Métodos de diagnóstico de Helicobacter pylori: análisis de sangre para anticuerpos, análisis de heces por PCR, pruebas de ureasa (con fgds, respiratoria), biopsia con citología. Análisis para Helicobacter pylori Dónde realizar las pruebas de heces para Helicobacter

- una de las bacterias más peligrosas que provoca el desarrollo de diversas enfermedades del estómago y el duodeno. Para diagnosticar la patología, no solo se prescribe un análisis de sangre, sino también un análisis de heces.

Helicobacter pylori es una bacteria patógena que, cuando se ingiere, provoca el desarrollo de Helicobacter pylori. Es de tamaño pequeño y tiene forma de espiral. Al liberar una gran cantidad de toxinas, afecta al estómago y al duodeno. La bacteria recibe su nombre de lo que se encuentra en la sección pilórica del estómago.

Al reproducirse, Helicobacter actúa sobre todas las células del estómago, lo que conduce a procesos inflamatorios. Esta bacteria es resistente a condiciones ácidas y puede moverse a lo largo de las paredes del estómago usando flagelos.

Es posible que los signos de infección no aparezcan de inmediato. La enfermedad se desarrolla con factores concomitantes: dieta poco saludable, situaciones estresantes, disminución de la inmunidad. La infección puede ocurrir por agua o alimentos contaminados, por contacto con una persona infectada al estornudar y toser.

Para la infección por H. pylori, los siguientes síntomas son característicos:

Acidez
Náuseas y vómitos
Olor de la boca
Pérdida de apetito
Hinchazón
Trastorno de las heces
Malestar después de comer

Los síntomas enumerados son similares a los signos de gastritis y úlceras, por lo tanto, para identificar el patógeno y tratar la helicobacteriosis, es necesario someterse a un examen.

Análisis de heces: preparación y recogida de material.

Durante 3-4 días es necesario dejar de tomar antibióticos, laxantes, supositorios rectales. En este caso, es importante advertir al médico sobre el uso de medicamentos.
Recoja el material para su análisis en un recipiente limpio. La farmacia vende un recipiente especial para estos fines. Está prohibido recolectar material después de los enemas, tomando laxantes, ya que los resultados no serán confiables.
Después de la recolección, el material se puede almacenar durante 12 horas a una temperatura de 2-8 grados, pero para la investigación es mejor entregarlo 4-5 horas después de la evacuación intestinal.
Si la recolección de heces se realiza después de la terapia con antibióticos para la helicobacteriosis, esto debe hacerse solo un mes después del final de la ingesta de antibióticos.

En el laboratorio, el material obtenido es examinado por el método. Este es un diagnóstico genético molecular que le permite identificar Helicobacter incluso un pequeño fragmento de ADN bacteriano en el material recolectado.El estudio se realiza en determinadas condiciones y condiciones de temperatura.

Se puede encontrar más información sobre Helicobacter pylori en el video:

Para identificar la infección por Helicobacter pylori, se pueden utilizar otros métodos: cultivo y análisis inmunológico. El método de cultivo generalmente se entiende como la inoculación bacteriológica del material de prueba. Se coloca en un medio especial para el crecimiento de bacterias. Suele tardar unos 10 días. Luego, el tipo de bacteria se examina bajo un microscopio, la capacidad de participar en reacciones bioquímicas.Este método le permite determinar la sensibilidad de las bacterias identificadas a los antibióticos, lo que le permite prescribir el tratamiento correcto y adecuado.

El método inmunológico asume la adhesión a los antígenos. Este método de investigación se lleva a cabo con síntomas graves y antes del método de examen instrumental. La elección de un método en particular la realiza el médico, teniendo en cuenta varios factores.

Al examinar las heces mediante PCR, el resultado puede ser negativo o positivo. En el primer caso, no se detectaron bacterias en las heces, y en el otro, estaba presente un antígeno de Helicobacter.

El análisis de heces implica una evaluación cualitativa y cuantitativa de microorganismos en el entorno de prueba. Hay 4 grados de crecimiento bacteriano:

1 grado. En un ambiente líquido favorable, el crecimiento de las bacterias identificadas es débil, y en un ambiente sólido, no se observa en absoluto.
2do grado. La reproducción y el crecimiento de la microflora de una determinada especie alcanza las 10 colonias.
3 grados. Difiere en crecimiento significativo hasta 100 colonias en un medio sólido.
4 grados. El crecimiento de la bacteria es muy elevado y supera las 100 colonias.

El tercer y cuarto grados indican un proceso inflamatorio provocado por un tipo específico de bacteria.

La presencia en las heces no indica una úlcera de estómago u otras enfermedades del tracto gastrointestinal, sino que solo determina la presencia de una bacteria patógena. Si, de acuerdo con los resultados del análisis, la mucosa gástrica está habitada por Helicobacter, en muchos casos esto se acompaña de patologías como úlcera, gastritis, síndrome del intestino irritable, tumor cancerígeno, pancreatitis, etc.

Para un diagnóstico preciso, las pruebas de laboratorio por sí solas no son suficientes. El examen debe ser completo e incluir un examen histológico.

Helicobacter durante el embarazo: peligro para el feto y método de tratamiento.

Durante el embarazo, el tracto gastrointestinal está expuesto a un gran estrés. Al mismo tiempo, se observan con mucha frecuencia acidez de estómago, dolor en la región epigástrica, etc. El riesgo de desarrollar una úlcera es muy alto, por lo que la futura madre debe ser examinada para detectar esta infección con el fin de evitar posibles violaciones.

Es mejor realizar el examen en los primeros meses, ya que el diagnóstico se vuelve más difícil con un aumento en el período. Para el diagnóstico, se utilizan métodos de investigación no invasivos. Un método de diagnóstico eficaz para determinar Helicobacter es la intubación gástrica. El procedimiento se realiza de forma suave. La endoscopia se realiza en casos raros y con mucho cuidado, ya que aumenta la presión sobre los órganos uterinos.

Está prohibido el tratamiento durante el embarazo y durante la lactancia de Helicobacter pylori, debido al posible efecto negativo de los antibióticos en el feto.

De las drogas, se permiten Fosfalugel, Maalox. De los antiespasmódicos, solo con el permiso de un médico, puede usar Drotaverin, Baralgin, Papaverin.

Si la infección por H. pylori se manifiesta activamente durante la gestación, los síntomas de la toxicosis son pronunciados y aparecen muy temprano. La toxicosis se puede observar hasta 5 meses.Una mujer embarazada debe seguir una dieta especial y excluir de la dieta los alimentos que irritan la mucosa gástrica. La dieta número 1 se prescribe en el período agudo. Está prohibido comer carnes y pescados grasos, caldos ricos, ahumados, col, espinacas, rábanos, etc.

