POSADA: Interferón alfa 2b

Fabricante: Sikor Biotech JSC

Clasificación anatómico-terapéutica-química: Interferón alfa-2b

Número de registro en el RK: No. RK-BP-5 No. 012842

Periodo de registro: 18.06.2014 - 18.06.2019

KNF (los medicamentos están incluidos en el formulario nacional de medicamentos de Kazajstán)

ALO (incluido en la lista de suministro gratuito de medicamentos para pacientes ambulatorios)

UNIDAD (Incluida en la Lista de medicamentos bajo el volumen garantizado de atención médica que se comprará a un Distribuidor único)

Precio máximo de compra en la República de Kazajstán: 33 116,64 KZT

Instrucciones

Nombre comercial

Realdiron

Nombre internacional no propietario

Interferón alfa

Forma de dosificación

Polvo liofilizado para preparación de solución inyectable, 1.000.000 UI, 3.000.000 UI, 6.000.000 UI, 9.000.000 UI y 18.000.000 UI

Estructura

Una botella contiene

substancia activa : interferón alfa-2b recombinante humano

1 millón de UI, 3 millones de UI, 6 millones de UI, 18 millones de UI

excipientes: dextrano 60, cloruro de sodio, hidrogenofosfato de disodio dodecahidrato, dihidrogenofosfato de sodio dihidrato

Descripción

Polvo blanco o masa porosa

Fgrupo armacoterapéutico

Inmunomoduladores. Interferones. Interferón alfa

Código ATX L03AB05

Propiedades farmacologicas

Farmacocinética

El tiempo de inicio de la concentración máxima de interferón-alfa 2b después de la inyección intramuscular es de 2 horas y dura hasta 12 horas, después de la administración subcutánea: 7,3 horas, después de 20 horas no se detecta el fármaco.

T1 / 2 (vida media) con inyección intramuscular es de aproximadamente 2-3 horas. La biodisponibilidad es del 80%.

La droga se distribuye uniformemente sobre órganos y tejidos. Se biotransforma en los riñones y, en pequeña medida, en el hígado. Se excreta parcialmente sin cambios, principalmente a través de los riñones.

Farmacodinámica

El interferón alfa-2b es una proteína altamente purificada obtenida mediante ADN recombinante. La estructura polipeptídica de la molécula, la actividad biológica y las propiedades farmacológicas son idénticas a las del interferón alfa-2b leucocitario humano. Tiene efectos antivirales, antiproliferativos, antitumorales e inmunomoduladores.

El fármaco, al interactuar con receptores relacionados en la superficie celular, inicia una compleja cadena de cambios dentro de la célula. Se supone que estos procesos están asociados con la prevención de la replicación viral en la célula, la inhibición de la proliferación celular y el efecto inmunomodulador del interferón. El interferón alfa-2b tiene la capacidad de estimular la actividad fagocítica de los macrófagos, así como la actividad citotóxica de las células T y NK (asesinos naturales). Estas propiedades del interferón son responsables del efecto terapéutico del fármaco.

Indicaciones para el uso

Como parte de la terapia combinada en adultos. Enfermedades virales

- hepatitis B crónica activa si es imposible de usar

interferones pegilados

- hepatitis C crónica si es imposible de usar

interferones pegilados

Enfermedades oncológicas - leucemia de células pilosas - leucemia mieloide crónica - cáncer de riñón - melanoma maligno.

Método de administración y dosificación.

La solución de Realdiron se administra por vía intramuscular o subcutánea. Antes de su uso, el contenido del frasco se disuelve en 1 ml de agua para inyección. La solución del medicamento debe ser transparente, sin inclusiones extrañas. En la hepatitis B crónica activa, Realdiron se administra a 3 millones de UI tres veces por semana durante 6 meses. Si, después de la terapia, no se observa mejoría clínica, bioquímica y / o desaparición de HBsAg dentro de los 3 meses, se suspende el medicamento.

En la hepatitis C crónica, Realdiron se prescribe 3 millones de UI 3 veces a la semana durante 6 meses. Si, después de la administración del medicamento dentro de un mes de terapia, no hay una disminución del 50% en la actividad de ALT en el plasma sanguíneo, la dosis del medicamento se aumenta a 6 millones de UI 3 veces por semana. Si después de 3 meses de terapia no hay mejoría clínica bioquímica, se debe cancelar el medicamento.

Con la leucemia de células pilosas, se administran diariamente 3 millones de UI durante 2 meses; al alcanzar la remisión hematológica: 3 millones de UI 3 veces por semana.

En la leucemia mieloide crónica, se administra una dosis inicial de 3 millones de UI por día por vía intramuscular o subcutánea. Con buena tolerancia, la dosis del fármaco se incrementa cada semana hasta una dosis máxima de 9 millones de UI por día. Una vez que el recuento de glóbulos blancos se haya estabilizado, esta dosis se puede administrar tres veces por semana. El curso del tratamiento se lleva a cabo de forma indefinida, con la excepción de aquellos casos en los que se debe interrumpir la terapia (por ejemplo, con una progresión rápida de la enfermedad o intolerancia a los medicamentos).

Para el cáncer de riñón, Realdiron se usa a 3 millones de UI diarias durante 10 días. Con buena tolerancia, la dosis del fármaco se incrementa cada semana hasta una dosis máxima de 18 millones de UI por día. Después de 3 meses de tratamiento, se inicia la terapia de apoyo con 18 millones de UI tres veces por semana durante 6 meses.

En el melanoma maligno, se administra una dosis inicial de 3 millones de UI por día por vía intramuscular o subcutánea. Con buena tolerancia, la dosis del fármaco se incrementa cada semana hasta una dosis máxima de 9-18 millones de UI diarias. Después de lograr el efecto clínico, cambian a terapia de mantenimiento en 9-18 millones de UI 3 veces por semana. La terapia adyuvante con Realdiron después de la extirpación quirúrgica del melanoma maligno en estadio I-II puede alargar el tiempo hasta la recaída.

Efectos secundarios

a menudo

Fiebre, fatiga, malestar, dolor de cabeza, mialgia, escalofríos, temblores, síntoma similar a la gripe

Anorexia, náuseas

con menos frecuencia

Cambios en el gusto, estomatitis, sequedad de boca, daño en la superficie de los dientes y membranas mucosas de la boca, vómitos, diarrea, estreñimiento, heces blandas, dolor abdominal.

Alopecia, picazón, piel seca, erupción

Dolor de espalda, dolor musculoesquelético, dolor de pecho, miositis, artralgia

Depresión, pensamientos y acciones suicidas, suicidio

Sudoración excesiva, especialmente por la noche.

Irritabilidad, insomnio, somnolencia, ansiedad, disminución de la concentración, labilidad emocional, mareos.

Hipotensión arterial, hipertensión

raramente

Inflamación, enrojecimiento, irritación en el lugar de la inyección.

Emoción, nerviosismo, psicosis, incluidas alucinaciones, comportamiento agresivo, agitación, alteración de la conciencia, neuropatía, polineuropatía, neuropatía periférica, parestesia, hipostesia, convulsiones, pérdida del conocimiento.

Infección viral, incluido el herpes simple

Eritema

Conjuntivitis, dolor ocular, visión borrosa, hemorragias retinianas, retinopatías, cambios retinianos focales, obstrucción de una arteria o vena retiniana, disminución de la agudeza visual o campos visuales limitados, neuritis óptica, edema de los discos ópticos

Disfunción de la glándula lagrimal

Epistaxis, congestión nasal, sinusitis, rinitis

Migraña

Tos, faringitis, infiltrados pulmonares, neumonía, disnea, trastornos respiratorios

Pérdida de peso

Taquicardia, palpitaciones.

Disminución de la libido, irregularidades menstruales (amenorrea, menorragia)

Aumento del apetito, glositis, encías sangrantes.

Rabdomiólisis (a veces grave)

Discapacidad o pérdida auditiva

Edema facial, función renal alterada, síndrome nefrótico, renal

insuficiencia, hiperuricemia

Hiper e hipotiroidismo, hepatotoxicidad (incluidas muertes)

Leucopenia

Trastornos dentales y periodontales (incluidos los que conducen a la pérdida de dientes)

muy raramente

Aumento del apetito, diabetes mellitus, hiperglucemia, hipertrigliceridemia, colitis, hepatomegalia, pancreatitis.

Isquemia cerebrovascular, hemorragias cerebrovasculares

Sarcoidosis o exacerbación de sarcoidosis

Reacciones alérgicas, eritema multiforme, síndrome de Stevens-Johnson, necrólisis epidérmica tóxica

Trombocitopenia, linfocitopenia, anemia aplásica

Linfadenopatía

Somnolencia

Necrosis en el lugar de la inyección

Trastornos autoinmunitarios e inmunomediados, incl. púrpura trombocitopénica idiopática, artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico, vasculitis y síndrome de Vogt-Kayanagi-Harada

Ruido en los oídos

Infarto de miocardio, arritmia (generalmente en pacientes con antecedentes de enfermedad cardiovascular o tratamiento previo con fármacos cardiotóxicos), miocardiopatía transitoria reversible (observada en pacientes sin antecedentes del sistema cardiovascular)

Neumonía

muy raramente (en monoterapia o en combinación con ribavirina)

Aplasia completa de la médula ósea roja

Cambios en los parámetros de laboratorio (observados con más frecuencia al prescribir

fármaco en dosis de más de 10 millones de UI por día): una disminución en el número de granulocitos,

una disminución en los niveles de hemoglobina, un aumento en la actividad de ALT, AST (observado cuando se usa para todas las indicaciones, excepto para la hepatitis viral crónica), ALP, LDH, creatinina sérica y nitrógeno ureico

En niños, incluida la terapia combinada con ribavirina (≥ 1% de los pacientes que reciben terapia combinada con ribavirina)

a menudo

Anemia, neutropenia

Hipotiroidismo

Depresión, labilidad emocional, insomnio, irritabilidad, dolor de cabeza, mareos.

Anorexia, náuseas, vómitos, dolor abdominal, diarrea.

Alopecia, erupción

Artralgia, mialgia

Reacciones inflamatorias en el lugar de la inyección: dolor, hiperemia.

