku kolejnych manipulacji wynik tej interakcji jest wizualizowany - uwidaczniany.
3. Interpretacja wyniku. Obecność prążków w określonych obszarach płytki nitrocelulozowej potwierdza obecność w badanej surowicy przeciwciał przeciwko ściśle określonym antygenom HIV.

• Linia A - Kontrola pozytywna
• Słupek B – Słaba kontrola pozytywna
• Linia C - Kontrola negatywna
• Linia D — próbka dodatnia (wykryto przeciwciała HIV-1)

Jak rozszyfrować analizę?

Jeśli test ELISA wykazał obecność wszystkich lub prawie wszystkich przeciwciał przeciwko antygenom zgodnie z tym systemem testowym, oznacza to pozytywny wynik testu na HIV. Jeśli odpowiedź po drugim serologicznym teście immunoenzymatycznym jest pozytywna, należy wykonać immunoblot. Odszyfrowanie jego wyników będzie bardziej poprawne. Jeśli test immunoenzymatyczny dał wynik pozytywny, następna analiza immunoblot również wykazała obecność wirusa HIV, a następnie umieszcza się wynik końcowy.

Kiedy testy zostaną odszyfrowane, musisz wiedzieć, że pozytywny wynik testu na HIV określa:

• 60% do 65% 28 dni po zakażeniu;
• 80% - po 42 dniach;
• w 90% - po 56 dniach;
• 95% - po 84 dniach.

Jeśli odpowiedź na HIV jest pozytywna, oznacza to, że wykryto przeciwciała przeciwko wirusowi. Aby uniknąć fałszywej odpowiedzi pozytywnej, konieczne jest powtórzenie testu, najlepiej dwa razy. Jeśli przeciwciała na niedobór odporności zostaną wykryte po przejściu dwóch testów z dwóch lub po przejściu 3 testów w 2 z nich, wynik jest uważany za pozytywny.

Antygen p24 można wykryć we krwi już po 14 dniach od zakażenia. Stosując metodę testu immunoenzymatycznego, antygen ten jest wykrywany od 14 do 56 dni. Po 60 dniach nie ma go już we krwi. Dopiero gdy w organizmie wytworzy się AIDS, białko p24 ponownie wzrośnie we krwi. Dlatego też systemy testów immunoenzymatycznych są wykorzystywane do wykrywania wirusa HIV we wczesnych dniach zakażenia lub do określania postępu choroby i monitorowania procesu leczenia. Wysoka czułość analityczna testu immunoenzymatycznego wykrywa antygen p24 w materiale biologicznym przy HIV pierwszego podtypu w stężeniu od 5 do 10 pkg/ml, przy HIV drugiego podtypu od 0,5 ng/ml lub mniej.

Pod wątpliwy wynik testu immunoabsorpcji enzymatycznej sugeruje, że gdzieś w diagnozie popełniono błąd, z reguły coś zostało pomylone przez pracowników medycznych lub dana osoba ma oznaki infekcji, a wynik jest negatywny, co budzi podejrzenia, że osoba zostaje wysłana na drugi test.

Pod fałszywie pozytywny wynik rozumiany jest jako wynik, gdy dostarczenie badań krwi zostało wykonane w następujących warunkach pacjenta:

• ciąża;
• jeśli dana osoba ma zaburzenia hormonalne;
• z przedłużoną immunosupresją.

Jak w tym przypadku rozszyfrować analizę? Fałszywie dodatni wynik jest podawany, jeśli wykryte zostanie co najmniej jedno białko. Ze względu na to, że antygen p24 jest silnie uzależniony od zmienności osobniczej, przy użyciu tej metody w pierwszym okresie infekcji wykrywa się od 20% do 30% pacjentów.

Jak wiarygodny jest pozytywny wynik testu?

Czasami wyniki ELISA są fałszywie dodatnie (w około 1% przypadków), przyczyną takiego wyniku może być ciąża, różne infekcje wirusowe lub zwykły wypadek. Po otrzymaniu wyniku pozytywnego potrzebny jest dokładniejszy test - immunoblot, na podstawie którego postawiono diagnozę. Dodatni wynik immunoblot po pozytywnym teście ELISA jest w 99,9% wiarygodny - jest to maksymalna dokładność każdego testu medycznego. Jeśli immunoblot jest ujemny, to pierwszy test był fałszywie dodatni i faktycznie osoba nie jest nosicielem wirusa HIV.

Co to jest niepewny (wątpliwy) wynik?

Jeśli test ELISA jest pozytywny lub negatywny, immunoblot może być pozytywny, negatywny lub nieokreślony. Niepewny wynik immunoblot, tj. obecność co najmniej jednego białka wirusa w immunoblocie można zaobserwować, jeśli infekcja wystąpiła niedawno, a we krwi nadal jest niewiele przeciwciał przeciwko HIV, w którym to przypadku immunoblot po pewnym czasie będzie dodatni. Również niepewny wynik może pojawić się w przypadku braku zakażenia wirusem HIV z zapaleniem wątroby, niektórymi przewlekłymi chorobami metabolicznymi lub w czasie ciąży. W takim przypadku wynik immunoblot będzie ujemny lub zostanie znaleziona przyczyna niezdefiniowanego wyniku.

Ile kosztuje analiza?

Immunoblot na HIV nie jest tanim testem. Średnio badanie przesiewowe metodami immunologicznymi kosztuje od 500 do 900 rubli. Immunoblotting to badanie weryfikacyjne, którego koszt waha się od trzech do pięciu tysięcy rubli. Bardziej złożone metody są znacznie droższe. Na przykład za analizę reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) będziesz musiał zapłacić około 12 000 rubli.

Gdzie przeprowadzić analizę?

Gdzie mogę się przebadać na obecność wirusa HIV? ELISA, badania immunoblot są przeprowadzane w prywatnych klinikach miejskich, wyniki są wydawane w ciągu jednego dnia. Możliwa jest również pilna diagnostyka. W państwowych placówkach medycznych testy ELISA i immunoblotting są przeprowadzane bezpłatnie, zgodnie z ustawodawstwem Federacji Rosyjskiej. Kobiety w ciąży, a także pacjenci, którzy będą hospitalizowani lub operowani, przechodzą obowiązkowe badania w kierunku chorób zakaźnych.

Immunoblotting -(z angielskiego „blot” - spot) - metoda identyfikacji antygenów (lub przeciwciał) przy użyciu znanych surowic (lub antygenów). Jest to połączenie elektroforezy żelowej z testem ELISA. Początkowo komórki bakteryjne lub wiriony są niszczone za pomocą ultradźwięków, a następnie wszystkie antygeny wirusa lub komórek bakteryjnych są oddzielane przez elektroforezę i na specjalnej folii nitrocelulozowej otrzymuje się komercyjny odczynnik. Podczas przygotowania immunoblottingu na błonę nakłada się surowicę pacjenta ze znanymi antygenami. Po inkubacji i przemyciu niezwiązanych przeciwciał rozpoczynają test ELISA - na błonę nakłada się surowicę odpornościową na ludzkie immunoglobuliny znakowane enzymem i chromogennym substratem, który zmienia kolor pod wpływem interakcji z enzymem. W obecności kompleksów antygen-przeciwciało-przeciwsurowica immunoglobulina-enzym na nośniku pojawiają się kolorowe plamki. Metoda immunoblottingu pozwala osobno wykryć przeciwciała przeciwko różnym antygenom patogenu (na przykład w przypadku zakażenia HIV immunoblotting wykrywa przeciwciała przeciwko gp120, gp24 i innym antygenom wirusa).

Test radioimmunologiczny (RIA)

Metoda opiera się na reakcji antygen-przeciwciało przy użyciu znacznika antygenu lub przeciwciała z radionuklidem. Jako znacznik stosuje się 125I, 14C, 3H, 51Cr i inne radionuklidy. Powstałe kompleksy immunologiczne izoluje się z układu, a ich radioaktywność oznacza się na licznikach (promieniowanie β). Intensywność promieniowania jest wprost proporcjonalna do liczby związanych cząsteczek antygenu i przeciwciała.

Rozpowszechniona wersja RIA w fazie stałej wykorzystująca znakowane przeciwciała lub antygeny zaadsorbowane w dołkach paneli styropianowych.

RIA służy do wykrywania antygenów drobnoustrojów, wirusów, różnych hormonów, enzymów, substancji leczniczych, immunoglobulin, a także innych substancji zawartych w badanym materiale w niewielkich stężeniach 10-12-10-15 g/l.

pytania testowe

Reakcja bakteriolizy immunologicznej: jaka jest ta reakcja; co to jest antygen, co to są przeciwciała, mechanizm reakcji, metody wiązania, praktyczne zastosowanie. Reakcja hemolizy immunologicznej: niezbędne składniki, sposób wiązania; sterowanie, praktyczne zastosowanie. Reakcja hemolizy miejscowej w żelu (reakcja Jerne'a): zasada reakcji, sposób wiązania, praktyczne zastosowanie. Reakcja wiązania dopełniacza: zasada reakcji; co powstaje, gdy surowica odpornościowa wchodzi w interakcję z określonym antygenem; co dzieje się z dopełniaczem, jeśli jest obecny podczas tej interakcji? Jaki jest los dopełniacza, jeśli nie ma swoistego powinowactwa między antygenem a przeciwciałami? Jakiej reakcji można użyć do ustalenia, co stało się z dopełniaczem; dlaczego stosuje się tę konkretną reakcję; jaki jest pozorny pozytywny wynik RSK? Czemu? Jaką właściwość dopełniacza wykorzystuje się w pierwszej fazie CBC? W drugiej fazie? Jeśli końcowym wynikiem CSC jest hemoliza, co to znaczy - pozytywny czy negatywny? Wyjaśnij wyniki: RSK + + + +, RSK + + +, RSK + +, RSK +. Nazwij składniki pierwszego systemu RSC i składniki drugiego systemu RSC. Dlaczego surowica testowa musi być inaktywowana? Jak miareczkuje się dopełniacz? Surowica hemolityczna: co zawiera, jak się ją pozyskuje, jakie jest miano i jak się ją określa? Z jakich zwierząt uzyskuje się składniki RAC? Metodologia zakładania RSC na mrozie. Podczas oceny której z wymienionych reakcji konieczny jest udział dopełniacza: wytrącanie, flokulacja, aglutynacja, wykrywanie niekompletnych przeciwciał, bakterioliza immunologiczna, hemoliza immunologiczna, Yerne, CSC? Reakcja immunofluorescencyjna (RIF) - wskazać sekwencję zdarzeń w bezpośredniej reakcji Koonsa; niezbędne składniki. Czym jest antygen, czym są przeciwciała, czym są znakowane przeciwciała, jak brany jest pod uwagę wynik reakcji, jak wygląda wynik pozytywny? Praktyczne zastosowanie – co można określić za pomocą tej reakcji? Reakcja immunofluorescencyjna pośrednia - należy wskazać sekwencję zdarzeń dla tej reakcji, wymagane składniki, jaki jest antygen, jakie surowice odpornościowe są stosowane; praktyczne użycie; przewaga pośredniego RIF nad bezpośrednią reakcją. Test immunoenzymatyczny (ELISA) - zasada reakcji; wymagane składniki; wskazać sekwencję zdarzeń podczas określania stopnia zaawansowania reakcji w celu wykrycia antygenu w badanym materiale; wymagane składniki; co się dzieje z wynikiem pozytywnym, jak to wygląda? Określ kolejność czynności podczas ustawiania testu ELISA w celu wykrycia przeciwciał w surowicy testowej; wymagane składniki; co się stanie, jeśli wynik będzie pozytywny? Immunoblotting - zasada reakcji; główne kroki; wymagane składniki; jak brany jest pod uwagę wynik; korzyści z reakcji. Test radioimmunologiczny (RIA) - jakie są główne etapy reakcji; czym są znakowane przeciwciała lub antygeny, jak uwzględniany jest wynik? Mikroskopia immunoelektronowa – zasada metody; główne kroki; wymagane składniki; jakimi przeciwciałami są znakowane; jak uwzględniany jest wynik reakcji. Reakcje unieruchomienia – zasada metody, technika wiązania, składowe, rozliczanie wyników.