Helicobacteriosis: tratamiento

El régimen de tratamiento para Helicobacter pylori lo determina el médico individualmente, teniendo en cuenta la gravedad de los síntomas y los resultados del análisis. La terapia con helicobacteriosis implica la muerte de bacterias, así como la curación de úlceras:

De los fármacos antibacterianos, se utilizan metronidazol, claritromicina, tetraciclina, amoxicilina, etc.
Además de los antibióticos, se prescriben medicamentos antiácidos: esomeprazol, lansoprazol, omeprazol, etc. Cuando se usan estos medicamentos, la producción de ácido clorhídrico disminuye.
Para reducir la acidez, se muestra el uso de Almagel, Maalox, Alumag y otros medicamentos similares. Estos fármacos tienen un efecto absorbente, envolvente y gastroprotector.
Para restaurar la microflora intestinal, después del uso de antibióticos, se utilizan probióticos: Lactoferrina, Vitaflor,

Durante el tratamiento, debe cumplir con una nutrición adecuada. La comida debe ser fraccionada, ni fría ni caliente. Los alimentos deben tomarse estrictamente en determinados momentos. El menú dietético debe ser acordado por el médico, pero las recomendaciones para todos los pacientes con enfermedades son las mismas: rechazo de alimentos grasos, fritos, salados, especias, adobos, alcohol y bebidas carbonatadas.

La bacteria Helicobacter pylori (Helicobacter pylori) vive en las células de la membrana mucosa del estómago y el duodeno de los seres humanos. Algunas cepas (tipos genéticos) del microorganismo secretan toxinas específicas que destruyen las células y aumentan el riesgo de patologías como gastritis crónica y duodenitis, úlcera gástrica y duodenal y algunos tipos de tumores malignos. Estas cepas deben identificarse y tratarse con prontitud. Una forma de determinar si Helicobacter pylori está infectado es mediante análisis de heces.

El mecanismo para determinar H. pylori mediante análisis de heces

La PCR (reacción en cadena de la polimerasa), el cultivo y los análisis inmunológicos de heces son métodos de investigación directos. A diferencia de los métodos indirectos, cuando la presencia de un agente patológico se juzga por la presencia de productos de su actividad vital o la reacción del sistema inmunológico del organismo (producción de anticuerpos), los métodos directos detectan directamente el propio microorganismo o su ADN.
Todos los tipos de análisis fecal para la helicobacteriosis son tipos de investigación no invasivos (no traumáticos), a diferencia del muestreo de sangre o la gastroduodenoscopia.

Diagnóstico molecular

Para realizar la PCR, se utiliza un dispositivo especial: un amplificador

El método de PCR es uno de los tipos de diagnóstico genético molecular y le permite determinar la presencia de Helicobacter pylori incluso si hay un pequeño fragmento de ADN bacteriano en el material.

La esencia del método consiste en la multiplicación múltiple de la muestra analizada del agente causante de la enfermedad. Para llevar a cabo la reacción, se requiere una especie de "marco", que consta de dos cebadores, obtenidos por síntesis artificial de fragmentos de ADN idénticos al ácido nucleico de Helicobacter pylori. Durante la reacción entre los cebadores, se forma una hebra de ADN si hay un fragmento del biomaterial de un microorganismo en las heces. Si está ausente, no se produce ninguna reacción.

La reacción se lleva a cabo a ciertos valores de temperatura y acidez del medio, consta de varias docenas de ciclos repetitivos, una enzima especial, la polimerasa, se utiliza para catalizar (acelerar la reacción). Durante 30 ciclos, el fragmento de ADN del agente patológico presente en el biomaterial se multiplica por un factor de mil millones, lo que permite diagnosticar con precisión la infección.

En presencia de cebadores apropiados, se puede detectar la infección con especies citotóxicas (células dañinas de la mucosa gástrica) de Helicobacter pylori.

Análisis de cultivo

El análisis cultural (cultivo bacteriológico) es un método de investigación microbiológica.

El material biológico se coloca en un ambiente específico favorable para el crecimiento de una colonia bacteriana. Después de un cierto período de tiempo (para Helicobacter pylori, más de una semana), el cultivo se estudia bajo un microscopio, utilizando varios métodos para la identificación correcta de la colonia: el color, la capacidad de participar en ciertas reacciones bioquímicas.

Además de identificar un antígeno patológico (agente causante de la enfermedad), el método le permite probar su sensibilidad a los medicamentos antibacterianos, lo que reduce el tiempo y el costo del tratamiento y aumenta la efectividad de la terapia.

Desafortunadamente, en algunos casos, los resultados de las pruebas de sensibilidad in vitro ("in vitro") pueden no coincidir con los resultados del tratamiento in vivo (organismo vivo): en la vida, los antibióticos seleccionados por el método de laboratorio pueden no ser tan efectivos.

Métodos de análisis inmunológico

Los métodos inmunológicos se basan en la propiedad de los anticuerpos de adherirse al antígeno. Para la investigación, los anticuerpos con marcas especiales se combinan con la muestra analizada, como resultado, si Helicobacter pylori está presente en el material, se forman complejos antígeno-anticuerpo.

Indicaciones para el examen.

Todos los tipos de diagnóstico de la infección por Helicobacter pylori tienen sus propias ventajas y desventajas. La conveniencia de utilizar un método en particular depende de varios factores y etapas del tratamiento. El método de investigación óptimo es elegido por un gastroenterólogo..

Indicaciones para el análisis de heces por PCR:

úlceras y úlceras duodenales;
atrofia de la mucosa gástrica;
pólipos, tumores de estómago;
reflujo gastroesofágico (reflujo del contenido del estómago hacia el esófago), úlcera esofágica;
predisposición genética: tumores malignos del estómago en parientes cercanos (padres, hermanos);

Lo óptimo es prescribir un estudio de PCR por el método para evaluar la viabilidad de realizar un tratamiento específico con fármacos antibacterianos para las lesiones orgánicas existentes.

Indicación para el análisis de cultivos: determinación de la sensibilidad a los fármacos cuando el tratamiento empírico es ineficaz. Dado que el análisis es complejo (el cultivo requiere un entorno especial y falta de acceso al oxígeno) y a largo plazo, este estudio no se prescribe para diagnosticar una infección.

La inoculación bacteriológica es capaz de aislar sólo las formas espirales de Helicobacter pylori, pero no las formas cocales, que se han generalizado recientemente. Este hecho reduce aún más el valor del estudio.

Indicaciones de métodos inmunológicos:

síntomas de patologías funcionales y orgánicas del estómago y los intestinos:
- , eructos;
- dolores que tienen una frecuencia durante el día con exacerbaciones en primavera y otoño;
- diarrea o estreñimiento;
- sensación de malestar, plenitud de estómago;
antes del nombramiento de una terapia a largo plazo con medicamentos antiinflamatorios no esteroides o inhibidores de la bomba de protones (medios para reducir la producción de ácido clorhídrico);
anemia ferropénica o trombocitopenia de etiología desconocida;
predisposición genética;
infección del entorno inmediato;
monitorear la efectividad de la terapia con antibióticos.

Los métodos inmunológicos y la PCR sin genotipado se prescriben con el fin de la detección; en vista de la simplicidad y el costo relativamente bajo, el estudio se lleva a cabo en grandes masas de la población para identificar el grupo de riesgo para el desarrollo de lesiones orgánicas y tumorales del estómago y los intestinos.