Debilidad, fiebre, escalofríos, síntomas similares a los de la gripe, malestar, infección viral, faringitis

Retraso en el desarrollo físico (retraso en el crecimiento y / o peso corporal en comparación con la edad)

a menudo

Palidez

Sangrado de nariz

Infección bacteriana, neumonía, infección por hongos, herpes simple

Neoplasias, no clasificadas

Trombocitopenia, linfadenopatía

Hipertiroidismo, virilismo

Hipertrigliceridemia, hiperuricemia

Agitación, temblor, somnolencia, reacción agresiva, ansiedad, apatía, nerviosismo, alteración del comportamiento, sonambulismo, pensamientos suicidas, confusión, sueños anormales, alteración del sueño, hipercinesia, disfonía, parestesia, hiperestesia, hipostesia, disminución de la concentración de atención.

Conjuntivitis, dolor ocular, visión borrosa, disfunción de la glándula lagrimal

Enfermedad de Raynaud

Tos, disnea, otitis media, congestión nasal, irritación de la mucosa nasal, rinorrea, estornudos, taquipnea

Trastornos gastrointestinales, aumento del apetito, estreñimiento, heces blandas, trastornos rectales, dispepsia, reflujo gastroesofágico, gastroenteritis, glositis, estomatitis, incl. ulcerativo, dolor de muelas, disfunción hepática

Dolor en el pecho, en el cuadrante superior derecho del abdomen.

Acné, eccema, cambios en las uñas, piel seca, grietas en la piel, reacciones de fotosensibilidad, erupción maculopapular, cambios en la pigmentación de la piel, eritema, sudoración, hematoma, prurito

Infecciones del tracto urinario, trastornos urinarios, enuresis.

Irregularidades menstruales, amenorrea, menorragia, alteraciones vaginales, vaginitis, dolor en el área testicular (en niños)

Contraindicaciones

Hipersensibilidad al activo oa alguno de los excipientes.

Enfermedades cardíacas graves, incluidos antecedentes de problemas cardíacos no controlados, infarto de miocardio reciente, arritmias cardíacas graves

Enfermedad renal o hepática grave, incluidas metástasis tumorales en ellos, insuficiencia renal con aclaramiento de creatinina inferior a 50 ml / min, cuando se administra en combinación con ribavirina

Cirrosis hepática descompensada

Hepatitis crónica con cirrosis grave o insuficiencia hepática

Hepatitis crónica tratada en el pasado con inmunosupresores o glucocorticosteroides

Enfermedades autoinmunes, incl. presente o antecedentes de hepatitis autoinmune

Trastornos de la tiroides no controlados por tratamientos estándar

Historial médico o mental preexistente en niños y adolescentes

Niños menores de 3 años con hepatitis C crónica

Embarazo y lactancia cuando se administra en combinación con ribavirina

Cuando se administra en combinación con ribavirina, también se deben tener en cuenta las contraindicaciones especificadas en las instrucciones de uso de ribavirina.

Interacciones con la drogas

El interferón alfa inhibe las enzimas hepáticas microsomales (citocromo P-450), por lo tanto, puede interrumpir el metabolismo de muchos fármacos (teofilina, etc.), aumentando su concentración en sangre.

Debido al riesgo de reacciones adversas del sistema nervioso central, los narcóticos, hipnóticos y sedantes deben usarse con extrema precaución junto con el interferón alfa.

La interacción de medicamentos entre Realdiron y otros medicamentos no se ha estudiado completamente. Realdiron debe usarse con precaución en combinación con medicamentos que potencialmente tienen un efecto mielosupresor.

Con el uso simultáneo de Realdiron y zidovudina, se puede observar un efecto sinérgico sobre una disminución en el número de leucocitos. Los pacientes que recibieron dicha terapia experimentaron casos de neutropenia dependientes de la dosis más frecuentes de lo esperado con la monoterapia con zidovudina. Los pacientes que reciben Realdiron como parte de una terapia combinada con ribavirina o zidovudina tienen un mayor riesgo de anemia.

Se desconocen los efectos del uso de Realdiron en combinación con medicamentos antirretrovirales.

Los interferones pueden afectar los procesos metabólicos oxidativos. Esto debe tenerse en cuenta cuando se usa simultáneamente con medicamentos metabolizados por oxidación (incluidos los derivados de xantina: aminofilina y teofilina). Con el uso simultáneo de Realdiron con teofilina, es necesario controlar la concentración de esta última en el suero sanguíneo y, si es necesario, ajustar el régimen de dosificación.

Interacciones farmacéuticas

Realdiron no debe mezclarse con otras sustancias medicinales excepto con una solución de cloruro de sodio al 0,9%.

instrucciones especiales

Hepatitis B

Antes de iniciar el tratamiento en pacientes con hepatitis B, se recomienda realizar una biopsia hepática para confirmar la hepatitis crónica y determinar la extensión de la lesión, así como para asegurarse de que no haya antecedentes o antecedentes de encefalopatía, sangrado por várices esofágicas, ascitis u otros signos clínicos de descompensación.

Antes de comenzar la terapia con Realdiron, debe centrarse en los siguientes indicadores:

norma de bilirrubina

tiempo de protrombina en adultos: alargamiento de no más de 3 segundos

niños - alargamiento no más de 2 segundos

leucocitos ≥ 4.000 / mm3

plaquetas de adultos ≥ 100.000 / mm3

niños ≥ 150.000 / mm3

Hepatitis C

La forma óptima de tratamiento es la terapia combinada con ribavirina. La monoterapia con Realdiron se lleva a cabo principalmente en caso de intolerancia o en presencia de contraindicaciones para el uso de ribavirina.

Cuando use Realdiron como parte de una terapia combinada con ribavirina para la hepatitis C crónica, lea también las instrucciones para el uso médico de la ribavirina.

Se recomienda una biopsia de hígado para todos los pacientes con hepatitis C crónica, pero en ciertos casos (por ejemplo, pacientes con genotipos virales 2 y 3), el tratamiento es posible sin confirmación histológica.

Adultos. Antes de comenzar la terapia con Realdiron, es necesario asegurarse de que no haya antecedentes o antecedentes de encefalopatía, sangrado por varices esofágicas, ascitis u otros signos clínicos de descompensación, mientras se concentra en los siguientes indicadores:

bilirrubina ≤ 2 mg / dL

albúmina estable y dentro de los límites normales.

alargamiento del tiempo de protrombina en no más de 3 segundos en adultos, en 2 segundos en niños

leucocitos ≥ 3.000 / mm3

plaquetas ≥ 70.000 / mm3

la creatinina sérica es normal o cercana a lo normal

Cuando se utiliza Realdiron en combinación con ribavirina en pacientes con insuficiencia renal (aclaramiento de creatinina\u003e 50 ml / min), se debe controlar el hemograma completo, la creatinina en sangre y orina, teniendo en cuenta la posibilidad de anemia. En pacientes mayores de 50 años, esta monitorización debe realizarse una vez a la semana.

Monoterapia.

Durante el tratamiento con Realdiron, es posible la disfunción tiroidea: hipotiroidismo o hipertiroidismo. Antes de comenzar a usar Realdiron, se debe determinar el nivel de hormona estimulante de la tiroides (TSH) en el suero sanguíneo y se debe realizar una ecografía de la glándula tiroides. Si se detecta alguna anomalía, se debe realizar la terapia adecuada.

Solicitud de coinfección por el VIH y el virus de la hepatitis C

Los pacientes que además están infectados por el VIH y están recibiendo terapia antirretroviral de gran actividad (TARGA) pueden tener un mayor riesgo de acidosis láctica. Se debe tener cuidado de agregar Realdiron y ribavirina a HAART.

En pacientes cirróticos infectados adicionalmente con VIH y virus de la hepatitis C y que reciben TARGA, puede aumentar el riesgo de descompensación hepática y muerte.

El uso adicional de interferones alfa solos o en combinación con ribavirina aumenta el riesgo mencionado en esta categoría de pacientes.

Trastornos dentales y periodontales.

Investigación de laboratorio

Antes de comenzar el tratamiento con Realdiron y periódicamente durante la terapia, todos los pacientes son monitoreados para ver la imagen de sangre periférica (con la determinación de la fórmula de leucocitos y el número de plaquetas), parámetros bioquímicos de la sangre (determinación del nivel de electrolitos, enzimas hepáticas, incluida ALT, bilirrubina, proteína total y fracciones, incluidas albúmina y creatinina). Antes y durante el tratamiento con Realdiron, el nivel de recuentos sanguíneos debe estar dentro del rango normal.

Durante el tratamiento de pacientes con hepatitis crónica, se recomienda el siguiente esquema de monitoreo de parámetros de laboratorio: 1, 2, 4, 8, 12, 16 semanas y luego una vez al mes, durante todo el curso del tratamiento. Si la ALT aumenta a un valor que es el doble o más del valor que tenía antes del inicio de la terapia, se puede continuar el tratamiento con Realdiron, excepto en casos de signos de insuficiencia hepática. En este caso, la determinación de ALT, tiempo de protrombina, fosfatasa alcalina, albúmina y bilirrubina debe realizarse cada 2 semanas.

En pacientes con melanoma maligno, la función hepática y el recuento de leucocitos (con una fórmula) deben controlarse semanalmente durante la inducción de la remisión y mensualmente durante la terapia de mantenimiento.

Hipersensibilidad inmediata

La aparición de una erupción cutánea transitoria no requiere la interrupción del tratamiento.

Enfermedades acompañantes

Realdiron se prescribe con precaución a pacientes con antecedentes de enfermedades crónicas graves: enfermedad pulmonar obstructiva crónica, diabetes mellitus con tendencia a la cetoacidosis. Se necesita especial cuidado al usar el medicamento en pacientes con trastornos hemorrágicos.

(tromboflebitis, embolia pulmonar) o con mielosupresión grave.

Quimioterapia simultánea

El uso de Realdiron en combinación con otros medicamentos de quimioterapia (por ejemplo, citarabina, ciclofosfamida, doxorrubicina, tenipósido) aumenta el riesgo de efectos tóxicos (su gravedad y duración) que, debido al uso combinado, pueden poner en peligro la vida o causar la muerte. Debido al riesgo de una mayor toxicidad, es necesario seleccionar cuidadosamente la dosis de Realdiron y los agentes quimioterapéuticos concomitantes.