Zadania do wykonania w procesie samokształcenia.

Wypełnij tabelę „Reakcje odpornościowe” dla reakcji omówionych w tym temacie.

Reakcje odpornościowe

Praca studenta na lekcji praktycznej

Rozpocznij pracę natychmiast od ustawienia 1. fazy RSK, ale zapisz to później w zeszycie (patrz niżej).

1. Reakcja hemolizy immunologicznej. Obejrzyj pokazową reakcję hemolizy immunologicznej, naszkicuj w formie diagramu, wyjaśnij wynik w probówkach doświadczalnych i kontrolnych.

2. Reakcja wiązania dopełniacza

a) zdemontować RSK zgodnie z tabelą;

b) narysuj w zeszycie schemat zakładania DSC w formie tabeli;

c) załóż drugą fazę DSC (pierwsza faza jest umieszczana na początku lekcji);

d) zdemontować preparaty diagnostyczne wymagane dla RAC;

e) wziąć pod uwagę wynik. Sformułuj wniosek na temat obecności swoistych przeciwciał w badanej surowicy.

3. Reakcja immunofluorescencji. Przestudiuj tabelę, opracuj schemat ustawiania reakcji w zeszycie; spójrz na surowice diagnostyczne; określić, co zawiera serwatka, jak jest przygotowywana, do jakiej reakcji (bezpośredniego lub pośredniego RIF) jest używana. Zobacz demonstracyjny wynik RIF w mikroskopie fluorescencyjnym.

4. Test immunoenzymatyczny (ELISA). W zeszycie sporządź schemat stopniowania reakcji w dwóch wersjach: do wykrywania antygenu w badanym materiale i do wykrywania przeciwciał w surowicy. Zapoznaj się z zestawem narzędzi diagnostycznych HIV i wirusowego zapalenia wątroby typu B. Określ, co zawiera każdy składnik i do czego służy.

5. Immunoblotting. Zrób schemat inscenizacji reakcji w zeszycie; obejrzyj demo - wynik reakcji.

6. Test radioimmunologiczny (RIA). Zrób schemat reakcji w zeszycie.

7. Immunologiczna mikroskopia elektronowa (IEM). Obejrzyj demonstrację - wynik reakcji, sporządź schemat reakcji w zeszycie, wskaż strzałkami antygen (wirus) i oznaczone przeciwciała.

Immunoblotting to bardzo czuła metoda wykrywania białek oparta na połączeniu elektroforezy i ELISA lub RIA. Immunoblotting jest stosowany jako metoda diagnostyczna w przypadku zakażenia wirusem HIV itp.

W ogólnym sensie immunoblotting rozumiany jest jako analiza mieszaniny białek przeniesionych na błonę stałego podłoża, z którą wiążą się wiązaniami kowalencyjnymi, a następnie immunodetekcja.

Możliwa jest analiza mieszaniny białek naniesionych bezpośrednio na podłoże - analiza dot blot - lub po jej wstępnym frakcjonowaniu metodami elektroogniskowania, elektroforezy krążkowej lub elektroforezy dwuwymiarowej - Western blot.

Antygeny patogenu są rozdzielane przez elektroforezę w żelu poliakrylamidowym, następnie przenoszone z żelu na aktywowany papier lub błonę nitrocelulozową i rozwijane przy użyciu testu ELISA.

Firmy produkują takie paski z bloczkiem antygenowym. Na te paski nakłada się surowicę pacjenta. . Następnie po inkubacji niezwiązane przeciwciała pacjenta są wypłukiwane i nakładana jest surowica przeciw ludzkim immunoglobulinom wyznakowana enzymem . Kompleks utworzony na pasku (antygen + przeciwciało pacjenta + przeciwciało przeciwko ludzkiej Ig) jest wykrywany przez dodanie chromogennego substratu, który zmienia kolor pod wpływem działania enzymu.

Metodologia ta jest również stosowana do selekcji klonów bakterii, fagów lub wirusów wyrażających produkty docelowych sklonowanych genów.

Transfer białek na błonę odbywa się pasywnie lub za pomocą sprzętu do elektrotransferu. Na efektywność przenoszenia białek na membranę ma wpływ wiele czynników, takich jak masa cząsteczkowa białek, porowatość żelu, czas przenoszenia oraz skład zastosowanego roztworu buforowego (trans-bufora).

W zależności od zadań i warunków eksperymentu dobierane są warunki transferu, które zapewniają najlepsze wyniki. Jako podłoża powszechnie stosuje się membrany nitrocelulozowe, difluorek poliwinylidenu (PVDF) lub dodatnio naładowane membrany nylonowe. Nitroceluloza może wiązać do 80-100 μg białka na 1 cm2.

Białka o małej masie cząsteczkowej (o masie cząsteczkowej mniejszej niż 20 kDa) mogą zostać utracone w wyniku płukania i możliwe jest wstępne zbadanie polimorfizmu pewnych loci genetycznych wzdłuż odpowiednich fragmentów DNA restrykcyjnego.

Dodatkowo, stosując hybrydyzację Southerna można łatwo stwierdzić, czy docelowy gen posiada w swojej wewnętrznej części miejsce hydrolizy przez pewien enzym restrykcyjny, co pozwala na wybór optymalnej strategii klonowania badanego regionu genomu.

Cząsteczki RNA można również przenieść z żelu agarozowego na filtr nitrocelulozowy, stosując podobny schemat. Metoda ta została nazwana Northern blotting w przeciwieństwie do Southern blotting, ponieważ nazwa Southern oznacza w języku angielskim „południową”.

Przeniesienie białek na filtry z żelu odpowiednio nazwano Western blot. Duże białka (powyżej 100 kDa) zdenaturowane w roztworze dodecylosiarczanu sodu (SDS) mogą być słabo przeniesione na membranę, jeśli w buforze trans jest obecny etanol. Alkohol znacznie poprawia przenoszenie białek z żelu SDS-poliakrylamidowego, ale zwęża pory w żelu, co prowadzi do zatrzymywania dużych białek.

Membrana PVDF jest zoptymalizowana do immunodetekcji i jest zdolna do zatrzymywania specyficznie związanych białek do 160 μg/cm2 przy bardzo niskim poziomie wiązania niespecyficznego.

Immunoblotting

Ważną właściwością tej membrany jest możliwość ponownego użycia. Membrany nylonowe Zeta-Probe skutecznie wiążą białka SDS pod nieobecność alkoholu, a to wiązanie jest odporne na kolejne zabiegi. Skutecznie zatrzymywane są również białka o niskiej masie cząsteczkowej. Błony Zeta-Probe ze względu na wysoką zdolność wiązania – około 480 μg białka na 1 cm2 – pozwalają na wykrycie śladowych ilości białka w analizowanych mieszaninach.

Po unieruchomieniu antygenu na błonie pozostałe miejsca wiązania są blokowane roztworami żelatyny lub albuminy surowicy bydlęcej lub odtłuszczonego mleka.

Następnie błonę inkubuje się w roztworze przeciwciał poliklonalnych lub monoklonalnych przeciwko badanemu antygenowi. Po wypłukaniu niezwiązanych przeciwciał membranę inkubuje się w roztworze przeciwciał wtórnych będących koniugatem enzymów fosfatazy alkalicznej (AP) lub peroksydazy chrzanowej (HRP) z przeciwciałami przeciwgatunkowymi (kozie przeciwciała przeciwko immunoglobulinom królika, myszy). lub ludzki) (białko Staphylococcus aureus) lub G (białko Streptococcus sp.), które mają wysokie powinowactwo do regionu Fc immunoglobulin.

Wykrywanie utworzonych kompleksów immunologicznych odbywa się metodą chemiczną lub chemiluminescencyjną. Substratami reakcji chemicznej przy użyciu koniugatów fosfatazy alkalicznej są fosforan 5-bromo-4-chloro-3-indolilu (BCIP) lub błękit tetrazolowy (NBT), a w przypadku koniugatów z peroksydazą chrzanową 4-chloro-1-naftol i nadtlenek wodoru.

W wyniku reakcji enzymatycznych na błonie powstaje kolorowy pasek lub plamka w miejscu lokalizacji kompleksu antygen-przeciwciało.

Czułość tej metody wynosi 100 pg białka w przypadku koniugatów AR i 100-500 pg w przypadku koniugatów HRP. Wykrywanie chemiluminescencyjne kompleksów immunologicznych pozwala na oznaczenie mniej niż 5 pg antygenu. Zasada tej metody polega na tym, że gdy HRP reaguje z nadtlenkiem wodoru i cyklicznym luminolem diacylohydrazyny, emitowane jest światło o długości fali 428 nm, które można utrwalić na błonie światłoczułej.

Reakcja immunoblottingu (RI) została opracowana na podstawie testu ELISA. Jest to najbardziej specyficzna i czuła metoda analizy immunochemicznej. Immunoblotting (z angielskiego blot - zmoczyć, zabarwić) łączy test ELISA z elektroforezą. Służy do wykrywania nie złożonych przeciwciał przeciwko HIV, ale przeciwciał przeciwko jego poszczególnym białkom strukturalnym (białka-p24, glikoproteiny-gp120, gp 41 itp.). Odnosi się do reakcji ekspertów (potwierdzających) w celu zdiagnozowania zakażenia wirusem HIV.

Reakcja przebiega w kilku etapach:

Wirus jest niszczony na składniki - antygeny (p24, gp120, gp 41 itp.), Które poddaje się elektroforezie w żelu poliakrylamidowym, czyli rozdzielaniu antygenów na frakcje według masy cząsteczkowej.

2. Żel pokrywa się błoną nitrocelulozową i przenosi na nią frakcje antygenowe za pomocą elektroforezy. Nitroceluloza zachowuje się jak bibuła. Membrana jest cięta na paski (paski). Firmy produkują takie paski z bloczkiem antygenowym.

Immunoblotting – dodatkowa metoda pośrednia

Paski z nałożonymi na nie antygenami HIV są zanurzane w surowicy pacjenta, a następnie wymywane z niezwiązanego materiału.

4. Paski inkubuje się z surowicą antyglobulinową znakowaną peroksydazą i przemywa.

Dodaj substrat i zanotuj liczbę kolorowych frakcji (plam) odpowiadających strefie lokalizacji kompleksu AG-AT.

Obecność prążków w niektórych częściach paska potwierdza obecność w badanej surowicy przeciwciał przeciwko ściśle określonym antygenom HIV. Wynik immunoblottingu uważa się za pozytywny, jeśli na błonie widoczne są prążki odpowiadające dowolnym dwóm z trzech antygenów HIV – p24, gp41 i gp 120 (ryc. 37).

RYSUNKI

WYKAZ UŻYWANEJ LITERATURY

Główna literatura

Mikrobiologia medyczna, wirusologia i immunologia: podręcznik dla studentów medycyny. uczelnie wyd. 2, ks. i dodaj. - 702 pkt. Wyd. AA Worobiow. M.: MIA, 2012.