Desafortunadamente, la detección de Helicobacter pylori no se ha generalizado en Rusia.

El análisis inmunológico se realiza antes que los métodos de investigación instrumental con síntomas apropiados y sugiere infección por Helicobacter pylori. De acuerdo con los resultados del análisis, si es necesario, se prescriben otros métodos de investigación.

Ventajas y desventajas del análisis de heces por PCR

La terapia específica de la helicobacteriosis con fármacos antibacterianos es un proceso largo, acompañado de poca tolerancia en muchos pacientes y un alto riesgo de complicaciones.

Recetar antibióticos a cualquier persona infectada con Helicobacter pylori es una mala práctica. La terapia con antibióticos específica está indicada solo para pacientes con tendencia a la progresión de lesiones orgánicas (erosiones, úlceras, proceso atrófico), como regla, infectados con ciertas cepas de Helicobacter. Estos pacientes requieren terapia con antibióticos para lograr la remisión de la enfermedad ulcerosa péptica y prevenir el riesgo de desarrollar neoplasias malignas.

Es posible identificar tipos citotóxicos de Helicobacter pylori solo mediante el método de PCR.

Beneficios del análisis de PCR fecal:

alta sensibilidad del método;
alta especificidad de la prueba;
simplicidad y no invasividad de la recolección de material;
la seguridad;
la capacidad de aislar formas espirales y cocales de Helicobacter pylori;
la capacidad de aislar varias cepas de bacterias.

Prueba de sensibilidad: la capacidad de producir resultados verdaderamente positivos. Cuanto mayor es la sensibilidad, menor es el porcentaje de falsos positivos, cuando el antígeno se detecta supuestamente en individuos no infectados.

La especificidad de la prueba es un indicador que depende del número de resultados falsos negativos (cuando el antígeno no se secreta en un paciente infectado). El método de PCR para el estudio de heces para Helicobacter pylori se caracteriza por una sensibilidad del 64 al 94% y una especificidad del cien por cien.

Recoger taburete es fácil y sencillo. A diferencia del muestreo de sangre o la gastroduodenoscopia, el muestreo no requiere el uso de anestésicos locales, a los que puede desarrollarse una reacción alérgica, no causa dolor ni malestar, y es seguro en términos de contaminación con un instrumento "sucio". El estudio no requiere la aplicación de ciertos esfuerzos, como el método respiratorio, que lo hace accesible incluso para niños pequeños.

Desventajas del análisis PCR de heces:

la incapacidad de determinar la sensibilidad a los fármacos antibacterianos;
la incapacidad de distinguir entre una infección actual y una curada con éxito, cuando los fragmentos de ADN de la bacteria pueden permanecer en las heces durante aproximadamente un mes;
menor índice de sensibilidad en comparación con el estudio de una biopsia (muestra de tejido o masa celular) de la mucosa gástrica;
costo relativamente alto del análisis de genotipado;
requisitos estrictos para el personal: calificaciones, estricto cumplimiento de las reglas, precisión.

Una de las principales desventajas del método PCR es la continuación de su principal ventaja: la alta sensibilidad de la prueba es la razón de resultados falsos positivos en el caso de contaminación ("contaminación" desde el exterior) del material analizado.

Preparación para la prueba

La confiabilidad del resultado de cualquier análisis depende del cumplimiento preciso de ciertas condiciones en todas las etapas, y el muestreo de material no es una excepción.

Reglas para llevar material:

tres días antes del análisis, los antibióticos, laxantes, medicamentos que ralentizan la peristalsis, supositorios rectales y algunos otros medicamentos se cancelan según las indicaciones del médico, por lo tanto, se debe advertir al médico sobre el uso de ciertos medicamentos;
la recolección de heces se realiza en los platos emitidos por el laboratorio, se recomienda tomar muestras de tres puntos diferentes;
es conveniente entregar el biomaterial al laboratorio inmediatamente; si esto no es posible, la muestra debe almacenarse a 2-8 grados por no más de 24 horas;
si el análisis se realiza para evaluar la efectividad de la terapia antibiótica prescrita previamente contra Helicobacter pylori, las heces se recolectan no antes de cuatro semanas después del final del tratamiento.

Al ralentizar el paso de las heces, el estreñimiento puede provocar la destrucción de Helicobacter en las heces, que es la causa de resultados falsos negativos. Para aumentar la confiabilidad del resultado, el médico puede recetar un laxante suave: lactulosa antes del análisis.

Cómo y dónde hacerse la prueba

Las pruebas son prescritas por un gastroenterólogo, por lo tanto, su consulta es necesaria antes de la prueba de Helicobacter pylori.

Costo estimado de la investigación de heces:

Método de PCR con genotipado - 1200 rublos;
PCR sin genotipado - 600 rublos;
sensibilidad a los antibióticos - 600 rublos;
métodos inmunológicos: 400 a 650 rublos (según el método).

Para el diagnóstico más preciso de Helicobacter pylori, es necesario elegir una institución médica que se haya ganado una buena reputación.

Resultados de la investigacion

El período de procesamiento del análisis y su confiabilidad dependen del método de determinación del antígeno.

Términos de ejecución, confiabilidad e interpretación de los resultados de los análisis de heces para Helicobacter pylori.

	Sincronización	Credibilidad	resultados
PCR	de 5-6 horas (método express) hasta 2 días	alto	1) negativo: no se ha aislado ni un solo genotipo bacteriano declarado; 2) positivo: helibacteriosis (actual o en la historia), se identificó al menos uno de los genotipos declarados
Análisis bacteriológico sensibilidad a los antibióticos	7-10 días	alta sensibilidad; baja - para la detección de antígenos	1) el número de bacterias es 0 - Helicobacter no está aislado; 2) cantidad\u003e 0 - helibacilosis; 3) S - sensibilidad al antibiótico especificado; 4) R - resistencia a los antibióticos (resistencia); 5) I - sensibilidad moderada a los antibióticos.
Métodos inmunológicos	1 día	bajo	1) negativo: no se ha identificado el patógeno; 2) positivo - helicobacteriosis

La baja confiabilidad del análisis inmunológico y cultural se explica por el bajo contenido de antígeno en las heces: si el análisis de PCR es sensible incluso en presencia de 10 células, para obtener un resultado confiable de otros métodos debe haber al menos 10 veces más células.

El estudio de heces para helibacilosis es seguro, no traumático y se puede realizar por diferentes métodos que permitan detectar la infección, determinar las cepas del virus y la sensibilidad del patógeno a los antibióticos.

Según los resultados de la prueba, es posible formar un grupo de riesgo, cuyos representantes tienen una alta probabilidad de desarrollar úlceras estomacales y duodenales, tumores malignos del estómago; evaluar el grado de riesgo y minimizarlo mediante un tratamiento antibacteriano oportuno de cepas citotóxicas de Helicobacter pylori.

Además, la ventaja del método es su no invasividad: no es necesario utilizar procedimientos más o menos traumáticos para tomar muestras de material (punción de una vena para extraer sangre, introducción de una sonda duodenal).