Autoanticuerpos y enfermedades autoinmunes

El tratamiento con Realdiron puede provocar la aparición de autoanticuerpos y el desarrollo de enfermedades autoinmunes. Los pacientes con predisposición hereditaria o sospecha de desarrollo de síntomas de enfermedades autoinmunes deben ser monitoreados constantemente para su diagnóstico temprano. Si se sospecha el síndrome de Vogt-Koyanagi-Harada en pacientes con hepatitis C crónica, se debe suspender la terapia antiviral y discutir la necesidad de terapia con corticosteroides.

Fiebre

La fiebre puede ser una manifestación del síndrome pseudogripal que es común con la terapia con interferón, pero deben descartarse otras causas.

Para reducir la temperatura corporal y reducir el dolor de cabeza en el síndrome similar a la influenza, que puede ocurrir durante la terapia con Realdiron, se recomienda el uso de terapia antipirética.

Aplicación para la función hepática alterada

Las muertes por hepatitis tóxica han sido raras. Si aparecen signos de disfunción hepática en el contexto del uso de Realdiron, el paciente necesita una observación cuidadosa y, con la progresión de los síntomas, se debe suspender el medicamento.

Los pacientes con hepatitis B crónica que tienen una función hepática sintética disminuida (p. Ej., Albúmina disminuida o tiempo de protrombina prolongado), pero que cumplen los criterios de elegibilidad para el inicio del tratamiento, pueden tener un mayor riesgo de desarrollar descompensación clínica si los niveles de aminotransferasas aumentan durante el tratamiento. Antes de tratar a estos pacientes, es necesario determinar las ventajas de usar Realdiron sobre el posible riesgo.

Rechazo de aloinjertos

La evidencia preliminar sugiere que la terapia con interferón alfa puede aumentar el riesgo de rechazo del trasplante renal. También se ha informado de rechazo de trasplante de hígado, aunque no se ha establecido una relación causal con la terapia con interferón alfa.

Hidratación

Al tratar con Realdiron, es necesario asegurar una adecuada hidratación del cuerpo, ya que en algunos casos se observó hipotensión arterial provocada por deshidratación (que puede requerir la administración de líquidos adicionales).

El sistema cardiovascular

Los pacientes con antecedentes de enfermedad cardiovascular (insuficiencia cardíaca crónica, infarto de miocardio y / o arritmias) requieren una supervisión médica cuidadosa al prescribir Realdiron. Se han notificado casos aislados de miocardiopatía, a veces con desarrollo reversible después de interrumpir el tratamiento con Realdiron. Se recomienda a los pacientes con antecedentes de enfermedad cardíaca que realicen

ECG antes y durante la terapia con Realdiron. Las arritmias, principalmente supraventriculares, ocurrieron en raras ocasiones y predominantemente en pacientes con antecedentes de enfermedades cardiovasculares o con tratamiento previo con fármacos cardiotóxicos. Tales alteraciones del ritmo, por regla general, responden a la terapia estándar, pero pueden requerir una modificación de la dosis o la interrupción de Realdiron.

Sistema respiratorio

Cualquier paciente con fiebre, tos, dificultad para respirar u otros síntomas respiratorios debe someterse a una radiografía de tórax. Si se detectan infiltrados o hay una violación de la función pulmonar, es necesario un control cuidadoso del paciente y, si es necesario, la cancelación de la terapia con Realdiron. Tales cambios ocurrieron con mayor frecuencia en pacientes con hepatitis C crónica que recibieron terapia con interferón alfa; sin embargo, hubo informes de casos de su desarrollo en pacientes con cáncer que también recibieron terapia con interferón alfa. La cancelación oportuna de la terapia con interferón alfa y el uso de corticosteroides conduce a la desaparición de las reacciones pulmonares adversas. Además, se ha informado la aparición más frecuente de estos síntomas con el uso de Shosaikoto (una medicina herbal china) junto con interferón alfa.

Trastornos mentales y sistema nervioso central (SNC). En algunos pacientes se observaron trastornos graves del sistema nervioso central, en particular depresión, pensamientos suicidas e intentos de suicidio, durante el tratamiento con Realdiron e incluso después del final del tratamiento, principalmente dentro de los 6 meses. Entre los niños y adolescentes que tomaron Realdiron en combinación con ribavirina, se observaron pensamientos e intentos de suicidio con mayor frecuencia en comparación con pacientes adultos (2,4% frente a 1%). En pacientes adultos, niños y adolescentes, también se observaron otros trastornos mentales, por ejemplo, depresión, labilidad emocional y somnolencia. Cuando aparecen estos síntomas, se debe considerar la posible gravedad de estos eventos adversos. Si los síntomas persisten o empeoran, o si se detectan pensamientos suicidas o comportamiento agresivo, se recomienda interrumpir el tratamiento y proporcionar al paciente la atención psiquiátrica adecuada.

Pacientes con antecedentes de problemas mentales o de salud mental. El uso de interferón alfa-2b en niños y adolescentes con trastornos mentales existentes o antecedentes de trastornos está contraindicado (ver sección "Contraindicaciones").

Si se decidió que la terapia con Realdiron es necesaria para pacientes adultos con trastornos mentales existentes o trastornos en la historia, así como con adicción al alcohol y las drogas, debe iniciarse solo después de un diagnóstico individual apropiado y bajo un monitoreo constante del estado mental.

El tratamiento con interferón puede exacerbar los síntomas de los trastornos mentales en pacientes infectados con el virus de la hepatitis C, con trastornos mentales existentes o previos, así como adicción al alcohol y las drogas. Si el tratamiento con interferón es necesario para pacientes con tales trastornos, entonces se lleva a cabo el tratamiento apropiado de los síntomas mentales para lograr un tratamiento exitoso con interferón. Además, es obligatorio exigir una evaluación individual del comportamiento del paciente y la frecuencia de los síntomas de los trastornos mentales. Se recomienda el pretratamiento para estos pacientes antes de la aparición o desarrollo de síntomas psiquiátricos.

Trastornos oftálmicos

Todos los pacientes deben someterse a un examen oftalmológico antes de iniciar la terapia. Suspenda el tratamiento con Realdiron cuando aparezcan trastornos oftálmicos nuevos o que empeoren.

Cambios de tiroides

En presencia de una glándula tiroides deteriorada, el tratamiento con Realdiron se puede iniciar o continuar si el contenido de TSH se puede mantener a un nivel normal con la terapia con medicamentos. Detener el uso de Realdiron no conduce a la normalización de la función tiroidea, que se ve afectada durante el tratamiento.

Desordenes metabólicos

En relación con los casos de desarrollo o progresión de hipertrigliceridemia a formas graves, se recomienda controlar el nivel de lípidos en sangre.

Otros

Teniendo en cuenta los casos descritos de exacerbación de la psoriasis y sarcoidosis durante el tratamiento con interferón alfa, Realdiron debe utilizarse en estos pacientes solo si el beneficio esperado supera el posible riesgo.

Aplicación en pediatría

La decisión de iniciar la terapia combinada en niños debe tomarse de forma individual, teniendo en cuenta tanto los signos de progresión de la enfermedad (actividad del proceso inflamatorio en el hígado y fibrosis) como los factores pronósticos para el desarrollo de la respuesta virológica, el genotipo del VHC y la carga viral. Es importante tener en cuenta que la terapia combinada puede causar retraso en el crecimiento, aumento de peso en algunos niños que recibieron tratamiento durante un año, cuya reversibilidad no se comprende completamente. En este sentido, se recomienda controlar el desarrollo físico de los niños durante la terapia y durante 6 meses después de completar el tratamiento.

Para reducir el riesgo de retraso en el crecimiento, el niño debe, si es posible, ser tratado después de un crecimiento rápido durante la pubertad. No hay evidencia del efecto del tratamiento a largo plazo sobre la pubertad.

Impacto en la función reproductiva

Se informó acerca de una disminución en las concentraciones de estradiol y progesterona en el suero de mujeres que recibieron Realdiron. Por tanto, Realdiron se puede utilizar en mujeres en edad reproductiva si utilizan un método anticonceptivo eficaz durante todo el período de tratamiento. Realdiron también se usa con precaución en hombres en edad reproductiva.

Embarazo y lactancia

No hay datos suficientes sobre el uso de Realdiron durante el embarazo. Realdiron debe usarse durante el embarazo si el beneficio potencial para la madre supera la amenaza potencial para el feto.

Debido a los posibles efectos adversos en el lactante, la decisión de suspender la lactancia materna o suspender el medicamento debe tomarse teniendo en cuenta el grado de necesidad de esta terapia por parte de la madre.

Características de la influencia del fármaco sobre la capacidad para conducir un vehículo o maquinaria potencialmente peligrosa.

Es necesario advertir al paciente sobre el posible desarrollo de debilidad, somnolencia, alteración de la conciencia durante la terapia y recomendar evitar conducir o utilizar equipos complejos.

Sobredosis

Actualmente, no se han reportado casos de sobredosis de drogas.

En caso de sobredosis, está indicado un tratamiento sintomático.

Esta sección presenta instrucciones de uso de interferones alfa 2b y alfa 2ala primera generación, que también se denominan lineales, simples o de corta duración. La única ventaja de estos productos es su precio relativamente bajo.

Allá por 1943 W. y J. Heyle descubrieron el llamado fenómeno de interferencia. La idea original del interferón era la siguiente: un factor que evita la multiplicación de virus. En 1957, el científico inglés Alik Isaacs y el investigador suizo Jean Lindenman identificaron este factor, lo describieron claramente y lo llamaron interferón.

El interferón (IFN) es una molécula de proteína que se produce en el cuerpo humano. La "receta" para su síntesis (gen del interferón) está codificada en el aparato genético humano. El interferón es una de las citocinas, moléculas de señalización que desempeñan un papel importante en el funcionamiento del sistema inmunológico.

Desde el descubrimiento del IFN durante medio siglo, se han estudiado decenas de propiedades de esta proteína. Desde un punto de vista médico, las principales son las funciones antivirales y antitumorales.

El cuerpo humano produce alrededor de 20 especies, una familia completa, de interferones. Los IFN se dividen en dos tipos: I y II.

Los IFN de tipo I (alfa, beta, omega, theta) son producidos y secretados por la mayoría de las células del cuerpo en respuesta a virus y algunos otros agentes. El IFN tipo II incluye el interferón gamma, que es producido por las células del sistema inmunológico en respuesta a la acción de agentes extraños.