2. Mikrobiologia, wirusologia i immunologia: przewodnik po badaniach laboratoryjnych: podręcznik / (VB Sbychakov i inni); wyd. V.B.Sboyakova, M.M. Karapats. - M.: GEOTAR-Media, 2014.- 320s.: Ill.

3. Mikrobiologia medyczna, immunologia i wirusologia [Zasoby elektroniczne]: podręcznik do miodu.

uniwersytety - 760 pkt. - Tryb dostępu: http://www.studmedlib.ru/book/ISBN9785299004250.html Korotyaev A.I., Babichev S.A. SPb.: Spetslit, 2010.

4. Mikrobiologia medyczna, wirusologia i immunologia [Zasoby elektroniczne]: podręcznik: w 2 tomach / T. 1. - 448 s. - Tryb dostępu: http://www.studmedlib.ru/book/ISBN97859704142241.html Zverev V.V., Boychenko M.N.

M.: Geotar Media, 2010.

5. Mikrobiologia medyczna, wirusologia i immunologia [Zasoby elektroniczne]: podręcznik: w 2 tomach V. 2. - 480 s. Tryb dostępu: http://www.studmedlib.ru/book/ISBN97859704142242.html Zverev V.V., Boychenko M.N. M.: Geotar Media, 2010.

dodatkowa literatura

1. Reakcje immunodiagnostyczne: podręcznik / komp.: GK Davletshina, ZG Gabidullin, AA Akhtarieva, MM Tuigunov, AK Bułhakow, TASavchenko, R.F. ...

Khusnarizanova, YuZ Gabidullin, MM Alsynbaev - Ufa: Wydawnictwo Państwowej Budżetowej Instytucji Edukacyjnej Wyższej Szkoły Zawodowej BSMU Ministerstwa Zdrowia Rosji, 2016. - 86p.

2. Cechy niektórych właściwości, które determinują potencjał patogenny współhodowanych odmian bakterii Enterobacter, Citrobacter, Serratia, E. coli, Proteus: publikacja naukowa / Yu Z. Gabidullin, R.S. Sufiyarov, II Dolgushin - Ufa, 2015. - 250 sek.

Strona główna »Immunoblot - co to jest? Immunoblot w diagnostyce chorób zakaźnych

Immunoblot – co to jest? Immunoblot w diagnostyce chorób zakaźnych

Co to jest immunoblot? Jest to powszechna metoda laboratoryjnej diagnostyki infekcji wirusowych u ludzi. Jest to jeden z najdokładniejszych i najbardziej niezawodnych sposobów wykrywania obecności wirusa HIV.

Aby zapewnić niezawodność, jest nawet większy niż test immunoenzymatyczny (elisa). Wyniki Immunoblot są uważane za niepodważalne i ostateczne.

Immunoblot – co to jest? Aby rozpoznać osobę jako HIV, należy przejść badanie laboratoryjne na obecność przeciwciał w surowicy krwi.

Metoda Western blot jest również nazywana Western blot (Western blot). Służy do wykrywania ludzkich infekcji wirusowych jako uzupełniająca metoda ekspercka. Jest to konieczne do potwierdzenia ELISA - testu laboratoryjnego, który pozwala określić obecność przeciwciał przeciwko HIV we krwi. Immunoblot w celu podwójnego sprawdzenia pozytywnego testu ELISA.

Jest uważany za najbardziej wrażliwy, złożony i drogi.

Cel

Co to jest immunoblot? Jest to technika laboratoryjnego badania surowicy krwi na obecność przeciwciał przeciwko wirusowi.

Podczas specjalnych badań, całkowite białka wirusowe w żelu i na błonach nitrocelulozowych.

Immunoblotting (wykrywanie przeciwciał w surowicach pacjentów na określone antygeny patogenu)

Procedura Western blot skrawków służy do oznaczania zakażenia HIV na różnych etapach. W pierwszym etapie oczyszczony wirus z jego części składowych poddawany jest elektroforezie, a zawarte w nim antygeny podzielone są przez masę cząsteczkową.

Ludzki wirus niedoboru odporności namnaża się w żywych komórkach, osadzony w jego informacji genetycznej. Na tym etapie osoba staje się nosicielem wirusa HIV, jeśli zostałeś zarażony.

Specyfika tej choroby polega na tym, że nie objawia się przez długi czas. Wirus niszczy limfocyty, przez co zmniejsza się odporność człowieka, a organizm staje się niezdolny do walki z infekcjami.

Jeśli HIV jest leczony prawidłowo i w odpowiednim czasie, pacjent dożyje sędziwego wieku. Brak leczenia nieuchronnie prowadzi do śmierci. Od momentu infekcji, ale bez leczenia, maksymalny okres nie przekracza dziesięciu lat.

Osobliwości

Analiza Immunoblot to niezawodna metoda, która pozwala określić obecność przeciwciał przeciwko antygenom HIV pierwszego i drugiego typu.

Jeśli dana osoba jest zarażona, po dwóch tygodniach przeciwciała można wykryć znacznie później. Cechą HIV jest to, że ilość przeciwciał szybko wzrasta i pozostaje we krwi pacjenta. Nawet jeśli są obecne, choroba może nie pojawić się w żaden sposób przez dwa lub więcej lat. Metoda ELISA nie zawsze dokładnie wskazuje na obecność choroby, wymagając potwierdzenia wyników ze skrawków PCR i Western blot, jeśli test immunoenzymatyczny wykazał wynik pozytywny.

Wskazania do

Jaki rodzaj „immunoblotu” został już wykryty, ale jakie zostały wprowadzone do badania?

Powodem badania immunoblot ludzkiego wirusa niedoboru odporności (HIV) będzie pozytywny wynik testu ELISA. U pacjentów, którzy mają zostać poddani operacji, konieczne jest wykonanie testu immunoenzymatycznego. Ponadto należy dokonać analizy kobiet planujących ciążę, a także tych, które prowadzą rozwiązłe życie seksualne. Skrawki Western blot są przepisywane pacjentom z zakażeniem wirusem HIV, jeśli wyniki testu elisa są niejednoznaczne.

Powodem pójścia do lekarza mogą być następujące niepokojące objawy: szybka utrata masy ciała; osłabienie, utrata funkcji; zaburzenia jelit (biegunka) trwające trzy tygodnie; odwodnienie; gorączka; obrzęk węzłów chłonnych w ciele; rozwój kandydozy, gruźlica, zapalenie płuc, toksoplazmoza, zaostrzenie opryszczki.

Pacjent nie musi przygotowywać się przed oddaniem krwi żylnej.

Nie jedz 8-10 godzin przed badaniem. Nie zaleca się picia alkoholu i napojów kawowych, intensywnych ćwiczeń ani odczuwania niepokoju na dzień przed oddaniem krwi.

Gdzie przeprowadzić analizę?

Gdzie mogę się przebadać na obecność wirusa HIV?

ELISA, analiza immunoblot wykonywana w miejskich prywatnych klinikach, wyniki podawane są w ciągu dnia. Możliwa jest również pilna diagnostyka. W instytucjach publicznych testy medyczne sekcje Elisa i Western blot są bezpłatne, zgodnie z ustawodawstwem Federacji Rosyjskiej.

Obowiązkowe badania przesiewowe w kierunku chorób zakaźnych kobiet w ciąży oraz pacjentów wymagających hospitalizacji lub operacji Jak przebiega badanie?

Jak przeprowadzić ELISA? Pozytywny/negatywny immunoblot potwierdza lub zaprzecza wyniki testu elisa. Procedura jest dość prosta. Specjalista przeprowadza pobranie krwi żylnej, która zajmuje mniej niż pięć minut.

Po pobraniu próbki miejsce wstrzyknięcia należy zdezynfekować i zakleić plastrem. Pobieranie próbek odbywa się na pusty żołądek, więc po zabiegu nie zaszkodzi zjeść tabliczkę gorzkiej czekolady lub słodki gorący napój.

Aby otrzymać skierowanie na bezpłatne badanie w publicznej placówce zdrowia, należy udać się do lekarza.

Ogólnie rzecz biorąc, immunoblot nie różni się od innych testów pobierania krwi. Metodologia badań jest prosta. Jeśli wirus jest obecny we krwi osoby, organizm zaczyna wytwarzać przeciwciała, aby go zniszczyć. Dla każdego wirusa istnieje wiele antygenów białkowych. Wykrywanie tych przeciwciał jest podstawą metody sekcji Western blot. Cena

Ile analizy? Immunoblot HIV odnosi się do tanich badań.

Średnio metody przesiewowych testów immunologicznych wahają się od 500 do 900 rubli. Sekcje Western blot to czek badawczy, którego koszt waha się od trzech do pięciu tysięcy rubli. Bardziej złożone metody są znacznie droższe. Na przykład za analizę reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) będziesz musiał zapłacić około 12 000 rubli.

Interpretacja wyników

Najczęstszymi metodami diagnozowania zakażenia HIV są testy immunoenzymatyczne i immunoblot.

Służą do oznaczania przeciwciał przeciwko ludzkiemu wirusowi niedoboru odporności w surowicy. Zakażenie zwykle potwierdzane jest dwoma badaniami: przesiewowym i potwierdzającym. Interpretacji wyników powinien dokonać lekarz, on diagnozuje i przepisuje leczenie. Jeśli immunoblot jest pozytywny, oznacza to, że w ludzkim ciele jest wirus.

Pozytywny wynik nie powinien być powodem do samoleczenia, ponieważ każdy pacjent może mieć własny obraz choroby.

Analiza jakościowa obejmuje badania przesiewowe i certyfikację. Jeśli u pacjenta nie wykryto wirusa, wynik jest ujemny. Po odnalezieniu tego certyfikatu przeprowadzane są dodatkowe badania przesiewowe. Analiza immunoblot, która potwierdza lub odrzuca badania przesiewowe. Jeśli paski testowe pojawią się w pewnych obszarach ciemnienia (lokalizacja białka), postawiono diagnozę HIV.

Jeśli wyniki są wątpliwe, testy przeprowadza się w ciągu trzech miesięcy.

Aby zapobiec zakażeniu ludzkim wirusem niedoboru odporności, jest to możliwe, jeśli przestrzegasz pewnych zasad: unikaj przypadkowego stosunku płciowego, używaj prezerwatyw przy kontakcie, nie używaj narkotyków.

Jeśli choroba zostanie wykryta u kobiety w ciąży, ważne jest przestrzeganie zaleceń lekarza prowadzącego, nie zapominając o testach na obecność wirusa.

Co to jest Western Blotting?

Jednym z najczęstszych zadań jest identyfikacja białek w złożonych mieszaninach lub ekstraktach różnych tkanek. Używając takiego narzędzia, jak specyficzne przeciwciała, możliwe jest zidentyfikowanie badanego białka przy minimalnym czasie i kosztach.

W metodzie Western blot w pierwszym etapie mieszanina białek jest rozdzielana przez elektroforezę w obecności dodecylosiarczanu sodu (SDS), a następnie przenoszona na membranę nitrocelulozową metodą elektroblottingu.

Istotą tej metody jest umieszczenie żelu po elektroforezie na membranie nitrocelulozowej pomiędzy warstwami bibuły filtracyjnej. Tak zmontowaną „kanapkę” umieszcza się w polu elektrycznym tak, że kompleksy białko-SDS przemieszczają się po płytce żelowej i zostają unieruchomione (w wyniku niespecyficznej sorpcji) na powierzchni błony nitrocelulozowej.

W wiązaniu kompleksu białko-SDS z błoną nitrocelulozową zaangażowane są głównie siły elektryczne, a oddziaływanie to jest wielopunktowe i prowadzi do „rozprzestrzeniania się” białek na powierzchni błony. W ten sposób po elektrotransferze otrzymujemy replikę żelu na nitrocelulozie z białkami ułożonymi w taki sam sposób jak w żelu poliakrylamidowym.