El análisis de heces no está asociado con la presencia del paciente; la entrega oportuna de heces al laboratorio es suficiente. Esto es especialmente importante para examinar a los niños.

Existen diferentes métodos para detectar Helicobacter pylori, cada uno con sus propias ventajas y desventajas.

El médico tratante determina la necesidad y elección del método de investigación. Es de gran importancia la disponibilidad de análisis para un paciente en particular debido al precio. La mayor parte se realiza solo en clínicas y laboratorios privados, ya que requiere equipos costosos.

El objetivo del estudio es identificar la relación causal de la enfermedad con Helicobacter y prescribir un tratamiento específico para eliminar el patógeno.

¿Qué es Helicobacter pylori?

El nombre Helicobacter pylori se traduce como "guardián espiral". Está ligado a la forma característica de la bacteria, localización en el área del píloro (zona fronteriza del estómago con el duodeno). El microorganismo tiene flagelos que lo ayudan a moverse incluso en moco espeso.

Helicobacter pylori es capaz de soportar el ambiente ácido del jugo gástrico. Como soporte vital, utiliza la energía de las moléculas de hidrógeno, que es producida por las bacterias intestinales.

La bacteria sintetiza unas 20 enzimas.

Las enzimas de Helicobacter más famosas:

Las características del microorganismo incluyen:

la complejidad del aislamiento por un método de cultivo, ya que Helicobacter pylori no crece en medios nutritivos convencionales;
un largo período de ausencia de síntomas que indiquen infección;
la capacidad en una situación "peligrosa" de transformarse en una forma esférica y cubrirse con una película protectora.

En las heces no se puede encontrar forma de espiral, ya que el ambiente intestinal es desfavorable para la existencia de Helicobacter. No hay acidez necesaria, actúan poco oxígeno, fuertes enzimas destructivas de la bilis y el páncreas. Por lo tanto, en las heces hay una forma cocal de la bacteria.

Los síntomas del daño estomacal causado por Helicobacter pylori pueden ser mínimos o corresponder a la exacerbación clínica de la enfermedad. El paciente tiene:

hinchazón
eructos
acidez;
síndrome de dolor, especialmente con exacerbaciones en primavera y otoño;
estreñimiento o diarrea;
sensación de pesadez en el epigastrio;
disminucion del apetito;
una fuerte caída de peso.

Las indicaciones para la investigación pueden ser:

la necesidad de verificar antes de un curso prolongado de terapia con medicamentos antiinflamatorios no esteroides, inhibidores de la bomba de protones, ya que reducen la producción de ácido clorhídrico en el estómago;
signos de anemia por deficiencia de hierro;
trombocitopenia poco clara;
la posibilidad de infección de miembros de la familia;
control del curso de la terapia con antibióticos;
aclaración de la relación con una predisposición genética.

En un niño, los síntomas de infección están indicados por quejas de náuseas, dolor abdominal vago, falta de apetito y negativa a comer, regurgitación abundante y frecuente, así como hinchazón y ruidos en el abdomen.

Método de inoculación bacteriológica

El aislamiento del cultivo del patógeno es un tipo de investigación microbiológica. El método clásico requiere sembrar el material en un medio nutritivo, contar las colonias crecidas y estudiar el microorganismo de la colonia bajo un microscopio. También es necesario realizar pruebas bioquímicas para estudiar sus propiedades y una inoculación adicional en un medio con antibióticos para identificar la sensibilidad a diversos fármacos.

El medio de siembra es bastante caro, está especialmente preparado.

El análisis de heces para Helicobacter pylori utilizando el método de cultivo es difícil de realizar:

la siembra debe realizarse sin acceso al oxígeno;
solo se pueden distinguir formas espirales, que rara vez ingresan a las heces, y no al cóccix;
los resultados de la prueba de susceptibilidad antibiótica in vitro (invitro significa “en vidrio, en un tubo de ensayo”) en la práctica resultan engañosos y en algunos casos no coinciden con el uso real en el paciente (in vivo), el antibiótico óptimo detectado no es suficientemente efectivo;
el análisis requiere un largo período (7-10 días) para completarse.

Métodos de investigación inmunológica

La esencia del análisis inmunológico es la identificación de complejos anticuerpo + antígeno, en los que Helicobacter es un agente extraño. Más comúnmente utilizado para análisis de sangre. Pero, de hecho, los signos indirectos de la presencia de un antígeno pueden confirmarse por la presencia en las heces, la saliva y la orina en mujeres embarazadas en el líquido amniótico.

Los métodos utilizan anticuerpos "etiquetados" listos para usar. Cuando procesan las heces del paciente que contienen antígenos (los restos de Helicobacter pylori), se produce una reacción del compuesto con los anticuerpos estándar. La duración del estudio es de un día. Se prescribe un análisis de heces para el antígeno de Helicobacter si el paciente tiene algún síntoma de indigestión.

La opción más común es el cribado primario de la población (examen de todos los solicitantes o de ciertos grupos), que no tiene quejas específicas. No se usa en Rusia debido a la falta de un número suficiente de pruebas inmunológicas en los laboratorios de policlínicos.

Método de PCR

La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se refiere al diagnóstico genético molecular. Con su ayuda, no se detecta una bacteria, sino su ADN específico. Incluso con una pequeña cantidad, en caso de recuperación o transporte asintomático, el método permite con suficiente precisión asociar cambios en el cuerpo con la acción de Helicobacter.

La duración del análisis por el método express es de 5-6 horas, por el método habitual - 2-3 días

La técnica está diseñada para la síntesis artificial de partes individuales de ADN, duplicando y construyendo una cadena de 30 ciclos. El proceso no se lleva a cabo en ausencia de los más mínimos residuos de biomaterial. Se requiere un amplificador para la reacción. La polimerasa es una enzima que acelera el proceso.

La PCR fecal se prescribe para confirmar el papel de Helicobacter en patología y para determinar la idoneidad de la terapia específica:

con erosiones y úlceras en el estómago, esófago y duodeno;
reflujo gastroesofágico (reflujo de contenido en la dirección opuesta);
lesiones atróficas de la mucosa gástrica;
pólipos
tumores del estómago;
identificación de una predisposición hereditaria en el caso de la presencia de tumores malignos del sistema digestivo en familiares;
seguimiento de los resultados de la terapia con antibióticos.

alta sensibilidad y especificidad (determinadas respectivamente en 94% y 100%), la reacción es positiva incluso en presencia de 10 bacterias;
facilidad de implementación;
seguridad para el paciente, sin trauma al tomar muestras de material;
la capacidad de determinar el ADN en formas helicoidales y cocales de Helicobacter;
aislamiento y estudio de diversas modificaciones genéticas, cepas.

no es posible determinar el antibiótico óptimo por sensibilidad;
no hay diferencia entre la enfermedad aguda en curso y los efectos residuales después de una exacerbación; el ADN bacteriano permanece en las heces durante casi un mes después de la recuperación clínica;
la sensibilidad es aún menor que en el estudio de una biopsia de la pared del estómago;
costo relativamente alto;
la necesidad de capacitar al personal y adquirir equipos;
una reacción positiva en los casos de contaminación del material por parte del personal de una muestra extraña (contaminación del exterior).