Inicialmente, las preparaciones de interferón se obtuvieron solo de células sanguíneas de donantes; se denominaron interferones leucocitarios. En 1980, comenzó la era de los interferones recombinantes o modificados genéticamente. La producción de medicamentos recombinantes se ha vuelto mucho más barata que la producción de medicamentos similares a partir de sangre de donantes humanos u otras materias primas biológicas; no utilizan sangre donada, que puede servir como fuente de infección. Los medicamentos recombinantes no contienen impurezas extrañas y, por lo tanto, tienen menos efectos secundarios. Su potencial terapéutico es superior al de preparaciones naturales similares.

Para el tratamiento de enfermedades virales, en particular hepatitis C, se usa principalmente interferón alfa (IFN-α). Distinguir entre interferones alfa 2b y alfa 2a "simples" ("de corta duración") y pegilados (peginterferón alfa-2a y peginterferón alfa-2b). Los interferones “simples” prácticamente no se utilizan en la UE y EE. UU., Pero en nuestro país, debido a su relativamente bajo precio, se utilizan con bastante frecuencia. En el tratamiento de la hepatitis C, se utilizan ambas formas de IFN-α "corto": interferón alfa-2a e interferón alfa-2b (que se diferencian en un aminoácido). Las inyecciones con interferones simples generalmente se realizan cada dos días (con peginterferones, una vez a la semana). La eficacia del tratamiento con IFN de corta duración cuando se administra en días alternos es menor que con peginterferones. Algunos expertos recomiendan inyecciones diarias de IFN "simples", ya que la efectividad del AVT es algo mayor.

La gama de IFN "cortos" es bastante amplia. Son producidos por diferentes fabricantes con diferentes nombres: Roferon-A, Intron A, Laferon, Reaferon-EC, Realdiron, Eberon, Interal, Altevir, Alfarona y otros.
Los más investigados (respectivamente - costosos) son Roferon-A e Intron-A. La efectividad del tratamiento con datos de IFN en combinación con ribavirina, dependiendo del genotipo del virus y otros factores, varía del 30% al 60%. En la tabla se proporciona una lista de las principales marcas de fabricantes de interferones simples y su descripción.

Todos los interferones deben mantenerse refrigerados (+2 a +8 grados Celsius). No deben calentarse ni congelarse. No agite ni exponga el medicamento a la luz solar directa. Es necesario transportar medicamentos en contenedores especiales.

La invención se refiere a ingeniería genética, biotecnología, medicina, farmacología. Nuevo ADN plásmido multicopia recombinante pSX50 que codifica la síntesis de interferón alfa-2b de leucocitos humanos, cuya expresión está bajo el control de los promotores de lactosa y triptófano y del terminador de la transcripción. Como resultado de la transformación de células de la cepa receptora de E. coli BL21 con el ADN plasmídico recombinante pSX50, se obtuvo la cepa de E. coli SX50, productora de interferón alfa-2b de leucocitos humanos recombinantes con una productividad de hasta 0,9-1,0 g de interferón alfa-2b a partir de 1 litro de medio de cultivo. El método de obtención de interferón alfa-2b recombinante se basa en el uso de la cepa recombinante creada de E. coli SX50 y proporciona su cultivo profundo en un medio nutritivo con un contenido reducido de triptófano con adición continua de sustratos nutritivos durante la biosíntesis, destrucción mecánica de células de microorganismos a alta presión, disolución de proteína agregada en solución concentrada de clorhidrato de guanidina seguida de renaturalización de interferón en soluciones tampón fisiológicas en presencia de agentes caotrópicos y su purificación mediante purificación cromatográfica de tres etapas de interferón en resinas como Chelates Sepharose Fast Flow inmovilizada con iones Cu +2, cromatografía de intercambio iónico en resinas de intercambio iónico como CM Flow y Seph gel cromatografía de filtración sobre resinas del tipo Superdex 75. El método permite obtener una sustancia de interferón con una pureza superior al 99% según los datos de electroforesis en condiciones reductoras y no reductoras al teñir geles con plata y más del 98% según RF HPLC y sin pirógenos (ensayo LAL) en cantidades de al menos 400-800 mg de 1 litro de medio de cultivo. 3 n. y 3 s.p f-ly, 6 enfermos.

Dibujos para patente RF 2242516

La invención se refiere a medicamentos modificados genéticamente obtenidos por medios biotecnológicos, a saber, a métodos de producción industrial de interferón alfa-2b leucocitario humano recombinante con fines médicos (en adelante interferón), así como a cepas recombinantes que producen Escherichia coli (E. coli) y ADN plasmídico. codificación de la síntesis de interferón.

Los interferones son moléculas de proteínas con un peso molecular de 15.000 a 21.000 daltons, producidas y secretadas por las células en respuesta a una infección viral u otros patógenos. Hay tres grupos principales de interferones: alfa, beta y gamma. Por sí mismos, estos grupos no son homogéneos y pueden contener varias especies moleculares diferentes de interferón. Así, se han identificado más de 14 variedades genéticas de interferón alfa, que son de interés y son ampliamente utilizadas en medicina como agentes antivirales, antiproliferativos e inmunomoduladores.

Métodos conocidos para producir interferón de leucocitos humanos a partir de leucocitos de sangre de donantes humanos inducidos por virus y otros inductores (SU1713591, RU 2066188, RU 2080873).

La principal desventaja de estos métodos para producir interferones es la probabilidad de contaminación del producto final con virus humanos, como el virus de la hepatitis B y C, el virus de la inmunodeficiencia, etc.

En la actualidad, el método de obtención de interferón por síntesis microbiológica se reconoce como más prometedor, lo que hace posible obtener el producto objetivo con un rendimiento significativamente mayor a partir de una materia prima relativamente económica. Los enfoques utilizados en este caso permiten crear variantes del gen estructural óptimas para la expresión bacteriana, así como los elementos reguladores que controlan su expresión.

Se utilizan diversas construcciones de cepas de Pichia pastoris, Pseudomonas putida y Escherichia coli como microorganismos de partida.

La desventaja de utilizar P. pastoris como productor de interferón (JN García, JA Aguiar et. Al. // Expresión de alto nivel de IFN-2b humano en Pichia pastoris.// Biotecnologia Aplicada, 12 (3), 152-155, 1995), Son condiciones extremadamente difíciles para la fermentación de este tipo de levaduras, la necesidad de mantener estrictamente la concentración del inductor, en particular metanol, en el proceso de biosíntesis. La desventaja de usar Ps. putida (SU1364343, SU1640996, SU1591484, RU1616143, RU2142508) es la complejidad del proceso de fermentación a un bajo nivel de expresión (10 mg de interferón por 1 litro de medio de cultivo). Más productivo es el uso de cepas de Escherichia coli (Semin. Oncol., 1997, Iun; 24 (3 Suppl. 9): S9-41-S9-51).

Se conocen una gran cantidad de plásmidos y cepas de E. coli basadas en ellos que expresan interferón: cepas de E. coli ATCC 31633 y 31644 con plásmidos Z-pBR322 (Psti) HclF-11-206 o Z-pBR 322 (Pstl) / HclN SN 35 -AHL6 (SU 1764515), cepa de E. coli pINF-AP2 (SU 1312961), cepa de E. coli pINF-F-Pa (AU 1312962), cepa de E. coli SG 20050 con plásmido p280 / 21FN (Kravchenko V.V. et al., Bioorganic chemistry, 1987, v.13, No. 9, págs. 1186-1193), cepa E. coli SG 20050 con plásmido pINF14 (SU 1703691), cepa E. coli SG 20050 con plásmido pINF16 (RU 2054041) y otros La desventaja de las tecnologías basadas en el uso de estas cepas es su inestabilidad, así como la expresión insuficiente de interferón.

Junto con las características de las cepas utilizadas, la eficiencia del proceso depende en gran medida de la tecnología utilizada para el aislamiento y purificación del interferón.

Un método conocido para producir interferón, que incluye el cultivo de células Ps. putida, destrucción de biomasa, tratamiento con polietilenimina, fraccionamiento con sulfato de amonio, cromatografía hidrofóbica sobre fenilsilocromo C-80, fraccionamiento de pH del lisado, su concentración y diafiltración, cromatografía de intercambio iónico sobre celulosa DE-52, elución en gradiente de pH, eluyente de intercambio iónico sobre celulosa -52, concentración pasando a través de un casete de filtro y filtración en gel sobre Sephadex G-100 (SU 1640996). La desventaja de este método, además de la fermentación compleja de múltiples etapas, es el proceso de múltiples etapas para obtener el producto final.

También se conoce un método de producción de interferón, que incluye el cultivo de la cepa de E. coli SG 20050 / pIF16, en caldo LB en matraces en un agitador termostatizado, centrifugación de la biomasa, su lavado con una solución tampón y sonicación para destruir las células. El lisado resultante se centrifuga, se lava con solución de urea 3 M en tampón, se disuelve en una solución de cloruro de guanidina en tampón, se sonica, se centrifuga, se somete a sulfitolisis oxidativa, se diálisis frente a urea 8 M, se renaturaliza y se cromatografía final en dos etapas sobre celulosa CM-52 y Sephadec G-50 ( RU 2054041). Las desventajas de este método es su productividad relativamente baja de las etapas principales del proceso de aislamiento y purificación. En particular, esto se aplica al tratamiento ultrasónico del producto, diálisis y sulfitolisis oxidativa, lo que conduce a la inestabilidad del rendimiento de interferón, así como a la imposibilidad de utilizar este método para la producción industrial de interferón.

Como análogo más cercano (prototipo) se puede indicar un método para producir interferón leucocitario humano, que consiste en cultivar una cepa recombinante de E. coli, congelar la biomasa resultante a una temperatura no superior a -70 ° C, descongelar, destruir células de un microorganismo con lisozima, remover ADN y ARN introduciendo en el lisado de DNasa y purificación de la forma insoluble aislada de interferón lavando con una solución tampón con detergentes, disolviendo el precipitado de interferón en solución de clorhidrato de guanidina, renaturalización y purificación en una etapa por cromatografía de intercambio iónico. Como productora se utiliza la cepa de E. coli SS5 obtenida utilizando el plásmido recombinante pSS5 que contiene tres promotores: P lac, P t7 y P trp, y el gen del interferón alfa con sustituciones de nucleótidos introducidas.