Po SDS - elektroforezie, elektrotransferze i sorpcji białek z żelu na błonę nitrocelulozową, trzeciorzędowa konformacja białka ulega znacznej zmianie, jeśli ogólnie można mówić o istnieniu struktury trzeciorzędowej białka po tak sztywnej obróbce . Dlatego do immunochemicznego wykrywania badanego białka zwykle stosuje się tylko mono- lub poliklonalne przeciwciała specyficzne dla liniowych regionów cząsteczki białka.

51. Test immunologiczny, immunoblotting. Mechanizm, komponenty, zastosowanie.

Przeciwciała specyficzne dla epitopów konformacyjnych (lub regionów, które zawierają kontakty międzypodjednostkowe) generalnie nie są odpowiednie do stosowania w Western blotting.

Po przeniesieniu białek błona jest inkubowana kolejno z przeciwciałami specyficznymi dla badanego białka, a następnie z przeciwciałami wtórnymi specyficznymi dla fragmentów Fc przeciwciał pierwotnych skoniugowanych ze znacznikiem enzymatycznym (lub innym) (ryc.

1A). W przypadku, gdy pierwotne przeciwciała swoiste dla badanego antygenu są bezpośrednio sprzężone ze znacznikiem, przeciwciała wtórne nie są wymagane (ryc. 1 B). Kompleksy immunologiczne utworzone w miejscu lokalizacji badanego białka są „manifestowane” za pomocą substratu chromogennego (w zależności od rodzaju znacznika).

Czułość i swoistość metody silnie zależy od tego, jakie przeciwciała zostaną użyte w badaniach.

Stosowane przeciwciała muszą być specyficzne dla unikalnej sekwencji aminokwasowej charakterystycznej tylko dla badanego białka. W przeciwnym razie możliwa jest interakcja (szczególnie w przypadku grubych ekstraktów białkowych) przeciwciał z kilkoma cząsteczkami białka, co z kolei doprowadzi do pojawienia się kilku kolorowych pasm na błonie.

W takim przypadku identyfikacja badanego białka jest często trudna lub wręcz niemożliwa.

Drugim ważnym czynnikiem, o którym należy pamiętać przy wyborze przeciwciał, jest powinowactwo. Im wyższe powinowactwo zastosowanych przeciwciał, im jaśniejsze i wyraźniejsze barwione są prążki białka, tym wyższa czułość metody. Stosując przeciwciała o wysokim powinowactwie można osiągnąć czułość 1 ng lub nawet wyższą.

Aby zwizualizować wynik interakcji między antygenem związanym z błoną a przeciwciałami, stosuje się przeciwciała wtórne, skoniugowane z czynnikami zdolnymi do wydawania określonego sygnału w określonych warunkach.

Zazwyczaj jako taki środek stosuje się enzym (peroksydazę lub fosfatazę), którego produkt reakcji ma kolor i wytrąca się na membranie w postaci nierozpuszczalnego osadu.

W tej metodzie możliwe jest również zastosowanie znaczników fluorescencyjnych.

Ryż. 1. Schemat barwienia immunochemicznego badanego białka: A – z użyciem przeciwciał wtórnych sprzężonych ze znacznikiem enzymatycznym; B – pierwotne przeciwciało jest bezpośrednio sprzężone ze znacznikiem enzymatycznym.

Protokół:

I. Przygotowanie żelu i błony oraz elektrotransfer białek

Po elektroforezie żel poliakrylamidowy umieszcza się w łaźni z buforem do blottingu (25 mM Tris, pH 8,3, 192 mM glicyna, 10% etanol).

Dwa arkusze bibuły filtracyjnej, przycięte do kształtu kasety do bibuły i zwilżone buforem do bibuły, są umieszczane na części kasety, która będzie zwrócona w stronę anody. Następnie membranę nitrocelulozową wstępnie zwilżoną tym samym buforem umieszcza się na bibule filtracyjnej, upewniając się, że pomiędzy membraną a bibułą nie ma pęcherzyków powietrza.

Następnie żel należy ostrożnie umieścić na membranie, ponownie zwracając szczególną uwagę na brak pęcherzyków powietrza pomiędzy żelem a membraną. Formowanie kanapki uzupełniają dwie warstwy zwilżonej bibuły filtracyjnej, które umieszcza się na powierzchni żelu (rys. 2). Powstała kanapka jest zaciskana w kasecie i umieszczana między elektrodami tak, aby membrana była skierowana w stronę anody.

Ryż. 2. Schemat elektrotransferu białek na błonę.

II. Elektrotransfer

Elektrotransfer białek na błonę nitrocelulozową przeprowadza się w buforze zawierającym 25 mM Tris, pH 8,3, 192 mM glicynę, 10% etanol przez 30-50 min przy stałym napięciu 100 V.

Czas elektrotransferu zależy od wielkości transferowanych białek, im większe białko, tym dłużej trwa elektrotransfer. Jakość elektrotransportu i położenie prążków białkowych ocenia się przez barwienie membrany nitrocelulozowej 0,3% roztworem Ponceau S w 1% kwasie octowym. Przed przeprowadzeniem barwienia immunochemicznego membranę należy kilkakrotnie przemyć słabo zasadowym wodnym roztworem Tris w celu usunięcia związanego z białkami barwnika.

III. Barwienie immunochemiczne białek unieruchomionych na błonie nitrocelulozowej

Aby zablokować miejsca niespecyficznego wiązania przeciwciał, membranę inkubuje się z ciągłym mieszaniem w temperaturze pokojowej przez 30 min w PBST (dla lepszego blokowania można użyć roztworu PBST zawierającego 10% odtłuszczonego mleka w proszku).

Po zablokowaniu membranę inkubuje się przez godzinę w temperaturze pokojowej z ciągłym mieszaniem w PBST zawierającym 1-10 μg/ml swoistych przeciwciał.

Optymalne stężenie przeciwciał dobierane jest empirycznie i zależy od powinowactwa oddziaływania przeciwciał z antygenem.

Pod koniec inkubacji przepłukać błonę 5 razy PBST i przenieść do roztworu przeciwciał drugorzędowych skoniugowanych z peroksydazą chrzanową. Rozcieńczenie koniugatu jest zwykle wskazane przez producenta na opakowaniu lub jest wybierane empirycznie przez badacza. W roztworze przeciwciał drugorzędowych inkubuj membranę przez 1 godzinę, ciągle mieszając.

Po dokładnym przemyciu (zmianie buforu co najmniej 5-6 razy) membranę PBST przenosi się do chromogennego roztworu substratu zawierającego 3 mg diaminobenzydyny (DAB) i 10 μl 30% nadtlenku wodoru w 10 ml 0,1 M Tris-HCl pH 7,6.

Inkubację prowadzi się z mieszaniem przez 5 do 10 minut. Po zakończeniu inkubacji z podłożem membranę należy przemyć PBST, osuszyć bibułą filtracyjną i niezwłocznie wykonać kopię elektroniczną skanując w kolorze. Jeśli membrana wyschnie całkowicie, zabarwione paski białkowe blakną, a obraz jest mniej jasny i kontrastowy.

Uwaga: DAB jest substancją toksyczną i potencjalnie rakotwórczym. Nosić tylko gumowe rękawice!

Nazywa się AIDS Wiaczesław Zalmanovich Tarantul

Immunoblotting – dodatkowa metoda pośrednia

Oprócz testu ELISA, w niektórych przypadkach do testowania zakażenia wirusem HIV stosuje się procedurę zwaną „immunoblotting” lub „immune blotting” (czasami nazywaną również „Western blot”). Zgodnie z zaleceniem WHO immunoblotting jest stosowany w diagnostyce zakażenia wirusem HIV jako dodatkowa metoda ekspercka, która musi potwierdzić wyniki testu ELISA. Zwykle ta metoda służy do podwójnego sprawdzenia pozytywnego wyniku za pomocą testu ELISA, ponieważ jest uważana za bardziej czułą i specyficzną, chociaż bardziej skomplikowaną i kosztowną. Ale przed podpisaniem ostatecznego werdyktu pacjentowi lekarz musi upewnić się, że diagnoza jest całkowicie prawidłowa. Dlatego kwestia złożoności i wysokich kosztów nie może być tutaj decydująca.

Dobrze znane wyrażenie „blotting out” dobrze nadaje się do immunoblottingu zarówno ze względu na jego zamierzony cel, jak i sposób wykonania. Immunoblotting łączy test immunoenzymatyczny (ELISA) ze wstępną elektroforetyczną separacją białek wirusa w żelu i ich przeniesieniem na błonę nitrocelulozową („blotter”). Procedura immunoblot składa się z kilku etapów (ryc. 27). Najpierw wirus HIV, wcześniej oczyszczony i zdegradowany do składowych składników, poddawany jest elektroforezie, podczas gdy wszystkie antygeny tworzące wirusa są rozdzielone masą cząsteczkową. Następnie antygeny są przenoszone z żelu na pasek nitrocelulozy lub filtr nylonowy metodą blottingu (analogicznie do wyciskania nadmiaru atramentu na blotterze), który teraz zawiera spektrum białek niewidocznych dla oka, charakterystyczne dla wirusa HIV. Następnie materiał testowy nakłada się na pasek (surowicę, osocze krwi pacjenta itp.), A jeśli w próbce znajdują się specyficzne przeciwciała, wiążą się one z ściśle odpowiadającymi paskami antygenów białkowych. W wyniku kolejnych manipulacji (np. ELISA) wynik tej interakcji jest wizualizowany – staje się widoczny. Ostatecznie obecność prążków w niektórych częściach paska potwierdza obecność w badanej surowicy przeciwciał przeciwko ściśle określonym antygenom HIV.

Do potwierdzenia diagnozy zakażenia wirusem HIV najczęściej stosuje się immunoblotting. WHO uważa surowice pozytywne, w których przeciwciała przeciwko dowolnym dwóm białkom otoczki HIV są wykrywane przez immunoblotting. Zgodnie z tymi zaleceniami, w przypadku reakcji tylko z jednym z białek otoczki (gp160, gp120, gp41), w połączeniu lub bez reakcji z innymi białkami, wynik jest wątpliwy i zaleca się ponowne wykonanie testu za pomocą zestawu inna partia lub inny producent. Dla siatki bezpieczeństwa, jeśli

Ryż. 27. Aby przeprowadzić immunoblotting w pierwszym etapie, białka zawarte w surowicy krwi rozdziela się w żelu według ich masy cząsteczkowej i ładunku za pomocą pola elektrycznego (metodą elektroforezy żelowej). Następnie na żel nakłada się membranę nitrocelulozową lub nylonową i „wymazuje” (to jest blotting). Odbywa się to w specjalnej komorze, która umożliwia całkowite przeniesienie materiału z żelu na membranę. W rezultacie wzór ułożenia białek, który był na żelu, jest odtwarzany na błonie (blot), którą można łatwo dalej manipulować. Początkowo błonę traktuje się przeciwciałami przeciw pożądanemu antygenowi, a po przemyciu niezwiązanego materiału dodaje się znakowany radioaktywnie koniugat, który wiąże się swoiście z przeciwciałami (jak w teście ELISA). Położenie powstałego kompleksu „koniugat znakowany antygen-przeciwciało” jest określane przez autoradiografię przy użyciu kliszy rentgenowskiej. Po jej ujawnieniu staje się jasne, czy we krwi są antygeny, czy nie, a po tym wynik pozostaje wątpliwy, zaleca się obserwację przez sześć miesięcy (badania są kontynuowane co trzy miesiące).