El laboratorio de PCR cuenta con una técnica mejorada que le permite obtener resultados diagnósticos fiables

¿Cómo evaluar los resultados de las pruebas?

Descifrar los resultados de la investigación es tarea de un médico especialista. No debe recurrir a la interpretación independiente ni utilizar los servicios de amigos. La evaluación se realiza sobre un conjunto de señales. Con PCR, se da el resultado:

negativo, si el genotipo de Helicobacter no está aislado, se encuentra en la norma;
positivo si el paciente se encuentra en medio de una enfermedad o tiene antecedentes de infección.

En examen bacteriológico:

recuento de bacterias cero o Helicobacter está ausente;
si el número de microorganismos es mayor que cero, se confirma helibacteriosis;
el signo S significa sensibilidad al antibiótico declarado;
R - indica resistencia (resistencia) a la droga;
Yo - sensibilidad moderada.

La siembra bacteriana de heces le permite dar no solo una característica cualitativa, sino también cuantitativa de la infección por Helicobacterias. Para ello, se tienen en cuenta los grados de crecimiento bacteriano:

1 grado: se observa un crecimiento débil en un medio líquido, en muestras sólidas: no hay crecimiento;
Grado 2: crece hasta 10 colonias;
3 grados: el número de colonias cultivadas alcanza 100;
4 grados: la prevalencia y la actividad del patógeno son muy activas, crecen más de 100 colonias.

La prueba se realiza mediante inmunoensayo enzimático con sueros estándar

Las pruebas inmunológicas muestran un resultado negativo si no se detecta el antígeno del patógeno, positivo, en presencia de Helicobacter pylori. La confiabilidad de los métodos inmunológicos y de cultivo es significativamente inferior a la PCR; para su implementación, se requiere una prevalencia masiva del patógeno en las heces.

¿Cómo prepararse para la prueba?

Dónde puede realizar la prueba, le indicará el médico. También debe familiarizar al paciente con las reglas para tomar material y preparación. Algunas clínicas privadas proporcionan a los visitantes instrucciones impresas sobre cómo hacerse la prueba. La efectividad del estudio depende del cumplimiento de estas condiciones.

Las reglas generales para recolectar heces para la detección de Helicobacter son:

detener la ingesta de agentes antibacterianos tres días antes del análisis;
el control de la entrega de análisis de heces se lleva a cabo un mes después del final del curso del tratamiento;
algunas pruebas requieren tres días antes del estudio para cambiar a una dieta sin alimentos con fibra dietética, excluir encurtidos, bebidas alcohólicas;
prohibición del uso de laxantes, supositorios rectales, si el tratamiento requiere una ingesta diaria, se debe advertir a un médico;
debe recolectar heces en cristalería de laboratorio limpia (emitida en una clínica o comprada en una farmacia), es aconsejable tomar muestras de tres puntos;
las heces con impurezas de moco, pus, sangre, orina se consideran inadecuadas;
la entrega del material al laboratorio debe realizarse en las primeras 2 horas, si es necesario, se permite almacenarlo en el refrigerador por no más de un día a una temperatura de 2 a 8 grados.

Se puede comprar en la farmacia un juego especial para tomar muestras de heces para su análisis.

Investigación adicional

Al diagnosticar, el paciente no debe insistir en un estudio aislado de heces. Usando especies adicionales, el médico aumenta la confiabilidad de la información sobre la infección por Helicobacter pylori.

Las pruebas de aliento con ureasa son muy populares.

Un tipo de examen irrefutable es un examen citológico de una muestra de la mucosa gástrica obtenida de una biopsia durante un examen fibrogastroscópico. Con una alta resolución del microscopio, el asistente de laboratorio ve el Helicobacter pylori teñido.

La imagen fibrogastroscópica de la propia membrana mucosa con erosiones características, atrofia, ulceración indica signos indirectos de la presencia del patógeno en el estómago. El diagnóstico de rayos X también permite violaciones en la dirección de los pliegues, los contornos del estómago para juzgar la patología orgánica causada por Helicobacter pylori.

Según los resultados de las pruebas, el médico puede ingresar al paciente en un grupo de riesgo con una mayor probabilidad de desarrollar una úlcera de estómago, tumores malignos. La aplicación previa de un tratamiento específico puede reducir el riesgo. Al elegir una institución médica para realizar investigaciones de forma remunerada, debe consultar sobre la reputación y la responsabilidad de sus empleados.

Análisis de heces para Helicobacter pylori: preparación y decodificación

Helicobacter pylori es una de las bacterias más peligrosas que provoca el desarrollo de diversas enfermedades del estómago y el duodeno. Para diagnosticar la patología, no solo se prescribe un análisis de sangre, sino también un análisis de heces.

Helicobacter pylori: causas y síntomas

Helicobacter pylori es una bacteria patógena que infecta el duodeno y el estómago.

Es posible que los signos de infección no aparezcan de inmediato. La enfermedad se desarrolla con factores concomitantes: dieta inadecuada, situaciones estresantes, disminución de la inmunidad. La infección puede ocurrir a través de agua o alimentos contaminados, contacto con una persona infectada al estornudar y toser.

Para la infección por H. pylori, los siguientes síntomas son característicos:

Acidez
Náuseas y vómitos
Olor de la boca
Pérdida de apetito
Hinchazón
Trastorno de las heces
Malestar después de comer

Los síntomas enumerados son similares a los signos de gastritis y úlceras, por lo tanto, para identificar el patógeno y tratar la helicobacteriosis, es necesario someterse a un examen.

Análisis de heces: preparación y recogida de material.

Recipientes médicos desechables para recolectar heces para su análisis.

En el laboratorio, el material obtenido se examina mediante PCR. Este es un diagnóstico genético molecular que le permite identificar Helicobacter incluso un pequeño fragmento de ADN bacteriano en el material recolectado. El estudio se realiza en determinadas condiciones y condiciones de temperatura.

Se puede encontrar más información sobre Helicobacter pylori en el video:

Para identificar la infección por Helicobacter pylori, se pueden utilizar otros métodos: cultivo y análisis inmunológico. El método de cultivo generalmente se entiende como la inoculación bacteriológica del material de prueba. Se coloca en un medio especial para el crecimiento de bacterias. Suele tardar unos 10 días. Luego, el tipo de bacteria se examina bajo un microscopio, la capacidad de participar en reacciones bioquímicas. Este método le permite determinar la sensibilidad de las bacterias identificadas a los antibióticos, lo que le permite prescribir el tratamiento correcto y adecuado.

El método inmunológico implica la adhesión de anticuerpos a antígenos. Este método de investigación se lleva a cabo con síntomas graves y antes del método de examen instrumental. La elección de un método en particular la realiza el médico, teniendo en cuenta varios factores.

Decodificación del análisis de heces

Cuando se examinan las heces mediante PCR para detectar Helicobacter pylori, el resultado puede ser negativo o positivo. En el primer caso, no se detectaron bacterias en las heces y en el otro, el antígeno de Helicobacter estaba presente.