La expresión de interferón por la cepa SS5 de E. coli que contiene este plásmido está controlada por tres promotores: P lac, P t7 y P trp. El nivel de expresión de interferón es de aproximadamente 800 mg por 1 litro de suspensión celular (RU 2165455).

La desventaja de este método es la baja capacidad de fabricación del uso de destrucción enzimática de células, ADN y ARN del microorganismo y purificación cromatográfica en una etapa del interferón. Esto provoca la inestabilidad del proceso de liberación de interferón, conduce a una disminución de su calidad y limita la posibilidad de utilizar el esquema anterior para la producción industrial de interferón. Las desventajas de este plásmido y de la cepa basada en él son el uso en el plásmido de un promotor fuerte no regulado del fago T7 en la cepa de E. coli BL21 (DE3), en la que el gen de la ARN polimerasa T7 se encuentra debajo del promotor del operón lac y que siempre "fluye". En consecuencia, la síntesis de interferón se produce continuamente en la célula, lo que conduce a la disociación del plásmido y a una disminución de la viabilidad de las células de la cepa y, como resultado, a una disminución del rendimiento de interferón.

El objetivo de esta invención es construir una cepa productora de E. coli industrial recombinante utilizando un nuevo ADN plasmídico recombinante con un alto nivel de biosíntesis de interferón, y desarrollar una tecnología industrial eficaz para producir una sustancia de interferón médico de calidad correspondiente a la "Farmacopea europea" para la sustancia de interferón alfa-2b.

Este problema se resolvió creando ADN plasmídico recombinante pSX50 y la cepa Escherichia coli SX50, depositada en la colección de toda Rusia de cepas industriales de la Empresa Unitaria del Estado Federal GosNII Genetics, número VKPM B-8550,

así como un método para producir interferón alfa-2b recombinante, basado en el uso de una cepa recombinante de E. coli SX50 y que permite su cultivo profundo en un medio nutritivo con un contenido reducido de triptófano con adición continua de sustratos nutritivos durante la biosíntesis, destrucción mecánica de células de microorganismos a alta presión, disolución de agregados proteína en una solución concentrada de clorhidrato de guanidina, seguida de renaturalización de interferón en soluciones tampón fisiológicas en presencia de agentes caotrópicos y purificación cromatográfica en tres etapas del interferón sobre resinas del tipo Chelates Sepharose Fast Flow, inmovilizadas con iones Cu +2, cromatografía de intercambio iónico sobre resinas de intercambio iónico como gel de filtración CM Flow Gel de sefarosa cromatografía sobre resinas Superdex 75.

Según la invención, se proporciona un nuevo ADN plásmido multicopia recombinante pSX50 que codifica la síntesis de interferón alfa-2b de leucocitos humanos, cuya expresión está bajo el control de los promotores de lactosa y triptófano y el terminador de la transcripción. El plásmido pSX50 tiene 3218 pares de bases (pb) y se caracteriza por los siguientes fragmentos:

La secuencia de 1 nucleótido a 176 nucleótidos (nt) incluye un fragmento de ADN de 176 pb que contiene el promotor triptófano (P trp);

Secuencia de 177 n. hasta 194 N. incluye un fragmento de ADN sintético de 18 pb que contiene la secuencia Shine Delgarno responsable de iniciar la traducción;

Sucesión desde 195 d.C. hasta 695 N. incluye un fragmento de ADN de 501 pb que contiene la secuencia del gen del interferón con las siguientes sustituciones de nucleótidos: en la posición 37, un cambio de A a C, en la posición 39, un cambio de G a T, en la posición 40, un cambio de A a C, en la posición 42, un cambio de G a T , en la posición 67, reemplazo de A por C, en posición 69, reemplazo de G por T, en posición 70, reemplazo de A por C, en posición 72, reemplazo de A por T, en posición 96, reemplazo de G por A, en posición 100, reemplazo de A por C, en en la posición 102 cambiar A a T, en la posición 114 cambiar A a C, en la posición 120 cambiar C a G, en la posición 126 cambiar G a A, en la posición 129 cambiar G a A, en la posición 330 cambiar C a G, en la posición 339 reemplazo de G por A, en la posición 342 reemplazo de G por A, en la posición 487 reemplazo de A por C, en la posición 489 reemplazo de A por T, en la posición 495 reemplazo de G por A;

Secuencia de 696 n. hasta 713 N. incluye un fragmento de ADN sintético de 18 pb que contiene un policonector sintético;

Secuencia de 714 n. hasta 1138 d.C. incluye un fragmento de ADN del plásmido pKK223-3 con 4129 nt. hasta 4553 N. tamaño 425 pb, que contiene la secuencia del terminador de transcripción estricto rrnBT 1 T 2;

Secuencia de 1139 d.C. hasta 1229 d.C. incluye un fragmento de ADN del plásmido pUC19 con 2487 nt. hasta 2577 n. tamaño 91 pb, que contiene el promotor del gen β-lactomasa (gen de resistencia a ampicilina - Amp R);

Secuencia del 1230 d.C. hasta 2045 n. incluye un fragmento de ADN del plásmido pUC4K con 720 nt. hasta 1535 d.C. tamaño 816 pb, que contiene la región estructural del gen kan;

Secuencia de 2046 d.C. hasta 3218 n. incluye un fragmento de ADN del plásmido pUC19 de 1625 a 453 nt. tamaño 1173 pb, que contiene la secuencia responsable de la replicación del plásmido (ori) y del promotor lac (P lac).

Las Figuras 1-5 muestran los esquemas de construcción y el mapa físico del plásmido pSX50.

La Figura 6 muestra la secuencia de nucleótidos completa para el plásmido pSX50.

La cepa de Escherichia coli SX50 se obtuvo mediante la transformación de células de Escherichia coli BL21 con el plásmido pSX50 utilizando tecnología de ingeniería genética tradicional. La cepa de E. Coli SX50 se caracteriza por las siguientes características.

Características culturales y morfológicas

Las células son pequeñas, rectas, engrosadas en forma de varilla, gramnegativas, no deportivas. Las células crecen bien en medios nutritivos simples. Al crecer en agar Difco, se forman colonias redondas, lisas, convexas, turbias, brillantes y grises con bordes lisos. Al crecer en medios líquidos (en medio mínimo con glucosa o en caldo LB), forman una neblina intensa y uniforme.

Signos físico-biológicos

Aerobio. El rango de temperatura para el crecimiento es de 4-42 ° C con un pH óptimo de 6.5-7.5.

Como fuente de nitrógeno se utilizan tanto sales minerales en forma de amonio y nitrato como compuestos orgánicos en forma de aminoácidos, peptona, triptona, extracto de levadura, etc.

Los aminoácidos, la glicerina y los carbohidratos se utilizan como fuente de carbono. Resistencia antibiótica. Las células muestran resistencia a la kanamicina (hasta 100 μg / ml).

La cepa Escherichia coli 8X50 es productora de interferón.

Método, condiciones y composición del medio de almacenamiento de la cepa

En L-arape con adición de kanamicina a una concentración de 20 μg / ml bajo aceite, en caldo L que contiene 15% de glicerol y los correspondientes antibióticos en ampollas a una temperatura de menos 70 ° C, en estado liofilizado en ampollas a una temperatura de más 4 ° C.

La guía de Bergi (1974) identifica la cepa SX50 de Escherichia coli como una cepa de la especie Escherichia coli.

Un método de producción industrial de interferón alfa-2b.

Una característica del método propuesto es el desarrollo de una tecnología que le permite aislar el interferón de la forma insoluble que se acumula durante la fermentación, lo que puede simplificar significativamente el diagrama de flujo del proceso y aumentar el rendimiento del producto objetivo.

El método consiste en el cultivo de la cepa de Escherichia coli SX50 en un medio nutriente, con la constante adición de sustratos nutritivos, preferiblemente glucosa y extracto de levadura, en el proceso de biosíntesis, preferiblemente con un contenido reducido de triptófano, destrucción mecánica de células de microorganismos a alta presión de 700-900 bar, disolución de interferón en buffer. solución de clorhidrato de guanidina, renaturalización de interferón en soluciones tampón fisiológicas en presencia de agentes caotrópicos, seguido de purificación cromatográfica en tres etapas de interferón sobre resinas quelantes de Sepharose Fast Flow inmovilizadas con iones Cu +2, cromatografía de intercambio iónico sobre resinas de intercambio iónico del tipo CM gel Sepharose Flow y gel Sepharose Flow filtración resinas como Superdex 75.

Las condiciones óptimas para las etapas individuales de obtención de interferón son las siguientes:

La fermentación se realiza con la adición continua de sustratos durante todo el proceso, lo que conduce a un alto nivel de expresión de interferón;

La destrucción de células se realiza en un desintegrador tipo Gaulin a una presión de 900 bar;

La eliminación de los componentes celulares solubles (ADN, ARN, proteínas, lipopolisacáridos, etc.) se realiza lavando la forma insoluble de interferón con soluciones tampón que contienen detergentes (Triton XI00, urea, etc.);

El precipitado resultante que contiene interferón se disuelve en una solución tampón de clorhidrato de guanidina 6 M;

La renaturalización del interferón se lleva a cabo en una solución tampón fisiológica que contiene agentes caotrópicos;

La purificación cromatográfica en tres etapas del interferón se lleva a cabo en Chelates Sepharose Fast Flow, inmovilizado por iones Cu + 2, en resina de intercambio catiónico CM Sepharose Fast Flow, y cromatografía de filtración en gel sobre resina tipo Superdex 75;

Después de cada purificación cromatográfica, se realiza una filtración esterilizante a través de filtros libres de pirógenos con un tamaño de poro de 0,22 µm.

El rendimiento de interferón como resultado de la aplicación del método descrito es de aproximadamente 400-800 mg de interferón de 1 litro de medio de cultivo. La calidad del producto resultante cumple con los estándares y requisitos de la "Farmacopea Europea" para la sustancia interferón alfa-2b.

Las diferencias esenciales entre el método propuesto y el prototipo son:

El uso de un constructo de cepa con mayor productividad, que permite obtener una mayor cantidad de interferón a partir de 1 litro de medio de cultivo durante la biosíntesis;

Uso de destrucción mecánica efectiva de la biomasa celular, que permite obtener un extracto más puro de la forma insoluble del interferón en un tiempo más corto, con menos pérdidas;

El uso de soluciones tampón fisiológicas durante la renaturalización en presencia de agentes caotrópicos aumenta el rendimiento de la forma de interferón correctamente renaturalizada;

La purificación cromatográfica de interferón en tres etapas permite obtener una sustancia de interferón con una pureza superior al 99% según electroforesis en condiciones reductoras y no reductoras al teñir geles con plata y más del 98% según RF HPLC y prácticamente libre de pirógenos (test LAL).