Obecnie w Federacji Rosyjskiej zaleca się stosowanie pięciu systemów testowych do stosowania w diagnostyce zakażenia wirusem HIV, wśród których są zarówno rosyjskie, jak i zagraniczne.

Z książki Anestezjologia i reanimatologia Autor Marina Aleksandrowna Kolesnikowa

Z książki Dziwność naszego ciała. Zabawna anatomia przez Stephena Juana

Z książki Poradnik pierwszej pomocy autor Nikolay Berg

Z książki Jak w 100% rzucić palenie, czyli pokochać siebie i zmienić swoje życie autor David Kipnis

Z książki The Complete Guide to Nursing Autor Elena Juriewna Chramowa

Z książki Poradnik Medycyny Ratunkowej Autor Elena Juriewna Chramowa

Z książki Cesarskie cięcie: bezpieczne wyjście czy zagrożenie dla przyszłości? autorstwa Michelle Auden

autorstwa Gary'ego Griffina

Z książki Jak zwiększyć rozmiar męskiego penisa autorstwa Gary'ego Griffina

Z książki Płaskostopie. Najskuteczniejsze zabiegi Autor Aleksandra Wasiliewa

Z książki Piękno i zdrowie kobiety Autor Vladislav Gennadievich Liflyandsky

Z książki Joga i praktyki seksualne autorstwa Nicka Douglasa

Kiedy zostałem przebadany w kierunku chorób przenoszonych drogą płciową, zdecydowałem się również wykonać testy na HIV. Następnego dnia otrzymałem gotowe testy na ifa, z wyjątkiem HIV, w wyniku czego zdiagnozowano u mnie chlamydię. Opryszczka i mikroplazmoza. Ale HIV nigdy nie przyszedł. Zadzwonili do mnie za 3 dni i powiedzieli, że musisz przyjść do centrum AIDS w celu redystrybucji krwi, poszedłem do imunablot i pokazałem pozytywny wynik. Czy imunablot może być fałszywie dodatni w chorobach wywołanych chlamydiami, mikroplazmozie, opryszczce HPV?

Eksperci Woman.ru

Uzyskaj opinię eksperta na swój temat

Anastazja Szesterykowa

Rusina Irina Władimirowna

Psycholog, łagodzenie stresu. Specjalista ze strony b17.ru

Olga Juriewna Diganajewa

Psycholog. Specjalista ze strony b17.ru

Olga Borisenko

Psycholog, terapeuta Gestalt. Specjalista ze strony b17.ru

Dmitrij Waleriewicz Tiszakow

Psycholog, Superwizor, Systemowy Terapeuta Rodziny. Specjalista ze strony b17.ru

Shiyan Olga Wasiliewna

Psycholog, Konsultant Psycholog. Specjalista ze strony b17.ru

Oksana Lushankina

Psycholog, Relacje Rodzinne. Specjalista ze strony b17.ru

Anna Daszewskaja

Psycholog, Skype Consulting. Specjalista ze strony b17.ru

Irina Bukina

Psycholog. Specjalista ze strony b17.ru

Aksjonowa Anna Michajłowna

Psycholog, Kandydat do analityki grupowej. Specjalista ze strony b17.ru

Nie chcę cię przestraszyć, ale kiedy dzwonią do centrum AIDS, prawie zawsze jest pozytywne, jak nie powtórzyć, powodzenia, najważniejsze jest podjęcie terapii i długie życie

Jeden znajomy od dziesięciu lat żyje z HIV i dba o siebie.
Mówią, że za trzy lata mogą znaleźć lekarstwo.
W każdym razie nie rozpaczaj i nie rozsiewaj, uzdrawiaj

Nie, IB nie może być fałszywie pozytywny i żadne choroby przenoszone drogą płciową nie wpływają na ten test, jeśli jest pozytywny, to niestety masz HIV, musisz monitorować komórki odpornościowe i rozpocząć terapię na czas.

niestety, nie ((jeśli wezwany do centrum, to na pewno już

O ile mi wiadomo, pierwsze, a nawet kolejne wyniki immunoblot mogą być wątpliwe. nie fałszywie pozytywne, ale wątpliwe. a następnie zalecana jest ponowna analiza. Podaję tekst ze strony:
„Blot immunologiczny jest najczęściej używany do potwierdzenia diagnozy zakażenia wirusem HIV. WHO uważa surowice pozytywne, w których przeciwciała przeciwko dowolnym dwóm białkom otoczki HIV są wykrywane przez immunoblotting. Zgodnie z tymi zaleceniami, jeśli dojdzie do reakcji tylko z jednym z białek otoczki (gp160, gp120, gp41) w połączeniu lub bez reakcji z innymi białkami, wynik jest wątpliwy i zaleca się ponowne badanie przy użyciu zestawu innego seria lub inna firma. Jeśli nawet po tym wynik pozostaje wątpliwy, badania są kontynuowane co 3 miesiące.”
możesz to wygooglować. jeśli tak, mam nadzieję, że nie masz HIV. ale jeśli się to potwierdzi, to wiedzcie, że dzisiaj z tą diagnozą żyjcie i żyjcie tak długo, jak zdrowi ludzie i rodzą dzieci. głównym warunkiem jest dyscyplina w leczeniu. zdrowie dla ciebie!

Terapia antyretrowirusowa online

Kalkulatory

Witryna przeznaczona jest dla profesjonalistów medycznych i farmaceutycznych w wieku 18+

Dekodowanie analizy - immunoblot

Pomóż mi rozszyfrować analizę
ENV (GP160) +
ENV (GP110 / 120) +
ENV (GP41) +
GAG (P55) +
GAG (P40) +
GAG (P25) +
POL (P68) +
POL (P52) +
POL (P34) +

Cześć! 2,5 roku temu byłem testowany na HIV, był taki immunoblot:
Gp-160+, Gp-110/120+, Gp-41+, p17+, p25+, p31+, p34+, p52+, p55+, p68+. A oto immunnoblot z dnia 30.05.18: Gp-160 +, Gp-41 +, GAG 1 -, poll +, env2-. Nie jest jasne, co oznacza słowo +? Czy jest tam tylko jeden, czy nie został ujawniony? A gdzie się podziały pozostałe białka?

Pol i Env to geny, które kodują grupy białek. Weź pod uwagę, że zapis jest po prostu inny. Pytanie jest inne. Na co czekamy? Dlaczego rozważamy kleks? Wszystko jest jasne. Musisz coś zrobić.

Przyzwyczaiłem się już do tego, że mam HIV. I gotowy do terapii.
Po prostu ciekawie jest usłyszeć twoją opinię. Czy to świeża infekcja czy coś, czego nie rozumiem? A może zdarza się, że immunoblot otwiera się bardzo powoli?

Dzisiaj przyjrzałem się moim analizom w aktach osobowych (zostały wykonane w KS):
ELISA na pierwszym systemie testowym - postawi
ELISA na drugim systemie testowym - negatywny (jak to jest?)

Kolejne IB (wykonane invitro i SC miesiąc temu):
immunoblot na pierwszym systemie testowym: gp 160+, gp 41+
immunoblot na innym systemie testowym: gp41 +, p24 +, p17 +
immunoblot na trzecim układzie testowym: gp160 +, gp120 +, gp41 +, p24 +

Według moich prognoz mogłam się zarazić rok temu (stan ostry był gdzieś w kwietniu) lub 9 miesięcy temu, ale generalnie - xs kiedy) zawsze byłam chroniona, a seks bez prezerwatywy był tylko raz jesienią 2017.

Dzisiaj zdałem go ponownie na HV i IS. Teru rozpocznie się za miesiąc, jak tylko dotrze zamówienie.

Ustaw daty wspomnianych testów.

Pierwsza plama przed testem ELISA? Nie bije. Nie ma tu sensu, który pozwoliłby nam powiedzieć, że świeża infekcja jest wysoce prawdopodobna lub odwrotnie.
Pozostanie tajemnicą, jeśli przypadkowo nie znajdziesz źródła i nie porównasz.

Aby to wyjaśnić, wtedy

Przekazany Invitro.
IFA - 11 maja
Następnie ta sama surowica została wymazana i przyszedł pozytywny test, w którym zidentyfikowano dwa białka.
GP 160+, GP 41+

Potem ponownie przekazałem go do SC.
Oddaną krew 29 maja.
I tam przeprowadzili go przez kilka systemów testowych, gdzie pierwszy wykazał negatywny, drugi pozytywny. Negatywny wynik testu ELISA jest jednak zabawny.
Następnie to samo serum trafia do blota, skąd pochodzą dane:

Pierwszy system testowy: gp41 +, p24 +, p17 +
Drugi system testowy: gp160 +, gp120 +, gp41 +, p24 +

Ale nie o to chodzi.
Nadeszła nowa analiza IP - 754. To zachęcające. VN nie jest jeszcze gotowy. Jak tylko nadejdzie, prawdopodobnie zacznę już teraz.

Fakt, że infekcja miała miejsce rok temu - jestem pewien na 80%. A fakt, że plama powoli się otwiera, a test ELISA jest negatywny, jest dziwny. A może mieści się w normalnym zakresie?

Negatywny wynik testu ELISA jest jednak zabawny. Chciałbym znać nazwę systemu, aby zapisać go w czarnym zeszycie. Chociaż ten moment, jeśli nie przyjmujesz teorii małżeństwa, zdecydowanie sprzyja wczesnej infekcji.
Fakt, że infekcja miała miejsce rok temu - jestem pewien na 80%. Biedny kleks na tamten czas. Nie niemożliwe, ale mało prawdopodobne.

W pewnym momencie zacząłem nawet wątpić w wyniki moich testów na HIV - więc czekam na VN.
Tutaj ostatni punkt pytania zostanie już postawiony.

Fakt, że IP rozrósł się o 200 kopii w ciągu miesiąca bez tera - czy to również jest uważane za normalny zakres? Obecnie biorę ursosan na polipa w woreczku żółciowym – we wkładce jest napisane, że lek zwiększa odporność.

Konieczna jest ocena zarówno z względną zawartością, jak i uwzględnienie danych jednego laboratorium za pomocą jednej metody obliczeniowej. Bo – Bóg wie, co jest z CD4.

Ogólnie CD4 wynosi 780 komórek / μl. VN - 250 egz./ml.
To nie jest terapia. Oznacza to, że CD4 z 486 skoczył do 780 w ciągu miesiąca.
VN spadł z 550 do 250 egzemplarzy.

Nie jest to jednak dziwne, czy takie skoki są w normie? Czy Teru czas zacząć?)

Cześć! Zdałem ifa trzy razy, za każdym razem +, immunoblot p24 + p18 + pochodził z SC. Potencjalne ryzyko było ponad pół roku temu. p24 wskazuje, że to nadal HIV?

Blot wątpliwy, powtórz za 6-8 tygodni. Najprawdopodobniej fałszywy alarm.

Dobry dzień!
Przyszły wyniki analiz, w tym blot:

Niebezpieczny kontakt: 24.04.2018
Test HIV ELISA 23.05.2018 (4 tygodnie od niebezpiecznego kontaktu lub 29 dni) wynik "+"
Test na HIV ELISA 28.05.2018 (5 tygodni od niebezpiecznego kontaktu lub 34 dni) wynik „odzyskania”
Test HIV ELISA 06.01.2018 (5 tygodni od niebezpiecznego kontaktu lub 38 dni) wynik "+"

Blot pochodził z pierwszej analizy (23.05.18):
GP160 śl.
P24 śl.

Nowe testy zostały złożone w dniu 06.06.2018 ELISA i PCR HIV RNA w lokalnym centrum AIDS. Czekamy na wyniki.