El análisis de heces bacterianas asume una evaluación cualitativa y cuantitativa de microorganismos en el ambiente estudiado. Hay 4 grados de crecimiento bacteriano:

1 grado. En un ambiente líquido favorable, el crecimiento de las bacterias identificadas es débil, y en un ambiente sólido, no se observa en absoluto.
2do grado. La reproducción y el crecimiento de la microflora de una determinada especie alcanza las 10 colonias.
3 grados. Difiere en crecimiento significativo hasta 100 colonias en un medio sólido.
4 grados. El crecimiento de la bacteria es muy elevado y supera las 100 colonias.

El tercer y cuarto grados indican un proceso inflamatorio provocado por un tipo específico de bacteria.

La presencia de Helicobacter en las heces no indica una úlcera de estómago u otras enfermedades del tracto gastrointestinal, sino que solo determina la presencia de una bacteria patógena. Si, de acuerdo con los resultados del análisis, la mucosa gástrica está habitada por Helicobacter, en muchos casos esto se acompaña de patologías como úlcera, gastritis, síndrome del intestino irritable, tumor cancerígeno, pancreatitis, etc.

Para un diagnóstico preciso, las pruebas de laboratorio por sí solas no son suficientes. El examen debe ser completo e incluir una biopsia y un examen histológico.

Helicobacter durante el embarazo: peligro para el feto y método de tratamiento.

La bacteria patógena no afecta el curso del embarazo y la condición del niño.

Durante el embarazo, el tracto gastrointestinal está expuesto a un gran estrés. Al mismo tiempo, se observan muy a menudo acidez de estómago, dolor en la región epigástrica, etc. El riesgo de desarrollar una úlcera es muy alto, por lo tanto, la futura madre debe ser examinada para identificar esta infección para evitar posibles violaciones.

Es mejor realizar el examen en los primeros meses, ya que el diagnóstico se vuelve más difícil con un aumento en el período. Para el diagnóstico, se utilizan métodos de investigación no invasivos. Un método de diagnóstico eficaz para determinar Helicobacter es la intubación gástrica. El procedimiento se realiza de forma suave. La endoscopia se realiza en raras ocasiones y con mucho cuidado, ya que aumenta la presión sobre los órganos uterinos.

Está prohibido el tratamiento durante el embarazo y durante la lactancia de Helicobacter pylori, debido al posible efecto negativo de los antibióticos en el feto.

De las drogas, se permiten Fosfalugel, Maalox. De los antiespasmódicos, solo con el permiso de un médico, puede usar Drotaverin, Baralgin, Papaverin.

Si la infección por H. pylori se manifiesta activamente durante la gestación, los síntomas de la toxicosis son pronunciados y aparecen muy temprano. La toxicosis se puede observar hasta 5 meses. Una mujer embarazada debe seguir una dieta especial y excluir de la dieta los alimentos que irritan la mucosa gástrica. La dieta número 1 se prescribe en el período agudo. Está prohibido comer carnes y pescados grasos, caldos ricos, ahumados, col, espinacas, rábanos, etc.

Helicobacteriosis: tratamiento

Cuando se detecta una infección por Helicobacter pylori, se prescribe terapia con antibióticos

De los fármacos antibacterianos, se utilizan metronidazol, claritromicina, tetraciclina, amoxicilina, etc.
Además de los antibióticos, se prescriben medicamentos antiácidos: esomeprazol, lansoprazol, omeprazol, etc. Cuando se usan estos medicamentos, la producción de ácido clorhídrico disminuye.
Para reducir la acidez, se muestra el uso de Almagel, Maalox, Alumag y otros medicamentos similares. Estos fármacos tienen un efecto absorbente, envolvente y gastroprotector.
Para restaurar la microflora intestinal, después del uso de antibióticos, se utilizan probióticos: Lactoferrina, Vitaflor,

Durante el tratamiento, debe cumplir con una nutrición adecuada. La comida debe ser fraccionada, ni fría ni caliente. Los alimentos deben tomarse estrictamente en determinados momentos. El menú dietético debe ser acordado por el médico, pero las recomendaciones para todos los pacientes con enfermedades gastrointestinales son las mismas: rechazo de alimentos grasos, fritos, salados, especias, adobos, alcohol y bebidas carbonatadas.

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SUBVENCIÓN - 25/09/2017
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Cómo realizar una prueba de heces para detectar Helicobacter pylori

Los métodos de diagnóstico modernos le permiten averiguar mucho sobre el estado de la salud humana por sus fluidos biológicos: sangre, orina, heces.

Al examinar las heces, puede averiguar si la bacteria N. ruli se ha asentado en el cuerpo, lo que puede causar gastritis, úlceras de estómago y provocar oncopatología.

Las heces para detectar la presencia o ausencia de este microbio se pueden estudiar de tres maneras: cultural, inmunológica y el método más confiable y extendido es el método de reacción en cadena de la polimerasa (PCR).

Determinación de Helicobacter por el método de cultivo.

La bacteria en sí misma se encuentra muy raramente en las heces en su conjunto en forma de S habitual. El intestino grueso y las heces no son un entorno favorable para el microorganismo, por lo tanto, al entrar en ellos, puede tomar una forma cocal redonda, que ocasionalmente se presenta en las heces de esta forma.

El método de cultivo implica sembrar una parte del material de prueba en un medio nutritivo en el que la bacteria se sentirá bien y comenzará a multiplicarse.

Crecen colonias, que se analizan, se tiñen con reactivos especiales y se examinan al microscopio. De esta manera, los microbios patógenos se cultivan literalmente con el fin de seguir estudiando.

Además de detectar la bacteria en sí, el método le permite establecer la sensibilidad del patógeno a un antibiótico en particular. Si, al agregar un medicamento, se conserva el crecimiento de la colonia: N. pylori es resistente al agente antibacteriano y si los microorganismos mueren, tiene sentido recetar este medicamento al paciente con el propósito de tratamiento y erradicación, las bacterias son sensibles a él.

El método de cultivo es muy confiable, pero solo si la forma S del microbio se encuentra en el material biológico tomado. El método tiene sus inconvenientes, por lo que no es muy común:

El período de investigación es de 6 a 12 días.
Medios de siembra de Helicobacter costosos
Ambientes específicos para el crecimiento de colonias que son difíciles de replicar en el laboratorio.
Rara aparición de formas de bacterias en forma de S en las heces adecuadas para el crecimiento en condiciones nutricionales (no se estudian las formas cocales)

Determinación del antígeno de Helicobacter pylori en heces por método inmunológico

Las heces del paciente pueden someterse a un estudio inmunológico, que permite identificar no el microorganismo en sí, sino sus partes: los antígenos.

Se utilizan anticuerpos especiales para detectar un antígeno extraño: partes de una bacteria, sus productos de desecho y material genético.

Al interactuar con un agente extraño, los anticuerpos forman un complejo específico, que se determina mediante un inmunoensayo enzimático.

Este método de estudio de las heces rara vez se usa en Rusia; no muchos laboratorios están equipados con los reactivos y las pruebas necesarias.