La esencia y las ventajas del grupo de invenciones reivindicado se ilustra mediante los siguientes ejemplos.

Ejemplo 1. Construcción del plásmido recombinante pSX50

El método para construir el plásmido pSX50 incluye los siguientes pasos:

Construcción del vector plásmido pSX10;

1.construcción del plásmido pSX3 (2641 pb)

2.construcción del vector plásmido pSX10 (2553 pb)

Construcción del plásmido recombinante pSX41 (3218 pb);

Construcción del plásmido recombinante pSX43 (3218 pb);

Construcción del plásmido recombinante pSX45 (3218 pb);

Construcción del plásmido recombinante pSX50 (3218 pb).

Construcción del vector plásmido pSX10

El vector plásmido pSX10 es un vector pUC19, en el que la secuencia codificante del gen beta-lactomasa que confiere resistencia a ampicilina se reemplaza por la secuencia codificante del gen kan y contiene el terminador de la transcripción del plásmido pKK223-3.

La construcción del plásmido vector pSS10 se realiza en dos etapas:

Obtener el plásmido pSX3 (2641 pb), que es un plásmido pUC19, en el que la región codificante del gen amp se reemplaza por la región codificante del gen kan;

Obtención del plásmido viento pSX10 (2553 pb), que es un plásmido pSX3, en el que se inserta un fragmento de ADN que codifica el terminador de la transcripción rBT 1 T2 detrás del sitio BamHI.

Para obtener el plásmido pSX3, se realizan cinco rondas de amplificación de ADN por PCR (reacción en cadena de la polimerasa). Durante la primera ronda, utilizando el ADN del plásmido pUC19 como molde, se lleva a cabo la amplificación de un fragmento de ADN de 1828 pb. (fragmento PU1-PU2) utilizando cebadores:

Esta y las reacciones de PCR posteriores se llevan a cabo en las siguientes condiciones: Tis-HCl 20 mM, pH 8,8, (NH 4) 2 SO 4 10 mM, KCl 10 mM, MgCl 2 2 tM, Triton X100 al 0,1%, BSA 0,1 mg / ml, 0,2 mM de cada dNTP, 1,25 unidades. Pfu ADN polimerasa, 100 ng de ADN. El proceso de amplificación consta de las siguientes etapas: calentamiento a 95 ° С durante 5 min, 35 ciclos de PCR (30 seg a 95 ° С, 30 seg a 56 ° С, 2 min a 72 ° С) e incubación durante 10 min a 72 ° С. Después de la amplificación (y después de las posteriores amplificaciones), el fragmento de ADN se purifica mediante electroforesis en gel de agarosa al 1%. Durante la segunda y tercera rondas, utilizando el ADN del plásmido pUC4K como molde, se lleva a cabo la amplificación de un fragmento de ADN de 555 pb. (fragmento KM1-KM2) utilizando cebadores:

y amplificación de un fragmento de ADN de 258 pb. (KMZ-KM4) con imprimaciones

En la quinta ronda de PCR, los fragmentos (PU1-PU2) y (KM1-KM4) se combinan en las siguientes condiciones: calentamiento a 95 ° C durante 5 min, 5 ciclos de PCR (30 seg 95 ° C, 30 seg 56 ° C, 10 min 72 ° C) e incubación durante 10 min a 72 ° C. El ADN obtenido tras la última PCR se transforma directamente en células de la cepa E. coli DH5 y se siembra en medio LA que contiene 20 µg / ml de kanamicina. Después de la incubación durante 12 horas a 37ºC, los clones se tamizan, se aísla el ADN plasmídico y se realiza un análisis de restricción. Como resultado, se obtiene el plásmido pSX3 de 2641 pb.

Para obtener el vector plásmido pSX10, se realizan tres rondas de amplificación de ADN por PCR. Durante la primera ronda, utilizando el ADN del plásmido pSX3 como molde, se lleva a cabo la amplificación de un fragmento de ADN de 2025 pb. (fragmento 10.1-10.2) usando cebadores:

Durante la segunda ronda, utilizando el ADN del plásmido pKK223-3 como molde, se lleva a cabo la amplificación de un fragmento de ADN de 528 pb. (fragmento KK1-KK2) utilizando cebadores:

En la tercera ronda de PCR, los fragmentos (10.1-10.2) y (KK1-KK2) se combinan en las siguientes condiciones: calentamiento a 95 ° C durante 5 min, 5 ciclos de PCR (30 s 95 ° C, 30 s 56 ° C, 10 min 72 ° C) e incubación durante 10 min a 72 ° C. El ADN obtenido después de la última PCR se transforma directamente en células de la cepa E. coli DH5 y se siembra en medio LA que contiene 20 µg / ml de kanamicina. Después de la incubación durante 12 horas a 37ºC, los clones se tamizan, se aísla el ADN plasmídico y se realiza un análisis de restricción. Como resultado, se obtiene el plásmido pSX10 de 2553 pb.

Construcción del plásmido recombinante pSX41

El plásmido recombinante pSX41 es un fragmento de ADN Hind III - BamHI del vector plásmido pSX3 (2529 pb), Hind III - EcoRI, un fragmento de ADN de 168 pb que codifica el promotor del operón triptófano (P trp) de E. coli, EcoRI-XbaI un fragmento de ADN sintético de 20 pb que codifica la secuencia SD (Shine-Delgarno) y XbaI-BamHI un fragmento de ADN de 501 pb que codifica el gen del interferón alfa 2b humano.

Para obtener Hind III - BamHI, el fragmento de ADN del plásmido vector pSX3 (2529 pb), se trata el ADN del plásmido pSX3 con las enzimas de restricción HindIII y BamHI, seguido de purificación electroforética en gel de agarosa al 1%. El fragmento de ADN Hind III EcoRI de 168 pb, que codifica el promotor del operón triptófano (P trp), se obtuvo mediante PCR utilizando ADN de E. coli total como molde y cebadores TRP1 y PRP2, seguido del procesamiento del fragmento amplificado con las enzimas de restricción HindIII y EcoRI:

Para obtener EcoRI-Xbal, un fragmento de ADN sintético de 20 pb que codifica la secuencia SD (Shine-Delgarno), se sintetizan los siguientes oligonucleótidos complementarios:

Se obtiene un fragmento de ADN XbaI-BamIII de 501 pb que codifica el gen del interferón alfa 2b humano mediante PCR utilizando ADN humano total como plantilla y cebadores IFN1 e IFN2, seguido del procesamiento del fragmento amplificado con las enzimas de restricción Xbal y BamIII:

A continuación, los fragmentos purificados electroforéticamente se combinan, se ligan con la enzima ligasa del fago T4, el ADN se transforma en células de la cepa DH5 de E. coli y se siembra en medio LA que contiene 20 µg / ml de kanamicina. Después de la incubación durante 12 horas a 37 ° C, se tamizan los clones, se aísla el ADN plasmídico, se lleva a cabo un análisis de restricción y se determina la estructura primaria del ADN. Como resultado, se obtiene un plásmido pSX41 de 3218 pb. A continuación, se lleva a cabo una mutagénesis escalonada del gen del interferón para aumentar el nivel de expresión del producto objetivo. La mutagénesis del gen del interferón consiste en la sustitución de tripletes, que son raros en E. coli, que codifican los aminoácidos correspondientes, por tripletes, que a menudo se encuentran en E. coli, que codifican los mismos aminoácidos. La mutagénesis del ADN del gen del interferón se realiza mediante PCR.

Construcción del plásmido recombinante pSX43

Para obtener el plásmido recombinante pSX43, se lleva a cabo una ronda de amplificación de ADN por PCR utilizando el ADN del plásmido pSX41 como molde y los cebadores de IFN3 e IFN4:

La PCR se lleva a cabo en las siguientes condiciones: calentamiento a 95 ° C durante 5 min, 20 ciclos de PCR (30 seg 95 ° C, 30 seg 56 ° C, 10 min 72 ° C) e incubación durante 20 min a 72 ° C. El ADN obtenido después de la PCR se transforma directamente en células de la cepa E. coli DH5 y se siembra en medio LA que contiene 20 µg / ml de kanamicina. Después de la incubación durante 12 horas a 37 ° C, se tamizan los clones, se aísla el ADN plasmídico, se lleva a cabo un análisis de restricción y se determina la estructura primaria del ADN. Como resultado, se obtiene el plásmido pSX43 con un tamaño de 3218 pb.

Construcción del plásmido recombinante pSX45

Para obtener el plásmido recombinante pSX45, se lleva a cabo una ronda de amplificación de ADN por PCR utilizando el ADN del plásmido pSX43 como molde y los cebadores de IFN5 e IFN6:

La PCR se lleva a cabo en las siguientes condiciones: calentamiento a 95 ° C durante 5 min, 20 ciclos de PCR (30 seg 95 ° C, 30 seg 56 ° C, 10 min 72 ° C) e incubación durante 20 min a 72 ° C. El ADN obtenido después de la PCR se transforma directamente en células de la cepa E. coli DH5 y se siembra en medio LA que contiene 20 µg / ml de kanamicina. Después de la incubación durante 12 horas a 37 ° C, se tamizan los clones, se aísla el ADN plasmídico, se lleva a cabo un análisis de restricción y se determina la estructura primaria del ADN. Como resultado, se obtiene un plásmido pSX45 de 3218 pb.

Construcción del plásmido recombinante pSX50.

Para obtener el plásmido recombinante pSX50, se lleva a cabo una ronda de amplificación de ADN por PCR utilizando el ADN del plásmido pSX45 como molde y los cebadores IFN7 e IFN8:

La PCR se lleva a cabo en las siguientes condiciones: calentamiento a 95 ° C durante 5 min, 20 ciclos de PCR (30 seg 95 ° C, 30 seg 56 ° C, 10 min 72 ° C) e incubación durante 20 min a 72 ° C. El ADN obtenido después de la PCR se transforma directamente en células de la cepa E. coli DH5 y se siembra en medio LA que contiene 20 µg / ml de kanamicina. Después de la incubación durante 12 horas a 37 ° C, se tamizan los clones, se aísla el ADN plasmídico, se lleva a cabo un análisis de restricción y se determina la estructura primaria del ADN. Como resultado, se obtiene un plásmido pSX50 de 3218 pb.