Pytania dotyczące plam:
1. Jeśli obecne jest P24, czy jest to koniecznie antygen HIV, czy też takie białko można wykryć w innych chorobach?
2. Co oznacza skrót „sl” przy białku? Zazwyczaj opisane plamy mają + lub -
3. Od czego zależy możliwość rozmieszczania blotów? Z terminu czy z indywidualnych cech organizmu?
4. Czy z takim kleksem w 4 tygodniu od niebezpiecznego kontaktu jest szansa, że ​​to nie jest HIV?

Miłego dnia i dziękuję.

1. nie, może to być po prostu podobne białko o innej naturze. 2.słabe. te. wątpliwy. 3. Czas i wdrożenie indywidualnej funkcji, ale średnio wszystko jest bardzo blisko. 4. pytanie jest błędne, zawsze jest szansa na postawienie diagnozy.

Cześć!
Pomóż mi poruszać się po wynikach testów i zrozumieć, jak zachowywać się poprawnie, aby powtarzane testy były poprawne.

Zdał testy 25.05.2018
IB HIV
NOWY LAV BLOT 1 - niezdefiniowany od 29.05.2018
Markery IB HIV
GP 160 +
GP 120 -
GP 41 -
p55 +
p40 -
p 24 +
p18 -
s. 68 -
s. 52 -
s. 34 -
ELISA HIV
ADVIA Centaur HIV Ag-Ab Reaktywność ELISA 12.00 poz. (28.05.2018)
Zaleca się powtórzenie analizy po 2 tygodniach.

W listopadzie 2017 była ABO, po czym została przetestowana na systemie testowym HIV Ag \ Ab Combo Abbott Architect, następnie wynik był negatywny.

W tym samym czasie robiłam ogólne badanie krwi. Limfocyty są nieznacznie zwiększone, eozynofile dokładnie 0 (ale miałem takie wskaźniki dla eozynofili wcześniej.

Główne pytanie brzmi:
Jakie leki można i nie można przyjmować w ciągu tych dwóch tygodni? (Nie chcę nic do „fonilowania”)
Okresowo mam napady alergii, zwykle piję tavegil. Czy powinniśmy z tego zrezygnować?
Czy przed badaniem można brać antybiotyki? (jeśli przepisany przez lekarza w leczeniu innych infekcji i chorób)

Blot immunologiczny w diagnostyce HIV

Blot immunologiczny (Western blot, Western blot)- łączy enzymatyczny test immunosorpcyjny (ELISA) ze wstępnym przeniesieniem elektroforetycznym antygenów wirusa na pasek (pasek) nitrocelulozy.

W tej pięknej naukowej nazwie "plam" najprawdopodobniej tłumaczy się jako "plam", a "zachodnia" - jako "zachodnia" odzwierciedla kierunek rozprzestrzeniania się tej "plamki" na papierze od lewej do prawej, czyli na geograficznym mapa odpowiada kierunkowi z zachodu na wschód.” Istotą metody „immune blot” jest to, że reakcja immunoenzymatyczna jest przeprowadzana nie za pomocą mieszaniny antygenów, ale antygenów HIV, wstępnie rozprowadzonych przez immunoforezę na frakcje zlokalizowane zgodnie z masą cząsteczkową na powierzchni membrana nitrocelulozowa. W rezultacie główne białka wirusa HIV, będące nośnikami determinant antygenowych, są rozmieszczone na powierzchni w postaci oddzielnych prążków, które objawiają się podczas enzymatycznej reakcji immunosorpcyjnej.

Immunoblot obejmuje kilka etapów:

Przygotowanie paska. Wirus niedoboru odporności (HIV), wcześniej oczyszczony i zdegradowany do swoich składowych składników, poddawany jest elektroforezie, podczas gdy antygeny będące częścią wirusa HIV są rozdzielane masą cząsteczkową. Następnie za pomocą blottingu (analogicznie do wyciskania nadmiaru atramentu na blotterze) antygeny są przenoszone na pasek nitrocelulozy, który teraz zawiera spektrum niewidocznych dla oka prążków antygenowych, charakterystycznych dla wirusa HIV.

Przykładowe badania. Materiał testowy (surowica, osocze krwi pacjenta itp.) Nanosi się na pasek nitrocelulozowy, a jeśli w próbce znajdują się specyficzne przeciwciała, wiążą się one z ściśle odpowiadającymi (komplementarnymi) prążkami antygenowymi. W wyniku kolejnych manipulacji wynik tej interakcji jest wizualizowany - uwidaczniany.

Interpretacja wyniku. Obecność prążków w określonych obszarach płytki nitrocelulozowej potwierdza obecność w badanej surowicy przeciwciał przeciwko ściśle określonym antygenom HIV.

Obecnie immunoblotting (immunoblot) jest główną metodą potwierdzania obecności przeciwciał swoistych dla wirusa w badanej surowicy. W niektórych przypadkach zakażenia wirusem HIV, przed rozwojem serokonwersji, specyficzne przeciwciała są skuteczniej wykrywane przez immunoblotting niż w teście ELISA. W badaniu metodą immunoblottingu stwierdzono, że przeciwciała przeciwko gp 41 są najczęściej wykrywane w surowicach pacjentów z AIDS, a wykrycie p24 u osób przebadanych w celach profilaktycznych wymaga dodatkowych badań na obecność zakażenia HIV. Stwierdzono, że systemy testowe do immunoblottingu oparte na genetycznie zmodyfikowanych rekombinowanych białkach są bardziej specyficzne niż konwencjonalne systemy oparte na oczyszczonym lizacie wirusowym. Podczas stosowania rekombinowanego antygenu nie tworzy się rozproszony, ale wyraźnie wyrażony wąski prążek antygenu, łatwo dostępny do rejestracji i oceny.

Surowice osób zakażonych HIV-1 wykazują przeciwciała przeciwko następującym białkom podstawowym i glikoproteinom - białkom otoczki strukturalnej (env) - gp160, gp120, gp41; jądra (gag) - p17, p24, p55, a także enzymy wirusowe (pol) - p31, p51, p66. W przypadku HIV-2 typowe są przeciwciała przeciwko env - gp140, gp105, gp36; knebel - p16, p25, p56; pol - s.68.

Wśród metod laboratoryjnych niezbędnych do ustalenia swoistości reakcji najbardziej rozpoznawane jest wykrywanie przeciwciał przeciwko białkom otoczki HIV-1 - gp41, gp120, gp160 i HIV-2 - gp36, gp105, gp140.

WHO uważa surowice pozytywne, w których przeciwciała przeciwko dowolnym dwóm glikoproteinom HIV są wykrywane metodą immunoblottingu. Zgodnie z tymi zaleceniami, jeśli wystąpi reakcja tylko z jednym z białek otoczki (gp 160, gp 120, gp 41) w połączeniu lub bez reakcji z innymi białkami, wynik jest uważany za wątpliwy i zaleca się ponowne badanie za pomocą zestaw z innej serii lub innej firmy. Jeśli nawet po tym wynik pozostaje wątpliwy, zaleca się obserwację przez 6 miesięcy (badania po 3 miesiącach).

Obecność dodatniej reakcji z antygenem p24 może wskazywać na okres serokonwersji, ponieważ przeciwciała przeciwko temu konkretnemu białku czasami pojawiają się jako pierwsze. W takim przypadku zaleca się, w zależności od danych klinicznych i epidemiologicznych, powtórzenie badania z próbką surowicy pobraną co najmniej 2 tygodnie później i tak właśnie jest, gdy badanie par surowic jest konieczne w przypadku zakażenia HIV.

Pozytywne reakcje z białkami gag i pol bez reakcji z białkami env mogą odzwierciedlać wczesny etap serokonwersji i mogą również wskazywać na zakażenie HIV-2 lub reakcję niespecyficzną. Osoby z takimi wynikami po badaniu na HIV-2 są ponownie badane po 3 miesiącach (w ciągu 6 miesięcy).

Pytanie: Powtórne badanie na HIV?

Przebadano mnie na infekcje przenoszone drogą płciową (brak objawów, chciałem mieć pewność w związku z kobietą). Test na HIV był pozytywny. USG wykazało guz na nerce, usunięty (okazał się złośliwy).
Przeczytałem książkę Sazonovej I.M., która mówi, że nowotwór złośliwy może dać pozytywny wynik testów na HIV.
Czy może tak być, czy nie ma na co liczyć?

Musisz wykonać test kontrolny na obecność wirusa HIV. Jeśli pierwszy test na HIV został wykryty przez ELISA, wynik może być fałszywie dodatni. Jego wiarygodność można sprawdzić bardziej czułą metodą diagnostyczną - PCR (reakcja łańcuchowa polimerazy), która określa DNA wirusa we krwi.

Pomoc. 16.12.10g ELISA (+) IB (+) następnie od 23.03.11 do 19.05.11 dziewięć negatywnych ELISA (-) i ilościowa PCR. niezdeterminowany. w 2002 roku podczas ciąży ELISA potem (+) potem (-), ale IB zawsze (-). od 2004 do 2008 brałem 2 razy w roku IFA (-) ale 30.04.08 ifa (+) i IB-undefined. potem znowu co 2 miesiące zawsze brałem ELISA (-). a od grudnia 2010 jest napisane powyżej.Jednocześnie ja nigdy nie robiłam zastrzyków, mój mąż zawsze ma IFA (-). cd4 980 komórek. a nawet krew na kiłę od 29.04 dała 3 +++ a potem trzy razy. ujemny co 10 dni. wszystkie zapalenie wątroby (-). czy ktoś to tak miał. Dzięki.

Proszę wyjaśnić, czy przeszedłeś RIBT (reakcja unieruchomienia krętków), jeśli tak, jakie są wyniki tego badania.

nie, nikt nie zaproponował mi takiej analizy, ale co ona pokaże? Mam nadzieję, że rozumiesz, że mówiłem o testach na HIV. Dzięki. czy w Twojej praktyce zdarzały się podobne przypadki? Nawiasem mówiąc, o IB w 2008 roku było nieokreślone. było białko p24 / 25. w 2010 r. białka IB (+) gp160.41.120 p24.17.31. potem kiedy ifa został ponownie 3 razy (-) wysłany do IB 4 kwietnia. wynik był pozytywny, ale białka gp 120 i 41. pozostałe przekreślono czerwoną pastą, a na dole czerwoną IB REPEAT. ale PCR z tego samego numeru jest odrzucany. po 4 kwietnia zdałem ELISA już 4 razy odmowa. wszystko w centrum AIDS, w tym antygen i przeciwciała. Teraz czekam na drugi IB i wysokiej jakości PCR. Otóż ​​to. BARDZO ZMĘCZONY MYŚLENIEM I CZEKANIEM. Mając nadzieję na najlepsze. DZIĘKI. czekam na odpowiedź BARDZO.

Jeśli zadasz jakieś pytanie, spróbuj następnym razem, aby sformułować je bardziej konkretnie, podając diagnozę. RIBT służy do potwierdzenia rozpoznania kiły. W celu dokładnej diagnozy zakażenia HIV oznaczanie przeciwciał przeciwko HIV we krwi przeprowadza się metodą ELISA i metodą immunoblot. Diagnoza jest potwierdzona tylko wtedy, gdy oba te wyniki są pozytywne.