Pero en el futuro, es posible incluir este método de detección de Helicobacter como pruebas de cribado: estudios de grandes grupos de población en busca de contaminación bacteriana.

Análisis de PCR en heces para Helicobacter pylori

Este es el método más común para examinar las heces en busca de esta bacteria, con alta precisión.

La esencia del método es la siguiente:

Una sección de ADN bacteriano se aísla del material biológico del paciente, que luego se duplica artificialmente muchas veces en un aparato especial, restaurando así H.

Cuando el fragmento genómico de un microbio alcanza un tamaño suficiente, se compara con el de referencia y se llega a una conclusión sobre el microorganismo en estudio: es Helicobacter u otro patógeno.

Un análisis de PCR positivo significa la presencia de infección por Helicobacter pylori en el cuerpo humano: la bacteria está presente en el estómago, sus fragmentos de ADN se encontraron en las heces y coincidieron con la referencia.

Alta precisión: incluso una pequeña cantidad de material genético es suficiente para la investigación con un alto porcentaje de confiabilidad cercano al 99%.
Velocidad de investigación. 2 días son suficientes para el análisis, pero existen métodos expresos que permiten establecer un diagnóstico en pocas horas.
Indoloro. El método es atraumático, no invasivo. Le permite examinar a niños pequeños, ancianos, pacientes debilitados que están contraindicados para EGD con biopsia y otras manipulaciones endoscópicas.
Para obtener un resultado preciso, no es necesario detectar fragmentos de ADN de S o formas helicoidales, partes de microbios cocales (la mayoría se encuentran en las heces) también son adecuadas para el análisis.

Los diagnósticos por PCR tienen muchas más ventajas que desventajas. Las desventajas incluyen:

Costo de análisis relativamente alto.
Conservación de fragmentos de ADN microbiano en heces y después de su erradicación. Incluso si el tratamiento se completa con éxito y la bacteria está ausente en el cuerpo, después de algún tiempo se encuentran fragmentos de ADN en el material biológico y la prueba de heces para H. pylori puede dar un resultado positivo. Por lo tanto, para controlar la cura, se recomiendan los diagnósticos por PCR no antes de 1 mes después del final de la terapia.
Equipo especial de alta tecnología costoso, que requiere personal capacitado y capacitado.

Análisis de heces para el antígeno de Helicobacter pylori invitro

Todos los estudios de diagnóstico realizados con las heces del paciente se refieren a manipulaciones in vitro: "en un tubo de ensayo", "en vidrio", fuera del cuerpo humano.

Tienen una precisión y un contenido de información suficientemente altos si persiguen el objetivo de detectar un microbio.

Pero no todos los procesos que ocurren "in vivo", dentro del cuerpo humano, se pueden recrear "in vitro" con la misma confiabilidad. Por ejemplo, determinación de susceptibilidad a antibióticos, analizada por cultivo.

En el estudio de la sensibilidad antibacteriana de colonias microbianas en cultivos de nutrientes, se encontró que las preparaciones más adecuadas para bacterias in vitro, “no funcionaron”, fueron ineficaces en el tratamiento del paciente.

Los resultados de los estudios de susceptibilidad a los antibióticos in vitro no siempre son precisos.

Cómo hacerse una prueba de heces para detectar Helicobacter pylori

El valor informativo de la prueba diagnóstica depende no solo del estudio elegido, la calidad del equipo y las calificaciones del personal, sino también de cómo se preparó el paciente para el análisis.

Las heces para investigación deben recolectarse correctamente:

Después de la defecación, parte de la materia fecal debe colocarse en un recipiente estéril para recolectar material biológico, que debe comprarse con anticipación en una farmacia o laboratorio.
Para excluir la entrada de sangre, orina, saliva, pus y otras impurezas en el material biológico, que probablemente distorsionen los resultados del análisis.
El recipiente con el contenido debe cerrarse herméticamente y entregarse al laboratorio a más tardar 4-5 horas antes del estudio.

Además de observar los puntos técnicos de recolección de material para análisis, durante varios días antes de la entrega de las heces, se deben observar las siguientes recomendaciones:

Deje de tomar antibióticos una semana antes del parto.
Durante tres días, no consumas alcohol, alimentos con un alto contenido en fibra, además de que pueden llevar al color de las heces: remolacha, bebidas con colorantes.
No use supositorios o ungüentos por vía rectal, no use laxantes.

El cumplimiento de las reglas anteriores permitirá al médico de diagnóstico de laboratorio evaluar la salud del paciente con la mayor precisión posible y sacar las conclusiones correctas durante el análisis.

Fiabilidad del análisis de heces para Helicobacter

PCR: el diagnóstico de heces es el más confiable de los tres métodos anteriores, hasta cierto punto es inferior solo al examen endoscópico por biopsia.

El análisis de PCR de las heces rara vez da resultados falsos positivos, tiene una alta especificidad y le permite estudiar el material de ADN de las formas cocales de Helicobacteria que se encuentran con frecuencia en las heces.

La fiabilidad del cultivo y el método inmunológico es menor que la de la PCR. Estos métodos "pecan" con la aparición de resultados falsos positivos, pero junto con otros métodos de detección de Helicobacter pylori, son una excelente ayuda para el diagnóstico.

Antígeno de H. pylori en heces

Si el antígeno de Helicobacter pylori o un fragmento de ADN del microorganismo en estudio se encuentra en las heces, esto significa que:

Una persona está infectada con H. pylori.
La terapia de erradicación no es lo suficientemente eficaz y el microbio no ha desaparecido de la mucosa gastrointestinal.
Ha pasado menos de un mes después de la terapia y los antígenos de los patógenos muertos permanecen en las heces.

Para excluir un resultado falso positivo después de someterse al régimen de terapia anti-helicobacter (cuando el análisis es positivo y el cuerpo humano no contiene H. pylori), uno no debe apresurarse a averiguar la efectividad del tratamiento, sino esperar al menos un mes después de su finalización.

Si el tratamiento de la bacteria tiene éxito, los antígenos y el ADN microbiano no se detectan en las heces un mes después de la erradicación. El resultado de la prueba es negativo.

Si se detectan antígenos durante el análisis inicial, el médico recomendará al paciente que se someta a un curso de terapia especial destinada a destruir N. ruli.

[09-053 ] Helicobacter pylori, ADN [PCR en tiempo real]

1025 RUB

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Detección de Helicobacter pylori (H. pylori), durante la cual se determina el material genético (ADN) de un microorganismo en una muestra de biomaterial mediante el método de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR).

Sinónimos Ruso

Helicobacter [reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real].

Sinónimos en inglés

H. pylori, Helicobacter pyloridis, ADN.

Método de investigación

Reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real.

¿Qué biomaterial se puede utilizar para la investigación?

Biopsia, heces.