Ejemplo 2. Obtención de la cepa de E. coli SX50 - productor de interferón

La cepa que produce interferón E. coli SX50 se obtiene transformando las células de la cepa E. coli BL21 con el plásmido recombinante pSX50. La cepa productora de interferón se cultiva en un fermentador de 30 L hasta una densidad óptica de 25,0-30,0 o.u. en medio M9 que contiene 1% de hidrolizado de caseína ácida (Difco), 1% de glucosa, 40 μg / ml de kanamicina, a 38-39 ° C. Durante la fermentación, el sustrato nutritivo se agrega continuamente usando un controlador gravitométrico.

Ejemplo 3. Método para aislar interferón de la cepa E. coli SX50

El interferón se obtuvo en 4 etapas:

Nivel 1. Cultivo de la cepa E. coli SX50.

Etapa 2. Aislamiento y purificación de la forma insoluble de interferón.

Etapa 3. Disolución y renaturalización del interferón.

Etapa 4. Purificación cromatográfica de interferón.

Nivel 1. Cultivo de la cepa E. coli SX50

El inóculo desarrollado de la cepa E. coli SX50 en un volumen de 3 l de medio LB rico durante 12 ha 26 ° C se introduce asépticamente en un fermentador que contiene 27 l de medio estéril que contiene M9, 1% de hidrolizado ácido de caseína, 1% de glucosa, 1 mM de MgCl. 2, CaCl2 0,1 mM, 40 mg / ml de kanamicina. El cultivo en fermentador se realiza a una temperatura de 38-39 ° C, manteniendo un pH de 7 ± 0,15 mediante titulación automática con solución de hidróxido de sodio al 40%. La concentración de oxígeno disuelto en el rango (50 ± 10)% de saturación se mantiene cambiando la velocidad de las revoluciones del agitador de 100 a 800 rpm y el suministro de aire de 1 a 15 l / min. La concentración de sustratos, en particular glucosa y extracto de levadura, se mide durante la fermentación y su concentración se mantiene variando la velocidad de alimentación de las soluciones concentradas mediante bombas peristálticas utilizando un controlador gravimétrico.

La acumulación de interferón insoluble se controla mediante microscopía de contraste de fase, electroforesis en gel de poliacrilamida al 15% (SDS-PAAG) y cromatografía de alta resolución en fase inversa (RF HPLC). La fermentación se detiene cuando se alcanza la densidad óptica máxima (~ 25-30 pu) y se detiene la síntesis de interferón. Al final de la fermentación, el líquido de cultivo se separa mediante centrifugación en un rotor de flujo continuo a una velocidad de rotación de 5000-10000 rpm. La biomasa se envasa en bolsas de plástico y se congela a una temperatura de menos 70 ° C.

Etapa 2. Aislamiento y purificación de la forma insoluble de interferón.

Se suspenden 300-400 g de biomasa congelada de la cepa de E. coli SX50 en 3000 ml de tampón 1 (Tris-HCl 20 mM, pH 8,0, EDTA 10 mM, Triton X100 al 0,1%). La suspensión se pasa a través de un homogeneizador de flujo continuo tipo Gaulin, se mantiene a 900 bar y se centrifuga en un rotor de flujo continuo a 15.000 rpm. El precipitado resultante se lava en condiciones similares secuencialmente con tampones 2 (Tris-HCl 20 mM, pH 8,0, EDTA 1 mM, urea 3 M) y tampón 3 (Tris-HCl 20 mM pH 8,0, EDTA 1 mM) y finalmente el precipitado de interferón se suspende en 200 ml de tampón 3. En este caso, el tiempo de aislamiento y purificación de la forma insoluble de interferón no supera las 5 horas.

Etapa 3. Disolución y renaturalización del interferón

Se agrega clorhidrato de guanidina seco a la suspensión de la forma insoluble de interferón obtenida en la etapa anterior a una concentración de 6 M, se agrega ditiotreitol a una concentración de 50 mM, Tris-HCl pH 8.0 a una concentración de 50 mM, NaCl a una concentración de 150 mM y Triton X100 a una concentración de 0.1%, incubados a a temperatura ambiente durante 2 horas Se separa el material insoluble mediante filtración esterilizante a través de membranas con diámetros de poro de 0,22 micras.

La renaturalización del interferón se lleva a cabo diluyendo lentamente la solución resultante 100-200 veces con tampón 4 (Tris-HCl 20 mM pH 8,0, NaCl 100 mM, EDTA 0,1 mM). Luego, la mezcla de renaturalización se incuba con agitación constante durante 12-15 horas a una temperatura de 4-8 ° C. Luego se agrega sulfato de magnesio a una concentración de 1 mM y el material agregado se elimina por filtración esterilizante a través de un filtro de membrana con un diámetro de poro de 0.22 micrones.

Etapa 4. Purificación cromatográfica de interferón

La purificación cromatográfica del interferón se realiza en tres etapas.

1. El interferón renaturalizado resultante en la primera etapa se purifica mediante cromatografía de afinidad en una resina Chelates Sepharose Fast Flow (Amersham Biosciences) inmovilizada con iones Cu + 2. Para ello, se aplica una solución de interferón a una columna con Cu + 2 Chelates Sepharose Fast Flow, y se eluye el interferón con un tampón de ácido cítrico 0,1 M, pH 2,2.

2. En la segunda etapa de purificación cromatográfica, se aplica una solución de interferón a una resina de intercambio catiónico CM Sepharose Fast Flow (Amersham Biosciences) y se eluye el interferón con un gradiente de soluciones (NaCl 0,0-0,5 M) en un tampón de Na (CH 3 COO) 50 mM, pH 5,5.

3. La purificación de la forma monomérica de interferón a partir de residuos de formas poliméricas de interferón se lleva a cabo en la tercera etapa de purificación de interferón mediante filtración en gel sobre una resina Superdex 75 (Amersham Biosciences). La cromatografía se realiza en tampón de Na (CH _ {3} COO) 50 mM, pH 5,0, que contiene NaCl 0,15 M.

El método descrito para el aislamiento y purificación de interferón permite obtener 4-8 g de interferón altamente purificado en un ciclo de aislamiento durante 7-10 días a partir de la biomasa obtenida de 10 l del medio de cultivo. La calidad del interferón resultante cumple plenamente los requisitos de la "Farmacopea europea" para la sustancia del interferón alfa-2b, a saber:

La concentración de interferón no es inferior a 2 × 10 8 UI / ml;

La actividad específica del interferón no es inferior a 2,0 × 10 8 UI / mg;

La pureza electroforética de la preparación no es inferior al 99% en condiciones reductoras y no reductoras cuando se tiñen los geles con plata;

El punto isoeléctrico del interferón aislado está en la región de pH 5,8-6,3;

El mapa de péptidos del interferón aislado no difiere fundamentalmente del mapa de péptidos para el estándar europeo para interferón alfa 2b CRS;

Como se desprende de los ejemplos anteriores, el grupo de invenciones reivindicado hace posible obtener interferón alfa-2b con un alto rendimiento con una tecnología relativamente sencilla y fiable.

RECLAMACIÓN

1. ADN plasmídico recombinante pSX50, que codifica la síntesis de interferón alfa-2b humano recombinante, caracterizado porque tiene un tamaño de 3218 pares de bases (pb) y consta de los siguientes fragmentos: secuencia de 1 a 176 nucleótidos (pb) incluye un fragmento ADN de 176 pb, que contiene el promotor triptófano (P trp), secuencia de 177 a 194 pb. incluye un fragmento de ADN sintético de 18 pb que contiene la secuencia Shine Delgarno responsable del inicio de la traducción, la secuencia de 195 a 695 nt. incluye un fragmento de ADN de 501 pb que contiene el gen del interferón alfa-2b con sustituciones de nucleótidos: 37 (A\u003e C), 39 (G\u003e T), 40 (A\u003e C), 42 (G\u003e T), 67 ( A\u003e C), 69 (G\u003e T), 70 (A\u003e C), 72 (A\u003e T), 96 (G\u003e A), 100 (A\u003e C), 102 (A\u003e T), 114 (A \u003e C), 120 (C\u003e G), 126 (G\u003e A), 129 (G\u003e A), 330 (C\u003e G), 339 (G\u003e A), 342 (G\u003e A), 487 (A\u003e C), 489 (A\u003e T), 495 (G\u003e A), secuencia de 696 a 713 n. incluye un fragmento de ADN sintético de 18 pb que contiene un policonector sintético, secuencia de 714 a 1138 pb. incluye un fragmento de ADN del plásmido pKK223-3 de 4129 a 4553 nt. tamaño 425 pb, que contiene la secuencia del terminador estricto de la transcripción rrnBT 1 T2, secuencia de 1139 a 1229 nt. incluye un fragmento de ADN del plásmido pUC19 de 2487 a 2577 nt. tamaño 91 pb, que contiene el promotor del gen β-lactomasa (gen de resistencia a ampicilina -Amp R), secuencia de 1230 a 2045 nt. incluye un fragmento de ADN del plásmido pUC4K con 720 nt. hasta 1535 d.C. tamaño 816 pb, que contiene la región estructural del gen kan, secuencia de 2046 pb. hasta 3218 n. incluye un fragmento de ADN del plásmido pUC19 de 1625 a 453 nt. tamaño 1173 pb, que contiene la secuencia responsable de la replicación del plásmido (ori) y el promotor lac (P lac).

2. La cepa bacteriana Eschcerichia coli SX50 transformada con el plásmido recombinante de acuerdo con la reivindicación 1 - el productor de interferón alfa-2b leucocitario humano recombinante.

3. Un método para producir interferón alfa-2b humano, que incluye el cultivo de la cepa Escherichia coli SX5 según la reivindicación 2 en un medio nutritivo con la adición constante de sustratos nutritivos durante la biosíntesis, destrucción mecánica de células de microorganismos a una presión de 700-900 bar, disolución de interferón en una solución tampón de clorhidrato de guanidina. , renaturalización de interferón en soluciones tampón fisiológicas en presencia de agentes caotrópicos, purificación cromatográfica en tres etapas de interferón en resinas quelantes Sepharose Fast Flow inmovilizadas con iones Cu +2, cromatografía de intercambio iónico en resinas de intercambio iónico CM Sepharose Fast Flow y cromatografía de filtración en gel sobre resinas Superdex 75 ...