Przepraszam za niedokładne sformułowanie pytania. Napisałem, że w grudniu IFA i Imunoblot były pozytywne na HIV. ale od marca ifa jest nosicielem wirusa HIV 9 razy. jeśli wsadzą mnie do centrum AIDS, to w zasadzie tak się dzieje. HIV zawsze będzie pozytywny lub negatywny. i jak, jeśli odmówi się wykonania testu ELISA na HIV, można odłożyć immunoblot? wtedy wszystko jest odrzucane, jeśli trzeba sprawdzić imunoblot, więc co się dzieje? w naszym centrum prędkości nie mogą mi nic odpowiedzieć. więc zwróciłem się do ciebie. Dzięki.

Niestety, zarówno test ELISA, jak i immunoblot mogą dawać fałszywie pozytywne wyniki. Dlatego diagnoza HIV jest uważana za ostateczną, tylko przy jednoczesnym wykryciu HIV za pomocą ELISA i metody immunoblot.

Witam Dzisiaj otrzymałem wyniki PCR na HIV, nie wykryto wysokiej jakości wirusa i powtórny immunoblot na HIV, wynik jest nieokreślony z powodu białka 41. CENTRUM AIDS powiedział, że najprawdopodobniej nie ma HIV, ale w moje ciało ma ciała podobne w budowie do HIV. Jak myślisz, jeśli weźmiesz pod uwagę moje pytania z 15 i 16 czerwca (patrz wyżej) to HIV czy nie? DZIĘKI.

W tym przypadku diagnoza zakażenia wirusem HIV jest wątpliwa.

piszesz, że tylko przy równoczesnym wykryciu HIV za pomocą IFA i immunoblotu diagnoza HIV jest uważana za ostateczną. a potem jak być w moim przypadku? W końcu cały PCR zaprzecza. a blot i ifa cały czas skaczą. przez 9 lat. powiedz mi, jeśli wirus był w mojej krwi, to jego rna i DNA można było precyzyjnie określić przez tyle lat. i czy okres inkubacji lub „okna” mogą trwać tyle lat? Czy są jakieś fałszywie ujemne wyniki PCR dla HIV w takim okresie czasu? Tak, zapomniałem powiedzieć, że szybkie testy na HIV, które robię w KVD, są zawsze negatywne, czy też nie możesz na nich polegać? Dzięki.

W tym przypadku diagnostyka PCR nie jest główną metodą identyfikacji dynamiki procesu - bardziej pouczające są metody serologiczne. W takim przypadku prawdopodobieństwo wyników fałszywie ujemnych jest wysokie. szybkie testy na HIV mają wysoki próg czułości, dlatego mogą również dawać fałszywie ujemny wynik.

przepraszam. Zdecydowanie napisałem w złym miejscu. Proszę odpowiedzieć w temacie HIV czy nie HIV. Dzięki.

W przypadku, gdy powiadomienie o otrzymaniu odpowiedzi nie zostało otrzymane pocztą, możesz wyświetlić odpowiedź na swoje pytanie pod tym adresem http://tiensmed.ru/news/answers/vich-ili-ne-vich- .html

Cześć! Czy możesz mi powiedzieć, abym się zarejestrował w LCD (teraz 10 tygodni ciąży) zdał testy na HIV, kilka dni temu zadzwoniłem do lekarza i powiedziałem, że wstępne testy na HIV były pozytywne (pierwszy został wykonany w Kirowogradzie, ale jest nadal brak oficjalnych wyników z Kijowa ), tego samego dnia w naszym laboratorium miejskim wykonano dwa ekspresowe testy firmy "Farmasco" CITO TEST HIV 1/2, oba wyniki są negatywne, asystent laboratorium powiedział, że te testy są wiarygodne i nie mogę się martwić, bo tak się dzieje w czasie ciąży, a te analizy można po prostu pomylić. Lekarz kazał mi ponownie oddać krew i jeszcze dwa razy oddałem krew do analizy w różnych szpitalach (żadnego z trzech wyników nadal nie brakuje). Bardzo się martwię, nie jestem narkomanem, nie było żadnych wątpliwych stosunków seksualnych, jeśli zachoruję, to bardzo rzadko, inne testy są w normie. Czy możesz zaufać szybkim testom? Czy to naprawdę dzieje się w czasie ciąży? Lekarz za bardzo mnie przestraszył. Dziękuję

Przede wszystkim musisz się uspokoić i nie myśleć o złych rzeczach. Czasami w czasie ciąży pojawiają się fałszywie pozytywne wyniki. Konieczne jest ponowne oddanie krwi dla wirusa HIV i oczekiwanie na wyniki testu.

Cześć! faktem jest, że 2 miesiące temu odbyłem stosunek seksualny z dziewczyną (nadal się spotykamy). po 1,5 tygodnia temperatura wzrosła do 37,4. wkrótce spał. dla pewności zdaliśmy test ifa po 2 tygodniach i ponownie po 1,5 miesiąca. obaj mają negatywne odpowiedzi. ale moja temperatura i kaszel wciąż się poprawiają. Czy możesz mi powiedzieć, czy ryzyko jest możliwe? poza tym długo pracowałam bez dni wolnych, a tydzień temu byłam na zwolnieniu lekarskim (ORVI). badania krwi i płuc są w porządku. Dzięki.

Ta temperatura może być związana z przebytą chorobą wirusową, organizm jeszcze nie wyzdrowiał lub przewlekłą przepracowaniem. W przypadku wykluczenia patologii organicznej ogólna analiza krwi i moczu mieści się w normalnych granicach, a dane z badań fluorograficznych również mieszczą się w normalnym zakresie, wówczas konieczne jest wykluczenie chorób przenoszonych drogą płciową: chlamydii, mykoplazmozy, ureaplazmoza, która może powodować zapalenie narządów miednicy małej i cewki moczowej, a w rezultacie wzrost temperatury ciała. Przeczytaj więcej o przyczynach wzrostu temperatury ciała, klikając link: Wysoka temperatura.

Cześć. Jest coś takiego- Ponad rok temu doszło do niezabezpieczonego kontaktu seksualnego z chodzącą dziewczyną. Zapewniła, że ​​na nic nie choruje, ale nie mogę jej uwierzyć na 100 procent. Zapewniła też, że przed złożeniem podania o pracę zdała badania lekarskie (pracowała jako sprzedawca) i wszystko było w porządku. Mimo to 7 miesięcy po kontakcie zdałem test na HIV w laboratorium citylab - wynik okazał się negatywny. Ale ostatnio często zaczynam chorować - od 3 tygodni mam czerwony ból gardła i nie mogę go wyleczyć. Znowu zaczął się bać, ale co, jeśli wtedy to podniósł? Powiedz mi, czy to możliwe i czy warto zaufać analizie z citylab? Boję się znowu z tego zrezygnować, moje nerwy tego nie wytrzymają..

Jeśli wynik jest negatywny, najprawdopodobniej nie jesteś chory ani zarażony wirusem HIV / AIDS. Jednak w celu wyjaśnienia diagnozy zaleca się ponowne wykonanie analizy w specjalistycznych laboratoriach w instytucjach państwowych, badanie to przeprowadzane jest anonimowo. W przypadku, gdy samodzielne leczenie nie przyniesie pożądanego rezultatu, zaleca się skonsultowanie się z otolaryngologiem w celu przeprowadzenia odpowiedniego badania i przepisania odpowiedniego leczenia. Przeczytaj więcej o testowaniu na HIV w serii artykułów, klikając link: HIV.

Powiedz mi, czy możesz podać jakieś cechy laboratorium citylab? Niemniej jednak nie zawsze możliwe jest przekazanie analizy instytucji państwowej. A jakie jest procentowe prawdopodobieństwo, że mężczyzna zostanie zarażony przez kontakt bez zabezpieczenia?

Niestety nie zapewniamy oceny porównawczej laboratoriów i prywatnych placówek medycznych. W przypadku, gdy masz wątpliwości co do wiarygodności wyników, przeprowadź badanie w innym ośrodku i najpierw poproś o licencję na świadczenie tych usług medycznych, czy ośrodek ten ma prawo do przeprowadzenia tego badania i czy wszystko jest zgodne z przyjętymi standardami. Ryzyko infekcji jest takie samo dla obu płci w przypadku stosunku bez zabezpieczenia. Przeczytaj więcej o testowaniu na HIV w serii artykułów, klikając link: HIV.

Dzień dobry! Dziecko ma 8 miesięcy, zostało przebadane na HIV testem ELISA, we krwi znaleziono gp160 + i p25 +, reszta to minus, wniosek IB jest wątpliwy. Sądząc po tych analizach, okazuje się, że dziecko ma +? gp160 + gp110 / 120 - p68 - p55 - p52 - gp41 - p34 - p25 + p18 -

Niestety, na podstawie uzyskanych danych nie można postawić diagnozy ze 100-procentowym prawdopodobieństwem, ponieważ nie wyklucza się fałszywie dodatniego wyniku. Aby postawić dokładną diagnozę, będziesz musiał przejść szereg badań, w tym powtórzyć tę analizę metodą ELISA, a także przejść analizę metodą PCR. Następnie należy skontaktować się z wyspecjalizowaną instytucją medyczną, w której lekarz chorób zakaźnych będzie mógł ocenić wyniki uzyskane w kompleksie. Możesz dowiedzieć się więcej o przejawach zakażenia wirusem HIV w sekcji tematycznej naszej witryny, klikając link: HIV

Czy może wykazać fałszywie dodatni wynik w przypadku ostrych infekcji dróg oddechowych lub bardziej ostrych chorób zakaźnych? Gdzieś przeczytałem, że przy 58 chorobach lub nawet wyższych może pokazywać "+", w tym szczepienie przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu B, jeśli cierpią nerki itp.?

Istnieje prawdopodobieństwo wyniku fałszywie dodatniego, dlatego zalecam wykonanie następujących czynności: ponowne wykonanie analizy - metodą ELISA i metodą PCR, a następnie ponowne odwiedzenie lekarza chorób zakaźnych. Więcej na temat diagnozy zakażenia wirusem HIV dowiesz się w dziale tematycznym: HIV

Dzień dobry! Immunoblot jest niezdefiniowany ze względu na białko p25. Jakie jest prawdopodobieństwo HIV?

W tej sytuacji konieczne jest uważne przestudiowanie protokołów badawczych w połączeniu z innymi wskaźnikami, ponieważ na podstawie tych danych nie można poczynić założeń. Przypuszczalnie wynik można uznać za wątpliwy i po 3 miesiącach wymagane jest ponowne badanie. Przeczytaj więcej w sekcji naszej strony internetowej: HIV

Dzień dobry.
Czy możesz skomentować test ELISA na HIV?
1 surowica +3,559 k = 13,3
+2,121 k = 4,9
p 24 neg
2 surowica +3,696 k = 13,9
+2,477 k = 5,7

W takim przypadku wynik fałszywie dodatni nie jest wykluczony, biorąc pod uwagę, że metoda ELISA jest pośrednia, dlatego zalecam przekazanie analizy inną, bardziej czułą metodą - immunoblottingu. Więcej szczegółowych informacji na ten temat można znaleźć w odpowiedniej sekcji naszej strony internetowej, klikając poniższy link: HIV

Dzień dobry, powiedz mi, na co mam się dostroić? Rok temu planując dziecko, przeszliśmy z mężem wszystkie testy, w tym na HIV (traktowali to bardzo poważnie i poprawnie), byłam przebadana w Republice Kirgiskiej.Mój mąż w Kijowie dał odpowiedź negatywną, ja powiedziano, że jakiś odczynnik nie zadziałał, trzeba go ponownie przekazać w Centrum AIDS w Kijowie. Po przejściu analizy w Ośrodku odpowiedź również była dla mnie negatywna. Teraz jestem na 14-tygodniowej pozycji tj. Rejestruję się, przechodzę wszystkie testy i znowu przyszła odpowiedź, analiza na HIV jest niepewna, zdałem ponownie w klinice i zdałem w "Dovir" ekspresowy test na uspokojenie, ale nie uspokoiłem ekspresowy test wykazał pozytywny wynik (drugi pasek był mniej wyraźny), zaraz po tych wszystkich zabiegach nie marnowałem czasu zwracając się do Centrum AIDS, również zdałem analizę, oczekuję wyniku. (Nie mogę się uspokoić) Proszę powiedzieć, na ile można ufać ekspresowym analizom i dlaczego nie ma odpowiedzi na analizę HIV za pierwszym razem? (mój mąż i ja prowadzimy zdrowy tryb życia i kochamy się). Dziękuję.