Información general sobre el estudio

H. pylori es una bacteria gramnegativa móvil que es resistente al ácido clorhídrico y puede colonizar la membrana mucosa del estómago y el duodeno. Como regla general, la infección inicial ocurre en la infancia y es asintomática, pero en algunas personas conduce al desarrollo de enfermedades graves con el tiempo. H. pylori se encuentra en la gran mayoría de los casos de gastritis y enfermedad ulcerosa péptica y, además, aumenta enormemente el riesgo de desarrollar adenocarcinoma y linfoma de células B gástrico. El diagnóstico moderno de estas enfermedades es imposible sin una identificación precisa y rápida de H. pylori.

H. pylori se puede detectar mediante varios métodos. Ahora se dispone de métodos de diagnóstico no invasivos que aprovechan la simplicidad y seguridad de tomar una muestra para su examen (examen fecal), que es de particular importancia cuando se examinan a ancianos, niños y también en un entorno ambulatorio.

Helicobacter es muy sensible a los efectos de los ácidos biliares y al bajo contenido de oxígeno, por lo tanto, cuando el quimo pasa por el duodeno y el colon, la cantidad de bacterias se reduce significativamente. Además, las formas helicoidales activas de bacterias sufren cambios morfológicos que les proporcionan una mayor resistencia en condiciones adversas. Esto da como resultado una baja concentración de microorganismos y un predominio de formas cocales en las heces, lo que debe tenerse en cuenta a la hora de elegir un método de laboratorio para estudiar este biomaterial. Entre muchos métodos no invasivos, la investigación de la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real ocupa un lugar especial.

La reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR) es una técnica de diagnóstico molecular que detecta fragmentos del material genético (ADN) del agente infeccioso en material biológico (por ejemplo, en las heces). La RT-PCR se caracteriza por una sensibilidad muy alta (93-95%), lo que es una ventaja para el análisis de heces. A diferencia del cultivo bacteriológico, este estudio puede detectar formas espirales y cocales (no cultivadas) de H. pylori. Debido al hecho de que el ADN del microorganismo se detecta en la reacción, el estudio no se utiliza para el diagnóstico diferencial de una infección actual o antecedentes de infección; el resultado de la prueba será positivo durante algún tiempo después de la erradicación completa de H. pylori, que se debe a la identificación de fragmentos de ADN destruido del microorganismo.

Otros miembros del género Helicobacter (H. suis, H. baculiformis) también pueden estar presentes en la mucosa gástrica. A pesar de que aún no se ha establecido completamente su importancia en el desarrollo de enfermedades gastrointestinales, desempeñan un cierto papel en la identificación de H. pylori. Por ejemplo, las pruebas de laboratorio basadas en la detección de un antígeno común a todas las especies de Helicobacter se caracterizarán por un gran número de resultados falsos positivos para H. pylori debido a la detección de otras especies (como en el caso de ELISA). Esto está prácticamente excluido en el estudio mediante RT-PCR, ya que la reacción se basa en la identificación de un fragmento de ADN específico de H. pylori.

El diagnóstico de helicobacteriosis en niños presenta ciertas dificultades. Esto se debe a que el niño no realiza una maniobra de respiración cuando se usa la prueba de aliento con ureasa, así como a la necesidad de anestesia cuando se usan métodos invasivos. El estudio de heces mediante RT-PCR es una buena alternativa a estos métodos y, por tanto, puede aplicarse con éxito en la práctica pediátrica.

Un alto contenido de sales inorgánicas (fosfatos, calcio), enzimas gastrointestinales, polisacáridos, ácidos y sales biliares, fibras vegetales, moco y otros componentes de las heces pueden inhibir la RT-PCR, por lo que la preparación para la prueba requiere la debida atención por parte del paciente y del médico. La interpretación del resultado del análisis se lleva a cabo teniendo en cuenta datos instrumentales y de laboratorio adicionales.

¿Para qué se utiliza la investigación?

Para diagnosticar enfermedades causadas por H. pylori:

gastritis atrófica o antral;
úlceras de estómago y duodeno.

¿Cuándo está programado el estudio?

Si sospecha gastritis o enfermedad ulcerosa péptica en niños y ancianos.
Si es imposible utilizar métodos invasivos para identificar H. pylori en pacientes de cualquier edad.

¿Qué significan los resultados?

Valores de referencia: negativamente.

Resultado positivo:

infección actual por H. pylori;
Infección por H. pylori en la historia.

Resultado negativo:

ausencia de infección por H. pylori.

¿Qué puede influir en el resultado?

La presencia de sangre, bilis, exceso de sales inorgánicas y otros componentes en la muestra de heces puede dar lugar a un resultado falso negativo.
El tratamiento con tetraciclina, penicilina (aminopenicilinas), macrólidos (claritromicina, azitromicina) y metronidazol puede producir resultados negativos falsos.

Notas importantes

Helicobacter pylori

La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) le permite aumentar la cantidad de copias del ADN de bacterias o virus millones de veces utilizando la enzima ADN polimerasa. Una molécula de ADN es suficiente para el diagnóstico. La cantidad sintetizada de ADN se identifica mediante inmunoensayo enzimático o electroforesis. El diagnóstico de PCR le permite detectar el patógeno en las etapas más tempranas del proceso infeccioso, en cualquier entorno biológico del cuerpo, con la posibilidad de determinación cuantitativa de virus o bacterias.

Helicobacter pylori son bacterias gramnegativas helicoidales que se encontraron en la mucosa gástrica hace más de medio siglo, pero no generaron mucho interés hasta principios de la década de 1980, cuando se desarrolló un método para cultivar organismos a partir de material de biopsia de la mucosa.

En 1983, el médico australiano Barry Marshall descubrió que H. pylori casi siempre está presente en el estómago de pacientes con gastritis crónica o úlceras. Las bacterias, por sí mismas, no causan úlceras en el estómago o el duodeno, sin embargo, provocan procesos inflamatorios en el estómago y debilitan la defensa natural de la membrana mucosa del ambiente ácido del estómago; mientras que H. pylori estimula la hipersecreción de ácido clorhídrico, influyendo en los mecanismos de su regulación. Si la terapia en curso conduce a una disminución de la acidez gástrica, entonces la úlcera puede sanar, pero después de suspender el tratamiento, existe la posibilidad de que vuelva a aparecer. Las observaciones a largo plazo han demostrado que en los pacientes que no han recibido tratamiento contra H. pylori, la úlcera reaparece después de 2 años en el 100%, y en los pacientes tratados reaparece (generalmente debido a una reinfección por H. pylori) solo en el 5-10%. La fuente de infección por H. pylori proviene de humanos, gatos, cerdos, ganado y monos (monos rhesus) infectados. Con mayor frecuencia, la contaminación se produce a través del agua y los alimentos contaminados con heces (verduras, que se regaron con agua contaminada). Manos contaminadas, saliva, gotitas de saliva o esputo al toser pueden ser objeto de transmisión de un agente infeccioso. Estudios llevados a cabo por médicos de Estados Unidos han demostrado que H. pylori puede considerarse una infección familiar, y si se identifica un portador de H. pylori en una familia, la probabilidad de que el resto de la familia se infecte es del 95%. La detección de Helicobacter mediante el método de PCR permite un diagnóstico y un control del tratamiento mucho más rápidos. El material de investigación puede ser aspirado gástrico, heces, saliva.

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