4. Método según la reivindicación 3, en el que el cultivo se realiza en un medio nutritivo con un contenido reducido de triptófano con la adición continua de sustratos nutritivos, preferiblemente glucosa y extracto de levadura.

5. El método según la reivindicación 3, en el que antes de la disolución del interferón se purifica retirando los componentes celulares solubles, incluyendo ADN, ARN, proteínas, lipopolisacáridos, lavando con soluciones tampón que contienen detergentes como Triton XI 00, ureas.

6. El método según la reivindicación 3, en el que después de cada purificación cromatográfica, se realiza una filtración esterilizante a través de filtros con tamaños de poro de 0,22 µm.

2018-02-02T17: 43: 00 + 03: 00

Eficacia probada del interferón alfa 2b

Por primera vez, el mundo aprendió sobre el interferón, una proteína natural del cuerpo humano en 1957, cuando los científicos Alik Isaacs y Jean Lindenmann descubrieron un fenómeno como la interferencia, un mecanismo complejo de procesos biológicos, gracias al cual el cuerpo puede combatir varias enfermedades. Pero en el siglo pasado, probablemente no sospecharon que esta proteína se convertiría en el componente principal de muchos medicamentos.

Los interferones son proteínas que producen las células del cuerpo cuando se introducen virus en ellas. Gracias a ellos, se activan los genes que se encargan de la síntesis de moléculas protectoras intracelulares, que aportan efecto antiviral al suprimir la síntesis de proteínas virales e impedir su reproducción. Es decir, estas proteínas (también llamadas citocinas) de nuestro organismo actúan como poderosos defensores que resguardan nuestra salud y están estrictamente vigilantes para, si es necesario, repeler inmediatamente el ataque de virus y vencer la enfermedad.

Para proteger un organismo infectado con virus, casi todas las células de nuestro cuerpo producen interferón. Además, su formación puede ser estimulada no solo por virus, sino también por toxinas bacterianas, por lo que esta proteína también es eficaz en algunas infecciones bacterianas. Por tanto, se puede concluir que esta citoquina es un componente muy importante del sistema inmunológico humano. Sin él, la humanidad habría sido derrotada durante mucho tiempo por numerosos virus y bacterias.

Tipos de interferones

Los interferones se dividen en tres tipos: alfa, beta y gamma, que son producidos por diferentes células.

• El interferón alfa activa las llamadas células asesinas naturales, los leucocitos, que destruyen virus, bacterias y otros agentes "enemigos".
• El interferón beta se produce en fibroblastos, células epiteliales y macrófagos, que absorben agentes infecciosos.
• El interferón gamma es producido por los linfocitos T, su función principal, al igual que otros tipos, es la regulación de la inmunidad.

¿Cómo se ha demostrado la eficacia del interferón en ARVI?

Como saben, en sus actividades, al prescribir una terapia, los médicos confían en su experiencia y en el sistema de conocimiento ya establecido. Pero la medicina se está desarrollando rápidamente: cada año se desarrollan nuevos métodos de tratamiento eficaces en el mundo y se patentan nuevos medicamentos. Por tanto, se hizo necesario sistematizar los últimos avances y descubrimientos de la medicina, que dieron como resultado guías clínicas y estándares de tratamiento. Estos algoritmos documentados, basados \u200b\u200ben la experiencia clínica comprobada, describen las instrucciones para el diagnóstico, tratamiento, rehabilitación y prevención de enfermedades necesarias a seguir, y ayudan al médico a tomar decisiones sobre la elección de tácticas de terapia en una situación determinada.

Por ejemplo, sobre los problemas de brindar atención médica a los niños sobre el problema de ARVI y la influenza, el grupo de desarrolladores consta de aproximadamente 40 personas e incluye a los principales especialistas rusos en el campo de las enfermedades infecciosas de varias instituciones y varios departamentos. Es lógico que los especialistas presten especial atención a los medicamentos que pueden hacer frente a las enfermedades lo más rápido posible y, al mismo tiempo, tienen un mínimo de efectos secundarios. Ahora estamos hablando de medicamentos que contienen interferón, que ayudan a combatir el ARVI en adultos y niños.

Como se mencionó anteriormente, su capacidad para combatir los virus se descubrió mediante el estudio de la interferencia de los científicos Isaacs y Lindenmann. Describieron el interferón como “una proteína significativamente más pequeña que las inmunoglobulinas, que es producida por las células del cuerpo después de la infección con virus vivos o inactivados; capaz de suprimir el crecimiento de varios virus en dosis que no son tóxicas para las células ". Hoy se sabe que estas proteínas pueden ser producidas por casi todas las células del cuerpo en respuesta a la introducción de información extraña, independientemente de su etiología (virus, hongos, bacterias, patógenos intracelulares, oncogenes). Y su principal efecto biológico radica en los procesos de reconocimiento y remoción de esta información ajena. En otras palabras, estas moléculas protectoras "son capaces" de destruir de forma suave y precisa los virus que han ocupado las células, sin dañar las células mismas. Esto ha sido confirmado por numerosos estudios científicos.

En cuanto a los métodos de uso de medicamentos que contienen interferones, aquí es necesario mencionar algunos de los matices. Uno de los principales problemas de la terapia con interferón es "administrar" la dosis eficaz del fármaco sin causar consecuencias negativas. En algunos casos, la administración intramuscular o intravenosa de medicamentos que contienen interferón produce efectos secundarios en forma de fiebre, escalofríos, dolores de cabeza y otros fenómenos indeseables. Estos síntomas no son críticos para el cuerpo y pronto desaparecen, pero durante el tratamiento causan molestias.

El uso de supositorios que contienen interferón alfa-2b hizo posible minimizar los efectos secundarios de la terapia con interferón o prescindir de ellos por completo. Según estudios científicos, la administración rectal de interferón humano recombinante en los primeros días de la enfermedad ARVI reduce la duración de la fiebre, combate el resfriado común y le permite vencer rápidamente la enfermedad 2. La administración intranasal de medicamentos (cuando el medicamento se aplica a la mucosa nasal) que contienen interferón alfa-2b complementa el tratamiento y asegura el efecto óptimo de la terapia. Uno de los medicamentos adecuados para combatir la influenza y otras infecciones virales respiratorias agudas en cualquier etapa de la enfermedad es VIFERON. Viene en forma de supositorios (velas), gel y ungüento.

Breves instrucciones de uso y tolerancia de medicamentos que contienen interferón alfa-2b.

Quién puede tomar medicamentos VIFERON:

• adultos;
• niños desde los primeros días de vida;
• mujeres embarazadas a partir de la 4ª semana de gestación.

Reconocimiento por parte de la comunidad científica

El interferón alfa-2b (VIFERON) está incluido en tres estándares federales de atención médica como medicamento recomendado para el tratamiento de la influenza y ARVI, así como en tres protocolos federales para el tratamiento de estas enfermedades. 1 Si tenemos en cuenta no solo la influenza y ARVI, sino también otras enfermedades, entonces la cantidad de estándares y recomendaciones con respecto a este medicamento es aún mayor: el interferón (VIFERON) está incluido en 30 estándares federales para la provisión de atención médica para adultos y niños aprobados por el Ministerio de Salud de la Federación de Rusia, así como en 21 Protocolo (directrices clínicas) para la prestación de atención médica a adultos, incluidas mujeres embarazadas y niños.

El principio de la droga

El interferón alfa-2b recombinante humano, que forma parte de la preparación VIFERON, tiene propiedades antivirales e inmunomoduladoras e inhibe la replicación de virus que contienen ARN y ADN. La terapia antiviral para la influenza se puede iniciar en cualquier fase de la enfermedad. Esto ayudará a mejorar la condición y evitará el desarrollo de complicaciones 2. La preparación VIFERON contiene antioxidantes altamente activos generalmente reconocidos: vitaminas E y C en velas, vitamina E en pomada, vitamina E, ácidos cítrico y benzoico en gel. En el contexto de tal soporte antioxidante, se observa un aumento en la actividad antiviral de los interferones.

Resultados de la prueba de drogas

VIFERON se ha sometido a un ciclo completo de ensayos clínicos para una amplia gama de diversas enfermedades en las principales clínicas de Rusia. El resultado de la investigación fue evidencia de la eficacia terapéutica y profiláctica de VIFERON en diversas enfermedades infecciosas e inflamatorias en adultos y niños, incluidos recién nacidos y mujeres embarazadas. Se ha demostrado científicamente que la composición compleja y la forma de liberación confieren a VIFERON características farmacocinéticas únicas, con acción prolongada del interferón en ausencia de los efectos secundarios inherentes a las preparaciones parenterales de interferones recombinantes 3.

¿Para qué enfermedades se utilizan medicamentos a base de interferón?alfa-2 segundo

VIFERON en forma de supositorios, gel y ungüento se usa para tratar las siguientes enfermedades:

• SARS, incluida la influenza;
• herpes;
• infección por virus del papiloma;
• infección por enterovirus;
• laringotraqueobronquitis;
• hepatitis crónica B, C, D, incluidas las complicadas por cirrosis hepática;
• vaginosis bacteriana;
• candidiasis;
• micoplasmosis;
• ureaplasmosis;
• gardnerelosis.

El uso del fármaco VIFERON como parte de una terapia antiviral compleja permite reducir las dosis terapéuticas de fármacos antibacterianos y hormonales, así como reducir los efectos tóxicos de esta terapia.

Doctor general

1. http://www.rosminzdrav.ru, Orden del Ministerio de Salud de la Federación de Rusia, http://www.raspm.ru; http://www.niidi.ru; http://www.pediatr-russia.ru; http://www.nnoi.ru
2. I. V. Nesterova "Preparaciones de interferón en la práctica clínica: cuándo y cómo", "Médico tratante", septiembre de 2017.
3. "VIFERON es un fármaco antivírico e inmunomodulador complejo para el tratamiento de enfermedades infecciosas e inflamatorias en perinatología". (Guía para médicos), Moscú, 2014.

Fuentes utilizadas: http://www.lsgeotar.ru