Nie panikuj z wyprzedzeniem – ekspresowa diagnostyka nie jest podstawą do postawienia diagnozy HIV, pozwala zidentyfikować grupy pacjentów, którzy potrzebują bardziej pogłębionych badań. W takich sytuacjach zaleca się przeprowadzenie immunoblottingu i osobistą konsultację z lekarzem chorób zakaźnych. Więcej szczegółowych informacji na ten temat można znaleźć w sekcji tematycznej naszej strony internetowej, klikając poniższy link: HIV. Możesz również uzyskać dodatkowe informacje w następującej sekcji naszej strony internetowej: Diagnostyka laboratoryjna

Witam, byłam w klinice chorób zakaźnych, właśnie dzisiaj wypisano ich przy wyjeździe, zadzwonił do mnie lekarz i wyjaśnił, że mam pozytywne ifa, najpierw jak mnie przyjęto do szpitala, to było negatywne, potem jak ponowna próba uzyskali pozytywne wyniki, wysłali badania do imunoblot na górze sokolników powiedzieli, że będą gotowe w przyszłym tygodniu, byłem w szpitalu z bólem gardła i wirusami paragrypy, przychodzę w szoku, nadal nie rozumiem jak aby to zinterpretować, sporządzono również wyciąg dla mojej kliniki wskazujący, że znaleziono ifa, a poniżej, że imunoblot działa, jeśli jutro sprawdzę swoją klinikę, to w tym oświadczeniu wszystko będzie wskazane, jak prawdopodobne jest obecność wirusa HIV? czy ze względu na to, że byłem leczony na ból gardła wirusa paragrypy, wykażę pozytywne wyniki na ifa?

Prawdopodobieństwo fałszywego trafienia jest bardzo wysokie. Obecność jednego pozytywnego wyniku nie daje jeszcze podstaw do rozpoznania HIV, dlatego zalecamy oczekiwanie na wynik immunoblottingu, po czym osobiście skonsultuj się z lekarzem chorób zakaźnych w sprawie dalszych badań i obserwacji. Angina, paragrypa i inne przeziębienia nie wpływają znacząco na wyniki analizy.

Chcę w to uwierzyć, ale pod koniec sierpnia zachorowałem, temperatura wzrosła, 37,5-38 było luźnym stolcem przez około 4 dni, było na wakacjach gdzie było dużo dyskotek, piłem wodę z kranu, jak w ogóle , wiele innych, bo to bardzo droga szklanka wody kosztowała 300 zł, płynny stolec kojarzył mi się z taką temperaturą z jakimś rodzajem infekcji jelitowej złapanej w wodzie, nie pamiętam dokładnie, ale był też mały wysypka w górnej części ciała, kiedy leciałam do domu z gorączką, zadzwoniłam do lekarza, napisała infekcję rotawirusem, po 5 dniach choroby zgłosiłam się na ochotnika do opuszczenia go i pójścia do pracy, gdzie po kilku dniach zachorowałam na zapalenie zatok ,(wtedy musiałem być na ulicy z powodu mojej długiej pracy), połączyłem to, że duży spadek temperatury z wakacji i zatrucie pozbawiło mnie odporności i dlatego znów przeziębiłem się z zapaleniem zatok, w sumie znów jest chory , w kierunku Laury wypiłem klatid cp 500 w ciągu 10 dni, zdałem, wróciłem do pracy po 3 tygodniach byłem w podróży służbowej na dworzec łuk kraju przez 3 dni. klimatyzatory w transporcie i hotelu były bezlitosne i po powrocie do domu w samolocie miałem już temperaturę 39,5.tu jestem w domu z temperaturą 40, zadzwoniłem do lekarza w domu, napisałem ARVI i powiedziałem, że moje gardło jest bardzo czerwony, mam przewlekłe zapalenie migdałków i powiedziałem to do laryngologa, napisała, żeby wypić antybiotyk Levolet R. wezwał pogotowie bo gorączka wynosiła 40 i nie spadła, nie zaproponowano hospitalizacji, następnego dnia ta sama historia - karetka dałem zastrzyk przeciwgorączkowy i wyszedłem.Za trzecim razem nalegałem na hospitalizację, ledwo zabrali mnie do szpitala chorób zakaźnych, gdzie wykryto mieszaną infekcję paragrypy i infekcję adenowirusem, ale po wypisie lekarz na oddziale powiedział, że mam HIV jeśli jest pozytywny i zrobili to dwa razy, jestem w szoku, nie wiem, co robić nie mogę jeść ani pić .powiedziała, że ​​mam wyraźną ostrą infekcję HIV i do sprawdzenia przysłali badanie krwi na immunoblot do centrum AIDS,
teraz rysując analogię do wydarzeń, które mi się przydarzyły w ostatnim czasie, a także 3 zwolnienia lekarskie pod rząd, wypróbowałam na sobie wszystkie objawy i boję się, co może być, po wypisaniu tego samego dnia, w którym poszłam wykonać analizę invitro anonimowo i następnego dnia wynik dla ifa był taki sam +
Wybaczę za tak szczegółowe informacje, ale jestem porwany i zabity, piję silne środki uspokajające i nie mam apetytu i praktycznie nie jem, bardzo schudłam
Mam jeszcze takie pytanie, że lekarz przy wypisie ze szpitala wskazał wynik HIV dla ifa stwierdzono i poniżej, że immunoblot działa, ale jak zamknę bl w mojej klinice w miejscu w, wszystko będzie napisane tam. co mam zrobić? nie będzie to już poufne. Poprosiłem lekarza, aby leczył lekarkę, aby nie pisała tej analizy w oświadczeniu, na które mi odmówiła, na ile przestrzegane są tutaj moje prawa do nieudostępniania informacji.

Niestety wyniki badań przeprowadzonych w szpitalu są uwzględniane w wypisie, ponieważ lekarz prowadzący musi mieć pełną informację o stanie Twojego zdrowia. W tej sytuacji nie mówimy o ujawnieniu informacji, ponieważ są one przekazywane tylko innemu lekarzowi prowadzącemu, który będzie Cię wtedy obserwował.

Cześć! Zrobiłem testy na HIV, bo potrzebowałem certyfikatu do FMS, nie dali testów przez kilka tygodni, potem zaprosili mnie do kierownika i dali im pozytywny wynik, wzięli kilka paragonów i wysłali je do regionalnego Centrum AIDS do dalszego zbadania, zgodnie z zapisem na certyfikacie. Chcę wziąć go w innej klinice, a potem udać się do regionalnej, czy nie ma sensu powtarzać? Po prostu nie rozumiem, dlaczego tak długo ich nie oddawali. No bo lekarz powiedział, że rzekomo zrobili jakąś analizę i powinnam mieć za nich jeszcze 4t rubli, bo gdyby to zrobili, to wtedy, oprócz zaświadczenia daliby szczegółowe informacje o chorobie?

W tej sytuacji nie należy wpadać w panikę z wyprzedzeniem - uzyskanie jednego pozytywnego wyniku nie pozwala nam jeszcze wiarygodnie ocenić możliwej infekcji, ponieważ wyniki fałszywie dodatnie nie są wykluczone. Zalecamy ponowne wykonanie testu, a jeśli wynik będzie pozytywny, konieczne będzie wykonanie kolejnego testu - immunoblottingu. Laboratorium z reguły nie podaje szczegółowych informacji o wynikach, co jest normalną i powszechną praktyką. Na wszystkie pojawiające się pytania lekarz prowadzący może odpowiedzieć po badaniu podczas osobistej konsultacji.

Zapomniałem dodać, że od początku czerwca do połowy września robiłem sobie kurs sterydów anabolicznych, a mianowicie Sustanon 250 to mieszanka testosteronów i stanozololu z primabolanem, chciałem przygotować się na lato i wakacje, czy można je sprowadzić moją odporność i wszystko, co mi się przydarzyło.

Zaburzenia odporności, a także obecność chorób autoimmunologicznych mogą dawać fałszywie dodatnie wyniki testu na HIV. Dlatego w przypadku uzyskania 2 pozytywnych wyników metodą ELISA zaleca się przeprowadzenie immunoblottingu, który pozwoli dokładnie odpowiedzieć na pytanie, czy występuje infekcja, czy nie.

co oznacza obecność chorób autoimmunologicznych?co to jest?
ogólnie mogę powiedzieć, że chorowałam dość często od wczesnego dzieciństwa i nawet kilka lat temu prosiłam lekarza prowadzącego o zadbanie o moją odporność, bo byłam ciągle zmęczona i często boli, głównie ucho gardło nos, ale przez cały czas były negatywne wyniki na HIV, przekazałem je z wystarczającą łatwością, bez wahania.

Fałszywie dodatni wynik testu na HIV może być po niedawnej infekcji wirusowej, szczepieniu przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu B, gruźlicy, zapaleniu wątroby, opryszczce, a także na tle chorób autoimmunologicznych takich jak: reumatoidalne zapalenie stawów, toczeń rumieniowaty układowy, zapalenie skórno-mięśniowe, twardzina, choroby tkanek itp.

Chcę dodać do mojego pytania, mój immunoblot przyszedł, był negatywny, ale lekarz powiedział, że skoro były dwa ifa + kiedy byłem w szpitalu chorób zakaźnych, nadal musisz powtórzyć analizę, ale trochę później

W takim przypadku taktyka medyczna jest uzasadniona - zalecamy ponowne zdanie immunoblotu po 1,5-2 miesiącach.

Jakie jest prawdopodobieństwo: 2 ifa + różnica między próbkami krwi wynosi około 2 dni, immunoblot -; leżał w szpitalu chorób zakaźnych z infekcją adenowirusem i paragrypą, gdzie pobrano krew, immunoblot został wysłany do centrum AIDS

Dzień dobry! Zarejestrowałem się na osiedlu, zdałem wszystkie testy, lekarz mówi, że mam opryszczkę we krwi, potem dzwonią z centrum AIDS i mówią, że muszę to ponownie wydać, i mówią mi, że mam HIV pozytywny, i w panice poszłam z mężem stworzyć drugą analizę przeszła i miałam od męża ifa i immunoblot + - podałam ponownie miesiąc później. Mam + męża - teraz jestem w 23 tygodniu ciąży!

W tej sytuacji niestety istnieje możliwość zakażenia wirusem HIV, ale ostatecznej diagnozy nie można postawić nawet przy pozytywnym wyniku immunoblotu, biorąc pod uwagę stan ciąży. W takiej sytuacji wymagana jest eliminacja wyników fałszywie dodatnich, dlatego zalecamy ponowne wykonanie testu i osobistą konsultację z lekarzem chorób zakaźnych.

Jeśli immunoblot wykazał pozytywny wynik na obecność wirusa HIV, a badanie przesiewowe jest negatywne, w który wynik wierzyć?

Immunoblot jest dokładniejszym badaniem, dlatego w tym badaniu, jeśli uzyska się pozytywny wynik, należy kontynuować badanie i osobiście odwiedzić lekarza chorób zakaźnych.